生物洁净实验室洁净度级别分析

第一篇：生物洁净实验室洁净度级别分析

洁净室（微生物实验室）标准及洁净度分级解析

微生物实验室一般包括清洁区、操作区和无菌区三个区域，可划分为准备室、培养室、菌种室、消毒室、无菌室等多个房间。微生物实验室根据专业领域（环保、食品、药品、医学等）和性质（教学、生产、科研、检测等）的不同，实验室的组成和规模有较大差别。

目前，中国没有专门的微生物实验室的设计建设标准，来对无菌室等的洁净度和空气沉降菌落数进行规范。空气中绝大多细菌直径0.5～5μm，霉菌直径2～30μm，在空中附着在尘埃上，形成一定粒径的生物性粒子而悬浮，直接影响微生物实验室空气环境。

在微生物实验室规划、设计和建设中，空气洁净度成为最关键的因素。目前，中国主要洁净室及洁净度分级的标准和文件如下：

1)GB 50073-2013《洁净厂房设计规范》

2)GB/T25915.1-2010《洁净室及相关受控环境 第1部分：空气洁净度等级》 3)GB 50687-2011《食品工业洁净用房建筑技术规范》 4)GB 50472-2008《电子工业洁净厂房设计规范》 5)GB 50457-2008《医药工业洁净厂房设计规范》 6)YY 0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》 7)《药品生产质量管理规范（2010年修订）》附录1 8)《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》

对于医药、电子和食品等行业还好说，有对应的标准。其他行业该怎么选择？有人说直接选择GB 50073-2013，我个人觉得不尽然。GB 50073-2013仅仅规定了悬浮颗粒物的要求，并没有对无菌实验室影响最大的微生物指标作出规定，如果你所在实验室仅仅控制悬浮颗粒物就可以，那参考GB 50073-2013完全可以满足要求，如果对微生物指标还有控制要求，那应该怎么选择呢？我们先来看看上述标准和文件对洁净度的主要分级： GB 50073-2013和GB/T 25915.1-2010均参考的ISO的标准分级，对洁净室空气洁净度的分级如下：

洁净室及洁净区空气中悬浮粒子洁净度等级

注：GB 50472-2008是参考GB 50073-2013分级标准，自身没有规定相应的分级。

GB 50457-2008《医药工业洁净厂房设计规范》关于洁净度的等级规定如下：

尘粒最大允许数／立方米

微生物最大允许数

洁净度 100级 10 000级 100 000级 300 000级 500 350 000 3 500 000 10 500 000

0 000 20 000 60 000

浮游菌／立方米 100 500 —

沉降菌／皿

l 3 10 15

注：GB 50457-2008的要求是直接引用1998版GMP，其中YY 0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》和《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的要求与之等同。

《药品生产质量管理规范（2010年修订）》关于无菌操作洁净度的等级规定如下：

洁净室各级别空气悬浮粒子的标准

悬浮粒子最大允许数/立方米 静态

≥0.5μm 3520 3520 352000 3520000

≥5.0μm(2)20 29 2900 29000

≥0.5μm 3520 352000 3520000 —

动态

≥5.0μm 20 2900 29000 —

洁净度级别

A级 B级 C级 D级

洁净室微生物监测的动态标准

表面微生物

接触（55mm）

cfu /碟 1 5 25 50

5指手套 cfu /手套 1 5 － － 浮游菌

洁净度级别

cfu/m

3沉降菌（90mm）cfu /4小时 1 5 50 100 A级 B级 C级 D级 1 10 100 200

注：GMP(2010)关于洁净度等级划分系参考EU GMP进行修订的。

GB 50687-2011的分级基本与GMP（2010），只是级别的名称改成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，而且GMP（2010）要求更为严格。GMP（2010）对浮游菌和沉降菌只做动态监测，GB 50687-2011则静态和动态监测都有。

那么微生物实验室设计和建设到底该参考那个标准呢？这就要根据不同专业领域及不同样品检测的风险而定了。我们不盲选择，先将他们来做个对比。

1）以GB 50073-2013和GB/T 25915.1-2010的等级为依据，即ISO的等级划分，以悬浮粒子为限度标准。2）GMP（2010）的A级相当于ISO的4.8级，4.8级是以≥5.0μm的悬浮粒子为限度标准通过公式计算得来。

