第一篇：中药药材真伪鉴定中半显微性状鉴定临床应用分析.
中药药材真伪鉴定中半显微性状鉴定临床应用分析
摘 要：目的 探讨和研究在中药药材真伪鉴定中半显微性状鉴定的作用。方法 在半显微性状鉴定法的仪器下观察中药药材，对药材的分辨率、观察的清晰度进行统计，以不同仪器、不同底色、不同的光线强度等差别作为主要参考因素，进行半显微性状鉴别的筛选和分析。结果 放大镜法方便、广泛但是存在观察效果不清晰等缺点，并且存在难记录的弊端；体视显微镜法观察最为清晰；扫描仪介于两者之间。结论 半显微性状鉴定法作为简单、易行的中药材真伪鉴定方法，是对传统鉴定方法的一个很好补充。
关键词：半显微性状鉴定；中药材鉴定；放大镜；体视显微镜；扫描仪
中药药材真伪鉴定中半显微性状鉴定临床应用分析 龚莲
（桃江县中医院 湖南 桃江 413400）
【摘要】目的 探讨和研究在中药药材真伪鉴定中半显微性状鉴定的作用。方法 在半显微性状鉴定法的仪器下观察中药药材，对药材的分辨率、观察的清晰度进行统计，以不同仪器、不同底色、不同的光线强度等差别作为主要参考因素，进行半显微性状鉴别的筛选和分析。结果 放大镜法方便、广泛但是存在观察效果不清晰等缺点，并且存在难记录的弊端；体视显微镜法观察最为清晰；扫描仪介于两者之间。结论 半显微性状鉴定法作为简单、易行的中药材真伪鉴定方法，是对传统鉴定方法的一个很好补充。
【关键词】半显微性状鉴定；中药材鉴定；放大镜；体视显微镜；扫描仪 【Abstract 】 objective to study and research in Chinese medicine identification of medicinal authenticity and a half were the role of microscopic identification.Methods in half a microscopic characters methods produced under the observation of the instrument of traditional Chinese medicine medicinal herbs, to the resolution of the medicinal materials, the clarity of the observation statistics, with different instruments, different impression, different light strength as the main factor influencing the difference, the microstructure of half the microscopical identification screening and analysis.Results a magnifying glass method convenient, widely but there observing effect not clear shortcomings, and to the shortcomings of the existing records;Stered microscope observation method most clear.Scanners are something in between.Conclusion half a microscopic characters methods produced as a simple and feasible method of Chinese medicinal materials authenticity identification, is to the traditional identification methods of a very good added.【Key words 】 half a microscopic characters appraisal;Chinese herbal medicine appraisal;A magnifying glass;Stered microscope;scanner
