金线莲组培快繁技术研究

第一篇：金线莲组培快繁技术研究

金线莲组培快繁技术研究

【摘要】目的建立金线莲快繁体系。方法以茎段为外植体，开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究，并进行了移栽试验。结果外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好；不定芽增殖最佳培养基配方为MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，两个月增殖倍数达5.0以上；壮苗最适培养基为1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3个月成活率均达100%，且生长良好。结论采用上述方法，能实现金线莲幼苗的快速繁殖。

【关键词】金线莲； 快速繁殖； 增殖； 生长； 移栽

金线莲Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl为兰科开唇兰属多年生草本，别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等，是我国传统珍贵药材，素有“金草”“神药”“乌人参”等美称，在民间应用范围较广，广泛应用于风湿性关节炎、高血压病、糖尿病、肾病等疑难杂症的治疗和强身健体、病后体虚恢复等方面，在浙江、福建、台湾等省和东南亚地区被视为珍稀名贵药材，特别在台湾省更是备受青睐，被称为“药中之王”［1，2］。

金线莲种子微小，由未成熟的胚及数层种皮细胞构成，自然萌发率和繁殖率低，目前市场上货源主要来自于野生采挖，产品一直处于供不应求的状况。近年来，随着对其药效学和临床应用研究的深入，对金线莲药用价值的认识进一步提高，其市场货源紧缺的状况更为严峻，野生资源也不断遭到破坏性采挖，以致于处于濒临灭绝之地。本研究旨在采用组织培养技术，解决金线莲种苗来源，加快人工栽培，以保护金线莲野生资源、稳定市场供应。现将有关实验结果如下。

1材料与方法

1.1材料无菌繁殖体系的建立为浙江金线莲野生种源，其它实验为继代培养的不定芽及无根幼苗茎段。

1.2无菌繁殖体系的建立 取生长健壮、无病虫害的植株，去叶后放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水冲洗30 min。在超静工作台前，用75% 酒精湿润5～6 s，放入0.1%的HgCl溶液灭菌12～13 min，用无菌水冲洗5～6次。将消毒好的茎按上段（具茎尖）、中段和下段（匍匐茎段）切成长约1.5～2 cm，带有1～2个节间的小段，分别接种于MS+6－BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培养基上，pH5.6，蔗糖2.5%，琼脂0.7%。培养条件为：温度(25±2）℃，光照时间12 h/d，光照强度1 500～2 000 lx。

1.3不定芽诱导

1.3.1基本培养基对不定芽诱导的影响 采用单因素实验，培养基选用MS

（Murashige-Skoog）［3］，1/2MS（大量元素减半，其他成分不变），VW(Vacin & Went)，B5（Gamborg·Miller & Ojima）和KC(Knudson C)等5种，分别添加6－BA 4.0mg/L，NAA 1.0 mg/L。

1.3.2激素对不定芽诱导的影响 以MS为基本培养基，添加不同种类及浓度的细胞分裂素和生长素。

上述实验选取无菌健壮植株，切取长约1～1.5 cm，带有一个节间的茎中段，每处理接10个茎节，重复3次。培养期间定时观察不定芽生长情况，培养60 d后统计不定芽数。其它条件同实验“1.2”项。

1.4壮苗培养

1.4.1激素对幼苗生长和发根的影响 以1/2MS为基本培养基，NAA设1～5 mg/L 5个处理，6－BA设0.5，1.0和1.5 mg/L 3个处理，共15个处理。

1.4.2添加物对幼苗生长和发根的影响以1/2MS＋NAA 2.0 mg/L＋6－BA 0.5 mg/L为基本培养，考察马铃薯提取物、香蕉提取物、苹果提取物、椰子汁等4种天然有机物和活性炭对金线莲幼苗生长的影响。

上述每种培养基均接入经增殖培养高约3 cm，具3～4节间、有1～2片的无根幼苗，每处理接种接无根幼苗10株，重复3次。培养后每隔15 d观察生长情况1次，至3个月考察每株净增加的叶片数、重量及发根数，并进行数理统计分析。

1.5移栽选苗高约6～8 cm，茎基直径约2 mm，丛生根有2～3条的试管苗，炼苗4 d后，洗净附着在植株上的培养基，并晾干洗涤水后移人直径为15 cm，装有不同基质的土盆中，考察不同基质对金线莲试管苗成活率的影响。移栽前，实验基质均用45%多菌灵可湿性粉剂800倍溶液浇透消毒。实验条件为遮荫度80%的荫棚，保持空气相对湿度的80%～90%。如发现有病死植株，及时拔除。每处理5盆，每盆种5株，重复3次，移栽3个月后考察成活株数，并进行数理统计分析。

2结果

2.1无菌繁殖体系的建立实验表明，外植体茎段的分化程度对诱导结果存在一定的影响。从表1可知，上、中段茎均能萌动生长。上段茎因有顶芽的存在，顶端优势表现较为强烈，因而以生长为主，不定芽发生较少，平均芽增殖数为0.6个；中段茎不定芽发生快、量大、长势好，平均芽增殖数为4.05个，并形成多枝丛生状。下段茎由于组织相对老化，虽有不定芽发生，但发生量与生长势均较弱。这和陈自力［4］报道的结果一致。

从实验中观察到，不定芽的产生以侧芽萌生为主。一般在培养15～20 d后，茎节上潜伏的叶腋芽萌动膨大，芽丛在节的四周萌出，起初为白色略带黄色，随着培养时间加长，芽不断伸展，逐渐转为黄绿色，形成主芽。叶腋芽是单生的，极个别节上能对生两个腋芽，未发现茎部或切口处长出不定芽。培养30 d左右，主芽基部的节再生侧芽(称一级侧芽)，45 d左右一级侧芽节上又可发生二级侧芽，随着芽的生长、出现叶片，节处毛并产生根，外被浓密的白色绒毛，从而形成完整小植株。培养3个月后每天观察，侧芽分生组织的增殖，一般只出现主芽和一二级侧芽或苗；培养5个月以上，主芽、侧芽较高，叶片较多、大，只有少数出现三级侧芽或苗。这种腋芽萌生的增殖形成了主轴分枝型的芽苗，随培养时间或继代繁殖代数的增加，或激素的作用，芽或苗因节间短，多数为形成似不定芽或丛生苗。培养过程中，未见愈伤组织，也没有发现有原球茎和类原球茎产生。

表1金线莲茎段外植体不定芽诱导（略）

2.2不定芽诱导

2.2.1基本培养基对不定芽诱导的影响 以金线莲的茎节段作为外植体，腋芽能快速萌发出不定芽体。经60 d的培养，增殖倍数可达3.1～5.4倍。但基本培养基对不定芽的诱导具有明显的影响，MS，B5培养基不定芽增殖率分别为5.4倍与5.2倍，比其它培养基增加23.8%～74.2%。

表2基本培养基对金线莲不定芽诱导的影响（略）

经LSR差异显著性测定，MS，B5培养基之间无明显差异，与1/2MS，KC和VW之间存在极显著差异，且MS，B5培养基上诱导产生的不定芽色绿、粗壮（见表2），表明MS，B5培养基适合作为金线莲茎段不定芽诱导的基本培养基［5］。

2.2.2激素对不定芽诱导的影响激素种类、水平与配比对组织培养快速繁殖在效率存在明显的影响，6-BA、KT和NAA是3种常用生长调节剂，其添加量对金线莲不定芽增殖的影响很大。结果见表3。从表3可知，同为细胞分裂素的6-BA，KT在相同的添加量下对不定芽的增殖效果差异极显著，6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%，表明6-BA比KT更适合金线莲茎节不定芽的诱导。

6-BA的浓度也影响不定芽诱导效果。在添加量小于4.0 mg/L的情况下，随浓度的提高，不定芽增殖率明显上升，添加量为4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0，1.0 mg/L分别提高22.1%和47.6%。当6-BA添加量达到6.0 mg/L时，其增殖率还出现下降趋势，表明本实验条件下6-BA添加的适宜量为4.0 mg/L。

