分子生物学实验室实验器材清单

第一篇：分子生物学实验室实验器材清单

分子生物学实验室所需试剂、耗材清单

1、普通化学试剂，共计约2.89万。

名

称 95%乙醇AR 无水乙醇AR DEPC EDTA二钠AR 柠檬酸钠AR 柠檬酸三钠AR L-精氨酸BR Tris 苯酚AR 变色硅胶 冰乙酸AR 丙酮AR 二甲苯AR 二乙醇胺cp 甘露醇AR 甘油AR 高碘酸AR 甲醇AR 磷酸氢二钠AR 硫酸AR 硫酸铵AR 硫酸镍AR 氯仿AR 氯化钾AR 氯化镁 氯化钠AR 氯金酸AR 莽草酸 明胶CP 钼酸

钼酸铵AR 尿素AR 牛肉浸膏BR 硼酸AR 氢氧化钠AR 去离子甲酰胺 三乙醇胺 碳酸钙AR 单 位 单价(元）

瓶 7 瓶 10 瓶 150 瓶 50 瓶 27 瓶 15 瓶 126 瓶 220 瓶 36 瓶 19 瓶 10 瓶 18 瓶 20 瓶 38 瓶 15 瓶 28 瓶 240 瓶 8.4 瓶 11 瓶 14 瓶 10 瓶 102 瓶 28 瓶 20 瓶 18 瓶 10 瓶 196 瓶 390 瓶 35 瓶 290 瓶 380 瓶 18 瓶 90 瓶 18 瓶 10 瓶 780 瓶 25 瓶 23 购置数量

金额（元）140 20 200 10 1500 9 450 9 243 9 135 5 630 10 2200 9 324 18 342 9 90 5 90 1 20 1 38 1 15 2 56 2 480 5 42 1 11 3 42 17 170 1 102 10 280 2 40 1 18 10 100 1 196 3 1170 1 35 1 290 1 380 5 90 1 90 10 180 10 100 4 3120 1 25 1 23 碳酸钠AR 碳酸氢钠AR 无水碳酸钾AR 硝酸 硝酸银 销酸钴 盐酸AR 乙酸钾AR 乙酸锌AR 蔥酮 AR 消毒/双氧水30% AR Trypan Blue Tween-20 硝酸钾 硫酸铁 氢氧化钾 甲醛 500ml 硼砂

乳酸 500ml 硝酸钙 乙酸钠 异丙醇 AR 异戊醇 AR SDS 合计

瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 16 22 10 350 48 14 45 36 68 11 32 20 15 15 15 8 12 27 12 46 10.45 40 38 1 1 1 5 1 2 1 1 1 4 1 1 1 1 1 15 5 1 1 4 8 8 40 12 16 22 10 1750 48 28 45 36 68 44 32 20 15 15 15 120 60 27 12 184 83.6 320 1520 28890.6

2、分子生物学试剂, 共计约4.5万元。

名称 La高保真酶 高保真Taq HS 高保真Taq HS GC Buffer DnaseI Rnase A 100bp maker 150bp Maker Marker DL500 Marker DL1000 Marker r-ecot14 I digest 去磷酸化酶 X-GLUC

单位

支 支 支 支 支 支 支 支 支 支 支 瓶

单价(元）购置数量 金额（元）

250 700 700 431

250 250 80 80 500 300 450 2 2 9 3 9 9 10 10 1 1 1

1250 1400 1400 3879 390 2250 2250 800 800 500 300 450 Klenow酶 pMD18-T Vetcor T4 DNA聚合酶 T4连接酶 TRNzol 总RNA提取试剂

IPTG X-gal dNTP(10mM)普通Taq酶（1000U）DNA ladder(100bp，1kb等，50ug)琼脂塘 TEMED 丙烯酰胺

溴酚兰 矿物油

Platinum高保真Taq酶

合计

支 支 支 支 盒 瓶 瓶 支 支 支 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 支

280 108 400 420 80 600 80 80 180 300 40 70 40 90 1500 2 1 5 2 10 10 20 20 10 10 20 30 1 6 5

