洛阳理工学院东校区中水处理站水质监测与评价

第一篇：洛阳理工学院东校区中水处理站水质监测与评价

环境监测课程设计

姓 名：

学 号：

班 级：

专 业：

指导老师：

洛阳理工学院环境工程与化学学院

二〇一五年五月

题目：校园中水回用工程污水处理站水质监测与评价

目录

第一章 监测背景......................................................................................1 第二章 基础资料收集..............................................................................1 第三章 采样点的设置..............................................................................3 第四章 监测项目的确定..........................................................................3 第五章 采样时间和采样频率的确定......................................................3 5.1采样时间的确定............................................................................3 5.2采样频率的确定............................................................................3 第六章 样品的采集与保存......................................................................3 第七章 样品的预处理..............................................................................4

7.1 浊度的测定...................................................................................4

7.2 化学需氧量的测定.......................................................................4 7.3 总磷的测定...................................................................................7 7.4 总氮的测定..................................................................................11 第八章 评价方法、质量保证和实施计划............................................14 8.1评价方法与评价...................................15 8.2质量保证措施.....................................15 8.3计划实施时间.....................................15 参考文献..................................................................................................16 附录..........................................................................................................17 校园中水回用工程污水处理站水质监测与评价

第一章 监测背景

中国是一个水资源贫乏的国家，属世界上13个贫水国之一，人均水资源是世界平均水平的1/4。同时，我国水资源时空分布不均，致使部分地区供求矛盾加剧。随着经济发展和城市化进程的加快，用水亮增多，城市缺水问题尤为突出。目前我国共有1400余所各级各类高校，在校学生4000余万人。从有关资料看高校学生消耗清洁水源410万m3/天。而校园绿化、学生公寓冲厕消耗大量自来水，造成能源和资源的浪费。为建设节水型校园，洛阳理工学院王城校区已经实施中水回用工程多年，为我们节约了大量的自来水和能源。

“中水”一词是相对于上水〔给水〕、下水〔排水〕而言的。中水回用技术系指将小区居民生活废〔污〕水（沐浴、盥洗、洗衣、厨房、厕所）集中处理后，达到一定的标准回用于小区的绿化浇灌、车辆冲洗、道路冲洗、家庭坐便器冲洗等，从而达到节约用水的目的。

在此，我们将对校园中水回用工程污水处理站进、出水的多个有机指标进行检测，检测结果结合《城市污水再生利用——城市杂用水水质标准》[7]以及中水处理站处理效率作出评价。

第二章 基础资料收集

依据标准与规范：

《地表水环境质量标准》GB3838--2002 《地面水环境影响评价 导则》HJ/T 2.3-93 《地表水和污水监测技术规范》HJ/T 91—2002 《水质 采样方案设计技术规定》HJ 495－2009 《水质 采样技术指导》 HJ 494－2009 《水质 样品的保存和管理技术规定》HJ 493－2009 《城市污水再生利用 城市杂用水水质标准》GB/1 18920-2002 《生活杂用水水质标准》CJ 25.1-89 《再生水回用用于景观水体的水质标准》CJ/T95-2000 《水质 总磷的测定 钼酸铵分光光度法》GB 11893-89

《水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法》GB 11894-89 《水质 化学需氧量的测定 重铬酸盐法》GB 11914-89 课题小组将先通过网络等途径对中水回用系统进行了解，了解中水处理工作 的原理、目前中水回用的概况等；然后到学校中水回用工程中水处理站作进一步了解校园中水处理站中水处理系统的结构；然后，根据《城市污水再生利用 城市杂用水水质标准》[7]选定本次监测、评价的四个指标，进而参考《地表水和污水监测技术规范》[3]、《水质 采样方案设计技术规定》[4]、《水质 采样技术指导》[5]和《水质 样品的保存和管理技术规定》[6]拟定本次检测前的实验方法、实验药品准备和配制；最后，大家检测任务进行分配、实验，进而根据《城市污水再生利用 城市杂用水水质标准》[7]对校园中水处理站进、出水水质作出评价。

通过网络、实地 根据技术规范与标准选定监测指标、采样

分配任务、实验药品准备、实验检测，处理数据

评价校园中水处理站进、出口水质状况

了解等途径了解中水回用系图2-1 洛阳理工学院东校区中水处理站水质监测与评价

图2-2 高校生活污水集中处理中水回用系统图

任务分配：

表2-1 监测评价任务分配

姓名 学号

任务

查询资料、方案拟定、水样采集、监测化学需氧量（COD）及浊度和对实倪吉祥 B12070828 验检测评价。孙 琳 B120708 水样采集,药品配制，检测总磷（TN），并对相应的指标作简单评价； 任美琪 B120708 水样采集,药品配制，检测总磷（TN），并对相应的指标作简单评价； 刘凌卓 B12070827 药品配制，检测总磷，记录检测结果，并对相应的指标作简单评价。孙尚波 B12070811 药品配制，检测总磷，记录检测结果，并对相应的指标作简单评价。水样采集，监测化学需氧量（COD），简单评价对应监测指标，记录检测于宝祺 B12070814 结果，对此次监测作评价。

第三章 采样点的设置

根据本次监测与评价的是校园中水回用工程污水处理站的情况，监测小组需要监测中水处理站进水和出水水质。所以，监测小组确定采样点位置为：洛阳理工学院王城校区（东校区）中水处理站中水回用系统中格栅前取水（进水）和清水池取水（出水）。

第四章 监测项目的确定

根据《城市污水再生利用 城市杂用水水质标准》[7]中的项目和《地表水环境质量标准》[1]中基本项目，考虑到校园生活污水中污染物的主要种类以及监测小组目前的能力和检测条件，最终，确定此次监测与评价的项目为：

项目一：浊度

项目二：化学需氧量（COD）项目三：总磷（TP）项目四：总氮(TN)

