第一篇：电镜演讲稿
据统计，中国拥有地球上 7%的耕地，但化肥使用 量 却 是 全 球 总 量 的 35%。我国化肥的平均利用率仅35% 左右，近年来由于不合理、过量施用化肥，多数耕地已出现土壤板结、盐渍化现象；研究表明，我国每年用于农田的氮肥，约有 17.4 万吨流失，而其中一半的氮肥从农田流入江河湖海，不仅造成资源的浪费，水体污染；而且水域富营养化，赤潮爆发，水生植物的肆意生长，使得水生动物窒息死亡，腐败污染水体；水体中的微生物利用腐败水生动物营养大量生长，使得湖泊变臭、变绿；间接影响到饮用水。因此，现在亟需新的快捷、高效、无污染肥料替代化肥。///随着科学的进步，生物有机肥对作物的施用价值，引起了众多学者的关注和重视，并就其生产方法、发酵工艺等方面开展了相应的研究工作，也使得生物有机肥逐渐成为国内外研究的一大热点。作为一种新型肥料，指经生化处理的有机肥添加功能性菌种的一种绿色环保型有机肥料，它综合了有机肥和复合微生物肥料的双重优点，兼具着高效、稳效、长效等三效结合的特点，具体表现为以下几方面：生物有机肥富含有益微生物菌群，环境适应性强，以发挥出种群优势，如含有发酵菌和功能菌，则具有营养功能强，根际促生效果好、肥效高等优点。生物有机肥同样富含生理活性物质，生产生物有机肥需将有机物发酵，进行无害化、高效化处理，产生吲哚乙酸、赤霉素、多种维生素以及氨基酸等生理活性物质。这些物质的存在可明显改善土壤的理化性质和生物学特性，又由于生物有机肥对作物品质的改善主要表现在维生素c和b胡萝卜素的增加、硝酸盐含量的降低，特别是口味和外观品质更好，因而能取得较显著的经济效益。所以，研究、开发并合理施用生物有机肥料不仅是获得作物优质高产和提高土壤肥力的重要措施之一，也是保护生态环境、促进农业可持续发展的必然趋势，///目前对生物有机肥的研究主要集中在不同原料的选取和特定发酵工艺的优化以及对相应作物施用效果上，对于生产的原料主要有禽畜粪便、城市有机垃圾、农业有机废弃物，其中又以对禽畜粪便的研究最为常见，其次是城市有机垃圾和农业有机废弃物。比如陶德祥等人将猪粪、保温垫料、生产生活垃圾集中进行生物发酵, 生产出优质、高效、无异味的有机肥, 广泛应用于蔬菜、果树、花卉、粮食作物等无公害种植, 取得投资少、见效快、效益高的好成绩。李东权等人以城市有机污泥为发酵底物，利用重金属固定等关键技术，再增加蘑菇棒、茶叶渣等有机物，经过严密的工艺流程后，把污泥变成了有机无机生物三维复合肥。成功的为污泥资源化利用打开了广阔的市场前景。林先贵等人利用优选获得的微生物菌剂快速发酵农余固体有机废弃物生产有机肥，并进行温室及大田的肥效试验。结果表明施用经微生物菌剂发酵制备的有机肥较非菌剂发酵有机肥更能促进作物生长，增加产量，有利于改善作物品质(降低作物硝酸盐、亚硝酸盐含量)，且可在一定程度上增加作物的抗病性。他们研制生物有机肥有个共同点，都是以堆肥法为主要生产方法。//意义本研究得到的微生物液体肥料，一方面缓解了环境压力，另一方面使鱼粉发酵成为供给植物营养物质的肥料，而且合理施用生物有机肥有利于土壤板结状况的缓解的潜在能力。在一定程度上克服了有机肥料生产周期长、肥效作用慢、化肥残留严重的问题。对工农业发展具有良好的促进作用，而用发酵法生产有机肥还有着巨大的潜力，深入研究寻找更有效的有机肥还是非常有意义的。而且生物有机肥在作物增产和品质改善等方面具有重要的积极作用。根据估计，若我国微生物肥料的产量占化肥产量的 3%，则粮食产量可增加50亿～10 亿kg，而我国现有微生物肥料的年产量仅300 万 t，只占化肥产量的 0.5%，可见生物有机肥的发展具有非常好的前景。
//本研究的目的在于利用有效的菌种筛选方法分离获得混合发酵鱼粉生产有机肥的复合菌株，根据单一发酵试验和响应面法的使用最终确定和优化发酵培养基及发酵工艺条件，研究了混合发酵工艺生产有机肥的效果，并通过农田及与其他生物有机肥的对比施用试验，检验了本研究生产的生物有机肥的肥效和特性，从而为生物有机肥在农作物种植培育方面的应用推广做进一步的技术和理论指导奠定基础。
这是具体开展的研究内容我将它概括成了一条技术路线： ①本实验先使用从土壤、腐败鱼体、微生物肥料中分离得到的所有菌株作为产酸性蛋白酶的菌群，并对其进行生理生化及分子生物学鉴定。以酪蛋白平板作为酸性蛋白酶初筛培养基，利用三角瓶固料复筛培养基对形成透明水解圈的菌株进行复筛，通过福林酚法测定酸性蛋白酶活力，选定相对高产的酸性蛋白酶混合菌株作为后续发酵菌群。
②然后对摇瓶发酵培养基及最佳发酵条件深入研究，从碳氮比、初始PH值、培养温度、发酵时间及接种量等发酵过程中几个重要的影响因素入手，以游离氨基酸含量为考察指标，通过单因素实验，研究这些因素对混合菌株产酸性蛋白酶能力的影响,并对其中影响较大的因素采用响应面法进行分析，建立二次多项数学模型得到响应面立体图,优化后得到混合菌株的最佳的发酵工艺条件和最优的发酵培养基组成。
前期的摇瓶发酵为工艺放大提供了一定的依据，摇瓶发酵中接种在底物中的微生物在一定的转速下，可与空气充分接触，而在发酵罐中，微生物与空气的接触面积相对减小，溶氧量变少，故对于发酵罐放大发酵转速的研究十分必要。同时，由于大型发酵罐相对于摇瓶发酵，与外界接触面积减少，对复合菌种的呼吸作用产生一定的影响，导致菌种的生长略缓，代谢能力下降，为避免此现象，不仅需要在转速面改进，接菌量方面也需探究。发酵罐发酵以鱼粉为底物，鱼粉含有丰的蛋白质，但是碳类物质含量较少，发酵过程中会产生碳源供给不足的情况，为此于碳源补料也需进行研究。而料水比、温度、p H 三因素在工艺放大之后，推测无较大影响。所以对于发酵工艺放大的探究，主要从转速、接菌量及碳源补充方面进行研究。
③最后依靠筛选得到的复合菌株以鱼粉和基肥为主要发酵底物在特定条件下进行有机肥混合发酵生产实验，研究了混合发酵工艺生产有机肥的效果及其在农业方面的施用的情况。
能够有效地提高肥料利用率，调节植株代谢，增强根系活力和养分吸收能力。由于大量使用化肥导致土壤和地下水污染，出现空气污染以及生物品种数量的改变，影响生态环境的事件不断发生。随着土壤问题的日趋凸显，大家对有机肥的重视程度也越来越大。
农业生产中化肥和农药的使用量逐年增加，引起土壤退化、生态环境恶化等问题，对农产品安全和农业可持续发展构成威胁和挑战，但为微生物肥料的研究和开发带来了很好的发展机遇。生物有机肥是指一类含有活微生物、具有肥料效应的特定制品。
近半个世纪以来,我国化肥用量呈现出大幅上升的趋势。虽然化肥有效地保证了粮食的安全,但是也引起了一系列的生 态问题。为了解决这一问题,需要采用一种新型的肥料替代传 统化肥,生物有机肥属于一种新型肥料,兼具复合微生物肥料 以及有机肥的优势,推广生物有机肥对于促进农业可持续发展 有着重要的意义
意义本研究得到的微生物液体肥料，一方面缓解了环境压力，另一方面使鱼粉发酵成为供给植物营养物质的肥料，而且合理施用生物有机肥有利于土壤板结状况的缓解的潜在能力。在一定程度上克服了有机肥料生产周期长、肥效作用慢化、化肥残留严重的问题。对工农业发展具有良好的促进作用，而用发酵法生产有机肥还有着巨大的潜力，深入研究寻找更有效的有机肥还是非常有意义的。微生物肥料在作物增产和品质改善等方面具有重要的积极作用。根据估计，若我国微生物肥料的产量占化肥产量的 3%，则粮食产量可增加50亿～10 亿kg，而我国现有微生物肥料的年产量仅300 万 t，只占化肥产量的 0.5%，可见微生物肥料的发展具有非常好的前景。
