《现代工业发酵调控学》课后习题[五篇范例]

第一篇：《现代工业发酵调控学》课后习题

《现代工业发酵调控学》课后习题

《第一章》

1，不同学科对微生物生长的定义的着重点有何不同？什么是分化？

答：细胞生物学家关注单细胞的形态变化，特别是细胞的分裂方式；而生化学者对成千个与生长有关的酶反应，动力学及代谢途径感兴趣，认为生长是所有化学成分有秩序的相互作用的结果。生物物理学者则认为细胞是热力学不平衡的开放系统，与其周围环境进行物质与能量的交流，特别是在熵的溢流上。生化工程师把生长看做是生物催化剂数量的增长，通常以质量和细胞数目的增长来表达细胞的生长。分化是生物的细胞形态和功能向不同的方向发展，由一般变为特殊的现象。

2，有些霉菌，如产黄青霉在培养液中生长过程，其菌丝会形成菌团，有哪些因素影响菌球 的松紧？

答：生长过程中添加易利用的碳源，如葡萄糖，加快搅拌，供氧改善能使菌团变得密实；反之，用乳糖、搅拌缓慢或供氧跟不上，则菌团变得疏松。

3，微生物生长可以分为几期？停滞期的长短由哪些因素决定？

答：微生物生长可分为三个时期，延滞期、对数生长期、静止期。停滞期的长短影响因素有接种量、接种种子生长期、种子培养基与发酵培养基的相似度、培养基的营养富集度等。4，生物量的测定为什么对次级代谢产物的生产尤为重要？对谷氨酸，青霉素发酵菌浓的测 定，您倾向于用什么方法，说出你的理由

答：因为生通过长量的测定可以判断菌体代谢情况，从而控制菌体的发酵得到所需发酵产物。对谷氨酸、青霉素发酵菌浓的测定，可用比浊法。操作简便、快速有效、精密度高。8，有哪些因素会影响微生物的生长

答：物理环境，如温度搅拌、空气流量、渗透压、水活度；化学环境，如pH值、溶氧度二氧化碳、碳源、氮源、有机酸等。

9，温度对微生物的生长影响表现在哪些方面

答：温度会影响没得活性，从而影响微生物的生长。温度过高会使酶失活，低温，酶活性弱，不同的温度，可能改变酶的合成种类，从而改变微生物的代谢形式。

10，水的活度用什么表示？它对微生物比生长速率有何影响？

答：水活度用同一温度下溶液蒸汽压与纯水蒸汽压的比值表示。在一定范围内，比生长速率随水活度增大而增大，超过一定界值时，比生长速率随水活度继续增大而迅速下降。13，生长速率对细胞大小和 DNA 包内含量有何影响

答：一般情况下，微生物生长速率越快，细胞个体越大，DNA含量下降。

14，生长得率是什么意思，有哪些表示方法，比较他们的优缺点

答：生长得率是是假定所利用的基质与生成的细胞之间的固定化学计量关系。表示方式有：分子得率系数、碳转化效率、以电平均数为基准的得率、基于热的产生的得率、以耗氧为基准的得率和基于克分子ATP消耗的得率。

15，生长得率取决于哪些因素？

答：①碳源的性质 ②基质的分解代谢途径 ③提供任何复杂基质，菌便省略若干合成途径 ④同化其他养分 ⑤不利于离子平衡的抑制性物质 ⑥生成ATP反应的效率的变化 ⑦菌的生理状态 ⑧微生物的遗传特性。

17，描述菌丝顶端的生长机制。

答：大多数菌丝顶端有泡囊聚集，泡囊内有细胞壁溶解酶和细胞壁合成酶，当生长停止时，泡囊在顶端消失，并分布在次顶部生长区。泡囊内的细胞壁溶解酶溶解细胞壁，使细胞壁局

部取得可塑性，细胞壁由于原生质的压力而扩展，泡囊与质膜融合，释放出细胞壁合成酶，合成新的细胞壁。

《第二章》

1，糖的分解代谢主要通过哪些途径，由葡萄糖分解为 CO2 和 H2O 可以得到多少 ATP

答：糖的分解代谢主要有糖酵解途径（EMP）、己糖单磷酸途径（HMP)、三羧酸循环（TCA）、ED、磷酸解酮酶途径（PK）。由葡萄糖分解为 CO2 和 H2O 可以得到30个ATP。

2，微生物是如何利用淀粉和纤维素的？

答：将淀粉和纤维素分解成葡萄糖，再通过糖代谢的各种途径进行分解代谢。

3，莽草酸途径是用来做什么的，其终产物是怎样合成的，其中间体是哪些初级代谢物的次 级代谢物 ？

答：莽草酸途径是用来合成芳香族氨基酸的途径。

4，丁二胺又称腐胺，在生理学上有何意义

答：它可以调节细胞的渗透压，保证细菌细胞内部的离子强度大致不变。培养基的渗透压增加引起腐胺的迅速排泄和钾离子的吸收，使细胞渗透压也增加，离子强度保持大致不变。5，在脂肪酸合成中生物素起什么作用，试述其作用机制

答：脂肪酸生物合成反应是有乙酰CoA羧化酶催化的。而无任哪一种羧化酶，都需要与生物素共价结合形成碳载体，在能启动脂肪酸合成反应。

《第三章》

1，试举三个例子，说明微生物代谢是如何高度调节的答：①微生物生长在含有单一有机化合物为能源的合成培养基中，所有大分子单体合成速率通大分子的合成速率是协调一致的 ②任何一种单体的合成，如能从外援获得并能进入细胞内，单体的合成自动终止，参与反应的酶的合成也停止 ③微生物只有在某些有机质存在是，才会合成一花这些基质的酶。

2，随生长速率的提高，细胞平均质量，DNA,rRNA,总 RNA 含量会发生什么变化

答：随着生长速率的提高，细胞平均质量下降，DNA含量下降，rRNA含量下降，总RNA含量下降。

4，JOCOB-MONOD 操纵子假说如何解释诱导酶的合成机制

答：当没有诱导物时，阻遏基因产生阻遏蛋白与草种基因结合，阻止结构基因转录，但有诱导物存在时，诱导物会与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，结构基因得以转录产生诱导酶。5，如何才能绕过微生物的固有调节机制，大量生产诱导酶？试举两种你认为可行的富集方 法 ？

答：①在诱导物为限制性基质的恒化器中筛选：将诱导型微生物放在含诱导物浓度很低的恒化器中培养，这有利于不需要诱导物的组成型突变株的生长，而诱导型亲株的生长缓慢逐渐被恒化器淘汰，已达到富集组成型突变株的作用。

