从法医相关性昆虫体内提取人类DNA的研究进展

第一篇：从法医相关性昆虫体内提取人类DNA的研究进展

【摘要】本文从嗜血性昆虫、嗜尸性昆虫、嗜骨性昆虫及实验技术等多角度阐述了从法医相关性昆虫嗉囔中提取人类dna的可

行性及国际研究和应用进展。

【关键词】法医昆虫学；嗉囔；个体识别；dna

【中图分类号】d919．

1【文献标识码】b

【文章编号】1007—9297(2005)04—0308～0

4随

着分子生物学技术的发展，dna在刑事案件及

民事案件中发挥了巨大的作用。对于死亡重罪中的个

体识别及将罪犯与现场的关联方面．dna技术屡建奇

功。而在亲子鉴定，打击拐卖人口方面，dna技术也展

现了其非凡的魅力。目前较常见有从现场血痕、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及搔抓当事人时指甲缝中的残留物

中提取扩增dna。同时，作为新兴学科，法医昆虫学在人类dna的提取扩增中逐渐得以应用。

法医昆虫学是介于法医学和昆虫学的交叉学科，主要用于刑事案件中被害人死亡时间的推断(pmi)。

【作者简介】万香波(1980-)~j，河南西峡人，中山大学基础医学院法医病理研究生。tel：+86—20-33080271，e-mail：wan1712@eyou．com

[通信作者】王江峰，法医病理博士后，副教授；研究方向：法医昆虫学。

[基金项目】国家自然科学基金项目“基于嘈尸性昆虫的死亡时间推断”(基金编号：30100216)；广东省自然科学基金项目(基金编号：001386)

法律与医学杂志2005年第12卷(第4期)

目前法医昆虫学方法已被认为是腐败尸体死亡时间

推断最有效的方法。除此之外，法医昆虫学亦可用于

死亡地点、死者中毒情况甚至死者身份的判别。日常

临案工作常见的为嗜尸性、嗜血性昆虫。由于其在现

场取食尸体组织，叮吸当事人的血液，因而扩增其胃

肠道(即嗉囔)中未消化的人的dna、线粒体dna，则

可望成为谋杀、强奸等案件以及用于死亡时间推断的昆虫是否与被害人尸体相关中个体识别的直接证据。

嗉囔作为昆虫的食物储存器官而非消化器官。故而没

有蛋白水解酶的分泌。虽然昆虫在吞噬食物时其唾液

中有少量蛋白酶，但这种预消化对宿主dna的降解

很少。故而对嗉囔内容物中的宿主dna进行提取、扩

增则成为个人识别的理想底物。

一、法医相关性昆虫

(一)嗜血性昆虫

临案工作中常见的嗜血性昆虫为虱和蚊。由于其

常常从一宿主转移至另一宿主，因而使之成为强奸、谋杀等案件中当事人曾在案发现场的有力证据。

法医临案中常见的蚊为按蚊(diptera：culicidae)，最

初常用免疫学方法通过对血型的检验进行个体识别的粗筛以及确定被蚊吸食的脊椎动物的种系。[1,21随后的研究发现，用pcr方法从按蚊(diptera：culicidae)的嗉囔(blood mea1)中扩增宿主dna，其吸食血液后的消化时间在0，8，16，24，32h时与宿主dna的成功扩

增率在逻辑回归曲线上呈明显的负相关，且宿主dna

扩增的成功率在吸食后12—24 h时下降得最快(p=

0．001)。但通过对扩增的tc一

11、vwa两段短串联重

复序列(str)的观察发现，在上述任一时点嗉囔内血

量的多少对两位点的成功扩增影响不大，且在同一时

点，两位点扩增的成功率几乎相等(p=0．85)。此外，周围环境对蚊的消化速率影响较大，32cc时的消化速率

为22ci=时的两倍。通过在实验室温度为27℃、吸食血

液后最长32 h时仍可扩增出宿主dna的事实，可知

在温度升高或降低时其成功扩增的极限时间亦随之

缩短或延长。[31由此可见，由于分子生物学中pcr技

术的成熟，使微量dna的成功扩增成为可能。因而从

蚊的嗉囔中提取扩增宿主dna时，影响扩增成功与否的主要因素是吸食后的消化时间而非嗉囔内血量的多少。

寄生于人身上的虱分为体虱与头虱。replogle等网

最早于1994年从17只阴虱的排泄物中通过amp—

flp技术获得了人类特异性基因座d1s180及

humtho1，其与阴虱所寄生的宿主相一致，但是re—

plogle并未扩增出完整的dna。lord等[51在1999年

成功地从阴虱pthirus pubis(l)中分离、扩增出宿主的线粒体dna(mtdna)。人类线粒体dna(mtdna)位于

核染色体外，具有组织特异性，为共价闭合的环状双链

dna分子。没有重组、倒置、易位等突变现