实验报告讨论集

第一篇：实验报告讨论集

蟾蜍坐骨神经干电生理实验

4.1动作电位的传导是细胞膜不断产生新的动作电位的过程。在动作电位的发生部位，细胞膜的电位较前方静息部位膜外侧的电位为负，而膜内则相对较正；由于这种电位差的存在，在动作电位的发生部位和邻接的静息部位之间便产生局部电流。这个局部电流将依据膜的被动电学性质在动作电位前方的静息部位首先形成电紧张电位，电紧张电位进一步引发去极化的局部反应，并在局部反应达到阈电位时引起动作电位的发生。如此，动作电位便通过局部电流沿细胞膜传导。

4.2 神经干由许多神经纤维组成，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，神经干动作电位是由许多不同直径和类型的神经纤维动作电位叠加而成的综合性电位变化，称

[2]复合动作电位。神经干动作电位幅度在一定范围那可随刺激强度的变化而变化。刺激电压从Uth增加至Umax，神经干动作电位振幅随刺激电压增加而增高。

4.3 动作电位在神经干上传导有一定的速度。不同类型的神经纤维传导兴奋的速度差别很

[2]大，这与神经纤维直径的大小、有无髓鞘、髓鞘的厚度以及温度的高低等因素有关。4.4 双相动作电位是神经冲动先后通过两个引导电极形成的，冲动通过第1个电极，形成动作电位的正相波，冲动通过第2个电极，形成动作电位的负相波。

4.5 刺激神经干中枢端在其末梢端引导所得BAP和刺激神经干末梢端在其中枢端引导所得BAP，正相振幅均大于等于负相振幅，正相时程均小于负相时程，由此表明在蟾蜍坐骨神经干AP引导时，两引导电极处神经纤维的多寡不是形成BAP正相振幅大于负相振幅和正相时程小于负相时程的主要原因。

若叠加发生在正相波去极后期，正相波波峰减小，时程缩短，当神经冲动传导被阻断使负相波消失，正相波被叠加的部分显示出来，正相波的波幅和时程均增大。若叠加发生在正相波复极期，正相波波峰不减小，但时程缩短，当神经冲动传导被阻断使负相波消失，正相波被叠加的复极化部分显示出来，正相波时程延长。

双相动作电位负相波的去极期完全与正相波叠加，其波幅减小程度大于正相波。负相波的复极后期，正相波已复极完毕，没有叠加发生，动作电位复极后期的时程较长，负相波时程缩短的程度比正相波小。

4.6 由于神经干由许多不同直径和类型的神经纤维组成，各种纤维上动作电位的传导速度有所不同，而神经干动作电位是由许多不同直径和类型的神经纤维动作电位叠加而成的综合性电位变化，因此神经干的动作电位传导属“衰竭性”传导：越远离刺激端，各种神经纤维的动作电位差异越大，产生的复合电位幅度越小。从而解释了实验中通道二中正相电位幅度显著小于通道一的现象。

5.3 肝损动物模型的建立

四氯化碳（CCl4）对肝细胞膜有直接溶解作用，但CCl4毒性主要与其活性代谢产物有关。CCl4在肝细胞内质网中经细胞色素P450依赖性混合功能氧化酶的代谢，生成活泼的三氯甲基和氯自由基。这些自由基可与细胞内和细胞膜的大分子发生共价结合，使酶的功能丧失，2+[4]细胞膜脂质过氧化，胞浆Ca浓度升高，导致肝细胞损伤坏死，胞浆内转氨酶渗入血液。5.4 肾损动物模型建立

升汞又名氯化汞。使用不同浓度的氯化汞溶液给动物皮下，肌内或静脉注射，带有二价阳离子的Hg进入体内，与带有巯基的氧化物具有较强的亲和力，并可使蛋白质凝固，造成[5]重金属盐导致的中毒性肾小管损伤，临床出现ARF。

离子和药物对离体蟾蜍心脏活动的影响

4.1 心肌收缩-舒张机制

心肌细胞兴奋时，通过兴奋-收缩耦联机制，触发心肌细胞收缩。心肌细胞的肌质网不2+2+如骨骼肌的发达，贮Ca量少，因此在收缩过程中有赖于细胞外Ca的内流。在心肌动作电

2+2+2+2+位的平台期，细胞外的Ca通过L型Ca通道流入细胞内，使胞质内Ca浓度升高，Ca浓度

2+2+的升高再触发肌质网释放大量的Ca，使胞质内Ca浓度升高约100倍（即钙触发钙释放），2+[2]Ca与肌钙蛋白结合并引发肌肉收缩。

2+2+在动作电位2期末，Ca内流中止，细胞中内流的Ca被迅速通过以下机制使细胞内的2+2+Ca浓度恢复到静息水平：①通过肌质网上的Ca泵主动回收进入肌质网；②通过细胞膜上+2+2+2+2+[2]的Na-Ca交换体将Ca排出细胞外；③细胞膜上的Ca泵可将Ca主动排出细胞，导致

[5]收缩终止和肌肉舒张的开始。4.2 收缩对外钙的依赖

实验中灌流低钙和高钙溶液后，心肌收缩能力有明显的升高和降低变化。

至少来自三个钙库的钙可参与心肌兴奋-收缩耦联强度的调节。细胞外钙库是进入细胞内并充实细胞内钙库的来源，而细胞内钙库储存的钙与激活收缩蛋白有更直接的关系。从细胞外进入细胞内的钙并不立即参加收缩蛋白的激活，肌质网则是供给肌钙蛋白需要的直接钙[2]源。心肌肌质网上存在两种钙释放通道——因分别可与ryanodine和三磷酸肌醇（IP3）

[2]结合而分别称之为ryanodine受体和IP3受体。根据钙触发钙释放理论，可知在一定范围2+2+内增加细胞外Ca浓度，可使心肌收缩增强；而降低细胞外Ca浓度，则使心肌收缩能力减弱。

