时间分辨荧光分析法[合集五篇]

第一篇：时间分辨荧光分析法

时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroisnmuno assay,TRFIA）是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术，是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10^(-12)g/ml[1]，较放射免疫分析（RIA）高出3个数量级。它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。由于其高灵敏度，在临床上得到了广泛的应用，逐渐代替了放射免疫分析。[1]

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光，因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的，因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合，就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。

时间分辨荧光分析法（TRFIA）实际上是在荧光分析（FIA）的基础上发展起来的，它是一种特殊的荧光分析。荧光分析利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。但是，当进行超微量分析的时候，激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此，解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。

解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短，激发光消失，荧光也消失。不过有非常少的稀土金属（Eu、Tb、Sm、Dy）的荧光寿命较长，可达1～2ms，能够满足测量要求，因此而产生了时间分辨荧光分析法，即使用长效荧光标记物，在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。平时常用的稀土金属主要是Eu(铕）和Tb(铽），Eu荧光寿命1ms,在水中不稳定，但加入增强剂后可以克服；Tb荧光寿命1.6ms，水中稳定，但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解，因此从测量方法学上看Tb很好，但不适合用于生物分析，故Eu最为常用。

由于常用Eu作为荧光标记，因此增强剂就成了试剂中的重要组成。增强剂原理：利用含络合剂、表面活性剂的溶液的亲水和亲脂性同时存在，使Eu在水中处于稳定状态。现在有些试剂，在络合Eu在抗体上时已考虑了增强问题，而使用了具有增强作用的新络合剂，因而有的试剂没有单独的增强剂。

随着检验医学的发展，对微量、超微量的测定会越来越多，同时RIA的污染问题会越来越被重视，因此，时间分辨荧光分析法（TRFIA）具有越来越大的应用空间。

划时代的检测技术

放射免疫分析(RIA)，以其高度特异性灵敏度和实用性，吸引着各国的生物医学工作者，但操作中始终存在放射性污染、同位素半衰期短及试剂盒稳定性问题。为此，人们发展了一系列非放射性标记技术，如酶标记、化学发光、生物发光标记等技术，其中，时间分辨荧光免疫分析技术。由于灵敏度及线性范围明显优于其它技术，最为引人注目。

时间分辨荧光分析足以稀土离子标记抗原或抗体、核酸探针和细胞等为特征的超灵敏度检测技术，它克服了酶标记物的不稳定、化学发光仅能一次发光且易受环境干扰、电化学发光的非直接标记等缺点。使非特异性信号降低到可以忽略的程度，达到了极高的信噪比，从而大大地超过了放射性同位素所能达到的灵敏度，且还具有标记物制备简便、储存时间长、无放射性污染、检测重复性好、操作流程短、标准曲线范围宽、不受样品自然荧光干扰和应用范围十分广泛等优点，成为继放射免疫分析之后标记物发展的一个新里程碑。标记物

采用镧系元素（铕、钐、镝、铽）进行原子标记，较碱性磷酸酶、吖啶酯、生物素等大分子标记物优势明显：原子标记，标记物更多，检测更灵敏，对被标记物的生物活性和结构无影响原子标记，标记稳定性强 多种标记，一个测试，多个项目。

检测特点

标记离子的荧光激发光波长范围较宽，发射光谱峰范围窄，是类线光谱，有利于降低本底荧光强度，提高分辨率。

激发光和发射光之间有一个较大的Stokes位移，有利于排除特异荧光的干扰，增强测量的特异性。

标记离子螯合物产生的荧光强度高，寿命长，有利于消除样品及环境中荧光物质对检测结果的影响。每一秒钟检测样品1000次，结果取平均值，有利于提高检测的准确性。

第二篇：动力学荧光分析法的简要论述

对动力学荧光分析法的简要论述

动力学荧光分析法是荧光分析新技术中的一种，通常利用慢反应，在反应开始之后和到达平衡之前的某一期限内进行测量。由于化学反应的速率与反应物的浓度有关，在某些情况下还与催化剂（有时还包括活化剂、阻化剂或解阻剂）的浓度有关，因而，可以通过测量反应的速率以确定待测物的含量，这正是动力学分析法定量测定的依据，所以该法也称为反应速率法[1]。动力学分析法的特点

动力学测量是一种相对的测量值，只测量反应检测信号的变化。在反应过程中，那些不参与反应的物质或仪器因素，对于反应监测信号值的贡献保持不变，因而并不干扰。其次，某些类似的物质，虽然也能发生反应，但反应速率不同，这样便有可能创造一定的条件，使得在测量期间内只有待测物的动力学贡献才是有意义的。这两种原因，使得动力学分析法有可能比平衡法具有更好的选择性。