第五章 采样时间和采样频率的确定

5.1采样时间的确定

此次课程设计的时间为第10周（2014年5月04日-2014年5月10日），根据老师安排和监测与评价任务量，监测小组采样时间为2014年5月05日下午。

5.2采样频率的确定

通常需要水质可能发生变化的全过程的资料，为此要不时地采样，使所采样品足以反映水质及其变化，但也要考虑到成本要小。相反，按主观想象确定采样频率或者仅从分析和采样的工作量考虑，会导致盲目采样或过于频繁的采样。当非正常状态出现的时候，有必要增加采样的频次，例如，在植物开始生长的过程中或者在一条河的涨潮期和水华时期等。为了统计长时间的发展趋势，需要增加采样的频次，这样采集的样品结果才是可以利用的。

对于污染治理、环境科研、污染源调查和评价等工作中的污水监测，其采样频次可以根据工作方案的要求另行确定。

参考《城市污水再生利用 城市杂用水水质标准》[7]中城市杂用水水质标准采样检测频率规定，以及监测小组监测的具体项目，第六章 样品的采集与保存

从管道中采样：用适当大小的管子（如抽取多相液体时，管的最小公称内径为25 mm）从管道中抽取样品。液体在管中的线速度要大，足够保证液体呈湍流的 特征，避免液体在管内水平方向流动。

第七章 样品的预处理

根据标准和规范，确定本监测方案所选监测项目的预处理方法和具体操作步骤。如表7-1。

表7-1 测定项目分析方法

测定项目 浊度 COD TP TN

测定方法 浊度仪 重铬酸钾法 钼酸铵分光光度法

碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法

执行标准

GB 11914-89 GB 11893-89 GB 11894-89 7.1 浊度的测定

水样 进水 出水 第一次测

20（21稀释至84，4倍）

0.052

第二次测

14.19（20稀释至100,5倍）

0.5

浊度 75.475 0.051

7.1 化学需氧量的测定

化学需氧量（CODCr）的测定（GB11914-89重铬酸钾法）[12] 1.实验目的和要求

（1）熟练掌握化学需氧量（COD）测定方法及原理（2）巩固《环境监测》（第四版）第二章第八节相关内容

2.原理 重铬酸钾法测定COD的原理是：在强酸性溶液中，用一定量的重铬酸钾氧化水样中的还原性物质，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据硫酸亚铁铵的用量算出水样中还原性物质消耗氧的量。测定结果因加入氧化剂的种类及浓度、反应溶液的酸度、反应温度和时间，以及催化剂的有无而不同，因此，化学需氧量亦是一个条件性指标，其测定必须严格按步骤进行。

酸性重铬酸钾氧化剂氧化性很强，可氧化大部分有机物，加入硫酸银作催化剂时，直链脂肪族化合物可完全被氧化，而芳香族有机物却不易被氧化，吡啶不被氧化，挥发性直链脂肪族化合物、苯等有机物存在于蒸气相，不能与氧化剂液体接触，氧化不明显。氯离子能被重铬酸钾氧化，并且能与硫酸银作用产生沉淀，影响测定结果，故在回流前向水样中加入硫酸汞，使之成为络合物以消除干扰。氯离子含量高于2000mg/L的样品应作定量稀释，使含量降低至2000mg/L以下，再行测定。用0.25mol/L的重铬酸钾溶液可测定大于50mg/L的COD。用0.025mol/L的重铬酸钾溶液可测定5～50mg/L的COD，但准确度较差。3.仪器与试剂

（一）仪器

（1）回流装置：带250ml磨口锥形瓶的回流装置（2）加热装置：电热板或变阻电炉（3）酸式滴定管：50ml。

（二）试剂

除另有说明外，所用试剂君威分析纯试剂。

（1）重铬酸钾标准溶液[c(1/6K2Cr2O7)=0.2500mol/L]：称取预先在120℃烘干2h的基准或优级纯重铬酸钾12.258g溶于水中，移入1000mL容量瓶，稀释至标线，摇匀。（2）试亚铁灵指示剂：称取1.485g一水合邻菲罗啉（C12H8N2·H2O，1.10-phenanthroline），0.695g七水合硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）溶于水中，稀释至100mL，贮于棕色瓶内。（3）硫酸亚铁铵标准溶液{c[(NH4)2Fe(SO4)2]=0.1mol/L}：称取39.5g六水合硫酸亚铁溶于水中，边搅拌边缓慢加入20mL浓硫酸，冷却后又移入1000mL容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。林用钱，用重铬酸钾标准溶液标定。标定方法：准确吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液于500mL锥形瓶中，加水稀释至110mL左右，缓慢加入30mL浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示剂（约0.15mL），用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。

c[(NH4)2Fe(SO4)2] =（0.250*10.00）/V（7-1）式中：c——硫酸亚铁铵标准溶液的浓度，mol/L；

V——硫酸亚铁铵标准溶液的用量，mL； 0.2500——重铬酸钾标准溶液浓度，mol/L； 10.00——重铬酸钾标准溶液体积，mL。（4）硫酸-硫酸银溶液：于2500mL浓硫酸中加入25g硫酸银，放置1～2d,不时摇动使其溶解（如无2500ml容器，可在500mL浓硫酸中加入5g硫酸银）（5）硫酸汞：结晶或粉末

4.实验步骤（1）取20.00mL混合均匀的水样（或适量水样稀释至20.00mL）于250mL磨口锥形瓶中，准确加入10.00mL重铬酸钾标准溶液及数粒小玻璃珠或沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢加入30mL硫酸-硫酸银溶液，轻轻摇动磨口锥形瓶使溶液摇匀，加热回流2h（自沸腾开始计时）。（2）冷却后，用90mL水冲洗冷凝管壁，取下磨口锥形瓶。溶液总体积不得少于140mL，否则因酸度太大，滴定重点不明显。（3）溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液的用量。（4）测定水样的同时，以20.00mL重蒸馏水，按同样操作步骤做空白试验。记录滴定空白溶液时硫酸亚铁铵标准溶液的用量。5.实验结果与数据处理 根据测定空白溶液和样品溶液消耗的硫酸亚铁铵溶液体积和水样体积按下式计算水样COD：