由于不合理、过量施用化肥，多数耕地已出现土壤板结、盐渍化现象；研究表明，我国每年用于农田的氮肥，约有 17.4 万吨流失，而其中一半的氮肥从农田流入江河湖海，不仅造成资源的浪费，水体污染；而且水域富营养化，水生植物的肆意生长，使得水生动物窒息死亡，腐败污染水体；水体中的微生物利用腐败水生动物营养大量生长，使得湖泊变臭、变绿；间接影响到饮用水。因此，现在亟需新的快捷、高效、无污染肥料替代化肥。随着科学的进步，微生物肥料对作物的施用价值，引起了众多学者的关注，目前已成为国内外研究的热点.由于化肥农药的长期高量施用，现在已严重威胁到农田的质构，土壤板结问题突出，水土流失严重，农作物的营养价值降低，残留引起的食品安全问题甚嚣尘上。随着食品营养学的发展，越来越多的人开始关注绿色食品的生产和发展。随着科学的进步，微生物肥料对作物的施用价值，引起了众多学者的关注，目前已成为国内外研究的热点
半个世纪以来，我国化肥施用量大幅度增长，在保证粮食安全方面发挥了重要作用。但由于化肥的过量施用引起肥料利用率低、生态环境恶化等一系列的社会问题。为了减少化肥施用量，提高肥料利用率和缓解化肥对环境的污染，迫切需要研制作为一种新型肥料来替代部分化肥。生物有机肥是多种有益微生物菌群与有机肥结合形成的新型、高效、安全的微生物—有机复合肥料。它综合了有机肥和复合微生物肥料的优点，能够有效地提高肥料利用率，调节植株代谢，增强根系活力和养分吸收能力。因此，研究、开发并合理施用生物有机肥料不仅是获得作物优质高产和提高土壤肥力的重要措施之一，也是保护生态环境、促进农业可持续发展的必然趋势
生物有机肥料是指以畜禽粪便、秸秆、农副产品和食品加工的固体废物、有机垃圾以及城市污泥等为原料，配以多功能发酵菌种剂加工而成的含有一定量功能性微生物的有机肥料。它既不是传统的有机肥，也不是单纯的菌肥，是二者的有机结合体 微生物肥料发酵工艺
生物技术的不断发展，促进了传统有机肥制备技术与现代生物技术的有机结合。微生物肥料发酵工艺通过将单一微生物或复合微生物菌剂接种于有机物料与填充料，然后经发酵而生产微生物肥料。这种工艺可以人工接种功能强大的发酵菌群，利用微生物的代谢活动来分解物料中的有机物质，使物料达到稳定和无害化。为加强发酵能力，可以引入一些能分解纤维素和半纤维素的微生物，如木霉属微生物；为除去发酵过程中的恶臭味和减少营养物质的流失，可以接种放线菌、EM菌剂等。此外，根据需要还可以加入具有固氮、解磷、解钾等功能的复合微生物菌剂等。目前，市场上已开发了多种用于制备有机肥料的微生物菌剂。采用发酵法制备微生物肥料，可以利用现代微生物技术，根据需要选择菌种或进行菌种组合，能大大缩短发酵周期，满足不同要求；还可以针对特定植物和功能要求设计开发精细产品。
本研究的目的在于利用有效的菌种筛选方法分离获得混合发酵鱼粉生产有机肥的复合菌株，根据单一发酵试验和响应面法的使用最终确定和优化发酵培养基及发酵工艺条件，研究了混合发酵工艺生产有机肥的效果，从而为生物有机肥在农作物种植培育方面的应用推广做进一步的技术和理论指导奠定基础。具体开展的研究工作如下：
①本实验使用从所购置的生物有机肥中分离得到的所有菌株作为产酸性蛋白酶的菌群，并对其进行生理生化及分子生物学鉴定。以酪蛋白平板作为酸性蛋白酶初筛培养基，利用三角瓶固料复筛培养基对形成透明水解圈的菌株进行复筛，通过福林酚法测定酸性蛋白酶活力，选定相对高产的酸性蛋白酶混合菌株作为后续发酵菌群。
②对发酵培养基及最佳发酵条件深入研究，从碳氮比、初始PH值、培养温度、发酵时间及接种量等发酵过程中几个重要的影响因素入手，以游离氨基酸含量为考察指标，对应的设计几组单因子对比实验，研究这些因素对混合菌株产酸性蛋白酶能力的影响,并对其中影响较大的因素采用响应面法进行分析，建立二次多项数学模型得到响应面立体图,优化后得到混合菌株的最佳的发酵工艺条件和最优的发酵培养基组成。
③依靠筛选得到的复合菌株以鱼粉和基肥为主要发酵底物在特定条件下进行有机肥混合发酵生产实验，研究了混合发酵工艺生产有机肥的效果。
优点 增施有机肥和生物肥。有机肥和生物肥含有大量有益微生物，对病害，特别是土传病害具有一定的拮抗作用。
化肥的缺点和危害，引出生物有机肥，介绍其特点优点、作用，进而抛出课题的研究方向和具体内容，化肥的过度施用产生的影响，提出应对措施，顺理成章的带出生物有机肥，然后就其优点优势作一番介绍，并对它的应用前景进行展望。
前期的摇瓶发酵为工艺放大提供了一定的依据，摇瓶发酵中接种在底物中的微生物在一定的转速下，可与空气充分接触，而在发酵罐中，微生物与空气的接触面积相对减小，溶氧量变少，故对于发酵罐放大发酵转速的研究十分必要。同时，由于大型发酵罐相对于摇瓶发酵，与外界接触面积减少，对复合菌种的呼吸作用产生一定的影响，导致菌种的生长略缓，代谢能力下降，为避免此现象，不仅需要在转速面改进，接菌量方面也需探究。发酵罐发酵以鱼粉为底物，鱼粉含有丰的蛋白质，但是碳类物质含量较少，发酵过程中会产生碳源供给不足的情况，为此于碳源补料也需进行研究。而料水比、温度、p H 三因素在工艺放大之后，推测无较大影响。所以对于发酵工艺放大的探究，主要从转速、接菌量及碳源补充方面进行研究。
目前在农业部获得产品登记证的生产企业达120 多家，年产量约 200 多万 t，已具备一定的生产规模。这些企业的生产起点较高，年设计生产能力多是中型(2 万～3 万 t)或是大型企业(3 万～5万 t)，也有部分超大型(5 万t以上)生产企业。吉林省及东北地区大约有 20 多个中小规模生物肥生产厂家，但由于各个厂家的生产条件、技术水平及生产工艺的差别，生产的产品质量不尽相同，也还没有形成产业化，远远满足不了生态农业和绿色食品的需要。破坏生态系统自我调节能力，造成环境严重污染
生物有机肥是多种有益微生物菌群与有机肥结合形成的新型、高效、安全的微生物—有机复合肥料。
我觉得这块市场非常大，国外生物有机肥已有80多年的历史，而我国在这块还很落后，为什么我国出口国外的粮食会出现退货的情况，就是因为种粮食施用了太多的化肥。生物有机肥是纯天然的化肥，无污染、残留期短。
本实验通过筛选具有高效分解鱼
类下脚料功能和消除土壤板结功能的菌种，并对其组合发酵过程进行优化，探索最佳的发酵条件，制备出含氮丰富、具有解磷解钾功效的发酵液，可进一步用于开发液体微生物肥料。
1对市售微生物肥料、土壤和腐败鱼体中分离得到的微生物菌种（保存于本实 验室）进行单一发酵试验、解磷解钾固氮试验、拮抗协同试验，筛选出适合发酵鱼类下脚料的菌株，并对其进行形态学、生理生化性质、分子生物学鉴定。
2、对筛选出的菌株进行混合扩大培养条件的研究，以 OD600值为评价指标，确定复合菌种扩大培养的优化条件，包括培养基配方、p H温度、转速、接菌量。
3、在单因素试验的基础上，以发酵液总氮含量为考察指标，通过单因素、正交试验确定复合菌种发酵的优化工艺，包括料水比、p H、温度、转速、接菌量。
4、利用 7.5 L 发酵罐、50 L 发酵罐、1 吨发酵罐进行发酵工艺的放大试验，为进一步研究提供一定的试验支撑和理论依据。
