第一篇:小鼠缺氧实验实验报告
/ 13 文档可自由编辑 篇二:缺氧
缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
【摘要】目的:本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法,观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化,并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法:通过复制缺氧动物模型,观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果:中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比,存活时间和总耗氧率有显著性差异;复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论:给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率,延长其存活时间(p<0.01)。co 中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间,降低呼吸频率。美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用,已定程度延长小鼠存活时间,延缓呼吸频率的下降。
【关键词】缺氧 氯丙嗪 总耗氧率 co 亚硝酸盐 美兰 存活时间
当供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型,不同类型的缺氧,机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。
1.材料和方法
1.1 实验动物:小白鼠(雌性)。
1.2 药品:氯丙嗪(chlorpromazine)、钠石灰(soda lime),亚硝酸钠(sodium nitrite)、亚甲基蓝(美蓝)(methylene blue,mb)、0.9%nacl(physiological saline solution)、co(carbon monoxide)。
1.3 器材:100、500ml 广口瓶和测耗氧装置。
1.4 方法
1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
取 2 只性别相同体重相近的小鼠,准确称取体重,并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按 0.1ml/10g 体重腹腔注射 0.25%氯丙嗪,随即安放在冰浴的纱布上
10~15min,使呼吸频率降至 70~80 次/min;生理盐水组按0.1ml/10g 体重腹腔注射生理盐水,室温放置 10-15min,作为对照。/ 13 文档可自由编辑 之后将 2 只小鼠分别放入 100ml 的广口瓶内,连接好测耗氧装置。如右图。
1.4.2 不同原因造成的缺氧
取 2 只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有 5g 钠石灰的 100ml 密闭瓶中;一氧化碳中毒组小鼠放入 500ml 密闭瓶,注入 10ml co 气体。
另取 2 只性别相同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射 50g/l 亚硝酸纳 0.2ml,并随即腹腔注射生理盐水 0.2ml;亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射 50g/l 亚硝酸纳0.2ml 后即刻腹腔注射 10g/l 亚甲基蓝 0.2ml。
2.观察项目
2.1.中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
记录下小鼠的体重 w(g)。从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡,分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间 t(min)、总耗氧量 a(ml)。按以下公式计算出总耗氧率 r[ml/(g·min)]:
r[ml/(g·min)]= a(ml)÷w(g)÷t(min)
2.2.不同原因造成的缺氧
乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组:处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待塞紧瓶塞开始记时后,每隔 5min 测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化,直至小鼠死亡。记录死亡时间。
亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组:处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待注射药品后,每隔 5min 测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化,直至小鼠死亡。记录死亡时间。
将 4 只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。
3.实验结果
4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重无显著性差异(p>0.05);氯丙嗪组小鼠的耗氧量为 12.7±5.02 ml,生理盐水组小鼠的耗氧量为 16.0±3.01 ml,两者无明显差异(p>0.05);氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活时间为 44.7±17.21 min,生理盐水组小鼠耐缺氧时间为 21.0±3.61,两者相比有高度显著性差异/ 13 文档可自由编辑(p<0.01);氯丙嗪组小鼠的耗氧率为 0.013±0.005(ml/g/min),生理盐水组小鼠的耗氧率 0.03±0.002(ml/g/min),两者相比有高度显著性差异(p<0.01)。见表 1。
表 1.氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表
小鼠体重(g)
样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9
对照 23 19
实验 22 25 22 25 24 22 23 22 22 23.0±1.32&
总耗氧量(ml)
对照
19.5
14.0
16.0
14.0
17.4
17.0
11.5
21.0
13.5
16.0±
3.01
实验
存活时间(min)
总耗氧率((ml/g/min)
对照
实验 47
35 23 24 59 31 60 71 44.7±17.21*
对照
0.034
0.035
0.033 0.035 0.033 0.034 0.031 0.037 0.029 0.03±
0.002
实验 0.01 0.011 0.013 0.014 0.016 0.015 0.024 0.005 0.012 0.013±0.005#
10.514.310.0
8.0
9.5
19.9
17.0
6.0
19.0
12.7±5.02$
2621.0±
3.6125 25 23 25 22 22 22.9±
x?s
1.96