3）GMP（2010）B级、GB 50687-2011的Ⅰ级（静态）和GB 50478-2008的100级相当于 ISO的5级，也即我们常说的100级。

4）GB 50687-2011的Ⅰ级（动态）相当于ISO的6级，也即我们常说的1000级。

5）GMP（2010）C级（静态）、GB 50687-2011的Ⅱ级（静态）和GB 50478-2008的10000级相当于ISO的7级，也即我们常说的10000级。

6）GMP（2010）的C级（动态）/D级、GB 50687-2011的Ⅱ级（动态）/Ⅲ级（静态）和GB 50478-2008的100000级相当于ISO的8级，也即我们常说的100000级。7）GB 50687-2011的Ⅳ级相当于ISO的9级。

综上所述，由于ISO标准仅仅规定了悬浮粒子的要求，对微生物指标并没有进行限定，所以建议：对没有微生物指标限制的洁净室可参考GB 50073-2013或GB/T 25915.1-2010的要求，食品、电子、医药等领域参考对应行业的标准，其他领域的微生物实验室应参考GMP（2010）的相关要求为宜。同时应结合检测样品的风险来确定微生物实验室的洁净度级别。

最后，附各国对洁净室洁净度对比（以下部分数据可能已经更新）。

=================================万恶分割线===============================

第二篇：洁净室内洁净度测试记录填写范例

洁净室内洁净度测

表B.0.7

试

报审、报验表

资料号

工程名称：

XXXXXXXXXXXXXXXXX项目

致：

XXXXXXXXXX监理有限公司

（项目监理机构）

我方已完成一层洁净区洁净室内洁净度测试

工作,经自检合格，请予以审查或验收。

附件：

隐蔽工程质量检验资料

检验批质量检验资料

分项工程质量检验资料

施工试验室证明资料

其他

施工项目经理部（盖章）

项目经理或项目技术负责人（签字）

XXX

****年**月**日

审查或验收意见：

项目监理机构（盖章）

专业监理工程师（签字）

****年**月**日

注：本表一式二份，项目监理机构、施工单位各一份。

洁净室内洁净度测试记录

表C3-47

资料号

工程名称

XXXXXXXXXXXXXXXXX项目

试验日期

2021年03月03

日

洁净室名称

一层洁净区洁净室内洁净度测试

洁净室级别

7级

采样点数

检测单位

云南新锐安全检测有限

公司

测试过程：

首先测试高效过滤器的风口处的出风量是否符合设计要求；

用扫描法在过滤器下风侧用粒子计数器动力采样头；

高效过滤器表面、边框、封头胶处移动扫描而测出泄漏率是否超出设计要求。

测试记录：

根据检测数据（静态下）悬浮粒子浓度达到7级洁净度室内洁净面积20m²，根据检测数据（空态下）悬浮粒子浓度达到7级洁净度室内洁净面积40m²。

测试结论：

经测试，高效过滤器透过率不大于出厂合格透过率2倍，室内洁净度等级达到7级，符合设计要求和《通风与空

调工程施工质量验收规范》

GB50243规定。

施工单位

试验（检测）单位

见证单位

项目技术负责人:

XXX

****年**月**日

试验人：

****年**月**日

见证人：

****年**月**日

本表由施工单位填写，施工单位、建设单位、城建档案馆各保存一份。

第三篇：洁净实验室的结构及功能

洁净实验室的结构及功能

十万级：

1.洗涤室：有专门清洗区域，配有自来水，蒸馏水。对一些试管、BD管、培养皿等玻璃仪器进行洗涤，洗涤后送入灭菌室进行干热湿热灭菌

2.灭菌室：配有干热箱和湿热灭菌锅，对清洗过的实验器材和玻璃仪器进行干热和湿热灭菌。

3.种子室：配有超净工作台、恒温卧式摇床、恒温培养箱、-70℃冰箱。用以接菌、为发酵提供种子以及进行菌体的低温保存。4.发酵室：配有液体发酵罐，用以中试规模的菌体发酵。