②基因工程：利用基因工程技术敲除调节基因或使调节基因失活，使无需诱导物就能大量产生诱导酶。

6，什么是分解代谢物阻遏，其生长和溶氧曲线有哪些特征性的变化

答：指培养基中某种基质的存在会阻遏细胞中其相应酶的合成速率。其生长会出现二次生长，即阻遏被去除后，微生物会再次生长。溶氧先下降、稳定、再上升再下降。

7，cAMP 在分解代谢物阻遏作用中起什么作用

答：cAMP可以促进可诱导酶的大量合成，cAMP可以与cAMP-受体蛋白结合形成cAMP-CRP复合物，此复合物与启动基因结合，能增强基因对RNA酶的亲和力，从而增加转录的频率。cAMP-CRP复合物在P上的结合时RNA集合没结合到P上所必需。

8，试举一个例子说明耐分解代谢物阻遏的突变株筛选原理

答：在葡萄糖—脯氨酸琼脂平板上筛选耐分解代谢的脯氨酸氧化酶的菌株，因脯氨酸氧化酶的合成受葡萄糖的阻遏，野生型擒住不能生长在这样的培养基上，只有耐分解代谢阻遏的突变株才能从氧化脯氨酸中获得所需氮源。

筛选原理：以一种能引起分解代谢阻遏的基质作为唯一氮源，用含这种氮源的培养基筛选精油变得菌株。

9，什么是反馈抑制和反馈阻遏，试比较诱导和反馈阻遏作用的分子水平机制

答：反馈抑制是指末端代谢产物抑制其合成途径中参与前几步反应的酶活性；反馈阻遏则是指末端代谢产物阻止整个代谢途径酶的合成作用。

反馈抑制中，末端代谢产物与阻遏蛋白结合，激活阻遏蛋白的活性，从而使与操纵基因O结合，阻止该酶的合成。反馈阻遏中，末端代谢产物阻遏合成途径中所有的酶的合成。10，试举例证明两种你认为可行的避开末端代谢产物反馈调节的方法

答：①改变培养环境条件来限制末端代谢产物在细胞内部的累积，如在谷氨酸发酵是，采用连续型培养，边加入新鲜发酵液边流出产物。②从遗传上改造微生物，使之对末端产物反馈调节不敏感。

11，叙述用结构类似物筛选耐末端代谢产物调节的突变株的原理

答：正常情况下，细胞中过量末端代谢产物（如氨基酸A）会抑制与其生物合成途径的酶。氨基酸A可用于蛋白质的合成，氨基酸类似物A¹具有元计算A一样的调节作用，但不能用于合成蛋白质。经诱变处理的野生型菌株在含有氨基酸类似物A¹的培养基中培养时，绝大多数不能合成氨基酸A的细胞死亡，只有那些对类似物A¹不敏感的抗性突变菌株能合成氨基酸A。

12，叙述分支代谢途径的调节方式，同工酶，协同反馈，积累反馈

答：同工酶：在一个细胞中催化同一反应的酶

协同反应：几种分支代谢产物都存在时才能抑制没得活性

积累反馈：积累作用

13，赖氨酸生产菌株同非生产菌株在赖氨酸合成的调节方式有什么不同

答：

14，为什么生物素浓度对谷氨酸发酵的成败至关重要

答：生物素能改变谷氨酸生产菌的细胞膜通透性，生物素浓度低，能使细胞大量分泌谷氨酸。15，不同谷氨酸生产菌种的两个共同特征是什么

答：α-酮戊二酸脱氢酶的缺乏和对生物素的需求。

16，为什么氧不利于酵母 EMP 途径而有利于 HMS 途径

答：氧可能钝化EMP途径的酶，从而降低EMP途径的物流，高浓度的氧对HMS途径有利。在有氧条件下，EMP途径所需的辅因子被呼吸系统抢走，从而造成葡萄糖利用速率与EMP途径总的运行速率下降。

17，糖代谢中的巴斯德效应和克列博特里效应有何不同 ？

答：巴斯德效应是对发酵活性的抑制，酵母在有氧条件下细胞得率比厌氧下高，氧抑制酵母糖发酵生成乙醇； 克列伯特里效应是呼吸酶合成的抑制，有氧条件下葡萄糖发酵为乙醇。18，溶解氧对于三羧酸循环的酶和呼吸链的酶有什么影响？

答：(P129)

19，什么是代谢工程，代谢流分析，代谢控制分析

答：代谢工程：通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性或运用重组DNA技术来创造新的化合物。

代谢流分析:一种计算流经各种途径的物流技术，用于描述不同途径的相互作用和围绕支点的物流分布。

代谢控制分析：通过一途径的物流和以物流控制系数来表示的酶活之间的关系。

《第四章》

1，次级代谢物及其生物合成有哪些特征

答：次级代谢产物是某些微生物在生命循环的某一个阶段产生的物质，一般是在的产生菌生长终止后合成的。

①不在产生菌生长期合成，而在随后的生产期形成 ②种类繁多，含有不寻常的化学键 ③一种菌可以产生结构相近的一簇抗生素 ④一簇抗生素中各组分的多少取决于遗传与环境因素⑤一种微生物的不同菌株可以产生分子结构完全不同的次级代谢产物 ⑥在生长期向生产期过渡时，菌体在形态学上会发生一些变化⑦次级代谢产物合成是由多基因控制的代谢过程。2，什么是抗生素生源学，您认为哪些见解叫符合实际

答：又称为生物发生学，是研究一些天热物质发生、存在的原因。以及它对宿主、环境的作用的学科。竞争需要、调节功能、代谢维持产物、进化遗留等见解符合实际。

3，试举例三个初级代谢和次级代谢相连的中间体

答：莽草酸、α-氨基己二酸、丙酮酸

4，如何区分基质，中间体，和前体

答：基质：培养基中能被微生物吸收利用的物质 前体是指加入到发酵培养基中的某些化合物，它能被微生物直接结合到产物分子中去，而自身结构无多大变化，有些还具有促进产物合成的作用； 中间体是指养分或基质进入一途径后被转化为一种或多种不同物质，它们均被进一步代谢，最终获得该途径的终产物。

5，初级代谢的基本中间体通常是经什么样的修饰后才能用于抗生素的合成答：①碳架的少许改动 ②分子氧化还原水平的改变 ③环化形成杂环 ④消旋化

6，前体有哪些作用，一般通过哪些方法研究作用？

答：①起抗生素建筑材料作用 ②诱导抗生素生物合成作用。

7，前体是如何从初级代谢向专门的次级代谢合成途径的答：通过次级代谢途径的第一种酶

8，脂肪酸与聚酮化物如红酶内酯的合成有哪些异同

答：

9，肽类抗生素的合成与多肽，蛋白质合成的主要差异是什么？

答：不用蛋白质合成所用的转录—翻译机构，故不需核糖体、tRNA和mRNA。肽类抗生素合成过程中氨基酸组装的顺序表现在负责此合成的酶上。

10，大环内酯抗生素的生物合成受哪些因素的影响 ？

答：①丙醇的促进作用，丙醇除了可以作为红霉素合成的前体外，还起诱导作用，能诱导红霉素链霉素的乙酰CoA羧化酶的合成 ②终产物调节作用，终产物会抑制抗生素的合成 ③碳分解代谢阻遏 ④脂肪酸 ⑤磷酸盐的调节，磷酸盐对大环内脂类抗生素的生物合成有明显的抑制作用 ⑥cAMP,可促进mRNA的转录。