注:*p<0.01 vs 对照组 ;p<0.01 vs 对照组;&p>0.05 vs 对照组,$p>0.05 vs 对照组 3.2 不同原因造成的缺氧
由表 2 可知,亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间最短,其次为 co中毒组。存活时间最长的是亚硝酸钠+美兰组,可见美兰具有抗亚硝酸钠中毒的作用。
表 2.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率(次/10 秒)
缺氧类型 乏氧 co 中毒 亚硝酸钠 亚硝酸钠+
美兰
0min 29.7±4.90 29.7±5.90 29.7±3.54 29.7± 5.68
5min 31.2±6.96 24.7±8.72 26.1±7.13 25.9± 4.99/ 13 文档可自由编辑 10min 30.4±7.52 26.8±9.31
28.7± 8.38
15min 25.0±8.97
28.5± 6.02
20min
30.1±6.83
25min
29.5±6.07
30min
28.9±6.24
5.3 亚硝酸钠中毒与亚硝酸钠+美兰的两组小鼠的存活时间有显著性差异,美兰组存活时间显著延长(p<0.01)。见表 3。
表 3.亚硝酸盐中毒及其美兰的治疗效果
缺氧类型
亚硝酸盐中毒性缺氧 亚硝酸盐中毒性+美兰 存活时间 9.56±1.59 48.67±14.23*
注:p<0.01
3.4 分别观察乏氧性缺氧组、一氧化碳中毒组、亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组的小鼠肝脏组织颜色,如表 3。
表 4.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒的小鼠存活时间和肝血、耳尾唇颜色比较 类别 乏氧
体重(g)19
存活时间(min)
肝血颜色 暗红色
耳尾唇颜色 青紫色(紫绀)
co
nano2 nano2+mb18 18.512 30
樱桃红色 深咖啡色 浅咖啡色
樱桃红色 青石板色 青石板色,稍浅
6.讨论
6.1.实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组,耗氧率也显著低于生理盐水组。氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物,主要阻断脑内多巴胺受体和 α 肾上腺素受体和 m 胆碱受体,具有神经安定作用,它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后,置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止,新陈代谢率降至最低,因此能量利用减/ 13 文档可自由编辑 少,单位时间的耗氧量减少,即耗氧率减小。在氧总量相等的情况下,存活时间就比生理盐水组长。
6.2.乏氧性缺氧,主要表现为动脉血氧分压降低,氧含量减少,组织供养不足。正常毛细血管的血液中氧离血红蛋白浓度约为 26g/l。乏氧性缺氧时,动静脉血中的氧离血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中氧离血红蛋白浓度达到或超过 50 g/l时,可使皮肤和粘膜呈青紫色。
co 与 hb 的亲和力比 o2 大 210 倍,hb 与 co 结合形成碳氢 hb,从而失去运氧功能。co 同时还能抑制红细胞内糖酵解,使其 2,3-dpg 生成减少,氧离曲线左移,妨碍 hbo2 中的氧解离,从而造成组织严重缺氧。此时外呼吸功能正常,故动脉血氧分压及血氧饱和度正常,但 hb数量减少或性质改变,使血氧容量降低。组织中 hbco 增多,故皮肤、粘膜呈樱桃红色。
亚硝酸盐可使 hb 中二价铁氧化成三价铁,形成高铁 hb(hbfe3+oh),三价铁因与羟基牢固结合而丧失携氧能力,加上 hb 四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的 fe2+与氧亲和力增高,导致氧离曲线左移,使组织缺氧。高铁 hb 呈咖啡色或青石板色,因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色[2]。低浓度美兰为还原剂,抑制了氧化剂(亚硝酸钠)的中毒反应,中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间延长 2 倍以上。本实验结果也显示,亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间(表 3),说明美兰具有较好的拮抗作用。
6.3.钠石灰的作用:钠石灰在两个实验中的用途也有很大区别:实验一中缺氧瓶内钠石灰吸收小鼠呼吸产生的 co2 造成负压,利于正确地测出耗氧量;实验二中加入钠石灰是为了排除高碳酸血症对缺氧实验的影响。
参考资料:
1.陆源,夏强.生理科学实验教程.杭州:浙江大学出版社,2004:240.
2.陈季强.基础医学各论(上册).北京:科学出版社,2004:492,495-496.篇三:小鼠缺氧模型及其分析
缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素
高伟飞
(浙江中医药大学滨江学院级
临床专业临滨 1 班 4 组
20102090114)/ 13 文档可自由编辑 一、实验目的:
1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用
2.复制几种类型缺氧的模型,观察血液颜色的特点,分析其机制
根据大纲要求:
掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫绀、肠源性紫绀。
熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。
熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。
掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化)。
二、实验原理:
当组织供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧,其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。
影响机体对缺氧耐受性的因素很多,如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度,观察动物的缺氧耐受性。
三、实验对象:小鼠
四、实验材料:电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸;生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等
五、实验方法:
1、
取 2 只小鼠,注射及处理:号:亚硝酸钠及美兰 0.2ml,左下腹注射号:亚硝酸钠及生理盐水各 0.2ml,左下腹注射
注射完,观察,2 号小鼠立即死亡,1 号小鼠仍存活;然后处死解剖,剪下一片肝脏组
织放于滤纸上,观察肝的颜色。
2、取 2 只小鼠称重,编号 3、4
注射及处理:号:氯丙嗪
0.2ml,左下腹注射号:生理盐水 0.2ml 左下腹注射/ 13 文档可自由编辑 将 3、4 号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶,塞上塞子,记录下量筒的液面,连通耗氧装置,开始计时,直至小鼠死亡,记录下时间和量筒下降的液面刻度
计算两只小鼠的耗氧量
小鼠耗氧率 r(ml/min/g)=a/(w*t.)
