乳品抗生素残留的免疫学快速检测技术及研究进展[大全五篇]

第一篇：乳品抗生素残留的免疫学快速检测技术及研究进展

目录

摘要................................................................1 关键词.............................................................1

Abstract........................................................1 Keyword.........................................................1 前言...............................................................2

1、乳品中抗生素残留的原因..........................................3

2、乳品中抗生素残留的危害..........................................3

3、抗生素残留现状..................................................4

4、抗生素残留的主要检测方法........................................4

4.1微生物检测法.............................................4 4.2理化检测方法.............................................5 4.3免疫法...................................................5

5、免疫学快速检测方法..............................................5

5.1 放射免疫法...............................................6 5.2 酶联免疫吸附法...........................................6 5.3酶联免疫受体法...........................................6 5.5胶体金免疫层析法.........................................7

6、新型免疫学快速检测方法..........................................8

6.1 免疫传感器...............................................8 6.2蛋白芯片.................................................8 6.3表面等离子体共振.........................................8 6.4快速检测试纸条...........................................9

7、结束语..........................................................9

8、参考文献.......................................................11

9、致谢...........................................................13

0

摘要：近年来，随着食品工业的不断进步，各类食品层出不穷。但食品安全问题却频频发生，特别是乳品抗生素残留问题，引起了广大消费者的热切关注。如何快速检测乳品中抗生素，降低抗生素残留，消除抗生素对消费者带来的健康威胁，成为乳品企业关注的焦点问题。因此，我们要尽快开发或引进先进的抗生素检测方法，从源头杜绝抗生素，保障乳品的安全。本文归纳了抗生素残留的原因及危害，详细的介绍了有关乳品抗生素残留免疫学快速检测方法，对乳品抗生素残留的前景进行了展望。

关键词：乳品

抗生素残留

免疫学

快速检测方法

Abstract: In recent years, along with the advance of the food industry, all kinds of food.But food safety problems occur frequently, especially the milk antibiotic residues, caused the earnest attention of consumers.How to quickly detecting antibiotics in milk, reduce antibiotic residues, eliminating antibiotic threat to the health of consumers, become the focus of the dairy companies.Therefore, we should develop as soon as possible or the introduction of advanced detection method of antibiotics, antibiotic and eradicate the source, to ensure the safety of dairy products.This paper summarizes the reasons and harms of the antibiotic residues, detailed introduces the related rapid immunological milk antibiotic residues detection method, the prospects of antibiotic residues in milk products Keyword：The dairy

Antibiotic residues

immunology

Rapid detection methods

前言

随着经济的发展，人民生活水平的提高，乳品在人们膳食结构中所占的地位越来越重要，人均占有量已达到21.7 kg[1]。乳品营养素种类齐全，除含有全部的必需氨基酸和丰富的蛋白质外，还含有部分重要的维生素和必需的微量元素，易被人体吸收。其含有的活性物质能提高人体的免疫力、增强人体体质，被公认为大自然赐予人类最理想、最接近于母乳的完美天然食品

在我国，随着乳制品工业的迅速发展，畜牧业也发展迅猛，β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、磺胺二甲基嘧啶等抗生素在乳畜饲养业中作为饲料添加剂和动物药物在预防和治疗动物疾病方面的广泛应用，造成乳品中抗生素的残留，给消费者健康带来了威胁，特别是近年来出现的一系列乳品安全问题，严重打击了消费者对乳品的信心，抗生素残留则是乳品安全问题中较为突出的一个，已成为公众关注的焦点。[2] 因此，寻求快速、安全的抗生素残留检测技术成为我国关注的焦点问题。

1、乳品中抗生素残留的原因

我国的奶牛饲养主要以自营牛场模式为主，农户饲养奶牛管理意识低下以及经济条件所限，造成奶源质量低、污染物残留量高，同时，兽药管理不严格，使得奶牛乳房炎和其它感染性疾病都明显高于发达国家，因此我国的乳品的抗生素残留问题就格外严重。

乳品中抗生素的来源最终要追寻到原料生产及其流通过程。其中造成乳品中抗生素残留的原因有：①美国食品和药品管理局（FDA）调查结果表明，对泌乳期奶牛用药不当是造成乳中抗生素残留的重要原因。[3]②违反国家规定，长期小剂量添加抗生素到饲料中。此类抗生素在动物体内需要一段时间才能完全排除体外，极易在动物体内蓄积，因此造成抗生素残留。③给患病奶牛使用过的挤奶工具和贮奶设备，未经彻底清洗和消毒就用于其他健康牛只，造成牛奶中抗生素的交叉污染。④个别饲养户和经营商, 为了防止牛奶酸败变质而非法在其中掺入抗生素, 以使牛奶通过验收而保证其经济利益。⑤利用抗生素治疗乳牛临床型、隐性型乳房炎和子宫内膜炎，其中乳管注药法就是让药物直接注入乳房，通过乳腺管进入某个已感染区进行消炎，乳牛在接受这种治疗后，乳中的药物残留期可延缓到停药3～5d后。[4]

