2005级临床医学护理医学检验[定稿]

第一篇：2005级临床医学护理医学检验[定稿]

大理学院职业技术学院

初中起点五年制高等职业教育2007级临床医学专业

毕业实习实施意见

各合作办学学校：

毕业实习是大理学院医学专业实现应用型人才培养目标重要的实践性教学环节，是加强学生理论联系实际、对学生开展综合训练和检测、全面提高学生专业动手能力和综合素质的重要教学环节。根据初中起点五年制临床医学专业教学计划规定，结合专业特点及我院工作情况，特对昭通卫校、临沧卫校、大理卫校、德宏职院、丽江民专五个办学单位2007级初中起点五年制临床医学专科专业，共209名学生的毕业实习工作制定以下实施意见。

一、学院组织领导机构

组长：栾玉泉；

副组长：段蓉霖、张怀忠、董凌峰；

组员：何泽志、李建英、王婷燕、董师良。

各办学学校的组织领导机构由各办学学校自定。

二、毕业实习工作

（一）组织原则

1．毕业实习的组织安排，由各办学学校根据“大理学院职业技术学院初中起点五年制高等职业教育《教学管理文件汇编》

（一）”的相关规定组织完成。

2．学生毕业实习结束，必须参加毕业综合考试和毕业总补考。

3．为了确保毕业实习和毕业考试工作的有效进行，各办学学校应根据此《实施意见》，结合工作实际，制定完成本单位具体的《实习方案》，并于2011年5月30日前报职业技术学院高职教综合管理科。

（二）毕业实习时间及内容安排

毕业实习时间共52周，开始实习时间及具体时段由各办学单位确定，原则上实习结束时间为2012年5月30日前，实习时间不得任意减少或延长。

毕业实习时段分配及相关工作：

1．实习准备阶段（2周），主要完成：

①开展实习前动员，强化实习纪律和安全教育，完成本单位《实习方案》的布置安排。

②开展实习前临床技能强化训练：围绕《大理学院临床医学专业核心技能训练及考核手册》（见附件）的相关内容，结合本单位实际，组织开展7-10天的“临床专业核心技能”短期强化训练。

③组织2007级学生开展一次《毕业就业指导》（不少于半天时间）。

④核对2007级学生基本信息。

2．学生实习阶段（48周）：按“大理学院初中起点五年制高等职业教育临床医学专科专业实习大纲”要求，组织学生完成“内科、外科、妇产科、儿科、传染科、五官科”等6个临床科室的实习任务。

3．实习总结阶段（2周），主要完成：

①毕业实习总结。

②毕业综合考及总补考。

③开展“毕业生就业讲座”和“毕业前教育”，组织“毕业典礼”。

（三）具体要求

1．学生毕业实习单位必须在县级或县级以上医院进行。

2．办学单位要高度重视实习前“临床专业核心技能”强化训练工作。训练前应有计划，训练后要有总结。“临床专业核心技能”训练计划（请于2011年6月20日前）和“临床专业核心技能”训练总结（请于2011年7月5日前）上报职业技术学院高职教综合管理科。

3．实习期间需严格学生考勤，加强学生安全管理。实习生必须严格遵守《大理学院实习生组织纪律管理规定》和《大理学院实习生守则》。

4．实习学员必须认真如实填写《大理学院毕业实习鉴定表》和《大理学院学生毕业实习考核表》，撰写毕业实习报告。以上两个表必须由实习科室（内科、外科、妇产科、儿科、传染科、五官科）签署意见并加盖公章后方能生效。

5．毕业实习考核成绩不合格的学生，不予毕业。

三、关于毕业考试工作

毕业考试应于学生实习结束返校后一周内举行，包括毕业综合考试和毕业总补考两部分。考试不及格的学生，不予毕业。具体的组织和安排另文通知。

1．毕业综合考试

考试的内容：理论综合考占60%（其中，内科占35%、外科占35%、妇产科

占15%、儿科占15%），成绩以百分制记；临床技能与操作考核占40%。

2．毕业总补考

有考试成绩不及格的学生，实习结束返校后需报名参加毕业总补考。

四、上交材料及相关要求

1．上报材料：《大理学院五年制高等职业教育毕业实习成绩汇总表》、所有学员的《大理学院毕业实习鉴定表》、《大理学院学生毕业实习考核表》和毕业实习报告。

2．上报要求：《大理学院毕业实习鉴定表》、《大理学院学生毕业实习考核表》和毕业实习报告按学号顺序整理后上报，《大理学院初中起点五年制高等职业教育毕业实习成绩汇总表》随以上材料上报。

3．上报时间：务必于2012年6月12日前上报，以免影响毕业证书和档案发放。

五、本学期的教学有求

鉴于2007级学生的实习时间比原来提前，为了不影响本学期的教学安排，请各合作学校在保证本学期各门课程应开课时的前提下，酌情增加周学时，在2011年6月20日前结束本学期所有课程的教学任务，并完成课程考核（含统考课程考试）。从2011年6月21日起转入实习准备阶段，完成相关工作。

六、未尽事宜，请与职业技术学院高职教综合管理科联系。

附件一：《大理学院临床医学专业核心技能训练及考核手册》

附件二：《大理学院毕业实习鉴定表》

附件三：《大理学院学生毕业实习考核表》

附件四：《大理学院初中起点五年制高等职业教育毕业实习成绩汇总表》

大理学院职业技术学院

2011年3月25日

第二篇：临床医学检验考试辅导医学检验

第九章　酶免疫技术

第一节　酶免疫技术的特点

它是将酶与抗体或抗原结合成酶标记抗体或抗原，在酶标抗体（抗原）与抗原（抗体）的特异性反应完成后，加入酶的相应底物，通过酶对底物的显色反应，对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定分析。

一、酶和酶作用底物

（一）酶的要求：一个酶蛋白分子每分钟可催化103～104个底物分子转变成有色产物。

1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。

2.易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定，且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。

3.作用专一性强，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。

4.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。

5.酶、辅助因子及其底物对人体无害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物应价廉易得。

（二）常用的酶

1.辣根过氧化物酶（HRP）：目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛的标记用酶。由无色的糖蛋白（主酶）和亚铁血红蛋白（辅基）结合而成的复合物。辅基是酶活性基团，而主酶则与酶活性无关，HRP的纯度用RZ（HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值）表示，RZ值应大于3.0。

RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP并不意味着酶活性也高，RZ值与酶活性无关。

酶活性以单位U表示：即1分钟将1μmol底物转化为产物所需的酶量。酶变性后，RZ值不变但活性降低，因此使用酶制剂时，酶活性单位比RZ值更为重要。

2.碱性磷酸酶（AP）：大肠杆菌来源的AP分子量80kD，酶作用最适pH为8.0；小牛肠黏膜AP分子量为100kD，最适pH为9.6；后一种AP的活性高于前者。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）：β-Gal来源于大肠杆菌。因人血中缺乏此酶，以其制备的酶标志物在测定时不易受到内源性酶的干扰，从而提高特异性，被用于均相酶免疫测定。

（三）常用的底物

1.HRP的底物

（1）邻苯二胺（OPD）：是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。OPD应用液稳定性差，易变色，需新配制后在1小时内使用，显色反应过程需避光，而且具有致癌性。

（2）四甲基联苯胺（TMB）：TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长450nm。TMB稳定性好，成色无需避光，无致突变作用，是目前ELISA中应用最广泛的底物。缺点是水溶性差。

（3）其他：5-氨基水杨酸（5-ASA）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）。

2.AP的底物

常用对-硝基苯磷酸酯（p-NPP），p-NPP经AP作用后的产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为405nm。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）的底物

常用4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷（4-MUU），酶作用后，生成高强度荧光物4-甲基伞形酮（4-MU），其敏度性较HRP高30～50倍，但测量时需用荧光计。

二、酶标记抗体或抗原

（一）酶标记抗体或抗原的制备

标记方法应符合：技术方法简单、产率高，且重复性好；标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性；酶标志物稳定，应避免酶、抗体（抗原）以及酶标志物各自形成聚合物等。

1.戊二醛交联法：同源双功能交联剂。

（1）一步法：连接AP。

①优点：操作简便、有效，重复性好。

②缺点：交联时分子间比例不严格，大小不一，影响效果。

（2）二步法：连接HRP。

先将HRP与戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5缓冲液中再与抗体作用而形成酶标抗体。

优点：酶标志物质量较均一，标记效率也较一步法高。

2.改良过碘酸钠法

HRP标记抗体或抗原的最常用方法。

（二）酶标记物的纯化及鉴定

常用的纯化方法有葡聚糖凝胶G-200/G-150过柱层析纯化和50%饱和硫酸铵沉淀提纯等。

常用免疫电泳或双相扩散法进行鉴定。

1.出现沉淀线表示酶标记物中的抗体（抗原）具有免疫活性。

2.沉淀线经生理盐水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀线上显色，则酶标记物中的酶活性仍保留。

三、固相载体

除均相酶免疫测定外，各种非均相酶免疫测定反应最后都需要分离游离和结合的酶标记物。

固相抗体或抗原就是把抗体或抗原结合到固相载体的表面上，是酶免疫技术中将游离和结合的酶标志物迅速分离的最常用方法。

（一）固相载体的要求　结合抗体或抗原的容量大；可将抗体或抗原牢固地固定在其表面，经长期保存和多次洗涤也不易脱落；不影响所固定的抗体或抗原的免疫反应性，而且为使反应充分进行，最好其活性基团朝向反应溶液，固相方法简便易行，快速经济。

（二）固相载体的种类和选择

1.塑料制品：聚苯乙烯塑料最常采用。抗原或抗体以非共价或物理吸附方式结合到此载体上。

主要缺点是抗体（抗原）结合容量不高、固相抗体（抗原）脱吸附率较高且不均一，孔间变异大，重复性差，从而影响测定的灵敏度、精确度及检测范围。

目前采用非共价和化学偶联共价吸附方法进行抗原或抗体的固相化可改善上述缺点

2.微粒：易与抗体（抗原）形成化学偶联，且结合容量大。均匀地分散到整个反应溶液中，因此反应速度快。可制成磁化微颗粒。自动化检测中常用。

3.膜载体：常有硝酸纤维素膜（Nc）、玻璃纤维素膜及尼龙膜等通过非共价键吸附抗体（抗原），广泛用于定性或半定量斑点ELISA的固相载体。

（三）包被与封闭

1.包被：将抗原或抗体结合在固相载体上的过程。普遍使用的聚苯乙烯载体，将抗原或抗体溶于缓冲液（常用为pH9.6的碳酸盐缓冲液）中，加于ELISA板孔中4℃过夜。包被好的固相载体在低温可放置一段时间而不失去免疫活性。

2.封闭：包被的蛋白质浓度过低，固相载体表面不能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色致本底偏高，在这种情况下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干扰，此过程称为封闭。

第二节　酶免疫技术的分类

包括两种：

酶免疫组织化学技术：用于组织切片或其他标本中抗原的定位。

酶免疫测定技术（EIA）：用于液体标本中抗原或抗体的定性和定量。根据抗原抗体反应后是否需将结合和游离的酶标志物分离，EIA一般可分为均相和异相两种类型。

一、均相酶免疫测定

利用酶标志物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变的原理，可以在不将结合和游离酶标志物分离的情况下，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。该法主要用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定，均相法的优点是适合于自动化测定，但反应中被抑制的酶活力较小，需用灵敏的光度计测定，反应的温度也需严格控制。

（一）酶放大免疫测定技术（EMIT）EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原。当与抗体结合后，所标的酶与抗体密切接触，使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例，从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。

（二）克隆酶供体免疫分析（CDEIA）DNA重组技术可分别合成某种功能酶（如β-D半乳糖苷酶）分子的两个片段，大片段称为酶受体（EA），小分子称作酶供体（ED），两者单独均无酶活性，一定条件下结合形成四聚体方具酶活性。克隆酶供体免疫测定（CDEIA）的反应模式为竞争法。

标本中的抗原和酶供体（ED）标记的抗原与特异性抗体竞争结合，形成两种抗原抗体复合物。ED标记的抗原与抗体结合后由于空间位阻，不再能与酶受体（EA）结合，而游离的ED标记的抗原上的ED可和EA结合，形成具有活性的酶，加入底物测定酶活性，酶活力的大小与标本中抗原含量成正比。

二、异相酶免疫测定

是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。

（一）异相液相酶免疫测定　主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性，且无放射性污染。

1.平衡法：将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育，待反应达平衡后，测定离心沉淀物（酶标抗原抗体复合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

2.非平衡法：先将样品（或标准品）与抗体混合反应达平衡，然后加入酶标记抗原继续温育一段时间，测定离心沉淀物（酶标抗原抗体复合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

（二）固相酶免疫测定　酶联免疫吸附试验（ELISA）。

第三节　酶联免疫吸附试验

一、基本原理

把抗原或抗体结合到固相载体表面，测定时将受检样品和酶标记抗原或抗体与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成抗原抗体复合物；洗去未结合成分；加入底物后，底物被固相载体上的酶催化变成有色产物。故：

①固相的抗原或抗体；

②酶标记的抗原或抗体；

③酶反应的底物三种试剂为反应必备。

二、方法类型及反应原理

（一）检测抗原的方法

1.双抗体夹心法：属于非竞争结合，检测抗原最常用的方法，检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。原理是先将特异性抗体与固相载体连接；加入待测标本，形成固相抗原抗体复合物；再加入酶标抗体形成双抗体夹心，洗涤；加底物显色，根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量检测。

