第一篇:畜禽血液样品的采集、制备与保存方法
畜禽血液样品的采集、制备与保存方法
血液不断地在全身流动,参与机体的各种功能活动,对动物的新陈代谢以及维持内环境和保持与外界环境间的平衡起着重要的作用。当血液发生病理变化时,常常会影响全身的组织和器官,而组织和器官的病变又可以引起血液成分的变化,因此,血液的检验在疾病的诊断中起到十分重要的作用;临床检验采用的血液样品分为全血、血清和血浆。全血主要用于血细胞成分的检验,血清和血浆主要用于大部分临床化学检查和免疫学检验。血液样品的采集、制备与保存是重要的前期工作,是保证正确诊断的基本条件。
1.采集部位与方法
畜禽血液样品的采集部位和方法,与种类、检测项目、试验方法及用血量有关,视实际情况而定。
1.1鸡的采血技术
1.1.1翅静脉采血:是常用的采血部位,翅静脉在肘关节腹侧的表面,清晰地暴露于皮肤之下,肉眼可见。采血时先拔去该部位的羽毛,抽血时,动作轻柔缓慢,防止血管塌陷不回流,采血后略移动皮肤轻压即可止血;由于鸡的皮肤游离性大,采血后容易形成血肿。
1.1.2心脏采血:此方法多用于进行尸体剖检前的血液采集检验。将鸡仰卧保定,针头从V型锁骨前端刺入,或者在靠近心脏的胸侧壁刺入;心脏采血过程中,如果操作不慎,易损伤肺脏,更有慎者,引起大出血死亡。
1.1.3颈静脉采血:鸡的左侧颈静脉很细,通常右侧颈静脉采血。在皮肤上的一个无毛的沟正好是右侧颈静脉所处的位置。颈静脉游离性大,皮肤松弛,采血后易于形成血肿。
1.2猪采血技术
1.2.1前腔静脉采血:猪前腔静脉是由左右两侧的颈静脉与腋静脉至第一对肋骨间的胸骨柄汇合形成。采血时,针头刺入部位在与耳根和对侧肩胛骨上缘连线垂直线的胸骨端处,大猪采用站立保定,小猪可以采用仰卧保定法。左侧靠近膈神经,故以右侧采血为宜。
1.2.2耳静脉采血:一般用于体格较大的猪。保定后,耳部消毒灭菌,以手指压迫近心端耳部静脉,使血管努张,针头刺入血管后,动作要轻柔,采血要缓慢,否则血液不回流使静脉瘪陷。
1.3牛的采血技术
1.3.1颈静脉采血:将头向一侧保定,用手指压迫颈静脉沟处,待血管怒张后,于采血部位消毒进针采血。
1.3.2尾静脉采血:采血人员站立牛正后方,将牛尾向上抬起180度,在第一尾锥与第二尾锥之间的尾中线上进针采血。此方法需要人员少,采血速度快,可以****操作。
1.4马、羊的采血技术
马、羊均采用颈静脉采血。方法同牛的颈静脉采血。
1.5犬、猫的采血技术
一般在后肢外侧小隐静脉或前肢内侧皮下静脉采血,采血前由助手保定,在采血部位的近心端扎止血带,待血管怒张后,迅速刺入采血器,松开止血带左手固定针头,采血力度要适当。
2.血液样品的处理
2.1血浆的制备:在采血器内加入适量的抗凝剂,采血后,反复颠倒采血器,使抗凝剂与血液充分混匀,静置或经过离心使血细胞下沉后,上清液即为血浆。
2.2血清的制备:首先将采集的血液样品置室温半小时,待血液凝固后2000-3000转/分离心5-10分钟,上清夜即为血清;如离心后有轻微的溶血,用牙签将血凝块挑出,将混有红细胞碎片的血清再次离心,用干净吸管收集血清于干燥的指型管中,贴上标签备用。如血清溶血严重,应剔出样品。
2.3全血的制备:全血制备与血浆制备基本相同。供全血分析时,抗凝剂选用会直接影响化验结果,选用抗凝剂的原则:主要用于血液PH值和血液电解质测定的应选用肝素;柠主要用于血液促凝时间的测定应选用柠檬酸钠;主要用于血液有形成分检查的全血应选用EDTA;草酸盐不能用作血小板计数和尿素、血氨、非蛋白氮等含氮物质的检测;
3.血液样品的保存与运送
采集的血液样品如不能及时进行检验,必须做适当的处理,防止其成分发生大的变化。
通常分离到的血清与血浆样品保存于密闭试管中,存放于4℃冰箱内或冷冻。
全血样品应保存于4℃冰箱内,检验时,样品必须达到室温,达到室温之后颠倒数次,使血液充分混匀后,方可检验。
如果样品能在24小时内送往实验室,可保存于4℃环境的保温箱内,如果24小时内不能抵达或有些样品送往外地实验室时,样品必须冷冻处理后,并在低温下运送。运送途中防止样品泄漏,密闭封装并加冰袋运送。同时要填写详细的样品记录。
4.分析:血液样品变异因素的控制
严格控制血液样品的 变异因素,是使检测结果尽可能符合客观情况的重要环节。因此,在采血过程中应注意下列问题:
4.1.规定动物的采血时间:有些血液化学成分有明显的昼夜波动,对采血动物,应在禁食12小时后采血,这样可以将食物对血液各种成分的浓度的影响减少到最低程度。在刚进完食动物身上采取的血液样品,往往出现血糖、甘油三酯增高,无机磷降低,麝香草酚浊度增加。进食富含脂肪的饲料,常导致血清混浊而干扰很多项目的生化检测。
4.2.血液样品来源一致:动脉血和经脉学的化学成分略有差异,整个试验期间,采取的血液样品必须一致。