2、乳品中抗生素残留的危害

虽然抗生素对人类疾病的预防和治疗以及兽医临床中发挥了巨大的作用，但长期饮用残留有抗生素的乳品，可造成药物积累，当其达到一定浓度后，就会对人体产生毒副作用。

抗生素对人体会产生以下毒副作用：①长期饮用含有抗生素乳品的人易产生耐药性，一旦患者再使用同种抗生素治疗将很难奏效。②若消费者长期饮用含有抗生素的乳品，等于长期服用小剂量的抗生素。对抗生素有过敏体质的人服用残留有抗生素的牛乳后,会发生过敏反应。③正常人体内寄生着大量菌群，如果长期饮用含有抗生素的乳品，极易导致微生物平衡破坏，人与动物易发感染性疾病。④其他危害有，链霉素可引起肾损害和听力神经受损，四环素引起肝损害，氯霉素残留会对人造成致命后果，引起再生障碍性贫血等；[5]⑤一些性质稳定的抗生

素被排泄到环境中会造成环境污染，破坏生态平衡。⑥ 抗生素可严重影响干酪、[6]黄油、发酵乳的起酵和后期风味的形成。⑦抗生素的残留会导致乳品品质降低，降低产量和质量，给生产者带来巨大的经济损失。

3、抗生素残留现状

一项对我国几个大城市如西宁、南宁、广州、杭州、泉州、北京等城市乳制品质量的检测调查结果显示，在近八百份乳品采样中，抗生素残留超标居不合格项目第一位。[7]从超标的情况看，超标率达 10%以上的药物有10 种，超标率达 20%以上的药物有 8 种。乳品中残留的抗生素主要为青霉素类药物和磺胺类药物，其中CEPA 和 PEN-V 残留最为严重，检出率达35%以上。其次是 A 肝、PEN-G、CIF、SD 和 SMZ，检出率达20%以上。[8]我国过去对乳品中抗生素残留卫生指标无明文规定，直到2001 年 10 月，农业部发布实施了《无公害食品生鲜牛乳行业标准》，对新食品安全鲜牛乳的卫生指标明确了“抗生素不得检出”。[9] 但对于这一行业标准，我国目前并没有严格执行，致使乳品中抗生素残留问题一直未能得到解决，以致引起人们对乳品安全问题的担忧，并成为越来越受关注的焦点。从以上情况可以看出，我国乳品中抗生素残留现状并不乐观，有关部门应加强对乳品生产的管理，并对乳品中的抗生素等药物残留进行检测和监控，以保证人们饮用乳品的卫生和安全。

4、抗生素残留的主要检测方法

目前，国内外用于检测乳及乳制品中残留抗生素的方法很多，按照检测原理和使用的仪器可分为：微生物检测法，理化检测法和免疫检测法等。[10]

4.1微生物检测法

微生物检测法是较为广泛应用的最经典方法，测定原理是根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用, 对样品中抗生素残留进行定性或定量检测。其优点是操作简单，可靠，费用低，无需高级实验设备，一般实验室及养殖场都能

使用。因为牵涉到微生物的培养，所以检测时间相对较长，不能实现定量检测，不能满足某些抗生素最低限的检测。微生物检测法主要有TTC 法（氯化三苯基四唑氮法）、BSDA 法（嗜热脂肪芽孢杆菌纸片法）、PD 法（纸片法）及 STOP法（拭子法）等[11]

4.2理化检测方法

理化检测方法是根据抗生素分子理化性质对其进行分离和检测的方法，如色谱法、荧光法、毛细管电泳、色谱质谱联用技术等，理化检测方法分离速度快、效率高和自动化程度高，能检测抗生素的具体含量，敏感性较高，结果准确，但待检样品需经一系列的预处理，繁琐费时，还必须有相应的价格昂贵的仪器设备。一般在大型实验室使用，适合于精确测定。

4.3免疫法

免疫分析法的基本原理是以抗原或半抗原和抗体特异性结合为抗原—抗体复合物的免疫反应为基础的生化测试技术。这种检测方法可以具体分析是哪种抗生素，因为抗体除了可以针对某类抗生素所共有的结构产生特异抗体外，也可以针对共有结构上的不同修饰基团（即不抗生素）而产生特异性抗体。免疫分析技术最突出的优点是操作简单、速度快、分析成本低。另外，有些抗生素，如磺胺类抗生素由于采用微生物检测方法缺乏灵敏度和特异性，所以只有用免疫法才能实现对其快速检测。[12]