560 108 2000 840 800 6000 1600 1600 1800 3000 800 2100 40 540 7500 87930

3、内切酶, 共计约0.41万。

名称 BamHI DraI EcoRI EcoRV HindIII KpnI Pst I XbaI 合计

单位 支 支 支 支 支 支 支 支

单价(元）购置数量 金额（元）77 65 75 77 65 120 70 5 18 9 5 9 2 8

385 1170 675 385 585 240 560 4090

4、试剂盒, 共计约1.84万元。

名称 单位 单价(元）

Promega T-easy载体A1380 盒 1400 Promega T-载体试剂盒 盒 900 质粒提取试剂盒(50次)盒 300 一次性胶回收纯化试剂盒

盒 1000（50次）

RNA提取试剂盒(50次)盒 800 RNA纯化试剂盒(50次)盒 360 植物总RNA 提取试剂盒 盒 1280 RT-PCR试剂盒 盒 1500 合计

购置数量 10 5 1 3 1 2

金额（元）

1400 9000 1500

3000 800 1080 1280 3000 248270

5、组织培养试剂，共计约3.55万元。名称

Ammonium sulfate 硫酸铵 Potassium phosphate monobasic KH2PO4 Potassium nitrate KNO3 MYO-INSOSITOL 肌醇 Magnesium sulfate heptahydrate 硫酸镁

Phytagel™ 琼脂粉

N-Z-Amine 水解酪蛋白 Kinetin MgCl2.6H2O 氯化镁 氯化钙 胰蛋白胨 酵母粉 琼脂粉 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 合计

单位 单价(元）购置数量 金额（元）

瓶 1190 1 1190

瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶

1390 4260 4650 3220 1350 1580 5050 1580 3600 300 150 52 15 22 200 1 2 1 2 1 1 1 1 2 2 5 5 4 2

1390 4260 9300 3220 2700 1580 5050 1580 3600 600 300 260 75 88 400 35593

6、抗生素，共计约2.22万。

名称 潮霉素 头孢霉素 羧苄青霉素 利福平

单位 单价(元）

瓶 700 瓶 550 瓶 2500 瓶 850

购置数量 5 4 4

金额（元）

5600 2750 10000 3400 卡那霉素 氨苄青霉素 合计

瓶 瓶30 8 8 240 240 22230

7、实验室耗材，共计约1.58万。名称 玻璃拖把 乳胶滴头 乳胶管6*9 1000ml塑料烧杯 1000ml玻璃烧杯 500ml玻璃烧杯 5ml可调定量加液器 5ml玻璃刻度吸管 10ml玻璃刻度吸管 150ml玻璃锥形瓶 100ml消煮管 25ml玻璃刻度试管 10ml塑料离心管

玻璃棒

有机试管架25*30 试管刷 玻璃试管 玻璃三角瓶 玻璃试剂瓶 塑料量筒 塑料烧杯 一次性过滤器

X光片 液氮（35L）冻存盒,离心管盒,离心管架

密封塑料盒 100格冷冻盒 冻存管(2ML)封口膜 硅胶塞24-28 硅胶塞27-31 三角烧瓶（1000ML)三角烧瓶（100ML)双面离心管架 水银温度计 定性滤纸

单位 单价(元）个 3 个 0.13 个 3.6 个 3.73 个 10.2 个 5.5 支 40.5 支 5 支 5.1 个 4.1 个 8.4 支 1.94 个 20 支 1 个 34.6 个 2 支 1.5 个 4 个 12 个 10 个 10 个 7 个 260 个 150 个 12 个 30 个 8 个 2.5 个 200 个 1.9 个 2.7 个 600 个 9.8 个 2.5 支 8.5 个

1.3

购置数量

金额（元）15 10 1.3 5 18 5 18.65 5 51 5 27.5 1 40.5 1 5 1 5.1 1 4.1 1 8.4 9 17.46 45 900 45 45 45 1557 9 18 18 27 18 72 18 216 18 180 18 180 45 315 4 1040 9

