第一篇:试验显微镜油镜的使用和保养试验目的1学会显微镜油镜的使用
实验
一、显微镜油镜的使用和保养
[实验目的]
1.学会显微镜油镜的使用与保养方法。2.学会认识细菌的基本形态与特殊结构。
[油镜的原理] 由于油镜的透镜很小,自标本玻片透过的光线因介质密度(从载物玻片到空气,再进入油镜)的不同,部分光线因发生折射而散失(如下图A—A‘),不能进入透镜,致使射入的光线较少,物像呈现不清。当在油镜与标本片之间加镜油后(镜油的折光率为1.515和玻璃的折光率1.52相近似),从而减少了光线通过标本片与油镜之间空气(折光率1.0)引起的散光现象,增加了进入透镜的光线(如下图中C—C‘),使视野的明亮度加强,物像可看清楚,此外,加用镜油能增加油镜的数值孔径,提高显微镜分辨能力。
油镜加香柏油的原理
[实验内容]
(一)显微镜的使用 材
料
显微镜,镜油(香柏油),擦镜纸,玻片标本。
方
法
1.检查:使用前必须对所用显微镜进行详细检查,如发现问题应及时向老师报告。
2.调光:检查未染色标本时,以弱光线为宜,此时可将集光器下降或缩小光栅,检查染色标本时,以光线强为宜,此时应适当升高集光器或将光栅打开。
3.标本观察:将标本置于载物台上,先用低倍镜观察。用粗调节器调至看出物象后,再调节细调节器,使物像更加清晰。在换高倍镜观察前,鉴于高倍镜视野范围比低倍镜小,故须将被观察内容移至视野中央后再换之。
(二)油镜的使用和保养 1.油镜头的识别:油镜头上一般刻有100×、或Oil、油等标记。2.油镜的使用方法:
(1)将显微镜直立于桌上,不要扳动倾斜关节,使载物台保持水平。(2)对光:用低倍镜对光,检查染色标本时光线宜强。要抬高集光器,放大光圈。
(3)滴加香柏油一小滴于染色标本片上,将标本置于载物台上,移置待检部分于接物镜下。
(4)换用油镜,眼睛从侧面看着物镜,转动粗调节器,使镜筒下降至油镜头浸入镜油并几乎接触标本片。
(5)左眼看接目镜,一面观察,一面缓慢转动粗调节器,使镜筒上升,直到观察到模糊的物像时,再适当转动细调节器,使物像完全清晰,即可正式观察。
注意
切不可在眼看目镜时向下转动粗调节器,以免压碎标本片及损坏镜头。观察标本时养成左眼看接目镜的习惯。
(三)油镜的保养
1.标本观察完毕,向上转动粗调节器将镜筒提起,取下标本,用擦镜纸将镜头上的油擦净。若油已干,可用擦镜纸沾少许二甲苯擦去油迹,随即用擦镜纸擦去二甲苯。因二甲苯能溶解粘固透镜的胶质,如不擦去二甲苯,日久后镜片会脱落。
2.将物镜转成“八’字形,以免损坏油镜。降低集光器,竖起反光镜,将显微镜放入镜箱。
3.填写显微镜使用登记卡。
注意事项:
1.细调节器是显微镜最精细、最脆弱的机械部分,每旋转一周使镜筒上升或下降0.1毫米,只能做往返回转,不要向单一方向转动数周。
2.观察滴片标本时,载物台应放平,注意勿将物镜镜头接触粪液。
3.观察封片标本时,勿使镜头与盖玻片接触,以免压坏标本或损伤镜头。4.观察血涂片标本时,必须按一定顺序,逐个视野检查,以免遗漏。
实验
二、细菌的形态检查
细菌在适宜的环境条件下,保持着一定的形态。细菌的正常形态基本上分为球菌、杆菌和螺形菌三类。球菌按其分裂方向与分裂后排列情况又分成双球菌、链球菌、四联球菌、八迭球菌、葡萄球菌等;杆菌也有球杆菌、链杆菌、分枝杆菌、棒状杆菌等之分;螺形菌中菌体仅有一个弯曲,呈逗点状者叫弧菌,菌体有2~3个回转,且较坚硬者为螺菌。
细菌除具有基本结构外,某些细菌在一定条件下尚具有某些特殊结构,如荚膜、鞭毛、芽胞、菌毛。细菌特殊结构除菌毛须用电镜观察外,荚膜、鞭毛、芽胞均可用光镜观察。
材
料
葡萄球菌、链球菌、脑膜炎双球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌示教片。鞭毛(伤寒杆菌)、荚膜(肺炎链球菌)、芽胞(破伤风杆菌)示教片。
方
法
1.细菌基本形态的观察
注意细菌菌体大小、形状、排列特点及染色性。①球菌:葡萄球菌革兰染色标本片。②杆菌:大肠埃希菌标本片。③螺形菌:霍乱弧菌标本片。
2.特殊结构的观察
①荚膜:肺炎链球菌荚膜标本片。注意荚膜的厚薄。②芽胞:破伤风梭菌芽胞标本片。注意芽胞的大小、形状及其位置。③鞭毛:伤寒沙门菌鞭毛标本片。注意鞭毛的数量及其类型。
【实验报告】
1.记录显微镜油镜的使用与保养方法。2.绘出显微镜下细菌基本形态及特殊结构图。