第一篇:T6新世纪紫外可见分光光度计 详细操作步骤
T6新世纪紫外可见分光光度计
快速操作指南
一、开机自检:依次打开打印机、仪器主机电源,仪器开始初始化;约3分钟时间初始化完成。
◆初始化完成后,仪器进入主菜单界面。
二、进入光度测量状态:在上图所示状态按
键,进入光度测量界面。
三、进入测量界面:按
键进入样品测定界面。
四、设置测量波长:按按
键,在下图界面输入测量的波长,例如需要在460nm测量,输入460,键确认,仪器将自动调整波长。
◆调整波长完成后如下图
五、进入设置参数:在这个步骤中主要设置样品池。按到“试样设定”,如图显示。按
键进入参数设定界面,按
键使光标移动
键确认,进入设定界面。
六、设定使用样品池个数:按键使光标移动到“使用样池数”,如图显示。按键循环选择需要使用的样品池个数。(主要根据使用比色皿数量确定,比如使用2个比色皿,则修改为2)
七、样品测量:按键返回到参数设定界面,再按
键返回到光度测量界面。在1号样品
键进行空白校正,再按池内放入空白溶液,2号池内放入待测样品。关闭好样品池盖后按键进行样品测量。测量结果如下图显示:
如果需要测量下一个样品,取出比色皿,更换为下一个测量的样品按
键既可读数。
如果需要更换波长,可以直接按键,调整波长。
注意:更换波长后必须重新按进行空白校正。
如果每次使用的比色皿数量是固定个数,下一次使用仪器时可以跳过第五、六步骤直接进入样品测量。
八、结束测量:测量完成后按键打印数据,如果没有打印机请记录数据。退出程序或关闭仪器后测量数据将消失。确保已从样品池中取出所有比色皿,清洗干净以便下一次使用。按返回到仪器主菜单界面后再关闭仪器电源。
键直到
第二篇:Uvmini-1240紫外分光光度计操作
UVmini-1240紫外分光光度计
一、原理:同721/722
二、仪器简介
岛津UVmini-1240是一款小巧灵便的紫外可见分光光度计,波长范围:190~1100nm,波长准确度±0.3nm,吸光度测量范围-0.3~3.0
Abs,配20W卤素灯(长寿命2000h型)和氘灯。
仪器面板介绍:
1、START/STOP(启动/停止)参数设置完成按下该键开始或停止测量。
2、AUTO
ZERO
(自动归零)按此键,当前波长下读数将自动设为0Abs(100%T),确认样品测量前在放置有空白吸收池。
3、GOTO
WL,改变波长
4、ENTER(键)
输入数值按该键确认所输入的数值
5、光标键
7、RETURN
返回键
8、LOD
CONT
调对比度
9、PRINT(打印)用该键输出当前屏幕的硬拷贝
10、数字键
11、CE键
清除数值输入错误可按此键清除
12、F1、F2、F3、F4,选择对应的功能
13、开关(背面)
14、样品室
三、操作
1、打开仪器后部电源开关,分光光度计开始自检,所有项目进行初始化,每一项初始化完成,显示OK,大概初始化过程约需6分钟。
2、每一项初始化正常,将显示“OK”,若检测异常,将出现“NG”(No
Good)字样,出现“NG”信息,按照表中检测点的项目检查仪器。
3、初始化结束后,UV1240同样存在预热稳定的过程,10分钟可进入样品测定。
4、样品测定(可选以下两种方式)
(1)、按下1“光度值”键,进入简易的吸光度测量,按下GOTO
WL选择相应的波长,按下ENTER确定键,确定后,空白放在样池中清零,倒入样品,进行样品测定,得出吸光值A结果,纳入计算,计算方法与722分光光度计一致。
(2)、按下F1“参数”,选择相应的曲线进入测定界面,先把空白试液放在样池中,清零,再放入入样品,进行样品测定。
5、曲线制作操作
按下3“定量”键,进入多点标准,在标准个数中输入曲线中所有点的数值(包括零点),选择测定次数,是否过原点,设置完成,按下START/STOP键,切换到曲线制作屏幕,设置λ即相应的波长,2键方法中修改成为所需的条件,按下测定键,输入曲线相应的浓度,选择2测定进行曲线的测定,所有数据测定完成后,保存在数据文件中即可(只有“0截距”设定为“否”的情况下才显示相关系数r2和线性方程)。
6、比色完毕,按RETURN建回到初始界面,关机,盖上防尘罩。
三、维护
1、使用仪器应保持室内清洁,可用水或少量清洗剂润湿的软布清洁,擦拭仪器避免使用过湿的抹布,或液体滴入样品室。滴入水和有机溶剂,易导致电路故障或机械故障。
2、当处理大量液体样品,立即擦拭渐洒的样品并检查样品室的底板上是否渐洒样品溶液,确认无残留,如有蒸发的气体将充满样品室的光通道,腐蚀内部元件并引起测定结果不准确。
3、检查基线平直度(原则上每月一次),如存在异常,或不能回零,则校正仪器基线。
(1)、测量方式:ABS
(2)、波长范围:1100nm~200nm
(3)、记录范围:-0.01A~0.01A
(4)、扫描速度:快
(5)、扫描次数:1
(6)、显示方式:顺序
基线平直度应在±0.010ABS之间,不包括震动噪声。点击“校基线”开始,不放比色皿进行空校。
4、检查波长准确度(原则上每月一次)。
紫外分光光度计在656.1nm和486.0nm处有2个特征锐线校准紫外分光光度计的最好的方式,准确度极高,所以只用这两个波长校验波长准确度。
(1)、测量方式:E(能量)
(2)、波长范围:660nm~650nm
(3)、记录范围:
0E~150E
(4)、扫描速度:非常慢