4.3 内钙浓度对舒张的影响

实验结果显示，当细胞内钙浓度较高，引起心肌收缩力增强的同时，舒张末期张力降低且具有显著性差异，这可通过如下机制解释。

钙外流的研究证明，80%以上的钙外流需要细胞外存在钠或钙，而且一般说来绝大部分

+2+外流钙是由于细胞外钙与细胞外钠的交换。在肌膜的内侧和外侧，Na和Ca发生竞争性结合。

+2+在此交换中，每种阳离子进入细胞的量取决于细胞外的[Na]/[ Ca]比值；每种阳离子流出

+2+[3]2+细胞的量取决于肌膜内侧的[Na]/[ Ca]比值。当细胞内Ca浓度较高时，通过竞争交换2+2+机制，Ca外流的量相应增多，舒张末期心肌张力降低。而当细胞内Ca浓度较低时，通过2+竞争交换机制，Ca外流的量相应减少，舒张末期心肌张力增高。4.4 钾离子对心肌收缩和舒张的影响

心肌上的钾通道多而复杂，其中参与动作电位2，3相的主要复极电流是Iks和Ikr。Iks激活缓慢，在保持除极时无明显失活，Iks手PKA和PKC的调节；Ikr激活迅速，有失活过程，具有内向整流特性。Ikr手细胞外钾浓度的调节，胞外低钾时，Ikr幅度减少，因此胞外低钾可延长复极过程；当胞外高钾时，Ikr电流幅度增加，使心肌动作电位复极化加速，从而减

[5]少了平台期钙内流量，产生了负性变力作用（收缩力减弱）（205）。胞内低钙引起舒张末期心肌张力增高同上述解释。

4.5 肾上腺素（Adr）对心肌收缩和舒张的影响

实验表明，肾上腺素（Adr）能显著增强心肌的收缩末期张力，降低舒张末期张力，其主要作用机制如下：

肾上腺素对心肌具有正性变时变力变传导作用。它能激活心肌细胞膜β1受体，通过兴奋G蛋白（Gs）激活腺苷酸环化酶（AC）使cAMP增多。cAMP激活蛋白激酶A（PKA），使心肌细胞膜钙通道磷酸化引起钙通道开放速率和时间增加，钙内流增多而增强心肌收缩能力。同时，蛋白激酶A还通过：①抑制肌浆网钙泵的功能调节蛋白受磷蛋白（phospholamban）磷酸化，而降低其对肌浆网钙泵的抑制，加快肌浆网摄钙；②使肌钙蛋白抑制亚单位（TnI）

2+磷酸化，引起钙结合亚单位（TnC）与Ca亲和力降低等效应，从而提高心肌舒张功能（即

[6]降低舒张末期心肌张力）。

4.6 普萘洛尔对心肌收缩和舒张的影响

普萘洛尔属无内在拟交感活性的β受体阻断剂，能与肾上腺素竞争性结合β受体，抑制交感神经兴奋所致的起博电流、钠电流和L-型钙电流增加，表现为减慢4相舒张期去

[5]极速率而降低自律性，降低动作电位0相上升速率而减慢传导。待普萘洛尔灌流充分后，再加肾上腺素已看不到其正性变力作用。

4.7 乙酰胆碱（Ach）对心肌收缩和舒张的影响

实验显示，乙酰胆碱（ACh）能有效地减弱收缩末期张力，增强舒张末期张力，其机制如下：乙酰胆碱（ACh）可通过直接作用及抑制NE能神经活性的作用而影响心脏功能，也可直接作用于心房使心肌收缩力有所改变。K ACh是一种电导大、门控过程快的钾通道。ACh作用于M受体而激活此通道，促进心肌细胞钾外流，引起细胞超级化，缩短动作电位时程和

[5]有效不应期，降低了钙内流量，导致心肌收缩力减弱。胞内低钙引起舒张末期心肌张力增高同4.3解释。

4.8 阿托品（atropine）对心肌收缩和舒张的影响

加入阿托品（atropine）后，蛙心很快增强了其收缩和舒张能力，可见阿托品能有效地解救ACh中毒。其机制如下：

阿托品（atropine）为M胆碱受体阻断剂。通过竞争性拮抗M受体可解除ACh对心脏的抑制作用，引起心率加快，收缩力增强。

蟾蜍心室期前收缩和代偿间歇

心肌每兴奋一次，其兴奋性就发生一次周期性的变化。心肌兴奋性的特点在于其有效不应期特别长，约相当于整个收缩期和舒张早期。因此，在心脏的收缩期和舒张早期内，任何刺激均不能引起心肌兴奋而收缩，但在舒张早期以后，给予一次较强的阈上刺激就可以在正常节律性兴奋到达以前，产生一次提前出现的兴奋和收缩，称之为期前兴奋和期前收缩。同理，期前兴奋亦有不应期，因此，如果下一次正常的窦性节律性兴奋到达时正好落在期前兴奋的有效不应期内，便不能引起心肌兴奋和收缩，这样在期前收缩之后就会出

[1] 现一个较长的舒张期，这就是代偿间歇。

研究性实验

[摘要]目的：观察西地那非（sildenafil）对大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用,并探讨其相关作用机制。方法：采用大鼠离体子宫灌流模型，累积给药，检测西地那非对乙酰胆碱引发的子宫平滑肌收缩功能的影响。结果：西地那非预孵未孕大鼠子宫平滑肌后，可以抑制乙酰胆碱（Acetylcholine, ACh）引起的平滑肌收缩功能。以10-5mol/L西地那非预孵后，在ACh浓度为78uM和156uM时有统计学意义（p<0.05）；以10-4mol/L西地那非预孵后，在ACh浓度为625uM和1250uM时，收缩显著减小（p<0.05）；以10-3mol/L西地那非预孵后，在ACh浓度为312uM和625uM时有统计学意义（p<0.05），1250uM时有高度显著性差异（p<0.01）结论：西地那非能通过降低细胞内的cGMP水平，抑制子宫平滑肌的收缩功能。