5、免疫学快速检测方法

免疫学快速检测是基于抗原-抗体特异性反应的检测方法。其分类方法不一而足,一般可分为放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析、发光免疫分析、胶体金免疫分析、仪器免疫分析和无标记免疫分析等。1959年建立的放射免疫分析被认为是免疫分析的建立标志[13],并获得了1977年的诺贝尔生理学或医学奖。

5.1 放射免疫法（RIA）

放射免疫法是一种应用放射性同位素的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合而成的体外微量分析方法。RIA 法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等，常可测至 pmol。缺点是使用放射性物质有一定污染，但由于只是在测试样品时才加入标记的同位素示踪物，且示踪物的放射性强度极低，因此一般不会对试验者造成辐射损伤。该方法特异性强，且与其他多种抗生素均无交叉反应。因此，该法能达到牛奶中四环素类抗生素残留的检测要求。

5.2 酶联免疫吸附法（ELISA）

ELISA 法是将待测目标物通过固定的抗体或抗原的特异性捕捉而结合于固相支持物表面，再将酶标记的抗体或抗原与之反应，利用酶在液相反应中催化底物显色来达到测定待测目标物含量的目的。最常用的标记酶为辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶。ELISA 方法把抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用有机地结合起来，目标物既可是抗原，也可是抗体。虽然 ELISA 法是目前研究较多的抗生素筛选检测方法，具有敏感性高，特异性强，检测量大，无需复杂的样品前处理等优点。但也存在一些问题，如因其载体的材质和包被技术的局限，在其包被载体孔内（一般为 96 孔酶标板），需要大剂量的抗原或抗体，才能达到良好的包被效果 ；且对显色时间要求较高，结果只能一次性判读等。[14]

ELISA 试剂盒是日前奶牛场和牛奶公司使用最广泛、快速、灵敏的检测青霉素类抗生素残留的方法。

5.3酶联免疫受体法（ELRA）

免疫受体法是目前国际法规认可的一类专利检测法。免疫受体检测法是酶联免疫分析（ELISA）的一个变换形式，基本原理是将特定抗生素类作为靶子，让固定在一定基质上的受体捕捉。大多数检测法利用竞争性原理，使样品内的抗生素与内置抗生素标志物竞争结合受体，然后进行冲洗和显色。该方法的检测限和灵敏度均与 ELISA 方法相当。5.4 荧光免疫法（FIA）

荧光免疫法是一种利用抗体标记的荧光素在特定激发波长下发出的荧光来进行检测抗原抗体结合信号的技术。该方法的优点是信号特异性好、灵敏度高、线性范围宽、操作简便 ；不足是扫描设备价格比较昂贵，难以进行普及应用。该法的优点是可以快速同时测定 18 种不同的磺胺类抗生素，可用于样品的初筛试验。缺点是在实际样品测定时，加样回收率偏低，且部分样品中的精密度偏差。

5.5胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析试验的原理是采用柠檬酸三钠还原HAuCl4聚合成金颗粒,由于金颗粒之间的静电作用和布朗运动,使其保持水溶胶状态,胶体金富含电子和强大的给电子能力。在胶体溶液pH8.2条件下,胶体金以非共价键与兽药小分子抗体结合形成金标抗体(Ab-Au),将金标抗吸附于玻璃纤维棉上,一端与固定有兽药小分子蛋白质偶连物(检测线)和二抗(质控线)的硝酸纤维素膜(NC)膜相连,另一端与样品垫相连。而后连同其他所需的吸水纤维、支撑材料、覆盖材料等按照设计工艺进行制作和组装,制成快速检测试纸。检测样品中不含兽药小分子,金标抗体就会与兽药小分子蛋白质偶连物反应而被部分截获,金颗粒富积而出现明显直观的红色条带,未完全结合的金标抗体至质控线时同样会出现红色条带;检测样品中含有兽药小分子,兽药小分子与兽药小分子蛋白质偶连物竞争性结合金标抗体,检测线不出现或出现很弱的红色条带。快速检测试纸检测小分子物质残留,检测时间仅需数分钟。