(5)、扫描次数:1扫描(1很快2快3中4慢5很慢)速度越快,取样间隔越宽,数据点少,扫描时间所需时间越短。
(6)、显示方式:顺序
(7)、增益:3(最小设定1,最大为6,每一级灵敏度大约提高4倍)
(8)、光源:D2灯
比较找出峰的波长与656.1nm的差值,应在±1.0之间。
(1)、测量方式:E
(2)、波长范围:
490nm~480nm
(3)、记录范围:
0E~30E
(4)、扫描速度:非常慢
(5)、扫描次数:1扫描
(6)、显示方式:顺序
(7)、增益:3
(8)、光源:D2灯
比较找出峰的波长与486.0nm的差值,应在±1.0之间。
5、日常使用时,有时会出现无法调零,可能因为空白消光值过高(高于0.200Abs)或测量室内发生腐蚀或光栅氧化引起,班组可以清理测量室卫生或进行基线校正。
6、实验室的环境湿度一般控制45~80%(若室内温度为30℃或更高,相对湿度应不超过70%),温度一般控制在15~35℃之间。
7、在日常维护工作中要经常更换仪器的硅胶,定期开机,这样才能保证仪器的正常使用和测量数据稳定可靠。
四、注意:同721/722
仅供参考
第三篇:紫外可见分光光度计单一来源采购公告-华东师范大学
单一来源采购公告
根据相关规定,现对紫外可见分光光度计进行单一来源采购,欢迎合格的供应商前来报价。
项目名称:紫外可见分光光度计 项目编号:HS-2017178 项目联系方式: 联系人:王翠红 联系电话:***
采购单位联系方式:
采购单位:华东师范大学设备处 采购单位地址:上海市东川路500号 采购单位联系方式:刘老师 021-54345242
一、拟采购的货物或者服务的说明: 紫外可见分光光度计用于常规有机物定性、定量检测,同时通过配备积分球附件可以用于不同温度下粉末、纸、布料、玻璃、薄膜等固体试样的漫反射、镜面反射等反射光谱测定。设备组成:紫外可见主机、温控系统、固体样品支架、样品池(用于固体、液体及粉末等不同样品)、积分球、电脑、打印机、附件及配件组成。该成套设备必须是进口原装,不接受由不同品牌、厂家模块组合的产品。
二、采用单一来源采购方式的原因及相关说明: 紫外可见分光光度计是超分子有机化学研究工作中进行手性化合物合成与分析,测定超分子化合物紫外吸收的必备分析仪器。作为绿色化学实验室全合成研究方向的学术骨干,在我们的研究工作中,每天都有大量合成化合物需要进行紫外吸收的测试,需要对样品在不同温度下漫反射和镜面反射进行研究,从而确定化合物的正确结构。这些工作要通过紫外分光光度计来实现。有机化学合成化合物的研究中,需要我们根据合成化合物的各种谱图进行结构分析,其中紫外光谱分析是其中一项。我们现有的质谱分析采用的是岛津公司的基质辅助激光解析质谱、制备型液质联用仪及气质联用仪等一系列仪器,研究数据中一般要求实验及表征数据进行统一性,所以采用同一厂家的仪器是数据统一的基础。考虑到数据的一致性,我们需要将紫外数据和荧光、红外以及质谱数据进行对比计算,得到理想的实验结果。这套仪器的配套不仅可以提高本小组的工作效率,同时还可以为重点实验室其他小组,甚至校内其他单位服务。
基于以上原因,结合样品在不同温度下漫反射和镜面反射研究的需要,我们申请采购岛津公司的配备温控装置和积分球的紫外可见分光光度计。
三、公示时间:
2017年 10 月 30 日至2017年 11 月 3 日 16点止
四、拟定的唯一供应商名称及其地址:
岛津企业管理(上海)有限公司 淮海西路570号
五、其它补充事宜
供应商对本项目有异议的,可于公示期内,以书面形式(加盖单位公章)向华东师范大学设备处提出。
六、预算金额
预算金额:3.0万美金
第四篇:紫外—可见分光光度法教案
第五章
紫外—可见分光光度法
一.教学内容
1. 紫外-可见吸收光谱的产生(分子的能级及光谱、有机物及无机物电子能级跃迁的类型和特点)2. 吸收定律及其发射偏差的原因
3. 仪器类型、各部件的结构、性能以及仪器的校正 4. 分析条件的选择
5. 应用(定性及结构分析、定量分析的各种方法、物理化学常数的测定及其它方面的应用
二.重点与难点
1. 比较有机化合物和无机化合物各种电子跃迁类型所产生吸收带的特点及应用价值
2. 进行化合物的定性分析、结构判断
3. 定量分析的新技术(双波长法、导数光谱法、动力学分析法)4. 物理化学常数的测定
三.教学要求
1. 较为系统、深入地掌握各种电子跃迁所产生的吸收带及其特征、应用 2. 熟练掌握吸收定律的应用及测量条件的选择 3. 较为熟练仪器的类型、各组件的工作原理 4. 运用各种类型光谱及的经验规则,判断不同的化合物
5. 掌握定量分析及测定物理化学常数的常见基本方法 6. 一般掌握某些新的分析技术
四.学时安排
5学时
研究物质在 紫外、可见光区 的分子吸收光谱 的分析方法称为紫外-可见分光光度法。紫外—可见分光光度法是利用某些物质的 1 分子吸收200 ~ 800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子 在电子能级间的跃迁,广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。
第一节
紫外—可见吸收光谱
一、分子吸收光谱的产生
在分子中,除了电子相对于原子核的运动外,还有核间相对位移引起的振动和转动。这三种运动能量都是量子化的,并对应有一定能级。在每一电子能级上有许多间距较小的振动能级,在每一振动能级上又有许多更小的转动能级。
