第一篇：自身免疫病和风湿病的免疫学检验
自身免疫病（AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。风湿病是一类涉及到关节、软骨、肌肉等结缔组织的慢性疾病。
实验室检查特别是免疫学检查对AID和风湿病的诊断是及其重要的。有些检查可作为诊断指标之一；
有些检查可作为病情进展和预后判断的监测指标； 有些检查可作为药物疗效的考核指标之一。
随着免疫学技术的发展以及分子生物学的应用，各种自身抗体的检查越来越多地应用于临床。作为临床医生，应该熟悉这些检验的意义，并能结合临床及其他检查，客观地运用这些指标，协助诊断，了解病情，指导治疗。这里仅介绍临床常用的一些自身抗体的检测。
一、抗核抗体测定
（Antinuclear antibody ,ANA)ANA是抗细胞核多种成分的自身抗体，无种属及器官特异性。ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。这些抗体共同组成ANA谱。
抗核抗体（ANA）的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。ANA的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。只有某种抗体的效价很高时，IFA才能加以鉴别。homogenous（均质型）
又称弥散型，相应的抗原是双链DNA和组蛋白复合物。常见于SLE，特别是肾脏受累病人。也可见于其它结缔组织病，如：风湿性关节炎，MCTD，干燥综合征，硬皮病，慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。Peripheral(周边型)
相应的抗原为双链DNA，多见于活动性SLE病人。Speckle(斑点型)
主要是针对ENA的抗体，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般认为低效价的斑点型ANA不是结缔组织病特有的，实际上不代表临床异常。高效价的抗Sm抗体多与SLE有关。高效价的抗RNP自身抗体见于MCTD，但也见于SLE。抗SSA和抗SSB抗体，见于S.S，也可见于SLE。当病人有抗SSA抗体时，通常以皮肤表现和光过敏为主。，也存在于ANA阴性狼疮和新生儿狼疮。Scl-70抗体与硬皮病有关。Nucleoli(核仁型)
其靶抗原是与RNA分子相关的核蛋白。多见于硬皮病。
Centromere(着丝点型)
抗着丝点抗体（ACA），多见于全身性硬皮病的CREST综合征。
常用检测方法为IFA、ELISA、免疫印迹法、RIA、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法等。其中IFA是应用较广的一种方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2细胞为底物抗原片，当加入病人血清时，病人血清中的ANA可与细胞中相应抗原成分结合。再加入荧光标记抗人IgG，在荧光显微镜下可见细胞核内亮绿色荧光。〖参考值〗
<1:10或阴性 〖临床意义〗
ANA阳性见于多种疾病，常用于风湿病及自身免疫病的诊断。SLE患者阳性率在95％以上，且效价常在1：80以上。在其他风湿病如RA、系统性硬化症、皮肌炎、干燥综合征(SS)、混合结缔组织病(MCTD)等也可阳性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效价阳性。〖注意事项〗
在大约1%的正常人的体内可测到低效价的非特异性抗核抗体，80岁以上老人的检出率可高达50%。高效价的ANA一般与活动期SLE密切相关。采用Hep-2细胞检测ANA，可见到不同的染色模型。
此外，口服避孕药的妇女也可检测到ANA。
二、可提取性核抗原（Extractable nuclear antigen ENA)抗体
ENA是细胞内许多小分子的RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。分布在细胞质中的称为小细胞浆核糖核蛋白(scRNPs)；分布在细胞核内的称为小细胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已发现的有20余种，其中常用的抗ENA抗体有如下几种。
（一）抗Sm抗体
Sm是病人Smith的缩写。Sm抗原属于SnRNP，由5个RNA和多肽组成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗体是酸性糖蛋白，是SLE的标记抗体。(二)抗nRNP(u1RNP)抗体