西地那非（sildenafil）是一种5型磷酸二酯酶抑制剂。从上世纪90年代中期起，西地那非就广泛用于治疗男性勃起功能障碍（ED），并成为其一线药物，疗效已得到临床医生和患者的普遍认可[1]。西地那非的药理作用有两点：一种是血管舒张作用，另一种是特异性的5型磷酸二酯酶（PDE-5）抑制剂，其抑制作用强度是其他磷酸二酯酶抑制剂的10-8500倍，由此升高细胞内环鸟苷酸(cGMP)的水平，导致海绵体血管平滑肌扩张[1]。2000年，Sher和Fisch的报告显示，西地那非可以改善体外受精患者的子宫动脉血流[2]，从此对西地那非的研究逐渐拓宽至其对女性子宫方面的应用。2003年，Catalin S等已通过PDE-5单克隆抗体证实孕和未孕大鼠子宫平滑肌中存在PDE-5[3]，因此我们预测西地那非可以通过特异性抑制PDE-5，舒张子宫平滑肌，以解决妇产科中常见的痛经、安胎等问题。但到目前为止，还没有这方面研究的临床实证。本实验旨在探究西地那非对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的抑制作用。

1.3 未孕大鼠子宫平滑肌的制备

本实验用Sprague-Dawley（SD）大鼠，雌性，未孕，200~250g，由浙江大学医学院动物实验中心提供。皮下注射已烯雌酚2天的未孕大鼠颈椎脱臼处死，打开腹腔，迅速分离子宫，置于盛有经混合气(95%O2，5%CO2)饱和的预冷大鼠子宫液中，洗去表面血迹，制备约 4×10mm全层子宫平滑肌条，4℃冰箱中静置15h。取出标本，将子宫平滑肌条悬挂于含有20mL台氏o液的浴槽内，恒温32C，持续通入95%O2+5%CO2的混合气，肌条两端分别连于JZJ01 型肌肉张力换能器和浴槽底部的不锈钢丝，使用RM6240BD型多道生理信号采集处理系统记录肌条张力。调节子宫肌条标本负荷2g，平衡40min，当张力稳定后开始实验。1.4 乙酰胆碱对未孕大鼠子宫平滑肌收缩的影响

当平滑肌张力稳定后，采用累积给药法，逐步增加乙酰胆碱浓度，使浴槽中乙酰胆碱浓度分别达到39，78，156，312，625，1250uM，每一浓度观察10分钟，记录加药后子宫肌条收缩幅度和收缩频率的变化。

1.5 西地那非处理后加乙酰胆碱对未孕大鼠子宫平滑肌收缩的影响

-5-4-31.5.1 分别以西地那非10，10，10 mol/L处理子宫肌条,反应10min。1.5.2 对以上相应浓度西地那非处理后的子宫肌条，采用累积给药法，逐步增加乙酰胆碱浓度，使浴槽中乙酰胆碱浓度分别达到39，78，156，312，625，1250uM，每一浓度观察10分钟，记录加药后子宫肌条收缩幅度和收缩频率的变化。1.6 数据处理

以药剂作用产生的最大收缩张力和曲线下面积为100%，用百分比形式表示其余浓度药剂产生的收缩张力和曲线下面积。实验数据用X ±s 表示，两组间采用student-t法进行显著性检验。p<0.05 认为统计学上有显著性差异。

3.讨论

凭借其对血管平滑肌良好的舒张作用，自上世纪90年代中期以来，西地那非已经极大改善了男性性功能障碍患者的生存质量，然后其在女性方面的运用一直缺乏深入研究。直至2000年，Sher和Fisch的一项前驱实验显示，西地那非有助于改善体外受精者的子宫动脉血流。本实验旨在探究西地那非对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的影响。

实验结果显示，西地那非对于不同浓度乙酰胆碱所引起的离体大鼠子宫平滑肌的收缩效应有明显的抑制作用。子宫平滑肌兴奋药乙酰胆碱可以诱导子宫收缩，产生张力波形，并呈浓度依赖性。经西地那非预孵后，再累积给药加入乙酰胆碱，在39-1250M浓度范围之内，其产生的平滑肌收缩效应均受到抑制，表现为肌张力和曲线下面积缩小。用不同浓度的西地那非预孵子宫平滑肌，则抑制效应呈浓度依赖性，即西地那非浓度越高，子宫平滑肌的收[2]缩效应受抑制程度越明显，特别是对于高浓度乙酰胆碱诱发的平滑肌收缩效应尤其显著。

现已研究证实，西地那非作为一种5型磷酸二酯酶抑制剂，可以特异性抑制PDE-5，[1]进而升高细胞内环鸟苷酸(cGMP)的水平，导致男性阴茎海绵体血管平滑肌舒张。2003年，Catalin S等通过PDE-5单克隆抗体证实，孕和未孕大鼠子宫平滑肌中存在PDE-5[3]，因此我们推测，西地那非对子宫平滑肌的舒张作用也是通过特异性抑制PDE-5，提高cGMP水平而实现的。cGMP是细胞内重要的第二信号分子，由GTP经鸟苷酸环化酶催化而转化而来, [4]该过程与一氧化氮-鸟苷酸环化酶途径密切相关。细胞内的高水平cGMP可以激活G蛋白激酶、细胞膜Ca2+泵和钙依赖的钾通道，从而使胞内Ca2+浓度下降并引起平滑肌舒张。正常情况下，细胞内cGMP可被PDE-5水解为5’-GMP，西地那非正是通过特异性抑制PDE-5对cGMP的水解作用，造成胞内cGMP蓄积，从而产生对平滑肌的舒张作用。

然而也有一些研究表明，西地那非对子宫平滑肌的舒张作用并不依赖于cGMP，钾离子通道在反应中可能起到重要作用；Medina P则发现西地那非对人输精管的作用不被鸟苷酸环化酶抑制剂缓解，而被钾通道阻断剂消除。因此，西地那非对于子宫平滑肌舒张作用的具体机制仍有待于进一步实验分析。

实验中发现，离体子宫平滑肌的生物活性对实验结果的影响很大。即便是来自同侧的两段子宫肌条仍有很大的个体差异性，为了尽可能消除实验误差，可以考虑进行自身对照。又有相关研究提示：西地那非作用时间很长，即使用新鲜台氏液洗脱数次仍可持续作用达一小[7]时，因此我们建议每个离体子宫肌条仅作一个西地那非浓度。