11，无机磷和胞内能量水平是怎样影响金霉素的生物合成？（P184、P187）

答：

12，链霉素的链霉胍部分的两个胍基是怎样合成的答：在先后经两轮类似的反应系列：脱氢、转氨、磷酸化、转脒基和去磷酸化反应形成两个胍基，并且一个胍基合成完毕才开始合成第二个。

13，在链霉素生物合成中，A 因子扮演了什么角色，简述其作用机理？（P200）答：P200

14，为什么微生物的生长速率降低会诱导参与抗生素合成的酶的生成答：P204倒数第12行

15，向发酵液添加次级代谢物的前体不一定能促进次级代谢物的合成，原因是什么

答：①前体物质可能不能被细胞吸收，或者不能到达次级代谢产物合成的部位②添加的物质可能对细胞本身的合成产生反馈抑制作用，而添加的物质又不是次级代谢合成所需的直接前体③添加的前体不是次级代谢产物合成过程中起限制作用的物质

16，抗生素的生物途径是如何启动和终止的答：P205、P212

17，简述抗生素生物合成中磷酸盐的调节作用？

答：P208

第二篇：课后习题

课后习题

第一课

背诵第1、2自然段

1、体会句子的含义：

A：那些小丘的线条是那么柔美，就像只用绿色渲染，不用墨线勾勒的中国画那样，到处翠色欲流，轻轻流入云际。

答：老舍将草原拟为一幅挥毫泼墨的写意画，突出了草原的辽阔碧绿，小丘线条的柔美，整个草原犹如巨幅中国画那样让人赏心悦目。

B：马上的男女老少穿着各色的衣裳，群马疾驰，襟飘带舞，像一条彩虹向我们飞过来。

答：蒙古族老乡身着节日盛装，策马疾驰，远迎来客。鲜艳的服饰，飞驰的骏马，飘舞的衣襟衣带，作者将这些景物比作彩虹，不仅形似而且神似，写出了蒙古族人民的热情好客。

C：“蒙汗情深何忍别，天涯碧草话斜阳”。

答：蒙古族和汉族人民之间的情谊很深，怎么忍心马上分别，大家站在蒙古包外，望着一望无际的草原，在夕阳下，相互倾诉着惜别之情。表达了蒙、汉两族人民的深情厚谊和依依惜别的感情。

第三课

背诵第12自然段

2、你从爸爸介绍白杨的话里可以看出白杨有哪些特点？

答：白杨树有三个特点：高大挺拔；适应能力强，哪里需要就能在哪里生长；坚贞不屈，任何艰难的环境都不能动摇。

3、《白杨》一课在表达上有什么特点？

答：课文在表达上的特点是：托物言志，借物喻人。

4、体会句子含义：“在一棵高大的白杨树身边，几棵小树正迎着风沙成长起来”。

5、用“哪儿„„哪儿„„”造句

用“不管„„不管„„总是„„”造句

第五课

背诵三首古诗及意思、注解、思想感情。

第六课

了解P30“资料袋”

第八课

6、“我”发现了什么？

答：“我”发现了胚胎发育规律的过程。

7、费奥多罗夫是个怎样的孩子，请概括地说一说。

答：费奥多罗夫是个天真无邪、求知若渴、善于探究和想象的孩子。

8、体会句子含义：“我明白了——世界上重大的发明与发现，有时还面临着受到驱逐和迫害的风险”。

答：这句话讲出了科学事业发展过程中的某些真实情况，又用幽默与自嘲的方式，表达了对此事的看法，意思是说，谁让我有这样重大的发现呢？被轰出教室也就不足为奇了。

例子：意大利科学家布鲁诺，他是哥白尼的推崇者，而且发展了哥白尼的学说，他指出太阳是太阳系的中心，结果被监禁七年后活活烧死。

第十课

默写课文及意思、注解

第十一课

写出楚王侮辱晏子的几件事的名称

答：让晏子钻狗洞；说齐国没有人；嘲笑齐人没出息。

第十四课

体会句子含义：

“是您带着全村妇女，顶着打糕，冒着炮火，穿过硝烟，送到阵地上来给我们吃。这真是雪中送炭啊！”

答：这段话表达了朝鲜人民对志愿军战士的热爱和志愿军战士对朝鲜人民的感激之情。

“您为我们:付出了这样高的代价，难道还不足以表达您对中国人民的友谊？” 答：这段话用反问的语气强调肯定了以大嫂为代表的朝鲜人民对志愿军战士比山高比海深的情谊。

第十八课

写出三个小故事的标题

答：完璧归赵；渑池之会；负荆请罪。

记住“资料袋”

第十九课

记住“资料袋”

回答问题：

周瑜很高兴，叫诸葛亮当面立下军令状，又摆了酒席招待他。（什么是“军令状”？诸葛亮立下军令状，周瑜为什么很高兴？）

答：“军令状”是指接受军令后写的保证书，如果完不成任务，愿意接受军法处置。周瑜经过步步紧逼，使诸葛亮答应三天内造十万支箭的任务，认为终于可以加害诸葛亮了，所以周瑜很高兴。

诸葛亮神机妙算，我真比不上他！（“神机妙算”是什么意思？诸葛亮神机妙算表现在哪些地方？）

答：“神机妙算”指惊人的机智，巧妙的策划。形容有预见性，善于估计客观形势，决定策略。

诸葛亮的神机妙算表现在1、算到天气；

2、算好了受箭方法；

3、算好了人。第二十课

记住“资料袋”

第二十五课

背诵第3自然段

回答问题：

人人为我，我为人人。我觉得这一种境界是颇耐人寻味的。（为什么说这种境界“耐人寻味”？生活中你有没有感受过类似的境界？）

答：“这一种境界”在这里指“人人为我，我为人人”。“我为人人”是说每个人心中要有他人，要有社会责任感，要用实际行动为大众着想，为社会尽到自己的义务。如果大家都这么想，这么做，就必然会换来“人人为我”的结果。虽然“人人为我”放在前面，但实际上“我为人人”是前提，只有“我为人人”尽到责任和义务，才会实现“人人为我”的美好愿望。“人人为我，我为人人”的实例很多，课文中德国人养花，自己的花是让别人看的，二各自又看别人的花；学生轮流值日打扫教室卫生，每人带课外书到班上建立图书角等，都是人人为我我为人

人。

变化是有的，但是美丽并没有改变。（你是怎样理解“美丽并没有改变”的？）答：作者是说德国沿街的奇丽风景没有改变，依然是“家家户户的窗子前都是花团锦簇、姹紫嫣红。许多窗子连接在一起，汇成了一个花的海洋”。

