第一篇:最好的毕业论文.doc
目录
摘要...........1
关键词................1
1前言................1
1.1影响卵母细胞成熟培养的因素.......1
1.2卵母细胞的来源........2
1.2.1奶牛卵母细胞的成熟.............2
1.2.2牛卵母细胞体外成熟的方法.........3
1.3卵母细胞的成熟判断............3
2材料及方法..........3
2.1卵巢卵母细胞的采集........3
2.2成熟液的配置.............3
2.3成熟卵的检查.............4
3结果与分析..........4讨论................4
5结论................4
致谢...........4
参考文献..........5奶牛卵母细胞体外成熟培养的研究
摘要:为研究孕马血清促性腺激素(PMSG)在奶牛卵母细胞的成熟过程中的作用。在牛卵母细胞成熟液中添加 0、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml PMSG 统计成熟率。结果表明,添加 PMSG各组与对照组相比,卵母细胞的成熟率均显著提高。而添加 10μg/ml、25μg/ml、75μg/ml组卵母细胞的成熟率之间差异不显著,50μg/ml组卵母细胞的成熟率最高。
关键词:牛;卵母细胞;体外成熟
1前言
牛在大多数情况下是一胎一仔,自然双胎的概率很小。其根本原因在于:牛的卵巢大多数情况下每次只排 1个卵,因而只可能有一个胚胎产生,这极大地影响了牛的繁殖性能。而通过牛卵母细胞体外成熟技术能获得较多的卵子,与体外受精技术相结合,大大提高了牛的繁殖性能。Edwards在 1965年获得牛卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养的成功。1982年,Brackett 等人首次报道用手术法收集牛卵母细胞进行体外受精,并产下活犊的试验。其后Iritani和niwa在报道体外成熟的卵母细胞进行体外受精后,又相继报道了卵母细胞的体外培养、受精、移植和妊娠,产下活犊的试验结果。牛卵母细胞的IVM和 IVF技术在牛胚胎生产中有很大发展潜力。随着体外受精技术的发展,牛卵母细胞的体外成熟显得愈来愈重要。近年来,Bols等(1995),Bungartz等(1995)和Niemann等(199
5)借助超声波横穿阴道从母牛卵巢吸取具有高的遗传性状的卵母细胞,经体外成熟、受精、培养以获得系谱清楚且具有高的可期望性状的胚胎。
随着哺乳动物体外受精、细胞核移植和外源基因导入等高新技术的不断深入,人们对成熟卵母细胞以及哺乳动物胚胎需求量日益增加,卵巢内丰富的卵泡资源是胚胎工程迅速发展的基础。通过卵巢卵母细胞体外成熟获取大量成熟卵母细胞,然后进行体外受精、体外生产胚胎愈来愈引起人们的注视。
1.1 影响卵母细胞成熟培养的因素
卵母细胞的成熟是一个复杂的,动态的过程,有许多代谢事件发生,除了进行积极的mRNAs转录、蛋白质合成外,还有其他一些物质的降解。在体外成熟培养中,通常以第一极体的排出来判断卵母细胞的成熟,其实这只是核成熟的标志。除了核成熟外,卵母细胞的胞质成熟也很重要,尤其是对用于核移植的卵母细胞而言,胞质的成熟直接关系到能否使供体核实现彻底的再程序化、重构胚能否维持正常的分裂发育。从这个意义上说,目前所用的卵母细胞成熟体系还不尽完善,一些对卵母细胞成熟和后续发育非常重要的物质不能完全合成。近年来,在卵母细胞体外成熟的研究中,人们的注意力主要集中在提高体外成熟的卵母细胞支持胚胎发育的能力上。
卵母细胞体外成熟中应用最广泛,效果稳定的基础培养液是TCM199。在牛上,TCM199 添加10%血清、促性腺激素和雌激素,卵母细胞的成熟率可达到90%(Fukuda,1990)。小鼠卵母细胞的体外成熟在CZB及KSOMaa中也可得到很好的效果。猪的卵母细胞成熟除用TCM19外,NCSU-23也被较多使用,虽然成熟率差别不大,但在TCM199中培养成熟的猪卵母细胞可更好的支持受精卵向囊胚的发育。这些培养液中都要添加动物血清,由于血清成分的复杂和难以确定,它对卵母细胞的成熟及后续发育的影响也是复杂多元的,这一点近年来倍受关注,因此人们正在努力寻找效果确切、不含血清的成熟培养液。研究显示,合成培养液(如 SOFM、KSOM)中用BSA或 PVA及氨基酸代替血清作成熟培养液,可以使卵母细胞成熟,并能