胶体金快速诊断技术凭借其方便快捷、灵敏度高、稳定性强等特点，在兽药残留检测领域中被迅速推广，是牛奶抗生素检测商业化应用较广泛的一种检测方法。

胶体金免疫层析技术是近些年发展起来的一项新型的检测、诊断技术，属于根据免疫反应原理开发的检测手段中的一种。但与其他免疫分析法不同的是，其他多数的免疫检测方法往往需要昂贵的分析设备和仪器，并且要配备专业人员操作检测。虽然这些检测方法具有很高的灵敏度和特异性，但却因为检测设备价格昂贵、操作复杂、专业性强等原因，而无法满足现场大规模检测的需求。而胶体金免疫层析分析技术除了采用免疫反应原理外，还结合了色谱层析的优点，有效突破了上述其他免疫检测方法的不足，具有快速、灵敏、简单、方便等特点。

6、新型免疫学快速检测方法

6.1 免疫传感器

免疫传感器是生物传感器的一种，近年来已取得迅速发展［15-17］。传感器的生物敏感层与复杂样品中特定的目标分析物之间通过抗体与抗原之间的识别反应，产生一些物理化学信号的变化，这些变化通过不同原理的传感器转换成第二信号（电信号），经放大后显示或记录。利用兽药与特异性抗体结合反应特性研制出的免疫传感器，检测灵敏，携带方便，可用于相应兽药的快速定性定量检测。

6.2蛋白芯片

蛋白质芯片又称蛋白质微阵列（protein microar-ray）是在基因芯片之后发展起来的，其原理是在固相支持物表面高密度排列蛋白质探针，可特异地捕获样品中分子，然后用 CCD 相机或激光扫描系统获取信息，最后用计算机进行定性定量分析。该方法在检测牛奶中抗生素残留上有潜在的巨大作用，可以实现样品用量少，无需样品前处理，高通量，快速检测的目的。

6.3表面等离子体共振（SPR）

表面等离子体共振（SPR）是一种物理光学现象。SPR 对金属表面电介质的折射率非常敏感，不同电介质其表面等离子体共振角不同，同种电介质，其附着在金属表面的物质的量不同，则 SPR 的响应强度不同。基于这种原理的生物传感器通常将一种具特异识别属性的分子即配体固定于金属膜表面，监控溶液中的被分析物与该配体的结合过程。在复合物形成或解离过程中，金属膜表面溶液的折射率发生变化，随即被 SPR 生物传感器检测出来。该方法优点是无需对样品进行标记处理，可真正实现无标记，在线检测。

6.4快速检测试纸条

日前，一项新型食品安全快速检测技术——乳制品及畜禽组织中关键抗生素 残留快速检测卡问世，让消费者面对乳、畜禽制品等食品的时候能更加放心。该项目填补了国内多种类抗生素类药物同时检测的技术空白，总体达到国际先进水平。[18]

据介绍，该项目是通过应用单克隆抗体技术和胶体金免疫层析技术自主开发出了β-内酰胺类&四环素类抗生素快速检测试纸条、β-内酰胺酶快速检测试纸条、氟喹诺酮类快速检测试纸条和磺胺类快速检测试纸条共四项技术成果。

科研人员表示，该项成果的创造性在于：采用特异性的抗原抗体反应与免疫层析分析技术相结合，大大提高了检测方法的特异性。β-内酰胺类&四环素类试纸条产品的开发，满足了市场上对头孢类、青霉素类和四环素类同时检测的需求，实现了一卡对多类药物的检测，使产品检测能力从原来的只能检测单一药物到检测一类药物，一直发展到现在的可以同时检测几类药物。此外，该成果检测牛奶样品的试纸条全部采用裸条进行检测，并配有微孔条，不同于传统的胶体金试纸条。由于微孔条的孔面积比较大，微孔中的金标抗体试剂与被检测的牛奶样品能够充分反应，能明显提高对样本检测的灵敏度。

该项成果已通过国家食品质量监督检验中心、中国检科院综合检测中心、北京市兽药监察所、北京出入境检验检疫局以及北京市理化分析测试中心等检测机构复核验证。其实际样本检测后采用仪器方法进行确证，阳性符合率为 100%。

7、结束语

乳品中抗生素残留是涉及人类健康的公共卫生问题。为了保障人们的身体健康，增强我国乳制品的国际竞争力。首先，我们要重视和加强检测工作，研发快速、便携、简单和经济的并能对多种抗生素残留进行检测的分析技术，以提高国产试剂盒的研制能力[19]，其次，要修订、制订乳制品标准，在将抗生素的检测纳入国标体系的基础上，进一步与国际标准接轨，在防控奶制品抗生素残留过程中，食品安全监督关口同样要严把商品准入市场关，严格食品质量报备制度，[20]杜绝不符合标准的奶流入市场，提高我国奶品的质量，符合WTO的质量技术要求，促进我国奶业向国际化方向发展。

