第一篇:生物检验实习总结1
一、实习目的及单位概况
实习目的在我们即将毕业步入社会的前夕,为了检验我们所学的理论知识,达到理论联系实际的目的。学校组织毕业班的学生与本学期1——4周进行为期一个月的毕业生产实习。毕业实习是在完成全部基础课程和专业课程的学习后通过到企业生产环节的实践进一步巩固加深课堂所学过的知识。通过在工作单位进行实地的实践,更好的深化自己在学校所学的知识,锻炼自己,使自己能更深的了解社会,毕业时能更好的融入社会。而且,通过毕业实习,多掌握一些有用的技能,为下一步找工作做准备。
1.单位概况
本单位是国家设质量技术监督检验检疫总局的一个分支,下设各省县市区局,主要职能是:
(一)负责《计量法》、《标准化法》、《产品质量法》、《特种设备安全监察条例》、《棉花质量监督管理条例》等法律、法规及相关配套法规、规章的贯彻实施和行政执法;
(二)统一管理标准化工作。宣传贯彻国家标准、行业标准、地方标准并实施监
督;负责农业标准化的实施及其示范区工作;管理组织机构代码和商品条码工作。
(三)统一管理计量工作。推行法定计量单位,保障国家计量单位制的统一和量值的准确可靠;组织开展计量器具的强制检定和量值传递;查处生产和流通领域的计量违法行为,组织计量仲裁检定,调解计量纠纷。
(四)负责宣传贯彻GB/T19000-ISO9000系列标准,积极推进质量认证工作,并按省质监局的部署,对质量认证中介机构的行为和认证标志的使用进行监督。
(五)负责锅炉、压力容器、压力管道、电梯、起重机械、防爆电器等特种设备的安全监察和监督管理工作,依法查处各类违法行为。
(六)负责棉花等纤维质量监督工作,依法查处收购、加工、销售、仓储等环节的违法行为。
(七)负责质量技术监督行政执法工作。依法组织查处产品质量、标准和计量违法行为。受理消费者投诉和举报,受理工商部门移交的在流通领域查出的属于生产环节引起的产品质量问题,并依法组织查处。办理行政复议案件。承担市政府“打假办”的日常工作,组织协调本市的“打假”工作,完成市政府授权牵头的市场专项整治任务。
本单位主要职责是:建立、保存、相济使用本地区社会公用计量标准和质量检验设备装置,承担量值传递、强制检定、仲裁检定、委托鉴定、非强制检定、校准和检测任务。承担产品质量监督检验、委托检验、仲裁检定、新产品质量检定检验等多种产(商)品质量检验工作。
二、实习内容
通过国家或省制定的食品卫生检测标准,检测食品中各项化学物质或 元素的或微生物的含量以及 含量是否超标。例如酸牛乳质量检测标准:(1)感官检测(2)净含量(3)脂肪(4)蛋白质(5)非脂乳国体(6)总固形物(7)酸度(8)苹果酸(9)山梨酸(10)硝酸盐(11)亚硝酸盐(12)黄曲霉素M(13)大肠杆菌群(14)酵母(15)霉菌(16)致病菌(17)乳酸菌(18)铅(19)无机砷(20)标签.学习并掌握各项各项指标的检测。还有很多食品很多项,再次就不一一介绍了。
三、实习结果
我感觉通过这一个多月的学习,我基本掌握的检测项有:糕点的过氧化值检测,酸价,砷得测定,挂面烹调损失得测定,食品中脂肪的测定,食品中有机酸的测定,食品中蛋白质的测定,生活饮用水好氧量的测定,食品中淀粉的测定,等等
四、实习总结和体会
作为2009年的毕业生就业压力相较去年会更大了很多,我是一名生物工程系,生物技术及应用专业的大专毕业生。面对就业这个难问题深感其困难所在。一个偶然的机会可以让我在平顶山市技术监督检验测试中心实习,虽说在学校学习过可都是理论知识,并没实际操作过,心中始终有个心结又带着那样的迷惑,不安和好奇。
我在这一个多月里学到了很多书本以外的东西,任何一个企业都有它自己的企业文化,正是这种文化使大家得力量超一个方向使只要大家齐心协作没有办不了得事。提到协作就是要同事之间互相帮助。刚到单位我是一个没有任何工作经验的实习生,产生错误或者做的不到位的地方肯定是有的,但我要正视我的缺点,遇事不急噪要以温和的态度。
虽然实习结束了,但是我觉的该学得还有很多很多,从身边的每一个细小的事件上我们都能学到做人或者做事的经验。希望我的路会越走越好,希望朋友们的路也越走越好。记得奋斗!以后是我们的!
第二篇:生物材料检验
103页,1.苯的监测指标有哪些?哪些是有特异性的?
答:反,反-黏糠酸(t,t-MA)和苯琉基尿酸(S-PMA)是苯在机体内具有较强特异性和较高敏感性的代谢产物,与低水平苯暴露具有良好的线性相关关系,是较理想的职业苯接触生物标志物。尿酚仅适合作为群体苯接触程度的生物监测指标(非特异性)。呼出气中苯可以作为职业接触苯的确证实验。
2.尿中黏糠酸和苯琉基尿酸的测定方法有哪些?简述最常用方法的原理及注意事项?
答:气相色谱法,高效液相色谱法,气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱-质谱联用法。1.原理
终末呼出气样品(肺泡气)收集在50 ml呼出气采集管内,用氮气将样品吹入活性炭管内,使样品中苯吸附在活性炭上。280 ℃热解吸,氮气将释出的苯带入FFAP柱(改性的聚乙二醇)中,FID检测,保留时间定性,峰高或峰面积定量。2.注意事项
(1)采样应在无污染的室内进行;
(2)当回收率低于75%时,应检查是否需要更换活性炭。活性炭在分析前应按热解吸的条件活化一定时间,以除去活性炭所吸附的有机物。
(3)正己烷、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲苯、环己酮等均不干扰苯的测定。
3.甲苯和二甲苯的生物监测指标有哪些?为什么说马尿酸作为甲苯接触的生物指标是非特异性的? 答:终末呼出气中的甲苯和二甲苯均为特异性生物监测指标,尿中马尿酸作为甲苯接触的非特异性监测指标,甲基马尿酸是一个较特异性的监测指标。正常人尿中也含有马尿酸,但其含量水平因个体差异很大,主要影响因素有膳食及某些药物摄入(水杨酸类药物),另外,接触乙苯、苯乙烯、苯甲醛、苯甲醇、苯甲酸等有机物也会使人尿中马尿酸含量增高。4,简述监测尿中1-羟基芘和3-羟基苯并a芘的意义及常用的方法?
答:1-羟基芘是芘的代谢产物,尿中1-羟基芘的浓度可以反映人体接触环境中多环芳烃的水平,它不仅与环境空气中芘的浓度有良好的正相关,而且与BaP有很好的正相关,因此人尿中1-羟基芘是多环芳烃一个灵敏有效的生物监测指标。高效液相色谱法
测定方法有:
HPLC,最为常用,无论是对于单一的羟基多环芳烃如3-羟基苯并[a]芘,还是多种羟基多环芳烃的同时检测;GC-MS;HPLC-MS;超高 HPLC-MS ,ect.84页,第六章 维生素的测定
2.维生素D的生物监测指标是什么?为什么选择该指标?