进行受精后的发育,用复合输卵管合成液(supplemental synthetic oviduct fluid medium,cSOFMaa)培养成熟的牛卵母细胞,发育到囊胚的能力与TCM199 +NCS培养成熟的卵母细胞相同,氨基酸的添加可以提高成熟卵母细胞的发育能力,增加囊胚中的细胞数量,提高卵母细胞中母型 mRNAs 的转录水平(Watson,2000)。Gardner等设计出了一种基础成熟培养液(G-Mat),用重组蛋白以及透明质酸代替血清,培养牛卵母细胞,取得了理想的效果,不仅囊胚的发育率高于 TCM199+10%FCS培养成熟的卵母细胞,而且囊胚中的细胞数目也显著增加(Gard2ner,2001)。合成成熟培养液中能量供应物的选择是其中的一个重要方面,猴卵母细胞成熟液中,葡萄糖是必须的,而且足以满足成熟过程中的能量需求,加入丙酮酸后会抑制葡萄糖对胞质成熟及卵丘细胞扩散的促进作用(Zheng,2001)。
许多研究表明,体外受精囊胚期前的胚胎代谢活动主要是由母源性基因及其产物,如mRNA、rRNA、蛋白质等所调控的,因此卵母细胞成熟情况是决定受精率及其囊胚发育率高低的关键。影响卵母细胞成熟的因素很多,主要包括卵泡大小、卵巢的发育阶段、培养基、激素以及生长因子等。据报道,牛卵母细胞体外成熟时间为培养后18~24 h,但受精率,受精胚发育率也有差异。在金黄仓鼠和大鼠,曾有人研究认为FSH对核成熟有抑制作用,而且对减数分裂纺缍体有损害,促性腺激素对卵母细胞的有害作用可被添加血清所抵消。张涌和刘泽隆等研究了不同浓度的血清,FSH,LH,E2及培养时间对卵母细胞成熟的影响,并认为TCM199+10%-15%奶牛卵泡液是卵母细胞成熟的理想培养系统。
1.2卵母细胞的来源
卵母细胞是体外胚胎操作的基础。来源主要有三个途径:一是利用超排技术,从输卵管获得成熟卵母细胞,适用于小型动物,对牛等大型动物而言,适用价值不大,二是利用腹腔镜进行活体采卵,可充分利用优良母牛的卵母细胞;三是采自屠宰场的遗弃牛卵巢。目前,家畜体外受精研究中使用最多的是屠宰场遗弃卵巢,它成本低、取材方便,能满足胚胎体外生产的大批量需要,但若要用于生产性移。
1.2.1奶牛卵母细胞的成熟
卵丘-卵母细胞复合体(COC)一个充分生长的牛卵母细胞被一层非细胞基质即透明带包围着,透明带又被几层卵泡细胞如放射冠细胞和卵丘细胞包围着。这三部分构成了卵丘-卵母细胞复合体。卵母细胞完成生长并具有了减数分裂的能力时,就进入减数分裂前期I的双线期即核成熟阶段,这时核物质被包裹起来,形成种核泡(GV)。种核泡阶段的卵母细胞质中的细胞器被收拢在一起分布于卵母细胞周围,其余胞质由许多散在的脂质滴和胞质泡组成。处于成熟阶段的卵母细胞,卵丘细胞通过大量充满肌纤维蛋白的带状结构紧密包裹着透明带,保持卵母细胞和卵丘细胞之间通过缝隙联合(GapeJunction)进行离子交换和一些小的代谢物质的交换。
卵母细胞在体内一直处于种核泡阶段,直至排卵前在促黄体素(LH)分泌高峰的刺激下才达到最后成熟。这一过程是由卵丘细胞、细胞核和胞质之间的协调作用所完成。经过一次LH高峰后,卵丘细胞、透明带、卵质及细胞核之间将发生一系列连续性的结构和分子方面的变化,卵母细胞完成核成熟(MetⅡ)和胞质成熟,卵丘细胞覆盖范围扩大,引起排卵,这时的卵母细胞才具备受精能力。
从卵巢中采集到的卵母细胞,外面有多层卵丘细胞包围,故称为卵丘-卵母细胞复合体,此时的卵母细胞不能用于受精。正常在体内成熟的卵母细胞是在LH分泌高峰的刺激下才完成的。卵丘细胞,透明带,卵质和细胞核发生一系列连续性的结构和分子方面的变化,完成核成熟和胞质成熟,卵泡细胞扩散,卵泡破裂引起排卵,这时的卵母细胞才具备受精和发育能力。牛卵母细胞体外成熟,就是要模拟体内成熟环境,使从卵巢采集的未成熟卵母细胞达到最后成熟。
1.2.2牛卵母细胞体外成熟的方法