半显微性状鉴定是近年来应用越来越广泛的一种介于性状和显微鉴别方法之间的药材鉴定方法，在中药材鉴定上已经越来越被接受。半显微性状鉴定利用放大镜、扫描仪、体视显微镜等仪器，对药物的性状、外观等细节进行逐层观察，达到药物鉴别的目的[1]。笔者对这种方法进行某些药物鉴定做出了分析，现报道如下。1 材料和方法
1.1 鉴定材料 半显微性状鉴定技术在很多中药材上都能够运用，比如果实种子类、中药材切片以及花叶类药材等，本文选取四种药材进行对比和分析：A组选用鹤虱和蛇床子，此两种药材的外形观察上从肉眼难以分别，鹤虱和蛇床子的边缘都存在羽边，容易导致在分类时混淆；B组选用虞美人种子和罂粟进行对比，此两种药材肉眼观察外形时会发现两者都呈现肾形，而且表面纹路及加工后的表面极为相像。
1.2 方法 分别利用放大镜、扫描仪、体视显微镜对两组药材进行鉴别观察，并对观察结果进行统计对比，探讨三种不同观察方式的优缺点。2 结果
放大镜法方便、广泛但是存在观察效果不清晰等缺点，并且存在难记录的弊端；体视显微镜法观察最为清晰；扫描仪介于两者之间。在对两组药材的观察中，放大镜能够鉴定出A组两种药材的不同点，但是对B组两种药材的观察存在一定的障碍，不能准确分辨；扫描仪对于两组药材均能够进行鉴别，但是对B组的观察中存在一定的不确定性；体视显微镜能够清晰的鉴别两组药材，并能够清晰的指出镜下药材的具体区别和不同。具体差别见表1。表1 三种不同方法对两组药材鉴别的差别对比 鉴定方法
A组（鹤虱、蛇床子）B组（虞美人种子、罂粟）放大镜
能够对两者的表面纹路及边缘进行观察，可以通过纹路的不同和羽边的形状的对比分辨
由于两者的形状和低倍数放大之后表面的纹路十分相近，不能够准确鉴别 扫描仪
能够准确鉴别两者表面的区别
能够鉴别，但是对于一些细节地方受到扫描图片分辨率的影响 体视显微镜
能够清晰准确的观察到两者的区别，对于表面的细微差距也能够准确的观察到 能够清晰准确的观察到两者的区别，对于表面的细微差距也能够准确的观察到 3 讨论
3.1 三种半显微性状鉴定方法的特点
放大镜、扫描仪和体视显微镜的适用性和准确性均有不同，各擅胜场。放大镜具有携带方便，随时随地都能够进行药物鉴别的优点，而且费用低廉，即使在较为简陋的环境中也能够药材的鉴定，但是由于受到自身分辨率的限制，对于一些在低倍率放大后依然存在极相似点的药物并不能够做出准确而迅速的鉴别，所以在一些精细药物的鉴定上，存在着相当的弊端；扫描仪法的器材也较为常见，一般用于文件扫描处理的扫描仪即可以胜任，所以对于设备的要求也不算苛刻，而且扫描仪法鉴定的同时也可以做到对药材扫描图片的保存，用于交流、讨论、资料保存都较为方便，但是扫描仪也同样存在对一些细节的鉴别上不能够做到准确、精细的程度，扫描图片也受到二维视物的限制，不能够对一些精细的差异做出准确判断；体视显微镜则是三种方法之中鉴别最为准确的，更高的分辨率，也更为准确的细节观察，都让体视显微镜法能够准确的对药物之间细微的差距做出观察和判断。从我们的观察当中，可以明显感觉到许多细微的表面纹理在扫描仪图片上并不能够清晰的观察到，而在体视显微镜下的观察则可以准确的看到这些差异，如B组两种药材的观察中，体视显微镜下能够观察到罂粟在表面假种皮下的黑色种皮，对于这种带有
假种皮的种子类药材而言，由于扫描图片的二维特性，不能够如体视显微镜这般具有观测的立体感。但是体视显微镜也存在一定的缺点，体视显微镜的价格昂贵，不如放大镜那样普及，也不如扫描仪那样具有多方面的用途，或者具有进行药材的扫描图片保存等功能。所以我们认为，在半显微性状鉴定方法的选择上，应当根据实地条件和具体药物所需求的精细程度选择适当的检测方法，做到更科学、更合理的方法选择。3.2 半显微性状鉴定与其他方法的对比
传统的中药材鉴定中，性状鉴别、显微鉴别较为常用，适用面也较广。性状鉴别能够对药材形状、大小、颜色、表皮、质地、断面、气味等方面的特点进行鉴别，但是对于某些药材上的细微特点如光滑或粗糙、有无绒毛、有无褶皱等不能做到准确的判断。所以性状鉴别通常仍需要一些仪器进行进一步的分辨或辅助[2~3]。