4.3.防止分解:血液内某些化学成分,离体后由于氧化酶或细菌的作用,容易分解,致其含量有所改变。所以,为了防止血液内某些化学成分的分解,血液样品被采集后应立即按规定处理,及时检测或加入适当的保存剂按规定保存。
4.4.防止气体逸散:血液暴露于空气中后,二氧化碳迅速逸出,并吸收氧气提高血氧饱和度,进而引起血浆成分的改变,因此,在采血过程中要根据检测项目的需要来采取适当的采血方式。
4.5.防止污染:采血器及样品容器都必须用化学处理并用重蒸馏水冲洗,防止铜、铁等金属离子和污染物对影响检测结果。并且在做作蛋白结合碘测定时,禁用碘酊消毒采血部。
4.6.防止溶血:溶血可以影响许多生化检测项目的结果。红细胞破裂后释放出的物质与血浆中许多成分的浓度不一样,如钠、氯化物、钙等在血浆中的浓度要高于红细胞内的浓度,应予以防止。
4.7引起溶血原因是强力震荡、离心速度过快、温度过低或者过高、加入与血液环境不等渗液体、放置时间过长等等引起红细胞破裂的因素。
第二篇:血液标本采集与处理
血液标本采集与处理
一:静脉采血法
(一)普通采血法 试剂与器材 1.30g/L碘酊。2.75%乙醇。
3.其他 一次性注射器,压脉带,垫枕,试管,消消毒棉签。操作
1.取试管一支(需抗凝者应加相应抗凝剂)。
2.打开一次性注射器包装,取下针头无菌帽,将针头与针筒链接,针头斜面对准针筒刻度,抽拉针栓检查有无阻塞和漏气,排尽注射器内的空气,套上针头无菌帽,备用。3.受检者取坐位,前臂水平伸直置于桌面枕垫上,选择容易固定、明显可见的肘前静脉或手背静脉,幼儿可用颈外静脉采血。
4.用30g/L碘酊自所选静脉穿刺处从内向外、顺时针方向消毒皮肤,待碘酊挥发后,再用75%乙醇以同样方式脱碘,待干。
5.在穿刺点上方约6CM处系紧压脉带,瞩受检者紧握拳头,使静脉充盈显露。
6.取下针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和中指持注射器针筒,市指固定针头下座,针头斜面和针筒刻度向上,沿静脉走向使针头与皮肤呈30度角,快速刺入皮肤,然后成5度角向前刺破静脉壁进入静脉腔。见回血后,将针头顺势深入少许。穿刺成功后右手固定注射器,左手松压脉带后,再缓缓抽动注射器针栓至所需血量。受检者松拳,消毒干棉球压住穿刺孔,拔出针头。瞩受检者继续压按针孔数分钟。
7.取下注射器针头,将血液沿试管壁缓缓注入试管中。抗凝血需立即轻轻摇匀,盖紧试管塞,及时送检。《附注》
1:采血部位通常选择肘前静脉,如此处静脉不明显,可采用手背,手腕,腘窝和外踝部静脉。幼儿可采用颈外静脉。2:采血一般取坐位或卧位。体位影响水分在血管内外的分布,从而影响被测血液成分浓度。
3:压脉带捆扎时间不应超过1分,否则会使血液成分浓度发生改变。
4:血液注入试管前应先取下注射器针头,然后将血液沿试管壁缓缓注入试管中,防止溶血和泡沫产生。需要抗凝时应与抗凝剂混匀,切勿用力震荡试管。
5:如遇受检者发生晕针,应立即拔出针头,让其平卧。必要时可用拇指压掐或针刺人中,合谷等穴位,或嗅吸芳香酊等药物。
二,真空采血管采血法 原理
将有头盖胶塞的采血试管预先抽成不同的真空度,利用其负压自动定量采集静脉血样。试剂与器材
目前真空采血器有软接式双向采血针系统(头皮静脉双向采血式)和硬接式双向采血针系统(套筒双向采血式)两种,都是一端为穿刺针,另一端为刺塞针。另附不同用处的一次性真空采血管,有的加有不同抗凝剂,或其他添加剂,均均用不同颜色头盖标记便于识别。真空采血法复合生物安全措施。操作
一:消毒:为受检者选静脉与消毒
二:采血
1:软接式双向采血针系统采血,拔除采血穿刺针的护套,以左手固定受检者的前臂,右手拇指和示指持穿刺针,沿静脉走向使针头与皮肤呈30度,快速刺入皮肤,然后成5度角向前刺破静脉壁进入静脉腔,见回血后将刺塞针端直接刺穿真空采血管盖中央的胶塞中,血液自动流入试管内,如需多管血样,将刺塞端拔出,刺入另一真空采血管即可。达到采血量后,松压脉带,瞩受检者松拳,拔下刺塞端的采血试管。将消毒干棉球压住穿刺孔,立即拔出穿刺针,瞩受检者继续按压针孔数分钟。2:硬连接式双向采血针系统采血:静脉穿刺如上:采血时将真空采血试管拧入硬连接式双向采血针的刺塞针端中,静脉血就会自动流入采血试管中,拔下采血试管后,再拔出穿刺针头。3:抗凝血
须立即混匀。附注
1.使用真空采血器前应仔细阅读厂家说明书,严格按说明书要求操作。
2.尽量选粗大的静脉进行穿刺。
3.刺塞针端的乳胶套能防止拔出采血试管后继续流血污染周围,达到封闭采血防止污染环境的作用,因此不可取下乳胶套。
4.带乳胶套的刺塞端须从真空采血试管的胶塞中心垂直穿刺。
5.采血完毕后,先拔下刺塞端的采血试管,后拔穿刺针端。6.使用前勿松动一次性真空采血管盖塞,以防采血量不准。
7.如果一次采血要求采取几个标准时,应按以下顺序采血:血培养管,无抗凝剂及添加剂管,凝血象管,有抗凝剂管。
第三篇:食品理化检验样品的采集、收样与检验
食品理化检验样品的采集、收样与检验