u1RNP是u1RNA和蛋白质组成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是混合结缔组织病（MCTD）的重要血清标志。
（三）抗SSA抗体
SS为干燥综合征的缩写。此抗体又称抗RO抗体。SSA抗原是RNA和蛋白质复合物，抗原表位在52KD多肽上，主要见于原发性干燥综合征患者及SLE。
（四）抗SSB抗体
SSB抗体常伴随SSA抗体同时出现，又称抗La抗体，SSB抗原属于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白质的复合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。与SSA抗体并存对诊断SS有特异性。
（五）抗Scl-70抗体
Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓扑异构酶I的降解产物，抗Scl-70抗体几乎仅见于硬皮病，阳性率30%左右。
（六）抗Jo-1抗体
Jo-1抗体是组氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗体是多发性肌炎和皮肌炎的标记抗体，阳性率25-40%。
（七）抗核糖体抗体
核糖体在核仁合成，然后转入胞浆，抗原表位在大亚基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖体抗体阳性主要见于SLE，阳性率20-30%。
检测以上抗体的方法主要有：对流免疫电泳法(CIE)、双相免疫扩散法，免疫印迹试验(IBT)，免疫斑点技术和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或细胞提取物作为抗原。近年来，应用分子重组抗原制备的试剂盒已投入市场。〖参考值〗阴性 〖临床意义〗
1.抗n RNP抗体：见于35－40％的SLE病人，在MCTD病人中阳性率可达95－100％，也可见于其他风湿性疾病。
2.抗Sm抗体：主要见于SLE及重叠综合征，急性期病人75％为阳性。一般SLE患者30－40％阳性率。但Sm抗体阳性者90％以上为SLE，故称之为SLE的标记抗体。
3.抗SSA和抗SSB抗体：见于40－45％的SS病人。抗SSA抗体也可见于25％的SLE病人及其他风湿性疾病；抗SSA抗体与新生儿狼疮和先天性传导阻滞有关。抗SSA抗体也可见于病毒感染等非风湿性疾病。抗SSB抗体对原发性干燥综合征较特异，但阳性率仅27％左右。
4.抗Scl-70抗体：一般仅见于系统性硬化症病人，阳性率20－60％。
5.抗Jol-1抗体见于30％的多发性肌炎病人及10％的皮肌炎病人。抗Jol-1抗体与多发性肌炎病人间质性肺炎的发生率增加有关。
6.抗rRNP 抗体：主要见于SLE患者，阳性率20%左右，与中枢神经系统病变有关，多在疾病活动期出现。〖注意事项〗
判断试验结果时要结合临床表现作出评价，也应根据试验方法来作出解释。对流免疫电泳法和双相扩散法敏感性低，但特异性较高；免疫印迹法、斑点免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特异性相对减少。
三.抗双链DNA抗体（Antidouble-stranded DNA，A-dsDNA，)
A-dsDNA 对SLE有高度特异性，是针对细胞核脱氧核糖核酸的自身抗体。临床上常用的检测方法有：①Farr¡®s法：125I－DNA与待检标本中的A-dsDNA形成免疫复合物，加饱和硫酸铵使复合物沉淀，以γ计数器分别测定上清中游离及沉淀物中已结合的125I－DNA含量，可计算出血清中A－dsDNA的结合活性。
②ELISA法：将小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA则结合到微孔板上，加入酶标抗人IgG，加入底物显色后经酶标仪比色可知血清中A-dsDNA抗体的量。
③免疫荧光法：采用马疫锥虫或短膜虫作为基质，加入病人血清。血清中的A-dsDNA与膜上的天然DNA结合，加入荧光标记抗人IgG。马疫锥虫和短膜虫的动基体会发出绿色荧光。
④金标斑点法：双链DNA包被于硝酸纤维膜上，加入病人血清，加入金标记抗人IgG，如有A-dsDNA存在，会显示红色斑点。〖参考值〗依方法不同参考值也有不同。
Farr¡®s法：≤ 0.20
免疫荧光法：<1:10
ELISA法：依试剂盒而定，一般<70u
金标法：阴性 〖临床意义〗
A-dsDNA 阳性对 SLE 有较高的特异性。大约60％的活动性 SLE 病人会出现 A-dsDNA。其他风湿性疾病也会出现，但阳性率非常低，如RA、S.S。
