动物病原微生物实验室检验实习总结

第一篇：动物病原微生物实验室检验实习总结

山西农业大学

教学实习总结

专 业 动物检疫

年 级

班 级

姓 名 学 号

指导教师 赵宇军

职 称 副教授

动物病原微生物实验室检验实习总结

实习时间：2012年5月8日至8月13日

实习地点：山西农业大学兽医微生物与免疫学实验室

指导老师：赵宇军

实习内容：时间过的很快，转眼间三年的大学生活就结束了，我们动物检疫专业的同学从五月份开始了为期3个多月的教学实习，在众多辅导老师之中，我有幸跟随我校动物科技学院预防系的赵宇军教授进行学习。实习地点为我校兽医微生物与免疫学实验室。实习内容自行选择。在老师的带领下我进行了大肠杆菌的实验室检测和食物中金黄葡萄球菌的检验。下面我们来回顾这次实验。

大肠杆菌的实验室检测

一、培养基配置

我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌，培养后可在LB固体培养基上划线分离。以下为本实验中培养基配置步骤：

1．称量：准确称取各成分。蛋白胨0.5g，酵母提取物0.25g，氯化钠0.5g，加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。

2．溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。3．调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。

4．灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。5．倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。

二、灭菌和消毒 1．无菌技术：①对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰旁进行；④避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2．消毒方法：①日常生活经常用到的是煮沸消毒法；②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法；③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒；④实验操作者的双手使用酒精进行消毒。3．灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；③表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。

三、细菌的分离

采用划线分离法，其操作步骤是：将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时，用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作第1次平行划线 3～5条，转动培养皿约70°角，用烧过冷却的接种针，通过第1次划线部分作第2次平行划线，然后再用同样方法，通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划线时，接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养基划破。划线完毕后，盖上皿盖，倒置于恒温箱培养。

四、菌落和菌种种类的辨认 细菌的菌落表面一般是光滑而湿润的，有黏稠性，多数透明或半透明，但也有细菌的菌落表面是干燥、有褶皱的；放线菌由于有纤细的菌丝并可产生孢子，所以菌落表面是紧密的绒状、坚实多皱，长孢子后就成粉末状，由于菌丝和孢子有多种色素，所以在菌落培养基底部和菌落表面都有不同的颜色，菌落不易用接种环挑动；酵母菌落类似于细菌菌落，表面光滑而湿润，有黏稠性但大多呈乳白色，少数呈红色。

食品中金黄葡萄球菌的检测方法

金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌，也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。本菌广泛分布于自然界，如空气、土壤、水及其它环境中。在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中，也经常有本菌存在。据报导，在正常人群中的带菌率可达30%~80%，其中皮肤带菌率为8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的带菌率在40~50%以上，因此其可通过各种途径和方式，尤其是经工作人员的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黄葡萄球菌能产生肠毒素，故一旦细菌污染食品，并在合适的温度环境下，细菌可以大量繁殖并产生肠毒素，从而引起消费者食物中毒。

我国对金黄色葡萄球菌目前采用的方法是以国家标准GB.4789-10-84及检验检疫系统行业标准SN.0172-92作为依据。整个检测过程获得最终结果须时5天左右，既费时又费力，并造成货物积压，也影响货物的及时出运，并使货主的仓储成本提高，造成较大的经济损失。

多年来很多食品微生物实验室都在探索和寻找一些准确性高，并快速的检测方法，最近我们分别从美国3M公司和法国生物梅里埃公司获得两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基，其名称为：

① Petrifilm RSA.Count Plate（由美国3M公司研制生产），是一种薄膜型快速检测金黄色葡萄球菌的计数平板。

② Baird-parker + RPF Agar.（由法国生物梅里埃公司研制生产的用Baird-Parker琼脂加免血浆纤维蛋白原的金黄色葡萄球菌检测计数平板）。