COD（O2，mg/L）=[（V0-V1）*c*8*1000]/V（7-2）式中：c——硫酸亚铁铵标准溶液的浓度，mol/L；

V0——滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的体积，mL； V1——滴定水样时硫酸亚铁铵标准溶液的体积，mL； V——水样的体积，mL；

8——氧（1/4O2）的摩尔质量，g/mol。

6.注意事项（1）使用0.4g硫酸汞络合氯离子的最高量可达40mg，如取用20.00mL水样，即最高可络合2000mg/L 氯离子的水样。若氯离子浓度较低，亦可少加硫酸汞，使保持m(硫酸汞)：m（氯离子）=10：1。若出现少量氯化汞沉淀，并不影响测定。（2）取水样体积可为10.00～50.00mL，但试剂用量及浓度需按表7-2进行相应调整，也可得到满意的结果。

表7-2 取水样体积和试剂用量

取水样 体积/mL 0.2500mol/L 1/6K2Cr2O7 标准溶液体积/mL 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30 45 60 75

H2SO4-Ag2SO4溶液体积

/mL

HgSO4 质量/g

（NH4）（SO4）2Fe

2标准溶液浓度

滴定前 总体积/mL

（mol/L）

0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

0.0500 0.1000 0.1500 0.2000 0.2500

210 280 350（3）对于化学需氧量小于50mg/L的水样，应改用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液，回滴时用0.01mol/L硫酸亚铁铵标准溶液。

（4）水样加热回流后，溶液中重铬酸钾剩余量应为加入量的1/5～4/5为宜。（5）用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂的质量和操作技术时，由于每克邻苯二甲酸氢钾的理论COD为1.176g，所以溶解0.425g邻苯二甲酸氢钾（HOOCC6H4COOK）于重蒸馏水中，转入1000mL容量瓶，用重蒸馏水稀释至标线，使之成为500,g/L的COD标准溶液。用时新配。

（6）COD的测定结果应保留三位有效数字。

（7）每次实验时，应对硫酸亚铁铵标准溶液进行标定，室温较高时尤其应注意其浓度的变化。7.数据处理结果：

表7-2（NH4）2Fe（SO4）2标准溶液浓度的标定

初值 21.68

末值 47.50

（NH4）2Fe（SO4）2标准溶液浓度mg/l

0.096824

表7-3化学需氧量检测结果

编号 水样 初值 3.10 0.50 5.18 0.25

末值 24.48 24.80 29.60 24.80

CODmg/l 1号磨口锥形瓶 进水（10ml水样+10ml蒸馏水）2号磨口锥形瓶 3号磨口锥形瓶 4号磨口锥形瓶

空白（20ml蒸馏水）出水（20ml水样）空白（20ml蒸馏水）

226.18

50.35

7.2 总磷的测定

水质 总磷的测定 钼酸铵分光光度法 GB 11893--89[10]

1.主题内容与适用范围

本标准规定了用过硫酸钾（或硝酸-高氯酸）为氧化剂，未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度测定总磷的方法。

总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。本标准适用于地面水、污水和工业废水。

取25mL试料，本标准的最低检出浓度为0.01mg/L，测定上限为0.6mg/L。在酸性条件下，砷、铬、硫干扰测定。2.原理

在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸-高氯酸）使试样消解，将所含磷全部转化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。3.试剂

本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。

（1）硫酸（H2SO4)，密度为1.84g/mL（2）硝酸（HNO3），密度为1.4g/mL（3）高氯酸（HClO4），优级纯，密度为1.68g/mL（4）硫酸（H2SO4），1+1（5）硫酸，约c（½H2SO4）=1mol/L：将27mL硫酸（1）加入到937mL水中。（6）氢氧化钠（NaOH），1mol/L溶液：将40g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL（7）氢氧化钠（NaOH），6mol/L溶液：将240g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL（8）过硫酸钾，50g/L溶液：将5g过硫酸钾（K2SO4）溶于水，并稀释至100mL 抗坏血酸，100g/L溶液：溶解10g抗坏血酸（C6H8O6）于水中，并稀释至100mL（9）此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周。如不变色可长时间使用。（10）钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵[（NH4）6MO7O24*4H2O]与100mL水中。溶解0.35g酒石酸锑钾[KSbC4H4O7*½H2O]于100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸（4）中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中，在冷处可保存二个月。

（11）浊度-色度补偿液：混合两个体积硫酸（4）和一个体积抗坏血酸（3.9）。使用当天配制

（12）磷标准贮备溶液：城区0.2197±0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾（KH2PO4），用水溶解后转移至1000mL容量瓶中，加入大约800mL水、加5mL硫酸（4）用水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含50μg磷。本溶液可在玻璃瓶中可贮存至少六个月。

（13）磷标准使用溶液：将10ml的磷标准溶液（3.12）转移至250ml容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。1.00ml此标准溶液2.0ug磷。使用当天配制。（14）酚酞10g/L溶液；0.5g酚酞溶于50mL95%乙醇中。4.仪器

实验室常用仪器设备和下列仪器。

（1）医用手提式蒸气消毒器或一般压力锅（1.1-1.4kg/cm2).（2）50mL具塞（磨口）刻度管。（3）分光光度计。

注：所有玻璃器皿应用稀盐酸或稀硝酸浸泡。5.采样和样品

（1）采取500mL水样后加入1mL硫酸3（1）调节样品的pH值，使之低于或等于1，或不加任何试剂于冷处保存。

注：含磷量较少的水样，不要用塑料瓶采样，因易磷酸盐吸附在塑料瓶上。（2）试样的制备：

取25mL样品5（1）于具塞刻度管中4（2）。取时应仔细摇匀，以得到溶解部分和悬浮部分均具有代表性的试样。如样品中含磷浓度较高么事杨体积可以减少。6.分析步骤（1）空白试样