若用△E电子、△ E振动、△ E转动分别表示电子能级、振动能级转动能级差,即有△ E电子 △ E振动 △ E转动。处在同一电子能级的分子,可能因其振动能量不同,而处在不同的振动能级上。当分子处在同一电子能级和同一振动能级时,它的能量还会因转动能量不同,而处在不同的转动能级上。所以分子的总能量可以认为是这三种能量的总和:
E分子 = E电子
+ E振动
+ E转动
当用频率为的电磁波照射分子,而该分子的较高能级与较低能级之差△ E恰好等于该电磁波的能量 h时,即有
△ E
= h
(h为普朗克常数)
此时,在微观上出现分子由较低的能级跃迁到较高的能级;在宏观上则透射光的强度变小。若用一连续辐射的电磁波照射分子,将照射前后光强度的变化转变为电信号,并记录下来,然后以波长为横坐标,以电信号(吸光度 A)为纵坐标,就可以得到一张光强度变化对波长的关系曲线图——分子吸收光谱图。
二、分子吸收光谱类型
根据吸收电磁波的范围不同,可将分子吸收光谱分为远红外光谱、红外光谱及紫外、可见光谱三类。
分子的转动能级差一般在0.005 ~ 0.05eV。产生此能级的跃迁,需吸收波长约为250 ~ 25m的远红外光,因此,形成的光谱称为转动光谱或远红外光谱。
分子的振动能级差一般在0.05 ~ 1 eV,需吸收波长约为25 ~ 1.25m的红外光才能产生跃迁。在分子振动时同时有分子的转动运动。这样,分子振动产生的吸收光谱中,包括转动光谱,故常称为振-转光谱。由于它吸收的能量处于红外光区,故又称红外光谱。电子的跃迁能差约为1 ~ 20 eV,比分子振动能级差要大几十倍,所吸收光的波长约为12.5 ~ 0.06m,主要在真空紫外到可见光区,对应形成的光谱,称为电子光谱或紫外、可见吸收光谱。
通常,分子是处在基态振动能级上。当用紫外、可见光照射分子时,电子可以从基态激发到激发态的任一振动(或不同的转动)能级上。因此,电子能级跃迁产生的吸收光谱,包括了大量谱线,并由于这些谱线的重叠而成为连续的吸收带,这就是为什么分子的紫外、可见光谱不是线状光谱,而是带状光谱的原因。又因为绝 大多数的分子光谱分析,都是用液体样品,加之仪器的分辨率有限,因而使记录所得电子光谱的谱带变宽。
由于氧、氮、二氧化碳、水等在真空紫外区(60 ~ 200 nm)均有吸收,因此在测定这一范围的光谱时,必须将光学系统抽成真空,然后充以一些惰性气体,如氦、氖、氩等。鉴于真空紫外吸收光谱的研究需要昂贵的真空紫外分光光度计,故在实际应用中受到一定的限制。我们通常所说的紫外—可见分光光度法,实际上是指近紫外、可见分光光度法。
第二节
化合物紫外—可见光谱的产生
在紫外和可见光谱区范围内,有机化合物的吸收带主要由*、*、n*、n*及电荷迁移跃迁产生。无机化合物的 3 吸收带主要由电荷迁移和配位场跃迁(即d—d跃迁和f—f跃迁)产生.由于电子跃迁的类型不同,实现跃迁需要的能量不同,因此吸收光的波长范围也不相同。其中*跃迁所需能量最大,n*及配位场跃迁所需能量最小,因此,它们的吸收带分别落在远紫外和可见光区。从图中 可知,*(电荷迁移)跃迁产生的谱带强度最大,*、n*、n*跃迁产生的谱带强度次之,(配位跃迁的谱带强度最小)。
一、有机化合物的紫外—可见吸收光谱
(一)、跃迁类型
基态有机化合物的价电子包括成键电子、成键电子和非键电子(以 n表示)。分子的空轨道包括反键 *轨道和反键*轨道,因此,可能的跃迁为*、*、n* n*等。
1,*跃迁
它需要的能量较高,一般发生在真空紫外光区。饱和烃中的—c—c—键属于这类跃迁,例如乙烷的最大吸收波长max为135nm。
2,n*跃迁
实现这类跃迁所需要的能量较高,其吸收光谱落于远紫外光区和近紫外光区,如CH3OH和CH3NH2的n*跃迁光谱分别为183nm和213nm。
3,*跃迁
它需要的能量低于*跃迁,吸收峰一般 处于近紫外光区,在200 nm左右,其特征是摩尔吸光系数大,一般max104,为强吸收带。如乙烯(蒸气)的最大吸收波长max为162 nm。
4,n*跃迁
这类跃迁发生在近紫外光区。它是简单的生色团如羰基、硝基等中的孤对电子向反键轨道跃迁。其特点是谱带强度弱,摩尔吸光系数小,通常小于100,属于禁阻跃迁。
5,电荷迁移跃迁
所谓电荷迁移跃迁是指用电磁辐射照射化合物时,电子从给予体向与接受体相联系的轨道上跃迁。因此,电荷迁移跃迁实质是一个内氧化—还原的过程,而相应的吸收光谱称为电荷迁移吸收光谱。例如某些取代芳烃可产生这种分子内电荷迁移跃迁吸收带。
电荷迁移吸收带的谱带较宽,吸收强度较大,最大波长处的摩尔吸光系数max可大于104。
(二)、常用术语 1,生色团
从广义来说,所谓生色团,是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。但是,人们通常将能吸收紫外、可见光的原子团或结构系统定义为生色团。
2,助色团
助色团是指带有非键电子对的基团,如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等,它们本身不能吸收大于200nm的光,但是当它们与生色团相连时,会使生色团的吸收峰向长波方向移动,并且增加其吸光度。
3,红移与蓝移(紫移)