综上所述，西地那非可以有效抑制子宫平滑肌的收缩作用，其机制很可能是改变了平滑肌细胞内的cGMP水平。这项研究将有助于探究西地那非在治疗妇产科中痛经、安胎等常见问题方面的运用，对于磷酸二酯酶抑制剂舒张子宫平滑肌的具体机制也有一定的参考价值。

1.磷酸二酯酶(phosphodiesterase，PDE)抑制剂，通过调节细胞内第二信使cAMP及cGMP的水平，对细胞活动起重要调控作用，从而发挥多种生物效应。

2.近年来由于PEDs具有抗炎和舒张平滑肌活性，尤其可显著抑制气管平滑肌，血管平滑肌及子宫平滑肌的收缩而引起广泛关注。

3.本实验用PDE抑制剂抑制PDE的作用，从而降低其对cAMP、cGMP的分解。从而使子宫平滑肌的收缩力降低，在几条收缩剂的作用下，子宫平滑肌收缩能力发生改变，其结果可通过张力换能器显示。然后通过空白组的对照，获得实验结论。

[6]

[5]取正常健康孕18-21d的SD大鼠及皮下注射已烯雌酚2天的未孕大鼠

↓颈椎脱臼处死，迅速分离子宫 制备全层子宫平滑肌

↓

置于盛有经混合气(95%O2，5%CO2)饱和氧的预冷大鼠子宫液4℃ 静置15h左右

↓

↓

孕子宫肌条标本负荷1g，平衡30min 未孕子宫肌条标本负荷2g，平衡40min

↓

↓

孕子宫肌条出现节律性自主收缩后

↓

↓采用累积给药法加入PDE抑制剂 ↓或以PDE抑制剂、工具药预孵，↓再加入肌条收缩剂（缩宫素、乙酰胆碱）

记录子宫收缩活动（收缩幅度、收缩频率）

[摘 要] 目 的：本研究通过观察磷酸二酯酶4抑制剂Z90对激动剂诱导的未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的影响，探讨Z90对子宫平滑肌的药理作用及其相关作用机制。方 法：取正常健康未孕的SD大鼠制备全层子宫平滑肌肌条，悬于32.0℃恒温裕槽中以台氏液灌流，待肌条稳定后分别对其进行Z90梯度给药，在每个梯度浓度下累积加入不同浓度的激动剂乙酰胆碱(acetylcholine)，设置相应对照组，分别记录肌条收缩曲线。结 果：以平均肌张力

-5-4为观察指标，不同浓度Z90预孵的子宫平滑肌收缩力产生了不同程度上的抑制，10，10，-3-410在大部分acetylcholine浓度下皆出现了显著性差异（其中10效果较好）；预孵不同浓度的磷酸二酯酶抑制剂Z90，子宫平滑肌acetylcholine浓度反应曲线发生右移；Z90对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的抑制作用随乙酰胆碱浓度升高而降低；根据浓度－舒张率曲线图，可求出Ach浓度分别为156uM，312uM，625uM，1250uM时，EC50分别为1.77×10，-4-4-44.70×10，4.79×10，4.82×10。结 论： 不同浓度Z90对对激动剂诱导的未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能起到了较明显的抑制作用；在反应标本的同质性方面，最大肌张力指标较平均肌张力较好；乙酰胆碱可能通过升高胞内钙离子浓度拮抗了磷酸二酯酶抑制剂的部分抑制效应。

-4[关键词]

磷酸二酯酶抑制剂;未孕大鼠;Z90;乙酰胆碱;收缩

Z90为磷酸二酯酶4（PDE4）选择性抑制剂，能选择性抑制PDE4分解cAMP的能力，从而提高细胞内cAMP的浓度。cAMP是胞内重要的信号传导信使物质，它可以通过对蛋白酶的激活，对胞内Ca离子浓度的调控以及对基因表达的调控等，广泛地影响机体的生理活动。

2+cAMP可通过使肌球蛋白失活及抑制磷脂酶（PLC）活性，降低胞内Ca这两条途径抑制子宫平滑肌的收缩功能。

因此, 在妇产科领域，磷酸二酯酶4（PDE4）抑制剂Z90可因其抑制子宫平滑肌收缩的功能而用于妊娠妇女的早产和非妊娠妇女的痛经。本实验旨在观察Z90对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的影响，从而为其临床应用做初步基础研究。1.4 未孕大鼠子宫平滑肌收缩的测定方法

取成年未孕正常雌性SD大 鼠8只，实验前 24小时皮下注射乙烯雌酚 0.5mg／kg，以促其处于动情前期或动情期，提高子宫对药物的敏感性。实验时猛击大鼠头部致死，立即取出卵巢及子宫叉处之间的子宫角[1]，剪除周围组织，沿系膜纵轴剖开，台氏液中漂洗干净，将肌条平铺在充满台氏液的培养皿中，并持续供给氧气。用手术缝线在肌条的一端打一个环，另一端扎紧后取合适长度再扎一个直径约 0.5cm的环，两扎线间的肌条长约1cm。制备两条这样的肌条，分别将肌条固定在两个恒温(37℃)含台氏液的平滑肌浴槽中，持续供给氧气，-5给予 2g前负荷，温浴lh。在其中一个浴槽中加入Z90(1×10)预孵15分钟，另一个不加药，作为对照。依次在向两个浴槽分别加入浓度依次为39uM，39uM，78uM，156uM，312uM，625uM的乙酰胆碱溶液，每次间隔10分钟。用信号采集器记录肌条收缩曲线。再用Z90(1×10)的浓度和Z90(1×10)的浓度，分别重复进行上述实验过程。三个浓度的Z90所得的实验结果为一组，共重复进行六组这样的实验。