答:首先在肝脏中羟基化,形成25(OH)D3与25(OH)D2两种形式的25(OH)D,其后在肾进一步羟基化生成有生理活性的1,25(OH)2D2和1,25(OH)2D3或无生理活性的24R,25(OH)2D。
由于血清中25(OH)D的生物半减期约为15~20 d,而1,25(OH)2D的生物半减期仅为4~8 h,血清中25(OH)D含量明显高于1,25(OH)2D,且后者的含量受到其他代谢过程的调控,已经确证维生素D缺乏的个体血清1,25(OH)2D含量水平可表现为正常甚至偏高。因此,比较而言,血清中25(OH)D的含量更适合作为评价人体维生素D是否缺乏的指标 4.什么是负荷实验?其作用是什么?
答:负荷实验是营养学中评价水溶性维生素营养状况的常用方法。未参与代谢的硫胺素及核黄素以原型或结合形式经尿排出,摄入后4小时排出量最大,以尿负荷实验后尿中硫胺素或核黄素含量分别反映人体这两种维生素的营养状况。
受试者清晨空腹排尿后口服5mg硫胺素/核黄素片剂,饮水200 ml以上,收集4h内尿液,尿中硫胺素含量:<100 μg为缺乏,100-200 μg为不足,>200 μg为正常; 尿中核黄素:<400 μg为缺乏,400-799 μg为不足,800-1300 μg为正常。
与其他水溶性维生素一样,超出组织需求无法在体内大量贮存,以原形或以脱氢形式随尿排出。因此,可通过负荷实验评价人体维生素C营养状况。
维生素C负荷实验:受试者口服维生素C水溶液(含维生素C 5mg),收集4h尿样,测定维生素C含量。
评价标准为:排出<5mg为缺乏,513mg为合格,>13mg为充裕。
第三篇:生物材料检验复习资料
生物材料检验:分析检验生物材料中化学物质及其代谢物的含量或因化学物质引起的的生物效应指标变化。
生物材料:是人体体液(如血液)、排泄物(如呼吸气、尿液)、毛发,指甲以及组织脏器等的总称。
生物标志物:指生物系统接触外源性物质后出现的一种变化。分为三类:接触性生物标志物、效应性生物标志物,敏感性生物标志物。
生物接触限值(BEL):大体相当于健康人吸入接触最高允许浓度的毒物时生物材料中被测物的水平。
尿液可分为全日尿,晨尿,定时尿和随时尿。
生物半减期:指进入生物体内的化学物质的里量通过各种途径消除一半所需要的时间,又代谢半减期。
一、检验方法的一般要求:
1.方法的一般要求
1)灵敏度选择符合生物监测的基本要求
2)操作简便
3)试剂易得、价廉
4)效率高
5)符合国情,易推行、推广 2.选择和建立生物检测方法必须考虑的因素: 1)被测成分
①
溶解性,稳定性 ②含量水平高g/L水平低ug/L 二、方法研制准则的基本内容
1.取样、运输、保存的原则
1)取样:(1)容器工具材质不干扰测定
(2)取样的操作要防止污染
(3)取样时间根据半减期判断决定
(4)取样的体积 尿液>=50ml 静脉血>=5ml 末梢血500ul
2)保存时间:一天,三天,一周,两周一般只要求两周 3)运输过程:保证分析物稳定,必要时要冷藏和冷冻运输
4)防腐剂(尿)和抗凝剂(血)
2.样品预处理原则
1)尿液浓度按比重校正 尿标准比重1.020,>1.030及<1.010的尿液应弃去
2)样品预处理的目的是消除干扰
(1)测定无机物时 ①用稀释液稀释后测定 ②混合酸消化
(2)测定有机物成分:先水解,再分离
(3)回收率>=75%
3.制定分析方法的程序
1)分析条件选择、优化
2)确定检出限
(1)影响检出限的因素:试剂的纯度,仪器的工作状态,电源稳定性光源的温度变化、污染等不可控制的因素。(2)检出限的确定
一般用统计法,一般用空白值的3倍标准差计算;色谱法用3倍噪音水平,检出限应小于0.3倍生物接触限值。(3)检出限的表示方法
浓度或绝对量表示,用浓度表示时要说明方法取样体积。
3)精密度 :同一个人用同一方法重复测定同一均匀样品测定结果的符合程度通常在线性范围内取高、中、低三个浓度水平分别重复测定3~5次。用RSD表示或用变异系数表示
复杂方法RSD<=20 简单方法<=10.4)准确度(1)分析高低浓度水平和国家级标准物质各一组,测定值应在标准值的不确定范围内。(2)用接触表样品的加标回收率表示
回收率>=75% 若>105%表明存在明显的系统误差。(3)用标准方法或权威方法比较:①两个方法均值相对误差应小于10% ②t检验 在确定一个置信水平条件,两方法测定无明显差异
5)干扰试验 :如果有干扰,要找出消除干扰的方法
6)样品的稳定性实验 :时间:当天,3天,1周,2周 温度:室温,普通冰箱冷藏(4℃),冷冻保存(-8℃),低温冰箱(-20℃)
4.方法的验证
1)新方法的验证:必须是另一单位①研制方提供方法所有技术材料
②验证内容:四项
线性范围,精密度,准确度,样品的稳定性。2)引进国外标准方法或权威方法,引进方就是验证方。
5.现场应用
①首先要观察检出率 ②观察检测结果与环境污染的符合程度 ③同时取非接触样品进行对照
三、确定生物监测指标的依据
(一)化学物质在体内的动力学过程
1.吸收
1)呼吸道吸收①气体物质通过肺泡壁及周围毛细血管吸收
②固体物质,溶解时吸收的前提
2)皮肤 ①有些有机物很容易被皮肤吸收 F=C/15 *(0.038-0.153p)exp(-0.016MN)F皮肤吸收量mg/㎝/h
2C化学物质在水中的饱和度mg/ml P辛醇-水的分配系数 MN相对分子质量 ②许多农药易被皮肤吸收 如有机磷
2.体内分压和贮存 1)起始主要分布于血液中最终分布取决亲和力 2)血液侧得量是反映新近吸收量或机体组织的水平3)血液中毒物或其他被测物并非均匀分布 4)一般脂溶性溶剂及卤代烃会分布在脂肪组织中,乳汁是检测有机氯农药最好的样品 5)体内储存毒物的形式大多为结合状态,测定尿液中的代谢物需要先水解
3.生物转化 1)概念:外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解产物的过程。2)有关生物转化的讨论 ①是毒物发生质的变化 ②生物转化的数量关系,个体差异很大 ③是一种动态过程,对时间的了解是确定采样时间的基础,生物半衰期。
4.排出
易挥发性有机溶剂从呼吸气中排出较多。长期蓄积的有机氯农药可从乳汁中排出及叮咛中排出,易代谢的有机毒物大多以结合态从尿中排出。
(二)、个体差异
1、毒物在生物体内的动力学过程有种属家族和个体的差异,其中生物转化过程变异极大;
2、生物监测的个体差异可用监测结果的变异系数表示;
3、个体差异降低了生物监测的精确性,却可帮助检出特殊敏感人群或耐受人群。
(三)、接触水平(剂量)—效应(反应)关系
1、是确定一次生物监测指标的关键依据;