表3激素对金线莲不定芽诱导的影响（略）

生长素NAA对金线莲不定芽的诱导与生长具有明显的促进作用。从表3可以看出，添加了NAA的培养基不定芽增殖量与生长明显较不添加的好，芽体粗壮、色浓绿，其中添加0.5 mg/L的表现最好，添加1.0 mg/L的其次，但二者间差异未达到显著水平；与其它不添加NAA的相比差异达极显著水平。表明在本试验条件下NAA适宜添加的量为0.5～1.0 mg/L。

2.3壮苗培养

2.3.1激素对幼苗生长的影响在金线莲壮苗培养中，NAA较6-BA对促进幼苗生长的影响更为明显。结果见表4。NAA浓度低于3 mg/L时，对幼苗生长有促进作用，随浓度的增加，叶片净增量、发根数和鲜重净增量明显增加，当浓度达到4.0 mg/L时，叶片净增量、发根数和鲜重净增量增加不明显。6-BA在0.5 mg/L情况下，比不加的具有一定的促进作用，但未达显著水平；在浓度为1.0 mg/L，1.5 mg/L情况下，叶片净增量、发根数和鲜重净增量反而减少，但在幼苗基部观察到丛生状不定芽的产生，表明6-BA在浓度高于1.0 mg/L情况下，有利于金线莲不定芽的生成，对幼苗生长不利。

从表4也可以看出，处理9、10号在发根数、鲜生净增量方面较其它处理明显提高，达极显著差异；在叶片净增量方面，除与处理13、14号无明显差异外，与其它处理之间的差异达极显著水平，表明在金线莲壮苗培养中，NAA适宜添加的量为3.0～4.0 mg/L，6-BA 添加量为0.5 mg/L或不加。

表4激素对金线莲幼苗生长的影响（略）

2.3.2活性炭与有机添加物对幼苗生长的影响结果见表5。从表5可知，不同的添加物对金线莲幼苗生长的影响表现不一，香蕉、椰子汁对促进幼苗生长最为有利，叶片净增量、发根数和鲜重净增量均高于其它处理，二者间无明显差异；马铃薯对幼苗生长不利，与其它处理相比均存在极显著差异水平。活性炭对金线莲幼苗生长具有一定的促进作用，在添加0.3%情况下，叶片净增量、发根数和鲜重净增量与对照相比均显著提高，差异达极显著水平；但与香蕉、椰子汁处理相比，其促进幼苗生长的作用不如前二者，除发根数无差异外，叶净增量与香蕉、椰子汁处理差异达显著水平，鲜重净增量差异达极显著水平。同时观察到活性炭、香蕉和椰子汁新发根洁白、粗壮。试验结果表明添加20%香蕉和椰子汁最适宜金线莲幼苗的生长。

表5添加物对金线莲幼苗生长的影响（略）

2.4移栽金线莲试管苗移栽3个月后的植株成活情况见表6。从表6中可以看出，处理7和处理9保持100%的成活率，处理3和处理8的植株成活率也在93%以上，处理1的成活率最低，仅为56%。经LSR差异显著性测定，处理3、7、8、9号之间无明显差异，与处理5、6号差异达显著水平、与处理1、2、4号差异达极显著水平。表明在菜园土中加

入粗砂、木屑能明显提高金线莲试管苗移栽的成活率，适宜添加的比例为1份菜园土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份，要求充分混匀。

表6种植基质对金线莲试管苗移栽成活率的影响（略）

3小结

金线莲不同部位的茎间对不定芽的诱导结果存在明显的差异，以不含顶芽和长根的中间段茎节为好，不定芽增殖率达4倍以上。

采用金线莲中间茎节作外植体诱导不定芽萌发时，适宜的培养基为MS或B5＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L～1.0 mg/L，蔗糖浓度为2.5%。

适宜的壮苗培养基为1/2MS＋NAA 3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%），蔗糖浓度为3.0%。3.4 试管苗在充分混匀的1份菜园土＋2份粗砂（2～3 mm）＋1份木屑，或1份菜园土＋粗砂1份＋木屑2份的基质中生长良好，3个月后成活率达100%。

【参考文献】

［1］ 钟岑生.金线莲的药用价值与开发［J］.广西农业科学,1997,34(2):102.［2］ 许文江,陈 裕，林坤瑞.药用野生金线莲植物资源的研究［J］.福建热作科技, 2000,25(4):9.［3］ 吴殿星，胡繁荣.植物组织培养［M］.上海:上海交通大学出版社,2004:20.［4］ 陈自力.花叶开唇兰组织培养快速繁殖的研究［J］.林业勘察设计, 2003,23(2):46.［5］ 高 燕,白燕冰,赵云翔.金线莲组织培养几种培养基的筛选［J］.热带农业科技, 2004,27(3):12.

第二篇：金线莲组培

金线莲组培

摘要 目的建立金线莲快繁体系。方法以茎段为外植体，开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究，并进行了移栽试验。结果外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好；不定芽增殖最佳培养基配方为MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，两个月增殖倍数达5.0以上；壮苗最适培养基为1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3个月成活率均达100%，且生长良好。结论采用上述方法，能实现金线莲幼苗的快速繁殖。【关键词】金线莲； 快速繁殖； 增殖； 生长； 移栽

金线莲Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl为兰科开唇兰属多年生草本，别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等，是我国传统珍贵药材，素有“金草”“神药”“乌人参”等美称，在民间应用范围较广，广泛应用于风湿性关节炎、高血压病、糖尿病、肾病等疑难杂症的治疗和强身健体、病后体虚恢复等方面，在浙江、福建、台湾等省和东南亚地区被视为珍稀名贵药材，特别在台湾省更是备受青睐，被称为“药中之王”［1，2］。

金线莲种子微小，由未成熟的胚及数层种皮细胞构成，自然萌发率和繁殖率低，目前市场上货源主要来自于野生采挖，产品一直处于供不应求的状况。近年来，随着对其药效学和临床应用研究的深入，对金线莲药用价值的认识进一步提高，其市场货源紧缺的状况更为严峻，野生资源也不断遭到破坏性采挖，以致于处于濒临灭绝之地。本研究旨在采用组织培养技术，解决金线莲种苗来源，加快人工栽培，以保护金线莲野生资源、稳定市场供应。现将有关实验结果如下。

1材料与方法

1.1材料无菌繁殖体系的建立为浙江金线莲野生种源，其它实验为继代培养的不定芽及无根幼苗茎段。

1.2无菌繁殖体系的建立 取生长健壮、无病虫害的植株，去叶后放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水冲洗30 min。在超静工作台前，用75% 酒精湿润5～6 s，放入0.1%的HgCl溶液灭菌12～13 min，用无菌水冲洗5～6次。将消毒好的茎按上段（具茎尖）、中段和下段（匍匐茎段）切成长约1.5～2 cm，带有1～2个节间的小段，分别接种于MS+6－BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培养基上，pH5.6，蔗糖2.5%，琼脂0.7%。培养条件为：温度(25±2）℃，光照时间12 h/d，光照强度1 500～2 000 lx。

1.3不定芽诱导

1.3.1基本培养基对不定芽诱导的影响 采用单因素实验，培养基选用MS（Murashige-Skoog）［3］，1/2MS（大量元素减半，其他成分不变），VW(Vacin & Went)，B5（Gamborg·Miller & Ojima）和KC(Knudson

C)等5种，分别添加6－BA 4.0mg/L，NAA 1.0 mg/L。

1.3.2激素对不定芽诱导的影响 以MS为基本培养基，添加不同种类及浓度的细胞分裂素和生长素。

上述实验选取无菌健壮植株，切取长约1～1.5 cm，带有一个节间的茎中段，每处理接10个茎节，重复3次。培养期间定时观察不定芽生长情况，培养60 d后统计不定芽数。其它条件同实验“1.2”项。

1.4壮苗培养

1.4.1激素对幼苗生长和发根的影响 以1/2MS为基本培养基，NAA设1～5 mg/L 5个处理，6－BA设0.5，1.0和1.5 mg/L 3个处理，共15个处理。

1.4.2添加物对幼苗生长和发根的影响以1/2MS＋NAA 2.0 mg/L＋6－BA 0.5 mg/L为基本培养，考察马铃薯提取物、香蕉提取物、苹果提取物、椰子汁等4种天然有机物和活性炭对金线莲幼苗生长的影响。