显微鉴定法是利用现代显微技术对中药材进行微观的观察和分析，对内部构造进行研究和鉴别的一种方法。这要求鉴定者必须熟练的掌握各种药材的解剖学知识，对动、植物的内部构造具有一定深度的了解，并掌握基本的制片技术[4~5]。由于这种方法能够很好的对药材的成分、构造等微观特点进行对比观察，所以对于一些即使出现破碎、不完整的药材也能够很好的进行鉴别。但是由于这种方法对鉴定人员的要求和对药物分析程度上要求较高，所以在应用上存在较大的局限性。
半显微性状鉴定法则是利用现代的一些观测仪器，对药物的基本性状进行进一步的观察、分析进行判断和鉴别。由于不需要对药材进行复杂的解剖和成分研究，所以在对于鉴别人员的要求上，并不像显微鉴定那样高。而相对于性状鉴别而言也能够进一步的对药物基础的性状、大小、边缘、表面特征等细节做到准确的观察。这种方法可以说结合了性状鉴别和显微鉴别的优点，但是由于从本质上而言，它仍是对于药物的基础性状进行观察从而鉴别，所以这种方法仍归类于性状鉴定的范畴。但是此种方法由于用于药材鉴定的时间较短，尚有许多不足和存在改进的地方。综上所述，半显微性状鉴定法作为简单、易行的中药材真伪鉴定方法，是对传统鉴定方法的一个很好补充。参考文献：
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[2]许亮，谷丽艳，赵丹玉，等。基于ITS序列的植物类中药材鉴定研究及展望[J]。中华中医药学刊，2010,28（4）：737。
[3]张贵君，金哲能，潘艳丽，等。常用中药显微鉴定[M]。北京：化学工业出版社，2005:1~46。
[4]肖树雄，林伟忠。中药现代检验中计算机技术的应用与发展前景[J]。数理医药学杂志，2002,15（4）：372~374。
[5]曾凡龙，郭鄂乎。不同显微测量方法的比较分析[J]。医学动物防治，2003,19（9）：527~529。
第二篇：执业药师中药的药材性状鉴定总结
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执业药师中药的药材性状鉴定总结
在执业中药师考试中，第五章《中药质量标准和鉴定》所占分值为1~3分。考题多在最佳选择题中出现，也有可能以多选题的形式考查。医疗卫生考试网现在对其中药材性状的鉴定的相关内容进行整理总结，希望对考生有所帮助。
1.药材性状鉴定(十大内容)(1)形状： 党参——狮子头 防风——蚯蚓头 海马——马头蛇尾瓦楞身
(2)大小：药材的长短、粗细和厚度。(3)色泽：
自然光下—药材的颜色、光泽度
药材的颜色与其成分有关，色泽通常能够反映药材的质量，是衡量药材质量好坏的重要指标之一。
黄芩由黄变绿——质量下降 丹参—红 紫草—紫 玄参—黑 黄连—断面红黄色(4)表面特征： 白芥子——表面光滑 紫苏子——表面有网状纹理 海桐皮——钉刺
合欢皮——皮孔棕红色，椭圆形
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辛夷——苞片外密被长茸毛(5)质地：
以薄壁组织为主，结构较疏松的药材一般较脆或较松泡——南沙参、生晒参 富含淀粉的显粉性—山药、半夏 含纤维的韧性强—桑白皮、葛根 含糖、粘液的黏性大—黄精、地黄
富含淀粉、多糖成分的药材加热后常质地坚实、半透明、角质样—红参、延胡索、天麻(6)断面：
菊花心——黄芪、甘草、白芍 车轮纹——防己、青风藤、大血藤 朱砂点——茅苍术
星点(髓部异型维管束)——大黄
筋脉点(同心环点状异型维管束)——牛膝与川牛膝 云锦状花纹(皮部异型维管束)——何首乌 罗盘纹(同心环型异型维管束)——商陆(7)气：
阿魏——强烈的蒜样臭气 檀香、麝香——特异芳香气
伞形科、唇形科——含挥发油、有特殊香气。如：白芷、当归、薄荷、广藿香、紫苏 花类药材具蜜腺，含挥发油，香气宜人
木类中药大多有树脂及挥发油—特殊香气。如：沉香、檀香、降香
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牡丹皮、徐长卿——含牡丹酚，有特殊香气