2、生物监测结果与空气毒物浓度之间的相关资料,可作为选择生物监测指标的替代依据。
四、检验指标的选择与分类
(一)、选择的基本要求
1、特异性好;
2、具有良好的剂量—效应关系;
3、稳定性好;
4、有准确可靠的检验方法。
(二)、生物材料检验指标的分类
1、化学物质原形:①化学物质在生物体内不进行生物转化或转化速度很慢;②缺乏毒物代谢动力学资料;③代谢产物在体内没有特异性
2、化学物质代谢产物
3、生物效应指标。
五、样品的采集与保存
一)、生物材料样品的选择
(一)、种类及特点
尿液: 最常用的1)特点:采集方便、无损伤性、采集量大
2)适用性:水溶性化学物质、代谢产物、金属等
3)尿样的种类:(1)全日尿(24h尿)收集24h内的全部尿液,通常只用于住院病人
(2)晨尿 起床后、早餐前第一次排出的尿
(3)定时尿: 生物半减期 ①班前尿:第2个工作日上班前以内排出的尿 ②班中尿:上班2~3h以后排出的尿 ③班末尿:下班前1h内排的尿 ④班后尿:下班以后1h以内排出的尿 ⑤周末尿:连续工作第五个工作日的班末尿。 血液
1)特点:①成分较恒定 ②个体差异小 ③取样污染机会小 ④损伤性采集样品 ⑤血样贮存条件要求较高;
2)种类:①血清:不抗凝离心分离出的上层清夜 ②血浆:加抗凝剂离心分离的上层清夜 ③全血 ④红细胞。
呼出气
1)特点
①优点:操作方便、干扰物少,非损伤性 ②缺点:a、被测物的含量比较低
b、肺泡气中水分对某些测定有影响
c、肺部“死腔”中环境空气对肺泡气稀释不稳定,影响测定结果的解释;2)适用性 ①监测仅限于挥发性物质 ②主要用于测定化学物质原形 ③呼出气监测结果能反映采样期间车间空气的平均浓度;
3)呼出气的分类 混合呼出气、终末呼出气(肺泡气)第一阶段呼出的是空气,第二
阶段混合呼出气,第三阶段肺泡气。
(二)、生物材料样品的选择
1、同一毒物或代谢产物在不同生物材料其生物学意义不一样,血镉代表近期接触水平、尿镉反映长期接触的浓度;
2、选择生物材料样品种类的要求:①被测物有特异性 ②与外剂量有相关性 ③有足够的稳定 ④测定结果重复性好,个体差异在允许范围内 ⑤采样能被受试者接受;
3、尿、血、呼出气是目前较理想的生物材料样品,美国BEI55个尿58%、血27%、呼出气14%。
二)、样品采集、运输及保存
(一)、一般要求
1、采样时间:依据生物半减期;
2、采样环境:无污染;
3、采样容器:①测无机成分、塑料、高压聚合玻璃:硬质、石英
不锈钢含Cr、Ni、Mn(不能用于测此三种元素)使用前要求用酸液(稀HNO3)浸泡24h洗涤;②测有机物
玻璃、塑料(不能用橡胶和添加染料的橡胶)冷冻保存不能用玻璃仪器;
4、样品的运输与保存;
5、采样记录①编号②检验项目③受试者信息④采样信息:时间、地点、环境、过程。⑤采样人及记录人信息
(二)样品采集与保存
1、尿样
1)尿样的校正:(1)比重校正法 标准比重1.020 校正公式C校正=(1.020-1.000)/(d-1.000)*c=kc d的使用范围1.010~1.030(2)肌酐校正法.尿中被测物浓度(mg/g肌酐)=实测浓度(mg/L)/肌酐浓度(g/L),肌酐含量 2)采样.采集尿液不少于50ml,用顶空分析法测定挥发性物质时.收集尿样的容器要充满尿样并知道体积,记录2人上次排光膀胱的时间及采集样的终点时间。
3)储存.贮存一般2周.反腐 加酸.氯仿.冷藏测尿中汞或挥发性有机物要尽快测定要保存5天以上的,最好冷冻
2、血样
1)采集(1)、全血;要抗凝(2)、血清(血浆)或红细胞
2)注意事项 采集过程避免污染.毛细管血防止溶血.金属针头(取下)再挤出针管时不能太快取末梢血要避免挤压采集部位,自然流出弃去第一滴血④有三种情况不宜采集 毛细管血a血液量超过5ml.b采集环境有外源性化学物质存在c测定挥发性成分
3)血样的运输与保存 避免振动和温度的改变 血样冷冻肯定溶血采集血清或血浆时,应分离再保存 临时存放4℃过夜,长时间保存要冷冻
④测酶活性要采集后尽快分析
3.呼出气.1)采集方法:先深呼吸2~3次,再恢复正常呼吸时采集呼出气采集肺泡气只收集末端呼出气
2)注意事项:受检者必须时肺功能正常者 要选择对被测物吸附小的容器 要在正常呼吸状态下收集样品呼出过程不能有阻力 ④采样的时机要依被测物代谢速度决定
三、生物材料样品的预处理原则
(一)无机物分析的样品处理
1、稀释法.1).常用的稀释剂;1)稀硝酸液(尿),2)TntonX—100表面活性剂3)基体改进剂溶液 2).常用机体改进剂:硝酸盐(NH4+ Ni2+ Ca2+)磷酸盐(Na+ NH4+)3).应用实例 :磷酸铵,硝酸铵和TritonX-100可改善血清中铜锌的测定 磷酸氢胺,硝酸铵测定血铅可提高灰化温度至1000℃
硝酸镍可使测定砷和Se的灰化温度到1000℃
④磷酸铵可使测定Cd的灰化温度增至800℃
2、酸提取法
1.硝酸提取,测定血铅.6mol/L 硝酸离心取上清液。标准物质
被测成分的含量是已知的2,盐酸提取3,三氯乙酸(固体)。铁(有效)提取+2价铁
3、矿物化法(无机法处理)
(二)有机物分析的样品处理(p11)
第五节
铅
一、接触途径:铅矿,开采,冶炼
二、代谢物和生物监测指标
(一)动力学过程.1、吸收
1)呼吸道:铅尘烟蒸汽
2)消化道:铅尘
3)皮肤,无机物不吸收有机铅化合物可被吸收(四乙基铅)
2、分析:起始分布在血中有95%与红细胞结合最终主要以磷酸盐沉积于管中,其次是肝肾脑等
3、生物效应:抑制血红蛋白的合成
1)抑制5—氨基乙酰丙酸脱水酶,导致血尿中δ-ALA增加 2)抑制粪川啉元氧化酶
3)抑制亚铁螯合酶
4、排除:吸收的铅主要经尿排出,尿铅生物半减期较长。
(二)铅接触的生物监测指标
1、血铅:直接反映近期接触铅的情况
2、尿铅:反应机体中铅的负荷量,是铅中毒的辅助诊断指标
3、生物效应指标:1)尿中σ—ALA
2)血中铅原卟啉
三、样品的采集与保存——用于尿铅血铅的测定
1.尿样.①采样时间的限定
②随即采集一次尿样
③按1%比例加HNO3,4℃可保存两周。
2.血样.1)末梢血40 μL
2)静脉血
四、尿铅和血铅的测定——石墨炉原子吸收法
(一)尿铅的测定
1、原理:尿样用基体改进剂液稀释后直接进行测定,基体改进剂液NH4H2PO4+抗坏血酸
2、石墨炉升温程序——适用涂铜石墨管
①干燥~70℃,40S ②灰化 450℃,30S ③原子化
2000℃ 5S(停气)④清除 2200℃ 3S
3、石墨管涂钼处理,向石墨管中加20μL钼酸铵液,石墨炉升温程序①~③并重复10次升温,石墨管内壁呈灰白色
4、标准系列液配置
①铅标准系列液