按6（2）-（4）的规定进行空白试验，用水代替试样，并加入与测定时相同体积的试剂。（2）消解

过硫酸钾消解：想5（2）试样中加4mL过硫酸钾3（8），将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线将玻璃塞扎紧（或用其他方法固定），放在大烧杯中置于高压蒸汽消毒器4（1）中加热，待压力达1.1kg/cm2，相应温度为120℃时，保持30min后停止加热。待压力表读数降至零后，取出放冷。然后用水稀释至标线。（3）发色

分别向各份消解液中加入1mL抗坏血酸溶液3（9）混匀，30s后加2mL钼酸盐溶液3（10）充分混匀。

注：如试样中含有浊液或色度时，需配制一个空白试样（消解后用水稀释至标线）然后向试料中加入3mL浊度--色度补偿液3（11），但不加抗坏血酸溶液和钼酸盐溶液。然后从试料中扣除空白试料的吸光度。

砷大于2mg/L干扰测定，用硫代硫酸钠去除。硫化物大于2mg/L干扰测定，通氮气去除。铬大于50mg/L干扰测定，用亚硫酸钠去除。（4）分光光度测量

室温下放置15min后，使用光程为30mm比色皿，在700nm波长下，以水作参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，从工作曲线6（5）上查得磷的含量。注：如显色时室温低于13℃，可在20-30℃水浴上显色15min即可。（5）工作曲线的绘制

取7支具塞刻度管4（2）分别加入0.0,0.50,1.00,3.00,5.00,10.0,15.0mL磷酸盐标准溶液3（14）、加至25mL然后按测定步骤6（2）-（4）进行处理。以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量绘制工作曲线。7.结果的表示

总磷含量以C（mg/L）表示，按下式计算：

C=m/V（7-3）式中：m---试样测得含磷量，μg； V---测定用试样体积，mL。8.检测结果

（1）标准溶液含量与吸光度

表7-4 标准溶液磷含量与吸光度

试管编号 磷酸标准溶液体积mL 含磷量μg 吸光度

0 0.519 0 0.5 1 3 5 10 15

0.008 0.015 0.026 0.06 0.101 0.322（2）标准曲线

磷含量吸光度标准曲线磷含量μg***0.10.20.30.40.5y = 57.64x + 1.1682R2 = 0.9921系列1线性(系列1)0.6吸光度

注：5号试管数据已剔除

图7-1磷含量标准曲线

（3）出水总磷检测结果

表7-5进出水总磷检测结果 水样 出水

吸光度 磷含量μg 总磷浓度mg/L

7.3 总氮的测定

水质 总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法 GB 11894--89[11]

1.原理：

在60摄氏度以上的水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，故在氢氧化钾的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。分解出的原子态氧在120~124摄氏度条件下，可以使水样中的含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐。并且在此过程中有机物同时被氧化分解。可用紫外分光光度法与波长于220和275mm处，分别测出吸光度A220及A275按式（1）校正吸光度A:

A=A220-A275---------(1)按A的值查校准曲线并计算总氮（以NO3-N计）含量。2.试剂和材料

除非（2.1）另有说明外，分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂。2.1无氨水。

2.1.1离子交换法：将蒸馏水通过一个强酸型阳离子交换树脂（氢型）柱，流出液收集在低啊有密封玻璃盖的玻璃瓶中。

2.1.2蒸馏法：在1000ml蒸馏水中，加入0.10ml硫酸（ρ=1.84g/mL）。并在玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前50ml馏出液，然后将馏出液收集在带有玻璃塞的玻璃瓶中。

2.2氢氧化钠溶液：200g/L：称取20g氢氧化钠溶于水中稀释至100ml。2.3氢氧化钠溶液，20g/L：将2.2溶液稀释10倍而得。

2.4碱性过硫酸钾溶液：称取40g过硫酸钾，另外称取15g氢氧化钠，溶于无氨水中，稀释至1000ml溶液，储存在聚乙烯瓶内，最长可储存一周。2.5盐酸溶液，1+9。

2.6硝酸钾标准贮备液，cN=100m/L：硝酸钾在105~110摄氏度烘箱中干燥3h,在干燥器中冷却后，称取0.7218G，溶于无氨水中，移至1000mL，用无氨水稀释至表现在0~10摄氏度的暗处保存，或者加入1~2mL三氯甲烷保存，可稳定6个月。

2.6.2硝酸钾标准使用液，C=10mg/L：将贮备液用无氨水稀释10倍而得。使用时配制。

2.7硫酸溶液，1+35。3.仪器和设备

3.1常用实验室仪器和下列仪器。

3.2紫外分光光度计及10mm石英比色皿。

3.3医用手提式蒸汽灭菌器或者家用压力锅（压力为1.1~1.4kg/cm2），国内温度相当于120~124摄氏度。3.4具玻璃磨口塞比色管，25mL。

所用玻璃器皿可以用盐酸（1+9）或者硫酸（1+35）浸泡，清洗后再用无氨水冲洗数次。4.分析步骤 4.1测定

4.1.1用无分度吸管取10.00mL试剂（C超过100时，可减少取样量并加无氨水稀释至10mL）置于比色管中。

4.1.2试样不含悬浮物时，按照下述步骤进行。

a.加入5mL碱性过硫酸钾溶液，塞进磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞，以防弹出。

b.将比色管置于医用手提蒸汽灭菌锅中，加热灭菌使压力表指针到1.1~1.4kg/㎝,此时温度达到120~124摄氏度开始计时。保持此温度加热半小时。c.冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管并冷却至室温。d.加盐酸（1+9）1mL，用无氨水稀释至25mL标线，混匀。

e.移去部分溶液值10mm，石英比色皿中，在紫外分光光度计上，以无氨水作为参比，分别在波长220与275nm处测吸光度，并用式（1）计算出校正吸光度A。

4.1.3.试样含悬浮物时，先按上述4.1.2中a至d步骤进行，然后带澄清后移取上清液到石英比色皿中，再按照4.1.2中e步骤继续进行测定。4.2空白试验

空白试验除以10mL无氨水代替试料外，采用测定完全相同的试剂、用量和分析步骤进行平行操作。

注：但测定在接近检测线时，必须控制空白试验的吸光度A不超过0.03，超过此值，要检查所用水、试剂、器皿和家用压力锅的压力。4.3校准

4.3.1校准系列的制备：

a.用分度吸管向一组（10支）比色管中，分别加入硝酸氮标准使用溶液0.0,0.10,0.30,0.50,0.70，1.00,3.00,5.00,7.00,10.00mL，加无氨水稀释至10.00mL。

b.按照4.1.2中a至e步骤进行测定。4.3.2标准曲线的绘制： 2空白试验溶液和其他硝酸钾标准使用溶液制得的校准系列完成全部分析步骤，与波长220和275nm出测定吸光度后，分别按下式去除空白外其他校准系列的校正吸光度Ag和空白的校正吸光度Aa及其差值Ar