第二篇：电镜演讲稿
在这项研究中，David Julius及同事将低温电子显微镜与脂质纳米盘技术相结合，获得了处在一个膜双层中的辣椒素受体TRPV1的结构。他们的结果揭示了脂质和配体调控的机制
两项研究分别对大鼠TRPV1闭合和开启状态下的结构研究，结果表明，TRPV1有一个独特的双门通道激活机制，结果表明，TRPV1有一个独特的双门通道激活机制。这两项研究是由加州大学旧金山分校凯克先进的显微镜实验室和加州大学旧金山分校生理学系分别独立完成相关文章发表于2013年12月04日的《Nature》杂志上。
在两篇相关联论文的第一篇中，Maofu Liao 等人获得了大鼠TRPV1(辣椒素受体——辣椒素是辣椒中的辛辣成分)在一个“封闭”状态下的高分辨率低温电子显微镜结构。该结构总体上与电压门控的离子通道的结构相当相似，但有TRP通道特有的几个结构特点。
在第二篇论文中，Erhu Cao等人发表了大鼠TRPV1在一种肽神经毒素(Resiniferatoxin)存在时和在辣椒素存在时的结构，从而提供了该通道激活状态的结构。对闭合和开启状态下的结构所做比较显示，TRPV1有一个独特的双门通道激活机制。
结构生物学，发表来自美国加州大学高分辨解析细胞膜通道如何开放关闭的结构，显然十分精彩。两篇《Nature》论文报道了分辨率为 3.4 埃的 TRPV1 蛋白的结构。第一篇《Nature》文章描述了 TRPV1 处于静息状态时的结构，蛋白质结构研究的手段主要有三种——X 射线晶体学、磁共振和电子显微术，在目前获得的近1500 个膜蛋白结构当中，90% 以上的都是由X 射线晶体学得到的。然而，随着低温电子显微三维重构技术在近5~10 年来的飞速发展，用低温电镜来观察和研究膜蛋白(特别是膜蛋白复合体)的结构和动态变化开始受到青睐，可以预见，在未来的5~10 年内，将会在越来越多的膜蛋白结构研究报道中出现低温电子显微技术的应用。今天《自然》两篇结构生物学研究就是采用的低温电子显微镜技术
为解析TRPV1的结构，Liao等只采用单颗粒低温电子显微镜，充分利用多种先进技术。首先用分子生物学技术建立一种结构较小但稳定性更好的大鼠TRPV1分子，然后把纯化的TRPV1分子导入脂质体以维持通道的稳定性和水溶性，用可直接探测电子的照相机采集数据，用最先进计算机程序，通过统计学方法估计颗粒方向并计算出精确的分子结构。他们通过该技术获得8.8 Å分辨率的显微镜下分子结构，并最终获得3.4 Å局部高分辨率结构。这一结构足够识别氨基酸残基链和β折叠，可识踪蛋白的骨架多肽。过去采用该技术对TRP通道研究只能达到15–19 Å的分别率。因此这是单颗粒低温电子显微镜技术上的一次里程碑意义的研究，在使用该技术研究复杂大分子结构方面也具有划时代意义。更重要的是，该研究中高分辨率区域接近与分子中心。
目标蛋白是热敏感TRPV1离子通道，（在疼痛和热知觉中起中心作用的一种蛋白质的结构）这个通道全称为瞬态电压感受器阳离子通道子类V，成员1。TRPV1是一个配体门控非选择性阳离子通道，可被各种外源性及内源性理化刺激激发，如物理的刺激(温度、机械力等)和化学刺激(pH 值、信息素等如温度超过43度、pH值低、内源性大麻素、花生四烯酸、乙醇胺、N-花生四烯酰基多巴胺和辣椒素等。这一通道广泛存在于酵母到人类等多种物种，在人类存在于中枢神经和外周神经系统，在痛觉传递和调制，整合各种同疼痛信息等方面发挥重要作用。一篇的重点是结构描述和热敏感位点
此次报告的目的在于带大家认识一种极具应用和发展潜力的技术-冷冻电子显微学技术，以及对最近来自加州大学旧金山分校的程亦凡研究组因该技术在生物大分子结构解析方面取得的重大突破而发表在nature杂志上的一篇通讯文章做简要的介绍。冷冻电镜作为一项生物物理学技术，如今的应用已是越来越广泛，特别是近些年来，由于最新的信号探测器的应用，以及单颗粒三维重建算法的革新和不断改进，冷冻电镜技术取得了飞跃式的发展。通过该技术解析得到的生物大分子结构可以在单分子条件下达到近原子分辨率(<4 Å)水平。随着越来越多具有重要生物医学功能的蛋白质及其复合体的高分辨结构被解析出来，冷冻电镜技术正在逐渐引发一场结构生物学革命，并引起全世界的关注。//提到了冷冻电子显微学技术，那么什么是冷冻电子显微学？它与其他强大的解析技术相比有何优势？又是根据什么原理制成的?//梁天鑫同学之前在其原理优势方面已经讲的挺详尽，挺到位的，对此我就不再赘述，不过我想在她的基础做一点小补充，就是：//利用冷冻电镜技术进行三维重构的主要方法：其中电子晶体学方法较多用于一些膜蛋白结构的解析，其解析的结构可以达到很高的分辨率，但要得到蛋白的二维晶体仍然是一个非常具有挑战性的工作。电子断层成像主要是通过获取同一区域多个角度的投影图来反向重构所研究对象的三维结构，适合于在纳米级尺度上研究不具有结构均一性的蛋白、病毒、细胞器以及它们之间组成的复合体的三维结构.虽然目前电子断层成像所获得的结构的分辨率（约4～10 纳米）但是还是不能与其他两种技术相比，单颗粒分析方法:适用于具有结构同一性的样品，通过采集大量单个颗粒的二维投影图来重构三维结构，是冷冻电镜三维重构发展最快也是最主要的结构解析方法。//为解析TRPV1的结构，Liao等只采用单颗粒低温电子显微镜，充分利用多种先进技术。首先用分子生物学技术建立一种结构较小但稳定性更好的大鼠TRPV1分子，然后把纯化的TRPV1分子导入脂质体以维持通道的稳定性和水溶性，用可直接探测电子的照相机采集数据，用最先进计算机程序，通过统计学方法估计颗粒方向并计算出精确的分子结构。他们通过该技术获得8.8 Å分辨率的显微镜下分子结构，并最终获得3.4 Å局部高分辨率结构。这一结构足够识别氨基酸残基链和β折叠，可识踪蛋白的骨架多肽。过去采用该技术对TRP通道研究只能达到15–19 Å的分别率。因此这是单颗粒低温电子显微镜技术上的一次里程碑意义的研究，在使用该技术研究复杂大分子结构方面也具有划时代意义。这篇文章主要内容就是有关单粒子分析法在trpvI结构方面的解析,他们这个项目研究对象TRPV1，TRPV1是第一个以近原子分辨率被cryo-EM成像的小蛋白,在近几年也算是一个研究热点吧，大家主要是从它与中药止痛及尤其介导的生理病理机制方面的研究相对较多，所谓的TRPV1，是一种在疼痛和热知觉中起中心作用的蛋白质结构，这个通道全称为瞬态电压感受器阳离子通道子类V，成员1。TRPV1是一个非选择性阳离子通道，可被各种外源性及内源性理化刺激激发，如温度超过43度、低pH值、内源性大麻素以及花生四烯酸等，又因为辣椒中的辛辣成分—辣椒素也可使其活化,因此TRPV 1又被称为辣椒素受体。这一通道广泛存在于酵母到人类等多个物种中，主要表达于背根神经节和三叉神经节的小型神经元中，在痛觉传递和调制，整合各种同疼痛信息等方面发挥重要作用。