六、实验结果:
1、几种类型的缺氧
序号
1.注射及处理 nano2+美兰
0.2ml
2.nano2+生理盐
水 0.2ml
2、不同条件下小鼠缺氧耐受性
序体重注射及处理 存活时
间
氯丙嗪 0.2ml
(冰浴)20.6 生理盐水(常
温)分 18 0.032 27 分 总耗氧量(ml)8 耗氧率(ml/min/g)0.016 血液性缺氧 青石板色 缺氧类型 血液性缺氧 肝脏颜色 暗红色 号(g)18.8
七、实验分析:
1、血液性缺氧:由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。
亚硝酸盐可使血红素中二价铁氧化成三价铁,形成高铁血红蛋白,导致高铁血红蛋白血症。美兰为还原剂,可抑制氧化剂的中毒反应。因此 1 号小鼠存活,2 号小鼠死亡。
2、不同条件下小鼠缺氧耐受性
氯丙嗪是中枢多巴胺受体的阻断剂,具有镇静、抗精神病、镇吐、降低体温及基础代谢、α-肾上腺素能受体及 m-胆碱能受体阻断、抗组织胺、影响内分泌等作用,再加上冰浴,制造低温环境,使得 3 号小鼠的基础代谢率将为最低,可延长其死亡时间。
八、实验结论:
1、缺氧是这 2 小鼠死亡的共同原因,不同的药物是小鼠死亡的条件,氯丙嗪加上低温可延长小鼠的死亡时间。/ 13 文档可自由编辑 2、高铁蛋白血症(亚硝酸盐中毒)属于血液性缺氧,原因:二价铁离子被氧化为三价铁离子,肝脏呈青石板色。篇四:抗缺氧实验
《中药药理学》
实验教学大纲
(供四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用)
ⅰ
前言
本大纲适用于四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用。编写本大纲的目的是要求学生在学习中药药理学基础课的过程中,通过实验课的学习使学生掌握必要的中药药理实验原理、方法和技能,能正确、合理地使用仪器,为学习中医学基础课、中药学专业课打下牢固的基础;培养学生严肃认真的工作作风、实事求是的科学态度和独立分析问题、解决问题的能力;培养学生观察和分析实验现象的能力,巩固和加深对中药药理现象和规律的理解。现将大纲使用中有关问题说明如下:
一 为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标,教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别,教学内容与教学要求级别对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划虚线,一边内容不标示)便于学生重点学习。
二 教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。
三 总教学参考学时为 12 学时。
四 使用教材:《中药药理学实验指导》,由中药药剂教研室自编。
ⅱ
正文
实验一
柴胡对发热家兔的解热作用
一 教学目的观察柴胡对发热家兔及正常兔体温的影响,了解柴胡解热作用的特点
二 教学要求
(一)掌握发热动物模型的制作方法。
(四)掌握肛温计测定家兔体温的方法。
(五)掌握动物模型分组方法。
(六)熟悉实验结果的统计处理方法。
(七)了解实验数据座标图示法。/ 13 文档可自由编辑 三 教学内容
(一)动物选择原则。
(二)测量正常体温值。
(三)分组。
(四)家兔发热模型的制作。
(五)给药。
(六)测量不同时段的体温值。
(七)实验数据的处理与图示法。
(八)实验报告的书写要求。
实验二
生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响(炭末法)
一 教学目的了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄、芒硝配伍的药理意义
二 教学要求
(一)掌握泻下药推进小肠运动的实验方法。
(二)熟悉炭末法。
(三)掌握炭末推进率测量与计算方法。
(四)了解小白鼠幽门与回盲部解剖部位。
三 教学内容
(一)
动物选择原则。
(二)
称重,标记。
(三)分组。
(四)灌胃给药。
(五)处死动物,解剖。
(六)测量尺寸。
(七)计算,实验数据处理。
(八)实验报告的书写要求。
实验三 延胡索及金铃子散镇痛作用
一 教学目的了解用热板法和扭体法筛选镇痛药的实验方法;观察延胡索及金铃子散的镇痛作用。
二 教学要求
(一)掌握热板法与扭体法。
(二)掌握痛阈值的测定方法。/ 13 文档可自由编辑(三)掌握合格小鼠筛选方法。
(四)熟悉实验结果的统计处理方法。
(五)了解实验数据座标图示法。
(六)掌握判定扭体反应的方法。
三 教学内容
(一)动物选择原则。
(二)测量正常痛阈值。
(三)筛选,分组。
(四)给药。
(五)测量不同时段的痛阈值。
(六)实验数据的处理与图示法。
(七)实验报告的书写要求。
实验四 人参抗应激作用
一 教学目的学习小白鼠游泳和耐常压缺氧的实验方法,研究人参抗应激作用。
二 教学要求
(一)掌握小白鼠游泳实验方法。
(二)掌握小白鼠耐常压缺氧的实验方法。
(三)熟悉实验结果的统计处理方法。
三 教学内容
(一)动物选择原则。
(二)测量水温。
(三)筛选,分组。
(四)给药,记时。
(五)测量小鼠游泳时间和耐缺氧时间。
(六)实验数据的处理。
(七)实验报告的书写要求。
ⅲ
教学组织与考核方法
一 实施机构:由中药药剂教研室执行。
二 组织内容:教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。
三 教学方法:
(一)实验教学:采用启发式、讨论式、交互式课堂教学方式,辅助现代教育技术和传统教学手段。重点内容以介绍为主,一般内容以自学为主。/ 13 文档可自由编辑(二)教学点:在中药药剂实验室教学,承担教师由中药药剂教研室委派。
(三)辅导形式:课堂答疑、讨论、复习等结合。
四 考核办法:每次实验后批改实验报告,学生的实验操作及报告成绩占课程总评成绩的 20%;实验要点考核占课程期末考试卷面成绩的10%左右。
ⅳ
教学时数分配表
实验内容
教学时数
实验类型
实验一
柴胡对发热家兔的解热作用
验证型 实验二
大黄对小白鼠小肠运动的影响
验证型 实验三 元胡及金铃子散对小白鼠的镇痛作用
验证型 实验四
人参抗应激作用
验证型
合计
篇五:小白鼠的缺氧实验
缺氧对小白鼠体征的影响
(潍坊医学院 2009 级临床 26 班 山东潍坊 261053)
[摘要]目的:观察缺氧对小白鼠体征的影响。