一、实验原理

Petrifilm.RSA.测试薄膜是由二部分组成。第一部分是由黄金色葡萄球菌培养基片，此培养基中含有经修正的Barid-Parker，营养成分加上以冷水可溶解的胶质。第二部分是一种耐热核酸酶（TNase）反应片，含有DNA及甲苯胺兰(Toluidine Blue-O)及四唑指示剂(Tetraeolium)。此指示剂有助于菌落的计数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。

耐热去氧核糖核酸（deoxyribonulcas Dnase）为产毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐热，在100℃加热30min，不易丧失活性，在130℃之下，其D值为16.6min，此酶之分子量为16800，等电点PH为9.6,耐热去氧核糖酸与检测血浆凝固酶相似，是一种鉴定金黄色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA 检测片上，耐热DNA酶反应看起来，呈粉红色环带包围着一个红色或兰色的菌落。

Petrifilm.RSA检测片，必须与Peyrifilm耐热核酸酶反应片一起使用，单独使用将不会显示菌落，因为具有辅助计数菌落的指示剂是在反应片上，而不是在Petrifilm.RSA检测片上。

Baird-parker + RPF agar，这一培养基中含有丰富的营养成分，其中以氯化锂代替亚碲酸钾，使菌落颜色呈黑色，RPF补充有兔血浆和牛纤维蛋白原，以便检测凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分围绕凝固酶阳性菌落周围沉淀晕环纤维蛋白的溶解，因此凡存在血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌，将在培养基中呈现有晕环的黑色菌落，即可确认，并作计数。

二、实验步骤

材料和方法：

本次实验采用以下3种试剂：

1.美国3M公司提供的Petrifilm.Rapid.S.aureus Count Plate.2.法国生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar.3.实验室自配Baird-Park琼脂（英国Oxoid）及新鲜兔血浆。

菌种来自美国菌种保存中心（America TyP Culture Collection）。金黄色葡萄球菌共10株菌株，其菌号分别为：

ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704

ATCC(K)12600 ATCC(R)65389 ATCC 25923 ATCC 29213 ATCC 8095 ATCC 12598

非金黄色葡萄球菌菌种5株，其菌号分别为：

ATCC 51813（大肠杆菌）、ATCC 624（无乳链球菌）、ATCC 51816（阴沟肠杆菌）、ATCC 6051（枯草杆菌）、ATCC 49214（肠炎沙门氏菌）、自然食品检样，任意购自市场。

本次实验是以同一测试样品经均质并通过无菌生理盐水作10倍递增稀释后取1至2个稀释度同时接种上述三种培养基作平行实验，在取得最终结果后相互进行比对。

上述三种培养基的接种方法是按生产商所提供的使用说明进行操作，另外Baird-Parker Agar 培养基是按SN0172-92标准进行操作。

A、本次实验共测试已知标准菌种共15株，其中葡萄球菌10株，其他菌种5株（包括大肠杆菌、阴沟肠杆菌、肠炎沙门氏菌、枯草杆菌和无乳链球菌）。

B、测试自然食品检样共101只（其中包括肉11只、肉类14只、水产品17只、牛奶25只、蔬菜22只、豆制品12只）。

三、实验结果：

A、被检菌种10株，金黄色葡萄球菌在三种培养基上都能检出生长情况良好，同一稀释度的菌液，除个别菌株外在3种培养基计数检测结果基本都在一个数量级上，无显著差异。而5株非金黄色葡萄球菌的菌株在三种培养基上全部不能生长。

B、自然食品检样共接种101只，每一检样同一稀释浓度分别同时种三种培养基，最终共检出金黄色葡萄球菌45只，占全部检样的44.5％，其中Petrifilm RSA 检出阳性结果为42只，占全部阳性检样的93.3％，Baird-Parker＋RPF Agar.检出阳性结果26只，占全部阳性检样的57.7％。Baird-Parker.Agar 检出阳性结果32只，占全部阳性检样的71.1％。

四、实验讨论

1.用15株标准菌在3种培养基中的检测，10株金黄色葡萄球菌以同一浓度接种，结果生长良好，其最终计数基本一致，定位在同一数量级，5株非金黄色葡萄球菌接种上述三种培养基全部不长，说明上述三种培养基对金黄色葡萄球菌选择良好。