第二十六课

背诵课文4—6自然段

回答问题：

威尼斯的小艇有二三十英尺长，又窄又深，有点儿像独木舟。船头和船艄向上翘起，像挂在天边的新月，行动轻快灵活，仿佛田沟里的水蛇。（说说威尼斯小艇的特点，并体会加点词语的好处）

答：小艇的特点体现在三个比喻句上：“像独木舟”，写出了小艇长、窄、深的特点；“像挂在天边的新月”，写出了小艇两头翘起的特点；“仿佛田沟里的水蛇”，写出了小艇轻快灵活的特点。

第三篇：课后习题

课后习题

第一章

•如何理解中国蒙古人种在形成发展过程中存在的多态性？ •请列举中国早期农业阶段具代表性的考古学文化遗存。•考古学家是怎样归纳中国新石器文化时期的考古学文化区系的？ •中国早期原始聚落的演进反映出原始先民社会组织形式怎样的发展过程？ •在上古人群集团划分问题上，对史前传说的研究已取得哪些成果？

•新石器时代晚期至传说中的尧舜禹时期，考古发现从哪些方面集中反映了各地区社会组织形式的进一步演化？

•试分析中国早期文明多样性和多中心格局是怎样一步步形成的？ 第二章

•请说明二里头文化的发现对论证夏王朝存在的意义。•请列举商代考古已取得哪些重要成果？

•现阶段的研究成果表明，商代国家形态有怎样的特点？ •请列举商代文化的几项重要表现。

•张光直先生说：“夏商周„„彼此之间的横的关系，才是了解三代关系与三代发展的关键。”根据本段的学习，谈谈你对夏商周三代关系的理解。

•如何理解西周“分封”的性质、作用以及对西周政治体制的影响？ •西周时期的宗法关系对社会秩序的建立起到怎样的作用？ •怎样理解西周时期的井田制？ •试分析西周衰亡的原因。

•请举例说明西周礼乐文明的基本内容和主要特征。第三章

•农业经济的发展对春秋战国兼并形势产生了怎样的影响？

•进入春秋战国之后，各地域政治、经济发展呈现出怎样的发展态势？

•试说明“礼乐征伐自诸侯出”、“礼乐征伐自大夫出”所反映的春秋战国时期社会上中层急剧变动的具体情况。

•春秋战国期间，各国是如何向集权体制转化的？ •请列举战国前期各国改革的主要主持者。

•简要评述战国时期各国变法的内容主要集中在哪些方面？又有怎样的结果和意义？ •请说明商鞅变法的具体内容及其历史意义。•战国时期为什么会出现“百家争鸣”的盛况？ •请评述战国儒法道墨诸家的基本思想及其历史意义。第四章

•战国七雄中为何是秦国统一了中国？

•简析秦始皇的专制主义中央集权制度的历史影响。

•“竹帛烟销帝业虚，关河空锁祖龙居。坑灰未冷山东乱，刘项原来不读书。”这是唐代章碣的感史诗句。请结合相关史实，谈谈对这首诗的理解。•秦朝何以短促而亡？ •试析楚汉胜负的原因。

•比较汉初的分封与西周封建的异同。

•汉初的布衣将相之局对汉代历史乃至汉以后历史有何影响？ •简述汉初的无为而治及其意义。•简析西汉的重农抑商政策。

•两汉经学对于中国学术文化的发展有何影响？ 第五章

•简述王莽改制的因由、内容，王莽改制为何难以成功？ •大族势力为何能在东汉得以迅速发展？其历史影响又是怎样？ •简论东汉“党人”和太学生反宦官专权的性质和意义。•说明两汉经营西北的异同点。

•简述三国分立对于区域经济发展的意义。•西晋为何会出现“八王之乱”？ •简析“九品官人法”。

•比较屯田制、占田制和均田制的异同。•魏晋的刺史与两汉刺史有何不同？ •简述东晋南朝的政治特征。•评析北魏孝文帝改革。

•简述北朝北方民族融合的历史条件及其表现。•东晋南朝时期南方经济发展的主要表现。

•简要说明魏晋玄学在中国学术文化发展史上的地位。第六章

•隋朝能在长期分裂后重新统一全国，有哪些主客观因素？ •隋朝在政治制度上有哪些创制？对后世影响如何？ •隋朝为保证赋税征收采取了哪些措施？效果如何？ •隋朝为何短期而亡？

•唐朝的政府机构在前代基础上作了哪些改进与完善？ •唐朝的均田制和租庸调制有哪些具体规定？实施情况如何？ •唐朝军队建置的演变情况如何？ •“贞观之治”的出现可给后人哪些启示？ •武则天统治时期有哪些重要举措？历史影响如何？ •唐朝与周边少数民族的关系如何？ •唐朝中外文化交流的情况如何？

•中国文化至唐代呈现出宽宏而开放的新气象，具体表现在哪些方面？

第七章

•五代的迅速兴替，基于哪些原因？

•宋初皇帝为巩固中央集权，采取了哪些措施？

•科举制度经隋、唐、宋三朝有何发展与变化？历史影响如何？ •两宋经济的发展水平如何？经济格局有何变化？ •如何看待宋朝的“重文”政策？

•“庆历新政”与“王安石变法”有何异同？失败的原因何在？ •如何评析宋与辽、西夏、金的和战？

•两宋时期有何重大科技发明？其对人类历史有何影响？

•宋代理学的基本特点是什么？发展经过如何？有哪些重要人物和学派？

•辽政权控制中国北方地区后，为适应境内不同的民族及其生产方式，对行政机构作了哪些调整？

•金朝取代辽朝统治中国北方地区后，其行政制度和社会经济发生了哪些变化？ 第八章

•简述蒙古的三次西征。

•蒙古帝国与元朝的疆域变化和行省制度。•简论元朝的双重民族政策。•元朝的政治制度与对外开放政策。•请列举元朝的主要科技成就。•简述元代的赋役制度。

•简论元代的社会阶层与种族主义。•简析元末的民变与朱元璋的兴起。•大运河与元朝的经济政策有何关系？

第九章

•胡蓝之狱与明初政治。•明朝的边患与政府应对。•明朝的对外贸易与海禁政策。•明朝中后期的社会经济发展状况。•明初的开国祖制及其影响。•明代的科举制度。•明代的粮长制度。•明代小说的主要成就。•明代中叶的宦官专权。•晚明的党争与时局。•晚明民变与社会变迁。•晚明三大案。

•倭寇之乱与中国沿海社会。•一条鞭法的推行与影响。•张居正改革及其评价。•郑和七下西洋的过程和意义。•南明王朝变革大势。

第十章

•明清时期的商品经济与社会变迁。•明清时期江南的经济与社会发展。•清初巩固中央集权的主要措施。•金奔巴瓶掣签制度。•清代的八旗制度。•清代的文字狱及其影响。•清代的学术与文化。