Ag=Ag220-Ag275(2)Ab=Ab220-Ab275(3)Ar=Ag-Ab(4)式中：Ag220----标准溶液在220nm波长的吸光度； Ag275------标准溶液在275波长处的吸光度； Ab220-----空白试验溶液在220nm波长上的吸光度； Ab275-----空白试验溶液在275nm波长上的吸光度； 按Ar值与相应的NO3-N含量（μg）绘制标准曲线。5结果的表示 5.1计算方法

按照式（1）计算得试样校正吸光度Ar，在校准曲线上查出相应的氮总数，总氮含量C(mg/L)按下式计算： Cm(5)（7-4）V式中：m------试样测出的含氮量，μg； V-----测定使用的试样体积，mL。6.检测结果（1）标准曲线

y=2.586x+0.0327（R2=0.9987）（7-5）式中：x--吸光度 y--浓度，mg/L。（2）检测结果

表7-6 进、出水及空白总氮检测结果

水样

进水

275 出水

220

0.209 1.568

1.355

3.5367

波长nm 220

吸光度 1.56

1.351

3.5264

Ax

总氮含量mg/L

275

空白

0.213

第八章 评价方法、质量保证和实施计划

依据标准和规范，确定监测结果的评价方法，质量保证（数据处理、标准样品和平行样品的数量等质量控制措施），本次为期5的课程设计的具体实施计划。

8.1评价方法与评价：

分别计算进、出水COD、TP、TN含量与各含量去除效率。

表8-1 中水处理站进、出口COD、总磷、总氮含量 水样 进水 出水

COD（mg/L)

总磷mg/L

总氮mg/L

(COD)=COD进-COD出100%=94.34%（8-1）

COD进 (TP)TP进TP出100%=76.57%（8-2）

TP进出水水样COD含量为9.2904mg/L，总磷含量为0.1136mg/L，根据《生活杂用水水质标准》（CJ 25.1-890）[8]，COD含量达到厕所便器冲洗、城市绿化和洗车、扫除标准（50mg/L）；总磷含量符合《再生水回用用于景观水体的水质标准》（CJ/T95-2000）[9]标准值（2.0mg/L）。

中水处理系统除去水中还原性物质（以COD计算）效率达94.34%，除去磷的效率达76.57%。

中水处理站进、出水总氮检测结果可以看出结果有问题，不能做出评价。分析出现错误的原因可能是：

水样消解加入的碱性过硫酸钾溶液量太少或水样使用量取多，导致水样中氮没有完全转化为硝酸盐。

8.2质量保证措施：

采样方法，样品处理和保存，实验室供应（如蒸馏水、实验用气、供电、通风等）,仪器 15 设备的选择和校准,器皿的选择、洗涤和校准，试剂的选择、提纯和检验,基准物的选择,标准溶液的配制和标定，分析方法的选定，分析测量程序均按照国家标准或环境标准实施。

数据记录、处理采用可靠方法。结果多次校订，消除结果错误带来的评价不准确。

8.3计划实施时间：

5月5日：资料收集、方案制定与任务分配；

5月6日：中水处理站了解中水回用系统机构，采样点确定； 5月6日：实验药品准备与配制（除现配现用的药品）； 5月7日：水样采集与监测；

5月8日：检测结果整理、中水处理站进出口水质评价，撰写监测评价书。

参考文献

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附 录

1.中水回用系统进水口取水

2.中水回用系统出水口取水

第二篇：发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用(精)

全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会 发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用 张绮王克波赵人王争

南京２１００２９南京医科大学公共卫生学院

摘要：发光细菌毒性试验已广泛应用于水质监测中。本文主要概述了发光细菌的分类、发光细菌毒性检测原理及其在工业废水、城市污水及河流等水域的水质综合毒性评价的应用。

关键词：发光细菌；水质监测；综述

随着工农业的不断发展，当今世界面临日益严重的环境污染问题，水污染尤为突出。水中污染物种类繁多，性质复杂，且污染物之间可发生协同、相加或拮抗等复杂作用。传统的水质检测虽能准确定量分析污染物中主要成分及含量，但不能检测水中各种污染物对环境和生物产生的综合毒性。发光细菌毒性试验因其独特的生理特性，与现代光电检测手段结合具快速、灵敏、简便等特点，检测结果可反映水中污染物的综合毒性，比测定单一组分污染物更具实际意义。１．发光细菌的分类及其生物毒性检测用商品种类

发光细菌属革兰氏阴性、兼性厌氧菌，大小约０．４一１．Ｏ×１．０—２．５ｕｍ。无孢子、荚膜，有端生鞭毛一根或数根，最适温度２０—３０＂Ｃ，ｐＨ６～９，ＮａＣｌ浓度３％，０．３％的甘油对发光反应有利。其分类目前普遍采用美国学者ＥＢａｕｍａｎｎ的方法【ｌ’２１，见表１。

表１发光细菌的分类

大多用明亮发光杆菌、鲳鱼发光杆菌及费氏弧菌作有毒有害物急性毒性效应的检测。检测时测试体系中须加入较高浓度的盐以维持其正常生存，大量氯离子的存在会在相当程度上影响样品中一些污染物的生物可利用性和毒性顺序。由我国学者分离的淡水型发光青海弧菌则具有较广泛的酸碱和温度适应性，可在蒸馏水中正常发光，使测试体系得到简化【引。