〖注意事项〗
假阳性结果非常少见，但阴性亦不能排除SLE的诊断。
四.抗中性粒细胞胞浆抗体（Antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)测定
ANCA是针对中性粒细胞胞浆多种成分的 自身抗体，主要有髓过氧化物酶(MPO)和蛋白酶3（Proteinase 3，PR3)的抗体。主要用于诊断Wegener 肉芽肿和系统性血管炎，特别是伴有肾病、呼吸疾病或其他类型血管炎引起多器官损害的患者。检测方法有IFA、ELISA、IBT等。〖参考值〗
阴性。〖临床意义〗
免疫荧光法检查ANCA阳性一般分为两种荧光类型，一种是胞浆型，称为cANCA，一种是核周型，称为pANCA。cANCA产生弥漫性细胞浆染色，是针对PR3的抗体，一般见于wegener肉芽肿病(WG)，特别是肾和肺受累的病人。pANCA产生核周染色，是针对MPO的抗体，主要见于系统性血管炎病人。
在WG病人中，cANCA阳性率在活动期可达80％，且有较高的抗体效价。在缓解期抗体阳性率低，且效价下降，或完全消失。
〖注意事项〗
ANCA 阳性也可见于 Good-Pastare¡®s 综合征和SLE病人。WG的诊断不能单纯依赖ANCA的结果，还要结合其他临床表现，试验室检查和组织病理学检查才能确定。ANCA效价不能完全反应疾病的活动以及对治疗的反应。
pANCA 阳性不是特异性的抗MPO抗体，也可以是抗粒细胞胞浆中其他酶的抗体，如弹性蛋白酶，组织蛋白酶G等。ANCA检测应注意排除其他自身抗体的交叉反应，如ANA。因其可产生假阳性应注意鉴别，并进行ANA检测。
五、抗线粒体抗体（Antimitochondrial antibody,AMA)
AMA是以细胞浆中的线粒体为抗原的一种自身抗体，无器官和种属特异性。一般采用大鼠肾及胃作为抗原基质，采用IFA检测，阳性可见大鼠肾和胃的细胞浆呈现细颗粒状荧光。采用免疫印迹法可将与线粒体抗原的反应分为从M1到M9九种类型，高效价的M2和M9型自身抗原与原发性胆汁性肝硬变相关。目前已有检测M2的ELISA试剂盒供应。〖参考值〗
阴性
>1：10 为阳性 〖临床意义〗
AMA是原发性胆汁性肝硬化的标记抗体，阳性率达90%，并且50%患者抗体效价达1：1280或更高。此外，也可见于慢性活动性肝炎、隐匿性肝硬化。肝外阻塞性黄疸患者AMA常阴性，因此可作为鉴别诊断的一个指标。正常人中阳性率<10%，且效价较低。六.抗平滑肌抗体（Antismooth muscle antibody，ASMA)
ASMA是抗肝细胞膜上一种肌动球蛋白的自身抗体。这种肌动球蛋白与平滑肌有交叉抗原性，因此与平滑肌有反应。一般采用IFA法，以大鼠胃作为抗原基质，阳性可见胃壁平滑肌呈现亮绿色荧光。
〖参考值〗 阴性，>1：10为阳性 〖临床意义〗
主要见于明显活动期的自身免疫性肝炎患者，阳性率在80%以上，效价
在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可阳性，且早于 HBsAg出现。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染者也有不同程度的阳性率。正常人中仅有2%阳性。
七.抗甲状腺球蛋白抗体（ATGA)和抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)
ATGA 是由甲状腺炎引起的自身抗体，抗原是一种糖蛋白。ATGA有器官特异性而无种属特异性。ATMA 的抗原是甲状腺滤泡上皮细胞胞浆内的脂蛋白。常用检测方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。
〖参考值〗
IHA： 血清效价
≤1：32，>1：32为阳性，ATGA 和ATMA
ELISA：正常为阴性，P/N < 2.1，>2.1 为阳性, ATGA 和 ATMA
RIA：ATGA <30%；ATMA <15% l〖临床意义〗
主要见于桥本甲状腺炎、甲亢、甲低患者，也可见于甲状腺瘤、恶性贫血、重症肌无力、Edison 病和肝脏疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的阳性率。
正常人也可检出这两种抗体，并且随着年龄的增长，阳性率增加，特别是40岁以上妇女，可达18%左右。
应该注意到，有的患者ATGA阴性，但ATMA阳性，因此两种抗体同时检测可提高抗甲状腺自身抗体的检出水平。八.HLA－B27测定