•清代的中外交流和反抗西方殖民者的斗争。•清代实行的“改土归流”措施及其意义。•清代中后期的人民反叛与社会矛盾。•雍正朝惩贪措施。•清代中枢权力机关的演变。

•台湾的统一与多民族国家的边疆政策。•摊丁入地政策述评。

•鸦片战争前中国与西方的贸易状况。

•元明清三代中央政府对于西藏地区管理和控制的异同。

第四篇：课后习题

第一章

1.如何正确认识提出马克思主义中国化的重要意义？

第一，马克思主义中国化的理论成果指引着党和人民的伟大事业不断取得胜利。

第二，马克思主义中国化的理论成果提供了凝聚全党和全国各族人民的强大精神支柱。第三，马克思主义中国化倡导和体现了对待马克思主义的科学态度和优良作风，不断开拓着马克思主义在中国发展的新境界。

2.如何正确理解马克思主义中国化的科学内涵？

马克思主义中国化，就是将马克思主义基本原理同中国具体实践相结合。

第一，马克思主义中国化就是运用马克思主义解决中国革命，建设和改革的实际问题。第二，马克思主义中国化就是把中国革命，建设和改革的实践经验和历史经验提升为理论。第三，马克思主义中国化就是把马克思主义植根于中国的优秀文化之中。

3.如何正确把握毛泽东思想，邓小平理论和“三个代表”的重要思想各自形成发展的时代背景和实践基础？

毛泽东思想：时代背景： 20世纪上半叶，帝国主义战争与无产阶级革命的时代主题，是毛泽东思想形成的时代背景。1914年帝国主义列强为争夺势力范围发动了第一次世界大战。1917年俄国十月革命的胜利开辟了师姐无产阶级革命的新时代。它使中国反帝反封建的民主革命从旧的世界资产阶级民主革命的一部分，转变为世界无产阶级社会主义革命的一部分。它为中国送来了马克思列宁主义，帮助中国的先进分子用无产阶级的世界观作为观察国家命运的工具。毛泽东领导中国革命取得胜利后，又经历了第二次世界大战后两大阵营的对立和斗争，帝国主义侵略战争的炮火还曾燃烧到我国边境，西方国家不仅对我国实行持续的封锁禁运，还极力推行和平演变战略。

实践基础：中国共产党领导的革命和建设的实践，是毛泽东思想形成的实践基础。

邓小平理论： 时代主题的转变是邓小平理论形成的时代背景。我国改革开放以来的社会主义现代化建设新的实践，是邓小平理论形成和发展的历史和现实根据。、“三个代表”： 国际局势和世界格局的深刻变化，是“三个代表”重要思想形成的时代背景。（和平发展仍是时代的主题，但霸权主义和全权政治又有新的体现，恐怖主义危害上升，一些地区冲突和争端时起时伏，世界还很不安宁，科技日新月异，以信息技术为核心的高新技术的发展，极大地改变了人们的生产，生活方式和国际经济，政治关系，以经济为基础，科技为先导的 综合国力竞争更为激烈。国际局势和世界格局的深刻变化，是“三个代表”重要思想形成的时代背景。

改革开放以来特别是党的十一届三中全会以来党和人民建设中国特色社会主义的伟大探索，是“三个代表”重要思想形成的实践基础。

4.如何正确把握毛泽东思想，邓小平理论和“三个代表”的重要思想各自的科学体系和主要内容？

毛泽东思想不是在个别的方面，而是在许多方面以其独特性理论丰富和发展了马克思列宁主义，构成一个博大精深的科学思想体系。它有着坚实的中国化马克思主义哲学思想的理论基础，其核心和精髓就是实事求是。主要内容：（1）新民主主义革命理论。（2）社会主义革命和社会主义建设理论。（3）革命军队建设和军事战略的理论（4）政策和策略的理论（5)思想政治工作和文化工作的理论。（6）党的建设理论（7)国际战略和外交工作的理论

5.如何正确把握毛泽东思想，邓小平理论和“三个代表”的重要思想各自的历史地位和指导意义？

毛泽东思想;1.马克思主义中国化第一次历史性飞跃的理论成果；

2.中国革命和建设的科学指南；

3.中国共产党和中国人民宝贵的精神财富。

邓小平理论：1.对中国社会主义建设规律的科学认识；

2.改革开放和社会主义现代化建设的科学指南；

3.党和国家必须长期坚持的指导思想。

三个代表：1.指导思想的又一次与时俱进；

2.全面建设小康社会的根本指针；

3.加强和改进党的建设，推进我国社会主义自我完善和发展的强大武器。

6.如何把握科学发展观的思想内涵和重要意义？

第一要义是发展，核心是以人为本，基本要求是全面协调可持续，根本方法是统筹兼顾。意义:1.科学发展观是同马克思列宁主义，毛泽东思想，邓小平理论，“三个代表”重要思想既一卖相承又与时俱进的科学理论。

2.科学发展观是马克思主义关于发展的世界观和方法论的集中体现；

3.科学发展观是我国经济社会发展的重要指导方针和发展中国可色社会主义必须坚持和贯彻的重大战略思想。

7.如何正确认识马克思主义中国化理论成果之间既一脉相承又与时俱进得关系？

8.如何正确理解中国特色社会主义理论体系？为什么说在当代中国，坚持中国特色社会主义理论体系就是真正坚持马克思主义？

第二章

1.毛泽东是怎样确立实事求是的思想路线的？

2.邓小平，江泽民和党的十六大以来党对实事求是的思想路线有哪些新的贡献？

3.实事求是思想路线的基本内容有哪些?如何理解党的思想路线的实质与核心是实事求是？

4.为什么说实事求是是马克思主义中国化各个理论成果的精髓？

5.如何科学理解解放思想，实事求是，与时俱进，求真务实之间的关系？

6.在发展中国特色社会主义事业的进程中，为什么要继续解放思想，怎样科学的理解理论创新？

第五篇：基因表达调控习题

第11单元 基因表达的调控和基因工程

（一）名词解释

1．操纵子； 2．启动子； 3．增强子； 4．衰减子； 5．反式作用因子； 6．降解物基因活化蛋白；7．克隆技术； 8．限制性核酸内切酶； 9．基因组DNA文库； 10． cDNA文库。