方法:取五只小白鼠,通过制作小白鼠的乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧三种模型并与正常状态的小白鼠作对比,观察小白鼠的行为及皮肤、黏膜、肝脏的变化。
结果:小白鼠的乏氧性缺氧模型肝脏为青紫色,一氧化碳中毒性缺氧模型为樱桃红色,亚硝酸钠中毒性缺氧模型肝脏青石板颜色,正常小白鼠肝脏为红色。
结论:不同的缺氧因素对小白鼠肝脏颜色有不同影响。
[关键词]乏氧性缺氧,一氧化碳中毒性缺氧,亚硝酸钠中毒性缺氧,青石板颜色
前言
缺氧是由于机体供氧不足或组织利用氧障碍引起的机体代谢、功能和形态结构改变的病理过程[1]。理论上由于不同机制的缺氧通过对血红蛋白的影响改变了血红蛋白的颜色从而我们可以复制相应模型以观察其血液的变化。至于类似的实验,前人已经将其机制研究清楚了,做本次实验只是加以验证,观察是否与理论相符合,有时也许会有新的发现,但主要是为以后的临床学习打下基础。
材料与方法/ 13 文档可自由编辑 1.实验材料
器材:小白鼠缺氧瓶、co 发生装置、1ml 注射器、酒精灯、剪刀、镊子。
药品:钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。
动物:小白鼠
2.缺氧模型的制备
2.1 乏氧性缺氧模型的制备
(1)取钠石灰约 5g 及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况,呼吸频率(次/10s),深度,皮肤和口唇粘膜颜色,然后紧塞瓶塞,记录时间,以后每 3min 重复观察上述指标 1 次(如有其他变化则随时记录)直到动物死亡为止。
(2)动物尸体留待 2.2、2.3、2.4 实验做完后,再依次打开其腹腔,比较血液或肝脏颜色。
3.2 一氧化碳中毒性缺氧模型的制备
(1)装好 co 发生装置。
(2)将小白鼠放入广口瓶中,观察其正常表现,然后与 co 发生装置连接。
(3)取甲酸 3ml 放入试管中,加入浓硫酸 2ml,塞紧。(可用酒精灯加热,加速 co 产生,但不可过热以至液体沸腾,因 co 产生过多过快动物迅速死亡,血液颜色改变不明显。)
(4)观察指标与方法同上。
4.3 亚硝酸钠中毒性缺氧模型的制备
(1)取体重相近的两只小鼠,观察正常表现后,向腹腔注入 5%亚硝酸钠 0.3ml,其中一只注入亚硝酸钠后,立即再向腹腔注入 1%美兰溶液 0.3ml,另一只再注入生理盐水 0.3ml。
(2)观察指标与方法同 2.1,比较两鼠表现及死亡时间有无差异。
5.4 解剖正常小白鼠
取一只未做处理正常的小鼠,观察体表特征,后处死,观察其肝脏颜色。
实验结果
类型
呼吸频率、幅度 肝脏颜色
皮肤粘膜颜色
先加深加快
低张性缺氧
后变浅变慢 暗红色
青紫色/ 13 文档可自由编辑 一氧化碳中毒 无改变 樱桃红色
樱桃红色
亚硝酸钠中毒 无改变 青石板颜色 青石板颜色
正常小白鼠 无改变 红色
红色
讨论
1.乏氧性缺氧:轻度缺氧使呼吸中枢兴奋,呼吸先加深加快,重度缺氧抑制呼吸中枢使呼吸变浅变慢,皮肤黏膜呈暗红色则是由于 hb 结合的氧气过少引起,钠石灰用于吸于甁中 co2 以排除 co2 的干扰,po2 降低里,也因肺通气量的增加,呼出较多的co2,使体内 pco2 和 h+浓度降低,从而减弱低氧的刺激作用[2]。
2.co 中毒:呼吸无改变,主要与 pao2 正常有关,皮肤黏膜、肝脏呈樱桃红色。是由于 cohb 引起,co 中毒性缺氧属等张性缺氧,呼吸系统的代偿不明显,故观察到小白鼠的呼吸逐渐减弱直至停止死亡因此加热时不能过猛,以免 co 产
生过多、过快,使小白鼠迅速死亡,来不及观察。
3.亚硝酸钠中毒:呼吸无改变,主要与 pao2 正常有关,皮肤黏膜、肝脏呈青石板颜色,是由于高铁 hb 引起,美兰是一种还原剂,可将 fe3+还原为 fe2+,具有解毒作用,可使亚硝酸钠中毒的小白鼠解救且皮肤黏膜颜色逐渐接近正常。
第二篇:小鼠缺氧模型及其分析
课程名称:机能实验学
教研室:病理生理学教研室
任课教师:张彩华 授课章节:缺氧与普鲁卡因对神经干的作用
授课专业和年级:2005级医疗 授课学时:8学时
授课时间:2007年3-7月
实验题目:缺氧
实验目的:1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用
2.复制几种类型缺氧的模型,观察血液颜色的特点,分析其机制 根据大纲要求:
掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫绀、肠源性紫绀。
熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。
熟悉氧代谢的四个环节(摄取、携带、运输和利用)及反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。
掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化)。
实验原理:
1.现代病因学认为,疾病是由于原因和条件综合作用的结果。原因是引起疾病所不可缺少的因素,并且往往决定疾病的特异性,它与相应的疾病有着必然的因果关系;而条件则不是疾病所不可缺少的因素,它往往是通过作用于致病因子或改变机体反应性,对疾病的发生发展起促进或阻碍作用。
2.缺氧是指任何原因引起的供氧不足或利用氧障碍引起组织细胞发生功能代谢和形态结构异常变化的病理过程。根据不同的病因,可以把缺氧分为四种类型:低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧、组织性缺氧。不同类型的缺氧具有不同的病因以及不同的血液颜色和血氧变化特点。
实验对象:小鼠
实验器械和药品:电子秤、注射器、钠石灰、小鼠缺氧瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸、苦味酸、一氧化碳包;生理盐水、1.25%尼可刹米、2%水合氯醛、5%亚硝酸钠、0.1%氰化钾
实验方法:
一、原因和条件作用的分析
1.取3只小鼠称重,编号1、2、3,用苦味酸做好标记 2.注射及处理:
1号:生理盐水,0.2ml/10g,腹腔注射
2号:1.25%尼可刹米,0.2ml/10g,腹腔注射 3号:2%水合氯醛,0.2ml/10g,腹腔注射
给药后分别放入三个缺氧瓶中,密闭计时,观察动物活动情况至死亡。3.用测耗氧量装置测定总耗氧量(A)4.计算耗氧率(R):根据小鼠体重(W),存活时间(t),总耗氧量(A)计算
小鼠耗氧率R(ml/min/g)=A/(W*t.)