某些有机化合物经取代反应引入含有未共享电子对的基团(-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、-SR、-NR2)之后,吸收峰的波长将向长波方向移动,这种效应称为红移效应。这种会 使某化合物的最大吸收波长向长波方向移动的基团称为向红基团。
在某些生色团如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后,吸收峰的波长会向短波方向移动,这种效应称为蓝移(紫移)效应。这些会使某化合物的最大吸收波长向短波方向移动的基团(如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3)称为向蓝(紫)基团。(三)有机化合物紫外-可见吸收光谱 1,饱和烃及其取代衍生物
饱和烃类分子中只含有键,因此只能产生*跃迁,即电子从成键轨道()跃迁到反键轨道( *)。饱和烃的最大吸收峰一般小于150nm,已超出紫外、可见分光光度计的测量范围。
饱和烃的取代衍生物如卤代烃,其卤素原子上存在n电子,可产生n* 的跃迁。n* 的能量低于*。例如,CH3Cl、CH3Br和CH3I的n* 跃迁分别出现在173、204和258nm处。这些数据不仅说明氯、溴和碘原子引入甲烷后,其相应的吸收波长发生了红移,显示了助色团的助色作用。直接用烷烃和卤代烃的紫外吸收光谱分析这些化合物的实用价值不大。但是它们是测定紫外和(或)可见吸收光谱的良好溶剂。2,不饱和烃及共轭烯烃
在不饱和烃类分子中,除含有键外,还含有键,它们可以产生*和*两种跃迁。*跃迁的能量小于 *跃迁。例如,在乙烯分子中,*跃迁最大吸收波长为180nm
在不饱和烃类分子中,当有两个以上的双键共轭时,随着共轭系统的延长,*跃迁的吸收带 将明显向长波方向移动,吸收强度也随之增强。在共轭体系中,*跃迁产生的吸收带又称为K带。
3,羰基化合物
羰基化合物含有C=O基团。C=O基团主要可产生*、n*、n*三个吸收带,n*吸收带又称R带,落于近紫外或紫外光区。醛、酮、羧酸及羧酸的衍生物,如酯、酰胺等,都含有 羰基。由于醛酮这类物质与羧酸及羧酸的衍生物在结构上的差异,因此它们n*吸收带的光区稍有不同。
羧酸及羧酸的衍生物虽然也有n*吸收带,但是,羧酸及羧酸的衍生物的羰基上的碳原子直接连结含有未共用电子对的助色团,如-OH、-Cl、-OR等,由于这些助色团上的n电子与羰基双键的电子产生n共轭,导致*轨道的能级有所提高,但这种共轭作用并不能改变n轨道的能级,因此实现n* 跃迁所需的能量变大,使n*吸收带蓝移至210nm左右。4,苯及其衍生物
苯有三个吸收带,它们都是由*跃迁引起的。E1带出现在180nm(MAX = 60,000); E2带出现在204nm(MAX = 8,000);B带出现在255nm(MAX = 200)。在气态或非极性溶剂中,苯及其许多同系物的B谱带有许多的精细结构,这是由于振动跃迁在基态电子上的跃迁上的叠加而引起的。在极性溶剂中,这些精细结构消失。当苯环上有取代基时,苯的三个特征谱带都会发生显著的变化,其中影响较大的是E2带和B谱带。5,稠环芳烃及杂环化合物
稠环芳烃,如奈、蒽、芘等,均显示苯的三个吸收带,但是与苯本身相比较,这三个吸收带均发生红移,且强度增加。随着苯环数目的增多,吸收波长红移越多,吸收强度也相应增加。
当芳环上的-CH基团被氮原子取代后,则相应的氮杂环化合物(如吡啶、喹啉)的吸收光谱,与相应的碳化合物极为相似,即吡啶与苯相似,喹啉与奈相似。此外,由于引入含有n电子的N原子的,这类杂环化合物还可能产生n*吸收带。
二、无机化合物的紫外-可见吸收光谱
产生无机化合物紫外、可见吸收光谱的电子跃迁形式,一般分为两大类:电荷迁移跃迁和配位场跃迁。
(一)电荷迁移跃迁
无机配合物有电荷迁移跃迁产生的电荷迁移吸收光谱。
在配合物的中心离子和配位体中,当一个电子由配体的轨道跃迁到与中心离子相关的轨道上时,可产生电荷迁移吸收光谱。
不少过度金属离子与含生色团的试剂反应所生成的配合物以及许多水合无机离子,均可产生电荷迁移跃迁。
此外,一些具有d10电子结构的过度元素形成的卤化物及硫化物,如AgBr、HgS等,也是由于这类跃迁而产生颜色。
电荷迁移吸收光谱出现的波长位置,取决于电子给予体和电子接受体相应电子轨道的能量差。
(二)配位场跃迁
配位场跃迁包括df
跃迁。元素周期表中第四、五周期的过度金属元素分别含有3d和4d轨道,镧系和锕系元素分别含有4f和5f轨道。在配体的存在下,过度元素五 个能量相等的d轨道和镧系元素七个能量相等的f轨道分别分裂成几组能量不等的d轨道和f轨道。当它们的离子吸收光能后,低能态的d电子或f电子可以分别跃迁至高能态的d或f轨道,这两类跃迁分别称为df
跃迁。由于这两类跃迁必须在配体的配位场作用下才可能发生,因此又称为配位场跃迁。
三、溶剂对紫外、可见吸收光谱的影响
溶剂对紫外—可见光谱的影响较为复杂。改变溶剂的极性,会引起吸收带形状的变化。例如,当溶剂的极性由非极性改变到极性时,精细结构消失,吸收带变向平滑。
改变溶剂的极性,还会使吸收带的最大吸收波长发生变化。下表为溶剂对亚异丙酮紫外吸收光谱的影响。
正己烷
CHClCH3OH
H2O * max/nm
230
238
237
243
n *max/nm
329
315
309
305
由上表可以看出,当溶剂的极性增大时,由n * 跃迁产生的吸收带发生蓝移,而由* 跃迁产生的吸收带发生红移。因此,在测定紫外、可见吸收光谱时,应注明在何种溶剂中测定。