这些是通过单粒子电镜技术得到的结构图像，其中小c是三张放大后的2维四聚体通道结构，小d至小f是经三D重构后分别从不同角度得到分辨率为3.4埃的离子通道蛋白立体结构，从宏观的角度看，TRPV1像大风车的形状，有一个处于敞开状态的细胞外口，它是由一个被认为是电压感应区的跨膜阿发螺旋S1—S4结构域组成，在跨膜阿发螺旋S1、S3、S4域上存在着一个疏水芳环层，这个芳环层使得Y44、Y441、Y554等氨基酸残基被小分子非芳香族残基取代进而形成了多个的微小孔道结构（具体是如何实现取代的过程该文并未给出解释），而且在赋予跨膜阿发螺旋S1—S4结构域以一定刚性的同时在某种程度上可帮助S4—S5 linker的移动来调整TRPV1离子孔道的闭合状态，在TRPV1被激活过程中它始终是保持静止的，另外，在其外表面上具有亲脂性配体如辣椒素和树胶脂毒素等的结合位点，在其内侧是由一个跨膜阿发螺旋S5—P—S6域构成，这个结构长得有点像倒置帐篷的形状，实际是一个凹形环内加一个空隙螺旋结构组成，这两种跨膜结构域主要是通过与膜呈平行关系的螺旋S4—S5linker连接在一起，当深入孔道时，他们发现了一个很短的选择性过滤器，其上的骨干羰基或侧链紧密地分布于中央孔道内，分子模拟预测，直径一般在6埃左右，且会随着TRPV1通道的激活而变大，这是TRPV1亚基结构细节，具体的，由TRP domain基因片段表达翻译形成的蛋白结构如图所示，TRPdomain它是由21—25个氨基酸残基组成，参与通道蛋白的组装过程，在这个结构域中心附近的一个W697氨基酸残基与处在主链上的一个F559氨基酸残基形成了一个氢键，此图旋转90度角后得到preS1的螺旋立体结构图，他主要是依靠氢键和盐桥与TRPdomain发生相互作用，再就是在该离子通道中存在有6个锚蛋白序列，其中四个处于氮端一侧，余下两个在碳端上，两者经由一条贝塔链连接在一起，而这条贝塔链与linkerdomain上的反向平行贝塔结构在离子通道的形成中扮演着重要的角色，锚蛋白序列是由内阿发螺旋与外阿发螺旋组成，其中ANK3、4的内阿发螺旋与3股碳端的贝塔折叠发生了相互作用，使通道蛋白浸在细胞质中这一部分牢牢的被包裹在了一起，并且他们还发现了ATP被结合在由ANK1—3形成的凹面上，可稳定ARD的折叠结构，对通道蛋白的调节具有重要的作用 在生物学功能中起关键性作用，如信息传递，神经传导，研究离子通道的结构对理解生物学功能及基于功能的药物设计是具有重要意义的。由于离子通道开放的时间很短（由毫微秒到毫秒），很难用X射线晶体学来研究其结构。应用冷冻电镜技术，可将分子冻结在不同的功能状态，因而可研究这些不同状态的结构。
它是一种采用cyo-EM技术，首先要将感兴趣的蛋白质放置在一种水溶液中，然后在非常薄的冰层中冻结蛋白质，其速度非常的快以致水根本没有时间形成结晶。而至关重要的是这种冰仍保持在一种玻璃状态，因为形成任何的冰晶体都会损害嵌入在冰内的蛋白质，干扰测定天然构象中的蛋白质结构就像困在琥珀中的昆虫一样，多个拷贝的蛋白质悬浮在这一玻璃状冰中，研究人员捕获了多达10万幅图像，然而组合成千上万的二维图像进行计算生成了蛋白质的三维结构。
意义：意义：这一研究对深入开展类似离子通道结构的研究具有促进作用，由于TRPV1等离子通道和痛觉的感受有密切关系，这一些研究将为人类寻找理想的镇痛药物提供重要支持。由于程一凡实验室取得的巨大进展，能够精确地捕获蛋白质的形状改变现成为了低温电子显微镜的一个巨大优势，他预计许多结构生物学家，甚至是那些支持X射线晶体学的人，也将会把低温电子显微镜添加到他们的工具箱中。
冷冻电子显微学解析生物大分子及细胞结构的核心是透射电子显微镜成像，其基本过程包括样品制备、透射电子显微镜成像、图像处理及结构解析等几个基本步骤（图3.1）。在透射电子显微镜成像中，电子枪产生的电子在高压电场中被加速至亚光速并在高真空的显微镜
内部运动，根据高速运动的电子在磁场中发生偏转的原理，透射电子显微镜中的一系列电磁透镜对电子进行汇聚，并对穿透样品过程中与样品发生相互作用的电子进行聚焦成像以及放大，最后在记录介质上形成样品放大几千倍至几十万倍的图像，利用计算机对这些放大的图像进行处理分析即可获得样品的精细结构。基本原理就是把样品冻起来然后保持低温放进显微镜里面，利用相干的电子作为光源对分子样品进行测量，透过样品和附近的冰层，透镜系统把散射信号转换为放大的图像在探测器上记录下来，最后进行信号处理，得到样品的三维结构。
瞬时感受器电位离子通道蛋白是一类组织分布非常广泛的非选择性阳离子通道蛋白。到目前为止,有超过30个TRP通道家族成员在哺乳动物中先后被克隆。TRPV 1是近年研究较多、机制较为清楚的TRPV亚家族成员之一,主要分布于外周感觉神经。研究表明, TRPV 1通道蛋白可被多种外源或内源性介质敏化或激活,其主要生理功能是感受热、痛等伤害性刺激,且与炎症、咳嗽等多种病理过程密切相关。
辣椒中的辛辣成分—辣椒素(capsaicin)和树胶脂毒素(RTX)可使其活化,因此TRPV 1又被称为辣椒素受体TRPV 1除对辣椒素敏感外,还可被多种配体样物质、炎性介质(如花生四烯酸代谢物)、组织损伤刺激物等激活[3]。另外, TRPV 1也可被非选择性刺激物,包括热(> 43℃)、酸(pH< 5.3)、细胞外渗透压的改变、细胞内Ca2+的减少、胞内氧化还原状态、静电荷等激活,提示其为多觉感受器。目前已经明确TRPV 1通道蛋白激活时主要引起Ca2+等阳离子内流,以胞内Ca2+浓度增高的形式调节着相应的生理功能或病理机制的发生[4]。
在低温下使用透射电子显微镜观察样品的显微技术，就叫做冷冻电子显微镜技术，简称冷 冻 电 镜。冷冻电镜是重要的结构生物学研究方法，它与另外两种技术：X射线晶体学和 核 磁 共 振 一起构成了高分辨率结构生物学研究的基础，在获得生物大分子的结构并揭示其功能方面极为重要。
具有里程碑意义的成果是，2013 年加州大学旧金山分校(UCSF)程亦凡和 DavidJulius 的研究组首次得到膜蛋白 TRPV1 的 3.4 Å近原子级别高分辨率三维结构，结果发表在 Nature 上,这篇文章主要是利用单颗粒分析法，结合先进的计算机算法和电子探测技术，成功的解析了trpv1通道蛋白结构，如图是他们获得蛋白结构图，从这张图可看出
冷冻电镜目前已经成为了一项应用越来越广泛的生物物理学技术。特别是近些年来，由于最新的信号探测器的应用，以及单颗粒三维重建算法的革新和不断改进，冷冻电镜技术取得了飞跃式的发展。通过该技术解析得到的生物大分子结构可以在单分子条件下达到近原子分辨率(<4 Å)水平。随着越来越多具有重要生物医学功能的蛋白质及其复合体的高分辨结构被解析出来，冷冻电镜技术正在逐渐引发一场结构生物学革命，并引起全世界的关注。在该文中，作者重点介绍了冷冻电镜及单颗粒分析技术的发展历程，并以炎症复合体和剪接体为例，介绍一些最新的研究进展。
该方法不需要蛋白质分子形成晶体结构并且仅需要相对较少量的生物样品，通过快速冷冻可以获得生物大分子的天然状太，硬件和软件的发展使得单颗粒冷冻电镜可以得到近原子分辨率的生物大分子结构，极大地提高了冷冻电镜的应用范围。另外图像采集以及数据处理的效率较之前都有了很大的提高，越来越多的高分辨大分子结构通过该技术被解析出来
S1至s之间大部分的氨基酸残基被解析出来，如图分别是 的氨基酸残基组成及排列顺序，
第三篇：山西医科大10级研究生电镜考试题
山西医科大10级研究生电镜考试题
1．名解（4×2.5’）：SEM ICC SER 心呼吸膜
2．请用简图加以叙述透射电镜的主要结构及部分主要特点及功能。（15’）