直径大于110um的卵母细胞能够完成减数分裂和卵裂。体外成熟用的卵母细胞一般从 2-7mm的卵泡上收集。谭世俭的研究表明,小于2mm的牛卵泡中的卵母细胞体外囊胚发育率最低,而6-8mm的卵泡中的卵母细胞体外囊胚发育率高。Pavlok 等(1992)研究结果表明,从小于或等于2mm的卵泡收集的卵母细胞体外成熟和受精后胚胎不能发育至8细胞阶段。而应收集卵质均匀、卵丘细胞致密,多层的卵母细胞。COCs的初期质量是决定卵母细胞成熟能力和以后受精能力的重要因素。透射电镜观察到,劣质卵母细胞易发生不正常成熟。胞质不正常或不完整的卵母细胞体外成熟和受精后的胚胎发育率低。因此,为确保牛体外胚胎生产的成功,选择适当大小卵泡和质量合格的COCs是必要的。
卵母细胞的体外常规成熟应在组织培养液和良好的气相条件下进行,同时添加血清或血清和1种或几种激素的混合物。使用发情母牛血清可避免外源激素的增加,添加排卵前后(例如LH高峰后)牛卵泡液可获得同样效果。添加含LH(50ug/mL)和处于发情周期第20天的母牛血清的培养液可提高卵母细胞的成熟质量。绝大多数情况下培养液中添加犊牛血清(FCS)与 LH,FSH和雌二醇E2)结合使用。培养液中加入OCS比FCS和其他激素更能提高成熟卵母细胞的受精力和卵裂率。
1.3卵母细胞的成熟判断
卵母细胞在体内生长期间,各种类型的RNAs合成旺盛,并进行蛋白质积累。在生长期后或体外培养,RNA的合成维持在较低水平,显著的蛋白质合成发生在生发泡破裂前后(Kastovp等1990)。这些新合成的蛋白质不仅与卵母细胞自身成熟有关(激活成熟因子,MPF),而且与卵母细胞受精后的发育有关。卵母细胞受精后3个细胞周期的细胞合成代谢是由贮存在细胞质中的mRNA和rRNA完成的,故细胞质成熟的质量如何,直接影响到早期胚胎发育的能力。卵母细胞成熟后期细胞器完成重新组装,由高尔基复合体分泌形成皮质颗粒,并逐渐向质膜下迁移,高尔基体本身消失,线粒体分布在核周围。胞质内有PAS阳性的囊泡和脂滴。
卵母细胞体外成熟一般是以卵丘细胞扩张、第一极体排出作为形态上的标志。减数分裂的完成仅仅是卵母细胞成熟的一个方面,卵内细胞学变化及蛋白质和RNA的合成与储备是正常受精和卵裂的先决条件。因此,卵母细胞成熟的判定应为卵受精后能否正常卵裂、发育和产仔。总之,要提高体外成熟卵母细胞的质量和数量,主要应解决以下问题: 第一,更好地选择能维持胚胎发育的卵母细胞进行成熟培养;第二,了解控制卵母细胞成熟的机理;第三,探求用以培养出腔前卵泡卵母细胞成熟的培养体系,以扩大卵母细胞的来源。材料及方法
2.1 卵巢卵母细胞的采集
将采集的卵巢置于37 ℃含双抗的灭菌生理盐水的保温瓶中,6 h 内运回实验室。用等温的生理盐水清洗卵巢,用10 mL 注射器吸取卵巢表面 2-5 mm 大小的卵泡,卵泡液收集于培养皿中,待用。
2.2成熟液的配置
成熟液(1):M199;成熟液(2):M199+PMSG(25μg/ mL);成熟液(3):M199+PMSG(50μg/ ml);成熟液(4):M199+PMSG(75ug/ ml)。收集可用于成熟培养的卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus Oocyte Complexes,COCs),将收集的COCs分别用4种不同的成熟液清洗三遍,然后置于含成熟培养液的培养皿中,在38.5℃,5% CO2和饱和湿度的CO2培养箱中培养。
2.3成熟卵的检查
将成熟培养后22h 的 COCs用100μL的微量移液器反复吹吸,去掉成熟卵母细胞表面的卵丘细胞,用M199 洗涤三次,以排出第一极体为成熟标准,然后于显微镜下检查成熟率。结果与分析
表 1不同浓度PMSG对牛卵母细胞体外成熟的影响
培养液
M199+10%FBS
M199+PMSG(25ug/ml)
M199+PMSG(50ug/ml)
M199+PMSG(75ug/ml)卵丘-卵母细胞总数 30 30 30 30 成熟卵母细胞总数 11 21 24 20 成熟率(%)36.770.080.066.7bcba 注:上标a,b,c值表示差异显著(p﹤0.05)。
由上表可见,培养液中无PMSG组成熟率最低36.7%,当成熟液中添加了25μg/ mL 的 PMSG 后,卵母细胞成熟率迅速提高至70.0%,随成熟培养液中 PMSG浓度进一步增加,卵母细胞的成熟率也相应提高,其中50μg/ mL 组卵母细胞的成熟率最高,为80.0%,75μg/ mL 组成熟率略有下降为66.7%,但下降不明显。由表1知,卵母细胞发育早期,PMSG具有促进卵母细胞增殖和分化的能力,成熟液中PMSG 的浓度决定了卵母细胞成熟率。但 PMSG 浓度的大小与卵母细胞激活后卵裂率无关,这可能是与因为在激活过程中去除了颗粒细胞有关。讨论