3.1 磷酸二酯酶抑制剂z90对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的抑制效果

通过对照组和实验组之间的显著性差异检验，我们发现在三个Z90浓度下，未孕大鼠受乙酰胆碱诱导的收缩幅度显著降低，平滑肌的乙酰胆碱浓度－反应曲线显著右移。

不同未孕大鼠子宫平滑肌对乙酰胆碱的敏感程度没有显著性差异。

各个浓度Z90对未孕大鼠子宫平滑肌收缩功能的抑制作用随乙酰胆碱浓度升高而降低。但各个浓度产生的舒张率没有显著性差异。

3.2 磷酸二酯酶抑制剂z90对未孕大鼠子宫平滑肌收缩抑制作用的机制探讨

本次实验中研究的新药z90是磷酸二酯酶4（PDE4）抑制剂，能够选择性抑制磷酸二酯酶4将cAMP降解为5’-腺苷酸（adenosine 5’-monophosphate），从而明显增加组织细胞内的cAMP的含量。cAMP是广泛存在于信号转导通路中的重要的胞内信使，称之为“第二信使”。

平滑肌的收缩依赖于肌丝滑行机制。平滑肌的细肌丝主要是由肌动蛋白和原肌球蛋白构成，粗肌丝由肌球蛋白构成，肌球蛋白分子由一对重链和两对轻链构成。平滑肌收缩时，横桥与细肌丝中肌动蛋白的结合是由胞质中的肌球蛋白轻链激酶（myosin light chain

2+kinase,MLCK）使横桥头部的一对轻链磷酸化而引起的，其主要过程包括：1.胞质内的Ca2+浓度升高时，Ca与钙调蛋白（calimodulin,CaM）结合，生成钙与钙调蛋白的复合物。2.该复合物与MLCK结合，并使之激活。3.活化的MLCK使肌球蛋白轻链（myosin light chain，MLC）磷酸化。4.MLC磷酸化引起肌球蛋白头部的构象改变，从而导致横桥与细肌丝肌动蛋白的结合。5.进入与横纹肌相似的横桥周期并产生张力和缩短。6.胞质内Ca2+浓度下降时，MLCK-

4-3失活，MLC在磷酸酶的作用下脱磷酸，横桥便与细肌丝的肌动蛋白解离，肌肉舒张。[3]

对于cAMP在子宫平滑肌中的作用，现在国际公认的说法是，cAMP激活cAMP-dependent protein kinase(PKA), PKA 磷酸化肌球蛋白轻链激酶myosin light chain kinase(MYLK)[4]和 磷脂酶phospholipase C(PLC)[5]。一方面使肌球蛋白失活，使其无法收

2+缩；另一方面抑制磷脂酶（PLC）活性，降低胞内Ca,从而抑制子宫平滑肌的收缩功能。

子宫平滑肌受交感与副交感神经的支配，其中副交感神经节后神经纤维的递质为乙酰胆碱（Ach），子宫平滑肌上存在着大量毒覃碱型胆碱受体（M3ChR），Ach作用于该受体(G蛋白耦连受体)后，可通过磷酸酯酶C，激活Gq/11，形成三磷酸肌醇IP3和二酰基甘油DAG[6]。IP3是一个水溶性的小分子，可在胞浆内自由扩散。当IP3到达内质网后，可与内质网膜上的2+2+IP3控制的Ca释放通道结合并打开该通道，使得储藏在内质网中的Ca释放到胞浆中[3]。

由此，我们发现，乙酰胆碱可通过信号转导通路升高胞内钙离子浓度，拮抗部分的cAMP的收缩抑制作用，也就拮抗了磷酸二酯酶抑制剂的部分抑制效应（具体可参考前述机制）。但是，cAMP对胞质中的肌球蛋白轻链激酶（MLCK）活性的直接抑制不受乙酰胆碱效应机制的影响，也就是说这部分的抑制作用，无法通过Ach得到缓解。这一理论可很好地解释图6和图9曲线逐步下降的现象。

3.2 对实验数据分析与研究所采用的衡量指标的可信度的评价

在本次的数据处理过程中，因为未孕大鼠平滑肌收缩的特殊性（没有自主收缩节律，经Ach诱导后产生的收缩活动相对不太稳定，波动幅度大，波形不典型），我们选取了三个指标对实验数据、曲线进行分析，希望借此能够比较全面、科学地对结果加以描述，将变化趋势和实验结果更为科学、直观、典型的展现出来。一.平均肌张力（AMT）

AMT的取值是将给药间隔内所有收缩峰值的平均值，其中去除了部分与自主节律相关的，或是显受外界环境影响的波动。相对而言，比较客观地反映了该时程内肌条的收缩活动。

但是，也正是在测值过程中，我们发现部分时段内，肌条收缩的幅度存在明显差异，而从统计学上来说，平均值易受样本中极大值或是极小值的影响，该影响的大小可以通过标准差来反映。可是在本次测量中，我们没有办法测出各个波之间的差异，也无法衡量该差异对统计量的影响，故我们引入了第二个描述指标。二.最大肌张力（MMT）

MMT，是在给药间隔内出现的最大收缩波的峰值，希望借此了解固定时程内，收缩波的变化、波动程度，并减少统计过程中引入的误差。但该统计量最大的缺点在于：相当的单薄，具有极大的片面性，难以反映整体的趋势，必须在AMT评价的基础上，作为辅助指标，进行比较与分析。三.收缩面积（CS）

一个波形曲线，不仅包括收缩幅度，也包括了收缩时程（频率）。未孕肌条的特殊性在于，它没有自主节律，无法用常规的频率或是时程指标加以衡量。为此，我们又引入了一个二维的衡量指标：波形曲线下面积，将时间因素也纳入考察范围。通过曲线下面积，我们发现它可以较好地反映Z90对大鼠子宫平滑肌收缩功能的抑制作用呈现浓度依赖性，并可进一步计算在各个乙酰胆碱浓度下Z90的EC50值。