香加皮——含甲氧基水杨醛等成分，具奶油话梅样香气(8)味：
乌梅、木瓜、山楂——味极酸(有机酸)甘草含甘草甜素、党参含糖——味甜 黄连、黄柏含小檗碱——味苦 干姜含姜辣素——味辣 海藻含钾盐——味咸 地榆、五倍子含鞣质——味涩(9)水试：
西红花——水浸后，水液染成金黄色 秦皮——浸出液在日光下显碧蓝色荧光 苏木——投热水中，水显鲜艳的桃红色
葶苈子、车前子——加水浸泡，种子变黏滑，体积膨胀 小通草——遇水表面显黏性
熊胆——投清水杯中，即在水面旋转，呈黄色线状下沉，短时间内不扩散 哈蟆油——温水浸泡，膨胀度不低于55(10)火试：
降香——微有香气，点燃则香气浓烈，有油状物流出，灰烬白色 海金沙——点燃，产生爆鸣声及闪光 青黛——火烧产生紫红色烟雾
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以上便是对药材性状的鉴定的相关内容进行的总结，华图医疗卫生考试网将会继续推出其他考点的讲解，敬请关注。
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第三篇：rDNA ITS 序列分析在植物种属鉴定中的应用与研究
rDNA ITS序列分析在植物种属鉴定中的应用和研究
黄
凤
玲
遵
义 医 学 院 珠 海 校 区（广东珠海，519041）
摘要：rDNA ITS序列分析方法用于植物系统种属鉴定与进化研究有较高的可靠性。由于高等植物rRNA基因上的18SrDNA、ITS及5SrDNA片段常具有变异位点[1]，通过DNA序列测定核基因组的rDNA ITS 序列，根据测序结果进行比较就可以鉴定植物的种属关系，对于植物的鉴定有非常重要的意义和作用。
关键词：rDNA ITS序列；植物；种属鉴定
分子生物学研究发现，生物种类所依赖的资源—“物种”的多样性是由于其基因多态性的结果，而基因多态性又直接体现在DNA分子水平上的检测。21世纪以来，现代分子生物学技术在植物的研究取得突破性进展，一些分类地位不明确、亲缘关系不清楚的物种通过该技术便得到验证，为不同植物的分类、鉴定等提供了更丰富、更可靠的手段。其中，核糖体基因（rDNA）的内转录间隔区（ITS）在植物的种、属鉴定的研究得到广泛的应用。rRNA基因（rDNA）的基本结构及ITS区
高等植物中有4种rRNA,即 5.8SrRNA、18SrRNA、28SrRNA和5SrRNA，前三者的基因组成一个转录元，是高度重复的串联序列单位。近年来，随着分子生物学技术在生物系统研究等领域的广泛应用，以PCR为基础的各种分子生物学技术在植物鉴定方面的应用报道日益增多。rRNA基因（rDNA）是目前分子系统研究中普遍采用的分子标记基因之一，它是一种中等重复并有转录活性的家族。核糖体RNA及其相邻的间隔区合称为rDNA
[2]。
rDNA中存在着广泛的保守区域，可以用作引物的结合位点，它们的不同区域可反映物种不同的进化水平。真核细胞rDNA有几十甚至数千个拷贝，其中2个内部转录间隔区ITS-
1、ITS-2将18S、5.8S、28S分隔开；不同的选择压力作用于rDNA区域，造成单个重复单位序列不同的保守性。每一部分都可以用作特殊的生物系统分析。大、小亚基序列高度保守，已被用来分析物种古化的进化分支以及跨越古生代和中生代的进化时间等问题。rDNA基因簇的最小基因5.8S由于序列太短，几乎不能提供强有力的系统信息。而ITS序列是rDNA中基因进化速度最快的区域，常用于属内中间比较或种内群体比较，因其两侧的编码区具有高度保守性，便于设计通用引物。利用植物核糖体基因的内转录间隔区既具保守性，又在科、属、种水平上均有特异性序列的特性，对ITS序列进行PCR扩增、测序以及序列分析后用于鉴定植物的方法越来越广泛的应用。rRNA基因（rDNA）ITS序列分析在中药材鉴定中的应用