上述每种培养基均接入经增殖培养高约3 cm，具3～4节间、有1～2片的无根幼苗，每处理接种接无根幼苗10株，重复3次。培养后每隔15 d观察生长情况1次，至3个月考察每株净增加的叶片数、重量及发根数，并进行数理统计分析。

1.5移栽选苗高约6～8 cm，茎基直径约2 mm，丛生根有2～3条的试管苗，炼苗4 d后，洗净附着在植株上的培养基，并晾干洗涤水后移人直径为15 cm，装有不同基质的土盆中，考察不同基质对金线莲试管苗成活率的影响。移栽前，实验基质均用45%多菌灵可湿性粉剂800倍溶液浇透消毒。实验条件为遮荫度80%的荫棚，保持空气相对湿度的80%～90%。如发现有病死植株，及时拔除。每处理5盆，每盆种5株，重复3次，移栽3个月后考察成活株数，并进行数理统计分析。

2结果

2.1无菌繁殖体系的建立实验表明，外植体茎段的分化程度对诱导结果存在一定的影响。从表1可知，上、中段茎均能萌动生长。上段茎因有顶芽的存在，顶端优势表现较为强烈，因而以生长为主，不定芽发生较少，平均芽增殖数为0.6个；中段茎不定芽发生快、量大、长势好，平均芽增殖数为4.05个，并形成多枝丛生状。下段茎由于组织相对老化，虽有不定芽发生，但发生量与生长势均较弱。这和陈自力［4］报道的结果一致。

从实验中观察到，不定芽的产生以侧芽萌生为主。一般在培养15～20 d后，茎节上潜伏的叶腋芽萌动膨大，芽丛在节的四周萌出，起初为白色略带黄色，随着培养时间加长，芽不断伸展，逐渐转为黄绿色，形成主芽。叶腋芽是单生的，极个别节上能对生两个腋芽，未发现茎部或切口处长出不定芽。培养30 d左右，主芽基部的节再生侧芽(称一级侧芽)，45 d左右一级侧芽节上又可发生二级侧芽，随着芽的生长、出现叶片，节处毛并产生根，外被浓密的白色绒毛，从而形成完整小植株。培养3个月后每天观察，侧芽分生组织的增殖，一般只出现主芽和一二级侧芽或苗；培养5个月以上，主芽、侧芽较高，叶片较多、大，只有少数出现三级侧芽或苗。这种腋芽萌生的增殖形成了主轴分枝型的芽苗，随培养时间或继代繁殖代数的增加，或激素的作用，芽或苗因节间短，多数为形成似不定芽或丛生苗。培养过程中，未见愈伤组织，也没有发现有原球茎和类原球茎产生。

表1金线莲茎段外植体不定芽诱导（略）

2.2不定芽诱导

2.2.1基本培养基对不定芽诱导的影响 以金线莲的茎节段作为外植体，腋芽能快速萌发出不定芽体。经60 d的培养，增殖倍数可达3.1～5.4倍。但基本培养基对不定芽的诱导具有明显的影响，MS，B5培养基不定芽增殖率分别为5.4倍与5.2倍，比其它培养基增加23.8%～74.2%。

表2基本培养基对金线莲不定芽诱导的影响（略）

经LSR差异显著性测定，MS，B5培养基之间无明显差异，与1/2MS，KC和VW之间存在极显著差异，且MS，B5培养基上诱导产生的不定芽色绿、粗壮（见表2），表明MS，B5培养基适合作为金线莲茎段不定芽诱导的基本培养基［5］。

2.2.2激素对不定芽诱导的影响激素种类、水平与配比对组织培养快速繁殖在效率存在明显的影响，6-BA、KT和NAA是3种常用生长调节剂，其添加量对金线莲不定芽增殖的影响很大。结果见表3。从表3可知，同为细胞分裂素的6-BA，KT在相同的添加量下对不定芽的增殖效果差异极显著，6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%，表明6-BA比KT更适合金线莲茎节不定芽的诱导。

6-BA的浓度也影响不定芽诱导效果。在添加量小于4.0 mg/L的情况下，随浓度的提高，不定芽增殖率明显上升，添加量为4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0，1.0 mg/L分别提高22.1%和47.6%。当6-BA添加量达到6.0 mg/L时，其增殖率还出现下降趋势，表明本实验条件下6-BA添加的适宜量为4.0 mg/L。

表3激素对金线莲不定芽诱导的影响（略）

生长素NAA对金线莲不定芽的诱导与生长具有明显的促进作用。从表3可以看出，添加了NAA的培养基不定芽增殖量与生长明显较不添加的好，芽体粗壮、色浓绿，其中添加0.5 mg/L的表现最好，添加1.0 mg/L的其次，但二者间差异未达到显著水平；与其它不添加NAA的相比差异达极显著水平。表明在本试验条件下NAA适宜添加的量为0.5～1.0 mg/L。

2.3壮苗培养

2.3.1激素对幼苗生长的影响在金线莲壮苗培养中，NAA较6-BA对促进幼苗生长的影响更为明显。结果见表4。NAA浓度低于3 mg/L时，对幼苗生长有促进作用，随浓度的增加，叶片净增量、发根数和鲜重净增量明显增加，当浓度达到4.0 mg/L时，叶片净增量、发根数和鲜重净增量增加不明显。6-BA在0.5 mg/L情况下，比不加的具有一定的促进作用，但未达显著水平；在浓度为1.0 mg/L，1.5 mg/L情况下，叶片净增量、发根数和鲜重净增量反而减少，但在幼苗基部观察到丛生状不定芽的产生，表明6-BA在浓度高于1.0 mg/L情况下，有利于金线莲不定芽的生成，对幼苗生长不利。

从表4也可以看出，处理9、10号在发根数、鲜生净增量方面较其它处理明显提高，达极显著差异；在叶片净增量方面，除与处理13、14号无明显差异外，与其它处理之间的差异达极显著水平，表明在金线莲壮苗培养中，NAA适宜添加的量为3.0～4.0 mg/L，6-BA 添加量为0.5 mg/L或不加。

表4激素对金线莲幼苗生长的影响（略）

2.3.2活性炭与有机添加物对幼苗生长的影响结果见表5。从表5可知，不同的添加物对金线莲幼苗生长的影响表现不一，香蕉、椰子汁对促进幼苗生长最为有利，叶片净增量、发根数和鲜重净增量均高于其它处理，二者间无明显差异；马铃薯对幼苗生长不利，与其它处理相比均存在极显著差异水平。活性炭对金线莲幼苗生长具有一定的促进作用，在添加0.3%情况下，叶片净增量、发根数和鲜重净增量与对照相比均显著提高，差异达极显著水平；但与香蕉、椰子汁处理相比，其促进幼苗生长的作用不如前二者，除发根数无差异外，叶净增量与香蕉、椰子汁处理差异达显著水平，鲜重净增量差异达极显著水平。同时观察到活性炭、香蕉和椰子汁新发根洁白、粗壮。试验结果表明添加20%香蕉和椰子汁最适宜金线莲幼苗的生长。

表5添加物对金线莲幼苗生长的影响（略）

2.4移栽金线莲试管苗移栽3个月后的植株成活情况见表6。从表6中可以看出，处理7和处理9保持100%的成活率，处理3和处理8的植株成活率也在93%以上，处理1的成活率最低，仅为56%。经LSR差异显著性测定，处理3、7、8、9号之间无明显差异，与处理5、6号差异达显著水平、与处理1、2、4号差异达极显著水平。表明在菜园土中加入粗砂、木屑能明显提高金线莲试管苗移栽的成活率，适宜添加的比例为1份菜园土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份，要求充分混匀。

表6种植基质对金线莲试管苗移栽成活率的影响（略）

3小结

金线莲不同部位的茎间对不定芽的诱导结果存在明显的差异，以不含顶芽和长根的中间段茎节为好，不定芽增殖率达4倍以上。

采用金线莲中间茎节作外植体诱导不定芽萌发时，适宜的培养基为MS或B5＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L～1.0 mg/L，蔗糖浓度为2.5%。