二、几种类型的缺氧
1.取3只小鼠称重,编号4、5、6,用苦味酸做好标记 2.注射及处理:
4号:放入缺氧瓶,通入二氧化碳
5号:5%亚硝酸钠,0.2ml/10g,腹腔注射 6号:0.1%氰化钾,0.2ml/10g,腹腔注射
观察小鼠活动情况直至死亡。
3.分别解剖1、4、5、6号小鼠,剪下一片肝脏组织放于滤纸上,观察对比血液颜色。
实验结果:
一、不同条件下小鼠缺氧状态的比较 序体重号(g)1 2 3 20 20 20 注射及处理 生理盐水
表现
存活时总耗氧间(min)量(ml)12 9 30 14 13
耗氧率(ml/min/g)0.033 0.078 0.02
正常活动,呼吸逐渐困难
1.25%尼可刹米 活动多,呼吸快 2%水合氯醛 活动少,呼吸慢
二、几种类型的缺氧 序号 1 4 5 6 体重(g)20 20 20 20
注射及处理 生理盐水 一氧化碳中毒 5%亚硝酸钠 0.1%氰化钾
缺氧类型 低张性缺氧 血液性缺氧 血液性缺氧 组织性缺氧
血液颜色 暗红色 樱桃红色 咖啡色 玫瑰红色
实验讨论:
一、原因和条件作用的分析
现代病因学认为,疾病是由于原因和条件综合作用的结果。原因是引起疾病所不可缺少的因素,并且往往决定疾病的特异性,它与相应的疾病有着必然的因果关系;而条件则不是疾病所不可缺少的因素,它往往是通过作用于致病因子或改变机体反应性,对疾病的发生发展起促进或阻碍作用。
本实验将生理盐水组作为正常对照,尼可刹米是一种呼吸中枢兴奋剂,可以直接兴奋呼吸中枢,也可通过刺激颈动脉体化学感受器反射地兴奋呼吸中枢,故2号小鼠活动多,死亡时间最早,代谢耗氧率最高。水合氯醛是一种镇静催眠药,可以抑制呼吸中枢,使呼吸变慢,故3号小鼠活动少,死亡时间最晚,代谢耗氧率最低;1号小鼠各项指标均介于中间。说明缺氧是这3只小鼠死亡的共同原因,不同的药物是小鼠死亡的条件,尼可刹米可以促进缺氧引起的小鼠死亡而水合氯醛可以延缓缺氧引起的小鼠死亡。
二、几种类型的缺氧
缺氧是指任何原因引起的供氧不足或利用氧障碍引起组织细胞发生功能代谢和形态结构异常变化的病理过程。根据不同的病因,可以把缺氧分为四种类型:低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧、组织性缺氧。不同类型的缺氧具有不同的病因以及不同的血液颜色和血氧变化特点。
1.低张性缺氧:由于吸入气氧分压过低或者外呼吸功能障碍引起的缺氧。(1.2.3号小鼠)
皮肤粘膜颜色:暗红色
2.血液性缺氧:由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。(1)贫血:血红蛋白量的减少,皮肤粘膜颜色-----苍白
(2)CO中毒: 原因:CO与Hb结合形成HbCO;抑制糖酵解,氧解离曲线左移
皮肤粘膜颜色:樱桃红色
(3)高铁血红蛋白血症(亚硝酸盐中毒):原因:二价铁离子被氧化为三价铁离子
皮肤粘膜颜色:咖啡色
3.循环性缺氧:血流量减少引起的缺氧(见休克实验)
皮肤粘膜颜色:暗红色
4.组织性缺氧:组织细胞利用氧障碍引起的缺氧
如氰化物中毒:抑制氧化型细胞色素氧化酶转化为还原型细胞色素氧化酶 皮肤粘膜颜色:玫瑰红色 实验结论:
1.缺氧是这3只小鼠死亡的共同原因,不同的药物是小鼠死亡的条件,尼可刹米可以促进缺氧引起的小鼠死亡而水合氯醛可以延缓缺氧引起的小鼠死亡。
2.低张性缺氧是由于吸入气氧分压过低或者外呼吸功能障碍引起的缺氧,皮肤粘膜颜色是暗红色,由于还原型Hb≥5g/dL
CO中毒属于血液性缺氧,原因:CO与Hb结合形成HbCO;抑制糖酵解,氧解离曲线左移。肤粘膜颜色是樱桃红色,是HbCO的颜色。
高铁血红蛋白血症(亚硝酸盐中毒)属于血液性缺氧,原因:二价铁离子被氧化为三价铁离子,皮肤粘膜颜色是咖啡色,是三价铁离子的颜色。
氰化钾中毒属于组织性缺氧,原因是抑制氧化型细胞色素氧化酶转化为还原型细胞色素氧化酶,皮肤粘膜颜色:玫瑰红色,由于血液中的氧化型血红蛋白较多。
实验中可能出现的问题及注意事项:
1.所有实验装置的连接必须保持通畅而且密闭,也可以在瓶口涂些凡士林时期密闭。2.腹腔注射位置应在左下腹,避免损伤肝脏,注射的药物剂量应准确。3.钠石灰必须完全干燥。
4.氰化钾有剧毒,避免皮肤粘膜与之接触。5.实验完毕后,所有器械应冲洗干净。
实验思考题:
1.小鼠在缺氧瓶中为什么会缺氧?