3．请简述电镜酶（以氢化酶为例）细胞化学技术的基本原理。（15’）
4．请简述肌节的超微结构。（15’）
5．细胞核的超微结构是怎么样的？（15’）
6．简要介绍样品制备的特殊技术及各自主要用途。（15’）
7．（给定了一幅细胞在电镜下的图，类似于下图这样的图，将标注换成了字母）
请看图后指出图中字母代表的超微结构是什么？其结构特点和功能又是怎么样的？（20’）
注：这门考试很好考的，写满就好，考前靠看好上课同学总结的3，4页纸就没什么问题了！
第四篇：2100F 高分辨电镜操作顺序--个人小结
装好试样后，开始操作JEM-2100F的步骤：
1、打开beam阀，在LOW MAG下，找到薄区所在的位置；
2、在LOW MAG下将放大倍数调至500倍，然后切换至MAG1；
3、找到一个薄区，将放大倍数调至2000倍，按下STD FOCUS，再进行调Z的步骤：
1）方法一：将试样边沿移至屏幕中心，按下IMAGE WOBB X，试样呈抖动状态，再通过调节，使屏幕中心试样不在抖动为止；
2）、方法二：找到试样薄区，逆时针旋转BRIGHTNESS，使电子束汇聚为一点，再通过调节，使各衍射斑点汇聚于同一点；
4、将放大倍数调至100K倍（调节放大倍数时，需要同时旋转BRIGHTNESS和MAG/CAM L），并将无试样区域移至屏幕中心，逆时针旋转BRIGHTNESS至电子束呈合适大小内、外圆形；
5、按下BRIGHT TILT按钮, 并通过调节SHIFT X和SHIFT Y将电子束移至屏幕中心，再通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y将电子束的内圆恰好移至外圆的中心（若电压对中过程中，平移与偏转相互影响，则联动比有问题，需要调最新的合轴文件）；
6、再按下COND STIG按钮，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y将电子束的内圆内的图形调成“奔驰”车标形状；
7、逆时针旋转BRIGHTNESS，使电子束的内圆和外圆重合，再在HIGH VOLTAGE CONTROL 界面中点击“ON”，按下F4，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y使内外圆同心缩放；
8、检查电压对中和聚光镜消象散；
9、顺时针旋转BRIGHTNESS，使电子束充满整个屏幕，套取一号聚光镜光阑，将电子束调至屏幕中心（机械对中）；
10、再次合轴，将放大倍数调节至400K倍，再次检查电压对中和聚光镜消象散；
11、将放大倍数调至100K倍，并将薄区边沿移至屏幕中心，通过调节OBJ FOCUS旋钮，将试样边沿调至为微欠焦（略显白色边沿），再将放大倍数调至400K倍，并将边沿区移至屏幕中心，按下F1，然后打开CCD，并调出傅里叶变换，按下OBJ STIG，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y和OBJ FOCUS旋钮（使傅里叶变换为一圆环），得到清晰的高分辨像；
12，关闭CCD，再按下F1，将放大倍数调至100K倍，找到感兴趣薄区，并将电子束汇聚于一点，按下SA DIFF按钮，并将相机常数调至60CM，手动将菊池线的交点移至电子束中心；
至此，已完成电镜合轴、消象散、踩带轴的步骤，接下来便可进行选区电子衍射、明场像、暗场像和高分辨像的操作。
一、选区电子衍射步骤：
1、合轴完成后，在TEM、MAG1模式下，将感兴趣区移至屏幕中心；
2、通过感兴趣大、小来套取合适的选区光阑；
3、按下SA DIFF按钮转为衍射模式，获得相应的电子衍射花样，并通过调节MAG/CAM L获得合适的相机常数（20-30CM）---不同相机常数的意义；
4、通过顺时针旋转BRIGHTNESS和调节DIF FOCUS获得足够暗、圆锐的衍射斑点。
在进行拍摄明、暗场之前，两个必须的步骤：
1）、保证物镜光阑和衍射斑点均在物镜的后焦面上，具体调节：通过调节DIF FOCUS旋钮，使物镜光阑投影为圆形；通过旋转BRIGHTNESS调节衍射斑点的亮度;2)、明、暗场电子束对中，在MAG1模式下，转换BRIGHT TILT 和DARK TILT 来检查对中性。
二、明场像
1、获得感兴趣区的电子衍射花样后，按下BRIGHT TILT，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y旋钮，将透射斑点移至屏幕中心；
2、选择合适的物镜光阑（由什么决定？最小尺度为多少？），套取透射斑点；
3、退回选区光阑，按下MAG1，并通过调节MAG/CAM L，获得合适放大倍数的明场像。
三、暗场像
1、获得感兴趣区的电子衍射花样后，按下DARK TILT，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y旋钮，将将感兴趣的衍射斑点移至屏幕中心；
2、选择合适大小的物镜光阑（由什么决定？最小尺度为多少？），只套取感兴趣的衍射斑点；
3、退回选区光阑，按下MAG1，并通过调节MAG/CAM L，获得合适放大倍数的明场像。
四、高分辨像
1、获得感兴趣区的电子衍射花样后，按下PLA，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y旋钮，将透射斑点移至屏幕中心；
2、选择合适大小的物镜光阑（由什么决定？最小尺度为多少？），同时套取透射和衍射斑点（最少要套住一个衍射斑点）；
3、退回选区光阑，按下MAG1，并通过调节MAG/CAM L，获得合适放大倍数图像（400K倍以上），按下OBJ STIG，通过调节DEF/STIG X和DEF/STIG Y和OBJ FOCUS旋钮，获得清晰的高分辨晶格像。
拍摄图片步骤：
选定好需要拍摄的区域，单击“stop view”，更改相关参数，选择待保存图像，单击“123”图标进行保存。需要注意：低倍图片，先选择好，再打开CCD摄像。
第五篇：简短演讲稿
简短演讲稿1
亲爱的女士们先生们：
是我的小女儿，高考，我们邀请你一起。我的长辈、亲戚和朋友们在百忙之中带着极大的喜悦和善意来祝贺我，这真的让我非常感激。我想准备一杯薄酒来纪念你。请原谅我的错误，韩海。
首先，小女儿的高考真的.让我心存感激。首先，我要感谢我的父母，他们养育了我，教会了我做事的方法，让我的丈夫和妻子能够很好的教育我的小女儿。其次，我要感谢我的妻子，她在10月份努力怀孕，用言行教导她。否则，我已经变成了一个如此美丽的婴儿。其次，我还要感谢我的小女儿，从小聪明伶俐。
除了一些感激之外，我也有一些感受要和现在和未来的大学生分享：高考真的很可喜，但我们要意识到，高考不是句号，它只是一个逗号，高考不是人生的终点，它应该是人生更高的起点。希望你在大学期间，继续秉承高中时期勤奋、勤奋的拼搏精神，不断学习，终身学习，继续考研。
最后还发了一条信息，说我的小女儿在我的丰福大家族里起了主角，抛砖引玉，给弟弟妹妹们开了个好头。后来长江的波浪往前推，一个比一个强！
我的小女儿——，我的父母永远爱你，你永远是我们的骄傲，你一定会成为一个社会有用的人才！
简短演讲稿2
亲爱的老师、同学们：
大家好!