由于溶剂对电子光谱图影响很大,因此,在吸收光谱图上或数据表中必须注明所用的溶剂。与已知化合物紫外光谱作对照时也应注明所用的溶剂是否相同。在进行紫外光谱法分析时,必须正确选择溶剂。选择溶剂时注意下列几点:
(1)溶剂应能很好地溶解被测试样,溶剂对溶质应该是惰性的。即所成溶液应具有良好的化学和光化学稳定性。
(2)在溶解度允许的范围内,尽量选择极性较小的溶剂。(3)溶剂在样品的吸收光谱区应无明显吸收。
第三节
紫外-可见分光光度计
一、组成部件
紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成:即光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统。
(一)光源
对光源的基本要求是应在仪器操作所需的光谱区域内能够发射连续辐射,有足够的辐射强度和良好的稳定性,而且辐射能量随波长的变化应尽可能小。
分光光度计中常用的光源有热辐射光源和气体放电光源两类。
热辐射光源用于可见光区,如钨丝灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。钨灯和碘钨灯可使用的范围在340 ~ 2500nm。这类光源的辐射能量与施加的外加电压有关,在可见光 9 区,辐射的能量与工作电压4次方成正比。光电流与灯丝电压的n次方(n1)成正比。因此必须严格控制灯丝电压,仪器必须配有稳压装置。
在近紫外区测定时常用氢灯和氘灯。它们可在160 ~ 375 nm范围内产生连续光源。氘灯的灯管内充有氢的同位素氘,它是紫外光区应用最广泛的一种光源,其光谱分布与氢灯类似,但光强度比相同功率的氢灯要大3~5倍。
(二)单色器
单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色光的光学装置,其主要功能:产生光谱纯度高的波长且波长在紫外可见区域内任意可调。
单色器一般由入射狭缝、准光器(透镜或凹面反射镜使入射光成平行光)、色散元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分组成。其核心部分是色散元件,起分光的作用。单色器的性能直接影响入射光的单色性,从而也影响到测定的灵敏度度、选择性及校准曲线的线性关系等。
能起分光作用的色散元件主要是棱镜和光栅。
棱镜有玻璃和石英两种材料。它们的色散原理是依据不同的波长光通过棱镜时有不同的折射率而将不同波长的光分开。由于玻璃可吸收紫外光,所以玻璃棱镜只能用于350 ~ 3200 nm的波长范围,即只能用于可见光域内。石英棱镜可使用的波长范围较宽,可从185 ~ 4000nm,即可用于紫外、可见和近红外三 个光域。
光栅是利用光的衍射与干涉作用制成的,它可用于紫外、可见及红外光域,而且在整个波长区具有良好的、几乎均匀一致的分辨能力。它具有色散波长范围宽、分辨本领高、成本低、便于保存和易于制备等优点。缺点是各级光谱会重叠而产生干扰。入射、出射狭缝,透镜及准光镜等光学元件中狭缝在决定单色器性能上起重要作用。狭缝的大小直接影响单色光纯度,但过小的狭缝又会减弱 光强。
(三)吸收池
吸收池用于盛放分析试样,一般有石英和玻璃材料两种。石英池适用于可见光区及紫外光区,玻璃吸收池只能用于可见光区。为减少光的损失,吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。在高精度的分析测定中(紫外区尤其重要),吸收池要挑选配对。因为吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。
(四)检测器
检测器的功能是检测信号、测量单色光透过溶液后光强度变化的一种装置。
常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。
硒光电池对光的敏感范围为300~800nm,其中又以500 ~ 600nm最为灵敏。这种光电池的特点是能产生可直接推动微安表或检流计的光电流,但由于容易出现疲劳效应而只能用于低档的分光光度计中。
光电管在紫外-可见分光光度计上应用较为广泛。
光电倍增管是检测微弱光最常用的光电元件,它的灵敏度比一般的光电管要高200倍,因此可使用较窄的单色器狭缝,从而对光谱的精细结构有较好的分辨能力。
(五)信号指示系统
它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。很多型号的分光光度计装配有微处理机,一方面可对分光光度计进行操作控制,另一方面可进行数据处理。
二、紫外-可见分光光度计的类型
紫外-可见分光光度计的类型很多,但可归纳为三种类型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。1,单光束分光光度计
经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修容易,适用于常规分析。2,双光束分光光度计
经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源强度变化所引起的误差。
3,双波长分光光度计
由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长(1和2)的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。