综上所述，我们认为：

AMT，总体来说比较客观，但是无法体现同一时程内多个波的差异性，易受极大或者极小波的影响；

MMT，较不典型，反映样本的特征也相对片面，但尚可与AMC的缺陷在一定程度上有所互补；

CS,在AMC的基础上，涵盖了时程元素，引入二维描述，但同时引入更多误差。

第二篇：读《叶圣陶语文教育论集》

读《叶圣陶语文教育论集》

叶圣陶先生从一九一二年起从事语文方面的教学、编辑、出版工作，前后六十多年，对于这半个多世纪里我国语文教育工作中的利弊得失知道得深切详明，写下了大量文章，收在这论集里的就有一百多篇。凡是关心语文教育问题的人都应该读一读这本论集。这本论集的文章大部分是解放以前写的，到现在还有深刻的现实借鉴意义。因为里头论述的都是语文教育中的根本问题。

论集里的文章，涉及的面很宽，性质也多种多样，有商讨语文教育的理论原则的，也有只谈论一篇文章或者评议一两个词语的。最重要是关于语文学科的性质：语文是工具，是人生日用不可缺少的工具。二是关于语文教学的任务：教语文是帮助学生养成使用语文的良好习惯。

语言文字本来只是一种工具，日常生活中少不了它，学习以及交流各科知识也少不了它。圣陶先生扼要地指出旧式语文教学的三大弊病，并且在好些处别的地方加以申说。第一是在阅读教学上不适当地强调所读的内容而把语文本身的规律放在次要的地位。“国文是各种学科中的一个学科，各种学科又像轮辐一样辏合于一个教育的轴心，所以国文教学除了技术的训练而外，更需含有教育的意义。说到教育的意义，就牵涉到内容问题了。……笃信固有道德的，爱把圣贤之书教学生诵读，关切我国现状的，爱把抗战文章作为补充教材，都是重视内容也就是重视教育意义的例子。这是应当的，无可非议的。不过重视内容，假如超过了相当的限度，以为国文教学的目标只在灌输固有道德，等等，而竟忘了语文教学特有的任务，那就很有可议之处了。道德必须求其能够见诸践履，意识必须求其能够化为行动。要达到这样地步，仅仅读一些书籍与文篇是不够的。必须有关各种学科都注重这方面，学科以外的一切训练也注重这方面，然后有实效可言。国文诚然是这方面的有关学科，却不是独当其任的惟一学科。所以，国文教学，选材能够不忽略教育意义，也就足够了，把精神训练的一切责任都担在自己肩膀上，实在是不必的。”在今天的语文课堂教学中过分强调思想教育，过分强调感悟文章作者的思想感情，显然是背离了学科的性质，最终无法完成学科教学任务。第二种弊病是在作文教学上要求模仿一套程式。“不幸我国的写作教学继承着科举时代的传统，兴办学校数十年，还摆脱不了八股的精神。”我想：不但是过去，就是现在，教学改革进行的过程中，课堂教学总要按照一定的模式进行，一节课里，总要有复习、学生提问、板书、小组讨论，小组汇报，总要有录像、课件，否则就算不上是优质课，本来教学是为了学生学，结果，我们在教学中却很少关注学生是否已经把该要学的知识技能学到，学得容易还是困难，学得轻松还是辛苦，而是过分关注教师在上课时是否已经达到了某个指标，把学生放在一边了，忘在一边了，这样的语文教育实际上是为教育而教育，应此，我不断地告诫自

己，在实际的教育教学中，要驱除程式化，要根据教学内容和学生实际，因人制宜，因文制宜。

第三种弊病就是读书作文不是为了增长知识，发表思想，抒发感情，而是为了应付考试。“从前读书人学作文，最主要的目标在考试，总要作得能使考官中意，从而取得功名。现在也有考试，期中考试，期末考试，还有升学考试。但是，我以为现在学生不宜存有为考试而学作文的想头。只要平时学得扎实，作得认真，临到考试总不会差到哪里。推广开来说，人生一辈子总在面临考试，单就作文而言，刚才说的写封信打个报告之类其实也是考试，不过通常叫作„考验‟不叫作„考试‟罢了。学生学作文就是要练成一种熟练技能，一辈子能禁得起这种最广泛的意义的„考试‟即„考验‟，而不是为了一时的学期考试和升学考试。”为了一时的学期考试和升学考试而学习的学生，为了一时的学期考试和升学考试而执行教育教学工作的老师现在还大有人在，因为学生的考试成绩是评价学生优劣的最重要的依据，也是评价老师的最重要的依据。因为这样，不少老师还对教学内容进行擅自取舍，要考试的多讲多练，不考试的内容不提也不练。我想这才是教育改革面临的最大问题。

叶圣陶先生认为过去的第二点错误认识是把语文课看成知识课，看成跟历史、地理或者物理、化学一样，是传授一门知识的课，因而要以讲为主。这种以教师讲解为主的教学法，其流弊，第一是学生“很轻松，听不听可以随便。但是，想到那后果，可能是很不好的。”其次，“学生会不会习惯了教师都给讲，变得永远离不开教师了呢?永远不离开教师是办不到的，毕业了，干什么工作去了，决不能带一位教师在身边，看书看报的时候请教师给讲讲，动笔写什么的时候请教师给改改。那时候感到不能独自满足当前的实际需要，岂不是极大的苦恼?”看到这里，我又想起了作文批改问题，现在，有很多老师对学生的作文是全批全改，除了总批还有微批，可说是修改的细致入微，学生只要按老师修改的照抄一遍，就是修改了，这不是自欺欺人吗？学生修改作文全被老师包揽了。这样做老师辛苦，学生也不见长进。由此看来，教学方式的选择是至关重要的。

这就触及教育学上的根本问题：在教学活动中，教师起什么作用?圣陶先生的看法是，“各种学科的教学都一样，无非是教师帮着学生学习的一串过程”。换句话说，教学、教学，就是“教”学生“学”，主要不是把现成的知识交给学生，而是把学习的方法教给学生，学生就可以受用一辈子。在这个问题上，圣陶先生有一句精辟的话，现在已经众口传诵，那就是：“教是为了不教。”这句话在这本论文集里多次出现，例如：“„讲‟当然是必要的。问题可能在如何看待„讲‟和怎么„讲‟。说到如何看待„讲‟，我有个朦胧的想头。教师教任何功课(不限于语文)，„讲‟都是为了达到用不着„讲‟，换个说法，„教‟都是为了达到用不着„教‟。……语文教材无非是例子，凭这个例子要使学生能够举一而反三，练成阅读和作文的熟练技能；因此，教师就要朝着促使学生„反三‟这个标的精要地„讲‟，务必启发学生的能动性，引导他们尽可能自己去探索。”又如：“学生须能读书，须能作文，故特设语文课以训练之。最终目的为：自能读书，不待老师讲；自能作文，不待老师改。老师之训练必作到此两点，乃为教学之成功。” “我近