适宜的壮苗培养基为1/2MS＋NAA 3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%），蔗糖浓度为3.0%。3.4 试管苗在充分混匀的1份菜园土＋2份粗砂（2～3 mm）＋1份木屑，或1份菜园土＋粗砂1份＋木屑2份的基质中生长良好，3个月后成活率达100%。

【参考文献】

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第三篇：金线莲

人工培植金线莲方式

因金线连分布于海拔500-1500公尺的阔叶林床，且生长缓慢，所以在栽培中温度、湿度，是成功与否的重要因素。

1、温度

金线连之发育、生长、开花与结果都有一定的温度。在金线连栽培环境中，温度的影响甚巨，温度过低则生长缓慢(9)，高于30℃或低于15℃则不利于生长，若低于10℃，须加设施保温，适宜的栽培温度为20 ~ 25℃，栽培场所温度过高时，可利用遮阴、浇水、加强通风或以蒸发冷却方式如喷雾或使用水墙等方法以将温度降下来。

2、湿度 空气湿度高有住于生长并提高植株鲜重，但栽培介质不能过湿，过湿易导致茎腐病，特别在高温(28-32℃)、高湿下，容易有镰刀菌感染进而发生猝倒病，这是平地夏天不能栽培成功的主要原因。茎腐病(stem rot)之病源菌为Fusarium oxysporum，基腐病(basal rot)为Pythiumultimum，目前以茎腐病发生最为严重，占病害发生之 90%(8)。

3、光度

金线连属于阴性植物，原生于森林内树下半遮阴的地方，因此适合金线连栽培的光度，约为正常日光量的1/3，最忌夏秋中午左右之直射阳光，此将引起日灼损伤叶片，一般而言，若光度高于5000lux 则会使新生叶片白化，低于 1000lux将使植株纤细徒长，一般栽培时可利用75%遮光网双层控制在4000lux 左右，如此除了具有遮阴效果外，也利于湿度的保存及通风。海拔1000公尺左右的地区栽培金线连，由于温度适宜，因此夏天的生产量几乎是平地的两倍，惟冬天来螳劦釭`意寒害的发生，保温设施中尤以隧道式阴棚较易保温，平地栽培场若亦须采用此方式栽培，应将阴棚架高一些，以利于通风。

4、栽培介质

金线连属地生兰又是药用植物，所以必须使用清洁及适宜的栽培介质栽培，适宜的介质除了须具备有良好的透气性外尚须有良好的保水性，目前所使用的介质包括有蛇目屑、碳化稻壳、蛭石、真珠石、腐叶土及水苔等，栽培中依不同的介质混合比例，来调整介质的通气性及保水性，苗株刚由瓶苗移出时最好以2号蛭石栽植，因蛭石系经高温处理，吸水及透气性均佳，且富含镁及钾离子，具蓄积养份之能力，可降低无菌状态移出的苗株遭受病菌为害的机会，并可助于瓶苗适应环境变化的机会，金线连须水而不宜积水，浇水量及次数将会随着植株的发育状况及生长环境而须调整，介质中的肥料以缓效性的有机肥为主。

5、繁殖方式

在组织培养尚未被应用在金线连上时，传统的繁殖方法为分株、扦插、种子播种，其中因为种子收获不易及播种的发芽率低，所以以往大都以分株及扦插的方式繁殖，然而因易受环境的影响，此方式的存活率约为30 ~ 70 %(9)，金线连生长缓慢，以种子播种繁殖而言，必须两年以后才能利用，现在利用茎段培养可以提早采收，而采收适期的决定仍然和栽培时间的长短有密切的关系，至少必须在出瓶栽培十个月(定植后8个月)采收较适宜。

我公司经多年的探索研究，在无菌播种繁殖金线莲方面取得成功，现已形成年产优质种苗10万瓶的规模，为我省人工种殖金线莲打下了很好的基础。

6、种殖基础的选址：根据金线莲生长特性，适宜选择在无工业污染环境，有天然洁净无污染水源，方便喷灌．靠山边阴面处建立生产产地。

7、金线莲种殖管理；金线莲生长速度慢，每个月仅长出１－２叶片，还要不断人工喷灌保持一定湿度，通气等条件。一般每隔一定时间浇灌一次，适量施肥和抗病农药保持金线莲的生长要求。目前，我公司已摸索出一整套人工种殖金线莲的生产管理经验。在气候条件适宜的地区，当年种殖，当年就可采收。

种植金线莲时，通常用腐殖土作为基质。种植前，应将金线莲苗从瓶子里取出，然后用清水把苗上的培养基清洗干，再把苗上的水滴晾干，但时间不可过长，否则令苗脱水就不好了。之后便可进行种植了。

人工栽培金线莲主要是采用大棚栽培。建造大棚应根据金线莲的生长要求，选择在有林有水的山沟，以保证阴凉，有水灌溉，冬季避风保暖，减少散热，保持湿度，且交通便利；大棚的透光度在40％～50％，大棚结构以北高南低的斜面为宜，棚前柱高1.5米，后柱高1.2米，柱距2～5米；顶铺约5厘米厚的茅草，上盖一层塑料薄膜，棚内畦高30～50厘米，畦宽1.2米；也可在棚内搭棚梁，进行立体种植；人工组培苗常年均可栽植，每平方米500～1000株，栽植宜浅忌深，栽后覆盖干净干燥的苔藓，喷洒清水，棚内温度不超过25℃，并注意保湿、保温。云南省和广东均可供应大面积生产所需的组培苗。

田间管理的好坏，关系到金线莲的成活率、生长及产量，应着重做好以下工作：

①松土除草

②施肥 栽植后的生长阶段，通常施用豆饼、猪粪、牛马粪等农家肥，并在每100千克肥液中加少量的硫酸亚铁，以促进叶色浓绿而富有光泽；在生长季节，每隔半个月还可用0.3％尿素加 0.2％磷酸二氢钾溶液喷一次，连喷4次；施肥时切忌污染金线莲叶片，不慎污染，应立即喷清水。

③浇水 适时浇水，提高土壤、空气湿度。④搭盖遮阴棚，调节透光度 棚内透光度的大小与生长发育密切相关，透光以三阳七阴为宜；早春棚上盖草宜稀；4月份透光度可减少到30以下；10月以后可把大棚盖草适当除去部分；

直射光照时间较长或西晒处，可采用围篱、遮阳网等减少透光度。

金线莲栽植后生长4～5个月，株高10厘米以上，5～6片叶，鲜重1～2克即可收获。收获时连根拔起（也可割茎留根再生），抖去泥土，置于阳光下曝晒或用火烘干即成干品。人工栽培的金线莲一般亩产鲜草250～350千克，鲜草每千克售价150元左右，金线莲是一种值得发展的经济植物。

金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药。它在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。经有关部门测定，金丝莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。目前，我国对金线莲的药用研究仅涉及文献考证、栽培、组培及商品调查等。

金线莲全草均可入药，其味平、甘，有清热凉血、祛风利湿、解毒、止痛、镇咳等功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症。金线莲属植物有30多种，一般分布在海拔300～1200米的丘陵地，我国福建、广东、广西、海南、四川、贵州、云南均有野生金线莲。它性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，要求温度18℃～20℃，光照约为正常日照的1/3，最忌阳光直射。其株高8～20厘米，根茎细软，茎圆筒形，先端直立，基部成匍匐状，茎节明显；叶互生具柄，呈椭圆形，叶面有光泽、墨绿色中有金黄脉网，叶背淡紫红色；花为完全花，总状花序具有1～6朵松散的花，花序梗长8～13厘米，被柔毛，花苞片淡紫色，卵状披针形。金线莲除药用外，还是一种极具观赏价值的室内观叶珍品。由于其对生态环境要求严格，加之近年自然环境遭受严重破坏，野生金线莲越来越少，因而商品价格居高不下，鲜草千克价达150元以上，干草千克价达1200～1700元。因此，国内有关单位经过研究实践，自前人工栽培技术已进入推广阶段。

金线莲鲜品是很容易识别的，金线莲是草本植物,高一般在6--8CM，根茎较细，节明显，有几片长约4CM的叶子,比较有特点的是墨绿色叶页面上有金黄色网状脉，在阳光下会闪闪发光，故称金线莲.背面紫红色，主脉3~7条总状花序顶生，花序轴被柔毛，萼片淡紫色。气微，味淡。