如血清标本中有类风湿因子（RF）存在，则可出现假阳性反应，因为RF是一种抗变性IgG的自身抗体，它能与多种动物的变性IgG的Fc部分结合，因此RF就可作为固相抗体和酶标抗体之间的桥接抗原。

双抗体夹心法只适用于二价或以上的较大分子抗原的测定，不能用于小分子半抗原的检测。

2.双位点一步法：针对抗原分子上两个不同且空间距离较远的决定簇，包被使用一种单抗，酶标记使用另一种单抗。测定时将待测抗原和酶标抗体同时加入，温育、洗涤，加入底物显色。若待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应，显色降低，甚至假阴性。必要时可将标本经过适当稀释后重复测定。

3.竞争法

用于测定小分子抗原，如药物、激素等。原理为先用抗小分子的特异性抗体包被固相，然后同时加入待测样本和酶标记的小分子，两种小分子竞争与固相上的抗小分子的特异性抗体结合，温育一定时间后洗涤，加入酶底物显色。

特点是：

①酶标记抗原与样品或标准品中的非标记抗原具有相同的与固相抗体结合的能力；

②反应体系中，固相抗体和酶标抗原是固定限量，且前者的结合位点少于酶标记和非标记抗原的分子数量和；

③免疫反应后，结合于固相载体上复合物中被测定的酶标抗原的量（酶活性）与样品或标准品中非标记抗原的浓度成反比。

（二）检测抗体的方法

1.间接法：最常用的方法，属非竞争性结合试验。原理：将抗原包被在固相载体上，加入待测样本形成固相抗原-受检抗体复合物；经温育洗涤后，加入酶标二抗，常用羊抗人IgG，在固相上即形成固相抗原-待测抗体-酶标抗抗体复合物，加入底物后根据显色的深浅确定待测抗体含量。多用于检测IgG类型抗体。

2.双抗原夹心法

此法可检测各类抗体，因此双抗原夹心法的灵敏度和特异性要高于间接法。其原理及操作步骤类似双抗体夹心法，也可采用一步法。由于机体产生抗体IgG的效价有限，一般不会出现钩状效应。

临床上乙型肝炎表面抗体的测定常用此法。

3.竞争法

一般抗体检测是较少采用，当相应抗原材料中含有与抗人IgG反应的物质，而且不易得到足够的纯化抗原或抗原的结合特异性不稳定时，可采用这种方法测定抗体，目前临床运用较多的是乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）的检测。

竞争抗体与待测抗体的特异性及亲和力越接近，则测定的可靠性越强。

4.捕获法又称反向间接法

主要用于血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定，最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。原理：先将针对IgM的二抗包被于固相载体，加入待测标本，其中IgM类抗体可被固相抗体捕获，再加入特异性抗原，其与固相上捕获的IgM抗体结合后，加入酶标记特异性抗原的抗体，形成固相二抗-IgM-抗原-酶标记抗体复合物，加底物显色后，即可对待测标本中IgM是否存在及含量进行测定。

第四节　酶免疫测定的应用

几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用酶免疫测定检测。

均相酶免疫测定主要用于药物和小分子物质的检测。

非均相免疫测定中的ELISA在多种物质的检测中被广泛的使用。

实战演练

目前酶免疫技术中应用较广、提纯较简便的酶是

A.脲酶

B.碱性磷酸酶

C.葡萄糖氧化酶

D.辣根过氧化物酶

E.半乳糖苷酶

『正确答案』D

『答案解析』HRP是目前在酶联免疫吸附试验中应用最为广泛的标记用酶。

酶放大免疫测定技术（EMIT）主要用来检测

A.抗原

B.抗体

C.半抗原

D.不完全抗体

E.抗原抗体复合物

『正确答案』C

『答案解析』酶放大免疫测定技术（EMIT）主要用来检测半抗原。

以下关于酶标记抗体或抗原不正确的是

A.过碘酸盐氧化法只用于HRP的标记

B.未标记上的游离的抗体与酶标记抗体竞争固相上的抗原

C.制备的标记物无须纯化，因为游离的酶或未标记上的抗原或抗体成分在测定过程中被洗掉

D.制备的结合物需要纯化

E.标价物需要鉴定

『正确答案』C

『答案解析』每批制备的酶标志物都要进行质量和标记率的鉴定，质量鉴定包括酶活性和抗体（抗原）的免疫活性鉴定。常用免疫电泳或双相扩散法，出现沉淀线表示酶标记物中的抗体（抗原）具有免疫活性。沉淀线经生理盐水反复漂洗后，滴加酶的底物溶液，若在沉淀线上能显色，则表示酶标记物中的酶活性仍保留。也可直接用ELISA方法测定。

关于酶联免疫吸附试验（ELISA）错误的是

A.属于液相和固相酶免疫测定

B.固相常用聚苯乙烯反应板

C.通过洗涤除去未结合成分

D.底物显色

E.既能定性又能定量分析

『正确答案』A

『答案解析』酶联免疫吸附试验（ELISA）属于固相酶免疫测定。

酶免疫技术中最常用的固相载体是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纤维素膜

D.琼脂糖

E.尼龙膜

『正确答案』B

『答案解析』酶免疫技术中最常用的固相载体是聚苯乙烯。

酶免疫技术中悬浮在溶液中具有液相反应速率的固相载体是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纤维素膜

D.磁性微粒

E.尼龙膜

『正确答案』D

『答案解析』酶免疫技术中悬浮在溶液中具有液相反应速率的固相载体是磁性微粒。

将抗原或抗体固相化的过程称为

A.吸附

B.包被

C.封闭

D.标记

E.交联

『正确答案』B

『答案解析』将抗原或抗体固相化的过程称为包被。

ELISA技术中，最常用来检测抗体的方法是

A.双抗体夹心法

B.间接法

C.竞争法

D.捕获法

E.应用生物素和亲和素的ELISA

『正确答案』B

『答案解析』ELISA技术中，最常用来检测抗体的方法是间接法。

下列有关双位点一步法ELISA的叙述中，错误的是

A.使用针对同一抗原不同决定簇的两种单克隆抗体作为酶标抗体

B.一种单克隆抗体作为固相抗体，另一种作为酶标抗体

C.采用高亲和力的单克隆抗体将提高测定的敏感性和特异性

D.可使标本和酶标抗体同时加入

E.标本中抗原过高时，会出现钩状效应

『正确答案』A

『答案解析』双位点一步法：在双抗体夹心法基础上，进一步发展了双位点一步法。该法是针对抗原分子上两个不同且空间距离较远的决定簇的两种单克隆抗体，即包被使用一种单抗，酶标记使用另一种单抗。测定时将含待测抗原标本和酶标抗体同时加入进行反应，两种抗体互不干扰，经过一次温育和洗涤后，即可加入底物进行显色测定。但当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应（hook

effect），显色降低，严重时可出现假阴性结果。必要时可将标本经过适当稀释后重复测定。这是应用此法必须要注意的问题。

ELISA技术中待测孔（管）显色颜色的深浅与待测抗原或抗体呈负相关的是

A.双抗体夹心法

B.双位点一步法

C.间接法测抗体

D.竞争法

E.捕获法

『正确答案』D

『答案解析』ELISA技术中待测孔（管）显色颜色的深浅与待测抗原或抗体呈负相关的是竞争法。

双位点一步法钩状效应产生是因为

A.标本中的抗原不纯

B.洗涤不充分

C.孵育时间过长

D.酶标抗体过量

E.标本中的抗原浓度过高

『正确答案』E

『答案解析』双位点一步法钩状效应产生是因为标本中的抗原浓度过高。

用一种标记物可检测多种与抗原相应的抗体的ELISA方法是

A.双抗体夹心法

B.间接法

C.竞争法

D.双抗原夹心法

E.双位点一步法

『正确答案』B

『答案解析』用一种标记物可检测多种与抗原相应的抗体的ELISA方法是间接法。

关于ELISA竞争法的叙述中，正确的是

A.只用于检测抗原

B.待测成分优先于酶标记物与固相结合C.被测物含量多则标记物被结合的机会少

D.待测管显色颜色越淡表示被测物含量越少

E.只用于检测抗体

『正确答案』C

『答案解析』关于ELISA竞争法的叙述中，正确的是被测物含量多则标记物被结合的机会少。

ELISA间接法中固相上包被的是

A.抗体

B.不完全抗体

C.抗原

D.抗抗体

E.酶标抗体

『正确答案』C

『答案解析』ELISA间接法中固相上包被的是抗原。

临床上检测IgM抗体常用的ELISA方法是

A.双抗体夹心法

B.间接法

C.竞争法

D.双抗原夹心法

E.捕获法

『正确答案』E

『答案解析』捕获法，又称反向间接法。主要用于血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定，目前最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。

酶免疫技术分为两类酶免疫测定，它们是

A.均相和异相

B.固相和液相

C.酶免疫组化和酶免疫测定

D.均相和固相

E.异相和液相

『正确答案』C

『答案解析』酶免疫技术分为两类酶免疫测定，它们是酶免疫组化和酶免疫测定。

ELISA一般不用于检测

A.病原体及其抗体

B.Ig、补体、肿瘤标志物等蛋白质

C.非肽类激素

D.药物

E.半抗原

『正确答案』E

『答案解析』ELISA一般不用于检测半抗原。半抗原一般用均相酶免疫测定法。

第三篇：2011年临床医学、医学检验(专升本)考试大纲.doc

2011检验技师临床检验备考：红细胞形态检查临床意义

2011初级检验技师临床检验基础备考预习：概述红细胞形态检查临床意义......1、红细胞体积大小变化

红细胞体积大小变化包括小细胞、大细胞、巨红细胞核红细胞大小不均。

（1）小红细胞：直径<6μm的红细胞。正常人偶见。小红细胞血红蛋白合成障碍，生理性淡染区扩大，见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。小红细胞血红蛋白充盈良好，生理性

淡染区消失，见于遗传性球形细胞增多症。

（2）大红细胞：直径>10μm的红细胞，为未完全成熟红细胞，体积较大，因残留脱氧核糖核酸，瑞氏染色后呈多色性或嗜碱性点彩。见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血

等。

（3）巨红细胞：直径>15μm的红细胞，因叶酸、维生素B12缺乏使幼稚细胞内DNA合成不足，不能按时分裂，脱核后成为巨大红细胞，血涂片还可见分叶过多中性粒细胞。见于巨

幼细胞性贫血。

（4）红细胞大小不均：红细胞间直径相差一倍以上，大者可达12μm，小者仅2.5／μm，与骨髓粗制滥造红细胞有关。见于严重的增生性贫血（如巨幼细胞性贫血）。

2、红细胞内血红蛋白含量改变

（1）正常色素性(normochmic)正常红细胞在瑞特染色的血片中为淡红色圆盘状，中央有生理性空白区，通常称正常色素性。除见于正常人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和白

血病。

（2）低色素性(hypochromic)红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少，常见于缺铁性贫血、珠蛋白生杨障碍性贫血、铁幼粒细胞

性贫血，某些血红蛋白病时也常见到。

（3）高色素性(hyperchromic)指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细胞均染成红色，而且胞体也大。其平均红细胞血红蛋白的含量是增高的，但平均血红蛋白浓度多属于正

常。最常见于巨幼细胞性贫血。

（4）嗜多色性(polychromatic)属于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大，由于胞质中含人多少不等的嗜碱性物策RNA而被染成灰色蓝色。嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能

活跃。在增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见。

3、红细胞形状改变

红细胞形状改变有球形红细胞、椭圆形红细胞、靶形细胞、口形红细胞、镰形红细胞、棘

红细胞、裂红细胞、缗钱状红细胞和有核红细胞。

（1）球形红细胞：细胞中央着色深、体积小、直径与厚度比小于2.4：1（正常值3.4：

1），球形红细胞气体交换功能较正常红细胞为弱，且容易导致破坏、溶解。见于遗传性和获

得性球形细胞增多症（如自身免疫溶血性贫血、直接理化损伤如烧伤等）和小儿。

（2）椭圆形红细胞：细胞呈椭圆形、杆形、两端钝圆、长轴增大，短轴缩短、长是宽的3～4倍，长径为12.5μm，横径为2.5μm，其红细胞生存时间一般正常也可缩短，血红蛋白正常，与遗传性细胞膜异常基因有关，细胞成熟后呈椭圆形，置于高渗、等渗、低渗、正常血清内，其椭圆形保持不变。见于遗传性椭圆形细胞增多症（可达25%～75%）、大细胞性贫血（可达25%）、缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血、正常人（约占

1%，不超过15%）。

（3）靶形细胞：细胞中央染色较深，外围为苍白区域，而边缘又深染，形如射击之靶。有时，中央深染区呈细胞边缘延伸的半岛状或柄状。细胞直径比正常大，但厚度变薄，由于红细胞内血红蛋白化学成分发生变异和铁代谢异常所致，形成过程是：红细胞中血红蛋白溶解成镰状或弓形空白区，随后弓形空白区两端继续弯曲延伸，形成环形透明带，细胞生存时间约为正常细胞的一半或更短。见于各种低色素性贫血（如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病）、阻塞

性黄疸、脾切除后。

（4）口形红细胞：细胞中央有裂缝，中央淡染区呈扁平状，似张开的口形或鱼口，细胞有膜异常，Na+通透性增加，细胞膜变硬，使脆性增加，细胞生存时间缩短。见于口形红细胞