HLA－B27 抗原为人类MHC I类 抗原B位点的表达产物，可分为几种亚型。HLA －B27的检测方法有多种，补体依赖性微量细胞毒法(CDMA)；流式细胞仪法；玫瑰花法；ELISA法；等电聚焦法等。近来应用PCR法检测HLA－B27，敏感而特异，并且可进行B27亚型的分析。l〖参考值〗
非洲－美洲人：3－4%； l 高家索人：6－8%； l 亚洲人：1%。〖临床意义〗
强直性脊柱炎(AS)患者HLA－B27阳性率为90－95%。大约42%的青年类风湿关节炎(JRA)存在HLA－B27，Reiter¡®s 综合征患者阳性率大约79%。此外，肠病性关节炎、银屑病性关节炎也有一定的阳性率。RA病人阳性率不高。〖注意事项〗
在评价HLA－B27阳性结果时应结合临床表现综合考虑，不能单纯依靠此结果作出诊断。
其他免疫指标及检测
C反应蛋白（C-Reactive Protein，CRP）
CRP是一种急性时相蛋白，由肝细胞合成，可与肺炎球菌细胞壁C多糖发生沉淀反应，故称CRP。在各种炎症的急性期或组织创伤时，血清CRP浓度急剧升高。CRP不仅可结合多种细菌（bacteria）,真菌(fungi)及原虫（protozoal)体内的多糖物质，而且在钙离子存在下，还可以结合磷脂酰胆碱和核酸。结合后的复合体具有激活补体(complement)的作用。
常用检测方法为
酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、速率散射比浊法（rate nephelometry）等。〖参考值〗
<8mg/L 〖临床意义〗
血清CRP 升高多见于：急性、慢性细菌感染；组织损伤坏死；急性心肌梗死；各种炎症；外科手术；肿瘤浸润；急性风湿热和活动性类风湿关节炎，以及其它关节炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作为病毒性感染和细菌性感染的鉴别指标。〖注意事项〗
CRP测定方法不同，在判定结果时应予考虑。此外，雌激素、口服避孕药可使CRP增高，皮质激素和抗炎药可使CRP下降。
类风湿因子（Rheumatoid Factor，RF）
RF是一种自身抗体，可与变性的IgG发生反应，与IgG 的Fc段结合。RF可分为IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集试验检测的主要为IgM型RF。RF主要见于类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis RA)，也可见于其他结缔组织病及其他疾病。检测方法有乳胶凝集试验、致敏羊红细胞凝集法、速率散射比浊法、ELISA法等。〖参考值〗
乳胶法：阴性或<1：20
速率散射比浊法：<30IU/ml 〖临床意义〗
RF见于90%以上的RA病人，效价常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所检测的大部分是IgM-RF。
关于RF分型，临床应用尚不广泛。多数作者认为：IgM－RF效价高低可在一定程度上反映RA的活动性，但无明确的密切关系；IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相关；IgA-RF见于RA、硬皮病、Felty综合征和系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE)，也是RA临床活动性的一个指标；IgE-RF 除RA患者外，也见于Felty综合征和青年型RA。高水平IgM-RF阳性病人预后较差。
从早期RA患者的X线片分析，IgM-RF持续阳性的病人更易发生骨侵蚀。IgA-RF在SS病人中阳性率较高；IgE-RF在恶性关节炎病人中阳性率较高。在RA病人，高效价RF存在并伴有严重的关节功能受限时，常提示预后不良。〖注意事项〗
正常人也可有4％左右的阳性率。随年龄增加，RF的检出率会增加。RA病人RF也可阴性，不能单纯依靠RF阳性来诊断RA。RF还可见于其它多种疾病，其中最常见的是干燥综合征（S.S），发生率在90％以上，且含量一般较高。其它常见的RF阳性的疾病有： SLE、系统性硬化症、高球蛋白血症、结节病、梅毒、麻风、病毒感染、肝硬化等等。有些效价可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解释结果时应予注意。
冷球蛋白（Cryoglobulin CG，)
冷球蛋白是一种球蛋白，4℃时发生沉淀，30 ℃易聚合，37℃又溶解。CG分为三类：
1.I型(单克隆型)：大多为IgM或IgG 型，无抗补体作用。
2.II型(混合型)：两种或两种以上单克隆Ig混合，以IgM+IgG最常见，也可见IgA+ IgG；IgG+IgM+IgA等。有抗补体作用。