1350 108 4 120 4 32 230 575 4 800 45 85.5 45 121.5 1 600 4 39.2 4 10 8 68 45

58.5 药匙

一次性注射器

0.2mlPCR管 1000个/包 96孔PCR板 10块/包 1.5ml离心管 500个/盒 2ml离心管 500个/盒 96孔PCR硅胶密封硅胶盖

一次性无菌细菌培养皿

玻璃培养皿

吸嘴（10ul，100ul）1000个/袋

吸嘴（1000ul）1000个/袋

合计

个 个 包 包 盒 盒 个 个 个 袋 袋 0.7 33 4 7 7 5 1 0.8 3.5 40

186 50 465 50 45 8 800 40 40 40

180 130.2 1650 1860 350 315 40 800 32 140 1600 15826.91

第二篇：分子生物学实验室的器材配置

分子生物学实验室的器材配置

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器？

1.冰箱： 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱。

最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

2.培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。

3.恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。

4.水浴锅：用于保温并进行各类实验。

25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。

含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。

5.烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。

6.超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。

7.蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。

8.滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。

9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。

10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。

11.pH计：测定溶液中H+的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来；pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高（小数点后两位）的pH计。

12.分光光度计：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。OD值也可以作为菌浓的检测指标。

13.高速离心机：最大转速25000 r/m，最大离心力89000g。有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。

14.超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。

15.电泳系统：电泳技术是检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，甚至还是分离、纯化、回收和浓缩样品的工具之一。

电泳系统分为电源和电泳槽，电源需经稳流通过稳压器，既能提供稳定的直流电，又能输出稳定的电压；水平式电泳槽：一般分为微型电泳槽和大号水平式电泳槽

16.PCR仪：Polymerase Chain Reaction仪，也称DNA热循环仪，基因扩增仪，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行的DNA变性，引物复性，DNA聚合酶催化的延伸反应三个过程。需要说明的是，有些实验室可能还需要梯度PCR仪或实事定量荧光PCR仪来进行一些特殊的分子生物学实验。

17.凝胶成像分析系统：不用紫外和EB、操作安全、直接读取数据。

18.其他设备

1.微波炉：便于一些溶液的快速加热和定温加热，电泳琼脂糖凝胶配制、溶化等。

2.制冰机：用于制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境，以减少核酸酶或蛋白质酶的水解。

3.层析装置：（色谱分离）是一种分离多组分混合物的有效物理方法。

真空印记系统，DNA合成/测序仪：这些都是对核酸进行深入研究的必备仪器。

4.磁力搅拌器：多角度旋转混匀器、快速振荡混合器：用于混合仪器。

5.组织匀浆器：超声组织及细胞破碎器，用其进行样品的分离提纯实验。

6.通风橱：很多溶剂能逸出毒气，必备柜，放射性试验还要有有机玻璃屏蔽。

7.玻璃蒸馏器、电热加帽、变压器：用于酚等有机溶剂的蒸馏。

8.Tip头、Eppendorf管：

微管移液器tip头（吸液尖）、Eppendorf管（微量离心管）可洗涤，硅化消毒后反复使用。对一些要求严格的实验，如RNA的提取、保存等操作，应使用新的消毒tip头与Eppendorf管。另外还应备有常用规格的离心管（1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的细胞培养塑料平板等。

9.小型设备、用具：

定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊；常规的玻璃或塑料器皿，包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶，如饱和酚、巯基乙醇等；记号笔、各种手套（PE、乳胶、家用、防酸的等）。

第三篇：分子生物学实验室

分子生物学实验室（P2设计）

1.功能：进行分

组织培养前实验室设计

标签：产经/公司实验室 微生物 洁净室 设计说明 通风柜 实验台 家俱

组织培养前实验室设计

在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。

在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。

实验室设计原则：保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。

实验室组成：化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。

1)化学实验室（准备室）：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.2)洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。

主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。

3)无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。

主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。

接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。

4)培养室：培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。

第四篇：实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介.

实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介

一、实验目的

熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用

二、实验原理

1、恒温气浴摇床：用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养，发酵，杂交，生化反应及酶和组织研究等。

2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。

3、低温台式高速离心机：用于分离纯化DNA和蛋白质等，如基因片段的分离，蛋白酶的沉淀和回收等。

4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。有多种规格：①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。

5、电泳仪：用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。

6、PCR仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。主要用于基础研究和应用研究等领域。

7、灭菌锅：用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂，器皿及实验用具的严格灭菌。

三、实验仪器

恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。

四、实验步骤

（一）、恒温气浴要穿的使用：

1、样品瓶牢固放入弹簧夹中

2、接通电源开关，仪器进入准备状态

3、参数设定，（设定温度、时间、转速等参数）

4、按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转；

5、按电源键，显示屏显示消失，关闭电源总开关

（二）、超净工作台的使用

1、使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。

2、接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积累的微生物，15分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。