5.离心式：配有低温高速及低温中速离心机，用以对菌体培养基进行离心，收集菌体，为蛋白粗纯做准备。

6.粗纯室：配有高压破碎仪，对收集的菌体细胞进行破碎，使之表达的胞内蛋白释放出来。

万级：

7.洗涤室：配有自来水、蒸馏水、超纯水洗涤系统，对装有纯化缓冲液的容器进行洗涤，为纯化做准备。

8.灭菌室：配有干热灭菌箱，对洗涤后的容器进行干热灭菌，为纯化做准备。

9.准备室：配有天枰、纯化需要配置缓冲液的各种药品，能够配置纯化所需要的各种缓冲溶液，为纯化做准备

10.纯化室：配有AKATA纯化系统及HPLC液相分析系统，对得到的目的蛋白进行精纯，得到高纯度的目的蛋白 11.制剂室：洁净区的温度和相对湿度应与制剂工艺要求相适应，洁净室温度控制在18-26℃，相对湿度控制在45-65%，配有纯化水系统设备、超净工作台、4℃消毒灭菌柜，保证了制剂配制的超净环境

12.细胞培养室：配有超净工作台、二氧化碳培养箱、液氮灌，能够对实验所需要的各种真核细胞进行培养。

13.动物房：配有超净工作台及若干IVC笼具，对饲养SPF级啮齿类动物提供清洁的环境，使之免受污染。

第四篇：GMP洁净实验室装修SICOLAB

GMP洁净实验室装修SICOLAB GMP是药品生产和质量管理的基本准则, 它的内容可以概括为湿件、硬件、软件。其中硬件就是指厂房与设施、设备等。在《药品生产质量管理规范年修订》中, 厂房与设施共条, 占《规范总条数条的。说明厂房与设施作为硬件在药品生产中的重要性, 厂房是药品生产的根本条件。随着国家以规范》的执行及加人组织, 全国药品生产企业, 无论是新建或改建厂房,都应符合以规范》规定。

该实验室位于建筑物的四层, 净化面积平方米, 土建层高米, 实验室吊顶净高米。在该净化区域内将建造四个实验室, 以供研制四种不同类型的药品, 在其中一套实验室内还包含一间℃的保鲜冷库, 且四间实验室在使用时间于周期上有所差异。为此首先对工艺布局上进行合理的布置见图房间的中间为洁净走廊, 其东西两侧分别布置两套实验室, 在西侧实验室的北端布置了共用净化辅助房间, 在东侧实验室的北端布置了产品出口及专用电梯, 在实验室的最西侧布置了一条参观走廊并兼做非净化物流的通道。这样进人实验室的工作人员须先经过共用区域的净化辅助房间,经过人身的净化或消毒处理后, 才能再分别进人各自的实验室, 即工作人员一换鞋男女一更一缓冲换鞋男女二更消毒一缓冲洁净走廊一实验室。实验完成后工作人员原路返回。物料则经外走廊预处理消毒物流吹淋室缓冲洁净走廊传递窗一实验室一洁净走廊洁净室药品专用电梯”室外。参观外走廊与实验室、洁净走廊与实验室之间在相对应的位置上设置圆弧形铝型材密闭观察窗, 使参观者不必进人实验室, 通过参观走廊上的观察窗就可以清楚地看到实验室里面工作的情况。这样的工艺布局不仅可以保证各实验室操作的独立性, 不发生相互妨碍的情况, 而且可以使人流、物流各行其道, 最大限度地避免了交叉污染。

GMP洁净实验室空调净化系统划分

根据实验室工艺布局和不同的使用要求及洁净度级别, 拟划分五套相对独立的空调净化系统、一套空气自净系统和一套空调系统为实验室送风。但由于该建筑在进行土建设计时, 仅在西侧实验室的最南端预留了一间面积为平方米的空调机房, 如按常规选择集中卧式空气处理机组, 机房内难以布置。为此设计时选用了集中垂直式空气处理机组, 即将送风机段置于机组的上方, 充分利用机房空间, 从而减少了空调机组的占地面积, 使五台空调机组得以从容布置, 并留有足够的维修空间。

第五篇：实验室生物安全

实验室生物安全事件应急预案

一 总则

（一）目的对医学工作者健康与安全负责的精神，加强实验室生物安全的管理，制定有效的应急处理程序和控制措施，以保证在实验室发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，从而遏制生物安全事件危害的进一步扩大，保证中心相关人员的健康，保证公众健康和社会稳定。

（二）工作原则 1.预防为主 常备不懈 2.设施规范 管理到位 3.主动监测 反应及时 4.依法处理 措施果断 5.机制通畅 遏制危害

（三）适用范围

本预案适用于发生于实验室内部的、与实验室安全相关的、危害工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：