通过光学系统转换,使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长工作方式。如果能在1和2处分别记录吸光度随时间变化的曲线,还能进行化学反应动力学研究。
三、分光光度计的校正
通常在实验室工作中,验收新仪器或实验室使用过一段时间后都要进行波长校正和吸光度校正。
建议采用下述的较为简便和实用的方法来进行校正:镨铷玻 璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰,可用来校正分光光度计的波长标尺,前者用于可见光区,后者则对紫外和可见光区都适用。也可用K2CrO4标准溶液来校正吸光度标度。
定性分析
紫外-可见分光光度法是一种广泛应用的定量分析方法,也是 对物质进行定性分析和结构分析的一种手段,同时还可以测定某些 化合物的物理化学参数,例如摩尔质量、配合物的配合比和稳定常 数、以及酸、碱的离解常数等。
紫外-可见分光光度法在无机元素的定性分析应用方面 是比较少的,无机元素的定性分析主要用原子发射光谱法或化学分 析法。在有机化合物的定性分析鉴定及结构分析方面,由于紫外- 可见光谱较为简单,光谱信息少,特征性不强,而且不少简单官能 团在近紫外及可见光区没有吸收或吸收很弱,因此,这种方法的应 用有较大的局限性。但是它适用于不饱和有机化合物,尤其是共轭体系的鉴定,以此推断未知物的骨架结构。此外,它可配合红 外光谱法、核磁共振波谱法和质谱法等常用的结构分析法进行定量 鉴定和结构分析,是不失为一种有用的辅助方法。一般定性分析方 法有如下两种:
1.比较吸收光谱曲线法
吸收光谱的形状、吸收峰的数目和位置及相应的摩尔吸 光系数,是定性分析的光谱依据,而最大吸收波长
及相应的是定性分析的最主要参数。比较法有标准物质比较法和标准谱图比 较法两种。
利用标准物质比较,在相同的测量条件下,测定和比较未知物 13 与已知标准物的吸收光谱曲线,如果两者的光谱完全一致,则可以初步认为它们是同一化合物。为了能使分析更准确可靠,要注意如下几点:
一、是尽量保持光谱的精细结构。为此,应采用与吸收物质作用力小的非极性溶剂,且采用窄的光谱通带;
二、是吸收光谱采用不同,则曲线只是沿
对
作图。这样如果未知物与标准物的浓度
曲线那样以的比
轴平移,而不是象例移动,更便于比较分析。
三、是往往还需要用其它方法进行证实,如红外光谱等。利用标准谱图或光谱数据比较。常用的标准谱图有以下表中的四种:
[1] Sadtler Standard Spectra(Ultraviolet),Heyden,London,1978.萨特勒标准图谱共收集了46000种化合物的紫外光谱。
[2] R.A.Friedel and M.Orchin,“Ultraviolet and Visible Absorption Spectra of Aromatic Compounds”,Wiley,New York, 1951.本书收集了597种芳香化合物的紫外光谱。
[3] Kenzo Hirayama:“Handbook of Ultraviolet and Visible Absorption Spectra a of Organic Compounds.”,New York,Plenum,1967。
[4] “Organic Electronic Spectral Data”。
2.计算不饱和有机化合物最大吸收波长的经验规则
有伍德沃德(Woodward)规则和斯科特(Scott)规则。
当采用其它物理或化学方法推测未知化合物有几种可能结构后,可用经验规则计算它们最大吸收波长,然后再与实测值进行比较,以确认物质的结构。
伍德沃德规则
它是计算共轭二烯、多烯烃及共轭烯酮类化合物π—π*跃迁最大吸收波长的经验规则,如表13.7和表13.9所示。计算时,先从未知物的母体对照表得到一个最大吸收的基数,然后对连接在母体中π电子体系(即共轭体系)上的各种取代基以及其他结构因素按上所列的数值加以修正,得到该化合物的最大吸收波长
。
结构分析
紫外-可见分光光度法可以进行化合物某些基因的判别、共轭体系及构型、构象的判断。
1.某些特征集团的判别
有机物的不少基团(生色团),如羰基、苯环、硝基、共轭体系等,都有其特征的
紫外或可见吸收带,紫外-可见分光光度法在判别这些基团时,有时是十分有用的。如在270~300nm处有弱的吸收带,且随溶剂极性增大而发生蓝移,就是羰基n-π*跃迁所产生R吸收带的有力证据。在184nm附近有强吸收带(E1带),在204nm附近有中强吸收带(E2带),在260nm附近有弱吸收带且有精细结构(B带),是苯环的特征吸收,等等。可以从有关资料中查找某些基团的特征吸收带。
2.共轭体系的判断
共轭体系会产生很强的K吸收带,通过绘制吸收光谱,可以判断化合物是否存在共轭体系或共轭的程度。如果一化合物在210nm以上无强吸收带,可以认为该化合物不存在共轭体系;若在215~250nm区域有强吸收带,则该化合物可能有两至三个双键的共轭体系,如1-3丁二烯,为217nm,为21,000;若260~350nm 15 区域有很强的吸收带,则可能有三至五个双键的共轭体系,如癸五烯有五个共轭双键,3.异构体的判断
包括顺反异构及互变异构两种情况的判断。
