胡辛麻镇痛软膏中延胡索乙素提取方法的优化研究

第一篇：胡辛麻镇痛软膏中延胡索乙素提取方法的优化研究

胡辛麻镇痛软膏中延胡素提取方法的优化研究

季锡中，韩关绥，方志军

（江苏省中医药研究院，江苏 南京 210028）

摘要：目的 探索优化延胡素的提取方法。方法 在原有临床研究及制剂预试的基础上，对原药材的关键技术条件及基质处方进行优选。结果 初步建立了可行、稳定的制备工艺流程，以及制备工艺流程关键步骤的质量控制方法、成品质量控制标准。结论 该工艺条件下制备出安全、有效、稳定的中药镇痛霜剂。

关键词：延胡索乙素，渗漉，软膏剂，提取工艺

中图分类号：R927 文献标识码：A 文章编号：1673-6427（2012）06-0039-03 胡辛麻镇痛软膏为我院已故外科专家，林祖庚主任医师根据多年临床经验，设计的科研处方。主药由祖师麻、延胡索、细辛组成，制成O/W型软膏剂。

根据原药材所含主要活性成分理化特性及立题前预试，拟将祖师麻用乙醇提取，延胡索用酸性乙醇提取，细辛提挥发油及水提醇沉其余部分。

本实验针对延胡索的单独提取工艺，利用正交法，做工艺技术条件的优选。1 仪器与材料

1.1 仪器与试剂

Wters HPLC仪，510泵，996型二极管阵列式检测器，Millenuium 2010色谱管理系统；CQX25-06超声清洗器，上海必能信超声有限公司；B-490(水浴)BÜCHI；对照品延胡索乙素（dl-tetrahydropalmatine）

购自中国药品生物制品检定所；试剂均为AR（上海化试厂）。

1.2 药材

市售合格药材、经南京中医药大学吴德康教授鉴定，系罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎。2 方法与结果

2.1试验方案的设计：经预试，选用提取方法，溶媒浓度，溶媒酸度及饮片粒度为考察因素见表1，作L8（27）正交优选，考察指标选用具镇痛活性的延胡索乙素[1]及总提取物量，各试验号平行操作。2.2 含量测定方法

2.2.1色谱条件 色谱柱μ-bondpak TMC18(ø3.9×300mm);流动相：甲醇-水-醋酸（76：24：2），10%NH4OH 溶液调PH至4.6；流速0.5ml/min；检测波长为280nm；柱温：室温。2.2.2对照品溶液的制备及线性关系的初步考察，精密称定对照品1.750mg，无

水乙醇溶解，定容至1ml，为对照品溶液。精密吸取对照品溶液，2、6、10、14、18μl按上述色谱条件测定峰面积见表1。计算得回归方程：Y = 1620331X – 10882，r = 0.9998。表明延胡索乙素在3.5），男，汉族，江苏·宜兴，副研究员，医学学士，从事中药制药工程研究。Tel：（025）85637192 E-mail:xljn66@ sina.com

2 1 1 2 2 546 157 4 1 2 2 2 2 1 1 451 161 5 2 1 2 1 2 1 2 446 191 6 2 1 2 2 1 2 1 374 196 7 2 2 1 1 2 2 1 476 187 8 2 2 1 2 1 1 2 377 186 K1 1804 1627 1666 1869 1698 1774 1702 K2 1673 1850 1817 1608 1779 1703 1775 R 43 56 37 68 20 18 19 S2 2145 6216 3081 8515 820 630 666 K1 720 791 775 733 735 737 740 K2 760 691 707 749 747 745 742 R 11 25 17 4 3 2 0.5 S2 2205 1250 578 32 18 8 0.5

B>A>C>D C>B>A>D

表6 延胡索吸收度方差分析

来源 离善平方和 自由度 方差 F值 显著性

A 2145 1 2145 1.42 B 6216 1 6216 4.11 C 8515 1 8515 5.63 * D 666 1 666 0.40 e 4531 3 1510.3 F0.05(1,3)=10.1 F0.1(1,3)=5.54 * P<0.1

表7 总提取物方差分析

来源 离差平方和 自由度 方差 F值 显著性

A 220.5 1 220.5 1.10 B 1250 1 1250 6.21 * C 32 1 32 0.16 e 604 3 201.3 F0.05(1,3)=10.1 F0.1(1,3)=5.54 *P<0.1 结合成本等综合因素考虑，工艺选用A2B2C1D1，即20目延胡素用PH4的70%乙醇渗漉。2.4 工艺小试确定具体技术参数（以供工艺放大参考）

2.4.1样品制备 照正交优选的工艺技术条件及《中国药典》2005版一部附录[3]流侵膏制备法中渗漉要点操作。用HCl调至PH4的乙醇为渗漉溶媒，取20目延胡索2kg，3L 渗漉溶媒湿润4h，装筒、浸渍16h后，滴速6ml/min渗漉。渗漉液收集到10L时，每500ml取样一次，以原浓度供TLC检出。

2.4.2 TLC检出试验、计算用量 参照《中国药典》2005版一部附录TLC法，硅胶G板，点样5ul，环

渗漉用溶媒=3+10+0.5×13=19.5 L，延胡索渗漉溶媒量约为物料量的10倍。2.4.3渗漉速度的计算

渗漉速度 = 6 ml/min÷ 2 kg×投料量kg =3×投料量（kg数）ml/min 3 结论及讨论

经正交试验及工艺小试，胡辛麻镇痛软膏延胡索的提取工艺定为以1.5倍量渗漉溶媒湿润物料4h，装筒，浸渍16 h 后，以与投料量相应的渗漉速度渗漉，制成相应的中间品备用。

中药软膏多采用凡士林、饴糖等为基质调制而成，相比之下W/O、O/W型软膏基质对所载主药的量和其理化性质有较为苛刻的要求，如有较多直接粉碎入药的或提取物量较大的主药，往往达不到良好的乳化效果或乳化了却无合格的稳定性。本实验目的在优化延胡索提取工艺，以获得指标成分含量较高的提取物，以便制成合格的软膏剂。另外，对传统渗漉法具体工艺技术参数的确定，作了考察研究，获得了较为理想的可参考数据，给工艺放大提供了依据。

参考文献：

[1] 原永芳，李修禄，柳正良等.超临界流体萃取及高效液相色谱法分析延胡索中延胡索乙素的含量[J].药学学报，1996，31(4):282.[2] 《中国药典》[S].一部.2005,附录VI D.[3] 《中国药典》[S].一部.2005,附录I O.[4] 《中国药典》[S].一部.2005,附录VI B.-