3.III型(多克隆型)： 没有单克隆蛋白。
其检测方法有血球压积管法(定性)和分光光度计法(定量)。〖参考值〗
定性法：阴性
定量法：<80μg/ml。〖临床意义〗
SLE 病人血清中可出现混合型CG。在血管炎、肾小球肾炎、淋巴细胞增生性疾病也可阳性。在巨球蛋白血症或多发性骨髓瘤病人伴雷诺氏现象时与I型冷球蛋白血症有关。II型冷球蛋白血症与自身免疫病例如血管炎、肾小球肾炎、SLE、RA 和 SS 有关。在某些感染如肝炎、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染和弓形虫病也可出现。〖注意事项〗
1.标本必须在37℃采集，并保持温度直至进行实验。
2.一般不用于无冷球蛋白血症临床表现的人群过筛。
3.冷凝集素可能引起某些自动血球计数仪的错误结果。小结:
总之，自身抗体的检测对诊断自身免疫病有着重要的意义。人血清中存在着多种自身抗体，有器官特异性的，也有非器官特异性的。因此，在选择自身抗体检测时应综合考虑，合理选用。
近年来出现了许多新的自身抗体，在此就不详细叙述了，可以参看有关文献。胞浆抗体
Hep-2细胞具有许多胞浆抗原。如有特异性胞浆抗体存在，可出现强阳性胞浆荧光。包括抗线粒体抗体（AMA）、抗核糖体抗体、抗肌动蛋白抗体即抗平滑肌抗体（ASMA）、抗高尔基体抗体、抗丝抗体（如Vimentin）。一般最有意义的是AMA和ASMA，可是荧光染色Hep2细胞却不能鉴定这两种抗体，可应用鼠肾和鼠胃切片作进一步分析。系统性风湿病活动期的评价
自身抗体检测以诊断全身性疾病比监测该病活动更有意义。但抗dsDNA抗体效价却与活动性有关。应定期检测抗dsDNA抗体的效价及C3、C4的含量。以及测定循环免疫复合物（CIC）的含量。ESR和CRP在炎症反应时常常升高。RA病情加重时，CRP明显增高。SLE活动期，CRP一般正常。器官特异性自身免疫性疾病 组织抗体
许多自身抗体可采用IFA测定，用鼠肾和胃的切片能测出抗线粒体、平滑肌、肝肾微粒体和胃壁细胞的抗体。甲状腺组织切片可测定抗甲状腺自身抗体。自身免疫性肝病
在肝脏病变中，ANA阳性率可达40-80%。抗线粒体抗体（AMA）与原发性胆汁性肝硬变有关。特别是高效价的M2和M9线粒体抗原。
约一半的自身免疫性肝炎的病人有较高效价的ASMA。此外，肝肾微粒体抗体（LKMAs），抗可溶性肝抗原（SLA）抗体，抗肝细胞膜抗体等也可用于自身免疫性肝病诊断和监测。其他
肾脏疾病常测定的抗体有抗dsDNA抗体，抗肾小球基底膜抗体等，还可测定CIC，以及作肾组织活检进行荧光染色。
韦格纳肉芽肿病是一种发生于上下呼吸道的坏死性血管炎，也累及肾脏，病人常死于肾和肺衰竭。检查抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAs）是诊断指标之一。也可通过ELISA测定抗髓过氧化物酶抗体，抗蛋白酶3抗体，有助于诊断和鉴别诊断。
胃肠道疾病中，恶性贫血与抗胃壁自身抗体有关，与抗内因子抗体的相关性达75%。抗胰岛细胞抗体（ICAs），抗谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）与I型糖尿病有一定关系。重症肌无力病人可出现抗骨骼肌抗体。多发性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗体。抗心肌抗体常见于心肌梗死、心脏手术或心肌损伤后。
第二篇：免疫学检验教学大纲.
《免疫学检验》教学大纲
（供卫生检验专业使用）
一、课程性质、目的和任务
免疫学检验是研究免疫学技术在医学领域中应用的一门学科，是卫生检验专业一门重要的专业课。免疫学检测技术因其特异性强、敏感性高、稳定、简便和快速的优势，现已广泛应用于生物学、临床医学、预防医学及其他有关领域。
通过对该课程的学习，掌握各类免疫学检验技术的原理、类型、技术要点、实际应用及方法学评价，更好的为防病治病服务。
二、课程基本要求
课程基本要求分为“掌握”、“熟悉”和“了解”三个层次。“掌握”的内容要求理解透彻，能在本学科和相关学科的学习工作中熟练、灵活运用其基本理论和基本概念；“熟悉”的内容要求能熟知其相关内容的概念及有关理论，并能适当应用；“了解”的内容要求对其中的概念和相关内容有所了解。
通过对该课程的学习，使学生掌握各类免疫学检验技术的原理、类型、技术要点、实际应用及方法学评价，更好的为防病治病服务。
考试内容中“掌握”的内容约占70%，“熟悉、了解”的内容约占25%，有5%左右的大纲外内容。
本大纲的配套使用教材是卫生部规划教材《免疫学检验》第一版（徐顺清、刘衡川主编，北京：人民卫生出版社，2006年）。