顺反异构体的判断
生色团和助色团处在同一平面上时,才产生最大的共轭效应。由于反式异构体的空间位阻效应小,分子的平面性能较好,共轭效应强。因此,及都大于顺式异构体。例如,肉桂酸的顺、反式的吸收如下:
为335nm,为118,000。
=280nm
295nm =27000
=13500
=
同一化学式的多环二烯,可能有两种异构体:一种是顺式异构体;另一种是异环二烯,是反式异构体。一般来说,异环二烯的吸收带强度总是比同环二烯来的大。
互变异构体的判断
某些有机化合物在溶液中可能有两种以上的互变异构体处于动态平衡中,这种异构体的互变过程常伴随有双键的移动及共轭体系的变化,因此也产生吸收光谱的变化。最常见的是某些含氧化合物的酮式与烯醇式异构体之间的互变。例如乙酰乙酸乙酯就是和烯醇式两种互变异构体:
它们的吸收特性不同:酮式异构体在近紫外光区的272nm(为为16),是n-π*跃迁所产生R吸收带。烯醇式异构体的为243nm(为16000),是π-π*跃迁出共轭体系的K吸收带。两种异构体的互变平衡与溶剂有密切关系。在象水这样的极性溶剂中,由于 可能与H2O形成氢键而降低能量以达到稳定状态,所以酮式异构体占优势:
而象乙烷这样的非极性溶剂中,由于形成分子内的氢键,且形成共轭体系,使能量降低以达到稳定状态,所以烯醇式异构体比率上升:
此外,紫外-可见分光光度法还可以判断某些化合物的构象(如取代基是平伏键还是直平键)及旋光异构体等。
定量分析
紫外-可见分光光度法定量分析的方法常见到的有如下几 种 :
1.单组分的定量分析
如果在一个试样中只要测定一种组分,且在选定的测量波长下,试样中其它组分对该组分不干扰,这种单组分的定量分析较简单。一般有标准对照法和标准曲线法两种。标准对照法
在相同条件下,平行测定试样溶液和某一浓度Cs(应与试液浓度接近)的标准溶液的吸光度Ax和As则由Cs可计算试样溶液中被测物质的浓度Cx
标准对照法因知使用单个标准,引起误差的偶然因素较多,故往往较不可靠。标准曲线法
这是实际分析工作中最常用的一种方法。配制一系列不同浓度的标准溶液,以不含被测组分的空白溶液作参比,测定标准系列溶液的吸光度,绘制吸光度-浓度曲线,称为校正曲线(也叫标准曲线或工作曲线)。在相同条件下测定试样溶液的吸光度,从校正曲线上找出与之对应的未知组分的浓度。
此外,有时还可以采用标准加入法。2.多组分的定量分析
根据吸光度具有加和性的特点,在同一试样中可以同时测定两个或两个以上组分。假设要测定试样中的两个组分A、B,如果分别绘制A、B两纯物资的吸收光谱,绘出三种情况,如图13.20所示。
(a)情况表明两组分互不干扰,可以用测定单组分的方法分
别在λ
1、λ2测定A、B两组分;
(b)情况表明A组分对B组分的测定有干扰,而B组分对A组分的测定无干扰,则可以在λ1处单独测量A组分,求得A组分的浓 18 度CA。然后在λ2处测量溶液的吸光度值,根据吸光度的加和性,即得
及A、B纯物质的和
则可以求出CB;
(c)情况表明两组分彼此互相干扰,此时,在λ
1、λ2处分别测定溶液的吸光度
及,而且同时测定A、B纯物质的、及、。然后列出联立方程
解得CA、CB。显然,如果有n个组分的光谱互相干扰,就必须在n个波长处分别测定吸光度的加和值,然后解n元一次方程以求出各组分的浓度。应该指出,这将是繁琐的数学处理,且n越多,结果的准确性越差。用计算机处理测定结果将使运算大为方便。3.双波长分光光度法
当试样中两组分的吸收光谱较为严重时,用解联立方程的方法测定两组分的含量可能误差较大,这时可以用双波长分光光度法测定。它可以进行一组分在其它组分干扰下,测定该组分的含量,也可以同时测定两组分的含量。双波长分光光度法定量测定两混合物组分的主要方法有等吸收波长法和系数倍率法两种。等吸收波长法
试样中含有A、B两组分,若要测定B组分,A组分有干扰,采用双波长法进行B组分测量时方法如下:为了要能消除A组分的吸收干扰,一般首先选择待测组分B的最大吸收波长λ2为测量波长,然后用作图法选择参比波长λ1,作法如图所示。
在λ2处作一波长轴的垂直线,交于组分B吸收曲线的另某一点,再从这点作一条平行于波长轴的直线,交于组分B吸收曲线的另一点,该点所对应的波成为参比波长λ1。可见组分A在λ2和λ1处是等吸收点,由吸光度的加和性可见,混合试样在λ2和λ1处的吸光度可表示为
双波长分光光度计的输出信号为ΔA,可见仪器的输出讯号ΔA与干扰组分A无关,它只正比于待测组分B的浓度,即消除了B的干扰。系数倍率法
当干扰组分A的吸收光谱曲线不呈峰状,仅是陡坡状时,不存在两个波长处的等吸收点时,如图所示。在这种
情况下,可采用系数倍率法测定B组分,并采用双波长分光光度计来完成。选择两个波长λ
1、λ2,分别测量A、B混合液的吸光度,利用双波长分光光度计中差分函数放大器,把大k1、k2倍,获得、两波长处测得的差示信号S:
调节放大器,选取和,使之满足、、分别放得到系数倍率K为
差示信号S与待测组分B的浓度CB成正比,与干扰组分A无关,即消除了A的干扰。4.导数分光光度计法
采用不同的实验方法可以获得各种导数光谱曲线。不同的实验方法包括双波长法、电子微分法和数值微分法。
将对波长λ求导:
在整个波长范围内可控制在恒定值,则
上式表明,第一,导数分光光度法的一阶导数信号与浓度成正比例,不需要通过对数转换为吸光度;第二,测定灵敏度决定于摩尔吸光系数在特定波长处的变化率,在吸收曲线的拐点波长处大,灵敏度最高。如图 所示。
