MaECM培养基-课题组选择在BM培养基加入10 μg-L雌激素和50 μg-L生长激素做后续的实验范文合集

第一篇：MaECM培养基-课题组选择在BM培养基加入10 μg-L雌激素和50 μg-L生长激素做后续的实验

MaECM培养基-课题组选择在BM培养基加入10 μg/L雌激素和50 μg/L生长激素做后续的实验

MaECM培养基-课题组选择在BM培养基加入10 μg/L雌激素和50 μg/L生长激素做后续的实验，命名为

MaECM(mammary epithelial cell medium)培养基。该培养基能够促进乳腺上皮细胞生长和阻止成纤维细胞的增殖，是适合筛选乳腺干细胞的培养基。

学术术语来源---

乳腺干细胞培养基的建立及有效性验证

文章亮点：文章的创新点在于筛选出MaECM培养基, 能够促进乳腺上皮细胞生长，阻止成纤维细胞增殖，是适合筛选乳腺干细胞的培养基。在MaECM培养基的基础上，证明了Sca-1+乳腺细胞具有干细胞的潜能。目前进行的乳腺干细胞研究，每次实验需要消耗20只鼠。课题在乳腺干细胞研究中仅用4只鼠就可以满足实验要求，减少了鼠的用量。一般培养的鼠乳腺细胞中含有大量与有些乳腺干细胞标记相同的成纤维细胞，难以将它们区分。大多实验室是通过贴壁时间不同去除成纤维细胞，但纯度难以保证。作者研发的鼠乳腺干细胞培养基可以有效抑制成纤维细胞的生长，提高制备乳腺干细胞的纯度。

关键词：

干细胞；培养；乳腺干细胞；成纤维细胞；Sca-1；乳腺干细胞培养基；国家重大科学研究计划(973)资助项目；863项目

主题词：

干细胞；乳腺肿瘤；成纤维细胞；培养基；荧光免疫测定

摘要

背景：干细胞培养基，尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。

目的：利用Sca-1+乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。

方法：用BM培养基培养乳腺器官样小体，6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选出MaECM培养基，培养乳腺细胞6 d后，免疫磁珠筛选Sca-1+和Sca-1-细胞群，流式细胞术分析Sca-1阳性细胞的纯度，1×104 Sca-1+或Sca-1-细胞种植在4只鼠双侧乳腺脂肪垫上，6-8周后取出乳腺脂肪垫，以卡红整体染色和苏木精-伊红染色分析长出乳腺的结构数量。

结果与结论：乳腺器官样小体用BM培养基培养6 d后，检测到大量Sca-1和vimentin阳性的成纤维细胞，说明BM培养基不适合分离Sca-1+乳腺干细胞。筛选出的MaECM培养基能够抑制成纤维的生长。磁珠筛选后，流式细胞术检测Sca-1+细胞在Sca-1+和Sca-1-细胞群的纯度分别是92%和5%。移植实验显示在8个种植Sca-1+细胞的脂肪垫生长出6个乳腺结构；而在8个种植Sca-1-细胞的脂肪垫中除1只鼠死亡，其余脂肪垫中均未长出乳腺结构。提示MaECM培养基适用于培养鼠乳腺干细胞。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程