发光菌除用于急性毒性效应检测外，其发光菌经过处理以后的暗变异株在接触致突变物后可恢复一定的发光能力，通常可使暗变株的发光强度增加１０００倍左右。因此利用暗变异株恢复发光的现象可对各种遗传毒物进行筛选、检测。这类菌株有鲳鱼发光杆菌暗变株ＳＤ．１８、ＲＣ．９３，费氏弧菌暗变异株Ｐｆ－１３，明亮发光菌暗变种＂１＂９１７１等。

目前发光细菌毒性检测有３种方法，即发光菌新鲜培养物测定、发光菌冷冻干燥制剂测定及发光菌与海藻混合测定的方法。新鲜培养的发光细菌其培养条件很难限制在同一水平上，这会造成发光细菌对１３０

全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会

有毒物质的敏感性不一致，导致重复性差且操作麻烦。而发光细菌冷冻干燥制剂可以避免以上问题，将其贮存于冰箱中，使用相对方便。２．发光细菌毒性试验检测原理

发光细菌的发光现象是其正常的代谢活动，不同种类的发光机理是相同的，其主要的过程概括如下：ＲＣＨＯ＋０２＋ＦＭＮＨ扣卫＞ＲＣＯＯＨ＋ＦＭＮ＋Ｈ２０＋ｈｖ（４９０ｎｍ）

茵细胞内由黄素单核苷酸（ＦＭＮＨ２）、长链脂肪醛（ＲＣＨＯ）及氧（０２）参与。在细菌荧光素酶（Ｅ）的催化下发生生化反应，产生波长多为４６５～４９０ｎｍ的磷光。外界条件和培养基成分以及温度、ｐＨ、氧浓度变化会影响细菌的发光。温度影响细胞内化学反应速率、生物吸收基质过程和发光细菌的生理状态。温度越高，抑制浓度越低，即响应越灵敏１４】。ｐＨ则影响发光细菌的代谢或造成化学品的水解，随着ｐＨ的变化，化学品毒性表现出增加或减弱［５１。有毒的化学物质、重金属离子、抗生素、化学治疗剂、农药等污染物质也会影响细菌发光。这类物质抑制细菌发光的途经有两个：一是直接抑制参与发光反应的酶类活性；另一方面是抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程。因此能够干扰或破坏发光细菌呼吸、生长、新陈代谢等生理过程的任何有毒物质都可以根据发光程度的变化来测定。

发光细菌法【６】就是利用灵敏的光电测量系统测定毒物对发光细菌发光强度的影响。毒物的毒性可以用ＥＣ５０表示，即发光细菌发光强度降低５０％时毒物的浓度。一般情况下有毒物质和与发光菌接触时，发光强度立即发生变化。并随着毒物浓度的增加而发光减弱，即发光抑制。因而可以根据发光强度判断毒物毒性大小。

３．发光细菌水质检测方法 ３．１样品采集及处理

自美国上世纪７０年代首次分离到ＰｈｏｔａｂａｃｔｅｒｉｕｍＰｈｓｐｈｏｒｅｕｍ细菌并用于污水监测获得成功以来，３０多年中，成功用于多种类型污染物监测【７１尤其是各类水质毒性检测。如工业废水、城市污水、河流海洋水质等。试验中样品的采集及处理有直接采样和半渗膜被动式采样（ＳＰＭ）两种方式。直接采样一般用四氟乙烯衬垫的塑料瓶采样。采集一定水样量后，根据需要对水样进行预处理。如要可用ＮａＯＨ和ＨＣＩ调节水样ｐＨ值在６．０～８．０之间，实验前将样品稀成不同浓度直接测定。半渗膜被动式采样是用ＳＰＭＤ采样器采样。将ＳＰＭＤ采样器固定于水面下ｌｍ处，暴露２８天，收回ＳＰＭＤ样品，将水样经０．４５ｕｍ膜后，用二氯甲烷萃取，净化和浓缩后用高纯氮气干后用ＤＭＳＯ溶解，低温保存样品。这种采样技术可以富集到水样中的

有机有毒污染物，从而评价样品中有毒有机物含量及急性毒性的变化规律【８１。

３．２发光检测仪器

２０世纪８０年代初美国Ｂｅｃｋｍａｎ公司推出功能完备的生物毒性测试仪，它具有应用范围广，灵敏度高，相关性好，反应速度快等优点，在世界范围内广泛使用。我国于１９９５年将发光细菌法列为环境检测的标准方法（ＧＢ／Ｔ１５４４１．１９９５），使用国产的ＤＸＹ．２型生物毒性测试仪，或ＳＨＧ．１型生物发光测量仪。美国ＭＩＣＲＯＢＩＣＳＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ也推出Ｍｉｃｒｏｔｏｘ２０５５型毒物分析系统１９１。为克服细菌发光强度本底差异较大、检测期间发光自然变化幅度宽、操作繁琐、重现性不佳、误差较大等不足，我国学者也研究细菌发光传感器进行污染物急性毒性快速检测，将细胞固定化技术、生物传感器技术与发光细菌毒性测试技术有机结合起来，改善了细菌发光的稳定性，实现急性毒性的快速检测ｌｌｏ】。３．３发光细菌毒性试验结果表达

往往以相对发光率、相对抑光率、ＥＣ如表达发光细菌毒性试验结果。相对发光率＝样品光强度，对照光强度×１００％，相对抑光率＝（对照光强度．样品光强度）／对照光强度×１００％。ＥＣｓｏ为相对抑光率达到５０％的样品浓度（或稀释度）。根据测定结果判定毒性待测样品急性毒性的大小。其判定标准有三种方式：①有毒，无毒；②百分数等级；③对数等级。国内多数采用百分数等级，百分数等级可根据相对发光率的大小及等当ＨｇＣｌ２溶液浓度来判定待测样品的毒性大小，也可以用ＥＣｓｏ判定待测样品的毒性大小，具体见表２、表３。１３１

全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会 表２发光细菌试验相对发光率毒性百分数等级 等级 Ｉ ＩＩ ＩＩＩ