食品卫生微生物检验样品的采集和处理......................................................................................................1 生活饮用水水样的采集、收样与检验..........................................................................................................3 食品理化检验样品的采集、收样与检验......................................................................................................6
食品卫生微生物检验样品的采集和处理
一、范围
适用于各类食品样品的采样。
二、采样用品
灭菌探子、铲子、匙、采样器、试管、吸管、广口瓶、剪子、开罐器等。
三、样品的采集
在食品检验中,所采集的样品必须有代表性。食品中因其加工批号、原料情况(来源、种类、地区、季节等)、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节(例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备)及销售人员的责任心和卫生认识水平等均可影响食品卫生质量,因此必须考虑周密。
1、采样数量
每批样品要在容器的不同部位采取,一般定型包装食品采取一袋/瓶(不少于250g)及散装食品采取250g.2、采样方法
(1)采样必须在无菌操作下进行。(2)根据样品种类,袋装、瓶装和罐装食品,应采完整的未开封的样品。如果样品很大,则需要无菌采样器 取样;固体粉末样品,应边取边混合;液体样品通过振摇混匀;冷冻食品应保持冷冻状态(可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存),非冷冻食品需在1℃~5℃中保存。
3、采样标签
采样前或后应贴上标签,每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等)。
四、送检
样品送到微生物检验室应越快越好。如果路途遥远,可将不需冷冻样品保持在1℃~5℃环境中(如冰壶)。如需保持冷冻状态,则需保存在泡沫塑料隔热箱内(箱内有干冰可维持在0℃以下)。送检时,必须认真填写申请单,以供检验人员参考。
五、检验
微生物检验室接到送检申请单,应立即登记,填写实验序号,并按检验要求,立即将样品放在冰箱或冰盒中,积极准备条件进行检验。
各食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。一般阳性样品,发出报告后3d(特殊情况 适当延长),方能处理样品。进口食品的阳性样品,需保存6个月,方能处理。阴性样品可及时处理。
检验完后,检验人员应及时填写原始记录,签名后,送质控办 出具检验报告。
生活饮用水水样的采集、收样与检验
一、范围
本规范规定了生活饮用水及水源水的采集、收样与方法。本规范适用于生活饮用水及水源水的采集、收样与检验。
二、生活饮用水水样的采集
1、采样点的选择
采样点的设置应有代表性,应分别设在水源取水口、集中式供水单位出水口和居民经常用水点处。管网水的采样点数,一般按供水人口每两万人设一个点计算,供水人口在20万以上、100万以下时,可酌量増减。在全部采样点中,应有一定的点数选在易受污染的地点和管网系统陈旧部位。
具体采样点的选择,应由供水单位和当地卫生行政部门根据本地区具体情况确定。
2、水样量的体积
水样的体积,取决于所分析项目的多少以及选用的测定方法。分析常规水质项目,只需要3-5升水样,取样量应能满足欲测项目的需要。对于细菌与化学检验,由于采集、处理、容器等的不同,不能应用同一瓶水样。
3、水样容器
样品瓶可用硼硅玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶,必须能够用塞或盖紧紧密封。
(1)选择容器的原则: a、容器不能是新的污染源。
b、容器壁不应吸收或吸附某些待测组分。
c、容器不应与待测组分发生反应。(2)容器的清洗原则
按水样待测组分的要求来确定清洗容器的原则。(3)用于微生物检验样品的容器
容器及瓶塞、瓶盖应能经受灭菌的温度,并且在这个温度下不释放或产生任何能抑制生物活动或导致死亡或促进生长的化学物质。为了除去余氯,在灭菌前向容器里加入硫代硫酸钠以还原余氯[每次125ml水样加0.1ml硫代硫酸钠溶液(100g/L)]。
热力灭菌分干热和高压蒸气灭菌两类。高压蒸气灭菌法要求121℃,15min,即可杀死芽孢。干热灭菌法杀死芽孢需160-180℃、维持2h。
4、样品保存