2.以101只自然样品同一均质稀释液，同时接种三种培养基，从最终结果来看，对金黄色葡萄球菌的阳性检出率为44.5％

3.从检测程序来年，Petrifilm.RSA及Baird-Parker＋RPF.Agar.都在样品接种后28~30h观察结果，并不必再做证实试验，而如以Baird-Parker Agar检测，须在接种后48h观察平板，并挑取可疑菌落转种到营养肉汤中，在经18-24h后做血浆凝固酶或耐热DNA酶试验进行证实，最终计数，前后约须80h。

4.从本次试验中观察，使用上述三种培养基对食品中金黄色葡萄球菌含量的直接计数检测，其样品接种液的含量拟控制在100个/ml以内，比较容易分清并计数，如菌量过浓，则将会影响最后的读数，因此对新送的被检样品，如在不了解污染的情况下一般必须要做2个以上的稀释度，同时分别接种，才能获得较为满意的结果。

而在Baird-Parker＋RPF Agar及Baird-Parker.Agar接种时必须将1ml样液作三只平板涂布（0.3、0.3、0.4ml）这样就会造成手续繁琐试剂消耗较大，但Baird-Parker.RPF.培养基也可以1ml样液作倾注培养，并作计数。

5.在整个测试过程中，我们发现，按使用说明对Petrifilm.RSA.及Barid-Parker＋RPF.Agar，操作规定在接种24h后观察结果，此时往往由于菌落长得经较小，特征瓜不明显，但如果继续放置一夜以后金葡萄菌落特征明显，并可能会经第一天观察数量有所增加，这样可以提高检测结果的可信度。

6.由于对上述两种培养基的试用期间我们尚未获得供应商的报价，故无法测算每一样品的测试成本价格。但可以予计上述两面种快速检测培养基的耗材费用要高于常规经典方法（Baird-Parker Agar）的费用。

7.通过本次实验，我们感到使用美国3M公司生产的Petrifilm.RSA Plate培养基和法国生物－梅利埃公司生产的Baird-Parker RPF.Agar培养基检测中的金黄色葡萄球菌。可以比目前常规检测方法时间可缩短一半。并可以明显节省大量人力。这完全符合实验室快速检测的要求，尤其是对基层较简陋的实验室条件中，更显其使用方便的优越性。

实习总结：通过这次严谨而有序的实验实习，为我们先前在教学中学习到的知识提供了一个实际的操作实施平台，也为今后在这方面检验技术的工作起到了指引作用。在过去的学习中，我们并不了解具体的病原微生物实验室检验技术的具体流程，注意事项等等非常关键和必须的防御手段。通过此次生产实习，使我们对以前所不熟知的问题有了深入的认识，也对目前的情况有所思考和感悟。在我看来，动物检疫人员在我国国民生活中起到了关键作用，民以食为天，没有认真负责的实验检测，将给社会带来巨大的饮食灾难，为此，我感到非常自豪和骄傲。在今后的工作学习中，我将一如既往的认真下去，无愧自己的职责和称号。

在此感谢我院的各级领导，特别是我的指导老师赵宇军教授。

第二篇：病原微生物检验实习总结

病原微生物检验实习总结

大三下学期5月份，我们动物检疫专业的同学开始了为期2个多月的教学实习，在众多辅导老师之中，我有幸跟随我校动物科技学院预防系的赵宇军教授进行学习。实习的地点就在我校动科楼的微生物实验室，以前我们曾在这里上过实验课，所以并不陌生。这次大家来到实验室为自行选择课题进行相关实验操作，我对世界闻名的金黄色葡萄球菌非常感兴趣，在老师的带领下进行了相关食物中该菌的检验。下面我们来回顾这次实验。