对于二阶导数光谱:
最
只有当一阶导数
时,二阶导数信号才与浓度成正比例。测定波长选择在吸收峰处,其曲率
三阶导数光谱:
最大,灵敏度就高。
当一阶导数
时,三阶导数信号与浓度成比例,测定波长在曲率半径小的肩峰处
最大,可获得高的灵敏度。
在一定条件下,导数信号与被测组分的浓度成比例。测量导数光谱曲线的峰值方法有基线法、峰谷法,如图13.24所示。
基线法又称切线法在相邻两峰的极大或极小处画一公切线,在由峰谷引一条平行于纵坐标的直线相交于a点,然后测量距离他t的大小的。
峰谷法测量相邻两峰的极大和极小之间的距离p,这是较常用的方法。
峰零法测量峰至基线的垂直距离z。该法只适用与导数光谱曲 23 线对称于横坐标的高阶导数光谱。
导数分光光度法对吸收强度随波长的变化非常敏感,灵敏度高。对重叠谱带及平坦谱带的分辩率高,噪声低。导数分光光度法对痕量分析、稀土元素、药物、氨基酸、蛋白质的测定,以及废气或空气中污染气体的测定非常有用。
6.其它分析方法:简单介绍动力学分光光度法及胶束分光光度法 动力学分光光度法
一般的分光光度法是在溶液中发生的化学反应达到平衡后测量吸光度,然后根据吸收定律算出待测物资的含量。而动力学分光光度法则是利用反应速率与反应物、产物或催化剂的浓度之间的定量关系,通过测量与反应速率成正比例关系的吸光度,从而计算待测物质的浓度。根据催化剂的存在与否,动力学分光光度法可分为非催化和催化分光光度法。当利用酶这种特殊的催化剂时,则称为酶催化分光光度法。由反应速度方程式及吸收定律方程式可以推导出动力学分光光度法的基本关系为
A=KCc
式中K为常数,Cc为催化剂的浓度。测定Cc的方法常有固定时间法、固定浓度法和斜率法三种。
优点:灵敏度高,选择性好(有时是特效的)、应用范围广(快速、慢速反应,有副反应,高、低浓度均可)。
缺点:影响因素较多,测量条件不易控制,误差经常较大。胶束增容分光光度法
胶束强度分光光度法是利用表面活性剂的增强、增敏、增稳、褪色、析向等作用,以提高显色反应的灵敏度、对比度或选择性,改善显色反应条件,并在水向中直接进行光度测量的分光光度法。
表面活性剂(有阳离子型、阴离子型、非离子型之分)在水相中有生成胶体的倾向,随其浓度的增大,体系由真溶液转变为胶体溶液,形成极细小的胶束,体系的性质随之发生明显的变化。体系由真溶液转变为胶束溶液时,表面活性剂的浓度称为临界胶束浓度,常用cmc表示。由于形成胶束而使显色产物溶解度较大的现象,称为胶束增容效应。由于胶束与显色产物的相互作用,结合成胶束化合物,增大了显色分子的有效吸光截面,增强其吸光截面,增强其吸光能力,使ε增大,提高显色反应的灵敏度,称为胶束的增敏效应。胶束增容分光光度法比普通分光光度法的灵敏度由显著的提高,ε可达106(L·mol-1·cm)。近年来,这种方法得到很广泛的应用。这种方法得到很广泛的应用。
第五篇:网站后台更新文章详细的操作步骤
网站的后台操作
现在给大家分享下,后台操作:
(温馨提示:大部分的网站后台都是相差不了多少的,下面展示的只是织梦后台的具体操作步骤,其它根据自己的网站后台来定。)一.根据关键词写文章
1.先不急写文章,但要想好几个长尾关键词。先准备后台的网址及账号密码。
2.输入账号和密码登陆到后台管理。
3.进入后台后寻找“搜索关键词维护”。大概是顺序是:核心→批量维护→搜索关键词维护。如下图
4.在点击右上角的“文档关键字(词)维护”就会出现下图
5.在搜索后面的那个框框里面填写先想好的长尾关键词,点击确定,看有没有搜到一样的长尾关键词,如果有就不要围绕这个词来写文章了,反之则写。
这个时候,就可以写文章了。之所以不提前备文章,是因为担心这里会重复,那样可能要改文章里面的东西,麻烦,所以要搜索后才写。这里,大家可以建个表格,把写过的关键词写在里面。这样,以后就不用重复以上动作了。直接在表格里面找关键词,看有没有。因为写文章要时间嘛。二.上传文档及图片
1.进入后台的“网站栏目管理”,选择合适自己写的文章的分类。
2.进入后就是下图的页面了,点击“添加文档”,进入后,进行文档的一些编辑及操作。
3.填写相关的信息:
3.1:文章标题:就是写的文章标题,照写。
3.2:TAG标签:写的文章的关键词,中间用“,”隔开。3.3:关键字:填写TAG,自动生成的,不用管。
3.4:内容摘要:写段能吸引人的话,可以是文章里的,也可以自
己写,但是要包含关键词。也就是描述。
3.5:把写好文章粘贴在下面的文档编辑里面,改好字体的一些属性。改时注意下,要跟网址里面之前的一样,美观嘛。
3.6:加入图片,这个跟文字一样,弄成跟之前网址里面的一样大小,图片的来源尽量不要从别的网站上弄,可以复制到桌面在上传。
3.7点击保存,进入下面的页面,点击“查看文章”,预览下,是否跟网站之前的效果一样。这里要把预览的网址给复制下来。
三.关键词设置及布置
1.重复第一大点的第3点,进入“文档关键词维护”,在“新增关键词”填写那篇文章的关键词。把刚才复制那篇文章的网址,粘贴在“链接网址”里面。频率改成2或3,这里的频率是指这个关键词在文章出现的频率,自然不能多。也可在文章编辑时加入其他的链接。点击保存即可。
四.这样,后台的添加文档.五.生成代码(注意:只有生成代码了,网站里面才能看得到)
第二步:
第三步:
第四步:
显示如下的文字提醒表示已更新完毕。
按照上方操作就可以了。