水样从采集到分析这段时间里,由于物理的、化学的、生物的作用会发生不同程度的变化,原则上应尽快测定。
(1)影响水质变化的因素
生物作用、化学作用、物理作用。(2)水样保存措施
通常将水样充满容器并密封,但对冷冻保存的水样不应充满容器。
水样保存,应达到:减慢生物或微生物作用,减慢化合物或络合物水解,避免分解,减少挥发与容器的吸附损失。保存方法,可采用控制pH值、加入化学剂、冷藏或冷冻。应根据具体组分选定适宜的保存方法。
5、现场采样和记录(1)现场采样
采集井水时,须先用泵充分抽水,以保证样品真正代表地下水源的实况。
采集自来水时,应开启龙头,适当放水数分钟后再取样,微生物样品应放水数分钟后关闭龙头,用酒精棉球擦试龙头口并点燃酒精棉球酌烧龙头口后迅速采样封口。
(2)采样记录
在采样现场把采样记录用胶纸粘贴或悬挂标签于水样瓶上,注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等。
三、水样的接收
检验人员接到样品后,应与《样品检测流转通知单》所注明的内容进行认真核对,核实无误,检验人员在《样品检测流转通知 单》上签名,接收样品并做好收样等记;核实有误,则将样品与《样品检测流转通知单》退回质控办核查。
四、水样的检验
接收样品后,依据《生活饮用水卫生规范》中《生活饮用水检验规范》,针对《样品检测流转通知单》所标明的检验项目,选取适合本实验室的检验方法,在规定时限内进行检验和校核.食品理化检验样品的采集、收样与检验
一、范围
本规范规定了食品卫生检验方法理化部分样品的采集、收样与检验的基本原则和要求。
本规范适用于食品卫生检验方法理化部分。
二、采样原则
食品采样是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。因此,应遵循下列采样原则:
1、代表性
在大多数情况下,待鉴定食品不可能全部进行检测,而只能抽取其中的一部分作为样品,因此,所采的样品应能够较好地代表待鉴定食品各方面的特性。
2、真实性
采样人员应亲临现场采样,以防止在采样过程中的作假或伪 造食品。所有采样用具都应清洁、干燥、无异味、无污染食品的可能。应尽可能避免使用对样品可能造成污染或影响检验结果的采样工具和采样容器。
3、准确性
性质不同的样品必须分开包装,并应视为来自不同的总体;采样方法应符合要求,采样的数量应满足检验及留样的需要;可根据感官性状进行分类或分档采样;采样记录务必清楚地填写在采样单上,并紧附于样品。
4、及时性
采样应及时,采样后也应及时送检。尤其是检测样品中水分、微生物等易受环境因素影响的指标,或样品中含有挥发性物质或易分解破坏的物质时,应及时赴现场采样并尽可能缩短从采样到送检的时间。
三、样品采集
1、采样应注意样品的生产日期、批号、代表性和均匀性(掺伪食品和食物中毒样品除外)。采集的数量应能反映该食品的卫生质量和满足检验项目对样品量的需要,一式三份,供检验、复验、备查或仲裁,一般散装样品每份不少于0.5Kg。
2、采样容器根据检验项目,选用硬质玻璃瓶或聚乙烯制品。
3、液体、半流体饮食品如植物油、鲜乳、酒或其他饮料,如用大桶或大罐盛装着,应先充分混匀后再采样。样品应分别盛放 在三个干净的容器中。
4、粮食及固体食品应自每批食品上、中、下三层的不同部位分别采取部分样品,混合后按四分法对角取样,最后取有代表性样品。
5、肉类、水产等食品应按分析项目要求分别采取不同部位的样品或混合后采样。
6、罐头、瓶装食品或其他小包装食品,应根据批号随机取样,同一批号取样件数,250g以上的包装不得少于6个,250g以下的包装不得少于10个。
7、掺伪食品和食物中毒的样品采集,要具有典型性。
四、样品的接收
检验人员接到样品后,应与《样品检测流转通知单》所注明的内容进行认真核对,核实无误,检验人员在《样品检测流转通知单》上签名,接收样品并做好收样等记;核实有误,则将样品与《样品检测流转通知单》退回质控办核查。
五、样品的检验
接收样品后,依据中华人民共和国国家标准GB/T 5009-2003《食品卫生检验方法
理化部分》,针对《样品检测流转通知单》所标明的检验项目,选取适合本实验室的检验方法,在规定时限内进行检验和校核。
第四篇:产前筛查标本采集与保存及报告制度
产前筛查标本采集与保存制度
1、人员要求:筛查工作必须由经过专门培训的有资质的人员承担;
2、产前筛查需按知情同意、孕妇自愿的原则: 医务人员告知孕妇或其家属产前筛查的性质、目的以及与诊断性检查相比筛查的局限性,孕妇和(或)家属签署知情同意书后方可进行筛查操作;
3、筛查孕妇资料登记要求
所有参与产前筛查孕妇资料应按照产前筛查申请单内容逐项登记清楚,随血样一道送至产前筛查机构。
4、使用唯一编码
编码要求准确、清楚,每位孕妇使用唯一编码,要求复读给孕妇听;编码操作者固定,做到三“三查七对”
操作时三查:即查编码、查离心管、查血清管;