动物卵泡的发育依赖于 PMSG 的供给。在卵泡的发育过程中,特别是对于初始阶段以后直径为6mm马的有腔卵泡,PMSG起着至关重要的作用。许多学者研究认为,在基础培养基中添加LH能提高卵母细胞的成熟率、受精率及胚胎发育率。Saeki等在牛的研究结果中也表明,LH能显著提高体外成熟卵母细胞的受精能力,而且旭日干用hCG代替LH也取得了类似的结果。FSH也能显著提高体外成熟卵母细胞的体外受精能力及早期胚胎的发育能力,并且常和LH一同使用FSH的作用机理,一般认为可能与诱导卵丘扩散,促进卵母细胞质成熟有关。本试验证实了50μg/ ml PMSG 对于奶牛卵母细胞体外成熟培养发挥着关键的作用。
5结论
培养液中添加浓度为50μg/ mL的 PMSG 对奶牛卵母细胞的成熟率效果最好。
致谢
首先衷心感谢塔里木大学动物科学学院的老师们在我的学习及生活中给予的帮助。在大学五年期间,各任课老师在学习上给予了很大的帮助,如果不是他们的悉心教导,我就不会取得优异的成绩,在此向各位曾经传授我知识的老师们表示感谢。
至此论文完成之际,我衷心的感谢我的指导老师曾维斌,感谢曾维斌老师在学习、工作和生活中给予的亲切关怀和对课题的悉心指导以及对论文进行了细心的审阅,从在整个论文的写作与修改都凝聚着曾老师的心血。老师严谨的科学态度,渊博的专业知识深深的影响了我,让我知道了无论做什么事情都要保持认真,从事科学学研究就要有谨慎的科学的态度平易近人的善品格我在做人做事等诸多方面获益匪浅。仅此,谨向曾维斌老师致以衷心的感谢。
再次感谢动物科学学院的各位领导和老师四年以来对我的培养和教诲,感谢所有关心、支持、帮助我完成学业的领导、老师、同学和朋友们。愿他们工作顺利,身体健康。
参 考 文 献
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[4] 于进亮,董雅娟,柏学进,等.不同浓度的牛卵泡液对牛卵母细胞体外核成熟率的影响[J].安徽农业科学,2007,35(17):5166~5168.[5] 石德顺,卢克焕.牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响[J].广西农业大学学报,1994,13(1):1~5.[6] 周颂成,细井,类彦,等.成熟培养基中添加卵泡液对牛体外受精卵发育的影响[J].畜牧兽医学报,1993,24(8):512~517.[7] 张志平,张君涛,安志兴,等.卵泡液对牛卵母细胞发育潜力的影响[J].中国农学通报,2005,21(8):7~9.[8] 张秀芳,梁贤威,陈明棠,等.水牛卵母细胞体外受精及其胚胎发育的研究[J].畜牧与兽医,2007,11:15~17.[9] 祖晶,林涛,胡艳明,等.不同 bFF对延边黄牛卵母细胞成熟及发育的影响[J].河南农业科学,2008,10:132~135.[10] 禹学礼,昝林森,邓雯,等.卵泡大小及卵泡液对牛卵母细胞体外受精后发育的影响[J].中国农业科学,2005,38(8):1664~1668.[11] 崔亚利,桑润滋.牛卵母细胞体外成熟及体外受精的研究[J].河北农业大学学报,1999,22(1):67~70.[12] 马云,李芬,张琪等.影响牛卵母细胞体外成熟的因素[J].黄牛杂志,2002,26(1):48~51.[13] 刘泽隆,张涌.牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究[J].西北农业大学学报,1999,27(2):17~20.[14] 李希.水牛卵母细胞体外成熟前后基因差异表达的研究[D].广西:广西大学,2008.[15] 檀利长,田宁宁,霍道坦,等.牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟及受精胚发育力的影响[J].黑龙江动物繁殖,2008,16(5):3~5.[16] 禹学礼,昝林森,邓雯,等.卵泡大小及卵泡液对牛卵母细胞体外受精后发育的影响[J].中国农业科学,2005,38(8):1664~1668.