增多症、小儿消化系统疾患引起的贫血、酒精中毒、某些溶血性贫血、肝病和正常人

（<4%）。

（5）镰形红细胞：细胞呈镰刀状、线条状或L、S、V形等，是含有异常血红蛋白S（HbS）的红细胞，在缺氧情况下，溶解度减低，形成长形或尖形结晶体，使细胞膜发生变形。检查镰形红细胞时需加还原剂如偏亚硫酸钠后观察。见于镰状细胞贫血（HbS-S，HbS-

C）、镰状细胞特性样本（HbA-S）。

（6）棘红细胞：细胞表面有针状突起、间距不规则、长和宽不一。见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症（高达70%～80%）、脾切除后、酒精中毒性肝病、尿毒症。需与皱缩红细胞

（锯齿状红细胞）鉴别，皱缩红细胞边缘呈锯齿形、排列紧密、大小相等、外端较尖。

（7）裂红细胞：为红细胞碎片或不完整红细胞，大小不

一、外形不规则、呈刺形、盔形、三角形、扭转形等，是细胞通过阻塞的、管腔狭小的微血管所致。见于弥散性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤。正常

人（<2%）。

（8）缗钱状红细胞：红细胞互相连接如缗钱状，是因为血浆中某些蛋白（纤维蛋白原、球蛋白）增高，使红细胞正负电荷发生改变所致。

（9）有核红细胞（幼稚红细胞）：除1周内婴幼儿血涂片中可见少量有核红细胞外，其

他则为病理现象，包括：

①溶血性贫血：严重的溶血性贫血、新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血。因红细胞大量破坏、机体相对缺氧，使红细胞生成素水平增高，骨髓红系增生，网

织红细胞和部分幼稚红细胞提前释放人血，说明骨髓有良好的调节功能。

②造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤：各种急、慢性白血病、红白血病。由于骨髓充满大量白血病细胞而使幼红细胞提前释放，或因髓外造血所致，有核红细胞以中、晚幼红细胞为

主。红白血病时可见更早阶段幼稚红细胞，并伴形态异常。

③慢性骨髓增生性疾病：如骨髓纤维化，血涂片可见有核红细胞，来自髓外造血和纤维化的骨髓。

④脾切除后：骨髓中个别有核红细胞能到达髓窦，当脾切除后，不能被脾脏扣留，从而进

入外周血。

（10）其他：①新月形红细胞：红细胞着色极淡、残缺不全、体积大、状如新月形、直径约20μm，见于某些溶血性贫血（如阵发性睡眠性血红蛋白尿症）。②泪滴形红细胞：红细胞形如泪滴样或梨状，因细胞内含有Heinz小体或包涵体，或红细胞膜被粘连而拉长所致。见于贫血、骨髓纤维化和正常人。③红细胞形态不整：出现不规则的奇异形状，如豆状、梨形、蝌

蚪状、麦粒状、棍棒形等。见于某些感染、严重贫血、巨幼细胞性贫血。

4、红细胞内出现异常结构

红细胞内出现异常结构包括嗜碱性点彩红细胞、豪焦小体、卡波环和寄生虫。

（1）嗜碱性点彩红细胞：瑞氏染色后，胞质内出现形态不一的蓝色颗粒（RNA），属于未完全成熟红细胞，颗粒大小不

一、多少不等，原因为重金属损伤细胞膜，使嗜碱性物质凝集，或嗜碱性物质变性，或血红蛋白合成中阻断原卟啉与铁结合。见于铅中毒。正常人血涂片中很少见到嗜碱性点彩红细胞（约占1／10000）。其他各类贫血见到点彩红细胞表明骨髓造

血旺盛或有紊乱现象。

（2）豪焦小体（Howell-Jolly’sbody、染色质小体）：成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为1～2μm暗紫红色圆形小体，为核碎裂、溶解后的残余部分。见于脾切除

后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病、某些贫血（如巨幼细胞性贫血）。

（3）卡波环：在嗜多色性、碱性点彩红细胞胞质中出现紫红色细线圈状结构，呈环形、8字形，为核膜残余物、纺锤体残余物（电镜下，可见形成纺锤体的微细管着色点异常）、脂蛋

白变性物。见于白血病、巨细胞性贫血、增生性贫血、铅中毒、脾切除后。

（4）寄生虫：红细胞胞质内可见疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等病原体。

第四篇：医学高级职称考试宝典(临床医学检验)-考试题库

医学高级职称考试宝典(临床医学检验)-考试题库

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第五篇：医学检验材料

2012年医学检验考试生化检验辅导：胆道疾病的临床意义

正常时肝细胞内ALT、AST的一部分可通过肝细胞膜到肝窦状隙而进入血液，一部分通过溶酶体分泌进入毛细胆管排人小肠，故当各种原因引起胆道梗阻时，后部分酶反流入血，可致ALT中度升高，梗阻缓解后l～2周即可恢复正常。

2012年医学检验知识讲解：精液检查的要求

如果取精液检查，应在检查前5天内不排精。一般收集精液，可以用自慰取得，用避孕套通过性交时收集也可以。精液取到后应盛放在干燥、清洁的瓶内，并立即送检。

精液是体液的一种。因此，很多性病可以通过精液传染给对方。艾滋病病人的精液含有艾滋病的病毒，因此可以通过性交传染给对方。肛交是一种危险的性行为，因为肛门附近的组织比较容易受伤害，如果有伤口破裂，那么带有艾滋病病毒的精液就可以通过伤口传染给被肛交的一方。这也是为什么同性恋的男性比较容易得艾滋病的原因。只要有体液的交流，异性恋的性行为也是可以传播性病的。

医生为了鉴定男性生育能力，常嘱男方作精液检查，正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者，可呈淡黄色，若出现鲜红色。暗红色，则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2～6毫升，常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状，1小时之内应液化为稀薄的液体，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液丝长度一般不超过2厘米，否则视为异常。精液呈弱碱性，PH值为7.2～7.8.正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精》=50%.世界卫生组织推荐精子活动力分为四级：0级：不活动；1级：精子原地摆动；2级：有中等的前向运动；3级：前向运动活跃，快速直线运动。正常的精子活动力为2～3级的精子》=40%～50%.精子形态：畸形精子小于50%.分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论，应对精子数量、活力、活动率、液化时间、畸形率等多方面进行综合能力分析。

2012年医学检验知识讲解：精液常规检查

精液由精子和精浆组成，其中精子占10%，其余为精浆。它除了含有水、果糖、蛋白质和脂肪外，还含有多种酶类和无机盐。精液中含有锌元素。

精子由睾丸产生。精浆由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌产生。精浆里含有果糖和蛋白质，是精子的营养物质。另外，精浆中还含有前列腺素和一些酶类物质。正常的精液呈乳白色、淡黄色或者无色，每毫升为精液中的精子数一般在6千万至2亿个。有活动能力的精子占总数的60%以上。畸形精子应总数的10%以下。在室温下精子活动力持续3－4小时。

精液是碱性，女性生殖器内部则为酸性。因此，精液进入女性内部，就会被中和。

有生育力的正常男性一次射精最为2-6毫升，平均3.5ml.一次射精量与射精频度呈负相关。若禁欲5-7天射精量仍少于2毫升，视为精液减少；若不射精，称为无精液症（aspermia）。精浆是精子活动的介质，并可中和阴道的酸性分泌物，以免影响精子活力。精液量减少（精浆不足）不利于精通过阴道进入子宫和输卵管，影响受精。若一次射精量超过8毫升，精子被稀释，也不利于生育。此可因垂体前叶促性腺素的分泌功能亢进，使雄激素的水平升高所致亦可见于禁欲时间过长者。

精液内含有一种可与青霉素相媲美的抗菌物质———精液胞浆素。专家们指出，精液胞浆素是一种具有独特功能的蛋白质，此物质一旦进入细胞内部，就可以阻止核糖核酸的合成，从而杀死细菌。从实验室培养中观察到，精液胞浆素能杀死葡萄球茵、链球菌等多种致病菌。

精液呈灰白色，自行液化后为半透明的乳白色，久未射精者可略显浅黄色。凡精液呈鲜红、淡红、暗红或酱油色并含有大量红细胞者称为血精，可能由于前列腺和精非特异性炎症、生殖系结核、肿瘤或结石所致黄色或棕色脓性精液见于前列腺炎和精囊炎。对于普通的健康男性，如果没有不洁的性行为，或者性病，精液是什么颜色，形状，根本是无关紧要的。男性疾病不是从表面研究精液，就可以诊断出来的。精液中的精子和女性的卵子结合，用来繁衍后代，这就是精液的唯一的功能。因此，如果吞食了精液，是绝对不可能导致女人怀孕的。对于单身男性来说，如果连对象也没有，根本就没有必要担心自己的精液问题，完全就是庸人自扰。如果结婚一年以后，女方仍然没有怀孕，那时才是应该看医生，找出不孕的原因。

有些男性，受到一些封建迷信的宣传，所以对于自己的精液特别重视。古人因为愚昧无知，所以有“一滴精，十滴血”，“精尽人亡”之类的错误说法。这是完全没有科学根据的。古代太监，因为睾丸被割掉，连一个精子都没有。有些太监还很长寿。现代科学研究，证明精液根本就不是所谓男性的精华所在。精液也绝对不是什么美容佳品。

2012年医学检验考试生化检验基础辅导：m-AST的意义

m-AST可协助判断肝实质损害的严重程度。

当急性肝炎病变严重累及线粒体时，AST/ALT比值升高，此时应注意是否发展为慢性肝炎。肝硬化时可达2.0.在Reye综合征、妊娠脂肪肝、心肌梗死、做导管肝动脉栓塞术后，m-AST也可升高

2012年医学检验考试临检基础辅导：肾前性少尿

肾前性少尿：由于各种原因造成肾血流量不足，肾小球滤过率减低所致；如①肾缺血：各种原因引起的休克、过敏、失血过多、心力衰竭、肾动脉栓塞、肿瘤压迫等。②血液浓缩：严重腹泻、呕吐、大面积烧伤、高热等。③血容量减低：重症肝病、低蛋白血症引起全身水肿。④应激状态：严重创伤、感染（如败血症）等。

2012年医学检验考试临检基础辅导：病理性多尿

1）内分泌疾病：如尿崩症，指抗利尿激素（ADH）严重分泌不足或缺乏（中枢性尿崩症），或肾脏对ADH不敏感或灵敏度减低（肾源性尿崩症），患者24h尿量可多达5～15L，尿比密常为1.005以下，尿渗透压在50～200mmol/L之间。多尿还见于甲状腺功能亢进、原发性醛固酮增多症等。

2）代谢性疾病：如糖尿病（DM）引起的多尿，主要机制是渗透性利尿所致，患者尿比密、尿渗透压均增高。

3）肾脏性疾病：如慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、慢性肾功能衰竭早期、肾小管酸中毒Ⅰ型、急性肾功能衰竭多尿期、失钾性肾病等。肾小管破坏致肾浓缩功能逐渐减退均可引起多尿。肾性多尿常具有昼夜尿量的比例失常、夜尿量增多的特点，即昼夜间尿量比《2：1.2012年医学检验考试生化检验辅导：其他疾病的临床意义

ALT广泛存在于各组织中，机体器官有实质性损害时，ALT均可增高。如急性心肌梗死、右心功能不全、多发性肌炎、肌营养不良、急性肾盂肾炎、大叶性肺炎、支气管炎、传染性单核细胞增多症、溃疡性结肠炎、细菌性或阿米巴性肝脓疡等疾病、疟疾、血吸虫病，外伤、手术等均可造成血清ALT和AST增高。

某些化学药物如异菸肼、氯丙嗪、利福平、环磷酰胺和某些抗生素等也可引起血清ALT增高，所以ALT单项增高，需要结合病情综合分析。

2012年医学检验知识讲解：血清学试验的应用

血清学试验在医学和兽医学领域已广泛应用，可直接或间接从传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病和变态反应性疾病的感染组织、血清、体液中检出相应的抗原或抗体，从而作出确切诊断。对传染病来说，几乎没有不能用血清学试验确诊的疾病。实验室只要备有各种诊断试剂盒和相应的设备，即可对多种疾病作出确切诊断。在动物疫病的群体检疫、疫苗免疫效果监测和流行病学调查中，也已广泛应用了血清学试验以检测抗原或抗体。血清学试验还广泛应用于生物活性物质的超微定量、物种及微生物鉴定和分型等方面。此外，血清学试验也用于基因分离，克隆筛选，表达产物的定性、定量分析和纯化等，已经成为现代分子生物学研究的重要手段。

2012年医学检验考试血液检验辅导：嗜酸性粒细胞的计数

嗜酸性粒细胞起源于骨髓内CFU-s。经过单向嗜酸性祖细胞（CFU-EO）阶段，在有关生成素诱导下逐步分化，成熟为嗜酸性粒细胞，在正常人外周血中少见，仅为0.5-5%.嗜酸性粒细胞有微弱的吞噬作用，但基本是无杀菌力，它的主要作用是抑制嗜石破天惊生粒细胞和肥大细胞合成与释放其活性物质，吞噬其释出颗粒，并分泌组胺酶发破坏组胺，从而起到限制过敏反应的作用。此外，实验症明它还参加与对嚅虫的免疫反应。嗜酸性粒细胞的趋化因子至少有六大来源：

①从肥大细胞或嗜碱性粒细胞而来的组胺（histamine）； ②由补体而来的C3AC5A、C567，其中以C5a最为重要； ③从致敏淋巴细胞而来的嗜酸性细胞趋化因子； ④从寄生虫而来的嗜酸性粒细胞趋化因子；