②基体改进剂液(混合液)
③正常人混合尿 :
没有接触铅的健康人的尿,取2份,一份比重小于1.020,一份比重大于1.020,混合成比重为1.020的尿液
5、说明 : 1)基体改进剂液的作用 :本法选用4%磷酸二氢铵-6%抗坏血酸作为基体改进剂,能有效地克服基体干扰
2)背景吸收的扣除
①背景校正器扣除背景吸收,氘灯背景校正
②石墨管涂钼可降低背景吸收
(二)血铅的测定
1、样品处理:全血用TritonX-100液稀释,稀HNO3酸化,进样测定
2、石墨炉升温程序:
①干燥:75℃-100℃,10S(斜坡升温)②灰化450℃-500℃
30S 保持10S(斜坡)③原子化
2400℃
7S④清除
2500℃
3S
3、标准系列液: ①铅标准液②TritonX-100液③正常人血
五、生化指标的测定
(一)尿中σ—ALA的测定
1、原理:①σ—ALA可与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡咯化合物
②用乙酸乙酯萃取吡咯化合物③显色,加对一二甲氨基苯甲酸生成红色化合物λmax=554nm
2、操作要点: ①两份经稀释尿样——加PH=6缓冲液
②样品管加乙酰乙酸乙酯
③尿样空白管补充缓冲液
④各沸水浴10min
⑤各加4mL乙酸乙酯萃取
⑥离心、静置、分层
⑦取清夜显色10min后测定
(二)全血中游离原卟啉的测定
1、原理:①用乙酸-乙酸乙酯破坏红细胞②盐酸萃取原卟啉,测定荧光强度
2、样品处理: 1)样品:20μL血+0.1mL生理盐水
2)加硅藻土悬浮液,乙酸乙酯—乙酸液、振摇、破坏红细胞
3)离心,取上清液加盐酸萃取
第三节、镉
一、接触途径:①锌矿的开采及冶炼②工业上含镉材料的生产③农业上也有镉化合物的应用
二、代谢和生物监测指标
(一)代谢 1.吸收、呼吸道和消化道2.生物效应
急性中毒靶器官:肺
慢性中毒靶器官:肺、肾、骨
3.排出少量由尿排出,属于蓄积性元素
(二)生物监测指标
1、尿镉:只反映长期接触情况2血镉:只反映近期接触情况
三、镉接触指标的测定——石墨炉原子吸收法
(一)尿镉的测定
1、原理:用磷酸氢二铵液稀释,直接标准曲线法定量
2、石墨炉升温顺序
1)干燥0~100℃
30S(斜坡)
2)灰化
100~200℃
20S(斜坡)
400℃ 10S(阶梯)
3)原子化
1800℃
5S
4)清除
2000℃
3S
3、标准系列液:①镉标准液
②空白尿液
③基体改进剂液
④1%NH3
(二)血镉测定
1、原理:血样加稀HNO3离心,取上清液测定,标准曲线法定量
2、标准系列液
①镉血标准液 :抗凝小牛全血+镉标准液
②4%HNO3
第七节:汞
一、接触机会
①矿的开采与冶炼 ②电器和仪表制造 ③化学工业
二、代谢和生物监测指标
(一)动力学过程 1.吸收主要是呼吸道 2.分布 无机汞主要是肾、其次肝、脑 有机汞主要是脑 其次肝、胃 3.排出 尿汞 生物半减期2~3个月
(二)生物监测指标 1.血汞:反映近期接触无机汞的量 2.尿汞:用于诊断汞中毒观察驱汞疗效
三、样品采集、保存 1.尿样:①随机取一次尿样 ②加碱NaOH使浓度达到40g/L,4℃可保存2周 2.血 样 ①周末血 ②抗凝 4℃可以保存数天
四、尿汞的测定——冷原子吸收法
(一)碱性氯化亚锡还原法
1.原理:在碱性条件及有Cd存在条件下,高浓度的SnCl2将有机汞及无机汞还原成元素,用测氯仪测定
2.标准系列液的配置 ①汞标准液 ②基体尿液 正常人混合尿 ③NaOH液 ④DL-半胱氨酸 3.测定 将上述标准系列液加1滴磷酸三酯,加SnCl2-CdSO4液立即通入空气测定(载气)4.说明:①磷酸三酯 消泡
②Cd2+催化作用
③DL-半胱氨酸起稳定剂的作用,防止无机汞吸附挥发;还可使有机汞不分解
④测定读数:读取最大吸光度值
(二)酸性SnCl2还原法
1.原理:用KMnO4和浓H2SO4分解尿样,使汞都转化成Hg2+,用SnCl2还原成Hg,吹空气导入测汞仪
2.测定:尿液和标准系列液同样用KMnO4和浓H2SO4分解
3.说明:1)KMnO4和浓H2SO4加入的顺序:先加KMnO4液再加浓H2SO4 2)测定前先对气路系统进行净化;加SnCl2(酸性)测定空白水、吹气观察到仪器的响应值为零为止 每次测定都使响应值为0再测第二份
第三章:非金属化合物及其代谢产物 第一节:CO
一、代谢及生物监测指标
1.吸收: 呼吸道
2.生物效应:进入机体与血红蛋白结合形成碳氧血红蛋白(HbCO)形式导致机体组织缺O
2COHbHbCO
3.分布: 血液中HbCO形式
4.排出 呼出气 约有1%被氧化成CO2
5.生物监测指标 1)血中碳氧血红蛋白 2)呼出气中CO
三、样品的采集与保存
1.呼出气:1)采集班中(3h后)或班末呼出气
2)收集终末呼出气
2.血液:1)采集班中(3h后)或接触最高浓度时的血
2)抗凝
3)密闭保存 4℃ 11周 4)最好取静脉血 5)受试者不抽烟
四、血中碳氧血红蛋白的测定——分光光度法
+
1、原理:1)血中血红蛋白的四种成分:Hb、HbO2、HbCO、HbMet
SO2)HbCO,HbMetNaHb 3)测定Hb和HbCO吸光度,最大吸收波长分别为
223432nm和420nm
2、测定方法:
1)摩尔吸光系数的测定:用吸光系数代替
(1)过饱和HbO2液的制备,血样用水和Tris液适量稀释通入O2 30min(2)饱和HbO2液的制备:取(1)中2份通入N2
(3)饱和HbCO液制备 取(1)中2份,通入CO 10min(4)HbCO和Hb液制备 在(2)和(3)的溶液中加Na2S2O4固体
(2)Hb
(3)Hb,HbCO
(5)分别测定420nm和430nm吸光度作为吸光常数(有四个值)
SO2)血样测定 稀释血样Na224HbHbCO 分别测420nm和430nm的吸光度
3.计算 :碳氧血红蛋白(%)A430K2-A420K4A420(K2K4)A430(K1K3)
A420:血样在420nm吸光度 ;A430血样在430nm吸光度 K1、K2是HbCO在420nm、430nm的吸光常数 K3、K4是Hb在420nm、430nm的吸光常数
4.注意事项:
(1)所用氮气和氧气应为高纯度氮和高纯度氧,不纯氮和氧气中含微量的CO,能干扰测定结果
(2)连二亚硫酸钠遇水易分解,在空气中容易被氧化失效,应以小瓶分装使用,避免接触空气和水分
(3)测定吸光系数必须采用新鲜血液,一次测定值在仪器波长稳定的情况下可以使用一段时间,但还应定期核检。
(4)测试液应尽量避免接触空气,及时测定,否则会造成结果偏低
第二节
CS2
二、代谢及生物监测指标