想必大家都知道我们都是要劳动的，但是，我们身边也还是有一些不爱劳动的现象，认为我们不需要劳动，认为劳动浪费时间，认为劳动又苦又累，总想投机取巧，逃避劳动。我认为这种想法是错的。我们应该劳动，劳动最光荣。天上不可能掉“馅饼”，只会掉“陷阱”，如果想成功，想得到成功的喜悦，那么就应该劳动。不劳动就想成功那是不可能的。
为什么总有人去诈骗去、做高利贷?那是因为他们想不劳而获。为什么总有人上当受骗，那也是因为他们想不劳而获。其实想实现致富的愿望，想成功只有靠劳动。在劳动中，通过汗水和努力换来的果实，你会倍感珍惜，而且非常开心。相反，不劳动轻而易举就得到，反而不会珍惜，也没有幸福感。
如果你们不想劳动，那么你们不仅会失去一切，而且还会变得更加懒惰。劳动与不劳动的区别太大了。你不仅会收获成功的喜悦，还会成长。你可以选择不劳动，也可以选择劳动，因为生命是你的，命运掌握在你自己的手中。劳动也罢，不劳动也罢，只有你可以选择自己的`命运，就看你想要怎样的未来及变成怎样的人了。你要记住，命运是你自己的，与他人无关。
如果人人都爱劳动，那么我们的世界将有所改变，劳动会让这世界变得更加和谐。通过劳动人们获得了内心的满足感，开心之余就不会愤怒，就不会发生矛盾。那么世界就不会有战争，没有一缕硝烟也不会有一个人因为战争而失去家人，也不会有那么多孩子变成孤儿。
所以大家一定要劳动，虽然很累，但你会发现，其实，这是很有成就感的，很值得自豪的。如果想改变命运，改变世界，让孩子们有一个美好的未来，那么我们就应该齐心协力，去劳动，因为劳动最光荣。
谢谢大家!
简短演讲稿3
尊敬的各位领导，亲爱的各位同事：
大家好！
今天，很荣幸在这里参加这个大会议。首先，我代表xx软件有限公司向项目合作方——妇产医院各位领导和同志们的大力支持表示感谢。
随着全球信息高速公路的兴建，医疗服务水平的提高，医院信息管理系统的建设在医疗服务中扮演着越来越重要的角色；实践说明一个好的医院信息管理系统的建设与使用对于医院医务人员来说提高了工作效率；对于病人来说，加快了就诊速度，并且做到明白消费；对于医院来说，堵住了收费和药品管理中的漏洞，提高了医疗服务质量。所以医院信息系统网络已成为医院现代管理水平的象征。
一个完整的医院信息系统需要一个周密的、整体的`设计思路，有一套能支持继续发展的、比较好的框架结构和可扩展的基础，在此基础上进行逐步投入、分步开发，软件才有生命力。而这需要开发者对医院业务进行较长时间的深入调查和了解，不但要了解医院现状，而且能预见或跟踪医院的长远发展，才能做出符合实际的系统分析和设计；此次工程是妇产医院一把手工程，我公司将给予高度的重视来完成这项工程，为项目的实施上线打下良好的基础。
妇产医院是我公司接手的第一家妇幼保健医院，是我公司的样板工程，我们将投入全部的精力来完成这项工程，在这项工程中我公司派出了一支强大的实施团队，根据医院的实际情况，纵观全局，考虑到使用过程中的每一个细微之处以及它们之间的相互作用，和医院人员一起规划设计适合自己的产品。根据我们实施团队多年来积累的多个成功项目的实施经验表明，我们的产品经得住考验，相信在这次项目中我们同心协力，同样可以创造出斐然的成绩；但实施成功的关键还在于双方的鼎力合作，医院各位同志对我们的大力支持。
各位领导，各位同仁，为了项目的顺利实施上线，相信在公司领导的大力支持下，在全体员工的积极参与配合下，妇产医院信息系统将会顺利成功实施！ 最后，预祝妇产医院项目启动大会圆满成功，信息系统项目能够顺利成功实施！
谢谢大家！
简短演讲稿4
亲爱的老师、同学们：
大家好！
一个目标达到之后，马上立下下一个目标，这是成功的人生模式。而想要完成这一个又一个的目标，只有不断去追寻。去拼搏。
拼搏进取，我们就能拥有战胜困难的勇气，使困难迎刃而解，使我们在逆境中行走，使我们在困难中茁壮成长！
拼搏进取，我们就能感受到生命的绚烂多彩。如果没有奋力的攀登，怎能体会一览众山小的豪情，只有直面惊涛骇浪的考验，才能体会劫后余生的欣喜。在时光飞逝中，我想感慨喜马拉雅云的壮观，我想探究原子世界电子排列的瑰丽，我想在脑海还原清明上河图的`繁华，然而，我知道，没有丰富的知识，深厚的艺术素养，想体会这些美好只是痴人说梦。
谢谢大家！
简短演讲稿5
老师们、同学们：
大家好！
骏马奔腾胜景，春风浩荡展宏图。今天是新学期的第二周的开始，我们吐纳着万物复苏的清新气息，又站在新的起跑线上，满怀希望迎来了新的征程。祝福我们全体同学健康成长，学业有成！祝福我们全体老师工作顺利，万事如意！
在新的学期，我相信，我们全体教师能立足岗位，加强学习，不断探索，学会反思，作学习型、反思型的教师；能转变教育观念，树立面向全体、全面发展的育人观，善待每一个学生，作育人型的'教师；能继续发扬无私奉献的优良传统，务本求实，追求卓越，做创新型的教师，帮助我们每一位同学去追求和实现自己的梦想！
我希望，全体同学一定要好好把握现在，严格要求自己，以更加明确的目标和更加认真的态度，勤学苦练，不断完善自我。要懂得“我自信，我出色，我努力，我成功”！坚信付出总有回报，一分耕耘，一分收获。努力打牢基础，争取学习上的更大超越！父母养育辛苦，报恩唯有苦读！拿出实际行动，以一颗感恩之心，争当一名合格、优秀的中学生，让老师放心，让家长放心。
谢谢大家！
简短演讲稿6
尊敬的老师，亲爱的同学们：
大家好!