1.病原微生物和有毒有害化学试剂的实验室污染事件； 2.工作人员受到实验室内有毒有害病原微生物或有毒有害化学试剂的感染或侵害；

3.病原微生物、有毒有害化学试剂被泄漏出实验室事件。4.由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。

（四）编制依据

1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《突发公共卫生事件应急条例》 3.《实验室生物安全通用要求》 4.《实验室生物安全手册》

（五）预案启动

当出现

（三）中的任意情况，启动本预案。

二、组织指挥体系及职责任务

（一）组织机构

1、元宝山区平庄镇中心卫生院实验室生物安全应急领导小组： 组长：孟宪杰 成员：李磊

2、元宝山区平庄镇中心卫生院实验室生物安全事件应急处理工作组

组长：孟宪杰 成员：李磊

（二）职能与工作

1.领导小组：制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。

2.应急处理工作组：制定实验室生物安全管理办法，建立规章制度和实验室操作规范，对各类实验室的安全进行监督检查，督促各项 生物安全管理责任和措施落实到位；突发事件发生时，在领导小组的指挥下实施全面的应急工作。

三、预防预警

（一）预防

1.加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。

2.建立实验室病原微生物专库，建立有毒有害化学试剂专库。对于传染病病原样本、剧毒化学品建立严格的监督管理制度。

3.增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。

4.提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。

（二）预警

1.建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告（见处理程序）。

2.建立中心实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。

3.定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。

四、应急控制措施

实验室生物安全事件发生后，立即启动应急机制。在领导小组的指挥下，有关部门进入应急状态，对突发事件进行侦测、调查，综合评估，采取应急处理措施，控制危害的蔓延等等。

（一）对实验室生物安全事件综合评估

1.流行病学调查 包括事件发生的原因、接触人员的发病情况、引起疾病流行的可能因素等。

2.标本、样品采集和检验 对污染的物品、区域、感染的人员进行采样和检测，对可疑生物进行样本检查，进行病原的分离鉴定，以确定事件的性质与危害。

3.污染区域划定 对污染区及其周围的地区进行卫生监测。对于病原微生物和有毒有害化学品、放射源的丢失或被盗事件，应监测生活资源受污染范围和严重程度，现场调查和取证人员应采取适宜的防护措施。

（二）现场控制措施

1.根据实验室生物安全事件发生的规模、危害的程度，可能波及的范围，封闭或封锁相关实验室和实验区。

2.传染源控制 对于受到实验室生物安全事件影响的现症病人实行就地报告，通过“绿色通道”，送至实验室人员感染救治的定点医院。对于疑似病人和接触者进行入院观察。对于事件中的高暴露人群根据实际情况进行预防性服药、留检、医学观察或隔离。在可能波及的范围内，开展疑似病例的搜索，开展传染源、传播途径及暴露因素 的调查。

3.对于查明的微生物病原、生物毒素以及有毒有害化学品污染的物品要对其进行封存和销毁，紧急封闭公共饮用水源等公众共用设施。

4.对受到污染实验室等所有场所、物品等进行消毒处理，具体方法参照《消毒技术规范》。

5.保护易感人群 对易受感染的人群和其他易受损害的人群采取紧急接种、预防性投药、群体防护等。

6.卫生知识宣教 针对事件性质，开展特异性卫生知识宣教。7.人员疏散 出现大量或毒性极大的病原微生物和有毒有害化学试剂丢失、并有迹象出现严重危害公众健康事件时，可报请政府取消集会性活动，采取必要的停工、停业、停课和人员疏散措施。

8.消除区域民众心理障碍和精神应激 采取宣传教育、心理咨询等方式针对性解决。

（三）追踪监测

追踪事件可能波及的地区的高暴露人群，开展主动监测工作，做到早发现、早报告、早隔离、早治疗。

（四）上报与部门协调

及时上报卫生主管部门，报告程序按照《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》的有关规定。对于病原微生物、有毒有害化学试剂和放射源丢失的事件，立即上报公安部门，并与相关部门密切配合，尽快查明下落；要与卫生监督部门配合协调，搞好相关区域的食品、饮水、环境卫生监督。