寄希望于通过对牛奶中抗生素残留的检测而保证乳制品的安全只是“治标”，应从抗生素残留产生的源头加以控制，从而实现对牛奶中抗生素残留的“标本兼治”。可从以下几个方面着手。①发展高效、低残留的动物专用饲用抗生素是大势所趋。②研发替代抗生素的绿色饲料添加剂，如寡糖、微生态制剂、中草药制剂。③在乳制品生产中应用危害分析与关键控制点（HACCP）技术。HACCP 体系是用来保证产品在整个生产过程中免受可能产生的生物、化学、物理因素的危害，主要控制目标是产品的安全性，由对最终产品的检验转化为控制生产环节中潜在的危害，从而保证产品的安全性。

8、参考文献

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label

-free

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9、致谢

经过几个月的忙碌，本次毕业论文已经接近尾声，作为一名专科生，由于缺乏经验，难免有许多考虑不周全的地方。

这次论文的顺利完成，首先要感谢我的论文指导老师岳峰，是他的悉心指导与帮助才能让我顺利的完成本文。期间，岳老师给我提出很多建议，让我能集思广益。老师渊博的知识及谦逊宽厚的处事态度必让我受益终生。

另外，要感谢大学三年传授给我知识的老师们，是他们的教育让我懂得很多最终写下本文，最后感谢学校给我们提供的资源，让我可以参考。最后，感谢我的同学们三年来对我的帮助，感谢我的亲人对我的支持。

在此论文完成之际，谨向所有关心我支持我的老师、同学和亲人表示我最诚挚的感谢！

第二篇：乳品中抗生素的检测方法

上海千测标准技术服务有限公司

乳品中抗生素的检测方法

乳品中抗生素的检测方法经多年的实践，人们认识到抗生素可以增强牲畜抗病能力、提高养殖业产投比。但过量使用，将降低畜牧产品品质，影响乳品发酵。而含有抗生素残留的动物性产品，进入人类食物链，会使体内菌株产生抗生素抗性，扰乱机体内环境平衡，菌群失调而不利于健康；也会对易感人群产生过敏反应、激素障碍变态反应。因此，FAO及WHO早在1969年就提出应规定各种动物性食品中的抗生素残留允许标准，WHO于1979年规定原料奶及消毒牛奶中不得有抗生素。近年来，国内对奶制品中的抗生素残留也非常关注，无抗奶（Antibiotic-FreeMilk）的生产和消费已成为大势所趋。但我们对奶制品中抗生素的检测缺乏必要的研究，检测技术还十分落后。本文旨在对抗生素的检测方法进行总结，为在我国开展相关工作奠定基础。我国关于奶制品中抗生素检测的国家标准方法最早出现在《牛乳检验方法——GB5409—85》中，采用TTC法。1994年制订的《食品卫生微生物学检验？鲜乳中抗生素残留量检验——GB/T？4789.27—1994》，也采用TTC法。2001年9月，农业部发布的《无公害食品生鲜牛乳》行业标准中，检测方法同《GB5409—85》，并不得检出。《绿色食品消毒牛乳标准》也做了类似规定。可看出，我国还未将抗生素纳入常规检测，作为必检项目；所采用的TTC法精确性和时效性都比较差。

展望新世纪的乳制品工业，为了保障人体健康，适应WTO的要求，增强国内乳制品业的国际竞争力，必须将抗生素的检测纳入议事日程。

首先是要制定相应的法规和检测程序，将乳制品中抗生素的检测、报告、处罚和管理等纳入法制化轨道，适应市场经济就是法制经济的要求。

其次是要修订、制订乳制品标准，将抗生素的检测纳入国标体系。解决国内标准混乱，与国际标准冲突的问题，加大采用国际标准的比例，同国际标准接轨。

再次是要进行抗生素检测方法筛选工作，提高国产试剂盒的研制能力。努力研究发展一些简单、快速、经济和便携化的能检测多种抗生素残留的分析技术；发展高效、高灵敏的联用技术和多残留组分确证技术。