马小军等用银染色法测定了4个山参的ITS1和2个山参的ITS2.得出人参属的ITS1有220—221个碱基，ITS2有222—224个碱基，其中ITS1在人参种内非常稳定，4个不同地区的野山参样品在ITS1转录间隔区的序列与GeneBank中栽培参无任何碱基发生变异。但ITS2有部分变异。说明ITS2的遗传信息有助于人参种质资源分析，能为栽培参起源提供一定证据。蔡金娜等为探讨不同分布区的蛇床的ITS序列变异与其地理分布和化学成分的相关性，设计两对引物进行PCR扩增，产物纯化后用银染法或ABI310测序，得到核糖体DNA中的ITS序列及5.8SrDNA部分序列。18S和28SrDNA部分序列,共约700bp，5个地点样品的ITS-1及ITS-2的序列大小分别为210—217bp和219—224bp，ITS-1碱基序列的遗传距离0.00—1.93％，ITS-2碱基序列的遗传距离0.46—2.34％ , ITS-1较为保守。结果表明ITS2序列的变异与中国产蛇床的纬度分布有关，而与蛇床化学型的关系尚需作进一步研究。另外，近几年国内学者还对阳春砂、黄草石斛、水母雪莲及其混淆品等rDNA ITS 序列进行测序分析。结果表明
[5]
[6]
[7]
[4][3] rRNA基因（rDNA）ITS序列分析在植物鉴定中的应用
ITS 序列分析不仅可以鉴定药用植物种类，还可以为寻找新的植物来源提供分子证据。杨佩文等应用真菌核糖体基因ITS区段通用引物对十字花科蔬菜根肿病菌rDNA进行PCR扩增，其实验结果对有效追踪根肿病菌在田间的发生动态监测和预测预报提供了重要信息和手段。葛芸英等用16S和23SrDNA之间的ITS 序列的通用引物对小麦细菌性苗枯菌进行研究，并发现对多种植物病原棒形杆菌的ITS 序列进行比较研究还具有一定的分类意义。
[9][8]4 rRNA基因（rDNA）ITS序列分析在植物和中药材鉴定中的应用前景
DNA测序技术(DNA Sequencing technology)使DNA分子鉴定技术取得了突破性进展，是中药材和植物鉴定的重要方法，ITS(核糖体基因内转录间隔区)是目前用于DNA测序的重要基因，因为高等植物rRNA基因上的18SrDNA、ITS及5SrDNA片段常具有变异位点，可成为一种很好的分子标记，不仅可用于植物品种的鉴定以及与其混伪品的鉴别，还在植物或药材的地道性、植物生态多样性及寻找新植物来源等研究领域具有广泛的应用前景。同时还可以应用于各种植物病害的诊断。另外，一些重要植物的系统研究中含有大量可供参考的信息，如五味子科的ITS序列
[10]、报春花属的ITS序列
[11]
等都可在GeneBank中找到。
参考文献
[1]陈随清，王利丽，等.rRNA基因序列分析在中药品种鉴定中的应用及研究进展[J].河南中医学院学报，2003，18（105）.[2]马荣群，黄粤，岳文辉，等.核糖体rDNA ITS区在植物病害诊断中的应用[J].内蒙古农业科技，2006（6）：19-20.[3]马小军，王小全，肖培根，等.野山参与栽培参rDNA内转录间隔区序列比较[J].中国中药杂志，2000，25（4）：206.[4]蔡金娜，周开亚，徐珞珊，等.中国不同地区蛇床的rDNA ITS序列分析[J].药学学报，2000，35（1）：56.[5]潘华新，黄丰，王培训，等.阳春砂与绿壳砂的ITS1序列鉴别[J].中药材，2001，24（7）:481.[6]徐红，李小波，丁小余，等.中药黄草石斛rDNA ITS序列分析[J].药学学报，2001，36（10）：777.[7]刘健全，陈之端，路安民，等.藏药雪莲原植物水母雪莲及其混淆种类的ITS序列比较和分子鉴定[J].中草药，2001，32（5）：443.[8]杨佩文，等.根肿病菌核糖体基因ITS区段的克隆测序及其在检测中的应用[J].云南农业大学学报，2003，18（3）：228-233.[9]葛芸英，郭坚华，等.小麦苗枯病菌的ITS分析及PCR检测[J].植物病理学报，2003，33(3):198-202.[10]刘忠，王小全，陈之端，等.五味子科的系统发育：核糖体DNAITS区序列证据[J].植物学报，2000，42（7）：758.[11]朱惠芬，杨俊波，张长芹，等.应用ITS序列分析探讨偏花报春的系统位置[J].植物分类学报，2002，40（2）：133.
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