第二篇:最好的毕业论文小结模版
2011年1月,我开始了我的毕业论文工作,经过长时间的写作到现在论文基本完成。论文的写作是一个长期的过程,需要不断的进行精心的修改,不断地去研究各方面的文献,认真总结。历经了这么久的努力,终于完成了毕业论文。在这次毕业论文的写作的过程中,我拥有了无数难忘的感动和收获。1月初,在与导师的交流讨论中我的题目定了下来,是:从电影摄影的窥视角度看大众的视觉心理。当开题报告定下来之后,我便立刻在学校的图书馆着手资料的收集工作中,当时面对众多网络资料库的文章真是有些不知所措,不知如何下手。我将这一困难告诉了指导老师,在老师的细心的指导下,终于使我了解了应该怎么样利用学校的浩瀚的资源找到自己需要的资料,找了十几本参考文献,认真的阅读,总结笔记,为自己的论文打好基础。
在搜集资料后,我在电脑中都进行分类的整理,然后针对自己不同部分的写作内容进行归纳和总结。尽量使我的资料和论文的内容符合,这有利于论文的撰写。然后及时拿给老师进行沟通,听取老师的意见后再进行相关的修改。老师的意见总是很宝贵的,可以很好的指出我的资料收集的不足以及需要什么样的资料来完善文章。
3月初,资料已经查找完毕了,我开始着手论文初稿的写作。初稿的写作显得逻辑结构有点不清晰,总是想到什么相关的问题就去写,而没有很好的分出清晰的层次,让文章显得有点凌乱,这样的文章必然是不符合要求的,但毕竟是初稿,在老师的指导下还要进行反复的修改。
写作毕业论文是我们每个大学生必须经历的一段过程,也是我们毕业前的一段宝贵的回忆。当我们看到自己的努力有收获的时候,总是会有那么一点点自豪和激动。任何事情都是这样子,需要我们脚踏实地的去做,一步一个脚印的完成,认真严谨,有了好的态度才能做好一件事情,一开始都觉得毕业论文是一个很困难的任务,大家都难免会有一点畏惧之情,但是经过长时间的努力和积累,经过不断地查找资料后总结,我们都很好的按老师的要求完成了毕业论文的写作,这种收获的喜悦相信每个人都能够体会到。这是一次意志的磨练,是对我实际能力的一次提升,相信对我未来的学习和工作有很大的帮助。在这次毕业论文中同学之间互相帮助,共同商量相关专业问题,这种交流对于即将面临毕业的我们来说是一次很有意义的经历,大学四年都一起走过了,在最后我们可以聚在一起讨论学习,研究专业问题,进而更好的了解我们每个人的兴趣之所在,明确我们的人生理想,进而在今后的生活和工作中更好的发挥自己的优势,学好自己的专业,成为一个对于社会有用的人.在此更要感谢我的导师,是你的细心指导和关怀,使我能够顺利的完成毕业论文。管很多时候我自己并没有特别重视论文的写作,没有按时完成老师的任务,但是老师还是能够主动地和我联系,告诉我应该怎么样修改论文,怎么样按要求完成论文相关的工作。老师的检查总是很仔细的,会认真的看论文的每一个细小的格式要求,认真的读我的论文,然后提出最中肯的意见,这是很难得的。
第三篇:最好辞职信
最好辞职信
最好辞职信1
尊敬的苗经理(或公司人事部):
您好!
我很遗憾自己在这个时候向公司正式提出辞职。
我来公司也快一年了,也很荣幸自己成为XX公司的一员。在公司工作一年中,我学到了很多知识与技能,公司的经营状况也处于良好的态势。非常感激公司给予了我在这样的良好环境中,工作和学习的机会。
但是我因为个人原因需要辞职,因我新购房屋在城南,到公司的距离超过15公里,每天往返公司的时间超过3个小时,这对我的工作已造成不良影响,(离职原因也可以写成:因本人身份的缘故,需回家调养,希望不要因为我的个人原因,影响了工作的进展。)因此,我不得不忍痛离开热爱的岗位。
我希望在XX年X月XX日之前完成工作交接,请领导安排工作交接人选。在未离开岗位之前,我一定会站好最后一班岗,我所在岗位的工作请领导尽管分配,我一定会尽自己的职,做好应该做的事。
望领导批准我的申请,并请协助办理相关离职手续。
祝您身体健康,事业顺心。并祝公司以后事业蓬勃发展。
此致!
敬礼!
申请人:***
时间:*******
最好辞职信2
尊敬的院领导:
您好! 首先感谢各位领导长期以来对我工作的关心,支持与肯定。 前不久,我看了一篇文章——老师的将来。讲述了一位老师从走出学校,走上社会的心灵成长历程。生活的艰辛,社会的残酷使我久久不能入睡。我不停反思自己的生活。难道生活中的校园与现实社会真的有那么大的区别?难道除了校园,外面的世界就找不到一块心灵的静土? 三个不眠之夜,萌生了我跨出校门的念头。
今天我终于鼓起勇气写了这封辞职信,就像我鼓起勇气选择的人生道路。希望各位领导能同意我诚恳地请求。
三尺讲台,将是我永远的怀念!不老的情结!