⑤从某些细菌而的嗜酸性粒细胞趋化因子（如乙型溶血性链球菌等）； ⑥从肿瘤细胞而来的嗜酸性粒细胞趋化因子。以上务因素均可引起的嗜酸性粒细胞增多。由于嗜酸性粒细胞在外周血中百分率很低，故经白细胞总数和嗜酸性粒细胞百分率换算而来的绝对值误差较大，因此，在临床上需在了解嗜酸性粒细胞的变化时，应采用直接计数法。

2012年医学检验知识讲解：血清学试验的概念

抗原抗体反应是指抗原与相应的抗体之间发生的特异性结合反应。它既可以发生在体内，也可以发生在体外。在体内发生的抗原抗体反应是体液免疫应答的效应作用。体外的抗原抗体结合反应主要用于检测抗原或抗体，用于免疫学诊断。因抗体主要存在于血清中，所以将体外发生的抗原抗体结合反应称为血清学反应或血清学试验。血清学试验具有高度的特异性，广泛应用于微生物的鉴定、传染病及寄生虫病的诊断和监测。

2012年医学检验考试临检基础知识辅导：尿红细胞形态分析的临床意义

1.畸形红细胞标准

Birech报告畸形红细胞分类 红细胞大小不等，形态异常多样，归为以下7种［6］：①酵母菌样红细胞：在红细胞外膜有小泡突出或细胞呈霉菌孢子样改变。②炸面包卷样红细胞：红细胞膜呈明显的内外两圈、四周肥厚、形似炸面包卷。③古钱样红细胞：形似中国古钱币。④膜缺损红细胞：红细胞膜不完整，部分血红蛋白（Hb）丢失。⑤大红细胞：细胞体增大，中心淡，无双盘凹陷感。⑥小红细胞：胞体小，外膜增厚，折光增强。⑦手镯样红细胞：胞体较大，呈明显内外两层膜改变。

黄锋先等关于畸形红细胞分类 ①面包圈样红细胞。②古钱样红细胞。③红细胞膜呈颗粒样、串珠样。④红细胞大小不等，大者为正常的1～2倍，小者为其1/2，颜色变浅。⑤残碎红细胞。⑥芽孢样红细胞。⑦棘状样红细胞。⑧其他形状，如细胞膜破裂成各种形状，马蹄形、月牙型等。其他如红细胞呈锯齿型、固缩型、大小一致的均称均一型。

2.均一型红细胞标准

红细胞大小一致，变化均一，图相在两种以内，多数为正常及桑椹样红细胞，部分可出现影子红细胞。此型多属于非肾小球性血尿。

3.混合型红细胞标准

根据畸形和均一型红细胞所占比例的不同，可分为畸形为主的混合型红细胞血尿（畸形红细胞》50%）和以均一型红细胞为主的混合型红细胞血尿（均一型红细胞所占》50%）两种。

4.判定界限

畸形红细胞占80%以上为肾小球性血尿；畸形红细胞《20%，均一型红细胞》80%以上为非肾小球性血尿；畸形红细胞》20%、《80%，为混合型血尿。

5.畸形红细胞形态变化与肾小球性血尿

畸形红细胞各种变化形状分为7～8种。肾小球性血尿，绝大多数为畸形红细胞，占80%以上；非肾小球性血尿绝大多数为均一型红细胞，占80%以上；以及以畸形红细胞为主（》50%）的混合型和以均一型红细胞为主（》50%）的混合型。以上畸形红细胞、均一型红细胞和混合型红细胞3型结果均有趋向性，不存在可逆行，当然结合临床症状观察更为客观。

畸形红细胞的形成：一般认为，红细胞通过肾小球基底膜时受损和经肾小球毛细血管壁漏出时受挤压而变形，同时还与尿渗透压、pH等因素有关。因此来自肾脏的红细胞，除外形发生图相变化外，其体积的大小也有显著性差异。采用显微镜观察检查尿内红细胞形态的变化，对诊断肾小球疾病引起的血尿和鉴别诊断是有一定价值和临床意义的。棘形、靶形红细胞的出现更具有临床诊断价值。

2012年医学检验考试质量管理与控制辅导：如何制定允许总误差

（1）Tonks于1963年从理论上研究此问题，提出根据参考值与参考值范围而设定，其公式是：

允许总误差（%）=（1/4）［（参考值上界-参考值下界）/参考值均值］100%

（2）目前国际上常推荐根据生物学变异制定不精密度标准。生物学变异或称生理变异（CVB），包括个体内变异（CVI）和个体间变异（CVG），也就是所说的生理波动。生物学变异可用来导出临床实验室检测项目的不精密度、不准确度和总误差的分析质量。体内和个体间变异分量表达为变异系数（分别为CVI和CVG）

2012医学检验考试质量管理与控制辅导：准确度的总误差概念

测定结果与真值的差异是随机误差（BE）和系统误差（SE）的总和，即总误差（TE）。也可用TE=1.96s+Bias表示（95%允许误差限）。所选用的检测方法的总误差必须在临床可接受的水平范围内（也就是允许总误差，TEa）。

2012年医学检验考试临检基础辅导：精液的精子活动率检测

【正常参考值】正常精子活力一般在Ⅲ级（活动较好，有中速运动，但波形运动的较多）以上，射精后1小时内有Ⅲ级以上活动能力的精于应》0.60.【临床意义】如果0级（死精子，无活动能力，加温后仍不活动）和Ⅰ级（活动不良，精子原地旋转、摆动或抖动，运动迟缓）精子在0.40以上，常为男性不育症的重要原因之一。

2012年医学检验考试临床检验技师综合辅导：酶的作用机理

一、酶作用在于降低反应活化能

在任何化学反应中，反应物分子必须超过一定的能阈，成为活化的状态，才能发生变化，形成产物。这种提高低能分子达到活化状态的能量，称为活化能。催化剂的作用，主要是降低反应所需的活化能，以致相同的能量能使更多的分子活化，从而加速反应的进行。

酶能显著地降低活化能，故能表现为高度的催化效率。例如前述的H2O2酶的例子，可以显著地看出，酶能降低反应活化能，使反应速度增高千百万倍以上。

二、中间复合物学说

目前一般认为，酶催化某一反应时，首先在酶的活性中心与底物结合生成酶－底物复合物，此复合物再进行分解而释放出酶，同时生成一种或数种产物，此过程可用下式表示： ES的形成，改变了原来反应的途径，可使底物的活化能大大降低，从而使反应加速。

三、酶作用高效率的机理

详细机制仍不太清楚，主要有下列四种因素： 1.趋近效应和定向效应

酶可以将它的底物结合在它的活性部位由于化学反应速度与反应物浓度成正比，若在反应系统的某一局部区域，底物浓度增高，则反应速度也随之提高，此外，酶与底物间的靠近具有一定的取向，这样反应物分子才被作用，大大增加了ES复合物进入活化状态的机率。2.张力作用

底物的结合可诱导酶分子构象发生变化，比底物大得多的酶分子的三、四级结构的变化，也可对底物产生张力作用，使底物扭曲，促进ES进入活性状态。

3.酸碱催化作用

酶的活性中心具有某些氨基酸残基的R基团，这些基团往往是良好的质子供体或受体，在水溶液中这些广义的酸性基团或广义的碱性基团对许多化学反应是有力的催化剂。

4.共价催化作用

某些酶能与底物形成极不稳定的、共价结合的ES复合物，这些复合物比无酶存在时更容易进行化学反应。

例如：无酶催化的反应 RX+H2O→ROH+Hx 慢 有酶存在时 RX+E桹H→ROH+EX快 EX+H2O→E桹H+HX快

2012年医学检验考试临床检验技师综合辅导：蛋白质的变性

天然蛋白质的严密结构在某些物理或化学因素作用下，其特定的空间结构被破坏，从而导致理化性质改变和生物学活性的丧失，如酶失去催化活力，激素丧失活性称之为蛋白质的变性作用。变性蛋白质只有空间构象的破坏，一般认为蛋白质变性本质是次级键，二硫键的破坏，并不涉及一级结构的变化。

变性蛋白质和天然蛋白质最明显的区别是溶解度降低，同时蛋白质的粘度增加，结晶性破坏，生物学活性丧失，易被蛋白酶分解。

引起蛋白质变性的原因可分为物理和化学因素两类。物理因素可以是加热、加压、脱水、搅拌、振荡、紫外线照射、超声波的作用等；化学因素有强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二烷基磺酸钠（SDS）等。在临床医学上，变性因素常被应用于消毒及灭菌。反之，注意防止蛋白质变性就能有效地保存蛋白质制剂。

变性并非是不可逆的变化，当变性程度较轻时，如去除变性因素，有的蛋白质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能，变性的可逆变化称为复性。例如，前述的核糖核酸酶中四对二硫键及其氢键。在β巯基乙醇和8M尿素作用下，发生变性，失去生物学活性，变性后如经过透析去除尿素，β-巯基乙醇，并设法使疏基氧化成二硫键，酶蛋白又可恢复其原来的构象，生物学活性也几乎全部恢复，此称变性核糖核酸酶的复性。许多蛋白质变性时被破坏严重，不能恢复，称为不可逆性变性。

2012年医学检验考试血液检验辅导：异型淋巴细胞

在传染性单核增多症、病毒性肺肝炎、流行性出血热等病毒感染或过敏原则刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。Downey将其按形态特征分为三型：

1型（空泡型）：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状、常偏位。染色质粗糙，呈粗网状或小块状，排列不规则。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状。Ⅱ型（幼稚型）：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见1～2个至发生母细胞化的结果。

Ⅲ型（不规则型）：胞体较大，外形常不规则，可有多数足。核形状及结构与1型相同或更不殊途同归，染色质较粗糙致密。胞质量丰富，染色淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深蓝色。可有少数空泡。

2012年医学检验考试生化检验辅导：胎儿血型的预测

羊水中存在ABH（O）血型物质，故可在妊娠期预测胎儿的血型，以便对母体胎儿血型不合者进行围生期监护、治疗和对新生儿的作好抢救准备。

一、ABH分泌型血型的预测

本试验是根据羊中分泌的血型物质可将相应抗血清中抗体中和原理设计的。将羊水与0.2毫升最适稀释度的抗A抗B抗H血清0.2毫升分别混匀，冯分作用10min后，便血型物质将抗体中和完全，再于各管加入相对应的2%标准A型，B型，O型红细胞悬液各0.2ml，充分混匀。置室温30min，低速离心1分钟观察有无凝集。

本试验最关键的部分是要选择好抗血清的最适稀释度。即选择抗血清与2%标准红细胞悬液恰能产生4+凝集的最高稀释度，这样才能在加入羊水后将相应抗体中和掉不再出现4+凝集。通常是将抗血清0.2ml用生理盐水做1：1-1：256倍比稀释后，将2%A，B，O型标准红细胞加入0.2ml混匀，置室温1小时后观察结果，以出现4+凝块的最高稀释度定为最适稀释度。实验中要注意控制温度，以免由于抗血清中冷凝集素未被完全吸收而造成结果判断错误。

二、ABH（O）血型酶的测定

羊水ABH血型物质的测定，无法预测非分泌型胎儿的血型。已知由A基因产生的N-乙酰氨基半乳糖转移酶能将N-乙酰氨基半乳联接在H物质末端的半乳糖上，形成A血型物质，B基因产生的D-半乳糖转移酶将D-半乳糖联接在H物质末端的半乳糖上，形成B血型物质。当有糖供体、二价锰离子与O型红细胞共同孵育时，羊水中的转移酶可在红细胞膜上合亿A或B物质，利用血型测定的方法可检测埋分泌型胎儿的血型。这时有严重ABO同种免疫史的孕妇非分泌型的胎儿血型鉴定提供了可能，也为在位于ABO基因部位的遗传性疾病的产前诊断提供了可能，而可不必考虑胎儿是否为分泌型。

2012年医学检验考试临检基础知识辅导：精液的男性生育力指数测定

【计算公式】

I=M（N×V）/（A×106）式中I为男性生育力指数；M为活动精子百分率；N为每毫升的精子数；V为精子运动的速度；A为畸形精子的百分率。【正常参考值】

正常人生育力指数》1.【临床意义】

1.生育指数为0，表明完全无生育能力。

2.生育指数为0-1之间，表明有不同程度的生育障碍。

2012年医学检验考试血液检验复习辅导：HIV-抗体常见检测方法

目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、病毒培养、核酸检测和抗原检测。其中对病毒抗体的检测是最常规使用的方法，这不但是由于这类检测特异性、敏感性较高，方法相对简便、成熟，更重要的原因是HIV抗体在病毒感染后除早期短暂的“窗口期”外的整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。

在一些特殊情况下，当抗体检测无法满足HIV感染诊断的需要时，病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用，这包括对非典型血清学反应样品的诊断、HIV感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。

2012年医学检验考试血液检验复习辅导：HIV-抗体确认实验

免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEKHIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。国内常用的确认试验方法是WB.（一）免疫印迹实验（WB）

免疫印迹实验是广泛用于许多传染病诊断的实验方法，就HIV的病原学诊断而言，它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法，WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。