来常以一语语人，凡为教，目的在达到不需要教。以其欲达到不需要教，故随时宜注意减轻学生之倚赖性，而多讲则与此相违也。” “尝谓教师教各种学科，其最终目的在达到不复需教，而学生能自为研索，自求解决。故教师之为教，不在全盘授与，而在相机诱导。必令学生运其才智，勤其练习，领悟之源广开，纯熟之功弥深，乃为善教者也。” “凡为教者必期于达到不须教。教师所务惟在启发导引，俾学生逐步增益其知能，展卷而自能通解，执笔而自能合度。”（怎样才能达到这个目的，关键在于使学生的学习由被动变为主动。例如要求学生预习，给以必要的指导；发起对课文的讨论(主要指语文方面，不是内容方面)，予以有效的启发；对学生的作文只给些评论和指点，让他自己去考虑如何修改；如此等等。这一切，作者在《精读指导举隅》的《前言》以及别的篇章里都有详细的论述。这样教学，当然比逐句讲解吃力，但是这才是教学的正经道路。正如圣陶先生所说，“把上课时间花在逐句讲解上，其他应该指导的事情就少有工夫做了；应该做的不做，对不起学生，也对不起自己。”

论集里边谈到的问题很多，有很多好见解，值得我们学习。但是最重要的恐怕还是借阅读这本论集的机会来对照检查我们自己的工作。有许多现在还常常有争论的问题，事实上圣陶先生多年前已经遇到，并且提出了他的看法。

其实语文教学创新不是凭空提出新思想，新操作就能成的，是要根据学科的特点，学生的成长规律，不断地总结借鉴前人的经验，不断地进行实践和实践反思总结和理论提升，发现了存在问题，改进了，就是创新。所以我说凡是关心语文教育问题的人都应该读《叶圣陶语文教育论集》。

第三篇：《毛泽东文艺论集》读书报告

《毛泽东文艺论集》读书报告

偶尔翻到了《毛泽东文艺论集》，因为本子很薄，很快就浏览完了。提到的做法、思想很多，抓到一个和目前自己的处境相关的，也和自己未来或者是下一代人的命运有关联的话题，我最终选择了知识分子这样一个范围。想着可以针对我们学生所处的环境和自身的发展的实际情况来谈谈。尽管毛所指出的知识分子带有明显的阶级性，也和现代我们所说的知识分子概念不太一样，但是感觉他的观点和态度仍然可以借鉴。同时，自己也想借由知识分子的话题来展开说明现代的知识分子的一些问题。

针对知识分子的话题，主要从毛的几篇文章来看，即《要使人民离开愚昧状态》、《文化、教育、知识分子问题》、《正确对待知识分子和文化工作》，以及《同音乐工作者的谈话》等集中谈论到知识分子的文章。

从《要使人民离开愚昧状态》中看到，文化、教育，与知识分子息息相关，但是政治、经济与军事也同样离不了知识分子。知识分子所从事的的工作一定会是政治、经济、军事工作，或者是文化、教育、艺术、卫生工作，由此看出了知识分子在新中国成立之前的促进作用，涵盖了社会的大方面的工作性质。但是知识分子会存在错误。毛指出应该在工作中来改造这些知识分子的错误。毛泽东似乎很喜欢用改造来应对错误。改造也是一个被他广泛用于文艺论中的词语，这里也不详谈了。那么毛泽东认为的这种错误是什么呢？甚至当时大多数领导人认为的知识分子的错误是什么呢？这个或许可以从《正确对待知识分子和文化问题》中找到答案了。

在《正确对待知识分子和文化问题》中，开始就道出了知识分子的缺点，具有动摇性。但这些知识分子也具有革命性。动摇性是缺点，通过教育来克服。革命性是优点，要发扬光大。这种动摇性主要从知识分子的小资产阶级出身来判定，不一定有它的后世意义。但是也主要强调了知识分子的重要作用。并且举的例子也很有意思，如《三国演义》中的穿八卦衣拿羽毛扇的诸葛亮就是知识分子。总之，不管是封建社会还是奴隶社会，或者是被迫的半殖民地半封建社会，社会主义社会，任何阶级都应该有为阶级服务的知识分子。一个阶级革命要成功、胜利，没有知识分子的参与是不可能的，但也不能全是知识分子，其他人也需要参与。因为整风运动把知识分子压低，这也不对，但是也不能抬高。毛泽东的言论中对知识分子的作用把握得到位，而在下一篇文章《文化、教育和知识分子的问题》对知识分子的作用讲得就更清楚一些。

《文化、教育和知识分子的问题》，突出强调了知识分子带有革命性质——革命知识分子，且讲道“为着扫除民族压迫和封建压迫，为着建立新民主主义的国家，需要大批的人民的教育家和教师，人民的科学家、工程师、技师、医生、新闻工作者、著作家、文学家、艺术家和普通文化工作者。他们必须具有为人民服务的精神，从事艰苦的工作。”一切为人民服务且有所成绩的的工作者，是社会和国家的宝贵财富。八年抗战中，革命知识分子的作用很大，而在今后的建设中会起到更大的作用。培养各类知识分子干部，团结和教育一切有用的知识分子。