此致
敬礼!
辞职人:
xx年x月x日
最好辞职信3
一、辞职信的写法
(一)标题
在第一行中间写“辞职书”三个字,或写“辞去×××工作”等字样。
(二)称谓
在第二行顶格写任职单位负责人姓名。
(三)正文
写明辞职的原因,辞去什么职务,什么工作。
(四)结语
在正文后面写表示歉意的语句。
(五)署名、日期
在正文右下方写上辞职人的姓名,在署名下面写具体的年、月、日。
二、写辞职信应注意的问题
1.理由要充分、可信。写辞职书,一定要充分考虑辞职的理由是否充分、可信。因为只有理由充分、可信,才能得到批准。但陈述理由的文字应扼要,不必展开。
2.措辞要委婉、恳切。用委婉、恳切的言词来表明辞职的诚意。
三、辞职信范文
尊敬的院领导:
您好!首先感谢您在百忙之中抽出时间阅读我的辞职信。我是怀着十分复杂的心情写这封辞职信的。自我进入口腔医院颌面外科之后,由于院领导、科主任对我的关心、指导和信任,使我获得了很多机遇和挑战。
经过这段时间在口腔医院颌面外科的工作,我在口腔颌面外科学到了很多知识,积累了一定的临床经验,对此我深表感激。这段时间,我认真回顾了这三年来的工作情况,觉得来口腔医院工作是我的幸运,我一直非常珍惜这份工作,这三年多来医院领导、科主任对我的关心和教导,颌面外科同事们对我的帮助让我感激不尽。在口腔医院工作的三年多时间中,我学到很多东西,无论是从专业技能还是做人方面都有了很大的提高,感谢医院领导对我的关心和培养,对于我此刻的离开我只能表示深深的歉意。非常感激口腔医院给予了我这样的工作和锻炼机会。本人xxx与口腔医院的合同于20xx年8月12日到期。
由于我自身能力的不足,近期的工作让我觉得力不从心。为此,我进行了长时间的思考,觉得口腔医院目前的工作安排和我自己之前做的职业规划并不完全一致,而自己对一个新的领域也缺乏学习的兴趣。经过深思熟虑之后我决定辞去目前在口腔医院颌面外科所担任的职务和工作。
我已准备好在下周一从口腔医院离职,并且在这段时间里完成工作交接,以减少因我的离职而给医院工作带来的不便。能为医院效力的日子不多了,但是我一定会把好自己最后一班岗,做好工作的交接工作,离开口腔医院,离开这些曾经同甘共苦的同事,很舍不得,舍不得领导们的教诲,舍不得同事之间的那片真诚和友善。在口腔医院的这段经历于我而言非常珍贵。将来无论什么时候,我都会为自己曾经是口腔医院的一员而感到荣幸。我确信在口腔医院的这段工作经历将是我整个职业生涯发展中相当重要的一部分。祝院领导和所有同事身体健康、工作顺利!再次对我的离职给科室带来的'不便表示抱歉,同时我也希望医院领导能够体恤我的个人实际,对我的申请予以考虑并批准。
此致
敬礼!
申请人:xxx
时间:XX年XX月XX日
最好辞职信4
尊敬的苗经理(或公司人事部):
您好!
我很遗憾自己在这个时候向公司正式提出辞职。
我来公司也快一年了,也很荣幸自己成为XX公司的一员。在公司工作一年中,我学到了很多知识与技能,公司的经营状况也处于良好的态势。非常感激公司给予了我在这样的良好环境中,工作和学习的机会。
但是我因为个人原因需要辞职,因我新购房屋在城南,到公司的距离超过15公里,每天往返公司的时间超过3个小时,这对我的工作已造成不良影响,因此,我不得不忍痛离开热爱的岗位。
我希望在20xx年X月XX日之前完成工作交接,请领导安排工作交接人选。在未离开岗位之前,我一定会站好最后一班岗,我所在岗位的工作请领导尽管分配,我一定会尽自己的职,做好应该做的事。
望领导批准我的申请,并请协助办理相关离职手续。
祝您身体健康,事业顺心。并祝公司以后事业蓬勃发展。
此致
敬礼!