动力学分析法还具有灵敏度很高、操作比较快速、易于实现自动化和可用来测定密切相关的化合物等优点。

当然，动力学分析法也有它的某些限制[2]。首先，所使用的反应半衰期应在5ms-1h之间。其次，要必须严格的控制温度、ph、实际浓度、离子强度等反应条件和其他可能影响反应速率的因素。第三是动力学测量的信噪比在本质上要比平衡法小，因为只有反应的一小部分被用于测量。

2动力学分析法的类型

动力学分析法主要包括如下三种类型：非催化法、催化法、酶催化法。非催化法是通过测量非催化反应的速率而测定某种反应物的浓度。此法的灵敏度和准确性都不比催化法，不过它常用于有机物的分析。基于各种相似组分与同一试剂的反应速率的差异，可应用差示动力学分析法进行同时测定。

催化法是以催化反应为基础来测定物质含量的方法。在合适条件下，催化反应的反应速率与催化剂的浓度成正比，因此，可用于测定某些对指示反应有催化作用的痕量物质，也可用于测定某些对催化反应起助催作用或抑制作用的物质。由于测量的对象并非催化剂本身，而是经“化学放大”了的其他物质，因而此法的灵敏度很高，检测限常可达ng或pg级。

酶催化法则是基于酶催化的反应，这类反应的突出特点是它的特效性和高灵敏度，不仅可用来测定酶的活性，也可用来测定底物、活化剂和抑制剂。在合适条件下，酶催化反应的初始速率与酶浓性成正比，当底物浓度较低时，初始速率也正比于底物的浓度。同时，酶催化反应的初始速率也与活化剂的浓度呈正比，与抑制剂的浓度成反比。

上述三种方法中，催化法尤其是酶催化法更为人们所青睐。不过，这里值得一提的是，酶催化法虽然具有高灵敏度和特效性的优点，但也具有酶的不稳定性、存储期短和价格昂贵的缺点，所以模拟酶的研究一直是人们所致力的工作。应用

动力学荧光分析法在实际应用中非常广泛。如，利用酶催化法可进行每的测定及底物的测定。利用非催化法可进行无机物的测定和有机物的测定。

先如今，动力学荧光分析法已经成为一种成熟的分析方法，随着科学事业的发展，我们将会进一步对其原理、特点和发展状况做出更深的研究。

参考文献

[1]许金钩，王尊本.荧光分析法.科学出版社，2006,7(3):221-240 [2]陈国树。催化动力学分析法及其应用.南昌：江西高校出版社，1991.

第三篇：时间序列分析法缺点

时间序列分析预测法有两个特点：

①时间序列分析预测法是根据市场过去的变化趋势预测未来的发展，它的前提是假定事物的过去会同样延续到未来。事物的现实是历史发展的结果，而事物的未来又是现实的延伸，事物的过去和未来是有联系的。市场预测的时间序列分析法，正是根据客观事物发展的这种连续规律性，运用过去的历史数据，通过统计分析，进一步推测市场未来的发展趋势。市场预测中，事物的过去会同样延续到未来，其意思是说，市场未来不会发生突然跳跃式变化，而是渐进变化的。

时间序列分析预测法的哲学依据，是唯物辩证法中的基本观点，即认为一切事物都是发展变化的，事物的发展变化在时间上具有连续性，市场现象也是这样。市场现象过去和现在的发展变化规律和发展水平，会影响到市场现象未来的发展变化规律和规模水平；市场现象未来的变化规律和水平，是市场现象过去和现在变化规律和发展水平的结果。

需要指出，由于事物的发展不仅有连续性的特点，而且又是复杂多样的。因此，在应用时间序列分析法进行市场预测时应注意市场现象未来发展变化规律和发展水平，不一定与其历史和现在的发展变化规律完全一致。随着市场现象的发展，它还会出现一些新的特点。因此，在时间序列分析预测中，决不能机械地按市场现象过去和现在的规律向外延伸。必须要研究分析市场现象变化的新特点，新表现，并且将这些新特点和新表现充分考虑在预测值内。这样才能对市场现象做出既延续其历史变化规律，又符合其现实表现的可靠的预测结果。