现在市面上有一种人工种植的金线莲,图片如下,主要特点就是叶子比较绿,背面是偏向粉红色.根茎较粗.而且页面的线呈银白色。

一、金线莲概况

1、金线莲成份：金线莲是兰科开唇兰属，学名；花叶开唇兰。金线莲全草成份：含强心甙、留醇、多糖等。

2、金线莲药效：几百年来长作为民间用药，在民间传说具有治疗白病之功效，素有“药王”美称。台湾医学专家，将金线莲用于治疗乳癌（MCF-7）起到很好的效果<<福建药物志>>记载其性平，甘，具有清热，凉血，怯风湿。

主治：支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎、急慢性肝病、降血压、小儿急惊风等疑难杂症。

3、金线莲市场状况：金线莲同样存在伴生，共生菌，目前国内有性繁殖还未取突破性进展，各研究机构都采用组织培育试管苗，应用在实际生产中容易造成醉倒病等抗性能力差，所以至今都无法形成规模化生产。近年来由于天然林受到人为破坏及人为大量采集，该物种呈枯绝状态价格直线上升，市场价500元--600元公斤。

二、金线莲的生长特性

野生金线莲一般产于广东、广西、福建、云南、四川、贵州等，日本，斯里兰卡，印度，尼泊尔也有分布。金线莲通常是长在林下潮湿沟边地带，最佳适宜生产温度18-33c，对光照要求不高，喜阴凉，通气性好土壤腐质肥厚地带。

三、人工培植金线莲方式

1、选址：根据金线莲生长特性，适宜选择在无工业污染环境，有天然洁净无污染水源，方便喷灌．靠山边阴面处建立生产产地。

2、人工繁殖方式：采用人工搭建遮阴栅，取到夏天高温防护，一般在遮阴栅内夏天温度可以，保持在３４c以下这个温度是适合金线莲生长的，生产上培植金线莲采用无性繁殖方法，其增值速度和扩蘩量一般为３－５倍，生长周期１１个月可采收鲜草（金线莲）。初次培植，种苗采用各地收购来鲜草金线莲做为种苗培植，第二年再次培植可自供种苗。在遮阴栅内可采用多层式（３－５层）培植，提高土地利用面积。

3、金线莲管理；金线莲生长速度慢，每个月仅长出１－２叶片，还要不断人工喷灌保持一定湿度，通气等条件。一般每隔一定时间浇灌一次，适量施肥和抗病农药保持金线莲的生长要求。

四、投资金线莲培植效益，分析预算

1、简易式：采用简易式木制结构，１亩地。层式可利用培植面积１０００平方米，亩产量可达６００＼市斤鲜草金线莲。第一年所需成本７万元，产值１０万元，当年可回收成本并营利成本的３０％。第二年成本３万元，产值１０万元，获利７－８万元，今后每年和第二年一样。随着规模不断的扩大效益同样成倍增长。

2、永久性：采用永久性铁架式，成本更高，但使用时间长。第一年约高出简易木制结构成本２－３倍，第二年获利成本和简易木制结构相同。

五、金线莲发展方向

随着生产技术不断发展成熟，和品种的优化，今后在培植金线莲可交给农户来完成，公司＋农户模式，把精力重点转移到金线莲的深加工方面上来，公司仅派出技术员分片指导种植金线莲签定金线莲订单回收鲜草，注重培育专业户等方式，在深加工上注重开发保健型饮料，治疗型胶囊等深加工产品。

珍贵药材,别名金蚕、金线兰、金石松、金线虎头蕉、金线入骨消等,为兰科开唇兰属多年生草本植物。在民

间素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。金

线莲还是花、叶观赏价值极高的珍品,其株型小巧,叶型优美,叶脉金黄色、呈网状排列。因此,金线莲具有 广阔的开发利用前景。1 药用价值

金线莲全草入药,在民间常用于治疗肺病、肝炎、肾炎、风湿性关节炎、糖尿病、高血压及神经衰弱,外用 可治肿伤、创伤及毒蛇咬伤。近年来,金线莲在治疗高血压、糖尿病及肿瘤方面,日益引起医学界的重视。

现代分析研究表明金线莲是一种滋补强壮药,含有种类齐全的维生素和较高的多糖,其微量元素含量、氨基酸含量以及8 种人体必需氨基酸含量均高于国产西洋参和野生参[1 ,2]。日本山田博士报道发现了金线莲的抗菌体,具有抗菌和抗癌的神奇功效,尤其是对肺部细胞的效果更为显著。我国的研究者也发现金线莲具有强心甙成分[3] 以及起镇痛作用的生物碱[4] ,为金 线莲强心和止痛功效提供了依据;陈卓等证实了金线莲的降血糖作用[5] ,表明金线莲的降血糖成分主要存在于水提物中[6];动物实验还表明,野生、栽培、组培 的金线莲均有明显的安定、镇痛及抗炎作用,进一步验证了金线莲的临床疗效[7]。2 生物学特性和资源分布 金线莲为陆生兰、多年生草本植物,株高4～18 cm , 根茎细软,茎圆筒形,顶端直立基部成匍匐状,茎节明显,节上长有不定根;叶互生,叶柄基部呈鞘状,叶片卵形或圆卵形,长1.5～3.5 cm、宽1～3 cm, 顶端急尖,基部近圆形,叶面黑紫色、有金黄色的网脉,叶背淡紫红色;总状花序,花序梗长8～13 cm, 具2～6 朵松散的花,花为完全花[8 ,9]。金线莲的花期在不同地区 有所差异,在福建一般为9 月中旬至11 月上旬[10] ,在广东东莞为10 月上旬至12 月上旬。金线莲主要分布于亚洲的日本、中国、斯里兰卡、印度和尼泊尔等国,在我国主要分布于亚热带地区,即台湾、福建、浙江、江西、广东、广西、海南、云南、四川、贵州、西藏等省区,其中以台湾、福建、浙江、江西为主产地[8]。

金线莲属阴性植物,性喜温凉潮湿环境。正常功能叶的光饱和点为5 000 lx , 光补偿点为400 lx[10]。金线莲常生长在人迹较为稀少、群落结构完整的亚热带常绿阔叶林、针阔混交林或竹林下的枯枝落叶层上 或阴湿石头间的腐质土上[ 11 ]。陈裕等调查发现,金线莲在海拔300～1 200 m 均有分布,最适宜的生长环境是植被覆盖较好、乔木层主要建群种为壳斗科、郁闭度 60 %～80 %、林内凉爽、土壤腐殖质较多、相对湿度大的小环境,尤其喜生长于山涧常绿阔叶林下枯枝落叶层、沟边、岩缝、石壁、树兜等阴湿处[ 12 ]。

金线莲种子微小、发芽率很低,其生长对生态环境

要求严格,自然繁殖和生长缓慢,野生金线莲资源非常

稀少;加上鸟兽喜食和人为采摘,以及近年来山地开

发,生态资源破坏,野生金线莲数量锐减,现已濒绝。因此为了保护和利用金线莲这一珍贵药用植物资源, 发展金线莲的人工栽培势在必行。3 栽培技术 3.1 繁殖方法

金线莲的繁殖方法有种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖。金线莲的种子微小,由未成熟胚及数层种皮细胞组成,一般不易发芽;采用扦插法的繁殖系数低,难以形成规模种植[13] ,因此生产上一般都是采用组培繁殖。目前金线莲的组培繁殖已是一项非常成熟的技术,东莞市植物园和东莞市生物技术研究所都可提供大量的组培苗。3.2 炼苗移栽移栽前,把瓶盖苗揭开置于栽植棚内炼苗1～2 周,或采用三步炼苗法炼苗:将未揭盖的瓶苗置于棚内一段时间,然后松盖炼苗几天,最后揭盖再炼苗3～5 天,效果更好13 ]。待组培苗茎由白色转为绿色时,洗净琼脂培养基,用多菌灵400 倍消毒10 min, 按苗重、大小分级后,选壮苗(株高大于3 cm, 茎转绿挺拔不披软根2 条以上)直接定植。苗势较弱的最好在室内用