一、实验内容：食品中金黄葡萄球菌的检测方法

金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌，也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。本菌广泛分布于自然界，如空气、土壤、水及其它环境中。在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中，也经常有本菌存在。据报导，在正常人群中的带菌率可达30%~80%，其中皮肤带菌率为8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的带菌率在40~50%以上，因此其可通过各种途径和方式，尤其是经工作人员的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黄葡萄球菌能产生肠毒素，故一旦细菌污染食品，并在合适的温度环境下，细菌可以大量繁殖并产生肠毒素，从而引起消费者食物中毒。

由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，在世界各国都极为普遍。特别是在北美及欧洲等地区发病率更高。在上述这些国家中，每年有金黄色葡萄球菌引起的食物中毒病例，仅次于沙门氏菌，而在细菌性食物中毒病例排到第2~3位，有此而造成的经济损失也相当惨重，在我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒病例也时有报导，所以目前世界各国都把金黄色葡萄球菌列为食品卫生的法定检测项目。

我国对金黄色葡萄球菌目前采用的方法是以国家标准GB.4789-10-84及检验检疫系统行业标准SN.0172-92作为依据。整个检测过程获得最终结果须时5天左右，既费时又费力，并造成货物积压，也影响货物的及时出运，并使货主的仓储成本提高，造成较大的经济损失。多年来很多食品微生物实验室都在探索和寻找一些准确性高，并快速的检测方法，最近我们分别从美国3M公司和法国生物梅里埃公司获得两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基，其名称为：

① Petrifilm RSA.Count Plate（由美国3M公司研制生产），是一种薄膜型快速检测金黄色葡萄球菌的计数平板。

② Baird-parker + RPF Agar.（由法国生物梅里埃公司研制生产的用Baird-Parker琼脂加免血浆纤维蛋白原的金黄色葡萄球菌检测计数平板）。

二、实验原理：

Petrifilm.RSA.测试薄膜是由二部分组成。第一部分是由黄金色葡萄球菌培养基片，此培养基中含有经修正的Barid-Parker，营养成分加上以冷水可溶解的胶质。第二部分是一种耐热核酸酶（TNase）反应片，含有DNA及甲苯胺兰(Toluidine Blue-O)及四唑指示剂(Tetraeolium)。此指示剂有助于菌落的计数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。

耐热去氧核糖核酸（deoxyribonulcas Dnase）为产毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐热，在100℃加热30min，不易丧失活性，在130℃之下，其D值为16.6min，此酶之分子量为16800，等电点PH为9.6,耐热去氧核糖酸与检测血浆凝固酶相似，是一种鉴定金黄色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA 检测片上，耐热DNA酶反应看起来，呈粉红色环带包围着一个红色或兰色的菌落。

Petrifilm.RSA检测片，必须与Peyrifilm耐热核酸酶反应片一起使用，单独使用将不会显示菌落，因为具有辅助计数菌落的指示剂是在反应片上，而不是在Petrifilm.RSA检测片

上。

Baird-parker + RPF agar，这一培养基中含有丰富的营养成分，其中以氯化锂代替亚碲酸钾，使菌落颜色呈黑色，RPF补充有兔血浆和牛纤维蛋白原，以便检测凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分围绕凝固酶阳性菌落周围沉淀晕环纤维蛋白的溶解，因此凡存在血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌，将在培养基中呈现有晕环的黑色菌落，即可确认，并作计数。

三、实验步骤

材料和方法：

本次实验采用以下3种试剂：

1.美国3M公司提供的Petrifilm.Rapid.S.aureus Count Plate.2.法国生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar.3.实验室自配Baird-Park琼脂（英国Oxoid）及新鲜兔血浆。

菌种来自美国菌种保存中心（America TyP Culture Collection）。金黄色葡萄球菌共10株菌株，其菌号分别为：

ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704

ATCC(K)12600 ATCC(R)65389 ATCC 25923 ATCC 29213

ATCC 8095 ATCC 12598

非金黄色葡萄球菌菌种5株，其菌号分别为：

ATCC 51813（大肠杆菌）、ATCC 624（无乳链球菌）、ATCC 51816（阴沟肠杆菌）、ATCC 6051（枯草杆菌）、ATCC 49214（肠炎沙门氏菌）、自然食品检样，任意购自市场。本次实验是以同一测试样品经均质并通过无菌生理盐水作10倍递增稀释后取1至2个稀释度同时接种上述三种培养基作平行实验，在取得最终结果后相互进行比对。