②时间序列分析预测法突出了时间因素在预测中的作用，暂不考虑外界具体因素的影响。时间序列在时间序列分析预测法处于核心位置，没有时间序列，就没有这一方法的存在。虽然，预测对象的发展变化是受很多因素影响的。但是，运用时间序列分析进行量的预测，实际上将所有的影响因素归结到时间这一因素上，只承认所有影响因素的综合作用，并在未来对预测对象仍然起作用，并未去分析探讨预测对象和影响因素之间的因果关系。因此，为了求得能反映市场未来发展变化的精确预测值，在运用时间序列分析法进行预测时，必须将量的分析方法和质的分析方法结合起来，从质的方面充分研究各种因素与市场的关系，在充分分析研究影响市场变化的各种因素的基础上确定预测值。

需要指出的是，时间序列预测法因突出时间序列暂不考虑外界因素影响，因而存在着预测误差的缺陷，当遇到外界发生较大变化，往往会有较大偏差，时间序列预测法对于中短期预测的效果要比长期预测的效果好。因为客观事物，尤其是经济现象，在一个较长时间内发生外界因素变化的可能性加大，它们对市场经济现象必定要产生重大影响。如果出现这种情况，进行预测时，只考虑时间因素不考虑外界因素对预测对象的影响，其预测结果就会与实际状况严重不符。

第四篇：分辨陈述句

分辨陈述句、疑问句、祈使句、感叹句四种句子类型

1、在括号里写出句子的类型

①、生活在九十年代的小孩是多么幸福啊!（）②、鞋店里有各种各样的鞋。（）③、她今天为什么没有来上课呢?（）④、请不要大声说话!（）⑤、她生病了，不能参加跑步训练。（）

2、按要求改句子

①、乌鸦的翅膀不能够挡住太阳的光辉。(改疑问句)

②、伟大的祖国是非常美丽、富饶的。(改感叹句)

③、这是多么感人的事迹啊!(改陈述句)

扩句和缩句练习

【专项突破】

(二)、判断下列缩句是否正确，对的打“√”，错的打“╳”。

1、“这不是伟大的奇观吗？”缩写为“这不是奇观。”（）

2、“红军的主力渡过了天险大渡河，浩浩荡荡地奔赴抗日的最前线。”缩句为“主力奔赴最前线。”（）

3、“高大挺拔的白杨树像一排卫兵似的的，在宽阔而又笔直的公路两旁排列。”可缩写为“白杨树在公路排列。”（）

4、“风景如画的桂林山水，吸引了成千上万的中外游客来此观光。”可缩写为“游客观光。”

（）

（四）、缩句。

1、大家热情地接待了远方的客人。

2、她的旧围裙里兜着许多火柴。

3、我们追寻诗仙李白在这里游览山水、痛饮狂歌的行踪。

4、繁花似锦的焰火在夜空中构成一幅美妙的图案。

5、童年的往事多得像天上的繁星。

6、我们要努力探索大自然的奥秘。

7、渔夫的妻子桑娜坐在火炉旁补一张破帆。

8、这是第一条完全由我国的工程技术人员设计施工的铁路于线。

9、晌午的太阳热辣辣地照射着整个树林。

10、这是远在万里之外的异国他乡就读的妈妈特意送给我的圣诞礼物。

11、气象台发布了西伯利亚来的寒流即将南下的消息。

12、汉丞相曹操在营寨里听到鼓声和呐喊声。

四、过关冲刺

1、缩句

①、都江堰是两千多年以前李冰父子在岷江中修建的一条大堤。②、我和同伴们低垂着头，在沙滩上慢慢前进。

2、扩句

①、妈妈买来了桔子。②、歌声打破了沉寂。

句式变换

【专项突破】

一、依照样子写句子。例：这个书包是王强的。

这个书包怎能不是王强的呢？

谁也不能否认这个书包是王强的。

1、那辆自行车是小丽的。

2、这件漂亮的风衣是李萌的。

二、仿照样子改写句子。

例1：红红低着头对妈妈说：“我不要皮鞋穿了。” 红红低着头对妈妈说，她不要皮鞋穿了。

1、鲁迅给颜黎明的回信中说：“我的信如果要发表，且有发表的地方，我可以同意。”

2、老师告诉小明：“你去大队部找赵老师领《我们爱科学》。”

3、中队长对张铭说：“我去开会，你自己去参加比赛。”

4、詹天佑经常勉励工作人员说：“我们的工作首先要精密。”

5、老人总是摇摇头，长长地吁了一口气说：“莺儿，你还小呢，不懂。”

6、蔺相如说：“我愿意带着和氏璧到秦国去。”