确认试验流程：

有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测，如果呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如果呈阳性反应，则报告HIV-1抗体阳性；如果不满足阳性标准，则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验，呈阴性反应，报告HIV-2抗体阴性；呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性，并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析，WB的敏感性一般不低于初筛实验，但它的特异性很高，这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化，能够检测针对不同抗原成分的抗体，因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出，初筛试验尽管选择质量较好的试剂，如第三代ELISA，仍会有假阳性出现，必须通过确认试验才能得出准确结果。

（二）免疫荧光实验（IFA）

IFA法经济、简便、快速，曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜，需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响，结果不宜长期保存，IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

2012年医学检验考试临检基础知识辅导：重视血常规的复检工作

目前血细胞分析仪己经普及到县医院或卫生院，这对提高血细胞常规的准确性和重复性，减轻工作人员劳动强度起促进作用。但是我们应该认识到血细胞分析仪还是一个过筛工具，至今最先进的全自动血细胞分析仪还不能完全取代人工检查，仍然有部分标本需要复检。据我所知有的医院有了血细胞分析仪，把人工操作的工具、试剂全丢弃，基本上不再复检了。有的单位即使复检，也没有复检标准，随心所欲，其复检率只有百分之几，这显然是不负责任的。现就此问题谈谈个人看法。

一、为什么要复检？考试用书 血细胞分析仪测定原理虽有不同，但它的各种项目的阈值是人设定的，而且是固定的，可是病人血细胞变化是千姿百态，有部分细胞难以识别或认错干扰其它细胞计数，如有核红细胞可影响白细胞计数；细胞碎片、血小板聚集可影响血小板计数等。尤其是白细胞形态学分类与血细胞分析仪的白细胞分类有本质上的不同，三分群仅仅是根据细胞大小来分而己，即使先进的五分类也与形态学也有很大差异，又如中性粒细胞毒性病变、变异淋巴细胞、疟原虫等临床需要的指标无法显示；有的幼稚细胞、有核红细胞也不能区分；各参数之间有时还存在互相干扰。总之，血细胞分析仪的结果仅仅是属于过筛而己，不能完全代替人工镜检。

根据1987年我赴日本考察时，日本对三分群仪器白细胞分类是不收费的，而且每一例仍然需要涂片染色，在显微镜下重新分类后才能报告。1989年Coulter公司制定了复检标准，调查了11个床位及性质不同的医疗单位，它们均使用该公司的三分群血细胞分析仪，根据该公司的复检标准，其复检率为15%～60%，平均为40%，使手工分类减少40～85%，平均减少了60%，也就是说用节省下来的时间好好为40%需要分类的病人服务。

最近日本名古屋大学医学部附属医院报告，他们用SysmexXE-2100（五分类）仪器的总复检率为32.3%.再次证明当前最先进血细胞分析仪也不能完全替代人工检查。

由于没有复检而产生的漏检白血病、异常淋巴细胞、疟原虫，还有EDTA依赖性血小板假性降低等己引起的医疗纠纷，应该引起我们深思。

二、复检内涵尚待统一

有人认为“复检”就是要在镜下重新进行白细胞分类计数而己，这是偏面的。复检内涵应包据：

1、对血细胞分析仪测定的全部结果进行评估，必要时包括原标本重查，或重新用人工复查等。因此血常规手工操作不能丢；

2012年医学检验考试临检基础知识辅导：精液检查的具备条件

受检者，经历一段经常排精过程后，禁房事5－7天（上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时）；备大口有盖清洁干燥容器一个，以手淫方式获取精液，一次全部射入容器，盖上盖，记录标本离体时间；贴身保温，30分钟内送到化验室，并向检验员提供标本取出时间。精液常规观察：精液总容量（毫升），精子活动情况，精子密度（个/毫升），精液液化时间（标本取出到精液液化的时间），不动精子（个/高倍视野）等。见不动精子，须染色方可区分：不活动的精子、死精子、未成熟精子等。

找不到精子必须离心后检验，仍然找不到精子；方可报告无精。经三次取样化验，结果仍然找不到精子方可确认无精子症。

2012年医学检验考试免疫检验辅导：血浆的鉴别方法

血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%.血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。

将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。2012年医学检验考试免疫检验辅导：血浆的主要作用

提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。

2012年医学检验考试生化检验辅导：离心技术的工具

离心机（centrifuge）是实施离心技术的装置。离心机的种类很多，按照使用目的，可两类，即制备型离心机和分析型离心机。前者主要用于分离生物材料，每次分离样品的容量比较大，后者则主要用于研究纯品大分子物质，包括某些颗粒体如核蛋白体等物质的性质，每次分析的样品容量很小，根据待测物质在离心场中的行为（可用离心机中的光学系统连续地监测），能推断其纯度、形状和相对分子质量等性质。两类离心机由于用途不同，故其主要结构也有差异。通常所使用的离心机根据转子转速大小的不同可分为普通离心机、高速离心机和超速离心机三类

2012年医学检验考试生化检验辅导：离心技术的概况

离心技术是利用物体高速旋转时产生强大的离心力，使置于旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离之目的。这里的悬浮颗粒往往是指制成悬浮状态的细胞、细胞器、病毒和生物大分子等。离心机转子高速旋转时，当悬浮颗粒密度大于周围介质密度时，颗粒离开轴心方向移动，发生沉降；如果颗粒密度低于周围介质的密度时，则颗粒朝向轴心方向移动而发生漂浮。常用的离心机有多种类型，一般低速离心机的最高转速不超过6000rpm，高速离心机在25000rpm以下，超速离心机的最高速度达30000rpm以上。

根据离心原理，可设计多种离心方法，常见下列三大类型：

1.差速离心法。通过逐步增加相对离心力，使一个非均相混合液内形状不同的大小颗粒分步沉淀。

2.密度梯度离心法。离心前，离心管内先装入分离介质（如蔗糖、甘油等），使形成连续的或不连续的密度梯度介质，然后加入样品进行离心，具体又可分为：

1）速度区带离心法。离心前，离心管内先装入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介质，待分离样品铺在梯度液的顶部，离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心，利用各颗粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度的梯度层内，达到彼此分离的目的。本法可分离各种细胞、病毒、染色体、脂蛋白、DNA和RNA等生物样品。

2）预制梯度等密度离心法。要求在离心前预先配制管底浓而管顶稀的密度梯度介质，常用介质有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分离样品一般铺在梯度液顶上，如需挟在梯度液中间或管底部，则需调节样品液密度。离心后，不同密度的样品颗粒到达与自身密度相等的梯度层，即达到等密度的位置而获得分离。

3）自成梯度等密度离心法。某些密度介质经过离心后会自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺经长时间离心后也可产生稳定的梯度。需要离心分离的样品可和梯度介质先均匀混合，离心开始后，梯度介质由于离心力的作用逐渐形成管底浓而管顶稀的密度梯度，与此同时，可以带动原来混合的样品颗粒也发生重新分布，到达与其自身密度相等的梯度层里，即达到等密度的位置而获得分离。

3.沉降平衡离心法。根据被分离物质的浮力密度差别进行分离，所用的介质起始密度约等于被分离物质的密度，介质在离心过程中形成密度梯度，被分离物质沉降或上浮到达与之密度相等的介质区域中停留并形成区带。

2012年医学检验考试生化检验辅导：离心技术的概况

离心技术是利用物体高速旋转时产生强大的离心力，使置于旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离之目的。这里的悬浮颗粒往往是指制成悬浮状态的细胞、细胞器、病毒和生物大分子等。离心机转子高速旋转时，当悬浮颗粒密度大于周围介质密度时，颗粒离开轴心方向移动，发生沉降；如果颗粒密度低于周围介质的密度时，则颗粒朝向轴心方向移动而发生漂浮。常用的离心机有多种类型，一般低速离心机的最高转速不超过6000rpm，高速离心机在25000rpm以下，超速离心机的最高速度达30000rpm以上。

根据离心原理，可设计多种离心方法，常见下列三大类型：

1.差速离心法。通过逐步增加相对离心力，使一个非均相混合液内形状不同的大小颗粒分步沉淀。

2.密度梯度离心法。离心前，离心管内先装入分离介质（如蔗糖、甘油等），使形成连续的或不连续的密度梯度介质，然后加入样品进行离心，具体又可分为：

1）速度区带离心法。离心前，离心管内先装入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介质，待分离样品铺在梯度液的顶部，离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心，利用各颗粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度的梯度层内，达到彼此分离的目的。本法可分离各种细胞、病毒、染色体、脂蛋白、DNA和RNA等生物样品。

2）预制梯度等密度离心法。要求在离心前预先配制管底浓而管顶稀的密度梯度介质，常用介质有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分离样品一般铺在梯度液顶上，如需挟在梯度液中间或管底部，则需调节样品液密度。离心后，不同密度的样品颗粒到达与自身密度相等的梯度层，即达到等密度的位置而获得分离。

3）自成梯度等密度离心法。某些密度介质经过离心后会自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺经长时间离心后也可产生稳定的梯度。需要离心分离的样品可和梯度介质先均匀混合，离心开始后，梯度介质由于离心力的作用逐渐形成管底浓而管顶稀的密度梯度，与此同时，可以带动原来混合的样品颗粒也发生重新分布，到达与其自身密度相等的梯度层里，即达到等密度的位置而获得分离。

3.沉降平衡离心法。根据被分离物质的浮力密度差别进行分离，所用的介质起始密度约等于被分离物质的密度，介质在离心过程中形成密度梯度，被分离物质沉降或上浮到达与之密度相等的介质区域中停留并形成区带。

2012年医学检验考试生化检验辅导：动脉血气标本采集方法

一、抗凝剂的配制

首先推荐使用市场上有售的专用采血针，愿意自己配制抗凝采血针的用户，可以用0.9%NS50ml+肝素钠针剂2支（12500U）配制成肝素稀释液备用，并做好无菌储藏。每抽血气前，用2ml注射器抽取肝素稀释液2ml，完全湿润整个针管后弃去肝素液，残留在针头及针管头部死腔内的肝素液即可起到抗凝作用。抗凝剂少了会使血液凝集，堵塞血气分析仪的流路系统，抗凝剂多了会影响血气和离子的检测结果，大剂量的抗凝剂会严重使离子钙偏低，误导临床。

二、采血方法的选择

成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首选桡动脉，次选股动脉

小儿：

1、首选用颞浅动脉或头皮小动脉，严格消毒后，用肝素化的5号头皮针连接2ml注射器，待动脉血流至注射器乳头时，立即用小止血钳分别夹住头皮针塑料软管首尾两端（约0.5ml血），然后拔出针头立即混匀送检。

2、用肝素化的注射器穿刺，采血部位首选小儿桡动脉，小婴儿可用颞浅动脉取血，取完血一定要密封。

3、因技术条件限制，不能反复动脉穿刺时，早产儿与小婴儿可在足后跟用肝素化毛细管采取动脉化毛细血管的血亦可。动脉化毛细血管采血，用不超过42～45℃的湿巾热敷采血部位皮肤5～15分钟，使血液增加，血流加速，达到动脉化，然后穿刺，穿刺要深，使血流快速自动流出，弃去第一滴血，不能挤压，用肝素化的毛细管吸取（建议采用厂家配套提供的专用毛细管），吸满后一定要密封，混匀后立即送检。未充分动脉化的毛细管血的PO2偏低，对PH、PCO2和HCO3—的测定结果影响不明显。

三、采血后处理

采血后针尖或毛细吸血管两端立即用橡皮帽或橡皮泥封住，防止空气气泡进入，并立即充分混匀达到抗凝目的，并立即送检，从采血到送检不宜超过20分钟，以免血细胞代谢耗氧，使PO2和PH值下降PCO2升高。若不能立即测定，应将血气标本保存在2～8℃容器内，但即使这样待测时间也不宜超过2小时。

2012年医学检验考试生化检验辅导：VC影响血糖尿糖检测

解放军总医院检验中心主任丛玉隆指出，维生素c（vc）可以还原尿糖检测试剂中的酶，会导致尿糖检测的结果失真，对于糖尿病患者来说，服用维生素要谨慎。

第一次遇到尿糖检测失真是在1984年，丛玉隆还是医院检验科的检验员。一天晚上急诊科一患者化验的结果是血糖8毫克。急诊医生一看检验报告马上产生疑问：怎么会是8毫克？人的正常血糖最低是80毫克，如果真是8毫克，那这个人早就死了。于是检验科再次对病人的血样化验，结果还是8毫克，丛玉隆仔细检查了检验程序和检验设备，都没发现问题，但检验结果确实与病人实际病情不符。丛玉隆再仔细检查后，发现在抽取病人血样时，患者正输着vc，结果终于弄明白了，原来是患者血样中含有的大量vc还原了检验试剂中的酶，干扰了病人的血糖检验结果。

vc的影响到底有多大？丛玉隆再次做了试验，一组人一天吃3片vc（每片100毫克），第二天检测结果是每毫升尿含vc30毫克。一组人一天吃6片vc，第二天尿含vc90毫克。一组人一天吃了9片vc，第二天尿含vc是300毫克。丛玉隆说，假如一个糖尿病人，没吃vc以前的尿糖是2个加号，吃了9片vc后，就可能是1个加号，甚至会出现阴性结果。

丛玉隆进行的另一个实验证实，给健康人静脉推注vc2000毫克，然后在不同时间段取尿，30分钟后尿含vc600多毫克、1小时500多毫克、5小时后含几十毫克（正常值），说明静脉使用大剂量vc对糖尿病人的尿糖检查干扰更大。试验也证明5个小时以后，使用vc的病人每毫升尿含vc几十毫克，已经属于正常值，不再干扰检验结果。