三、课程基本内容、学时分配
免疫学检验总学时数为54学时（其中理论教学18学时，实习36学时）。主要内容为抗原抗体的纯化、免疫原和特异性抗体的制备、沉淀反应和凝集反应、补体测定和补体结合试验、标记免疫技术、免疫细胞检测技术、免疫球蛋白测定、健康相关产品的免疫学检验等。并开设免疫球蛋白的分离纯化、双向免疫扩散试验、聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附试验、NK细胞活性测定等实验课。
第一章 抗原抗体的纯化（2学时）
【掌握】
几种常用抗原和抗体纯化方法的基本原理、方法评价和应用。【熟悉】
各种抗原抗体纯化方法的程序。【了解】
各种抗原抗体纯化方法的影响因素以及分离物的选择。
第二章 免疫原与特异性抗体的制备（2【掌握】
学时）1．人工免疫原的制备方法； 2．多克隆抗体的制备方法； 3．杂交瘤技术的原理及技术要点。【熟悉】
人鼠嵌合抗体、小分子抗体、双特异性抗体、抗体库技术的概念。【了解】
1．可溶性抗原的制备方法； 2．单克隆抗体制备流程及应用。
第三章 沉淀反应与凝集反应（2【掌握】
1．沉淀反应和凝集反应的基本原理、类型及应用； 2．双向琼脂扩散试验、对流免疫电泳的原理及应用； 3．间接血凝试验的原理及应用。【了解】
其他凝集技术类型、原理和应用。
学时）
第四章 补体测定和补体结合试验（2学时）
【掌握】
1．溶血反应体系；
2．血清总补体溶血（CH50）测定。【熟悉】
补体结合试验的类型与原理。【了解】
补体结合试验的试验方法、影响因素、方法评价及应用。
第五章 酶免疫技术（2学时）
【掌握】
1．固相酶免疫测定的方法类型及原理； 2．ELISA技术要点。【熟悉】
酶免疫技术的分类。【了解】
其他酶免疫技术及应用。
第六章 荧光免疫技术（1学时）
【掌握】
荧光抗体技术的原理、技术方法及在卫生检验中的应用。【熟悉】 荧光免疫显微技术和流式荧光免疫技术的概念。【了解】
荧光抗体的制备方法。
第七章 放射免疫技术（1学时）
【掌握】
放射免疫测定的原理、方法、评价及应用。【熟悉】
放射免疫技术的类型。【了解】
免疫放射测定原理、技术类型及技术要点。
第八章 免疫细胞检测技术（3学时）
【掌握】
1．T淋巴细胞功能检测方法原理及结果判定； 2．B淋巴细胞功能检测的体外实验原理及结果判定； 3．NK细胞活性检测方法原理、结果判定及卫生学意义； 4．吞噬细胞功能的检测方法原理、结果判定及卫生学意义。【熟悉】
外周血液中单个核细胞、淋巴细胞及亚群分离纯化方法，淋巴细胞保存及活力测定方法。【了解】
T淋巴细胞表面标志的检测方法及卫生学意义的评价。
第九章 免疫球蛋白测定（1学时）
【掌握】
免疫球蛋白定量检测方法及参考值，方法评价及应用。【了解】
血清Ig、尿微量Ig、脑脊液Ig定量检测的临床意义。
第十章 健康相关产品的免疫学检验（2学时）
【掌握】
1．保健食品免疫学检验项目、检验方法和评价标准； 2．化妆品的免疫学检验方法。【了解】
有毒有害物质的免疫学检验的技术要点、方法和应用。
第三篇：【免疫学总结】自身免疫性疾病
【免疫学总结】自身免疫性疾病
免疫自身稳定 是指机体的免疫系统对自身的组织细胞成分处于免疫耐受状态不发生免疫应答。第一节
概述
自身免疫机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的能力,通常对机体不造成损伤。
自身免疫病因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的疾病状态自身免疫性疾病的特点1)患者体内可检测到针对自身抗原的自身抗体和/或自身反应性T淋巴细胞 2)自身抗体和/或自身反应性T淋巴细胞介导对自身细胞或自身成分的适应性免疫应答，造成损伤或功能障碍； 3)病情的转归与自身免疫反应强度密切相关；4)易反复发作，慢性迁延。
自身免疫性疾病的分类1.器官特异性自身免疫病(1)针对自身抗原的自身抗体或淋巴细胞损伤靶器官或腺体细胞。(2)某些自身抗体可通过对靶器官或腺体的正常功能过度刺激或抑制.代表疾病桥本氏甲状腺炎、毒性弥漫性甲状腺肿、胰岛素依赖的糖尿病
2.全身性自身免疫病由针对多种器官和组织靶抗原的自身免疫反应引起，患者的病变可见于多种器官和组织。代表疾病：系统性红斑狼疮 第二节
自身免疫性疾病的免疫损伤机制及典型疾病 发病原因自身抗体和/或自身反应性T淋巴细胞介导的免疫应答。
发病机制由自身抗体/自身反应性T淋巴细胞，或二者共同引起的针对自身抗原的超敏反应性疾病，其发病机理和超敏反应的发病机理相同。
一、自身抗体引起的自身免疫性疾病自身抗体包括:细胞膜或膜吸咐成分自身抗体