2.缺氧分为几种类型,各型的原因,皮肤粘膜颜色及血氧变化的特点是什么?
实验题目:普鲁卡因对神经干的作用
实验目的:观察普鲁卡因对混合神经的作用特点。
根据大纲要求:
掌握局部麻醉药的概念及机制,熟悉其体内代谢过程,了解常用的几种局麻药的特点效果和作用。了解几种局麻方法,熟悉局麻药的毒性反应及影响局麻药作用的因素。实验原理:
局部麻醉药普鲁卡因作用于用药局部的神经末梢,可逆性的阻断神经冲动的发生和传导。感觉神经先麻醉,运动神经后麻醉。实验对象:蟾蜍
实验器械和药品:电子计算机、生物机能实验系统、蛙类手术器械、刺激电极、玻璃分针、棉花、蜡纸。1% 盐酸普鲁卡因溶液。
实验方法:
1.取蟾蜍一只,腹位固定四肢于蛙板上,剪开一侧股部皮肤,可见股二头肌和股三头肌,用玻璃分针在两块肌肉间小心剥离出坐骨神经干,在其下面穿一线,轻提起神经在其下垫一小片蜡纸,将神经与周围肌肉隔开。
2.方形波刺激坐骨神经,找出最小刺激阈,选用适宜的刺激强度(可稍大于最小刺激阈),观察蟾蜍对刺激的全身运动反应及该后肢的运动反应。
3.一段棉线(或直径为1.5mm的细棉条)浸泡1%盐酸普鲁卡因溶液,包绕神经干的穿线部位。4.2min后,以同样强度刺激给药上下端的神经干,观察蟾蜍全身运动反应及该后肢的运动反应,分析所出现现象的原因。
5.为了分辨感觉纤维与运动神经纤维何者先产生麻醉作用,隔2min以同样强度重复刺激一次。这时反应有何变化?分析其结果。
6.给药10min后,在以同样强度刺激棉线上下端的坐骨神经干,观察动物的反应。实验结果:
普鲁卡因对神经干的作用
时间(min)0 2 4 6 8 10
近中端
肌肉运动
+ + + +---“+”表示对刺激有反应 ;“-”表示对刺激无反应
实验讨论:
局部麻醉药是一类以适宜的浓度,局部应用于神经末稍或神经干后能可逆的完全的暂时的阻断神经传导有关的动作电位的药物。
低浓度的局部麻醉药能阻断感觉神经冲动的发生和传导;高浓度对神经系统任何类型的纤维(感觉神经、运动神经、植物神经)都有阻断作用。一般细的无髓鞘的神经纤维比粗纤维对局麻药作用更敏感。在局麻药的作用下,痛觉先消失,其次是冷觉、温觉、触压觉。局麻药通过抑制钠离子内流,阻止动作电位的产生和传导,产生局麻作用。
本实验将局麻药盐酸普鲁卡因作用于混合神经——坐骨神经的局部,由于感觉神经纤维的冲动是向上(近中端)传导的,故刺激近中端时,全身反应(代表感觉)始终存在,而刺激远中端时,在2min时全身反应消失,说明此时感觉神经纤维已经被药物阻断了。运动神经纤维的冲动是向下(远中端)传导的,故刺激远中端是,肌肉运动(代表运动)始终存在,而刺激近中端时,在8min时肌肉运动消失,说明此时运动神经纤维已经被药物阻断了。实验结论:
局部麻醉药普鲁卡因作用于用药局部的神经末梢,可逆性的阻断神经冲动的发生和传导。感觉神经先麻醉,运动神经后麻醉。
实验中可能出现的问题及注意事项: 1.蟾蜍不捣毁脑脊髓 2.棉线浸泡药液不易过多
实验思考题:
局麻药对混合神经作用的机制和特点是什么?