ＩＶ

Ｖ相对发光率（Ｌ）（％）Ｌ＞７０等当的ＨｇＣｌ２溶液浓度Ｃ（ｍｇ／Ｌ）ＣＨｇ＜０．０７毒性级别低毒中毒重毒高毒剧毒５ｔＹ＜Ｌ≤７０３０＜Ｌ≤５００＜Ｌ≤３００．０７、＜ＣＨｇ＜０．０９０．０９≤ＣＨｇ＜０．１２０．１２≤ＣＨｇ＜０．１６ＣＨｇ＞０．１６Ｌ卸 表３发光细菌试验ＥＣ５０或ＬＣｓｏ毒性百分数等级 ４．发光细菌毒性在水质监测及评价中的具体运用 ４．１工业废水综合毒性测定

工业废水是导致水污染问题不断加重的原因，能否达标排发，涉及到待测项目多、成本高、工作量大，尤其难以判定废水的毒性大小，更无法判定多种有毒化合物的相互影响。生物方法的检测可以弥补这些缺憾，国内有多项研究运用发光细菌毒性评价水质毒性。于晓丽等用此评价了某油田不达标采油污水的综合毒性１１１）ｅ张秀君等运用发光细菌法对辽宁１６个污染源废水样的毒性进行测定，指出从行业分布来看，毒性最强为化纤业、化工业、黑色金属冶炼业，其次是煤炭开采炼焦煤制品业，毒性最低的是医药、造纸、食品加工业ｎ２ｌ。董玉瑛等应用发光细菌法对啤酒、酿造、印染、化纤、造纸废水进行的生物毒性测定其结果表明，不同行业废水的生物毒性与其ＴＯＣ值之间不存在相关性，将二者相结合，能正确反映废水的实际毒性大小【ｌ３１。周秀艳利用发光菌、斑马鱼和蚕豆根尖微核对辽宁典型２１家工业污染废水进行的急性生物毒性其结果发现发光菌相对抑光率的毒性等级在中等以上的占８１％，其中高毒及剧毒占６１．９％，工业废水发光菌相对抑光率的毒性等级略高于相应鱼类ＬＣ５０值的毒性等级，建议在对污染源废水生物毒性实行监测时，应该首选对污染物反应敏感的发光菌进行毒性试验【１４１。

运用发光细菌毒性试验对工业废水水质毒性进行评价，一般能较好地反映水质状况，并可根据结果评估其废水安全排放的可靠性。杨碧波等检测了以沈阳冶炼厂为代表的冶金类行业废水，结果显示废水毒性呈剧毒水平，处理后废水尽管符合废水排放标准但仍表现为低毒水平【ｌ５１。另外发光细菌法是一种定量表征污染水体毒性的生物监测方法，它能对环境的总体作出反应，有助于对水环境进行综合评价。乔鸿泽等用发光细菌测定法估算了两城市污水对河道水体污染的分担率，评价了工厂排放废水的毒性，并据此确定污染源监督管理中应优先治理的工厂（车间）废水Ｉｌ们。

发光细菌进行工业废水毒性试验时也存在局限性。发光菌主要受废水中有机或无机毒物影响，使其正常新陈代谢发生改变，从而使相对发光量发生变化的过程，当水中存在某些无毒有机物，且未及时分解时，在短时间，反而可成为该细菌生长、繁殖的营养源，从而刺激其相对发光度的提高。因此，在食品加工、酿造等行业废水监测中，不宜采用该方法。

４．２河流海域等水质监测

用氯化汞作为参比毒物用发光菌试验对鞍山市三条河流的水质及底泥进行毒性分析其结果符合实际水质状况。从而据此可以判定河流水质及底泥能否作为灌溉的依据【１７１。而杜惠文等用发光细菌的急性毒性试验对洹河断面水质同监测发现细菌发光检测结果与理化检测结果并不完全一致，但根据发光菌的检测结果分析造成洹河毒性增大的因素之一是工业废水的排入【ｌ引。１３２ 全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会

海域水质也可以用发光菌毒性试验进行检测，吴伟等用发光菌检测渔业水域污染物的急性毒性。张秀君等人研究了如何选择污染水样的稀释液以避免海水非污染组分对菌体初始发光度的影响，确保测定精度【１９１。郑天凌等采用发光细菌测试毒性法（ＭＩＣＲＯＴＯＸ）检测了取自厦门大学海滨浴场、厦门大学医院排污口、厦门大学东大沟排污口的海水水样毒性并比较了四种稀释液：３０％ｏＮａＣＩ溶液、陈海水、人工海水Ｉ及人工海水ＩＩ对发光菌发光强度的影响和在不同盐度条件下发光强度的变化。结果表明前两个站住水体无毒性反应，后一个站住水体存在毒性物质：除人工海水ｌＩ对发光菌有较强的抑制作用外，其它两种稀释液的活化作用与常用稀释液（３０％０Ｎａｃｌ溶液）相近；当盐度变化在２５‰～４０％ｏ范围时，对发光强度影响极小㈤。

４．３城市污水毒性评价

城市污水一般是由工业废水和生活污水组成的混合污水，污染成分复杂。但由于技术和经济的原因，目前主要以处理后的化学需氧量、生化需氧量、悬浮固体等常规指标的达标为目的，很少对城市污水处理过程中的有害物质进行监测，也没有相应的国家标准，对出厂水质进行控制。运用发光细菌急性毒性可评价城市污水的综合毒性。黄满红等运用发光细菌急性毒性测试比较了上海市几个污水厂的毒性，分析了发光抑菌率与污水中有机物的关系，结果发现发光抑菌率随着ｌｎ（ＣＯＤｎｂ／（ｍｇ．Ｌ－１））增大而增大，说明水中难降解物质对发光菌可能存在发光抑菌作用【２１１。

４．４水中污染物质状态对细菌发光毒性的影响

水中污染物的状态及一些因素可影响某些物质的生物毒性。有研究表明五氯酚钠对发光细菌的ＥＣｓｏ值随着ｐＨ值和硬度的增加而增加：而实验中常规有机污染物的存在对五氯酚钠毒性测定的结果影响较小