5、血样登记表与本人七对:即对姓名、年龄、对编码、对末次月经、对B超孕周、对地址、对通讯电话;
6、血清管编码的书写要求:编号要求字迹清楚,准确无误;
7、血样的处理要求:全血于室温放置2小时待血液完全凝集后再进行离心,分离血清时要仔细,避免溶血现象,他离出的血清用一次性吸管转入血清管中,血清管盖须拧紧,防止血 清漏出,标本如能在7天内检测完毕,则置2--8℃保存;如检测时间超过7天,则置-20℃冰箱保存。
筛查结果的原始数据和血清标本必须保存至少一年,血清标本须保存于-70℃,以备复查。
8、筛查时孕周计算尽可能按B超孕龄,如不能取得B超孕龄,则按末次月经推算,但如遇孕妇朋经不规则的或末次月经记不清楚,则必须进行B超孕龄测量,孕龄 测量需精确到天数,早孕期统一以关臀长为准,中孕期统一以双顶径孕周为准。
产前筛查报告发放制度
1、筛查结果以书面形式送交被筛查者。
2、筛查报告至少应包括以下信息:(1)孕妇的年龄与预期的分娩年龄;(2)标本编号;
(3)筛查时的孕周及其推算方法;
(4)AFP与游离β-hCG的检测值和MOM 值;(5)经校正后的筛查目标疾病的风险度;(6)相关的提示与临床建议。
3、报告发放要及时,一般孕中期为5个工作日,孕早期为8个工作日以内。对于筛查结果为极高风险的要及时电话通知孕妇。
4、筛查报告需两个以上相关技术人员核对后方可签发。
第五篇:植物病害标本的采集制作与保存-系统发生错误
植物病害标本的采集制作与保存
植物病害标本是高等农业院校植物病理学科本科教学不可缺少的实物,它在教学中具有直观、不受季节和区域限制的特点。因此,植物病害标本的采集、制作和保存是植物病理学科实验教学中必不可少的基础知识和技能。1 植物病害标本的采集
在北方由于季节分明,作物品种丰富,植物病害发生频繁,大部分的植物病害标本都能从田间采集到。但是,病害的发生有一定的规律,要充分掌握病害发生的季节规律及寄主的生长规律才能收获症状特征比较典型的标本。1.1 病害标本采集的工具
植物病害大多发生在根、茎、叶和果实上,因此所用工具要针对不同的部位,常用的工具有刀、剪、锄、锯等,还有标本夹、标本箱、标本纸、小玻瓶、纸袋、标签和记录本等。1.2 标本的采集
大田采集主要分为按季节采集和按寄主采集。按季节采集主要是针对每年只在特定时期发生的病害。如白粉病具有性阶段,小麦白粉病多在每年5—6 月能够采集到;植物的灰霉病则在低温阴雨的条件下容易发病,每年3—5 月最容易采到。按寄主采集主要针对寄主范围广泛的病害,如霜霉病,可以在很多植物病害的叶片上发现,常见的有莴苣、葡萄、白菜等;疫病如番茄、马铃薯、辣椒疫病等。1.3 采集标本的记录
为了区分采集的不同的标本,采集时要进行记载。主要包括寄主名称、时间和地点、采集人姓名、主要发生情况和必要的生态环境因子。2 植物病害标本的制作
采集的标本通过鉴定以后,除去作为分离用的标本外,一般都用干燥法或浸渍法进行保存,要求能够尽量保存标本的本来性状。一些微小的可以做成玻片标本,比较难以保存的和特殊的标本可通过多媒体扫描系统或显微系统存入计算机中,制成相应的文体图形、动画、视频图像等。
2.1 标本干燥制作法
2.1.1 压制法。采到的植物病害标本,若干燥后容易卷缩的(如稻叶),最好随采随压。其他的可以放到采集箱内带回去后压在吸水纸中,用标本夹夹紧,日晒任其干燥。在此期间,要经常更换标本纸。夏季温度和湿度较高,容易使标本发霉变色,标本纸要勤更换。通常前3~4 d 换1~2 次/d,以后2~3d 换1 次,至标本完全干燥。2.1.2 烫干法或硅胶烘干法。不准备作为分离用的标本可以采用此2 种方法。为了加快标本的干燥速度,更好地保持标本原有的色泽,可以将刚采集的标本放在吸水纸或布中用电熨斗来回迅速烫干或将其加载草纸和干燥过的硅胶粉的标本夹中捆紧,放入50 ℃烘箱中2~3 d,使其很快干燥。
2.1.3 微波炉干燥保色法。为了弥补烫干法的不足之处,刘春元等(2003)报道了根据植物病害标本的质地,摸索了一套微波干燥保色法。此法干燥迅速,保色效果较佳,可长期保存而不褪色。如豆科植物病叶处理1 min,效果最佳,症状保存完好。2.1.4 冷冻干燥法。是目前比较好的方法。标本在冷冻的情况下干燥,几乎能完全保持原有的色泽和形状。
2.1.5 自然干燥法。水分很少的标本如枝干病害的枝条等,不需要采取任何干燥的手段,在空气中自然干燥即可。2.2 浸渍标本制作法
对于果实病害和汁液较多的病害以及肉质的子囊菌和担子菌的子实体,均可以采用浸渍法保存。但此方法占的面积大,保存时间有限,只能用于保存少量的标本,这些标本大多用于教学和示范。浸渍标本的制作,需要配备各种类型的浸渍液,主要包括各种保持原本颜色的保存液和防腐的保存液。