第三篇:小鼠游泳实验及解剖总结
小鼠游泳实验及解剖总结
1测试小鼠的抗疲劳能力~有时候还需要测定其恢复能力~但实验周期长,故不作要求~
2首先抓取小鼠,在天平上放一个烧杯,去零,称重,记录小鼠体重,为m g 称保险丝,保险丝体重为小鼠体重百分之十~ Ps 方法:要用到刻度尺,首先称一定长度的保险丝的重量,如记为a cm,重量为n g,则我们要量取的保险丝长度为x=0.1m*a/n
3用细绳系上保险丝(要注意细绳的长度要适当),怎么系呢,系在尾巴根部,用一烧杯扣住小鼠,烧杯开口处有一小嘴,所以让小鼠的尾巴露出来即可~2个人操作,一个人用手按住烧杯,一手捏住小鼠尾巴中部,一人则将系有重物的细绳系在小鼠尾巴中部~
4一人将小鼠放入装有温水的超大量筒,一人开始将小鼠放入烧杯的同时,一人开始计时,等到小鼠下沉10秒,则停止计时。
5记录时间即可啦~ 补充:扔进大量筒之前可以先将小鼠打湿,为什么呢?因为小鼠的毛比较蓬松,里面充了空气,所以当把小鼠放进大量筒后,可能对实验有影响~有时甚至把小鼠毛给刮掉~ 比较严格的实验还要求小鼠要空腹,不然小鼠肚子里有粪便,对小鼠体重也影响~
小鼠解剖
解剖方法类似于蟾蜍解剖~用大头针固定~辨别雌雄,雌性有三孔:尿道,阴道,肛门。雄性少了阴道。对于雄性,有时候可以看到睾丸在外面,有时候在肚子里面~不同小鼠情况可能不同
观察的有心脏,肺部,食道,味,盲肠,颌下腺,舌下腺,腮腺,淋巴,胰脏,脾脏,输卵管,子宫,卵巢等等 颌下腺(2片)深红色,前段一块覆盖着半透明的舌下腺,因为半透明且覆盖在颌下腺上,所以也呈现深红色,所以可以将舌下腺那一片掀开,再放回去,可能比较容易观察,有的小鼠可能淋巴发育比较成熟,会覆盖在舌下腺上,注意区别。
盲肠:没有路的长,很容易辨别的吧。
对于雌性,要分清子宫(类似Y形)输卵管,卵巢的相对位置。
第四篇:实验动物学实验报告
实验动物学实验报告
一、实验动物:小鼠
二、操作流程:抓取,固定,编号,给药,取血,麻醉,绝育,解剖。
三、具体操作
1、抓取:抓取小鼠时,右手抓住小鼠尾巴,不要过于用力,以免惊吓小鼠。左手从小鼠身体后部向前抓(以免小鼠向后缩咬伤自己),抓住小鼠颈部。固定住小鼠后,将小鼠皮肤往上抓,尽量将小鼠背部皮肤抓住。左手将小鼠腹部朝向自己,把小鼠尾巴用左手无名指和小指夹住,这时小鼠腹部皮肤紧绷,不能动弹。
2、固定: 通常使用固定器进行固定。将固定器拧开后,抓住小鼠尾巴,使其钻入固定器中,再将拧下的固定器部分装好,使小鼠尾部露出,再将可旋转的铁片固定住即可进行后续实验。
3、编号:编号方式有两种:①剪脚趾编号:把小鼠腹面朝上,在下的脚趾从左至右依次编为1~10号,剪10号脚趾加1~9号脚趾依次编为11~19号,在上的脚趾依次编为20,30,40,50,60,70,80,90号,其余编号与11~19号类似。②打耳钉编号:耳钉上均有唯一编号,通过使用耳钉钳将耳钉打在小鼠耳朵上即可。实验时通常使用的是第一种方式进行编号,第二种编号通常用于需要长距离运输的动物。
4、给药:常用的给药方式有:
①口服给药:即灌胃。将注射器装入药物溶液,装上灌胃针(灌胃针有直头和弯头两种,区别不大)。如上所述,抓取小鼠后,使其头部朝上,尽量呈一直线,取灌胃针,从小鼠嘴角一侧缓缓插入(保持刻度在自己能看到的位置),顺着小鼠口腔食道的弧度让小鼠将针咽入,灌胃过程中如果遇到阻碍一定要及时拔出灌胃针,不可强行灌胃以免伤及小鼠食道以及肺部。灌胃针顺利进入后基本与小鼠身体呈一条直线,注入适量体积后再顺着食道缓缓取出灌胃针。
②静脉注射:小鼠尾部有3条静脉和1条动脉,3条静脉非别位于背部,及两侧。静脉注射时一般选取两侧静脉,因为其相对于背部静脉更为清晰饱满。将小鼠固定后,用酒精擦拭其尾部静脉,使其充血,以便注射。之后使注射器针孔处朝上,针与尾部呈约30°扎入尾部后向上轻挑,再向内扎入部分,此过程应该比较顺畅,没有阻碍,若阻碍较大则有可能扎入到了皮肤中。扎入后将活塞向后回抽一点可见到有血回流,则说明成功扎入静脉当中,注射适当体积后迅速拔针,用酒精进行消毒。
5、取血:有断尾取血法和眼眶取血法两种。本次实验使用的是眼眶取血法。抓取小鼠,固定其头部用手指将其上下眼睑分开,露出其眼球并且不能闭上。用玻璃毛细管从其上眼角处扎入眼球后方毛细血管从,使血液顺着毛细管留下,取血完成后快速将毛细管取下。
6、麻醉:抓取老鼠,使其头部朝下,使其腹部脏器向胸腔靠拢,露出腹部空腔,以免刺伤脏器。将注射器竖直扎入靠近后腿部腹腔,刺入之后稍微向前倾斜但不要向前刺入,一般注入0.5mL麻醉剂即可。随后拔出针,方向小鼠,等待几分钟后即可麻醉。