3、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。

4、操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。

5、最后开启工作台紫外灯，照射消毒30分钟后，关闭紫外灯，切断电源。

（三）、低温台式高速离心机的使用

1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。

2、打开门盖，将离心管放入转子内，离心管必须成偶数对称放入，且要事先平衡，完毕用手轻轻旋转一下转子体，使离心管架运转灵活。

3、关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关紧。

4、插上电源插座，按下电源开关（电源开关在离心机背面，电源座上方）。

5、设置转子号、转速、时间：

在停止状态下时，用户可以设置转子号、转速、时间，此时离心机处于设置状态，停止灯亮、运行灯闪烁；按下启动离心开始

（常用，最高转速为13000r/min，时间最长为20分钟）；

注意：对应的转子一定要设置在相应的转速范围内，不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。

6、离心机时间倒计时到“0”时，离心机将自动停止，当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。

（四）、微量移液管的使用

1． 将微量移液器装上吸头（不同规格的移液器用不同的吸头）2． 将微量移液器按钮轻轻压至第一停点；

3． 垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千万不要将吸嘴直接插到液体底部；

4． 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少； 5． 等一秒钟后将吸嘴提离液面

6．平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体； 7． 提起微量移液器，然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。

（五）、PCR的使用

1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”。

2、放入样品管，关紧盖子。

3、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则开始执行程序。

4、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》，1）命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。2）输入程序步骤：名字输入后，确认，然后输入相关程序

5、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。

6、其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

（六）、电泳仪的使用

1． 首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。2．按电源开关，显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后，同时系统初始化，蜂鸣4声，设置常设置。屏幕转成参数设置状态，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。3．确认各参数无误后，按“启动”键，启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start!并蜂鸣4声，提醒操作者电泳仪将输出高电压，注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“Run”，并有两个不断闪烁的高压符号，表示端口已有电压输出。在状态栏最下方，显示实际的工作时间（精确到秒）

4．电泳结束，仪器显示：“END”，并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣

（七）、高压灭菌锅

1、开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没至板上

2、通电：将控制面板上电源开关按至ON处，若水位低（LOW）红灯亮

3、堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过200mm×100mm×100mm为宜，各包装之间留有间隙，堆放在金属框内，这样有利 于蒸汽的穿透，提高灭菌效果，灭菌时间： 121℃，20min，；如为液体，液体必须装在可耐高温的玻璃器皿中，且不可装满，2/3即可，121℃，18-20min

4、密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，使锅盖下压，充分压紧

5、设定时间和温度，开始灭菌

6、灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气

五、思考题

1、列出分子生物学常用仪器的名称，用途及操作时的注意事项。

答：①恒温气浴摇床：常用于液体摇匀以培养微生物、细菌和细胞等。注意要依据不同的用途设置不同的参数。②超净工作台：常用于为微生物学实验提供无菌操作环境。注意操作时关掉紫外灯，避免给人类带来伤害。③低温台式高速离心机：常用于分离纯化蛋白、病毒、细胞等。使用时不能随便移动离心机或打开盖子；离心机运行时要处于锁定状态；离心管的放置要处于平衡状态。④微量移液管：用于计量和转移微量液体的专用仪器。操作时注意避免枪头的污染；调节刻度时不宜超过最大量程；使用完后将刻度调到最大收藏。⑤电泳仪：可对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组分分析或单个组分的提取制备。操作时不可把导线极性接反；当电泳仪进入工作状态后，避免人体与其各部分的接触，不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行；若使用时出现异常，要立刻切断电源。⑥PCR仪：用于扩增DNA片断。操作时应注意盖子要盖紧，按正确步骤进行。⑦高压高温灭菌锅：用于杀菌消毒。使用时应严格按照规程操作，避免发生安全事故。

实验二 琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测

一.实验目的

1、掌握琼脂糖凝胶电泳的原理;