2.2.1 保色浸渍液的配制。根据植物果实病害的寄主植物的颜色,可将保色的浸渍液分为保存绿色浸渍液、保存黄色和桔色的浸渍液、保存红色的浸渍液等。①保存绿色的浸渍液。保存绿色的浸渍液很多,要根据不同的植物病害标本选择适当的方法,才能达到好的效果。如醋酸铜浸渍液:将醋酸铜结晶逐渐加在50%的醋酸溶液中,到不再溶解为止,原液要根据标本颜色的不同将其用水稀释3~4 倍,然后使用。将标本加入到煮沸的稀释液中,继续加热,标本的绿色开始褪去,经3~4 min,使绿色恢复后,将其取出,用清水冲净,保存于5%的福尔马林溶液中,或压制成干燥的标
本。这种方法保色效果良好,但与原色稍有出入。不能煮的如淡绿色苹果、梨、绿色葡萄等的病害标本可直接浸泡在1%亚硫酸100 ml、95%酒精100 ml、水800 ml 配成的溶液中浸泡10~20d,然后取出,冲洗干净,再保存在5%的福尔马林溶液中。另外,还有硫酸铜亚硫酸浸渍液、瓦查(Vacha)浸渍液等,也是保存绿色标本常用的方法。②保存红色的浸渍液。对于红色的果实病害标本如草莓、辣椒、马铃薯以及其他的植物红色组织,选择病害症状典型的标本,可以将标本浸入瓦查的红色浸渍液(硝酸亚钴15 g,福尔马林25 ml,氯化锡10 g,水1 000 ml)内,2 周后取出冲洗干净,浸泡在亚硫酸30~50ml,福尔马林10 ml,酒精(95%)10 ml,水1 000 ml 配成的溶液中加以保存。③保存黄色和桔红色标本的浸渍液。含叶黄素和胡萝卜素的果实如杏、梨、柿子、柑橘等,用亚硫酸溶液保存比较适宜。方法是将亚硫酸(含SO2 5%~6%)配成4%~10%的水溶液(含SO2 0.2%~0.5%)中[1]。总之,各种保色的浸渍液,除有些保存绿色的浸渍液外,保存其他颜色的浸渍液,效果都不理想。为了更好的显示植物病害的危害状,最好采用多媒体系统将其扫描或摄影,制作成相应的图片和视频进行保存。
2.2.2 防腐浸渍液。对于浸渍标本的保存来说,防腐是最重要的一个环节。因此,需要防腐浸渍液对其进行保存。主要成分如下: 福尔马林50 ml,酒精(95%)300 ml,水2 000ml,也可单用福尔马林和酒精。3 植物病害标本的保存 3.1 蜡叶标本的保存
3.1.1 散装标本。将干燥好的蜡叶标本放进消毒室或消毒箱内,传统的方法是用酒精、升汞液消毒,或将敌敌畏或四氯化碳与二硫化碳混合液置于玻皿内,利用毒气熏杀标本上的虫或虫卵,约3 d 后即可取出。有条件也在-40 ℃低温处理消毒。将消毒好的蜡叶标本鉴定、整理,然后装进标本袋中,贴好标签,以备实验课用作实物标本,供学生上课使用。
3.1.2 制作盒装标本。将植物病害症状典型的蜡叶标本和干燥的果实标本,可利用玻面纸盒的方法进行保藏。按照标本的大小,选择合适的纸盒(一般为长28 cm、宽20 cm、高1.5~3.0 cm),在纸盒中铺1 层棉花,棉花上放标本和标签,注明寄主植物、寄生菌的名称、采集时间等,然后加上玻盖。棉花中可加入少量的樟脑粉或驱
虫的药剂。这种方法制作的标本可长期保存,循环使用。
3.1.3 塑封标本。适合保存叶片标本和较小的茎秆(如小麦、水稻)标本。做法是:根据植物病害标本的大小选择适当的护卡膜,将1 张比护卡膜稍小的白纸放入护卡膜中,在白纸右下角写上该标本的标签,然后把标本放在白纸上摆好,再把膜放平,放入预热到160 ℃的过塑机封塑即可。如果标本较小、较窄,1 张纸上可放几个标本,可根据需要分类装订成册。这种方法做出的标本弥补了以上盒装方法存在许多缺点,如标本盒体积大,携带不便,造价较高,只能用肉眼和手持放大镜观察标本的局部,对细小组织和结构观察困难,标本易变色、发霉、受虫蛀、不耐贮存等。3.2 浸渍标本的保存
将已鉴别的标本适当处理后放在盛有保存液的标本瓶中,用蜡或火棉胶封口后,将标签贴在标本瓶上进行保存。由于浸渍液所使用的药品大都为挥发性的,或容易氧化,因此浸渍标本最好放在暗处,以减少药液的氧化,或瓶口因温度变化而造成破裂。4 注意事项
植物病害标本的采集受植物生长季节、气候条件、采集地点、采集时间及作物品种布局等多种因素的影响,要把握时机才能采到需要的症状典型的标本。另外,对于病害标本的制作,不同部位制作和保存的方法不同。蜡叶标本在保存过程中,要保持标本室的干燥才能防止发霉,但干燥标本易遭虫蛀,因此最好每年用甲基溴等药剂熏蒸,以保证标本的完好。浸渍标本保存液也要经常更换,以保证标本不腐烂。这样,逐渐积累和补充各种病害标本,才能使实验课程顺利进行,达到预期的良好效果。
昆虫标本制作方法
一、昆虫标本的干制法
1.用针刺晒干。用昆虫针由昆虫的胸部刺过, 插在软木板上。插人的针应当垂直, 插人的高度当用刺虫台校整, 自然干固。
2.粘虫纸粘固。较小的昆虫,如蚤、蚊等, 将其粘在粘虫纸上后,剪下纸块, 用
昆虫针刺在纸上固定晒干。
3.展翅晒干。翅较大的昆虫,针刺后常常两翅下落, 这时应使用展翅板, 将其两翅伸平并用纸条固定晒干。
4.去除内脏。对较大的昆虫,内脏极易腐败生霉, 应去除内脏。在腹或背侧开口取出内脏, 再用脱脂棉花加以充填, 并放人少量的苯酚,再用昆虫针从胸中刺人晒干。