例 2：下课了，老师叫我到办公室去。

下课了，老师把我叫到办公室去。下课了，我被老师叫到办公室去。

7、什么也没有打到，还撕破了网。

8、汹涌的洪水冲毁了古老的大堤。

三、将陈述句改为反问句。

1、在南极考察队员面前，没有克服不了的困难。

3、在阳光下，一片青松的边沿闪动着白桦的银裙，像海边上的浪花。

4、人与山的关系日益密切，使人感到亲切、舒服。

6、这样气魄雄伟的工程，在世界历史上是一个伟大的奇迹。

8、我的心哪，留在祖国的蓝天上。

修改病句

常见的病句有：

成份残缺；搭配不当；重复罗嗦；语序颠倒；前后矛盾；用词不当；指代不明；分类不当；不合事理；含糊不清等。

修改下列病句，在括号里注明病因。（在原句上修改）

1、多次反复教育我们要好好学习。（）

2、爷爷经常想起许多过去的往事。（）

3、《为人民服务》这篇文章的作者是毛泽东写的。（）

4、改革开放以来，我国人民的生活水平不断地改善。（）

5、菜园里种着西红柿、西瓜、扁豆、茄子等各种蔬菜。（）

6、参加会议的同学基本上都到齐了。（）

7、我上完五年级了，还有一年没有毕业。（）

8、从这件普通的小事中，却说明了深刻的道理。（）

9、春天的街心花园飘着醉人的桂花香。（）掌握比喻、拟人、排比、夸张、反问、设问等修辞手法

1、照样子，写句子。

例

1、空旷的花园里，烧焦的树垂头丧气地弯着腰。

例

2、鸬鹚像等待命令的士兵，整齐地排列在船舷上。

例

3、危楼高百尺，手可摘星辰。

判断下列句子是否用了修辞手法，如果运用了，在括号里注明类型；没有运用则在括号里划“×”。

1、如果我们出了什么事，你们可不要忘了小夜莺。（）

2、人群在欢跃，小草也从地下伸出头来向人们微笑。（）

3、旷野里一片黑暗，天地交融在一起，什么也看不见。（）

4、我好像在哪儿见过你。（）

5、不劳动，连棵花也养不活，这难道不是真理吗？（）

6、他是在介绍白杨吗？不是的，他是在表白自己。（）

7、清清的溪水，照着蓝天的影子、照着彩霞的影子、照着山上松树林的影子、照着行人来往的影子。（）

8、飞流直下三千尺，疑是银河落九天。（）

第五篇：荧光爱自然

荧光爱自然

深夜中，星星布满天幕，月亮与星星讲述着自然的故事，一颗流星划过天际，微乎的荧光照耀林云。。。

萤火虫是大自然最特别的女儿，逍遥于丛林中，给大自然传递爱的信息。

萤火虫总是位神秘的“夜行者”。它有薄薄的翅膀，黑夜遮住了它的面目，只有浅浅的黄光、绿光为它美衬。阳光使它睁不开眼睛，惟有夜晚的深邃让它着迷，也唯有夜晚的冰凉来降降它腹中的“灯火”的独特。萤火虫在夜晚低唱，它想用它的绝唱来赞美它伟大的母亲——大自然。它不喜欢青蛙、蝉的“噪音交响曲”，它喜欢与风儿与星星的“幽静交响乐”。它行于夜间，挂着斗篷，只为那一份仅属于自然万物的宁静。

萤火虫也是位低调的“美容师”。它与伙伴用身上的荧光照耀草丛边上，像一颗颗冷绿的露珠点缀；飞过小溪，像一盏盏灯火溶于水，不见踪影；飞在大树上，像一个个发光的果实熟得可摘。

流萤成群地在夜空中飞舞，像星的河流，灯的长阵；流萤闪烁在林梢，忽出忽没，像树林里藏着晶晶莹莹的蓝宝石，把夜色点缀得分外瑰丽神奇。

萤火虫还是位无私的“短命者”。人家说：“昙花一现。”昙花在太阳初升于地平线，就闭了花瓣，落了青叶，但至少让人们欣赏到了它独特的美和诱人的芬芳。而萤火虫直至它光辉的消逝而逝去了仅一夜的生命，那斑点的光儿并不持久，被夜给融化了。可萤火虫死在夜里，又有谁寻觅到它在夜晚时给予的光的奉献？但是它虽然短命，却很欣然——因为萤火虫为自然而生，为快乐而去。在夜晚与白天的交接，它满足了，也释然了。

萤火虫的光芒悄悄地流于水中，不留半点痕迹，“银烛秋光冷画屏，轻罗小扇扑流萤，”万般柔情溶于水中，只求星星粲然一笑——这是萤火虫不变的信条。

初二:刘哲