第三篇：农药残留快速检测规程

上海浩丰果蔬专业合作社 农药残留快速检测规程

一、目的：

对基地的原料进行农残检测，以确保原料符合相应的法律法规和客户要求。

二、范围：

适用于基地所有原料蔬菜的农药残留快速检测。

三、职责：

基地采收负责人从即将采收的地块中选取菜样交给基地检测员检测。检测员负责完成原料蔬菜的农残检测，填写检测记录。

四、操作流程

1、采收负责人在采收前一天按照取样程序选取菜样后交给检测员检测。

2、检测员在收到菜样后须在24小时内完成检测。

3、检测前需对检测器具状况、试剂库存数量进行检查，清洁操作台，保证检测过程顺利进行。

4、农残检测具体操作过程参照CNY-858C型残留农药测试仪试剂配制及使用说明执行。

5、检测完毕后，出具检测报告，对不合格样品及时通知采收负责人并采取相应措施。

6、清洁检测室及检测器具，锁闭检测室。

7、农场场长审核检测结果，签字确认后存档，有效期为二年。

五、检测室管理

1、农残检测室是确保食品安全的场所，要专室专用，不得存放公私杂物，不得进行其他无关活动。

2、检测室由专人负责，需经常保养，及时维修，做好防腐、防锈、防虫等工作。

3、检测室须保证设备齐全，分类存放，布局规范，整齐清洁。

4、爱护仪器设备，出现故障要及时维修，不能维修的要及时购买新的补充。

5、建立健全设备仪器档案，保留产品说明、维修记录等。

6、严格按照规定操作，冷静处理意外情况。

7、做好安全用电、用水、防火、防盗、防污染等工作，避免造成人身伤害和财产损失。

蔬菜原料田间取样程序

一、叶类蔬菜取样方法： 去掉明显腐烂和萎蔫部分的茎叶,菜花和花椰菜分析花序和茎。采集样本量至少为4个～12个个体，不少于1kg。代表种类：菠菜、甘蓝、大白菜、莴苣、甜菜叶、花椰菜、萝卜叶、菊苣等。

二、果菜类（果皮可食）取样方法：除去果梗后的整个果实,采集样本量为6个～12个个体,代表种类有：黄瓜、胡椒、茄子、西葫芦、西红柿等。

三、采收负责人提前确定采样批次、地点，并准备好相关器具：不锈钢刀、铁铲、样品纸袋（箱）、样品标签、铅笔等。

四、布点：一般采用定点法(5点法)和对角线法（5～15个点），混合采样。

五、具体方法:

对于采样区面积较小（10亩以内），地势相对平坦均匀的地块，采用定点法，设点5个；

对于采样区面积较大（10亩以上），或地块形状不够平坦和规范的地块，采用对角线法，设分点10-15个； 对于单个大棚内的采样，六、各分点混匀后用四分法取0.5-1kg样品装入样品袋，多余部分弃去。

七、对每一样品粘贴标签进行区分，详细记录。

第四篇：农药残留快速检测制度

农药残留快速检测制度

一、检测人员应严格依农药残留快速照仪器使用说明书的操作规程进行检验，数据应真实可靠。

二、检测人员应熟悉农药残留快速照仪器、配件的功能、特点和操作方法，并掌据保养维护知识。

三、遵守检测室制度，按时上、下班，值班人员必须坚守岗位，不得擅自离岗。

四、检测人员应经常打扫检测室卫生，保持检测台面整洁，环境干净卫生。

五、检测室使用的试管、比色皿等，应先用自来水冲冼干净，再用纯净水清洗三遍，倒扣，使内壁自然风干；移液枪使用完毕应恢复至最大量程。

六、检测结束后要及时填写检测记录台帐，如实记录检测结果，将结果公布于农贸市场LET 显示屏或电视公示栏上，同时将检测结果告知送检消费者。

七、加强对快速检测仪、试剂（耗材）、记录台帐的管理，定期检查耗材使用情况，预先制定采购计划，上报市场管理者购买。市场管理者应及时按计划购买检测耗材，保证检测正常进行。

八、每次检测完毕，应关闭电源、水，并清洁保养检测仪器，擦净台面，保持整洁。

第五篇：食品中抗生素残留危害及检测方法

食品中抗生素残留危害及检测方法

随着人们生活质量的提高，食品安全问题越来越为广大消费者所关注，特别是农药和抗生素等药物残留问题更是广大消费者所关注的焦点问题。在食品安全这个全球关注的热点问题上，如何快速、准确地检测食品安全的问题已成为重中之重。要检测抗生素在食品中的残留，必须选择特异性强、灵敏度高、高效快速的检测方法。因此，研究各种抗生素类残留检测的方法，提高其灵敏度与选择性具有十分重要的意义。

抗生素具有哪些危害

人们吃了有抗生素残留的肉、蛋、奶等食物后，会造成抗生素在人体内蓄积，使人产生对抗生素的抗性，引起各种组织器官病变，甚至癌变。

对人类健康的危害

对人体肠道菌群的影响

人体肠道菌群是一个平衡的生态系统，对保持人体健康起着非常重要的作用。如果人们长期摄入含有抗生素的食品后，会使敏感菌群被杀灭或抑制，而耐药菌群却大量繁殖，从而打破原来的平衡状态造成菌群失调，这就可能会导致长期腹泻或营养不良，严重时还可造成耐药菌感染，给临床治疗带来困难。