上述三种培养基的接种方法是按生产商所提供的使用说明进行操作，另外Baird-Parker Agar 培养基是按SN0172-92标准进行操作。

A、本次实验共测试已知标准菌种共15株，其中葡萄球菌10株，其他菌种5株（包括大肠杆菌、阴沟肠杆菌、肠炎沙门氏菌、枯草杆菌和无乳链球菌）。

B、测试自然食品检样共101只（其中包括肉11只、肉类14只、水产品17只、牛奶25只、蔬菜22只、豆制品12只）。

四、实验结果：

A、被检菌种10株，金黄色葡萄球菌在三种培养基上都能检出生长情况良好，同一稀释度的菌液，除个别菌株外在3种培养基计数检测结果基本都在一个数量级上，无显著差异。而5株非金黄色葡萄球菌的菌株在三种培养基上全部不能生长。

B、自然食品检样共接种101只，每一检样同一稀释浓度分别同时种三种培养基，最终共检出金黄色葡萄球菌45只，占全部检样的44.5％，其中Petrifilm RSA 检出阳性结果为42只，占全部阳性检样的93.3％，Baird-Parker＋RPF Agar.检出阳性结果26只，占全部阳性检样的57.7％。Baird-Parker.Agar 检出阳性结果32只，占全部阳性检样的71.1％。

五、实验讨论

1.用15株标准菌在3种培养基中的检测，10株金黄色葡萄球菌以同一浓度接种，结果生长良好，其最终计数基本一致，定位在同一数量级，5株非金黄色葡萄球菌接种上述三种培养基全部不长，说明上述三种培养基对金黄色葡萄球菌选择良好。

2.以101只自然样品同一均质稀释液，同时接种三种培养基，从最终结果来看，对金黄色

葡萄球菌的阳性检出率为44.5％

3.从检测程序来年，Petrifilm.RSA及Baird-Parker＋RPF.Agar.都在样品接种后28~30h观察结果，并不必再做证实试验，而如以Baird-Parker Agar检测，须在接种后48h观察平板，并挑取可疑菌落转种到营养肉汤中，在经18-24h后做血浆凝固酶或耐热DNA酶试验进行证实，最终计数，前后约须80h。

4.从本次试验中观察，使用上述三种培养基对食品中金黄色葡萄球菌含量的直接计数检测，其样品接种液的含量拟控制在100个/ml以内，比较容易分清并计数，如菌量过浓，则将会影响最后的读数，因此对新送的被检样品，如在不了解污染的情况下一般必须要做2个以上的稀释度，同时分别接种，才能获得较为满意的结果。

而在Baird-Parker＋RPF Agar及Baird-Parker.Agar接种时必须将1ml样液作三只平板涂布（0.3、0.3、0.4ml）这样就会造成手续繁琐试剂消耗较大，但Baird-Parker.RPF.培养基也可以1ml样液作倾注培养，并作计数。

5.在整个测试过程中，我们发现，按使用说明对Petrifilm.RSA.及Barid-Parker＋RPF.Agar，操作规定在接种24h后观察结果，此时往往由于菌落长得经较小，特征瓜不明显，但如果继续放置一夜以后金葡萄菌落特征明显，并可能会经第一天观察数量有所增加，这样可以提高检测结果的可信度。

6.由于对上述两种培养基的试用期间我们尚未获得供应商的报价，故无法测算每一样品的测试成本价格。但可以予计上述两面种快速检测培养基的耗材费用要高于常规经典方法（Baird-Parker Agar）的费用。