细胞表面受体自身抗体（1）激动型抗受体自身抗体（2）阻断型抗受体自身抗体
细胞外成分自身抗体(细胞外基质成份)1.自身抗体引起的细胞破坏性自身免疫性疾病自身抗体与细胞表面抗原结合后引起的损伤机制：a.补体依赖的细胞毒作用（CDC）、b.补体和抗体的调理作用、c.ADCC、d.嗜中性粒细胞的破坏细胞作用。常见疾病有自身免疫性溶血性贫血、血小板减少性紫癜、血型不合引起的输血反应。
2.细胞表面受体自身抗体引起的自身免疫性疾病抗体与细胞表面受体结合，过度刺激器官功能（如Graves病），或阻断受体与配体结合，抑制器官功能（如重症肌无力）。3.细胞外成分自身抗体引起的自身免疫性疾病如肺出血肾炎综合征，系由抗基底膜Ⅳ胶原自身抗体启动的免疫应答，导致肾炎和肺部出血。4.自身抗体-免疫复合物引起的自身免疫性疾病如SLE，因免疫复合物沉积在各种组织的小血管壁，激活补体引起细胞损伤；核抗原物质释出又导致产生更多的自身抗体，进一步加剧损伤。
二、自身反应性T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病⒈胰岛素依赖型糖尿病CTLà胰岛的β细胞--使胰岛素分泌严重不足 ⒉实验性变态反应性脑脊髓膜炎（EAE）存在髓鞘碱性蛋白（MBP）特异的Th1 ⒊人多发性硬化病（MS）存在髓鞘碱性蛋白（MBP）特异的Th1 ⒋多发性硬化症(中枢神经系统的疾病)
三、自身抗体、自身反应性淋巴细胞均可导致发病重症肌无力（MG）（抗乙酰胆碱受体自身反应性T细胞）
类风湿关节炎（抗关节滑膜抗原的自身反应性淋巴细胞）第三节
自身免疫性疾病发生的相关因素
一、抗原方面的因素1．免疫隔离部位抗原的释放免疫隔离部位
2.自身抗原发生改变由生物、物理、化学以及药物等因素引起。
3.分子模拟有些微生物与人的细胞或细胞外成分有相同或类似的抗原表位，在感染人体后激发的针对微生物抗原的免疫应答，也能攻击含有相同或类似表位的人体细胞或细胞外成分，这种现象被称为分子模拟。
二、免疫系统方面的因素1．MHCⅡ类分子的异常表达只在APC表达。胰岛素依赖糖尿病β胰岛细胞高表达MHCII。2．免疫忽视的打破免疫忽视 是指免疫系统对低水平抗原或低亲和力抗原不发生免疫应答的现象。3．调节性T细胞的功能失常发挥免疫抑制。
4．活化诱导的C死亡发生障碍激活的效应性淋巴C在行使效应功能后死亡的现象称为活化诱导的细胞死亡（AICD）。5．淋巴细胞的多克隆激活：
6．表位扩展免疫系统针对一个优势表位发生免疫应答后，可能对隐蔽表位相继发生免疫应答，这种现象被称为表位扩展。
三、遗传方面的因素1．HLA等位基因的基因型和人类自身免疫性疾病的易感性相关
2．与自身免疫性疾病发生相关的其他基因 3．性别与某些自身免疫性疾病的发生相关 第四节
自身免疫性疾病的防治原则
1．预防和控制微生物感染采用疫苗和抗菌素控制，尤其长期感染。
2.应用免疫抑制剂环孢菌素A和FK506。特异性抑制T细胞功能，如抑制IL-2产生。
3．应用细胞因子及其受体的抗体或阻断剂
第四篇：《临床免疫学和免疫学检验》课程简介
《临床免疫学和免疫检验》课程简介
课程名称：《临床免疫学和免疫检验》
英方名称：《clinical immunology and immunological examinations 》 开课单位：遵义医学院医学检验系
课程性质：必修课
总 学 时：90学时，其中理论：46学时，实验：44学时
学分：5学分
适用专业：医学检验
教学目的：通过教学使学生掌握临床免疫学基本理论及免疫学检验的方法。对各种
疾病血清、体液、组织等标本的免疫学检验原理及操作程序，依据抗原或抗体的变化规律，进而对疾病的发生、发展及预后做出诊断等。
内容简介：临床免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学领域中应用的一门学科。
重点阐述免疫学技术的原理、类型、技术要点、临床应用及其方法学评价。内容包括：抗原抗体反应、免疫原和抗血清的制备、凝集反应、沉淀反应、补体检测及应用、荧光免疫技术、酶免疫技术、流式细胞技术、免疫细胞的分离与检测、细胞因子测定及应用、超敏反应及其检测、自身免疫病及检验、免疫增殖病及检验、免疫缺陷病及其检验、肿瘤免疫及检验、移植免疫及检验、免疫学检验的质量控制等。
考核形式：闭卷考试
教材：《临床免疫学和免疫学检验》，人民卫生出版社，王兰兰，3版，2003年。参考书目：
1.《现代检验医学与临床实践》，上海科学技术文献出版社，王鸿利，1999年。
2.《检验医学自动化及临床应用》人民卫生出版社，彭黎明，2003年。
3.《内科学》，人民卫生出版社，叶任高，6版，2004年。
主讲教师：李树仁教授
第五篇：《临床免疫学检验》双语教学的探索与实践.