（二）填充题

1．正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用

模式，而真核细胞常用

模式。

2．在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为，其调控区包括

基因和

基因。

3．有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为

；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可的基因。

4．在基因重组技术中，切割DNA用，连接DNA用。

5．除噬菌体外，和

也是分子克隆的常用载体。

6．用动物病毒DNA改造的基因载体有

和

。用于植物基因工程的常用载体是。

7．将重组质粒导入细菌称，将噬菌体DNA转入细菌称。

8．Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究、和

转移和鉴定的几种常规技术。

（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）

1．一个操纵子通常含有

A．一个启动序列和一个编码基因

B．一个启动序列和数个编码基因

C．数个启动序列和一个编码基因

D．数个启动序列和数个编码基因

E两个启动序列和数个编码基因

2．有关操纵子学说的论述，正确的是

A．操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式

B．操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式

C．操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成 D．诱导物与阻遏蛋白结合启动转录

E．诱导物与启动子结合而启动转录

3．转录因子是

A．调节DNA结合活性的小分子代谢效应物

B．调节转录延伸速度的蛋白质

C．调节转录起始速度的蛋白质

D．调节转录产物分解速度的蛋白质

E．促进转录产物加工的蛋白质

4．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的

A．启动基因

B．结构基因

C．操纵基因

D．内含子

E．调节基因

5．在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高

A．高乳糖，低葡萄糖

B．高乳糖，高葡萄糖

C．低乳糖，低葡萄糖

D．低乳糖，高葡萄糖

E．不一定

6．顺式作用元件是指

A．基因的5ˊ侧翼序列

B．基因的3ˊ侧翼序列

C．基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列

D．基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列以外的序列

E．具有转录调节功能的特异DNA序列

7．反式作用因子是指

A．具有激活功能的调节蛋白

B．具有抑制功能的调节蛋白

C．对自身基因具有激活功能的调节蛋白

D．对另一基因具有激活功能的调节蛋白

E．对另一基因有调节功能的蛋白质因子

8．下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的

A．它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA

B．切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构

C．它能专一性降解经甲基化修饰的DNA

D．是重组DNA的重要工具酶

E．主要从细菌中获得

9．基因工程中，不常用到的酶是

A．限制性核酸内切酶

B．DNA聚合酶

C．DNA解链酶

D．DNA连接酶

E．反转录酶

10下列哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方法?

A．磷酸钙转染

B．电穿孔

C．脂质体转染

D．氯化钙转染

E．显微注射

11．重组体的筛选方法有

A．抗药标志筛选

B．标记补救

C．分子杂交

D．免疫化学

E．酶联免疫检测

12．cDNA是指

A．在体内合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA

B．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C．在体外经转录合成的与DNA互补的RNA

D．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA

E．在体内经转录合成的与DNA互补的RNA

13．建cDNA文库时，首先需分离细胞的

A．染色体DNA

B．线粒体DNA

C．总mRNA

D．tRNA

E．rRNA

（四）判断题

1．高等真核生物的大部分DNA是不为蛋白质编码的。

2．大多数管家基因编码低丰度的mRNA．

3．乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。

4．某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。

5．准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。

6．用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。

7．Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。

8．用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。

9．基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。

10．采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。

（五）分析与计算题

1．简述操纵子的基本结构。

2．举例说明基因表达的诱导与阻遏，正调控与负调控。

3．概述原核生物基因表达调控的特点。

4．概述真核生物基因组的特点。

5．概述真核生物基因表达调控的特点。

6．简答真核生物基因表达的调控方式。

7．常用的限制性核酸内切酶有哪些特点?

8．在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源?

9．什么是cDNA文库?cDNA文库与基因组文库有何差别?

10．用于DNA重组的载体应具备什么条件?常用的载体有哪一些?各有何特点?

11．简述连接目的基因与载体的主要方法?

12．概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。

参考答案

（一）名词解释

1．原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。

顺式调控元件：指可影响自身基因表达活性的真核DNA序列。根据顺式作用元件在基因中的位置、转录激活作用的性质及发挥作用的方式，分为启动子、增强子及沉默子等。

2．是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。

3．是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。

4．在原核生物的Trp操纵子结构中，第一个结构基因与启动子P之间有一个区域含Trp密码子，称衰减子。当环境中Trp浓度很高时，它可通过编码并翻译，使正在转录的mRNA形成终止信号，从而终止Trp操纵子的表达。这种转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，它是原核生物特有的一种基因调控机制。

5．大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用（DNA－蛋白质相互作用），或通过与基它调节因子的相互作用（蛋白质－蛋白质相互作用），反式激活另一基因的转录，故称反式作用蛋白或反式作用因子。

6．也就是cAMP受体蛋白（cAMP receptor protein，CRP），它与cAMP的复合物可以促进某些原核操纵子（如乳糖操纵子）的转录。

7． “克隆”作为名词指相同的分子或细胞构成的群体，或一个共同的祖先通过无性繁殖所得到的群体，作为动词指获取“克隆”的过程。克隆技术特指获取“克隆”的过程，包括分子克隆，细胞克隆等技术。

8．就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制、修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对保持细菌遗传物质的稳定具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类，其中的Ⅱ类酶能特异性在一定的核苷酸序列处切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的应用。

9．利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定大小的片段，将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。不同细菌中的重组DNA分子可能包含不同的染色体DNA片段，这样，只要得到的转化细菌所携带的重组DNA分子种类足够多，则全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌内，由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。

10．以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。另外，对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接，去除了内含子的cDNA。一般来说，从cDNA文库获得的基因，因不含内含子而片段较小，更适合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在将hnRNA加工成mRNA的酶系统，若用原核生物表达真核基因，则目的基因一定要通过cDNA获取。

（二）填充题

1．负调控，正调控；

2．启动子，启动，操纵； 3．管家基因，诱导，阻遏； 4．限制性核酸内切，DNA连接； 5．质粒，病毒； 6．腺病毒载体，反转录病载体，Ti质粒。7．转化，转导； 8．DNA，RNA，蛋白质；

（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）

1．（B）操纵子均含有数个编码基因，但启动序列只有1个。

2．（B，C，D）操纵子调控系统由调节基因，操纵基因，启动子和多个结构基因组成，是原核生物基因表达调控的主要方式，诱导物与组遏蛋白结合启动转录。诱导物不能直接与启动子结合。真核生物不存在操纵子调控系统。

3．（C）转录因子是调节转录起始的蛋白质，对转录延伸的速度，转录产物分解的速度和转录产物的加工均无影响。

4．（C）操纵基因位于启动基因与结构基因之间，阻遏蛋白与操纵基因结合后，与启动基因结合的RNA聚合酶不能转录结构基因。

5．（A）参与乳糖代谢的三种酶的表达同时受控于正负调控两种机制，只有在正调控发挥作用，负调控不起作用的时候，这三种酶才能有效的表达。当培养基中加入乳糖的时候，参与负调控的阻遏蛋白将失去活性，但如果培养基中含有葡萄糖，则细菌优先利用葡萄糖，这时参与乳糖代谢的酶仍然不能有效的表达，这是因为葡萄糖降低了细胞内的cAMP水平，而cAMP浓度的降低，导致降解物激活蛋白丧失活性，正调控的机制失去作用，这时三种酶不可能正常的表达。

6．（E）顺式作用元件是对某基因自身有调节功能的DNA序列，其中的启动子多在基因的5ˊ侧翼，但增强子既可以在5ˊ侧翼，又可以在3ˊ侧翼，一般距基因较远。有些顺式作用元件甚至可以在基因内部。

7．（E）反式作用因子是指对另一基因的表达有激活或抑制作用的蛋白质因子。

8．（C）限制性核酸内切酶主要存在于细菌，它可以水解外源DNA，而自身DNA因在特定位点被甲基化而可以免遭水解。限制性核酸内切酶由于可识别特定的碱基序列并在特定的位点切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的使用。