(一)代谢
1、吸收:呼吸道、皮肤
2、生物转化
1)吸收后约70~90%转化为多种代谢产物
2)目前,接触者中尿中已确认的有3种:TTCA、2-巯基-2-噻唑啉酮-5,硫脲(其中TTCA研究较少,生减期为2h)
3)排出:a.代谢产物随尿排出 b.约20~30%以原形从呼吸道排出
c.约1%以原形从尿中排出
(二)生物监测指标
1、尿中TTCA:班末尿
2、呼出气中CS2,目前研究较少
三、样品采集与保存
四、尿中TTCA的测定——HPLC法
1、样品的处理:A、取离心后的尿样 B、稀HCL酸化:乙醚提取
C、离心分层,去上层醚液于试管中
D、40℃用N2吹干加20ul甲醇定容
2、说明:A、尿样经离心后取上层尿液,易于分离
B、此法从国外引进,将原来的梯度洗脱改为等度洗脱。国外的梯度洗脱是用两种配比的流动相切换洗脱
C、TTCA纯品需自己纯化
五、呼出气中CS2测定
(一)GC法
1、样品处理:(1)、呼出气中CS2浓度在测定范围内不需要处理,直接进样
(2)、呼出气中CS2低于测定浓度范围需富集,用Tenron GC管富集
2、色谱条件:固定相:OV-17;检测器:火焰光度检测器
3、说明:(1)采集终末呼出气,最后呼出的100ml
(2)TenronGC管:2,6-二苯基对苯醚的多孔聚合物,用于捕集/热解吸
(3)富集测定要求做富集空白测定:用180ml气体(冲洗气)注入空白Tenron GC管中,热解吸后测定
(二)检气管法:快速检测法
1、根据检气管中形成色带长度,粗略估计浓度
2、特点:操作简单、快速、成本低、精度差,相对偏差达20%-30%以上 第四章
芳香烃及其代谢产物 第一节
苯
一、代谢及生物监测指标
1、吸收:主要是呼吸道,其次是皮肤
2、代谢与排泄
1)吸入的苯约50%以上以原形从肺中排出,约10%以原形储存在有机组织中
2)约40%进入血液循环,在肝中代谢,代谢产物50%-70%的苯酚,6%为间苯二酚,2%为对苯二酚,还有极少量的粘糖酸等都以结合态从尿中排出 3)有极少量的苯以原形从尿中排出
3、生物检测指标:
1)尿酚
A、因正常人尿中很有酚且个体差异大
B、尿酚不是特异性指标 C、仅用于群检
2)呼出气中的苯:在测定尿酚以后,测定呼出气中苯作为确认试验 3)尿苯:1993年有人提出用尿苯作苯接触的生物接触指标,目前,还没纳入生物监测指标
二、呼出气中苯的测定——GC法
(一)原理:用塑料袋或采样管收集呼出气,呼出气用N2吹入活性炭管吸附(-78℃)280℃热解吸,用载气(N2)导入色谱仪,FID检验,通过六通阀切换完成
(二)苯标准气的配制:注入20ul苯于100ml玻璃配气瓶中,临用时从中抽取一定体积注入另一配气瓶中稀释成20ng/ml的苯标准气
(三)测定 : 1)取苯标准气(0.5、1.0、2.0ul)和样品分别注入呼吸气的采样管中
2)将采集管37摄氏度恒温2h
3)一端与六通阀连接,一端接N4)吹入冷阱(-78℃)中的活性炭管
5)热解吸导入色谱仪
三、尿酚的测定——GC法
1、原理:尿样加盐酸加热(90℃水浴)水解,再用乙醚萃取苯酚
2、尿样采集与保存:班末尿50ml
4℃
2周
3、样品处理与测定: 1)5.0ml尿样,1ml浓盐酸于具塞试管中,90℃水浴1h
2)、用3.0ml乙醚振摇萃取
3)取上层醚液注入GC仪
4、标准曲线:苯酚标准系列液用3ml乙醚提取
4、色谱条件(1)液晶柱分离
分离苯酚和邻间对甲酚。
(2)FFAP柱,分离苯酚和对甲酚
5、说明:(1)3ml乙醚萃取要避免乙醚挥发,分层后不是3ml,加乙醚补至3ml
(2)可用内标志法定量
四、甲苯、二甲苯
(一)代谢及生物监测指标
1)代谢
(1)甲苯 ①约15%~25%以原型呼出约1%从尿中排出
②约80%代谢甲苯→[O]苯甲酸→马尿酸
马尿酸排出的半减期为2~3人。
(2)二甲苯
①约5%原形从肺中呼出②60%~80%生物转化主要终产物是甲基马尿酸
2)生物监测指标
(1)甲苯①尿中马尿酸非特异性对群体判断有一定的定义②呼出气体中甲苯作为确认
(2)二甲苯 :尿中马尿酸正常人尿中无甲基马尿酸特异性指标
(二)、尿中马尿酸的测定—比色法
(喹啉 苯磺酰氯比色法)
(1)原理
(2)样品采集
两天后班末尿,按100+1体积比加氯仿
(3)样品处理与测定
(4)注意事项 :
1、试剂加入顺序不能颠倒
2、日光对显色有破坏作用要避光放置(加入苯磺酰氯后)
第四节 乙苯
一、代谢及生物监测指标
(一)代谢与排泄
1、只有少部分以原形从呼吸道排出。
2、70%以上代谢后随尿排出,主要代谢产物为扁桃酸60%苯酰甲酸25%
(二)监测指标:
1、呼出气体中乙苯
2、尿中扁桃酸(非特异性)
二、生物监测方法:
1、呼出气体中乙苯的测定GC法与呼出气中笨的测定类似
2、尿中扁桃酸的测定 HPLC法
内标法定量 内标物 4-羟基苯甲酸
第五章 芳香族硝基和氨基化合物
第一节 苯胺
一、代谢和生物监测指标
1、吸收:主要通过呼吸道吸收,很容易经皮肤吸收
2、代谢 ①主要代谢途径:苯胺—苯基羟胺—对氨基酚
②接触24h后,有15~60%转化为对氨基酚、以结合态随尿排出
3、生物监测指标:尿中对氨基酚
正常人尿中含微量对氨基酚平均3.7mg/L
二、尿中对氨基酚的测定
(一)盐酸萘乙二胺分光光度法
1、原理:①尿中对氨基酚经水解。萃取分离
②重氮化偶合显色。重氮化试剂:亚硝酸盐
偶和显色剂:盐酸萘乙二胺
2、操作要点
(1)样品处理:①盐酸酸化沸水浴水解约1人 ②萃取先用NaOH调中性,用乙酸乙酯萃取,再用盐酸溶液反萃取。
(2)重氮化偶合反映 ①重氮化,酸性条件下加过量的亚硝酸盐、反应10min
②除过量的NaNO2液加氨基磺酸胺溶液至无色气泡产生止放10min
③偶合反应显色:加盐酸萘乙二胺生成紫红色
(3)比色定量
580nm 尿空白管作参比,标准曲线法定量
3、说明:(1)尿样应采集班末或班后尿,采样前要询问受检者是否服用药物
(2)重氮化反应,NaNO2过量才能完全重氮化 但NaNO2对偶和显色有干扰
(3)重氮化反应应在尽量低温条件下进行,而偶合反应在60°为宜,水浴加
热前,偶合剂加入后充分混合(二)HPLC法
1样品处理:
(1)水解,同上法
(2)萃取
①先在酸性条件下用乙酸乙酯萃取 ②再在中性条件下用乙酸乙酯萃取对氨基酚(两次萃取除杂质)
2、说明:P96 用磷酸氢二钾(弱碱)调节PH值
第二节:硝基苯
一、代谢产物和生物监测指标
1、吸收:很容易从皮肤吸收,主要从呼吸道吸收。
2、代谢:代谢产物有硝基酚和氨基酚还有少量苯胺,对硝基酚13—16%,对氨基酚10%。