5.填蜡法。对较大的蛾类幼虫, 在去内脏之后(去内脏时用注射器从肛门刺人把内脏全部吸除), 把化溶的石蜡用注射器从肛门注入其体腔内, 呈现原来的饱满状态。放人冷水中加以固化。
6.去脏烤干法。把昆虫的内脏抽出之后, 用二联球慢慢打人空气使之体腔充起, 外加红外线灯烘烤至干。
7.埋藏法。把昆虫经固定脱水之后, 用熔化的酒精松香稠液慢慢浇灌, 使昆虫被包埋藏在松香之中;另法是把昆虫脱水后, 用白明胶液包藏之。明胶液配法明胶加水和石碳酸, 用水浴法溶化后浇埋之。此外还可以用万能胶包藏, 效果较好。把脱水的材料放在白纸上用万能胶滴埋, 使其全部躯体都粘上胶, 待后再滴一次, 滴后应加罩防尘。这种作法效果较好,包埋极薄的一层胶, 不影响观察, 增加材料的坚固性能, 能防潮防霉。
二、昆虫标本浸渍法
1.福尔马林浸存法。用5%福尔马林浸泡。经3-5d后换液一次再移入5%福尔马林中保存。
2.酒精浸存法。用50%酒精固定12-24h后移入70%酒精中保存。
3.酒精甘油、甲醛甘油浸存法。将上二配方分别加20%-40%甘油效果更好。能增加昆虫肢足关节的柔软性,防治了单用酒精脱水变硬的缺点。
鼠类的标本采制和保藏
山西省农科院济经作物研究所
柳
枢
在进行鼠类区系、生态调查,灭鼠防治工作中,必须要做好一件事情,就
是收集标本材料,保存和制作好各种鼠类的标本,作为研究生物科学的证据,标本的形迹是最重要的记录材料,采集标本,鼠夹是最常用的捕鼠工具,种类型号很多,可根据鼠的活动特点
栖息环境以及鼠类的体型大小分别选用。为了不损伤被捕获的动物,也可选用各种捕鼠笼捕抓活体。此外,亦也有猎枪、小口径步枪猎取动物。在药物灭鼠现场则能收集妥善处理。尤其是动物疫病流行地区或不疑地区,在无十分安全可靠的消毒措施及手段时,不要随便进行采集。必须指出,在进行该项工作时,应穿戴防疫服装、鞋、袜等,以避被跳蚤等叮咬感染动物流行病。
(1)制作标本所需要的物品
1、消毒用品:氯仿、来苏儿、酒精、肥皂、洗涤剂等。
2、防腐剂:砒矾粉(配方:亚砒酸、明矾各半研制成细粉)或砒皂膏(配方亚砒酸五分之
一、樟脑五分之二,切碎的肥皂五分之二混合后加水煮成膏)樟脑或卫生球等。
3、工具和物品:熏桶、解剖刀、小剪刀、钳子、镊子、天平或小称、钢卷尺、铅丝(粗细根据标本而定)、木板、毛巾、棉花、针、线、标签、钢笔、铅笔、墨水、登记本、大头针等等。制作生态标本时,还要准备假眼等。
(二)剥制前的处理
对于获得的标本,务必置于鼠袋内并扎紧袋口,谨防鼠类体外寄生虫逸出。同时,使用标签注明采集地点、时间、原则上应以一鼠一袋为准。将带回的鼠体,首先放在熏桶内、倒入一定量的乙醚、氯仿或氰化钙,把体外寄生虫、蚤、螨等熏死和暂时麻醉,然后,用昆虫镊或密梳子清拣昆虫。捕获的活鼠可就地破坏延髓、压挤内藏、窒息等法处死。或置于密闭的容器内充以CO2窒息处死。对于获得的罕见鼠种,即使是幼鼠和有血迹污染,或稍有腐烂尸体,也要用布或滑石粉等擦洗干净,设法制成标本。经过上述处理的死动物,即可进行标本的测量,鉴定。
(三)外部测量与鉴别
已杀灭体外寄生虫的死亡动物,挑选毛皮、头骨、四肢及尾部完整的个体做标本。虽有损伤,但可能是稀有、珍贵或可疑的种类也应选取。选取的标本应先记录体重,以克为单位,然后进行外部测量。
外部测量以毫米为单位,取其整数即可。测量器械可用两脚规、钢卷尺、卡尺等。测量前,将鼠体仰放桌上或搪瓷盘内,取其自然姿态,若是僵死蜷缩的标本,应轻轻揉按直,其使恢复自然姿势。测定及记载项目包括:标本编号、采集地、日期、性别、体长、后足长、尾长、耳等(见图1)动物的雌雄鉴别,主要决定于动物的外生殖器结构,雌雄有发达的乳腺位于胸腹部和鼠鼷部两侧;雄性的睾丸自腹腔降落至鼠鼷部的阴囊里。
对于幼体发育不完全,上述特征不易看清,因此不易鉴别。一般说来,可根据位于腹部正中线后端的泌尿生殖乳头与肛门的距离长短而定,雄性比雌性距离为长。在上述方法皆无法鉴别性别或对于不熟悉的种类,可剖开腹部,通过内生殖器观察来判断。雄性可看到阴茎及睾丸,雌性可看到输卵管及子宫带。
(四)剥制方法
将鼠体仰放于平板上,用小剪刀或解剖刀轻轻沿腹部正中线,至生殖器前端切开表皮。
(不可用力过大,否则会切开腹肌露出内脏),在刀口处小心把两侧表皮与肌肉分开,直到膝关节,并推出后腿的膝关节用剪刀将膝关节处剪断。(如图2)为了使这项工作作得方便,把后腿足略微向里推一点,此时关膝弯曲,而关节上去了。清除大腿的肌肉,把皮翻过来使恢复原态。另一侧用同样的方法处理。
把生殖器及直肠与皮肤连接处切断,便可剥离尾部。以后修剪一下尾周围的结缔组织纤维,在此后用一只手的食指与拇指摄紧尾基部皮缘,缓缓紧拉,尾椎即可抽出(见图3)。切记不可用力过猛、否则尾椎会断。
尾部剥完后,继续脱袜子式的向前推脱,一直脱到前肢,从肩胛处切断。