干净河沙先疾15 天左右,待其充分发根、茎生长粗壮后再移植于室外,可明显提高成活率[14 ]。移栽要选择阴凉天气或凉爽的傍晚进行,夏季高温高湿条件下

不宜移栽。何云芳等的研究结果表明,移栽期以9 月份最理想[ 13 ]。

金线莲的栽培皇要求疏松、透气、无菌、排水和保水性能良好,如苔藓、椰糠、泥炭土、炭化稻壳、腐殖土、河沙等,也可几种皇按一定比例混合以改善皇的通气透水性能。我们用4 份泥炭土、2 份椰糠、4 份蛭石配制的混合皇种植效果较好。此外,1 份蛭石+1 份腐殖土[ 14 ]、5 份蛇木屑+1 份蛭石、3 份蛇木屑+1 份腐殖土+1 份炭化稻壳也是较好的栽培皇。植前皇要用多菌灵400 倍或托布津600 倍消毒[15 ]。种植时植株插入皇内1～2 个节,每m2 植300～500 株,植后淋透水。3.3 栽培环境

模拟原产地环境是金线莲栽培成败关键之一。人工栽培金线莲主要是采用大棚栽培,也可在林荫下栽培。地点最好选择在有林有水的山沟,以保证阴凉和

灌溉。大棚栽培要注意通风透气,调节好温湿度和光照强度, 适宜的温度、湿度、光照强度分别为20 ～ 25 ℃、76 %～85 %、2 600～3 800 lx[15] ,冬季覆膜保温, 夏季喷雾或水帘降温,遮阳网透光度为30 %左右。

3.4 肥水管理

施肥以迟效性有机肥为主,如豆饼、猪粪、牛马粪

等农家肥。有机肥经沤制发酵、充分腐熟后兑水施用, 施后立即喷水清洗茎叶,以保持茎叶干净。此外,还可配合叶面施肥,用0.3 % 尿素加0.2 % 磷酸二氢钾溶液喷施。黄德贵等[ 15 用高效稀土1 600 倍液喷施,取得了显著的增产效果。移栽后1 个月左右开始施肥:叶面施肥每月喷1 次,喷至叶面滴水为止;有机肥可2 个月施1 次,每667 m2 施50 kg 左右。金线莲植株含水量高达80 %, 因此从移植至采收都要注意保持皇湿润[ 16 ]。浇水施肥次数还与皇有关,如河沙保水保肥力弱,应少量多次施用,而椰糠、泥炭土等则反之。3.5 病虫害防治

金线莲病虫害发生大多由高温多湿、通风不良及受光照与栽培地不清洁寺,应设法克服这些不良因素和防除杂草。金线莲在炎热季节易发生茎枯病,春末夏初易发生立枯病、猝倒病,因此在病害高发季节, 可用农用硫酸链霉素1 000 万单位或代森锰锌200 倍、多菌灵1 000 倍等轮换喷施,每15 天喷1 次[15 ]。虫害主要是蛞蝓和蜗牛,5～6 月尤为严重,可用蜗牛药洒于苗床及四周防治[ 16 ]。金线莲栽植后,在管理好的条件下生长5～6 月, 株高即可达到10 cm 以上,叶片5～6 片,鲜重1g 左右,收获时可视苗情留茬重发。4 结语

金线莲是我国一种重要的民间药用植物。目前国内对金线莲的研究主要是文献考证、资源调查、生物学特性观察、组培、栽培及营养成分分析和简单的药理实验,而在药用有效成分的分离与鉴定、制剂鉴定、炮制、药理及临床等方面缺乏深入的研究报道。由于药性研究的工作尚未完备,金线莲仍属于青草药的地位,其科学研究与产品开发尚有很大的空间,建议医学界、生物研究界加大投入,促进金线莲的药物学研究,使之成为大众化的医学药物。同时制定金线莲的标准化栽培技术规程,促进金线莲的规模化、产业化生产,为金线 莲的药学研究和药物生产提供原料保障。

第四篇：魔芋组培良种扩繁技术研究及推广应用工作报告

魔芋组培良种扩繁技术研究及推广应用

工

作

报

告

1、项目背景

魔芋是21世纪的朝阳产业，魔芋产品市场短期内始终处于供不应求状态。恩施自治州依靠得天独厚的自然条件、区位优势、政策支持和廉价的劳力、土地资源，给魔芋产业发展带来了千载难逢的大好机遇。

魔芋作为无性繁殖作物，长期种植必然导致种性退化、抗性下降、病害逐年加重，并成为制约魔芋种植业乃至整个产业发展的瓶颈，一般年份减产二、三成，严重年份减产60%以上，甚至绝收。为了有效遏止病害发生，保障魔芋产业持续发展，最根本最有效的措施和办法是选育新品种，并通过组织培养脱去自带病原，实现种芋的提纯复壮，从而增强抗性、提高产量和繁殖系数来满足生产发展的需要。

恩施自治州农科院选出育省审命名的清江花魔芋及配套组培技术已经研究成熟，为了完善新品种三级繁育体系（育种单位组培原原种，科研开发单位生产原种，县级农业部门或魔芋企业生产良种），加速组培良种推广步伐，我们在恩施州农 1 科院及建始金璐、农泰、花果山公司等魔芋企业支持下，于2007年-2009年开展了魔芋培良种扩繁技术研究及推广应用。

2、研究内容

为了探索魔芋组培良种扩繁技术，2008-2009年开展了不同栽培方式、不同栽培密度、不同覆盖方式、不同商品肥料、高科技产品应用试验，为组培良种推广提供了科学依据。

2007年以来依托魔芋企业，组织农户示范推广组培良种1000亩，示范推广的同时又开展了组培良种与常规自留种对比示范研究。

3、研究结果

3.1 组培良种栽培方式上应以间套栽培为主，采用玉米间套比单作（魔芋净作）软腐病发生及损失下降80%，单产增14%左右，繁殖系数高1倍多，纯收入（含玉米项）亩增1300多元。

3.2 目前25克左右大小组培原种的最佳种植密度是8000-10000株/亩。

3.3 组培良种采用稻草及玉米秸杆覆盖垄面软腐病发生损失下降近40%以上，单产增10%以上。

3.4 组培良种所用商品肥料主选40%沃夫特硫型控释复 2 合肥以替代目前生产上大面积推广的40%烟草复合肥（含氯1.5%），亩增魔芋200多公斤，增幅20%以上。

3.5 组培良种使用高科技产品防病、增产效果更突出，供试中的保水剂、液态地膜防病效果高于60%，增产幅度20%以上，值得大力推广，抗蒸腾剂、松土精增产10%以上，也具应用价值。

3.6 组培良种与常规自留种对比示范，软腐病下降85%以上，单产增2100多公斤，农户大面积推广平均增产也达到1520公斤，在除去多投入的种芋成本后亩纯增产值还有3800多元。

4、创新点

4.1 优良品种应用高科技产品提高了科技含量。4.2 本项研究技术实用性好，可操作性强，生产上推广易收到立竿见影效果。

5、推广应用成果

2007年以来已在花坪、红岩、官店乡（镇）推广应用组培良种1000亩。

6、效益分析 6.1 经济效益

推广组培良种生产种芋经济效益突出，平均每亩增加产种 3 量1520kg，除去生产成本后还有纯增产值3840元，全县所推广示范的1000亩组培良种就为芋农增收384万元。建始县魔芋种植8万亩，其中基地种芋面积2万亩，如果按照1/6比例建组培良种扩繁基地3300亩以满足基地种芋用种需求，可为农民（含种芋生产者）直接增收1267万元。

6.2 社会效益

组培良种扩繁技术研究及推广应用，加速了种芋基地良种更新换代，充分发挥了良种的增产作用，确保了魔芋产业的可持续发展，使农民能稳定增收，企业能持续增效，财政能不断增长，社会效益十分明显。

6.3 生态效益

推广应用组增良种及配套技术，不仅能解决种性退化、减轻病害发生损失、提高魔芋产量和产品质量，而且还能改良土壤、改善农田生态、提高土壤肥力和生产能力、提高土肥水资源利用率、减少资源浪费，生态效益极其良好。