3、排出:①代谢产物与葡萄糖醛酸和硫酸结合,随尿排出。②少量以原形级微量本案随呼出气排出。
4、生物监测指标
尿中对硝基酚(特异性)
二、尿中对硝基苯酚的测定
P98
(一)、邻甲酚分光光度法
1、原理:①尿样经酸水解。②苯取 先用混合有机溶剂取,再用氢氧化铵溶液反萃取。③还原
用三氯化钛将其还原成对氨基酚。④邻甲酚显色
蓝色600nm比色定量。
2、样品处理:1)水解 盐酸酸化沸水浴1h。2)萃取 先用异戊醇—石油醚—乙醚萃取,再用3mol/L氯水反萃取。
3、显色测定 ①先加邻甲酚,再加三氯化钛溶液。②立即振摇至黄色沉淀变成淡黄色沉淀,过滤③30min后600nm测定吸光度。
(二)HPLC法
1、样品处理 1)水解同上法。2)萃取 二氯甲烷萃取3次定容至20ml。
2、说明
1)尿液采集后,尽快加盐酸,10c以下运输。2)流动相配比和流速可根据仪器性能调整。
第三节:三硝基甲苯
TNT
2,4,6—三硝基甲苯
一.代谢 1)经氧化还原化合等途径代谢。2)以还原代谢途径为主,主要代谢物4—硝基—2,6—二硝基甲苯。3)各种代谢产物以结合态随尿排出。二.生物监测指标
4—A 三.GC法测定尿中4—A
o
1、样品处理:1)盐酸酸化沸水浴1h。2)萃取代谢 加固体碳酸氢钠调PH7—8用甲苯萃取(尿样1ml,甲苯1ml)2.色谱条件:
1)检测器 ECD
2)固定相:OV—17(固定液)
3)柱温 220℃
程序升温效果更好
200℃(0.4min)10℃/min
220℃
5℃/min
240℃
第六章:卤代烃化合物及其代谢产物的测定 第一节:氯乙烯
一、代谢
1)经呼吸道吸入大部分以原形从呼吸道中排出
2)少部分在肝脏转化①先转化成一种致癌活性物环氧氯乙烯
②在甘光甘肽或半胱氨酸参与下最终代谢物为亚硫基二乙酸(硫代二乙酸)
3)少量的氯乙烯以原形随尿液排出
二、生物监测指标:尿中硫代氯乙酸,呼出气中氯乙烯很少作为检测指标
三.GC法测定尿中硫代氯乙酸
(一)原理 ①尿样经酯化后水蒸气蒸至近干 ②甲醇—乙醚溶解其中的硫代二乙酸 ③酯化 重氮甲烷酯化 ④火焰光度计监测
(二)样品处理: 1)1ml尿液加0.1mlHCl酯化 2)瓷蒸发皿水蒸气蒸干至结晶状态 3)甲醇—乙醚溶解残渣,上层夜转入离心管混水浴浓缩至1ml
(三)酯化 :(通风柜中进行)亚硝基甲脲与氢氧化钠溶液反应生成重氮甲烷气体导入样液酯化溶液至浅黄色为止,在放置10min,最终用甲醇定容。
(四)注意事项?
第三节:三氯乙烯和四氯乙烯
一、代谢与生物监测指标
(一)代谢 1.三氯乙烯 1)吸入约20%以原形从肺中排出 2)有50—60%储存在体内(蓄积性)3)大部分在肝中转化成三氯乙酸和三氯乙醇还有少量一氯乙酸 4)脱离接触50h后,尿中三氯乙酸浓度达到最高。2.四氯乙酸 ①约98%经肺排出 ②约2%代谢转化成三氯乙酸
(二)生物监测指标 1.三氯乙烯:①尿中三氯乙酸和三氯乙醇联合作为三氯乙烯接触的生物监测指标 ②呼出空气中三氯乙烯特异性指标
2.四氯乙烯:①尿中三氯乙酸 非特异性 ②呼出空气中 特异性
二、尿中三氯乙酸的测定
(一)顶空GC法
三氯乙烷
1、原理 ①在密闭顶空瓶中 三氯乙酸②抽取顶空气注入气相色谱仪 ③FID检测 内标法定量 内标物为正丁醇
第七章:农药接触指标的测定
第一节、有机磷农药 二代谢和生物监测指标
(一)、毒性效应 抑制胆碱酯酶的活性造成乙酰胆碱过量,导致胆碱能神经过度兴奋,使中枢神经系统紊乱
(二)、胆碱酯酶
1.真性胆碱酯酶
1)指的是乙酰胆碱酯酶和红细胞胆碱酯酶 2)主要存在于神经组织和细胞中 3)对乙酰胆碱有很高的特异性 4)在血中活性占80%以上
2、假性胆碱酯酶 1)指的是血清胆碱酯酶 2)存在于血清中 3)是非特异性胆碱酯酶 4)在血中活性约20%
(三)生物监测指标 :血中胆碱酯酶活性——效应性指标
(三全血中胆碱酯酶的活性测定)(1)三氯化铁分光光度法
乙酸+胆碱
1.原理:①乙酰胆碱NH2OH酶②剩余的乙酰胆碱与羟胺反应 乙酸胆碱
FeCl3OH-乙酰羟胺
红色物质 520nm测定吸光度标准曲线法定量 ③显色 乙酰羟胺
2、标准系列液——乙酰胆碱标准系列液
3、样品处理及测定
1)样品处理:①将A、B两个样品管37℃水浴5min ②向A管加入乙酰胆碱标液1ml,37℃水浴中精确反应30min(每隔10min振摇一次)取出 ③立即向A、B管各加胆碱羟胺液4ml ④再向B管加乙酰胆碱标液1ml
2)测定 向A、B管及标准管各加盐酸(1+2)2ml 加2ml FeCl3液振摇过滤 520nm测定吸光度
4、计算:被水解的乙酰胆碱吸光度=AB-AA以此吸光度(差值)查标准曲线得到被水解乙酰胆碱量(μmol)此值为40ul血37℃反应30min胆碱酯酶活性绝对值(G)
全血胆碱酯酶活性(μmol/ml)=c/0.04(绝对值)
全血胆碱酯酶活性相对值(%)=C/正常人血胆碱酯酶活性
5、注意事项:P116(2)DTNB分光光度法 : 硫代乙酰胆碱试剂测定血清中酶活性
第四篇:病原微生物检验实习总结
病原微生物检验实习总结
大三下学期5月份,我们动物检疫专业的同学开始了为期2个多月的教学实习,在众多辅导老师之中,我有幸跟随我校动物科技学院预防系的赵宇军教授进行学习。实习的地点就在我校动科楼的微生物实验室,以前我们曾在这里上过实验课,所以并不陌生。这次大家来到实验室为自行选择课题进行相关实验操作,我对世界闻名的金黄色葡萄球菌非常感兴趣,在老师的带领下进行了相关食物中该菌的检验。下面我们来回顾这次实验。
一、实验内容:食品中金黄葡萄球菌的检测方法
金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌,也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。本菌广泛分布于自然界,如空气、土壤、水及其它环境中。在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中,也经常有本菌存在。据报导,在正常人群中的带菌率可达30%~80%,其中皮肤带菌率为8~22%,鼻腔和咽喉部等上呼吸道的带菌率在40~50%以上,因此其可通过各种途径和方式,尤其是经工作人员的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黄葡萄球菌能产生肠毒素,故一旦细菌污染食品,并在合适的温度环境下,细菌可以大量繁殖并产生肠毒素,从而引起消费者食物中毒。