2012年医学检验考试生化检验辅导：血磷测定的参考值

参考值：血清磷：0.81～1.45mmol/L

2012年医学检验考试生化检验辅导：血磷的测定方法

血清无机磷的测定方法一般有磷钼酸法、染料法和酶法。

磷钼酸法是血清中无机磷与钼酸盐结合形成磷钼酸化合物，再用还原剂将其还原成钼蓝进行比色测定。

染料法如孔雀绿直接显色测定法。虽非常敏感，但影响因素多，显色不稳定，重复性也较差，不能用于常规检验。

酶法是一个偶联反应，参与反应的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶及葡萄糖6-磷酸脱氢酶，反应中使NADP+还原成NADPH，形成NADPH在340nm波长下测定其吸光度，该方法不受有机磷酸酯的干扰。

2012年医学检验考试生化检验辅导：火焰分光光度法的仪器

原始的火焰光度计由雾化器、火焰燃烧嘴、滤光片和光电池检测器组成。现代的火焰分光光度计的基本框图（见图）示意出：试样溶液经雾化后喷入火焰，溶剂在火焰中蒸发，盐粒熔融，转化为蒸气，离解成原子（部分电离），再由火焰高温激发发光，发射的光经切光器调制，并由单色器（通常是光栅）分光，选择待测波长谱线，经光电转换和电信号放大后检出。反射镜起聚光作用。

火焰光度法常用的火焰是在大气恒压下经化学反应而燃烧的。不同的燃料气体和助燃气组分，及其配比，称助/燃比，决定该化学火焰能达到的最高温度和化学作用性质（见表）。这是火焰光度法应用中要选择的关键条件。

2012年医学检验考试生化检验辅导：火焰分光光度法的简史

1859年R.W.本生利用本生灯进行焰色反应，就是火焰分光光度法的起源，用此法发现了许多新元素。1928年瑞典植物生理学家H.G.龙德加德用火焰光谱法研究植物新陈代谢作用中微量元素的定量变化，并使用了参考元素技术。由于当时使用照相方法记录谱线，致使准确定量分析工作较为繁琐。1935年制成第一台火焰光谱光电直读光度计，以及后来W.吉尔伯特制作的直接注入式燃烧器的使用，使得火焰光度法应用范围进一步扩大。

2012年医学检验考试生化检验辅导：火焰分光光度法的应用

火焰分光光度法主要用于碱金属和碱土金属元素的定量分析。方法简单迅速，组分影响较小，取样量小，用一份溶液即可进行多种元素分析，每毫升10微克浓度的钠溶液也可测定。此法不仅可作为一个光化学分析方法独立使用，而且可作为一个有特色的光检测器，与气相色谱仪联用，或作为一种试样原子化装置，用于原子吸收光谱法中。

2012年医学检验考试血液检验复习辅导：骨髓标本的采集选择

骨髓标本的采集选择

骨髓标本大部分采用穿刺法吸取。骨髓穿刺部位选择一般要从以下几个方面考虑：①骨髓腔中红骨髓丰富；②穿刺部位应浅表、易定位；③应避开重要脏器。临床上常用的穿刺部位包括胸骨、棘突、髂骨、胫骨等处。髂骨后上棘此处骨皮质薄，骨髓腔大，进针容易，骨髓液丰富，被血液稀释的可能性小，故为临床上首选的穿刺部位。

2012年医学检验考试血液检验复习辅导：骨髓涂片的检查

骨髓涂片的检查

（1）普通光镜低倍镜检验：判断骨髓增生程度；估计巨核细胞系统增生情况；观察涂片边缘、尾部、骨髓小粒周围，有无体积较大或成堆分布的异常细胞。

（2）油镜：选择满意的片膜段，观察200～500个细胞，按细胞的种类、发育阶段分别计算，并计算它们各自的百分率；仔细观察各系统的增生程度和各阶段细胞数量和质量的变化。

2012年医学检验考试血液检验复习辅导：骨髓象的分析与报告

骨髓象的分析与报告

包括骨髓有核细胞增生程度、粒细胞与有核红细胞比例、粒系统细胞改变、红系统细胞改变、巨核系统细胞改变、淋巴系统细胞改变、单核系统细胞改变和其他血细胞改变。

2012年医学检验考试综合知识辅导：均相酶免疫测定

均相酶免疫测定：属于竞争结合分析方法。

①酶增强免疫测定技术（EMIT）：了解其基本原理，反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例，从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。

②克隆酶供体免疫分析：DNA重组技术可分别合成某种功能酶（如β-D半乳糖苷酶）分子的两个片段，大片段称为酶受体（EA），小分子称作酶供体（ED），两者单独均无酶活性，一定条件下结合形成四聚体方具酶活性。

2012年医学检验考试综合知识辅导：异相酶免疫测定

异相酶免疫测定：又分为液相和固相酶免疫测定。

①液相酶免疫测定：其测定灵敏度与放射免疫方法相近，近年有取代放射免疫方法的趋势。②固相酶免疫测定：如常用的酶联免疫吸附试验（ELISA）

2012年医学检验考试生化检验辅导：肝硬化的临床意义

肝硬化代偿期患者血清ALT可轻度增高或正常，失代偿期ALT可持续升高。胆汁淤积性肝硬化ALT活性较高可与黄疸平行，AST升高不及ALT显著。肝硬化病变累及线粒体时，多数AST升高程度超过ALT。

2012年医学检验基础知识辅导：尿的方法学评价

尿色和透明度判断，受主观因素影响。尿透明度还易受某些盐类结晶的影响。临床应用仅作参考

2012年医学检验基础知识辅导：尿的质量控制

1.使用新鲜尿尿放置时间过长，盐类结晶析出、尿胆原转变为尿胆素、细菌增殖和腐败、尿素分解，均可使尿颜色加深、混浊度增高。2.防止污染。

2012年医学检验基础知识辅导：尿的生理性变化

（1）代谢产物：生理性影响尿颜色主要是尿色素、尿胆素（URB）、尿胆原（URO）等。

（2）饮水及尿量：大量饮水、尿量多则尿色淡；尿色深见于尿量少、饮水少或运动、出汗、水分丢失。

（3）药物的影响：如服用核黄素、呋喃唑酮、痢特灵、黄连素、牛黄、阿的平使尿呈黄色或深黄色；番泻叶、山道年等使尿呈橙色或橙黄色；酚红、番泻叶、芦荟、氨基匹林、磺胺药等使尿呈红色或红褐色。

（4）盐类结晶及酸碱度：生理性尿混浊的主要原因是含有较多的盐类，常见有：①尿酸盐结晶：在浓缩的酸性尿遇冷时，可有淡红色结晶析出。②磷酸盐或碳酸盐结晶：尿呈碱性或中性时，可析出灰白色结晶。

2012年医学检验免疫检验考试辅导：肿瘤坏死因子的生物效应

肿瘤坏死因子的生物效应：TNF对多种肿瘤细胞均有杀伤或抑制作用，敏感性因肿瘤细胞类型而异；TNF呈剂量依赖性地抑制病毒介导的细胞病变的发展，对RNA病毒和DNA病毒均有抑制作用；TNF能够增强T细胞产生以IL-2为主的淋巴因子，提高IL-2R的表达水平，促进T细胞增殖；还能促进B细胞增殖、分化和产生抗体；TNF有中性粒细胞和单核细胞趋化作用，并使之活化和脱颗粒，释放炎症介质；TNF可刺激成骨细胞内的碱性磷酸酶活性，诱导成骨细胞吸收骨质、使软骨细胞进行软骨更新，抑制软骨形成。

2012年医学检验免疫检验考试辅导：肿瘤坏死因子的应用研究

肿瘤坏死因子的应用研究：由于TNF的抗肿瘤和免疫调节功能，TNF疗法的研究已被许多国家开展。动物实验和临床经验表明，TNF对某些肿瘤具有明显的抑制作用，但副作用大，建立合理的用药方案及治疗措施，可望降低用量，减轻副作用，达到最佳治疗效果。

2012年医学检验血液检验辅导：红细胞镰变试验

（1）原理：在低氧分压条件下，HbS转变为还原状态后溶解度降低，从而聚合成短棒状凝胶使红细胞变形，呈镰刀状。

结果：阴性，无镰变细胞。

（2）临床意义：阳性见于镰状细胞贫血（HbS病），HbBart、HbI病可见少量镰状细胞。

2012年医学检验知识辅导：埃希菌属的常规检验项目

CDC将大肠埃希氏菌O157：H7列为常规检测项目

EHEC的血清型》50种，最具代表性的是O157：H7.在北美许多地区，O157：H7占肠道分离病原菌的第二或第三位，是从血便中分离到的最常见的病原菌，分离率占血便的40%，6、7、8三个月O157：H7感染的发生率最高。且0157是4岁以下儿童急性肾功衰的主要病原菌，所以CDC提出应将大肠埃希氏菌0157：H7列为常规检测项目。

2012年医学检验知识辅导：埃希菌属的肠道感染

埃希菌属的肠道感染：致病性大肠埃希菌有下列五个病原群。（1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水泻）。（2）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。（3）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起志贺样腹泻（粘液脓血便）。（4）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。（5）肠粘附（集聚）型大肠埃希菌（EAggEC）：也是新近报道的一种能引起腹泻的大肠埃希菌。

2012年医学检验临床检验技师考试综合辅导资料：埃希菌属的概念

埃希菌属包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。

大肠埃希菌俗称大肠杆菌，大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群。

2012年医学检验临床检验技师考试综合辅导资料：肠杆菌科的鉴定

（1）初步鉴定：原则是：①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。

将选择培养基或鉴别培养基上的可疑菌落分别接种克氏双糖铁琼脂（KIA）和尿素-靛基质-动力（MIU）复合培养基管中，并根据其六项反应结果，将细菌初步定属。

（2）最后鉴定：肠杆菌科各属细菌的最后鉴定是根据生化反应的结果定属、种，或再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。

2012年医学检验免疫检验考试辅导：细胞因子的类型

细胞因子分类按其作用大致可分为免疫调节因子和免疫调控因子两大类。主要的细胞因子有：白细胞介素、干扰素、生长因子、趋化因子家族、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、转化因子家族以及其他细胞因子等。

2012年医学检验免疫检验考试辅导：细胞因子共同特性

（1）化学性质大都为糖蛋白。

（2）细胞因子可以旁分泌、自分泌或内分泌的方式发挥作用。

（3）一种细胞可产生多种细胞因子，不同类型的细胞可产生一种或几种相同的细胞因子。

2012年医学检验血液检验复习指导：血象特点

血液检验复习指导血象：血红蛋白、红细胞均减少，以血红蛋白减少更为明显。轻度贫血时红细胞形态无明显异常，中度以上贫血时红细胞体积减小，中心淡染区扩大，严重时红细胞可呈环状，并有嗜多色性红细胞及点彩红细胞增多。网织红细胞轻度增多或正常。白细胞计数及分类一般正常。血小板计数一般正常。

2012年医学检验免疫检验考试辅导：单向扩散试验

单向扩散试验：琼脂内混入抗体，待测抗原从局部向琼脂内自由扩散，如抗原和相应抗体结合，则形成沉淀环。

1、试管法：将一定量的抗体混入0.7%琼脂糖溶液中，注入小试管内，上层加抗原溶液使待测抗原在凝胶中自由扩散，在抗原抗体比例恰当位置形成沉淀环。

2、平板法：是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖内，未凝固前倾注成平板，然后在上打孔，将抗原加入孔中，放37℃让其自由扩散，24～48h后可见孔周围出现沉淀环，测定环的直径或面积计算标本中待测抗原的浓度。有两种计算方法：l）Mancini曲线：适用大分子抗原的和长时间扩散（》48h）的结果，沉淀环直径的平方与抗原浓度呈线性关系c/d2=k.（其中c为抗原浓度 d为沉淀环直径 k为常数）

3、单向扩散试验检测时的注意点：

（1）抗血清必须特异性强、效价高、亲和力强，在良好条件下保存。（2）每次测定都必须作标准曲线。

（3）每次测定时必须用质控血清作质控。

（4）注意双环现象（出现了两种抗原性相同成分）。

（5）应用单克隆抗体测量多态性抗原时，测定值偏低；用多克隆抗体测量单克隆病时，测定值偏高

2012年医学检验免疫检验考试辅导：双向扩散试验

双向扩散试验：在琼脂内抗原和抗体各自向对方扩散，在最恰当的比例处形成抗原抗体沉淀线，根据沉淀线的位置、形状以及对比关系，可对抗原或抗体作出定性分析。双向扩散试验也分为试管法和平板法。

1、试管法：在含有抗原的溶液和含有抗体琼脂中间，加一层普通琼脂，让下层抗体和上层抗原向中间自由扩散，在抗原、抗体浓度最适时形成沉淀线。

2、平板法：

是在琼脂板上相距3～5mm打一对孔，或者梅花孔、双排孔、三角孔等。在相应孔中加入抗原或抗体，待其自由扩散后，抗原、抗体形成可见的沉淀线。根据沉淀线的位置可作如下分析：①抗原、抗体是否存在及其相对含量。一般沉淀线靠近抗原孔，提示抗体量大，沉淀线靠近抗体孔，提示抗原量大。

②抗原、抗体相对分子量的分析；抗原或抗体在琼脂内自由扩散，其速度受分子量影响。分子量小者，扩散快，反之较慢。由于慢者扩散圈小，局部浓度较大，形成沉淀线弯向分子量大的一方。如若两者分子量相等，则形成直线。