9．（C）DNA聚合酶可用来获取目的基因，测序和PCR等项工作，限制性核酸内切酶用于DNA酶切片段长度的多态性分析，载体和目的基因的特异性切割等工作，DNA连接酶可用于基因重组的连接反应。DNA解链酶在基因工程中几乎用不到。

10．（D）CaCl2处理受体细胞是提高细菌转化率的常用方法，不适用于真核生物，题中列出的其余4种方法均可用于将表达载体导入真核细胞。

11．（A，B，C，D，E）题中列出的5种方法均可用于重组体的筛选。

12．（D）cDNA指在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA。

13．（C）cDNA文库应包含某一细胞在某一状态下所表达的基因，因此，构建cDNA文库首先要分离细胞的总mRNA。

（四）判断题

1．对。高等真核生物的DNA中含有不少高度重复序列的非编码序列，基因内部又有内含子，不少基因内含子的总长度远远大于外显子。因此，真核生物的编码区只占DNA总长度的一小部分，一般认为，编码区不超过总长度的5%。

2．对。管家基因是持续表达的，mRNA丰度不高，但寿命较长，翻译效率较高。

3．错。乳糖被转化为别乳糖后，与乳糖操纵子调节基因产生的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失去活性。由于这一调控方式起作用的是阻遏蛋白，故属于负调控。

4．对。某些蛋白质能够与DNA分子的不同区域结合，分别发挥激活蛋白或阻遏蛋白的作用。

5．对。真核生物的基因多数含有内含子，原核生物缺乏从转录初级产物切除内含子的加工系统，另外，如果将基因组DNA作为目的基因，基因片段因含有内含子而过大，也会降低基因转移的成功率。cDNA是以成熟mRNA为模板经过反转录制成的，不含内含子，适合于作为目的基因用于基因的克隆或表达。

6．对。原核生物缺乏真核生物的翻译后加工系统。不能对蛋白质进行糖基化。因此，表达糖蛋白要用真核表达系统。

7．错。土壤农杆菌可以促进Ti质粒进入植物细胞，但农杆菌本身并不进入植物细胞。

8．错。λ噬菌体的外壳蛋白只能包装长度为 噬菌体DNA78%～105%的DNA，若外源DNA片段太小，重组体DNA的长度小于 噬菌体DNA的78%，就不能在体外包装成噬菌体，因而，克隆很难成功。

9．对。如果宿主细胞有限制性核酸内切酶，将会水解进入宿主细胞的重组体DNA，导致克隆失败。

10．错。采用蓝的斑选择法时，克隆位点被选在表达 －肽的基因内，含有空载体的受体菌可以在IPTG（异丙基硫代－ －D－半乳糖苷）的诱导下，表达 －肽，通过与受体菌的 －互补，能够水解X－gal（5－溴－4氯－3－吲哚 － －D－半乳糖苷）生成蓝色的水解产物，因而菌落或噬菌斑为蓝色。含有重组DNA的受体菌，由于外源基因插入表达 －肽的基因内，不能表达 －肽，因而，菌落或噬菌斑为白色。

（五）分析与计算题

1．操纵子的调控区有一个操纵序列，一个启动序列及一个CAP位点，调控区下游有几个结构基因，还有一个调节基因编码阻遏蛋白，阻遏蛋白与操纵序列结合，使操纵子受阻遏而处于关闭状态。若cAMP 与CAP结合，形成的复合物与CAP位点结合，可增大操纵子的转录活性。阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节共同调节结构基因的表达，操纵子机制在原核基因表达调控中具有较善遍的意义，因其多是几个功能相关基因串联于同一操纵子上，故在同一启动序列控制下，可转录出能为多种蛋白质编码的mRNA，即多顺反子mRNA。

2．在特定的环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，则这种基因是可诱导的。可诱导基因在特定的环境中表达增强的过程称为诱导。例如有DNA损伤时，修复酶基因就会在细菌内被诱导激活，使修复酶的活性增加。相反，如果基因对环境信号应答时被抑制则这种基因是可阻遏的，可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏，例如，当培养液中色氨酸供应充分时，在细菌内编码色氨酸合成相关酶的基因表达会被抑制。如果某种基因在没有调节蛋白存在时是表达的，加入某种调节蛋白后基因表达活性便被关闭，这样的控制为负调控。例如，乳糖操纵子。相反，若某种基因在没有调节蛋白存在时是关闭的，加入某种调节蛋白后基因活性就被开启，这种控制称为正调控。例如代谢物阻遏。

3．原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简单，基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面：（1）σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长，亚基识别特异启动序列，即不同的 因子协助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性：除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。

4（1）基因组结构庞大：哺乳动物基因组DNA由约 bp的核苷酸组成。大约有3万个左右的基因，90%以上的DNA不为蛋白质编码。真核细胞DNA与组蛋白结合形成复杂的染色质结构，基因表达调控机制更加复杂。（2）单顺反子：真核基因转录产物为单顺反子，即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。许多蛋白质由几条不同的多肽链组成，因此存在多个基因的协调表达。（3）重复序列：重复序列在真核DNA中普遍存在，重复序列长短不一，短的在10个核苷酸以下，长的达数百，乃至上千个核苷酸。据重复频率不同分为高度重复序列、中度重复序列及单拷贝序列。（4）基因的不连续性：结构基因的两侧有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部有一些不为蛋白质编码的间隔序列，称内含子，而编码序列称外显子，因此真核基因是不连续的。

5．同原核生物一样，真核基因表达调控的最基本环节也是转录起始，而且某些机制是相同的，但也存在明显差别：（1）RNA聚合酶：真核有3种RNA聚合酶，分别负责3种RNA转录。（2）活性染色质结构变化：当基因被激活时，可观察到染色体相应区域发生结构和性质变化。包括对核酸酶敏感，DNA拓扑结构变化，DNA碱基修饰变化和组蛋白变化。（3）正调节占主导地位：真核RNA聚合酶对启动子的亲和力极小或根本没有实质性的亲和力，二者的结合必须依赖一种或多种激活蛋白。尽管发现少量基因存在负性顺式作用元件，但普遍存在的是正性调节机制。（4）转录与翻译分隔进行：真核细胞有胞核及胞质等区间分布，转录与翻译在不同亚细胞结构中进行。（5）转录后加工：真核基因的内含子和外显子均被转录，内含子在转录后要被剪接去除，使外显子连接在一起，形成成熟的mRNA。不同剪接方式可形成不同的mRNA，翻译出不同的多肽链。因此，转录后加工是真核基因表达调控的另一重要环节。