《与音乐工作者的谈话》也涉及到知识分子问题，因为和前面三篇的时间跨度较大，所以毛泽东的一些观点有了变化，在对于知识分子的阶级性问题上更加尖利起来，这也会当时的背景有很大的关系吧。新中国的成立，西方的东西快速进入到中国，而首先接触到的就是之前那一批知识分子，他们学习西方的音乐，医术，表演，创作，而导致了西化的泛滥，在面对本土和外来的问题上，知识分子的阶级性被重申，近代文化吸收都归结到了知识分子的身上，这也导致了毛要对知识分子进行一番教育了。()毛这里把资产阶级和知识分子始终挂钩，一同出现了多次，这也表现了毛的阶级斗争性。总之，毛泽东在处理有关知识分子的问题上，是通过自己的阶级性以及知识分子对外来文化的全面吸收和接触而放下了自己本民族的文化来说明的。

看了毛有关知识分子问题的文章，其实也看到了毛所认为的知识分子的某些特质：大部分参加文教工作，出身资产阶级，对外来事物和文化吸收迅速，他们的思想中有一种动摇性，要对其进行一些思想改造，但他们体现出了自己的价值：他们是革命事业和建设事业不可或缺的一部分，很重要。这里似乎会谈到一个依附的关系，知识分子为了革命的胜利服务，并不具有一种明显的独立性，他们的社会地位和处境是由他们在革命事业中所从事的工作带来的成绩所决定的，本身并不会得到一种认同。我们现在的知识分子是怎样的？我想借由毛提到的知识分子问题引申到现在的社会，他所说的一些对待知识分子的态度和知识分子应该有的服务意识是我所赞同的。知识分子应该成为这样一种社会力量，但是现在社会毕竟又向前迈进了一大步，知识分子又有了新的内涵和意义需要我们补充和说明。

许纪霖教授的《中国知识分子十论》中为现代的知识分子所做的定义，我认为很符合目前我心目中现代社会的“知识分子”形象：“以独立的身份，借助知识和精神的力量，对社会表现出强烈的公共关怀，体现出一种公共良知，有社会参与意识的一群文化人。”这种定义把我们对于社会和自身价值的实现之间建立起一种微妙的平衡。我们凭借知识获得一种安生立命的本领，又凭借这种知识来成为一种“文化资本”,实现自身的独立。最重要的是我们说的话为什么会被采纳和应用，就是因为我们凭借这种知识首先成为了某一领域的专家，但是我们并不局限在自己的领域里，而是跳出这个圈子，结合自己所擅长的知识、可以被人相信的专业本领，站在社会和国家的角度来观照社会，表达自己对社会的想法和思考。这才能体现出真正知识分子的价值。

冯欣

文学院2017级硕二党支部

第四篇：检 讨

检 讨

尊敬的领导：

我怀着十分的愧疚以及十分的懊悔向您写下这份检讨书，我为自己行为感到了深深地愧疚和不安，在此，我向各位领导做出深刻检讨：

向您递交这份检讨，严肃深刻反省我在防汛期间报水工作所犯下的错误。此刻，我对自己的疏忽大意以及可以因我的疏忽大意造成的严重后果和不良影响，对您表示深深的抱歉与忏悔。

回顾我的错误，由于疏忽大意以及对黄河防汛工作思想认识不足，在晚上值班期间将电话转移到办公室而到值班室睡觉，以至于在值班时听不到管理段报水电话，无法及时向上级单位汇报。而无法及时上报水位，就会直接影响到上级单位对于黄河情况的及时了解，无法对防汛工作做出及时的掌握。这完全是对防汛工作的思想认识严重不足，对待报水工作的思想观念不够深刻，对待防汛工作不够认真负责。

此次错误的发生，充分暴露出我的防汛意识与思想觉悟严重不足，身为防汛值班水情组的一员，本职工作性质所在，是一份需要非常严肃认真对待的工作。应该时刻注意防汛情况及时做到上传下达，保证我局防汛期间水位及时上报工作。而我竟然犯下如此错误，我的安全意识、危机意识是何等的薄弱。

犯下了错误，我首先应该郑重地向单位领导表示深深地歉意。并郑重地向领导表示抱歉！我思想觉悟不足，对防汛工作的思想认识不够，从今往后，我决定要严肃对待防汛报水工作，在今后工作中时刻警示自己。

此致： 非常抱歉！

检讨人：李宪文

二O一三年七月十一日

第五篇：检 讨

检

讨

——2011年9月20日开标经过

2011年9月20日所开的标为

工程，由于我没有仔细查看招标文件的内容，在检查标书的过程中，未能及时发现人员证书扫描件中得出生年月不一致，导致商务标资格审查没通过，并且废标。为此，我感到很失职，由于我的疏忽，辜负了公司以及本部门领导对我的培养。

由于开标前领导对该项目特别安排专职人员开标，并且标书上午都在审核中，而当天领导安排我做其他的事情，办完事回来后已快下班，心想大家都已经审核了好几遍了，所以就只针对签字盖章的问题仔细检查了标书，确定无误后才下班。但因此次废标，我也觉悟出‘责任重大’的含义。深刻地反省了自己的粗心大意，导致我自身的很多缺点，我的心情是浮躁的，导致工作不够细致，忽视了细节，错误往往就在小事中产生，且在工作考虑不够周全，总是喜欢从单一的角度看待问题，对待工作不够认真负责。针对于我的错误，我做以下弥补：

1、在以后的工作中，我会做到细致，检查检查再检查，细节决定成败，由此事的教训，让我深刻地意识到要认真对待每件事。

2、在工作中，我应当把公司的事情当成自己的事情一样的重视，不应当只以完成为前提，更应当在乎完成的质量与效果，为避免以后有同样的事情发生，我必须从始至终地认真完成每一项工作，不能粗心大意，要有责任心，多集思广益。

3、工作考虑不周，以后在做任何一项工作或计划时，我应当多听取他人的意见，策划详细，做到先思考再行动，尽量使工作毫无漏洞。

4、谨记需要办理的每一件事情，以记事本的方式把需要办理的每一件事详细记录。

5、我应当多听取领导的意见，取长补短。

我会将此次教训当作极其宝贵的经验加以吸取，并时刻铭记于心，时常警醒自己，对于今后的工作，我也要端正态度，严格要求自己，深刻反省并加以改正。

2011年9月22日