由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒,在世界各国都极为普遍。特别是在北美及欧洲等地区发病率更高。在上述这些国家中,每年有金黄色葡萄球菌引起的食物中毒病例,仅次于沙门氏菌,而在细菌性食物中毒病例排到第2~3位,有此而造成的经济损失也相当惨重,在我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒病例也时有报导,所以目前世界各国都把金黄色葡萄球菌列为食品卫生的法定检测项目。
我国对金黄色葡萄球菌目前采用的方法是以国家标准GB.4789-10-84及检验检疫系统行业标准SN.0172-92作为依据。整个检测过程获得最终结果须时5天左右,既费时又费力,并造成货物积压,也影响货物的及时出运,并使货主的仓储成本提高,造成较大的经济损失。多年来很多食品微生物实验室都在探索和寻找一些准确性高,并快速的检测方法,最近我们分别从美国3M公司和法国生物梅里埃公司获得两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基,其名称为:
① Petrifilm RSA.Count Plate(由美国3M公司研制生产),是一种薄膜型快速检测金黄色葡萄球菌的计数平板。
② Baird-parker + RPF Agar.(由法国生物梅里埃公司研制生产的用Baird-Parker琼脂加免血浆纤维蛋白原的金黄色葡萄球菌检测计数平板)。
二、实验原理:
Petrifilm.RSA.测试薄膜是由二部分组成。第一部分是由黄金色葡萄球菌培养基片,此培养基中含有经修正的Barid-Parker,营养成分加上以冷水可溶解的胶质。第二部分是一种耐热核酸酶(TNase)反应片,含有DNA及甲苯胺兰(Toluidine Blue-O)及四唑指示剂(Tetraeolium)。此指示剂有助于菌落的计数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。
耐热去氧核糖核酸(deoxyribonulcas Dnase)为产毒金葡菌之典型特征,此酶非常耐热,在100℃加热30min,不易丧失活性,在130℃之下,其D值为16.6min,此酶之分子量为16800,等电点PH为9.6,耐热去氧核糖酸与检测血浆凝固酶相似,是一种鉴定金黄色葡萄球菌的方法,在Petrifilm.RSA 检测片上,耐热DNA酶反应看起来,呈粉红色环带包围着一个红色或兰色的菌落。
Petrifilm.RSA检测片,必须与Peyrifilm耐热核酸酶反应片一起使用,单独使用将不会显示菌落,因为具有辅助计数菌落的指示剂是在反应片上,而不是在Petrifilm.RSA检测片
上。
Baird-parker + RPF agar,这一培养基中含有丰富的营养成分,其中以氯化锂代替亚碲酸钾,使菌落颜色呈黑色,RPF补充有兔血浆和牛纤维蛋白原,以便检测凝固酶活力,胰酶可以抑制全部或部分围绕凝固酶阳性菌落周围沉淀晕环纤维蛋白的溶解,因此凡存在血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌,将在培养基中呈现有晕环的黑色菌落,即可确认,并作计数。
三、实验步骤
材料和方法:
本次实验采用以下3种试剂:
1.美国3M公司提供的Petrifilm.Rapid.S.aureus Count Plate.2.法国生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar.3.实验室自配Baird-Park琼脂(英国Oxoid)及新鲜兔血浆。
菌种来自美国菌种保存中心(America TyP Culture Collection)。金黄色葡萄球菌共10株菌株,其菌号分别为:
ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704
ATCC(K)12600 ATCC(R)65389 ATCC 25923 ATCC 29213
ATCC 8095 ATCC 12598
非金黄色葡萄球菌菌种5株,其菌号分别为:
ATCC 51813(大肠杆菌)、ATCC 624(无乳链球菌)、ATCC 51816(阴沟肠杆菌)、ATCC 6051(枯草杆菌)、ATCC 49214(肠炎沙门氏菌)、自然食品检样,任意购自市场。本次实验是以同一测试样品经均质并通过无菌生理盐水作10倍递增稀释后取1至2个稀释度同时接种上述三种培养基作平行实验,在取得最终结果后相互进行比对。
上述三种培养基的接种方法是按生产商所提供的使用说明进行操作,另外Baird-Parker Agar 培养基是按SN0172-92标准进行操作。
A、本次实验共测试已知标准菌种共15株,其中葡萄球菌10株,其他菌种5株(包括大肠杆菌、阴沟肠杆菌、肠炎沙门氏菌、枯草杆菌和无乳链球菌)。
B、测试自然食品检样共101只(其中包括肉11只、肉类14只、水产品17只、牛奶25只、蔬菜22只、豆制品12只)。
四、实验结果:
A、被检菌种10株,金黄色葡萄球菌在三种培养基上都能检出生长情况良好,同一稀释度的菌液,除个别菌株外在3种培养基计数检测结果基本都在一个数量级上,无显著差异。而5株非金黄色葡萄球菌的菌株在三种培养基上全部不能生长。
B、自然食品检样共接种101只,每一检样同一稀释浓度分别同时种三种培养基,最终共检出金黄色葡萄球菌45只,占全部检样的44.5%,其中Petrifilm RSA 检出阳性结果为42只,占全部阳性检样的93.3%,Baird-Parker+RPF Agar.检出阳性结果26只,占全部阳性检样的57.7%。Baird-Parker.Agar 检出阳性结果32只,占全部阳性检样的71.1%。
五、实验讨论
1.用15株标准菌在3种培养基中的检测,10株金黄色葡萄球菌以同一浓度接种,结果生长良好,其最终计数基本一致,定位在同一数量级,5株非金黄色葡萄球菌接种上述三种培养基全部不长,说明上述三种培养基对金黄色葡萄球菌选择良好。
2.以101只自然样品同一均质稀释液,同时接种三种培养基,从最终结果来看,对金黄色
葡萄球菌的阳性检出率为44.5%
3.从检测程序来年,Petrifilm.RSA及Baird-Parker+RPF.Agar.都在样品接种后28~30h观察结果,并不必再做证实试验,而如以Baird-Parker Agar检测,须在接种后48h观察平板,并挑取可疑菌落转种到营养肉汤中,在经18-24h后做血浆凝固酶或耐热DNA酶试验进行证实,最终计数,前后约须80h。