引起过敏和变态反应 青霉素、四环素、磺胺类及某些氨基糖苷类抗生素能使部分人群发生过敏反应和变态反应，氯霉素可破坏机体造血功能，诱发再生障碍性贫血。经常食用含抗生素的动物性食品，轻者出现皮肤瘙痒、荨麻疹、关节肿痛，重者导致血管性水肿、休克、甚至死亡。

导致细菌耐药性增加

目前，由于抗生素的广泛使用，使得细菌的耐药性不断增加，食用含抗生素残留的动物性食品后，人体内细菌的耐药性增加。同时，动物体内的耐药性菌株的耐药性也可能转移到人体细菌中，从而对人类产生极大的危害。

其他毒害作用

动物性食品中残留的链霉素进入人体后可引起肾损害和听神经受损。长期摄入氨基糖苷类抗生素残留严重超标的动物性食品，可损害第8 对脑神经，出现头晕、头痛、耳鸣、耳聋、恶心、呕吐等症状。四环素会引起肝损伤，与骨骼或牙齿中的钙质结合后，使骨骼及牙齿黄染，还可影响儿童的生长发育。邻氯青霉素、头孢菌素等可引起人类免疫性疾病；氯霉素会损害人的造血功能，抑制蛋白质

摘要：文章综述了抗生素残留的来源与途径, 介绍了抗生素残留对人类健康、乳制品生产、环境及其他方面造成的危害，分析了检测抗生素残留的方法，包括微生物检测法、仪器检验法、免疫学分析法等，并指出了这些检测方法的研究现状与发展前景。

对乳制品生产工艺的危害

由于含有抗生素的奶无法制成酸奶、奶酪等一些高质量牛奶产品，容易造成大量原料奶的浪费，给乳品企业造成经济损失。另一方面，一些不法奶户在高温季节为防止鲜乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，从而造成乳中抗生素残留，对人体也造成了很大的危害。

对环境的危害

一些性质稳定的药物被排泄到环境中仍能稳定存在很长时间，从而造成环境中的药物残留。链霉素、土霉素在环境中不易降解；螺旋霉素低浓度降解很快，但浓度高时需6 个月才能降解完；杆菌肽锌在有氧的条件下完全降解需3～4个月，在无氧环境中降解所需要的时间更长。据报道，动物养殖场污水处理池中红霉素、复红霉素、磺胺甲唑质量浓度可达69g/L，这些药物的排放污染了环境，破坏了生态平衡。

抗生素残留量的检测方法

随着社会的进步和人们对抗生素残留的日益重视，在客观上就要求改进传统的检测方法。引进先进的检测仪器，寻求一种快速、精确的检测方法，使得检测结果更加准确、可靠。

微生物检测方法

微生物检测方法的主要原理是根据抗微生物药对特异微生物的抑制作用，来定性或定量检测受检样品中残留的抗微生物药。微生物检测法应用较为广泛，是抗生素残留检测的传统方法，但测定时间长，结果误差较大，操作复杂。其优点是费用低，一般实验室都能操作。

氯化三苯四氮唑法（TTC）

这是目前我国食品卫生标准中用来检查牛乳中抗生素残留的检测方法。如果牛乳中有抗生素存在，当乳中加入菌种（嗜热链球菌）经培养后，菌种不增殖。此时，加入的TTC 指示剂不发生还原反应，所以仍呈无色状态。如果没有抗生素存在，则加入菌种就可增殖，TTC 还原变成红色，使样品染成红色。

棉拭法或纸片法

这是检测胴体内可疑抗生素残留的现场试验方法，简便而又有一定准确性，被世界普遍采用，具有广域的灵敏性。它是用棉拭插入待检部位浸润20min取出，放入有枯草杆菌的培养基中培养18h～24 h，或用圆滤纸从肾脏或乳取样，与含有枯草杆菌等细菌的营养琼脂贴合培养，通过观察棉拭周围有无抑菌圈或根据其大小判定有无抗菌物质存在。该法的特点是能够确定抗生素的种类，提高检出率和准确率。如，氯霉素最低检出限量为0.01mg/kg、土霉素为0.05mg/kg等。

杯蝶法

样品经处理后，注入牛津杯中，与含菌液的检定平板贴合。培养后，根据抑菌圈的有无及大小判定结果。采用不同的试验菌种，可检测不同的抗生素。如检测肉中四环素类抗生素用蜡样芽孢杆菌；检测青霉素用金黄色葡萄球菌；检测链霉素或双氢链霉素用枯草杆菌。