我是xx，中秋马上就到了，这是我们国家的传统节日，每年到了这个时候都是一家人团聚在一起，自古以来中秋节都是我们非常重要的节日，在这一天我们会想到自己的家人，自己的朋友，希望能够像月亮一样团团圆圆，在这个节日里，我们应该抱着一个感恩的心态，不管身在何方，我们应该给家人，朋友们送上问候，这也是代表着自己深深的思念。
亲情是我们社会关系当中最特殊的一种感情，随着我们现在一天天的成长，在学校的时间也是越来越多了，其实和家人的相处时间在慢慢的变少，同时在这个时候还是应该和家人们相处在一起，交流感情，中秋节这一天也是非常有象征意义的，我们给父母送上一句问候是非常合适的，让父母感受到来自的我们的温暖，所有说中秋节我们应该要用一个的感恩心去对待，对家人，对朋友传递我们深深的思念和感激，此刻我面对大家，其实内心也是非常的紧张，在我们的生活当中或许不是什么时候都是圆满的，但是我们应该尽力去做到圆满，这也是不让自己留下什么遗憾，这非常的关键，和大家相处的过程当中我感觉非常的好，我也希望能够继续保持下去，在这一点上面是毋庸置疑的。
马上就到农历八月十五了，其实关于月亮的传说有很多，我们都是从小听到现在，这些故事背后都是我们先人们对美好生活的向往，我们也应该跟进步伐，一样有这样的心态，向往美好的生活，我们每一个人的'生活美满都是自己争取的，包括家庭幸福美满，我知道大家都是应该有这样的想法，在这方面更加应该要认识到这一点，希望我们所有的老师，同学们都能够在以后工作顺利，学习的顺利，去找到自己的方向，保持好的态度，认真的去做好分内的事情，中秋佳节到，放假之后和家人们一起团聚，培养感情，不久之后中秋之月照亮夜空，让我们抱着对美好未来生活的向往，去做自己想做的事情，生活顺利，学习进步，未来更多的是我们。
中秋将至，让我们度过一个美好中秋之夜，抱着一个感恩的心态，感恩周围的每一个亲朋好友，作为一名小学生我们应该努力学习，以后回报学校和父母。
最后预祝大家中秋快乐，阖家团圆。
谢谢大家!
简短演讲稿7
各位老师们、同学们，大家早上好！
今天，我国旗下演讲的题目就是《诚信，最珍贵的品质》。
首先，我想问大家，什么是诚信？有人说很简单，诚信就是诚实守信，是人类的美德，无论在什么地方，在哪个时代，诚信都是一种重视和最值得珍视的品德。
记得曾经有一位名人这样说过：我在校园里学到了人生中最重要的`知识，学会了借东西一定要还，学会了把自己拥有的分享给他人，学会了真诚以对，学会了诚信。这是一句很普通的话，没有华丽的句词，却说明了一个大道理，说明诚信在我们的人生成长过程中起到了多么大的作用。
那么请大家想一想当你在离开座位后，自觉地把椅子贴着课桌放回原处了吗？老师在上课时能做到不插嘴吗？当你看完阅览室的书以后能归还原处吗？你答应别人的事努力做到了吗？这些都是小事，没做到不会影响什么，但诚信就在这点点滴滴中。养成诚信好品质需要从小事做起，更需要坚持去做，只要同学们能以诚为本，以信为根，坚持时时处处注意自己的言行，从小养成一种对任何事情认真踏实，对任何人以诚相待的态度。在日常的学习、生活中培养自己的良好品德，那你就会逐渐成为一个具备诚信好品质的人。
诚信很大，但诚信其实并不难，只需要从一点一滴的小时做起就行。买东西多找了钱，就应该退还给老板；捡到别人丢失的物品，要还给失主；考试失利，要实事求是的告诉家长；还要做到人前人后一个样，老师在与不在一个样，在家在校一个样，有人监督无人监督一个样。
同学们，诚信是最宝贵的品质，就让我们从小做一个诚实守信的人吧。只要人人都讲诚信，文明之花就会开遍全社会。愿每一位同学都能载着诚信之舟，驶向前程似锦的明天，愿你们因诚信多了友谊，因诚信添了风采，因诚信而走得踏踏实实，成为一个高尚的诚信人。
谢谢大家！
简短演讲稿8
各位同行你们好！
销售的过程中，尤其是已经成交之后，必须先做朋友后卖产品。不然永远是熊瞎子掰包米，永远都是结一个瓜。现在有很多做销售的，觉得自己各个方面都可以为什么就是做的好呢？其实很简单，越聪明的人越谦虚，有的人，尤其是很有成就的人都很谦虚，因为他明白一个道理，一个最简单的做人的道理，宽广的胸襟，博爱的胸怀，在任何人面前都是一样都把自己当做最普通的人。反之，对自己的估价过高或者毫无理由的自己赞美，会导致自满情绪，绝对不会成为销售的高手，永远赚不到自己的美好明天，最后的结果就是在自人命苦的情况，碌碌终生。
其实做销售时间不算长，但感受却很多，我想该总结一下经验了，是好是坏，几个月再看，一目了然！
我心中的top sales应该充满笑容，平易近人，充满亲和力，而且眼中带有自信，这是所谓的形象！当然了良好的销售技巧，扎实的专业知识，精通整个的行情都是有用和必须的！
不同的人，他或她销售的方式各不同，喜欢吹牛皮的，慢不经心的，谈三道四的，实话实说的，无所不谈的……很多很多的`。诚然，我们的产品太好卖，你的销售能力好还不如运气好，尽管如此，我们依然会遇到困难，如何能克服呢？
有种说话，有时候别人不是buy你的产品，而是buy你自己才会买这样产品，你也在卖，别人也在卖，你态度好，你业务好，始终都会有优势的！
我的销售心得，销售是人与人交流达成的，个人认为，在倾谈价格问题上，我们应该站硬底线绝不能退让，千万不能陷入别人的节奏，被人牵着鼻子走。关键是控制，把握节奏，就好像篮球，足球一样，做成功了，主导权就在了。要主导，这就是我以后学习并努力的方向。
简短演讲稿9
尊敬的老师、亲爱的同学们：
大家好！
我们每个人都从幼年一步步走向成熟，就像沿着一条河流逆流而上。
小时候，我们都曾有过一些美妙而又略显天真和不切实际的幻想，就像河流边那些形形色色的鹅卵石。我们都曾陶醉于那些绚丽的颜色中。渐渐地，我们长大了，目光由脚边的鹅卵石移向前方。河流的源头，屹立着一座雄伟高峻的雪山，令人神往。我们把它称之为——理想。一个美丽的字眼。
理想，包含着我们对未来的向往，对未来的希望，对未来美好的憧憬。
金色的童年，沉淀着儿时的快乐，沉淀着淡淡的幸福。就像陈年的老酒，愈久愈香，愈久愈让人不满足于回味。小时候的.我，的理想就是爸爸妈妈能多带我出去玩，给我买些玩具和好吃的。现在看来，才觉得儿时的我多么的天真。
到了现在，我才渐渐的明白：“理想，不在于一朵娇嫩的鲜花需要我们渴望的目光去滋润，更需要我们用真挚的心灵去呵护。”
的确，每个人都有理想，但要让这美好的理想变成现实，关键还要看自己。在失败中振作，在振作中奋发，在奋发中取胜，这才是我们要的精神。俗话说“有志者，事竟成”。我相信，通过我们努力踏实的学习，一定会让自己的理想成真。