二OO九年十二月

第五篇：组培与快繁实习报告——西北农林科技大学生物技术

一、时间：2008年10月14日——2008年10月15日

二、地点：陕西省眉县汤峪太白山森林公园北10公里（西宝高速太白山站南3公里处）

三、基地指导老师：

四、学校指导老师：

五、西部兰花生态园实习基地简介 “西部兰花”生态园位于陕西省眉县境内，是在陕西省苗木繁育中心的基础上建成的，总面积4080亩。现拥有水上娱乐垂钓园、高科奇观园、珍稀树种观赏园、百果采摘园、花卉盆景园、疏林休闲娱乐园和科普教育基地7个园区39个观光景点。拥有各类自动控温40000余平方米，国内一流植物组培楼2300平方米，科研培训楼3000平方米，年可“克隆”植物6000万株；育苗生产线1500平方米，气调冷库2000平方米，水上垂钓娱乐园350000平方米；目前已引进繁育世界各国名优树种420多种2100万株；蝴蝶兰、大花蕙兰、红掌等世界名贵花卉160余种在园内安家落户。580余种世界名优花卉苗木品种使园内四季常青、三季有花；草地水塘与亭台轩榭等建筑小品相映成趣，将生态园装扮得清新秀丽、质朴自然，被誉为中国西部农业的绿色明珠。中心为陕西省唯一的“全国花卉生产示范基地”和“全国特色种苗基地”，是“全国无检疫对象苗圃”、“全国农业生态旅游示范点”、“国家级引智示范推广基地”和园林绿化二级资质企业。是集观光旅游、科普教育、苗木花卉生产示范为一体的高科技林业生态园。

六、实习内容

（一）1.时间：2008年10月14日上午

2.地点：西部兰花生态园1号、2号、3号、4号、5号温室3.基地指导老师：

4.学校指导老师：5.实习内容1）1号温室2）2号、3号温室2号、3号温室为红掌引进及工厂化生产温室，位于工厂化育苗分区中部，为V96文络型8连栋温室，面积6500m2，内有降温、加温、外遮阳、微雾环绕风机、滴灌、施肥、水处理系统，配有移动式苗床，计算机控制。主要用于名贵花卉生产。红掌的管理：红掌性喜温暖、潮湿和半阴的环境，喜阳光而忌阳光直射，不耐寒，喜肥而忌盐碱。浇水是pH值控制在5.2至6.1之间最好。花与叶数量的差别最重要的因素是光照。温度红掌生长最适宜温度为20℃至28℃，最低不低于15℃，最高不超过30℃。在高温季节，通过开启湿帘及通风设备来降低室内温度。湿度红掌工厂化生产，关键是保持相对高的空气湿度，一定的湿度有利于红掌生长。

3）4号、5号温室4、5号温室，总面积4500平方米，圆拱形双层充气膜连栋温室，覆盖材料为以色列进口薄膜，整个温室有六大系统组成：温室主体，外遮阳系统，温帘风扇降温水处理系统，供暖系统，补光系统。该温室主要用于生产红掌、凤梨等高档花卉。

4）进入温室前消毒操作规范每次进入温室前，需将脚在门口消毒垫上来回擦拭数次，将手在消毒盆中清洗干净；不要用手随意触摸在温室内用手触摸花株及设施，以防花株感染病菌；不要把杂物丢弃在温室内；不要在温室内吃东西；不要把其他植物及其他外来物品带进温室。5）参观花卉的生产参观的主要花卉有：粉冠军、白冠军、凤梨、红掌、西部神龟、维它、改良红皇后、茱萸、紫背、白玉子等花卉。了解其生产条件，包括消毒、控温、施肥、浇水要求。6）实习操作内容：红掌的移苗，修剪，搬运原产于南美洲热带雨林潮湿、半阴的沟谷地带，通过引种改良和用光、温、水调节系统的大棚栽培，现在欧洲、亚洲、非洲皆有广泛栽培。植物界 被子植物门 单子叶植物纲 天南星科Araceae，花烛属Anthurium。生长习性：红掌为多年生常绿草本花卉。性喜温热多湿而又排水良好的环境，怕干旱和强光暴晒。红掌盆栽材料常见的有四种：组培苗、切株、穴盘苗和盆栽苗。

主要内容：将一批已经开花的红掌，从移苗床上移到另一个已经消毒的移苗床上；将一批较小的红掌根据其生长进行筛选分成不同的批次。消毒：配置一定浓度的高锰酸钾消毒液，喷洒到空苗床上。注意不要喷洒到临近的红掌的叶面上。移苗：用盆搬移红掌，搬移时要小心，注意不要伤害到红掌的花、叶。筛选：根据红掌的长势，将其长势相同移到一个移动苗床上，以便于管理。

凤梨习性：喜温暖湿润和阳光充足的环境。喜疏松、透气性佳、排水良好、微酸性土壤。栽培管理：夏季适温为25～30℃，冬季适温为15～18℃，最低温度不能低于12℃。气温高时，可给植株喷水。柔和的阳光使叶片更加美丽。生长季节可大量浇水，同时在莲座叶筒中灌些水。每次浇水后，待盆土较干时再浇第二次，不可过量。冬天盆土应稍干一些。5～9月生长旺盛期，每两周施一次肥。除此之外，还应增施磷钾肥两次。

小组工作：为红掌换盆，并添加培养基质（肥料土壤）

（二）科研部实习科研部主要是用于苗木的引种、实验、推广。现建有樱桃园、核桃园、杏园、李子等示范园。

1.时间：2008年10月27日上午 2.地点：西部兰花生态园1号、2号、3号、4号、5号温室3.基地指导老师：

4.学校指导老师：

5.实习内容（1）樱桃园实习

该园种有7个品种的樱桃，主要用于对引种的樱桃的生长、结实等性状的记录，以便于进行推广。为提高光合利用率，合理利用空间，在樱桃园中套种了植株小、快速生长期与樱桃不能竞争、根系不发达、有经济性作用的植物，如该园种植的是白菜、萝卜等蔬菜。为防止地表水分蒸发，在樱桃树附近种植了三叶草，一方面用于固氮，另一方面可以作为绿肥使用。

樱桃园中有引种三年的植株，还有引种7年的植株。樱桃树三年长成，第四年开始结果。树形的管理要求是：主干分型，水平面摆布。在防治病虫害方面，主要采取喷药、树干涂白。春季可以采取摘取虫害的叶片，防治虫卵。在蚜虫发生的主要时期喷洒农药，进行化学防治预防。

2、修剪a.修剪应注意事宜 樱桃的枝分为发育枝和结果枝两类，幼树上发育枝较多，其前端叶芽延伸生长，扩大树冠，下部腋芽抽生结果枝。进入结果期后，大部分一年生枝顶芽为叶芽外，腋芽多为花芽，称为结果枝。结果枝依长度分为长果枝（15～20厘米）、中果枝（5～15厘米）、短果枝（5厘米左右）、花簇状果枝（1～2厘米）。从结果能力看，长果枝座果力较差，一般在40%左右；中果枝结果能力因品种而不同；短果枝座果率高，果实品质亦佳；花簇状果枝是盛果期旺树上的主要结果枝，座果率能达80%左右。果实品质最佳，而且寿命长，可连续结果10～20年。结果枝和花簇状果枝是产量形成的基础。中国樱桃、酸樱桃在初果期，长、中果枝的比例大，而在盛果期则短果枝和花簇状果枝为主。

c.结果树的修剪 常在采果后进行夏季修剪。采用疏剪去除过密过强、扰乱树冠的多年生大枝，进行树冠结构调整，促进花芽形成。在疏除大枝时，注意伤口要小，要平，以利尽快愈和。疏除一年生枝时，可先在其基部腋花芽以上剪截，待结果光秃后，再疏除。冬季修剪时，应注意对骨干枝先端和短果枝的2～3年生枝段进行适当回缩，以刺激营养生长和新果枝的不断形成，防止结果部位外移和树冠内部光秃。

d.衰老树的修剪 主要任务是及时更新复壮、利用生长势强的徒长枝来形成新的树冠。对骨干枝先衰弱而无结果能力的，要及时回缩。利用隐芽回缩更新时，中国樱桃的隐芽寿命约5～10年。为了回缩有枝更新，回缩处最好有生长较正常的小分枝，这对树体损伤较小。回缩修剪后发出的徒长枝，选择方向、位置、长势适当、向外开展的枝来培养新主枝、侧枝。过多的应疏除，余者短截，促发分枝，然后缓放，使其形成结果枝组。大枝更新时，亦应在采果后进行，以免引起伤口流胶 病虫防治 危害樱桃树的主要病虫害有桑白蚧、刺蛾、桃红颈天牛、苹果透翅蛾、金缘吉丁虫、金龟子、梨小食心虫和炭疽病、樱桃叶斑病、细菌性穿孔病、流胶病、根颈腐烂病等，应采取综合措施加以防治。在冬季修剪时，剪除并烧毁病虫枝，同时在落叶期喷布波美5度石硫合剂一次；在春梢叶片停长前，喷40%乐果1200倍液加70%甲基托布津800倍液一次；7～8月喷50%马拉松乳剂1000倍液加65%代森锌400～500倍液一次