③抗原性质的分析，受检的抗原性质可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分别出现完全融合、部分融合、不融合三种情况；

④抗体效价的滴定。抗体效价是抗原、抗体经过自由扩散形成沉淀线，出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。

2012年医学检验血液检验复习指导：酸化甘油溶血试验

（1）原理：当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间（AGLT50）明显缩短。

参考值：AGLT50大于l800s（30min）

（2）临床意义：减少见于遗传性球形细胞增多症（25～150s）、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶贫和妊娠妇女。

2012年医学检验血液检验复习指导：红细胞膜的结构与功能

1.红细胞膜的组成与结构：红细胞膜含脂类40%，蛋白质50%，碳水化合物10%.膜的主要蛋白有主体蛋白和外周蛋白。后者包括收缩蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和区带（4.1～4.5）等，即骨架系统，起支架作用，对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。膜的主要脂类为磷脂和胆固醇，起屏障和保持内环境稳定性作用。

2.红细胞膜的功能：屏障作用和可变性；半透性；免疫性；受体特性：激素类受体、递质类受体、丙种球蛋白受体、病毒受体、EP0受体和铁蛋白受体等。

3.影响红细胞膜稳定的因索：红细胞能量代谢紊乱；红细胞膜有遗传性缺陷；酶缺陷。

2012年医学检验血液检验辅导：血红蛋白病的定义与分类

血红蛋白病的定义与分类：血红蛋白病是一组由于生成血红蛋白的珠蛋白肽链（α、β、γ、δ）的结构异常或合成肽链速率的改变，而引起血红蛋白功能异常所致的疾病。血红蛋白病多为遗传性，如：因控制遗传的珠蛋白基因发生突变所致的结构性血红蛋白病；因指导珠蛋白合成速率的遗传基因缺陷所致的珠蛋白生成障碍性贫血或称海洋性贫血。另外，也可见获得性血红蛋白病。通常是由接触或误服化学药物所致。

常见的结构性血红蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改变而引起血红蛋白功能或理、化性质异常的疾病，如：引起血红蛋白异常聚合的HbS病；不稳定血红蛋白症、高铁血红蛋白血症等。常见的珠蛋白生成障碍性贫血为α或β珠蛋白生成障碍性贫血。也有多种基因异常导致的血红蛋白病，如HbE、Hb Constant Spring、Hb Lepore等。

2012年医学检验临床检验技师辅导：溶血空斑形成试验

溶血空斑形成试验：经典的溶血斑试验用于检测实验动物抗体形成细胞的功能，其原理是将绵羊红细胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾细胞，加入SRBC及补体，混合在温热的琼脂溶液中，浇在平皿内或玻片上，使成一蒲层，置37℃温育。由于脾细胞内的抗体生成细胞可释放抗SRBC抗体，使其周围的SRBC致敏，在补体参与下导致SRBC溶血，形成一个肉眼可见的圆形透明溶血区而成为溶血空斑（plaque）。

每一个空斑表示一个抗体形成细胞，空斑大小表示抗体生成细胞产生抗体的多少。这种直接法所测的细胞为IgM生成细胞，其他类型Ig由于溶血效应较低，不能直接检测，可用间接检测法，即在小鼠脾细胞和SRBC混合时，再加抗鼠Ig抗体（如兔抗鼠Ig），使抗体生成细胞所产生的IgG或IgA与抗Ig抗体结合成复合物，此时能活化补体导致溶血，称间接空斑试验。但是上述直接和间接空斑形成试验都只能检测抗红细胞抗体的产生细胞，而且需要事先免疫，难以检测人类的抗体产生情况。如果用一定方法将SRBC用其它抗原包被，则可检查与该抗原相应的抗体产生细胞，这种非红细胞抗体溶血空斑试验称为空斑形成试验，它的应用范围较大。

现在常用的为SPA-SRBC溶血空斑试验。SBA能与人及多数哺乳动物IgG的Fc段呈非特异性结合，利用这一特征，首先将SPA包被SRBC，然后进行溶血空斑测定，可提高敏感度和应用范围。在该测试系统中，加入抗人Ig抗体，可与受检细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物，复合物上的Fc段可与连接在SRBC上的SPA结合，同时激活补体，使SRBC溶解形成空斑。此法可用于检测人类外周血中的IgG产生细胞，与抗体的特异性无关。用抗IgA、IgG或IgM抗体包被SRBC，可测定相应免疫球蛋白的产生细胞，这种试验称为反相空斑形成试验。

2012年医学检验临床检验技师辅导：淋巴细胞分离

1.纯淋巴细胞群的采集：利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，从单个核细胞悬液中除去单核细胞，从而获得纯淋巴细胞群。主要的方法有：①粘附贴壁法；②吸附柱过滤法；③磁铁吸引法。

2.淋巴细胞亚群的分离原则：根据相应细胞的特性和不同的标志加以选择性纯化。根据细胞的特性和标志选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法，而选择性去除不要的细胞，仅留下所需的细胞为阴性选择。常用的方法包括：①E花环沉降法；②尼龙毛柱分离法；③亲和板结合分离法；④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。

2012年医学检验生化检验辅导：锌的生理功能

（1）锌可以作为多种酶的功能成分或激活剂；

（2）促进生长发育，促进核酸及蛋白质的生物合成；（3）增强免疫及吞噬细胞的功能；（4）有抗氧化、抗衰老、抗癌的作用。

2012年医学检验生化检验辅导：锌的吸收排泄

锌在小肠上皮细胞内吸收，运送至肝和全身。从粪便、尿、汗、头发、及乳汁排泄。可以测定血锌或发锌判断体内含锌情况。

2012年医学检验生化检验辅导：锌的含量分布

锌是体内含量仅次于铁的微量元素。锌在在正常成人体内含量为2～2.5g，男性略高于女性，视网膜、前列腺、胰腺浓度最高；肌肉内储锌占全身锌的62%，骨占28%。血锌：80%存在于红细胞，约18%的锌分布于血浆。

2012年医学检验技师临检基础知识讲解：输血传播性疾病的概述

常见的有：乙型、丙型肝炎，艾滋病，巨细胞病毒感染，梅毒，疟疾，弓形体病等。献血者有EB病毒感染，黑热病、丝虫病、回归热感染时，均有可能通过输血传播。此外，如血液被细菌污染，可使受血者由此引起菌血症，严重者可致败血症。在由输血引起的疾病中，以肝炎和艾滋病危害性最大。

2012年医学检验技师临检基础知识讲解：常见输血的不良反应

1.免疫性

溶血反应、非溶血性发热反应、过敏反应、荨麻疹、非心源性肺水肿、移植物抗宿主病、输血后紫癜、对红细胞、白细胞、血小板或血浆蛋白的同种（异体）免疫等。

2.非免疫性

高热（有休克）、充血性心力衰竭、理化性溶血、空气栓塞、出血倾向、枸橼酸钠中毒、钾中毒、血液酸化、高血氨、含铁血黄素沉着症、血栓性静脉炎、疾病传播（乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒、疟疾，巨细胞病毒感染等）。

2012医学检验临床检验技师辅导：淋病奈瑟菌的临床意义

临床意义：淋病奈瑟菌是常见的性传播疾病淋病的病原菌，主要通过性接触直接侵袭感染泌尿生殖道，口咽部及肛门直肠的黏膜。如单纯性淋病、盆腔炎、淋菌型结膜炎。

2012年医学检验临床检验技师辅导：淋病奈瑟菌的生物学特性

（1）形态与染色：本菌的形态与脑膜炎奈瑟菌很相似。在脓汁标本中，此菌通常位于中性粒细胞内，而在慢性淋病时常位于细胞外。从患者体内新分离的菌株可有荚膜和菌毛，经人工培养后，呈卵圆形或球形，排列不规则。无芽胞和鞭毛。

（2）培养特性：营养要求较高，须在含有血液、血清或多种氨基酸和无机盐类物质的培养基上生长良好。国内常用血液琼脂、巧克力琼脂、EPV琼脂等培养基。初次分离时，须置5%～10à2条件下才能生长。

（3）生化反应：可发酵葡萄糖、产酸，但不酵解麦芽糖（常借此与脑膜炎奈瑟菌相鉴别）。氧化酶和触酶试验均阳性。主要有三种抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。对外界抵抗力极低。

2012年临床医学检验技师免疫检验考试辅导：淋巴细胞保存与活力的测定

1.淋巴细胞的保存技术

（1）短期保存技术：将分离的细胞用适量含10%～20%灭活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMIl640或其他培养液稀释重悬。短期保存可置于4℃保存。

（2）长期保存技术：液氮深低温（-196℃）环境保存细胞，加入二甲亚砜作为保护剂。

2.活力测定：最简便常用的为台盼蓝染色法。台盼蓝又称锥蓝，是一种阴离子型染料，这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色，通过死亡细胞与活细胞的百分比可反映细胞活力。

2012年临床医学检验技师生化检验辅导：治疗药物监测

治疗药物监测（TDM）是指应用一定的分析技术测定体液中药物的浓度，以药代动力学理论为基础和电子计算机为计算工具，研究药物在体内的过程，使临床给药个体化，科学化、合理化。

无论是药物的治疗作用还是不良反应，从本质上说都是通过药物和靶位受体间的相互作用而产生的。当药物在体内达到分布平衡后，虽然血液和靶位的药物浓度往往并不相等，但血药浓度与药物效应间存在相关性。故检测相对易采集的血药浓度，替代心、脑、肾等难以取样的靶位药物浓度的可行性基础

2012年医学检验技师辅导：水与钠的代谢紊乱

水与钠的代谢紊乱：等渗性缺水，低渗性缺水，高渗性缺水，水过多。

一、等渗性缺水

又称急性缺水或混合性缺水，是外科病人最易发生的。水和钠成比例的丧失，血清钠仍在正常的沲围，细胞外液渗透压也保持正常。

（—）病因：常见的有：①消化液的急性丧失如大量呕吐和肠瘘等；②体液丧失在感染区或软组织内如腹腔内或腹膜后感染、肠梗阻和烧伤等。

（二）临床表现：少尿、畏食、恶心、乏力、舌干燥、眼窝下陷、皮肤干燥、松弛，但不口渴。当丧失体液达体重的5%（相当于丧失细胞外液20%）时，出现血容量不足症状；当丧失体液达体重的6%～7%时，可出现严重休克，当体液的丧失主要是胃液时，可伴发代谢性碱中毒征象。

（三）诊断：主要依据病史和临床表现进行诊断。实验室检查有血液浓缩表现，尿比重增高，但血Na+和Cl-浓度仍在正常范围内。

（四）治疗 在积极治疗原发病的同时，应给予等渗盐水，并注意补充血容量（包括晶体和胶体）纠正体克。可根据临床表现估计补液量，也可根据血细胞比容（hct，正常值：男0.48，女0.42）来计箅。

补液量（l）=hct上升值/hct正常值×体重（kg）×0.2

二、低渗性缺水

（一）病因：①胃肠道消化液持续丧失，②大创面慢性渗液；③肾排钠过多。

（二）临床表现：常见症状若头晕、视光模糊、软弱无力、脉纳速，甚至神志不清，肌痉挛性疼痛、腱反射减弱、昏迷等。

1、轻度缺钠：乏力、头晕、手足麻木、口渴不明显。

2、中度缺钠：除上述症状外，尚有恶心、呕吐、脉细速、血压不稳或下降、浅静脉萎陷。

3、重度缺钠：病人神志不清、肌痉挛性抽搐、腱反射减弱或消失，出现木僵，甚至昏迷。常发生休克。

（三）诊断：①依据病史及表现；②尿Na+和Cl-下明显减少；③血清钠低于135mmol/L；④红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤尿比重常在1.010以下。

（四）治疗：①积极处理病因；②采用含盐溶液或高渗盐水静脉输注。

三、高渗性缺水

（-）病因：①摄人水不足，如食管癌吞咽困难，病危病人给水不足等；②水分丧失过多，如高热大汗、烧伤暴露疗法、糖尿病昏迷等。

（二）临床表现

1、轻度缺水 除口渴外，无其他症状，缺水量为体重的2%～4%.2、中度缺水 极度口渴、乏力、尿少、尿比重高；唇干舌燥、皮肤弹性差、眼窝下陷，常出现烦躁。缺水量为体重的4%～6%.3、重度缺水 除上述症状外，出现躁狂、幻觉、谵妄、甚至昏迷。缺水量超过体重的6%.（三）诊断：①依据病史及表现；②尿比重增高；③血清钠在150mmol/l以上；④红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容轻度增高。

（四）治疗：①尽早去除病因；②补充水分，不能经口补充者，可以经静脉滴注5%葡萄糖溶液或0.45%氯化钠溶液；③因血液浓缩，体内总钠量仍有减少，故补水的同时应适当的补充钠盐；④尿量达40ml/h后应补充钾盐；⑤经补液后酸中毒仍未能完全纠正者，应给碳酸氢钠。