2、学习琼脂糖凝胶电泳的操作。二.实验原理

琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。

DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA，其分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶电泳法分离DNA，主要是利用分子筛效应，迁移速度与分子量的对数值成反比关系。溴化乙锭（EB）未扁平状分子，在紫外照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成EB-DNA复合物，其发射的荧光强度较游离状态EB发射的荧光强度大10倍以上，且荧光强度与DNA含量成正比。

三、仪器和试剂

仪器： 微量移液器，电泳仪，电泳槽，微波炉

试剂： 琼脂糖：1.0%；电泳缓冲液（50 × TAE 电泳缓冲液取Tris24.2g，冰醋酸5.7ml，0.25mol/L EDTA(pH8.0)20ml，加蒸馏水至100ml）EB：5 µl / 100 ml TBE 电泳材料：标准分子量核酸（DL2000）四.操作步骤

（1）制胶（以20 mL为例）

a.称取0.2 g 琼脂糖，加入20 ml 的1XTAE缓冲液（pH 8.0），摇匀； b.微波炉加热，至琼脂糖完全溶解（要防止过热溢出三角瓶）；

c.将制胶板放入制胶槽中，插入适当的梳子，将溶解的琼脂糖（约50℃）加入2ul EB后，混均匀，倒入其中，直至厚度为4～6 mm（如有气泡要把气泡赶出），在室温下冷却凝固(约30~ 45 min)；

d.小心垂直向上拔出梳子,以保证点样孔完好,将胶板置于电泳槽中。（2）点样

用微量移液器将5 µl含蓝色染液的 DL2000 加入点样孔下部。（3）电泳

打开电源开关，调节电压至3~5 V/cm(约100 V)，可见到溴酚蓝条带由负极向正极移动，约30-40分钟后即可观察结果。（4）观察

将电泳好的胶置于紫外透射检测仪上，打开紫外灯，可见到橙红色核酸条带，根据条带粗细，可粗略估计该样品DNA的浓度。如同时有已知分子量的标准DNA进行电泳，则可通过线性DNA条带的相对位置初步估计样品的分子量。

五、实验结果

点样时效果较好的照片点出的白色荧光线比较亮，条带粗细均匀；条带没有出现两端粗中间细的情况

六、思考题

1、做琼脂糖凝胶电泳应注意哪些问题。

答：①EB为强致癌剂，使用时一定要戴手套，避免造成伤害。EB废液要进行正确的处理。②制胶过程中要注意细节，用微波炉加热时要分三步，每步只加热十秒，且要用不戴手套的那只手开微波炉，以免污染。③拔梳子时要垂直向上拔出，以防破坏点样孔。④点样时要小心，既要将样品点到样孔里，又不至于将点样孔戳破。⑤接电源时不可把正负极接反。

第五篇：分子生物学实验室工作制度

分子生物学实验室工作制度 分子生物学实验室分为试剂准备区、标本制备区、文库构建区、扩增区、纯化区、测序准备区、测序区合计7个独立工作区域：各区实验用品应有明显标识，严禁混用； 实验室工作人员均取得国家要求上岗资质； 为有效防止后扩增区产物的污染，实验工作人员应遵循单向走动原则。试剂准备区→标品制备区→文库构建区→纯化区→测序准备区→测序区，物品传递需通过传递窗进行，严禁人和物品反向流动，进入实验室必须更换有该室特殊标识的工作服和鞋套，工作服及拖鞋均有专门的衣柜存放，每个区均有专用的一次性手套、口罩、帽子并有固定存放处。4 实验室工作人员必须严格按照PCR实验室操作程序进行，实验开始前必须先做好室内及工作台的清洁消毒，离心管、吸头等一次性用品均需高压灭菌处理或用商品化专用耗材。建立门禁，非本室人员未经允许不得进入，工作人员在工作时也不能随意进出，以免造成不应有的污染。

6实验前后应用70%乙醇清洁实验室和实验台面，并打开紫外灯消毒30分钟，试验中使用过的吸头、离心管等应置于1mol/L HCL溶液中浸泡，消毒后集中处理，废弃物置于有生物危害标志的待处理区。7 每天下班前处理好废弃物品，关好水、电、门窗。定期校准和维护好PCR仪、离心机、水浴箱、冰箱等仪器设备。核心仪器设备应做好使用登记工作。