2）核桃园实习核桃园基因库，占地面积十亩，搜集保存优良核桃品种资源的基因库，可为试验示范、推广、是优良种质资源，现有辽、辽

3、香菱、林

1、林

2、商洛1号、商洛2号、商洛3号、绿波、鲁光、灵石8号、晋龙、美国黑核桃等26个品种。该核桃园用于选育新品种、优良新品种，有目的的做杂交。

嫁接 嫁接在3月下旬至4月上旬进行。首先采集接穗，3月中旬在芽即将萌动时，采集生长健壮、无病虫害的1年生枝作接穗，采后分品种进行湿沙贮藏，4月上旬待核桃砧木芽萌动开始嫁接。砧木要求粗度在1．5cm左右，距地面l0cm处进行嫁接。核桃嫁接时有伤流，不易成活，嫁接前12小时内必须在根际部刻伤至木质部“放水”，再行劈接或插皮接，接后用塑料条绑紧伤口，接穗上端用漆涂抹防止水分蒸发。成活后及时除萌松绑，松绑时间以新稍生长20cm以上时进行为宜。待嫁接苗长至40cm左右时，用小竹杆或木棍固定，以防风折。效率最高、成活率最高的嫁接方法为“方块芽接”。嫁接时间华北地区5月20日至6月20日；选取接穗，用嫁接刀切割成长3~4公分、宽0.8公分左右的方块，掰下，然后在地面以上30公分左右当年生茎切除与芽片相当表皮，并向下切割出放水口；将芽片放入切口，尽量保持下部和一侧紧密结合；用薄膜严密包扎，露出芽；接口以上留3片复叶剪砧；以后随时抹除萌芽，促使嫁接芽萌发；嫁接芽15公分时，去掉帮条。成活率一般达到80%以上。

3）李子园实习实习项目：李子的修剪

技术要领：幼树及初结果树的冬季修剪：此期修剪应兼顾整形和结果两个方面，对主、侧枝延长枝要轻剪长放，一般留全枝长的2/3进行短截。疏除密挤枝、多杈枝、重叠枝和强旺枝，并控制竞争枝、直立旺枝的生长。对生长中庸、角度比较开张的发育枝应缓放，促其萌发中短枝，增加结果枝的数量，成花或结果后及时回缩培养成结果枝组。中、短枝角度大，成花容易，要尽量予以保留，以利结果。对生长较弱的幼树宜适当短截，疏除过密、细弱枝，多保留健壮枝，拉平直立旺枝作为辅养枝，以促发粗壮的中、短果枝。

盛果期树的冬季修剪：主要任务是调整生长和结果的关系，维持树势，延长盛果期结果的年限。修剪时可根据枝条长势、树冠各部位的空间情况，适当疏密、截弱，以保持稳定的结果部位和生长势。对各级延长枝，一般进行中度短截(剪去当年生枝的1/3～2/3)，使其继续抽生健壮新梢。对衰弱的主枝、侧枝、多年生辅养枝、结果枝组、下垂枝，在有强壮枝的部位进行回缩更新或抬高角度，使其恢复生长势。对树冠下部及内膛枝，要注意及时更新复壮，使其不断产生新的健壮结果枝。树冠上部和外围的过密枝、强旺枝，要进行回缩或疏除，以改善内膛光照。杏树成枝力弱，对各部位的结果枝组、长果枝和长势中庸的发育枝，只要不过密，一般不要疏除，可短截促发少量长枝，使中下部抽生中短枝交替结果。

衰老期树的冬季修剪：衰老期杏树各延长枝生长变弱，新梢短，骨干枝开始下垂，树冠内部开始光秃，几乎只在树冠表面结果，产量降低。修剪的主要任务是更新骨干枝和枝组，增强树势，延长经济结果年限。要利用中下部角度小、生长健壮的背上枝换头。或在比较直立的枝段回缩，促使隐芽萌发更新。对位置适当的徒长枝，要利用其培养为骨干枝和结果枝组。对结果枝组和结果枝，本着去弱留强的原则，选留壮枝、壮芽进行更新修剪。树势极度衰弱、更新难以奏效的，要加强肥水管理，对主侧枝及大枝组在10～15年生部位进行全树大更新，一次完成，当年可萌发大量新梢，通过夏季抹芽、摘心和冬季整形修剪，第2年即可开花结果，恢复一定的产量。

（三）生产实习1.时间：2008年10月27日上午2.地点：西部兰花生态园1号、2号、3号、4号、5号温室3.基地指导老师：4.学校指导老师：5.实习内容

1）树的造型主要用于树的造型的是：橡树、黄金槐、大荔花、红玉兰、接骨木。

2）红叶李的扦插 技术要领： 苗圃地选择和整地苗圃地应选择排灌和交通运输方便的地方，土层要求为深厚、肥沃、疏松的沙壤土。整地前，每亩地均匀撒施1至1．5吨腐熟农家肥，并用50％多菌灵1500克撒于土中，进行土壤杀菌消毒；再用4000克50％锌硫磷颗粒剂撒施杀灭地下害虫。然后深耕、细耙、整平土地，清除杂草废农膜等杂物，做畦。畦长根据圃地而定，畦宽1米；畦与畦之间留沟，沟宽0．3米，深0．2米。做好后稍加镇压，将畦面中耕耙平，准备扦插。

提高紫叶李扦插繁殖成活率。一定要在小雪节气前后挑选插条，插条长度应在18厘米以内，顶芽上保留2厘米的保护层。之后于清水中泡12小时，用沙土混合，在深度不超过70厘米的地窖中储藏。储藏时注意让插条下部朝上，防止水分、养分流失。使用生根剂会导致插条中毒，成活率大幅降低，一般在20％以下。

扦插时间最好在惊蛰前后，早了生长慢，成活率低；晚了插条高度不一致。为了保证温度，苗床上要铺一层地膜。扦插前，先用手指或木棍把薄膜捅破，以防直接扦插脱落的薄膜包裹插条底部。扦插时，插条要垂直苗床插入，不能倾斜。扦插之后浇第一遍水，然后注意培土，尽量保证所有插条第一个芽都刚刚露出苗床。春季地下害虫非常多，可用3911防治，每亩地用药1至2公斤，兑水后随第二遍水浇施。

6.参观苗木花卉温室繁殖示范区

该区位于推广区中部，占地面积12亩。主要设施有：三连栋喷雾大棚6座，3240平方米，钢架保温育苗温室一座，700平方米。日光温室4座，1060平方米。利用三种不同形式的温室设施，采用林业科技手段，对中心培育、引进的观花、观叶、观果的珍贵种苗进行繁殖，示范栽培。

（四）组培部实习1.参观组培部的设置

配药室；灌装室；中转储藏室；接种室；培养室；蝴蝶兰培养室。

2.蝴蝶兰的接种、培养 1）超净工作台的紫外消毒20min2）超净工作台用酒精喷雾消毒，擦拭。擦拭从里往外，从上往下。超净工作台侧壁用从里往外擦拭。

3）剪刀、镊子