6．（1）DNA水平的调控：a．基因丢失，即DNA片段或部分染色体的丢失，如蛔虫胚胎发育过程有27%的DNA丢失。b．基因扩增，即特定基因在特定阶段的选择性扩增，如非洲爪蟾卵母细胞中的rDNA是体细胞的4000倍。c．DNA序列的重排，如哺乳动物免疫球蛋白各编码区的连接。d．染色质结构的变化，通过异染色质关闭某些基因的表达。e．DNA的修饰，如DNA的甲基化关闭某些基因的活性。（2）转录水平的调控。a．染色质的活化，如核小体结构的解开、非组蛋白的作用等。b．转录因子的作用，转录因子与RNA聚合酶及特定的DNA序列（启动子、增强子）相互作用实现对转录的调控。（3）转录后水平的调控。a．mRNA前体的加工，如5′端加帽、3′端加尾、拼接、修饰、编辑等。B．mRNA的选择性拼接，如抗体基因的选择性拼接。（4）翻译水平的调控。a．控制mRNA的稳定性，如5′端的帽子结构、3′端polyA尾巴和mRNA与蛋白质的结合有利于mRNA的稳定。b．反义RNA的作用，反义RNA可以选择性抑制某些基因的表达。c．选择性翻译，如血红素缺乏时，通过级联反应使eIF2磷酸化。d．抑制翻译的起始。（5）翻译后水平的调控。a．多肽链的加工和折叠，如糖基化、乙酰化、磷酸化、二硫键形成、蛋白质的降解。b．氨基酸的重排，如合成伴刀豆蛋白A时，氨基酸序列大幅度地被剪接重排。c．通过肽链的断裂等的加工方式产生不同的活性多肽。

7．Ⅱ型限制性核酸内切酶（限制酶）是基因工程中常用的重要工具酶，是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的核酸内切酶，常用的限制酶主要有以下特点：（1）均来自于微生物，并以其来源的微生物学名进行命名；（2）相对分子质量小，仅需Mg2＋作为辅助因子，无需ATP；（3）识别特异性DNA双链顺序，在序列内特异切割产生特异性DNA片段；（4）识别序列长度为连续的4/6/8bp；（5）识别序列呈二重旋转对称，称回文结构，富含GC；（6）有3种切口：5′端突出的黏性末端（如HindⅢ），3′端突出的黏性末端（如Pst Ⅰ）和平末端（如H加工）。

8．（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。

9．同mRNA互补的DNA称为cDNA。cDNA文库是以某一细胞的总mRNA为模板，在无细胞系统中，在反转录酶的作用下，首先合成互补DNA的第一链，破坏RNA模板后，再以第一链为模板合成第二链，得到双链cDNA。选用适合的载体，与合成的cDNA重组，导入寄主细胞，经筛选得到的cDNA克隆群称为cDNA文库。由于cDNA技术合成的是不含内含子的功能基因，因此是克隆真核生物基因的一种通用方法。由于细胞内的基因在表达的时间上并非是统一的，具有发育的阶段性和时间性，有些则需要特殊的环境条件。所以，cDNA文库不可能构建得十分完全，也就是说任何一个cDNA文库都不可能包含某一生物的全部编码基因。cDNA文库与基因组文库的主要差别是：（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列，cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响，cDNA文库克隆的是被转录DNA序列（因它受发育和调控因子的影响）。（3）基因组文库中的编码基因是含有内含子和外显子，而cDNA克隆的基因不含内含子。

10．DNA重组载体应具备的条件：（1）能自主复制；（2）具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点，并在位点中插入外源基因后，不影响其复制功能；（3）具有1～2个筛选标记；（4）克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入其他生物细胞；（5）易于操作，转化效率高。常用的基因载体有以下几种：（1）质粒：是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子，本身有复制功能，且带有某些选择信息，但可插入的目的基因片段较小。（2）噬菌体DNA：是一种病毒DNA，能插入比较大的外源DNA片段，在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点，便于多种外源DNA酶切片段的克隆。（4）柯斯质粒载体和酵母人工染色体：前者结合了质粒和 噬菌体载体的优点，也是一种环形双链DNA分子，具有质粒的性质，可以转化大肠杆菌，并自行复制和增殖，但它不会产生子代噬菌体，构建成的此种载体较小，因此能插入比较大的外源DNA片段，所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点，又含有酵母菌染色体DNA着丝点，端粒和复制起始位点的序列，以及合适的选择标记基因，可在转化的酵母菌细胞内，按染色体DNA复制的形式复制重组DNA，容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。

11．（1）黏性末端连接：用同一限制酶切割载体及目的基因后，产生完全相同的黏性末端，可以用DNA连接酶直接进行共价连接。或两种不同的限制性核酸内切酶切割产生的配伍末端（相同类型的黏性末端）之间也可以进行黏性末端连接。（2）平端连接：某些限制酶切割DNA后产生平头末端，由于平头末端5′端带有磷酸，3′带有游离羟基，可在DNA连接酶作用下直接连接，并且不管末端序列如何均可连接，但连接效率要比黏性末端之间的连接低。（3）同聚物加尾连接：利用同聚物序列，如多聚A与多聚T之间的退火作用完成连接。如果载体和目的基因上找不到共同的酶切点时，可经不同的限制酶切割后，用单链核酸酶将其各自的黏性末端切平，在末端核苷酸转移酶作用下，在DNA片段末端加上同聚物序列，制造出黏性末端，而后连接。（4）人工接头连接：将磷酸化接头连到平末端，使产生新的限有制性酶切核酸酶位点，再用限制酶切割，产生黏性末端后连接。

12．在转基因操作以后，载体只能进入部分宿主细胞，即使含有载体的细胞，也并非都含有目的基因，有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此，须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定，以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因，这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同，可采用：（1）直接选择法：针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因，直接测定该基因或基因表型的方法。a．抗药标志的筛选：载体具有某种抗生素的抗性基因，在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落，而未转化细胞则不能生长，这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。b．插入失活法：将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活，可区分单纯载体或重组载体（含目的基因）的转化菌落。如pBR322含ampr、Tetr双抗药基因，若将目的基因插入载体的Tetr基因中，则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长，而不能在含Tet的培养液中生长。c．标志补救：若克隆的基因能在宿主菌表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那么就可以利用营养突变菌株进行筛选，这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型（Leu＋），将重组子导入亮氨酸异养型（Leu－）的宿主细胞后，在不含Leu的培养液中可生长，而不含重组体的细胞则不能生长。－互补法筛选（见43题）也是一种标志补救选择方法。d．酶切图谱筛选：分别挑取独立的菌落，培养后快速提取重组体DNA，用重组时所采用的限制酶切割后，进行琼脂糖凝胶电泳，可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。e．核酸杂交筛选：将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上，利用标记探针进行杂交，直接选择并鉴定目的基因。f．原位杂交筛选：是将待选菌在平板上培养成菌落，按相应位置（原位）转移至合适的膜上，经变性使膜上的DNA成单链，再与标记的探针（与目的基因互补）杂交，找出平板上的菌落位置，即为重组的阳性菌落。（2）免疫学方法筛选：利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因，属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原，再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上，在膜上得到抗原抗体复合物，最后用合适的方法检出阳性反应菌落。