【２２１。化学物质的结构不同对发光菌的急性毒性也不同，胺类化合物质对发光菌的毒性随ｐＨ的升高而增大，酚类和茉甲酸类的毒性随ｐＨ的升高而减少，这与不同ｐＨ下有机酸碱的电离程度有关。分析显示有机酸碱的生物毒性主要是由分子态引起，但离子态作用不可忽略。４．５发光细菌毒性试验与遗传毒性评价

细菌发光急性毒性评价与遗传毒性评价结合可较全面反应水质的情况。应用细菌发光试验及Ａｍｅｓ试验对比研究了武汉市易家墩、黄孝河污灌区工业废水的急性毒性及致突变性，同时应用色质谱（ＧＣ／ＭＳ）分离鉴定技术测定了工业废水中有机污染物的化学组成。结果表明，罗家渠废水的急性毒性、致突变活性在所研究废水中最为严重：废水中急性毒性物质主要包括苯酚、苯甲酸苯甲酯等。致突变致癌物包括联苯、萘等１２３１。

另外利用发光细菌的暗变种，也可直接检测化学品的基因毒性，此技术称为“Ｍｕｔａｔｏｒ＇’。Ｋｗａｎ等人将Ｍｕｔａｔｏｒ结合到一组生态毒性筛选试验中，在加拿大的Ｙａｍｅｓｋａ河流盆地监测河水和沉积物的基因毒性，Ｈｏｋｅ等人在美国大湖地区运用了Ｍｉｃｒｏｔｏｘ对沉积物和间隙水中的基因毒性进行检测，我国学者顾宗濂等人也从明亮发光杆菌Ｔ３小种分离到了自发的暗变种Ｔ９１７１菌株，并以此检测了化学品致突变效应。张秀君等用其检测十种化合物，其中六种化合物呈致突变阳性，二种化合物呈可疑阳性，二种化合物呈阴性反映，该方法比传统的Ａｌｎｅｓ试验检测化合物的灵敏度高１２４１。赵华清等人用发光细菌法检测苯酚、溴化乙锭、甲基磺酸乙酯的基因毒性显示为阳性、环磷酰胺、缩水甘油、硫酸二乙酯、黄曲霉素ＢＩ、硫酸锌、重铬酸钾为可疑阳性。对１４种环境样品（某污水处理厂出厂黄浦江支流的检测显示）检测结果显示检出２个环境样品，７个可疑样品，激活系统Ｓ９能极大地提高试验的灵敏度１２５１。实验显示发光细菌法的灵敏度与Ａｍｅｓ试验相似。

发光细菌法对某些具有基因毒性的化合物的检测不敏感，这主要与它的作用机理有关，发光细菌法是利用发光细菌暗变种在基因毒物的诱导下回复突变，恢复正常发光，移码剂主要使发光细菌暗变种的发光系统阻遏物结合操纵子位置的能力发生改变。ＤＮＡ插入剂以共价键与发光细菌的ＤＮＡ结合，产生移码突变，ＤＮＡ损伤剂启动“ＳＯＳ功能”，使发光系统阻遏物失物。因而，该方法一般仅对ＤＮＡ损伤剂、ＤＮＡ插入剂、ＤＮＡ合成抑制剂及引起碱基替代、移码的直接诱变剂敏感，对基因毒物的筛选具有特异性。

５．发光细菌毒性试验存在的问题及运用前景１３３

全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会

目前发光细菌毒性测试方法中仍存在结果重现性不高，报告结果不统一，部分急性毒性评价使用剧毒物质氯化汞作为毒性参照物容易造成环境污染等不足，且发光细菌法对某些具有基因毒性的化合物的检测不敏感等。这一类问题均需加以解决。如已有人通过一系列实验筛选出了ｚｌｌ２＋作为毒性参照物代替传统方法中的剧毒物质ＨｇＣｌ２，采用ｚｎ２＋作为参照物不仅可以方便地表征不同化学物质的毒性，而且可以直观地表征复杂环境样品的毒性，是一种简便可行的方法【矧。

发光细菌毒性试验具快速、灵敏、简便和经济，并较好地反映综合毒性，具有广阔的运用前景。今后可进一步开展与人体健康关系等研究，发展对内分泌、免疫及遗传毒性等毒性进行评价的方法，通过生物传感器开展在线监测等。参考文献

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２０００．（１１）：４０－４２发光细菌的急性毒性试验在洹河断面水质监测中的应用［Ｊ］河南化工，［１９］张秀君：发光茵监测海水毒性实验研究［Ｊ］沈阳教育学院学报１９９９。１（１）：１１１—１１２

［２０］郑天凌：王斐：陈进才等发光细菌监测沿岸水质应用研究［Ｌ）］，福建环境，１９９７．１４（１）：９—１１［２１］黄满红李咏梅顾国维生物测试方法在城市污水毒性评价中的应用［Ｊ］同济大学学报（自然科学版），２００５，３３（１１）：１４８９—１４９３１３４

全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会

［２２］．施玮：牛军峰：余刚水中五氯酚钠对发光细菌毒性测定的影响因素［Ｊ］环境科学，２００４。２５（３）：４４－４７

［２３］黄正：王家玲细菌发光试验及Ａｍｅｓ试验检测工业废水急性毒性及致突变性的研究［Ｊ］，环境科学，１９９４，１５（６）：７０－７１ ［２４］张秀君韩桂春发光细菌暗变种对化合物致突变效应的检测［Ｊ］沈阳师范学院学报（自然科学版）１９９９，（４），５８—６２

［２５］赵华清殷浩文陈晓倩发光细菌法检测环境污染中的基因毒性［Ｊ］应用与环境生物学报，２０００，６（６）：５７７－５８０

［２６］王丽莎：魏东斌：胡洪营发光细菌毒性测试条件的优化与毒性参照物的应用［Ｊ］：环境科学研究，２００４，１７（４）：６１－６６１３５