对于实验室人员受到感染和侵害事件，积极与医疗部门协调，提供有关资料，尽早确诊，尽早治疗，把危害降低到最小。

五、疫情的解除

如果查明实验室生物安全事件是由于细菌毒素或传染性较差的病原体引起的危害较小的污染，经实验室消毒处理后即可解除封锁。但对感染者必须加强治疗和必要的限制。如查明生物污染或泄漏是由于国家规定的一、二、类病原微生物，或发生上述相应疾病的病症时，应继续封锁，并应将封锁区分为若干个大小封锁圈。各封锁圈之间应完全隔离开来，对病人进行隔离治疗，对受感染者及病人密切接触者进行隔离留验。解除封锁的条件是对污染区或疫区进行必要的卫生处理，如对病原体进行彻底的消毒或扑灭；根据情况进行了必要的杀虫、灭鼠；对小隔离区进行终末消毒，并从最后一例病人算起，经过一个最长潜伏期仍无新的病人发生，报请批准封锁的主管部门解除封锁。

六、保障措施

1.技术保障

加强科学研究，提高科技含金量，强化实验室规范化建设。2.人员培训

加强对涉及实验室生物安全的监测与预警、疫情分析评估、流行病学调查、消毒隔离技术等方面的业务培训。

加强对实验室业务人员在法制化管理和法律责任方面的培训。

3.监督检查 相关实验室要定期自查，建立实验室检查制度。4.应急演练

应急演练工作每两年不少于1次。演练工作应根据性质的不同分类进行。实验室生物安全事故和意外事故的处理程序

一、菌（毒）外溢在台面.地面和其他表面

1、戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护。

2、用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。

3、向纸巾上倾倒适当的消毒剂，并立即覆盖周围区域。通常可以使用2000mg/L漂白剂（或5%次氯酸钠溶液）；但在飞机发生溢出时，则应该使用季铵盐类消毒剂，如苯扎溴铵等。

4、使用消毒剂时从溢出区域的外围开始，向中心进行处理。

5、作用适当时间后（例如 30 分），将所处理物质理掉。如果含有碎玻璃或其他 锐器，则要使用簸或硬的厚纸来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处 理。

6、对溢出区域再次清洁并消毒（如有必要，重复第 2～5 步）。

7、将污染材料置于防漏.防穿透的废弃物处理容器中。

8、再成功消毒后，通知主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。二.菌(毒)外溢在防护服上 应立即进行局部消毒，更换。污染的防护用消毒液浸泡后进行高压灭菌处理。三.菌（毒）外溢到皮肤粘膜 这种情况被视为有很大危险，应立即停止工作，能用消毒液的部位可进行消毒，然后用水冲洗 15～20 分。处理后安全撤离，视情况隔离观察，期间根据条件进 行适当的预防治疗。四.皮肤次伤 若皮肤被刺破应被视为有极大危险，应立即停止工作，对伤口进行挤血，用水冲 洗消毒。视情况隔离观察，其间根据条件进行适当的预防治疗。五.离心管发生破裂

(一)非封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂 这种情况被视为发生溶胶暴露事故，应立即加强个人防护力度，其处理原则如下：

1、如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，停止后密 闭离心筒至少 30 分，使气溶胶沉积。

2、如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭至少 30 分。发生这两种情况时都应报告实验室负责人。随后的所有操作都应加强个人呼吸保 护并戴结实的手套（如厚橡胶手套），必要时可在外面戴适当的一次性手套。当 清理玻璃片时应当使用镊子，或用镊子夹着的棉花来进行。所有玻璃的离心管、玻璃碎片.离心桶.十字轴和转子都应放在无腐蚀性的.已知对相关微生物具有杀 灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，然后 回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂反复擦拭，然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废物处理。

（二）在可封闭的离心桶（安全杯）内离心管发生破裂 所有密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。如果怀疑在安全杯内发生破损，应该 松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌。还可以采用化学方法消毒安全杯。

六、潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）：

1、所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。应当立即通知实验室负责人和生物安全人员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室。

2、就地张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在生物安全人员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。

七、发现相关症状 若操作者或其所在实验室的工作人出现于被操作病原微生物导致疾病类似的症状，则应被视为可能发生实验室感染，应及时到指定医院就诊，并如实主诉 工作性质和发病情况。在就诊过程中，应采取必要的隔离防护措施，以免疾病传播。