四、水过多（—）临床表现

1、急性水中毒：脑细胞肿胀或脑组织水肿致以颅内压增高，引起各种神经精神症状：头晕、失语、精神错乱、定向力失常、嗜睡、躁动、惊厥、谵妄、甚至昏迷。有时可发生脑疝。

2、慢性水中毒：软弱乏力、恶心、呕吐、嗜睡等，但往往被原有疾病所掩盖。病人体重明显增加，皮肤苍白而湿润。有时唾液及泪液增多，一般无凹陷性水肿。

（二）诊断：红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容和血浆蛋白量均降低；血浆渗透压降低。

（三）治疗：预防重于治疗。对容易发生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、创伤和大手术者以及急性肾功能不全和慢性心功能不全的病人，应严格限制人水量。对水中毒病人，应立即停止水分的摄人；程度严重者，除禁水外，用利尿剂，一般用渗透性利尿剂（甘露醇或山梨醇）静脉快速滴注，也可静脉注射袢利尿剂（速尿和利尿酸），尚可静脉滴注5%氯化钠溶液。

医学检验临床检验技师辅导：铁染色与代谢的检查特点

铁染色显示细胞外铁增多，铁粒幼细胞百分数增加、铁颗粒增多变粗；如幼红细胞铁颗粒在6个以上（正常少于4个），围绕并靠近核排列成环状或半环称此为环形铁粒幼细胞，占幼红细胞15%以上，为本病特征和重要诊断依据。

医学检验临床检验技师辅导：T细胞表面标志检测

1.特异性抗原检测：用单克隆抗体检测T细胞表面抗原的方法有两大类：一类是用标记抗体染色，如免疫荧光法、酶免疫法、ABC法及免疫金银染色法；另一类用抗体致敏的红细胞作花环试验。

2.特异性受体的检测原理：T细胞表面有特异性绵羊红细胞（E）受体，当人的T细胞与绵羊红细胞悬液按一定比例混合后，置4℃至少2小时或过夜，T细胞表面的E受体可与绵羊红细胞结合形成玫瑰花样的花环，称为活性E（Ea）花环。检测Ea花环形成细胞可反映受检者的细胞免疫水平。

3.T细胞亚群检测：见第二十二章流式细胞仪分析技术。

医学检验临床检验技师辅导：B细胞表面标志检测

B细胞具有多种特异性抗原和受体，据此建立了相应的检测方法，一般用以研究B细胞各分化发育阶段的特性，也可藉以鉴定和计数各阶段B细胞在人外周血和淋巴样组织的分布以及疾病时的变化动态，为临床提供诊治相关疾病的有用信息。

1.B细胞表面抗原的检测：B细胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B细胞所共有，而有些仅活化B细胞所特有，据此可用相应的CD系列单克隆抗体，通过间接荧光免疫法、酶免疫组化或ABC法加以检测。

2.SmIg的检测：大多采用间接荧光免疫法或包括ABC法在内的酶免疫组化法，关键是选用高效价、高特异性和高亲和力的荧光或酶标记的多价抗人Ig抗体，也可分别用各种类型的Ig，即IgM、IgG、IgA、IgE等抗血清，检测带有各种类型Ig的B细胞，在人外周血中以带有SmIgM的细胞数为最多。B细胞经荧光标记的抗Ig抗体染色，细胞膜表面呈现的荧光着色可有不同的形式，开始均匀分布呈环状，其后集中在某些部位呈斑点状，然后又可集在一个部位呈帽状，最后可被吞饮入胞浆直至荧光消失。这一现象是由于淋巴细胞膜由双层类脂组成，上嵌有蛋白分子，在体温条件下，膜呈半液体状，而镶嵌物能在其中移动。当SmIg抗体发生结合时，由于抗血清为双价，使SmIg出现交联现象，这种抗原与抗体结合物可连成斑点和帽状，时间过长，帽状结合物可脱落或被吞饮而消失，因此染色后，观察时间不能超过30min，或在染色时加叠氮钠防止帽状物形成或被吞饮。

2012年医学检验技师辅导：水与钠的代谢紊乱

一、等渗性缺水

又称急性缺水或混合性缺水，是外科病人最易发生的。水和钠成比例的丧失，血清钠仍在正常的沲围，细胞外液渗透压也保持正常。

（—）病因：常见的有：①消化液的急性丧失如大量呕吐和肠瘘等；②体液丧失在感染区或软组织内如腹腔内或腹膜后感染、肠梗阻和烧伤等。

（二）临床表现：少尿、畏食、恶心、乏力、舌干燥、眼窝下陷、皮肤干燥、松弛，但不口渴。当丧失体液达体重的5%（相当于丧失细胞外液20%）时，出现血容量不足症状；当丧失体液达体重的6%～7%时，可出现严重休克，当体液的丧失主要是胃液时，可伴发代谢性碱中毒征象。

（三）诊断：主要依据病史和临床表现进行诊断。实验室检查有血液浓缩表现，尿比重增高，但血Na+和Cl-浓度仍在正常范围内。

（四）治疗 在积极治疗原发病的同时，应给予等渗盐水，并注意补充血容量（包括晶体和胶体）纠正体克。可根据临床表现估计补液量，也可根据血细胞比容（hct，正常值：男0.48，女0.42）来计箅。

补液量（l）=hct上升值/hct正常值×体重（kg）×0.2

二、低渗性缺水

（一）病因：①胃肠道消化液持续丧失，②大创面慢性渗液；③肾排钠过多。

（二）临床表现：常见症状若头晕、视光模糊、软弱无力、脉纳速，甚至神志不清，肌痉挛性疼痛、腱反射减弱、昏迷等。

1、轻度缺钠：乏力、头晕、手足麻木、口渴不明显。

2、中度缺钠：除上述症状外，尚有恶心、呕吐、脉细速、血压不稳或下降、浅静脉萎陷。

3、重度缺钠：病人神志不清、肌痉挛性抽搐、腱反射减弱或消失，出现木僵，甚至昏迷。常发生休克。

（三）诊断：①依据病史及表现；②尿Na+和Cl-下明显减少；③血清钠低于135mmol/L；④红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤尿比重常在1.010以下。

（四）治疗：①积极处理病因；②采用含盐溶液或高渗盐水静脉输注。

三、高渗性缺水

（-）病因：①摄人水不足，如食管癌吞咽困难，病危病人给水不足等；②水分丧失过多，如高热大汗、烧伤暴露疗法、糖尿病昏迷等。

（二）临床表现

1、轻度缺水 除口渴外，无其他症状，缺水量为体重的2%～4%.2、中度缺水 极度口渴、乏力、尿少、尿比重高；唇干舌燥、皮肤弹性差、眼窝下陷，常出现烦躁。缺水量为体重的4%～6%.3、重度缺水 除上述症状外，出现躁狂、幻觉、谵妄、甚至昏迷。缺水量超过体重的6%.（三）诊断：①依据病史及表现；②尿比重增高；③血清钠在150mmol/l以上；④红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容轻度增高。

（四）治疗：①尽早去除病因；②补充水分，不能经口补充者，可以经静脉滴注5%葡萄糖溶液或0.45%氯化钠溶液；③因血液浓缩，体内总钠量仍有减少，故补水的同时应适当的补充钠盐；④尿量达40ml/h后应补充钾盐；⑤经补液后酸中毒仍未能完全纠正者，应给碳酸氢钠。

四、水过多（—）临床表现

1、急性水中毒：脑细胞肿胀或脑组织水肿致以颅内压增高，引起各种神经精神症状：头晕、失语、精神错乱、定向力失常、嗜睡、躁动、惊厥、谵妄、甚至昏迷。有时可发生脑疝。

2、慢性水中毒：软弱乏力、恶心、呕吐、嗜睡等，但往往被原有疾病所掩盖。病人体重明显增加，皮肤苍白而湿润。有时唾液及泪液增多，一般无凹陷性水肿。

（二）诊断：红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容和血浆蛋白量均降低；血浆渗透压降低。

（三）治疗：预防重于治疗。对容易发生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、创伤和大手术者以及急性肾功能不全和慢性心功能不全的病人，应严格限制人水量。对水中毒病人，应立即停止水分的摄人；程度严重者，除禁水外，用利尿剂，一般用渗透性利尿剂（甘露醇或山梨醇）静脉快速滴注，也可静脉注射袢利尿剂（速尿和利尿酸），尚可静脉滴注5%氯化钠溶液。

2012年医学检验技师辅导：再生障碍性贫血诊断

（1）概念：是由多种原因致造血干细胞减少或功能异常，从而引起红细胞、中性粒细胞、血小板减少的一种获得性疾病。表现为贫血、感染和出血。与造血干细胞受损、造血微环境损伤及免疫介导有关。

（2）血象与骨髓象特点：呈正细胞正色素性贫血，可有小细胞增多。网织红细胞极低，血小板计数早期减少。骨髓各穿刺部位大多增生不良，白细胞常低于2×109/L，粒细胞显著减少，多为淋巴细胞，骨髓巨核细胞减少。骨髓活检对再障的诊断具有十分重要价值。

（3）再生障碍性贫血的诊断标准：①全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少；②一般无肝、脾肿大；③骨髓至少1个部位增生减低或重度减低，骨髓小粒非造血细胞增多；④能引起全血细胞减少的其他疾病，如阵发性睡眠性血红蛋白尿症、骨髓增生异常综合征中的难治性贫血等；⑤一般抗贫血药物治疗无效„„

2012年医学检验技师辅导：胆碱酯酶肝病的检测意义

人体组织中有两种胆碱酯酶，一种是分布在红细胞和神经组织中的乙酰胆碱酯酶（又称真性胆碱酯酶）；另一种是广泛分布于血浆及许多非神经组织中的假性胆碱酯酶（非特异性胆碱酯酶），我们一般称假性胆碱酯酶（CHE）。CHE是一种生物酶，具有降解胆碱酯并在自主神经系统和肌肉运动系统中起神经传递的功能，它存在于血清、肝、大脑、肾、肠及胰中，对其检测常被用于有机磷中毒患者的辅助诊断。由于CHE是由肝脏生成后分泌入血的，所以它还能反映肝实质细胞损害的程度。因此，胆碱酯酶是一项具有重要临床意义的的肝功能检测指标。

1、急性肝炎 此组患者的ALT均》200U/L，血清CHE降低者有17例，占的比例是65%，比有关文献报道的比例高，我们可以将CHE的测定作为一项急性肝炎有价值的辅助酶学指标。

2、肝硬化 此组患者肝脏的功能性细胞减少，使蛋白质合成降低，故其CHE均降低。值得注意的是部分肝硬化病例的ALT等一般肝功能指征不高或无明显异常，而CHE明显降低，提示CHE对肝硬化的诊断和病情观察是一项有特色的指征之一。

3、肝癌 本组患者的CHE明显降低，其下降幅度与肝细胞损害程度呈正相关，而ALT的升高与肝组织病理无固定关系。

4、大三阳与小三阳 临床上大、小三阳患者区别在于病毒的复制不同。大三阳患者血清中能同时检测出HBsAg、HBeAg、抗HBC，提示急慢性的HBV感染，而且有病毒复制；小三阳患者血清中能检测出HBsAg、抗HBe、抗HBC，提示HBV在肝细胞内复制极低或停止。CHE在大三阳组的32例中有4例降低，约占13%，在小三阳组的38例中只有2例降低，因此，我们认为临床上区别大、小三阳患者，不能预示其肝脏功能改变的程度。

CHE在肝脏受损时活力下降，是肝脏病变后唯一下降的酶，特别是蛋白质合成受损时的肝病，其降低幅度与血清白蛋白大致平行。因此，CHE在肝病的诊断及治疗中是一项很有价值的检测指标。

2011年医学检验辅导之血象与骨髓象特点

血象与骨髓象特点是检验技师要求掌握的内容，医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。①血象：为正细胞低色素性贫血，血片上细胞呈两种红细胞并存的“双形性”，这是本病的特征之一。点彩红细胞可增多。获得性原发性者可出现中性粒细胞颗粒减少、Pelger样核异常和少量幼稚粒细胞。

②骨髓象：红细胞系明显增生，以中幼红细胞为主，有的细胞呈巨幼样改变、双核或核固缩，胞浆常缺少血红蛋白或有空泡。

收集细菌培养标本首先应注意无菌的原则，其次还应注意：

（1）细菌培养标本应在抗生素治疗前收集，并及时送检。

（2）血培养成人抽血5～10ml，儿童3～5ml，注入规定培养瓶。

（3）尿标本收集前应清洁外阴部，留中段尿2～3ml于无菌小瓶中。

（4）胸腹水、脓、分泌物应收集于无菌小瓶或无菌试管内。

（5）厌氧培养的标本应避免与氧接触，并及时送检。

1.血象：血液呈暗紫色，红细胞数增多（[7.0～10.0）×1012/L]，血红蛋白增高（180g～240g/L），红细胞比容增高（0.54～0.80），网织红细胞百分率不增多。红细胞形态正常，可轻度大小不均，嗜多色和嗜碱点彩红细胞增多，偶见有核红细胞。白细胞数增高（12～15）×109/L，少数患者可达50×109/L.分类以中性粒细胞为主，核左移，嗜酸及嗜碱性粒细胞稍多，血片可见中幼粒及晚幼粒细胞。血小板增高，可达（400～500）×109/L.中性粒细胞碱性磷酸酶增高。

2.骨髓象：偶有“干抽”现象，髓液为深红色，有核细胞增生明显活跃，三系均增生，以红系增生为显著。巨核细胞增多，可成堆出现。各系各阶段比值及形态大致正常。骨髓铁减少或消失。

全血容量增加（为正常的150%～300%），红细胞容量增加（>32ml/kg），血液比重增加（1.075～1.080），全血粘度增加（比正常高5～6倍）。血清维生素B12增高（>900μg/ml），血沉减慢，动脉血氧饱和度正常，血清铁正常或减低，未饱和铁结合力正常或增高。