7、绝育:绝育手术是通过剪除雌鼠卵巢或雄鼠输精管来实现的。将麻醉的雌鼠背面朝上,从其胸腔和尾部之间向下三分之一处剪开一个小口,用镊子将其卵巢取出,上面呈现红色斑点的部分即为卵巢,用剪刀将这一部分剪除,然后用缝合针线将其缝合,缝合方法为将针穿过后,将线缠绕镊子两圈再逆时针缠绕两圈,再重复缠绕一遍,将镊子夹住线头把缠绕的线移至线头系紧即可(缝合过程全程用镊子和剪刀操作),里面肌肉层以及外面皮层均需缝合。雄鼠则从外生殖器向上1-2cm处剪开小口,用镊子在其中找出输精管(较细长的乳白色小管),尽量多减掉一些,以免其长长愈合,以上述方法缝合伤口即可。
9、解剖:以颈椎脱臼法处死小鼠,使其腹面朝上。用镊子将其腹部皮肤夹起,然后用剪刀剪开,观察各个器官所在位置和形态,解剖完的小鼠放入尸体袋中。
第五篇:趣味实验实验报告
趣味实验
实验员:张燕年级、班级:09级化学三班学号:40907147 联系方式:***
一、实验目的:
激发学生学习化学的兴趣,通过化学实验的趣味化活动,使学生的思维更加活跃,手脑并用的能力更强,创新意识和创造精神得到充分发挥。
二、实验内容:
(一)蓝色振荡实验:
1.实验原理:
亚甲基蓝的水溶液呈蓝色,在碱性条件下,葡萄糖可以将它还原为无色,搅拌条件下空气会把无色产物亚甲基白氧化为蓝色,蓝色又被还原为无色,如此反应,实验能多次重复。
2.实验仪器和药品:
碘量瓶(用于微量元素的测定)、小烧杯、NaOH固体、葡萄糖、亚甲基蓝溶液(10mol/L)。
3.实验步骤:
(1)称取5.0g氢氧化钠(为整个实验过程提供一个碱性环境)于小烧杯中,加入约30mL水充分溶解。再将所得溶液转移至碘量瓶中,加水至约150mL;
(2)称取7g葡萄糖加入到(1)所得的溶液中,充分搅拌,使其完全溶解。再向碘量瓶中滴加1mL(约20滴)亚甲基蓝溶液,缓慢摇匀,之后静置大约半分钟,会发现蓝色的溶液慢慢变为无色透明的溶液,再继续振荡碘量瓶,会发现溶液又变回蓝色,再继续静置半分钟左右,溶液又变为无色。此现象可重复若干次。
(二)化学冰袋:
1.实验原理:
铵盐溶解会吸热,可以起到降温的效果。
2.实验仪器和药品:
密封袋、(NH4)2SO4、NH4NO3、Na2SO410H2O和NaHSO4。
3.实验步骤:
(1)分别称取4g硫酸铵、5g硝酸铵、9.6g十水硫酸钠和4g硫酸氢钠;
(2)将所称取的药品按顺序加入到密封袋中,添加顺序如下:十水硫酸钠、硫酸氢钠、硫酸铵和硝酸铵。将所加的药品用手压碎,会发现密封袋温度很低,此时我们的冰袋就做好了。
(三)固态汽水:
1.实验原理: 3
碳酸氢钠和柠檬酸钠反应可以释放出二氧化碳,能带走部分热量,这就是特别爽口的碳酸饮料。
2.实验仪器和药品:
烧杯、玻璃棒、研钵,柠檬酸、柠檬黄、蔗糖、明胶、碳酸氢钠。
3.实验步骤:
(1)称取0.1g明胶于小烧杯中,加入约10mL水使其吸水膨胀,如溶解过慢可用酒精灯适当微热;
(2)称取2.5g碳酸氢钠与小烧杯中,再取1mL(1)所得的溶液加入其中,最后用电吹风将小烧杯中的液体吹干;
(3)取4g蔗糖、4.5g柠檬酸和微量的柠檬黄于研钵中,研细成粉末状之后再加入到(2)所得的固体药品中,这时我们就制成了固体汽水;
(4)用100mL来冲调固体汽水,就制成了我们日常饮用的爽口的饮料。
三、实验注意事项
1、明胶微热溶解时不可温度太高,烧杯距离火焰需保持一定的距离,原因是明胶是一种蛋白质,高温容易变性。
2、称量NaOH时需用烧杯,纸张要现称现用,这样也会产生潮解。当然由于此实验主要是要一个碱性环境,所以此影响在此实验中可以忽略。
3、蓝色振荡实验过程中包含的是一种热力学平衡,在2—3h后这个实验现象就完全消失,此时已达到了极限状态。
4、冰袋制作不能使用无水碳酸钠(纯减)粉末,必须是含结晶水的晶体碳酸钠或成块状纯碱。可以将无水碳酸钠粉末溶于水,然后加热浓缩至晶体析出,自制晶体碳酸钠。
四、实验反思1、1.化学是一门实验科学,化学实验能够引起学生的认知兴趣,如果把实验做趣味化处理,则更能引起学生的兴趣,产生强烈的学习动机。我们本次实验包括观察性趣味实验和操作性趣味实验。
2、作为一名准化学教师,做好演示实验是很重要的一项教学技术,尤其是趣味实验,它在激发学生学习化学方面起着很重要的作用。而在这次演示实验时,我由于过于紧张,所以出现了小差错,而且讲解实验的方式也不够生动,没有“趣味”,没有很好的达到趣味实验所要求达到的目的。