当然，理想也是一股动力，推动着我们永不气馁一直前进。让我们为理想插上翅膀，让我们一起放飞自己的理想！
谢谢。
简短演讲稿10
尊敬的各位领导，亲爱的各位同事：
大家好！
我是xx餐饮管理公司xx宾馆广场店经理。
时光荏苒，岁月如歌，我们已昂首跨过极不平凡的20xx年。在这一元复始、万象更新的美好时刻，我谨代表xx宾馆广场店向一年来辛勤工作、团结拼搏的员工及家人表示衷心的感谢和诚挚的问候。
我们是一家位于起步阶段的酒店，酒店之新，让我和我的团队充满激情。酒店开业一年多，我和我的同事们，一直在不断努力，为光临我们酒店的每一位客人提供最优质的服务，使他们在xx能够感受到家的温暖，给他们留下十分美好的印象，从而经常记起我们，并且不断的把这种美好的印象，告诉他们的.家人和朋友。
酒店每一位客人的意见和建议对于改善我们的工作都十分重要。因此，客人的不满更是我们最严厉的警钟。我们都十分注意每一位客人入住以后的感受，并把他们意见当成我们宝贵的财富，让每一位员工都能够时刻铭记心中。
在我们xx，有很多优秀可爱的员工，他们每时每刻都与管理者一起，为改善我们的酒店的服务而不断努力。我们这个团队是属于大家的，是十分富有激情的，我们将把这种激情连同我们的服务一起，奉献给客人。
在20xx年的春节之际，仍然有我们的一些同事会坚守在工作岗位上，他们放弃了与家人的团聚，放弃了自己的休息，时刻以饱满的热情服务每一位客人，我真诚对坚守在工作岗位上的各位兄弟姐妹们，给你们拜年了，同时也把这种祝福带给您的家人，告诉他们，我们以酒店有您这样的员工引以为豪。
我坚信，我和我的同事在不断服务客人的同时，也必将赢得越来越多的认可，对这份事业我们将一生引以为豪。
最后，祝大家新春佳节快乐！20xx，我们最棒。
简短演讲稿11
亲爱的老师，亲爱的同学：
你们好！
我是xxxx，今天我要在这里参加劳动委员，请大家用热烈的掌声，让我激动万分的心情平静下来吧。
此时此刻，我站在这里，你们肯定在下面质疑我的.实力，虽然我以前坏毛病一大堆：上课走神不认真听讲，自己每天一大堆垃圾，不喜欢扔。而且上课时经常开小差和做小动作，还有就是自己死活不肯去打扫，还要别人催……我知道自己的缺点有很多，但不过我一定发奋图强、艰苦奋斗的改掉这些坏毛病。但不过我也有很多优点，比如：我每次作业差不多都是全对，我长跑特别厉害，跑5000米，只需要10分钟。我相信做人就像蜡烛一样，有一分热，发一分光，给人以光明，给人以温暖。请大家相信我吧！
假如我真的当上了劳动委员，我一定会让大家刮目相看的，我会看到别人乱扔垃圾时，一定会阻止他（她）的，假如有人不听。那也是有惩罚的。如果表现好的，也有奖励。惩罚就是：扫一周的地。奖励就是：免一周的扫地。除此之外，我也会努力的让我班成为级的班级的。
亲爱的同学们，我不敢说我是的，但我已经很努力了。“少年当有梦，少年当自强，让我们趁着青春年少追逐心中的理想。”
请大家投票给我吧，谢谢。
简短演讲稿12
亲爱的客人，亲爱的朋友：
大家好！
我很高兴邀请你们所有人参加我的高考宴会。这一刻，我心中充满了感激。
我要感谢母亲这来的辛苦养育，也让我深深的觉得做他的女儿是世界上最幸福的事。
我要感谢我的老师，感谢你们一直以来的教育，是你们的教育给我在学习的`道路上留下了坚实的足迹。
我要感谢所有在场的客人，感谢你们这么多年来对我们全家的关心、照顾和支持。没有你的帮助，我今天的成就是不可能的。真心感谢。
我要特别感谢我的朋友们，感谢你们和我一起度过了我生命中最美好的时光，感谢你们对我的关心、帮助和爱，我永远不会忘记你们。
大学不是一个可以坐以待毙的岗位，而是一个新的起点。在即将到来的大学生活中，我会努力学习，努力充实自己，早一天回报关心我的人。
最后，祝大家：
身体健康，工作顺利，学习成功，家庭幸福。
我在这里准备了清酒和素菜。希望大家好好吃饭。谢谢你！
简短演讲稿13
亲爱的老师、同学：
大家好！
我叫xxx，学习自认为一般，今天来参加班长竞选活动，我相信我一定能胜任班长这个职务。
我喜欢数学和语文，但成绩不是。不过我认为数学除了课前预习外，只要上课时认真听讲，做题时认真，多练习就行了。语文只要多读课外书，养成课前预习，自己解决生字、新词，难理解的句段先思考或借辅导书掌握就好了。学英语时单词总记不住，多锻炼听力。
我认为要想学习好，必须要有好习惯，每天早上要读几十分钟书，上课认真听讲，中午看会书，增加知识，不能到校就玩，考试时什么也不会。
对待班里事务，让合适的'人做适合他自己的事，做到熟能生巧、滚瓜烂熟这种程度，再做别的事，一个人争取做到十全十美。尽力把缺点却掉，让大家对我刮目相看。
另外学校检查卫生前全体同学读书，不但为班级荣誉加2分，而且对形成良好的班风很有好处，希望大家红领巾佩戴整齐，不给班级丢脸，做一个有责任感、积极向上的好同学吧！
请大家多支持我，谢谢！
简短演讲稿14
尊敬的老师和学生：
大家好！
这首歌唱得很好，“它总是让人充满期待，总是将梦想与未来联系在一起。我们的心海是一首纯洁而浪漫的歌，一条色彩斑斓的'丝带，跳跃着不知疲倦的音符，播种着充满期待的未来。作为一代年轻人，我们正处于人生中最美丽的年龄。
让我们一起扬帆起航，穿越浩瀚的海洋，追寻彼此的青春梦想！
谢谢！
简短演讲稿15
亲爱的老师，爷爷奶奶、爸爸妈妈、小朋友们：
我是大四班小朋友xxx。今天是六一国际儿童节，在这个美好的日子里，咱们欢聚一堂，唱歌、跳舞，庆祝咱们自己的节日。
幼儿园就是咱们的家，咱们快乐的摇篮!这里有咱们的好老师，好伙伴，咱们在这里学习成长，变得聪明又能干，咱们在这里玩耍嬉戏，留下无数的欢声笑语，我爱咱们的家——河畔镇中心幼儿园。
亲爱的`老师，是你们像爸爸妈妈一样，无微不至的照顾咱们，教会了咱们唱歌、画画和舞蹈，也教会了咱们献爱心、懂礼貌，咱们的每一点进步，都伴随着你们的辛勤付出，在此我代表幼儿园的全体小朋友，对老师真诚的说一声：谢谢，老师!亲爱的爸爸妈妈，是你们一步一步教我学走路，是你们一字一句教我学说话，咱们生病了，最着急的是爸爸妈妈;咱们快乐了，最快乐的也是爸爸妈妈。在这里，我要和所有的小朋友一起说：爸爸妈妈，我爱你们!
六一的花儿是香香的，六一的歌儿是甜甜的，六一的小朋友是美美的。咱们是早晨的太阳，祖国的希望，伙伴们，让咱们怀着一颗感恩的心，唱响爱的赞歌，迎接灿烂美好的明天吧。谢谢大家!
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