电泳生物检测法

该法灵敏度较高。Fusac（1989）应用电泳和微生物自显影技术测定动物组织中残留的氨基糖苷类抗生素（如，双氢链霉素、卡那霉素等），取得了满意的结果。

琼脂扩散法

Korkela 以猪肾为样品采用琼脂扩散法对几种抗生素残留检测进行了比较。能检测出土霉素和链霉素的残留。Untermann（1986）报道，采用枯草杆菌进行琼脂扩散法检测出了牛、猪及山羊的肌肉中和肾脏内抗生素的残留。

仪器检验方法

仪器检验方法是利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应或性质来测定其含量，进行定性定量

和药剂鉴定。其敏感性较高，但有的检测程序较复杂或检测费用较高。

液相色谱法（LC）

德国Russel 报道了液相色谱法检测氯霉素残留，检测限为10μg/kg，回收率为63%～79%。Jefery等（1994）报道了用LC法测定沙拉沙星在海峡鲇鱼肌肉中的残留，沙拉沙星的检测限为1.4ng/g，回收率为85.4％～104％。

气相色谱法（GC）

该法有许多高灵敏、通用性或专一性强的检测器供选用。Plomp和Maes报道了在血液和羊水中甲砜霉素的快速气相色谱检测方法，检测限为0.1μg/mL，甲砜霉素血清的回收率为91.3％，羊水的回收率为90.3％。

薄层色谱法（TLC）

该法经常作为样品筛选方法。其优点是速度快，有利于现场应用，且已在饲料、组织和体液等的分析中得到了广泛的应用。Bossuyt 等（1976）报道用TLC 法测定牛奶中新霉素的残留。但新霉素的检测限为15μg/g，远高于牛奶中的新霉素残留限量。

高效薄层色谱法（HPTLC）

该法现已成为仅次于HPLC的残留分析法。HPTLC在兽药残留的快速筛选检测方面应用广泛。测定组织样品时需在样品展开后喷以硫酸-高氯酸试液，灵敏度可提高10倍，检测限达10μg/kg。

高效液相色谱法（HPLC）

这是目前广泛应用的一种理化检测方法。该法对抗生素残留的检测具有较高的灵敏性。Anadan等（1995）报道了用HPLC法测定鸡脂肪、肝脏、肾脏、肺脏及皮肤中恩诺沙星及代谢产物环丙沙星浓度，检测限为0.003 μg/g，在各种组织中提取回收率均大于70％。Rolinski 等（1997）用HPLC 法检测了肉鸡组织和鸡蛋中诺氟沙星残留，检测限为0.0025μg/g。

超临界流体色谱法（SFC）

该法可弥补GC和HPLC法的不足，但不可能取代二者。SFC 最大优点是可以方便地连接各种灵敏的检测器。Pensabene 等将鸡蛋样品进行超临界流体萃取后进行磺胺类药物的残留分析，检测限为25 μg/kg，回收率为81％~101%。

毛细管电泳法（CE）Ackermans 等将猪肉样品加乙腈提取，离心后上清液过滤膜后直接进行毛细管区带电泳分析。测出肉样中15 种磺胺类药物的检测限在2 mg/kg~9mg/kg 的范围内。

联用技术

联用技术可扬长避短，一般兼分离、定量和定性（分子结构信息）于一体，因而特别适用于确证性分析。常见的联用技术有薄层色谱-质谱（TLC-MS）、气相色谱-质谱（GC-MS）、液相色谱-质谱（LC-MS）等。色谱和质谱联用由于实现了高效层析分离和检测联机，可用微电脑控制层析条件、程序和数据处理，其特异性、灵敏度和重复性均好，并可一次同时完成同一样本中多种药物及其代谢物的检测。

免疫分析法

免疫分析法主要有放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、荧光免疫分析（FIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）。与常规的理化分析技术相比，免疫分析技术最突出的优点是操作简单、容量大、速度快、仪器化程度低且分析成本低，分析效率则为HPLC 或GC 的几十倍以上。免疫分析法能与其他技术联用。

放射免疫分析（RIA）

Mahon 等曾将卡那霉素与人血清白蛋白直接连接制备结合抗原，并建立了血清样品的放射免疫测定法，检测限为10 ng/mL。1984 年Arnold 等即建立了氯霉素的放射免疫测定法，其检测限为0.21μg/kg。酶联免疫吸附法（ELISA）

Prithipal Singh 等（1989）建立了检测猪血中磺胺二甲嘧啶的ELISA 方法，其检测范围为10ng/mL~1 000 ng/mL。国内刘智宏等（1998）建立了检测血清中磺胺二甲基嘧啶的ELISA 方法，其检测限为50 ng/mL。杨红（1999）建立了测定牛奶、猪血浆等样本的ELISA 检测方法，其检测限约0.025 ng/mL。