4.从本次试验中观察,使用上述三种培养基对食品中金黄色葡萄球菌含量的直接计数检测,其样品接种液的含量拟控制在100个/ml以内,比较容易分清并计数,如菌量过浓,则将会影响最后的读数,因此对新送的被检样品,如在不了解污染的情况下一般必须要做2个以上的稀释度,同时分别接种,才能获得较为满意的结果。
而在Baird-Parker+RPF Agar及Baird-Parker.Agar接种时必须将1ml样液作三只平板涂布(0.3、0.3、0.4ml)这样就会造成手续繁琐试剂消耗较大,但Baird-Parker.RPF.培养基也可以1ml样液作倾注培养,并作计数。
5.在整个测试过程中,我们发现,按使用说明对Petrifilm.RSA.及Barid-Parker+RPF.Agar,操作规定在接种24h后观察结果,此时往往由于菌落长得经较小,特征瓜不明显,但如果继续放置一夜以后金葡萄菌落特征明显,并可能会经第一天观察数量有所增加,这样可以提高检测结果的可信度。
6.由于对上述两种培养基的试用期间我们尚未获得供应商的报价,故无法测算每一样品的测试成本价格。但可以予计上述两面种快速检测培养基的耗材费用要高于常规经典方法(Baird-Parker Agar)的费用。
7.通过本次实验,我们感到使用美国3M公司生产的Petrifilm.RSA Plate培养基和法国生物-梅利埃公司生产的Baird-Parker RPF.Agar培养基检测中的金黄色葡萄球菌。可以比目前常规检测方法时间可缩短一半。并可以明显节省大量人力。这完全符合实验室快速检测的要求,尤其是对基层较简陋的实验室条件中,更显其使用方便的优越性。
实习总结:通过这次严谨而生动的实验实习,为我们先前在教学中学习到的知道提供了一个实际的操作实施平台,也为今后在这方面检验技术的工作起到了指引作用。在过去的学习中,我们并不了解具体的病原微生物实验室检验技术的具体流程,注意事项等等非常关键和必须的防御手段。通过上学期生产实习,使我们对以前所不熟知的问题有了深入的认识,也对目前的情况有所思考和感悟。在我看来,动物检疫人员在我国国民生活中起到了关键作用,民以食为天,没有认真负责的实验检测,将给社会带来巨大的饮食灾难,为此,我感到非常自豪和骄傲。在今后的工作学习中,我将一如既往的认真下去,无愧自己的职责和称号。
在此感谢我的院各级领导,特别是我的指导老师赵宇军教授。
2010年7月
第五篇:医学检验实习总结.
医学检验实习总结
自2009年12月22日到xx医科大学附属医院实习以来,实感时间之匆匆,不经意间就到了毕业的时候,六个月的实习生产,锻炼了我许多,面对走向社会,自己对自己有了更深的了解,自己有信心走向社会。
在大学三年半的理论学习中,深知自己的学习方法有问题,算不上一名合格的学生;自达去年年底走向实习点后,在带教老师的悉心指点下,自己一步一个脚印,尊敬同事,刻苦钻研,在不断的操作中逐渐对理论有了跟深刻的认识,虽然和优秀的毕业生相比,自己还有一定的差距,但和过去比比,确实进步了好多,逐渐热爱上了医学,更加喜欢上了医学检验这门学科。
附属医院是一所三级甲等医院,医学实验中心除拥有国内先进的检验仪器外,更有一直团结向上,严谨求实的科研队伍。在日新月异的科技水平面前,更需要一种永不满足的求知精神。医学实验中心是医技科室,它在医院中占有举足轻重的地位。医学实验是疾病诊断的侦察兵,准确的实验无疑是医疗的保障,这就要求实验人员有严谨的态度,科学的作风。
医学检验人员不仅仅是一名技师,他应更向临床检验医师方向发展,承担起报告单的解释,参与临床医生的查房,向医师提供必要的治疗建议,成功地医治好病人。
医学实验中心工作任务繁重,责任大,人员少,无疑实习生有跟多的机会接触实际操作。自2008年12月22日下实习点后,前前后后共轮转了十三个临床实验室,切切实实体会到了检验人员的责任,工作的压力。
医学检验学的发展与自然科学的发展息息相关。随着科学技术的不断发展,医学检验学的内容也逐步深化和拓展,是医学检验学由单一学科发展成为一个拥有临床检验基础,临床血液学检验,临床微生物学检验,临床免疫学检验,临床生物化学检验,分子诊断学等众多亚学科的科学。其检验技术也日新月异,从定性到定量检验,从手工检验到自动化分析,从常量标本一次检验一个项目到微量标本一次检验多个项目,从有创伤检查到某些无创伤检查等。目前医学检验学已经成为发展最为迅速,应用高精尖技术最为集中的学科之一,并与其他学科一样成为临床医学中不可缺少的一个分支或学科。
医学检验是一门涉及多专业,多学科的边缘性学科,是基础医学与临床医学的桥梁学科,也是临床医学在诊断,治疗,判断愈后和预防等方面的实用性学科。现代医学检验学包含了检验技术和检验项目在临床上的应用两方面的内容。其基本任务是运用物理学,化学,生物学,免疫学,自动化检验等技术,对人体的血液,体液,排泄物,分泌物和脱落细胞等标本进行实验室检查,以获得病原体,病理变化和脏器功能状态等资料,为疾病诊断,治疗,观察病情,判断预后提供依据,并结合病史资料,体格检查和其他各种辅助诊断资料,进行综合分析,以达到明确诊断,及时治疗和制定预防措施的目的。
医学检验学是技术性很强的学科,除了掌握基本理论和基本知识外,必需熟练掌握各种检验技术,做到技术熟练,操作规范,这样才能为诊断和鉴别诊断疾病提供准确可靠的资料。理论联系实际,除了掌握基础医学和临床检验技能外,应对疾病的发生,发展有充分的了解,却是掌握检验结果在诊断与鉴别诊断中的应用,并运用循证检验医学的观点筛选检验项目,为临床医师当好参谋,为病人减轻负担,变被动检验为主动检验。并不断采纳具有最佳临床价值的金标准检验项目和检验方法,为临床提供更为有效的信息。由于机体反应不尽相同,疾病的病理生理变化又十分复杂,不断变化。同时,检验方法本身也存在灵敏度和特异度等差异,其检验结果也有一定的局限性,这样可造成不同疾病出现相同检验结果或相同疾病出现不同的检验结果的现象,对分析病情和诊断疾病造成一定困难。因此,分析检验结果时必需结合临床表现和其他资料,只有综合分析才能做出符合临床实际的合理解释。
医学检验学所进行的工作是一项细致,严肃的工作,无论在进行临床检验,还是进行科学研究,都必须由良好的职业道德和工作热情,力求细致认真,一丝不苟,规范行事,为临床诊断和科学研究提供有效准确的检验结果和资料,决不能因一时的疏忽大意,差错,造成病人永久的痛苦或死亡。
作为合格的检验技师,应能自如地面对不断变化的机遇与挑战,不仅要了解和掌握医学检2验学的技术和方法,还要掌握其临床应用价值,为临床提供咨询服务,并积极参与临床讨论,与临床医师一起选择检验项目,评价检验的价值,共同提高医学检验水平。所以,我们必须积极地投生到我国医学检验的改革和发展中去,认真学习,努力钻研,不断进步,为我国医学检验学的发展和进步而贡献力量。