《临床免疫学检验》双语教学的探索与实践
[ 10-02-07 09:47:00 ]
编辑：studa20
作者：蒋红梅, 肖林生, 程萍，费樱，逯惠敏
【关键词】
高等院校； 医学检验专业； 临床免疫学检验； 双语教学
双语教学是指用外语（主要用英语）进行学科教学的一种教学体系。教育部2001年颁发了《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》，明确提出要在高等院校积极推动使用英语等外语进行教学。医学院校开展双语教学是培养具有较强外语应用能力医学生的需要［1］。为提高检验人才的素质，使之能适应国内外医学检验科学的发展，了解和掌握本学科的最新成果，在专业课程教学中引入双语教学已成为必然的趋势，2006年3～8月在医学检验专业主干课程《临床免疫学检验》教学中进行了中英双语教学的调查和实践，现报告如下。
材料和方法
1.1 研究对象
贵阳医学院2003级本科医学检验专业学生108人。
1.2 教学方法
采用全国高等医药院校规划教材《临床免疫学检验》［2］。选择其中部分章节，按照教学大纲的要求，制成双语教学CAI课件，教师做好中、英文上课的充分准备。授课采用以下4种形式：（1）采用中文教材、中英文混合课件（英文比例不超过50%）；（2）采用中文教材、补充英文资料、中文课件；（3）采用中文教材、补充英文资料、中英文混合课件（英文比例不超过50%）；（4）采用中文教材、补充英文资料、英文课件。授课时主要采用中文和英文并举的教学方式，对重点和难点的理论知识点以中文讲解为主，对比较浅显易懂的部分，尽量用英语讲解，进而调动学生积极性，英语讲授内容比例占到总内容的50%以上。
1.3 调查方法
问卷调查在实施双语教学结束后进行，由学生不记名填写。调查使用自行设计的问卷，内容涉及对双语教学的态度、双语教学教材的选择、授课语言（中英文）的应用比例、双语教学授课效果等。
结果
2.1 学生对双语教学的态度和建议
见表1。本次调查显示，多数学生（65.8％）对《临床免疫学检验》采用双语教学表示理解和支持；多数学生（56.5％）希望采用中文教材、中英文混合课件（英文比例不超过50%）；多数学生希望教师以中文授课为主，仅介绍个别专业术语的英文名称，或在用英文讲授后，再翻译成中文。表1 医学检验本科学生对《临床免疫学检验》双语教学的态度和建议（略）
2.2 学生对《临床免疫学检验》双语教学效果的评价
见表2。对于采用双语进行专业课程教学，仅21.3％学生认为学习效果比单纯用汉语教学好，41.7％的学生认为对专业知识的学习效果比单纯汉语教学差，另24.1％学生认为学习效果与单纯中文教学差不多；对于双语教学CAI课件，52.8%的学生认为不同英文程度的课件可作为双语教学的辅助学习资料,67.6%的学生认为促进了专业英语的学习,9.3%的学生认为可提高英语的实际应用能力；并且与汉语教学相比，46.3％学生认为双语教学使专业学习变得特别吃力，仅5.6％的学生认为可以学得很轻松。表2 医学检验本科学生对《临床免疫学检验》双语教学效果的评价（略）
讨论
高校开展双语教学是我国高等教育顺应时代发展的必然，本文在我院医学检验本科专业课程《临床免疫学检验》教学中作了有关双语教学的调查和尝试，认为在双语教学实施过程中仍然存在一些需要解决的问题。
3.1 学生
学生是学习的主体，成功开展双语教学需要学生的配合。在实施双语教学之前，应对学生进行充分动员，让他们对双语教学有足够的重视，只有这样才能发挥他们的主观能动性。在此项调查中，65.8%的学生支持双语教学，说明多数学生思想上是认同双语教学的，这是我们开展双语教学的重要前提。但是仍有26.9%学生对双语教学持强烈反对态度，作为教师不应该放弃任何一个学生，对这一部分学生应该认真分析其反对的原因。大多数学生的英语基础较差，给开展双语教学造成一定的困难。调查显示，仅7.4%的学生接受教师全英文授课方式，多数学生要求教师用中文授课，仅个别专业名词用英语表述，或在用一段英文授课后再作中文解释。许多（41.7％）学生担心使用双语教学会对专业知识的学习效果有影响，并且46.3%的学生感觉双语教学使得专业知识的学习特别吃力，这也是部分学生反对双语教学的主要原因。应该说进入专业课程学习阶段的大学生经过高中阶段的英语学习、高考的选拔和低年级阶段大学英语的学习，已有一定英文基础，基本具备双语教学的条件，教师应该鼓励学生树立信心，只要努力一定能接受双语教学，在学好专业知识的同时，也一定能提高专业英语水平。同时这也提示，双语教学是一个系统工程，要顺利开展双语教学，对学生基础英语的培养非常重要，英语应用能力的提高绝不可能简单地通过某一门课程的双语教学就能完成，只有通过多门学科、多年级循序渐进地开展双语教学才能提高学生应用英语的能力。同时专业课程教师实施双语教学也必须有计划有步骤进行，结合教学对象的实际情况，初期最好采取简单渗透式和过渡式的方式，在实际教学过程中结合专业知识的难易、学生对专业知识的掌握程度灵活调整英语在教学中的应用比例，特别要注重专业词汇的讲解。
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