头部剥皮比较复杂,应特别小心谨慎,以免碰伤皮肤或头骨。当翻至颈部上端时会遇到一层半透明的软骨膜,这是耳壳。将周围的结缔组织轻轻剥离,细剪着耳部的皮肤,再向前剥至眼部,要特别小心,切匆剥破。轻拉皮与头骨,可见到皮肤与眼球之间有一白色的园环,这就是眼脸。从脂白环与眼球之间小心剪开,继剥至吻部。先剥下唇,后剥上唇,至鼻端从鼻骨处切断。到此为止,鼠的尸体与鼠皮完全分开了。头胄由颈部剪下,系上与鼠皮和采集薄上的一致编号,另行处理。如果要剥制生态标本,头骨要保留在皮上。在上颔的鼻尖和下颔嘴唇的皮不要完全切开,适当的保留一点,由头骨后部剪下,把舌头、眼睛、脑浆挖出来,把头骨上的肌肉去干净。
(五)标本的填装与制作
1、固态标本制作法:首先把皮上残留肉和脂肪刮去,把破裂的地方要缝合好。将剥皮时留在皮上的四肢骨插上细铁丝,涂以防腐剂,用棉花缠在四肢骨骼上,使其如生活有肌肉那样丰满,取长等于尾尖到胸部的鸟羽轴或竹·签、铁丝等卷以适当的棉花插入尾鞘。然后把鼠皮翻过来,开始填装,填入的棉花应均匀不管装在什么部位,都要平而松软,与原来肌肉相似。填充完毕后,将上下唇缝合,再缝合腹皮。缝合时应注意要从里往外穿针,穿针时以免把毛带进皮的内面。由上而下先拉一针,然后再左右拉线。最后调整姿态,先用小镊子张鼓眼脸,两耳竖直,胡须摆正,将皮毛梳理好。标签一般系在右后腿上。四肢用大头针固定在硬纸板或木板上,固定时前肢并拢,脚掌向下,两后肢靠紧尾巴,足掌向下,尾平放于两后腿之间。而后分别在前飞后肢的掌部用大头针加以固定(图4)。在阴干过程中还要不断加以整形,直到干为止。
2、生态标本制作法:生态标本的制作法与固态标本相同,但是还需要用铁
丝支持其肢体,并按其生活时的姿态进行制作。铁丝的粗细应依动物个体的大小而不同。头部、前后左右附肢及尾部各用一根铁丝支撑。头部的铁丝先用棉花卷成与颈部原有肌肉粗细长短相同,其一端固定于头骨上。眼窝、吻部等除去肌肉的部分,用棉花填充塑成而与原形相似,将它放在头皮之内,按其原头部之形状矫正眼、耳、脸飞唇的位置。取两根细铁丝,一端由足底沿肢骨后侧插入肢内,外留一段为固定之用。穿人的铁丝沿肢骨弯曲,用线缚于骨骼上,外卷棉花以代替除去的肌肉。四肢皮肤翻回原状,但应注意不可扭转。尾巴的制法与固态标本同。先将头和前肢的铁丝在相当于肩胛骨外扭合,再将后肢和尾巴的铁丝扭合成适当的躯干支柱,腹内填充棉花,缝合切口。
将制成的生态标本,按所需求的姿态固定于板上或生境架上,整理眼睛耳朵、嘴唇位置,唇间填入适当的棉花或粘土,使它与原肌肉一样,胡须摆正,两耳竖直,眼窝内嵌入大小适宜的假眼睛。至此生态标本制作完毕。
假眼的制作有许多方法。小型鼠类的眼睛因其虹彩不大明显,可采用黑疙瘩钉。对于较大的鼠类,可采用彩色假眼,即用大小适当的半球形黑色飞玻璃体,或黑豆粒等。制作生态标本时,必须熟悉鼠类的生活习性和形态特征,这样才能制成如生的标本o
3、浸制标本制作:暂时性的保存野外捕获的鼠类或幼小的哺乳鼠,胎仔、生殖系统等资料,均可用浸制液保存。一般采得上述标本可直接浸于7 5%酒精,或5-10%甲醛(福尔马林)溶液,或两者各半的混合液中。对幼小鼠或胎盘内脏等,宜用较稀药液浸泡,否则,容易硬化。
体型较大的鼠体处死后,应将腹部剖开,使保存溶液易于渗透到内部,以免腐烂。
活的鼠类标本可不经杀死直接投入浸泡液中,待它死后固定变硬之前,将附肢及其它部分调整适当姿态,以便日后观察研究。
各浸制标本都应拴以标签,用铅笔写上采集时间飞地点、种类等。为防止保存液蒸发,装有浸制标本的标本瓶除加盖外,还需将盖缝四周以石腊密封。药液如变浑浊,要随时更换。
4、头骨的标本制作法:头骨是标本的一个组成部分,在分类签定中是不可缺少的。鼠类鉴别,主要是根据外部形态与头骨结构特征进行的。因此,制成剥制的标本,其头骨均应制成相应的头骨标本。
剥皮后的动物从颈部将头切下,用水蒸法将附在头骨下的肌肉煮熟后剥制干净,用小勺子或小镊子掏净脑髓,用刷子刷净后即成。较大的头骨附着的筋健不易熟烂,可少加些碱面。较小的头骨,用水煮时,时间不要过长,以免由于过于熟烂至头骨破碎。此外,小型头骨的制作也可采用生刮法或发酵法,即将头骨连同附带的肌肉浸泡于装清水的玻璃瓶中或埋在土中,数日后肌肉自行腐烂,然后用清水洗净制成完整的头骨标本,制成的头骨标本,如需漂白,可放于烈日下暴晒或在百分之二的漂白粉溶液中浸泡后清洗,即可达到标本漂白的目的。
(六)标本的保藏
标本是科学研究的资料和依据,也是生物教学的实物,需要长期保存,除应妥善管理不使损坏外,对原来头骨、皮毛及其它认为有研究、保存价值的标本亦
应成套保管,不能随便堆放。为了避免混乱,可在头骨标本的颅骨与下颌骨上分别标以同样的标号,在相配合的头骨、假剥制标本或毛皮上也应系上相同的标签。
标本应放置在通风良好,空气干燥的室内保存。为使毛皮标本不致蜕色,宜放于柜厨内避免阳光照射。存放标本的柜厨内应经常撒放樟脑以防虫蛀。标本室要定期用熏蒸毒剂处理,以防蛀虫。
浸制标本的保藏除以上所述外,亦应注意避光保存。