辞职人:xxx
日期:xxxx年xx月xx日
最好辞职信5
尊敬的校长:
你好。首先向你说声对不起,我辜负了你对我的期望,今天写信是向您提出辞职的。
自去年分配到我校以来,我一直受到了您的各方面的帮助,对此我是感恩不尽的。刚大学毕业,我由一名学生成了一位光荣的人民教师,对教师这职业我是既熟悉又陌生。感谢一年来您和诸位校领导对我的悉心栽培和备至关怀。来罗塘小学已经有一年了,当初刚来学校时我什么也不懂,胆子也很小。正是在您的帮助下,我才适应了环境,了解了学校的基本情况,使得自己的工作走上了正轨。
回忆总是甜蜜的。在罗塘小学的时候,我总会去看看学校那口古老的井,站在办公室二楼,看到校墙外,那一片片是金色的麦田,抬头看到的是蓝天白云,呼吸的是新鲜的空气,这里的一切令我陶醉,这里的少年让我感动,这个学校的精神,让我为之动容。
我也和事先离开学校的年轻同事们一样,离开了这所曾是我们了解社会、实践教学经验的,给我们快乐且促使我们尽快成长的校园。
在崛起工作的一年,是我踏入罗塘小学的第一年,无论在教学上还是在班级管理上,我都受益匪浅。感谢您给了我这样好的锻炼机会。在这一年的工作中,由于性格和工作经验等原因,给您和学校带来了不少的麻烦,在此,诚致歉意!。回想刚来罗塘小学的时候,满怀憧憬。如今的我,依然如故。在学校一年的教学生活中,我切实感受到了教育的点点滴滴,虽辛苦却也甜蜜。现将辞职之由呈上,劳烦过阅。我心向往自由,个性之自由,空间之自由,时间之自由。平凡若我辈,庸碌若我辈,不求名垂青史,只愿活出自我。费精劳神,历辛尽苦,有所不悔。
我会怀恋在罗塘小学这三尺讲台的。
感谢诸位给予我职期间的信任和支持,并祝所有领导和同事们在工作中取得更大的成绩。
辞职人:
20xx-12--30
最好辞职信6
尊敬的领导:
您好!
我进**已经有几个月了,由于我个人的原因。经过深思熟虑地考虑,我决定辞去我目前在公司所担任的职位。
我非常重视在**公司内这段经历,也很荣幸成为**的一员,特别是**的处事风范及素质使我倍感钦佩。在**这几个月所学到的知识也是我一生宝贵的财富。也祝所有**成员在工作和活动中取得更大的成绩及收益!
望领导批准我的申请,并请协助办理相关离职手续(本人在2**年*月*日离职)。在正式离开之前我将认真继续做好目前的每一项工作。
愿祝**生意兴隆!
敬请领导同意并批复!
辞职人:xx
时间:XX年2月26日
第四篇:2012最好看电影推荐
【2012最好看电影推荐】《那些年,我们一起追的女孩》《失恋33天》《阳光姐妹淘》《最后一次初恋》《错位青春》《他们在毕业的前一天爆炸》《单车男孩》《音为爱》《翻滚吧!阿信》《灵冲浪人》《家庭作业》《潜水艇》《等到永远》【14部闺蜜电影推荐】《末路狂花》《欲望都市》《NANA》《花与爱丽丝》《20、30、40》《萨玛利亚女孩》《死亡教室3:狐狸阶梯》 《东京闺蜜电影版》《紫色》《自梳》《阳光姐妹淘》《牛仔裤的夏天》《亲爱的伽利略》《焦糖》【】
1、缺乏学习动力:《幸福终点站》、《风雨哈佛路》;
2、对爱失望:《偷天情缘》、《初恋50次 》;
3、自卑失落:《阿甘正传》、《肖申克的救赎》;
4、失败或绝望:《铁权男人》、《迫在眉梢》、《伊丽莎白镇》;
5、厌倦生活:《在世界的转角遇见爱》、《搏击俱乐部》....【最费脑力的14部电影】《盗梦空间》、《记忆裂痕》、《生死停留》、《死亡幻觉》、《禁闭岛》、《穆赫兰道》、《蝴蝶效应》、《恐怖游轮》、《伤城》、《盗走达芬奇》、《88分钟》、《万能钥匙》、《决胜21点》、《沉默的羔羊》......【结局最意外的20部电影】《搏击俱乐部》、《迷雾》、《心理游戏》、《第六感》、《蝴蝶效应》、《 电锯惊魂》、《赛末点》、《 穆赫兰道》、《非常嫌疑犯》、《魔术师》、《小岛惊魂》、《万能钥匙》、《火柴人》、《七宗罪》、《魔鬼代言人》、《孤儿》、《八面埋伏 》、《香水》、《偷拐抢骗》...【走进12星座女孩内心世界的电影】《情人》白羊座、《绿荫下》金牛座、《初恋五十次》双子座、《黑暗中的舞者》巨蟹、《办公室的故事》狮子座、《傲慢与偏见》处女、《西西里的美丽传说》天秤、《布达佩斯之恋》天蝎、《艳舞女郎》射手、《杨朵儿》摩羯、《罗丹的情人》水瓶、《 天使艾米丽》双鱼【世界十大禁片——心理承受能力差的看看片名就好】暴力,恶心,荒诞、残忍,肮脏的大集合:《我唾弃你的坟墓》、《切肤之爱》、《**》、《杀人不分左右》、《魔法圣婴》、《感官世界》、《罗马帝国艳情史》、《不可撤消》、《下水道的美人鱼》、《索多玛120天》【16部讲天才的电影】《美丽心灵》、《雨人、《波拉克》、《暗物质》、《天才瑞普利》、《猫鼠游戏》、《香水》、《一级恐惧》、《心灵捕手》、《莫扎特传》、《证据》、《海上钢琴师》、《电锯惊魂》、《沉默的羔羊》、《非常嫌疑犯》、《寻找弗罗斯特》..【女人必看的十部电影】
1、《乱世佳人》(坚强)
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第五篇:2013最好总结
2013工作总结
回首过去的一年,我的工作有着与同事共同安装设备的艰辛,也有在维修中碰到困难难以解决时的迷惘,更有工作安排中遇到挫折而改变不了的惆怅。当然也有工作之于静静感受劳动成果的喜悦。现将一年主要工作总结如下:
1.设备安装
2013年设备保养班共安装改造设备12台。年初按公司计划要求在4月份完成对铜拉丝机和框绞机等周边设备安装。记得班组员工在刘班带领下加班加点,不畏艰辛,从基础挖掘到混凝土浇灌和水电气的安装都秉承平、准、精、稳的原则顺利完成任务。接下来到了生产忙季,公司为了降低拉丝所产生的粉尘,给员工创造更好的工作环境,又着手更换拉丝设备,把大量产生粉尘的滚筒拉丝机更换成水箱式拉丝机。在炎热得夏季,站在那里就出一身汗的情况下,我们还是以认真负责,精益求精的态度为生产进度赢取时间。公司领导看在眼里,为了员工的辛勤劳动,又补发了高温补贴,使我们干劲十足,圆满完成安装调试工作。在随后得到七八月份,附件金具车间为了扩证需要,陆续的购买了摩擦压力机和摩擦焊接机及高频熔炉等设备,我们班组都按质按量完成工作。
2.设备维修
上半年保养班共5名员工裁减了两名,但设备维修工作也没落下,虽然在生产过程中发生过旧90挤塑机主牵引涡轮箱磨损停机和新90机直流控制器过流跳闸击穿晶闸管故障,但在曹厂长和周主管的直接帮助下及时购买更换维修,没造成浪费过多时间而影响生产进度。在这件事中,我们也汲取教训,对有些不是易磨损部件,在突发损伤后难以及时购买到现货,厂家也需要一段时间的情况下,也要有提前购买备份的方案,做到有备无患。在总结经验上,我认为欲善其事,必先利其器。只有提高自身的维修水平,才能在设备维修成本上节省开支,已最低的维修费用修复设备,对已损坏的部件要进行分解,缩小故障范围,避免直接大卸大拆更换整套配件。在确保设备使用性能上,通过变更改造难以维修部分,减少外修次数。举个例:附件车间压铸机电炉发生多次因晶闸管击穿和仪表损坏不能加热,经更换配件都不能修复,厂家来人费用又很高,在这种情况下提出建议,经曹厂长同意重新更改设计电路,就解决了根本依靠厂家维修的问题。
3.厂务工作
公司在不断发展,厂务制作维修工作也是不断增加。在5月份公司考勤实行电脑扫描后,由于传达室桌面太小放不下监控显示器和扫描显示器,员工的扫描条形码张贴在墙上七零八乱,于是提议经曹厂长同意请购木料自制了现有的弧形工作桌。这样既整洁了传达室空间坏境,又提升了公司形象,也得到了员工的好评。在7月份公司为了对附件计件工时做到有效管控,把二楼增加了6个监控镜头。办公室为了安全和管理需要也安装了16个镜头。接下来的7月份公司决定把设备保养班和模具可用仓搬移到附件车间,我们班组顶着夏日酷暑完成了物料铁棚从基础浇灌到制作工作。在这段时间当中也穿插设计制作了仓库的穿刺刀片计数机和筛料机。在11月份生产忙季我们挤出时间在计划内把蒸汽交联柜进行了改造,完成水电气安装调试。
4.自我体会
天行健,君子以自强不息。工作中积极进取的心态才能保持工作激情。埋头苦干虽是本分的工作方式,但好的工作技术和判断能力会更使工作事倍功半,使之顺利。加强学习,虚心求教,使自己技能进一步提高是我来年的自我要求。同事之间做到多一点沟通,少一点摩擦,多一点信任,少一点猜凝,使团队的力量更加强大是我来年的工作目标。过去的2013年,忙碌是我工作的主旋律,我总相信在XX公司一路走来,哪里流过汗水,哪里就有收获。最后祝愿XX公司事业如登山,一步比一步高。
设备保养班:曹尚峰
2013年12月8日星期日