7.通过本次实验，我们感到使用美国3M公司生产的Petrifilm.RSA Plate培养基和法国生物－梅利埃公司生产的Baird-Parker RPF.Agar培养基检测中的金黄色葡萄球菌。可以比目前常规检测方法时间可缩短一半。并可以明显节省大量人力。这完全符合实验室快速检测的要求，尤其是对基层较简陋的实验室条件中，更显其使用方便的优越性。

实习总结：通过这次严谨而生动的实验实习，为我们先前在教学中学习到的知道提供了一个实际的操作实施平台，也为今后在这方面检验技术的工作起到了指引作用。在过去的学习中，我们并不了解具体的病原微生物实验室检验技术的具体流程，注意事项等等非常关键和必须的防御手段。通过上学期生产实习，使我们对以前所不熟知的问题有了深入的认识，也对目前的情况有所思考和感悟。在我看来，动物检疫人员在我国国民生活中起到了关键作用，民以食为天，没有认真负责的实验检测，将给社会带来巨大的饮食灾难，为此，我感到非常自豪和骄傲。在今后的工作学习中，我将一如既往的认真下去，无愧自己的职责和称号。

在此感谢我的院各级领导，特别是我的指导老师赵宇军教授。

2010年7月

第三篇：病原微生物实验室

病原微生物实验室检查

为进一步加强病原微生物实验室生物安全的监督管理，特别是病原微生物菌（毒）种及样本的保藏管理工作，预防生物安全事故的发生，近日医疗卫生监督科对全市设置病原微生物实验室的7家医疗机构（4家市级医院、3家中心卫生院）的生物安全进行监督检查。检查内容包括实验室基本情况、组织制度、建筑设计和设施、防护设备、人员培训和上岗情况、病原微生物菌（毒）种和样本的管理等，并抽查了相关台账资料。

本次共检查医疗机构微生物实验7家，仅第一人民医院1家是备案实验室。抽查从事实验室业务的卫生技术人员29人，其中中级职称12人，初级职称17人。7家病原微生物实验室均按要求划分清洁区、半污染区、污染区，配备有BSC1000-II生物安全柜，并能出示实验室生物安全手册、感染应急预案及工作人员生物安全培训记录。

检查中发现主要存在以下问题：

一、大部分实验室未经嘉兴市卫生局备案；

二、大部分实验室门非自动关闭，可开启窗户无纱窗；

三、未配备洗眼设施或应急喷淋装置；

四、在实验室内直接使用外排式高压蒸汽锅灭菌等。

对存在的问题当场均提出了整改意见，接下来我所将对存在问题的医疗机构进行复查，督促整改到位，有效预防生物安全事故发现。

桐乡市卫生监督所

2011.9.20

第四篇：病原微生物实验室简介

病原微生物实验室简介

病原微生物实验室的检测项目和检测方案根据临床需要综合设计，做到结果稳定可靠、效率高、检测周期短，从而为临床诊断和治疗提供及时和可靠的依据。

血液系统恶性疾病患者常伴免疫功能低下，尤其造血干细胞移植或长期的放化疗后，患者的免疫功能更低，易继发各种病原微生物感染，甚至机会性致病菌爆发感染，部分患者还可因感染继发恶性淋巴细胞增殖性疾病，常常危及生命危险。

目前常用的病原微生物检测方法有：病原微生物培养、免疫血清学检测、抗原检测和基因检测。由于血液系统恶性疾病患者多免疫功能低下，产生抗体困难;病原微生物培养检测周期长，而且受多种因素影响阳性率很低，不能满足临床需要。故检测病原基因或抗原更能反应感染的状态。

病原微生物实验室现已开展了多种血液病患者中常见的致病和机会性致病的病原微生物定量和定性检测项目。主要应用PCR基因扩增检测的方法对病原微生物进分型鉴定，具有检测灵敏度高、分型准确、窗口期短、报告速度快的优势。所配备的仪器主要有AB 3500实时荧光定量PCR仪、AB 9700和AB Verity型普通PCR仪。

本实验室的检测项目和检测方案根据临床需要综合设计，做到结果稳定可靠、效率高、检测周期短，从而为临床诊断和治疗提供及时和可靠的依据。

病原微生物实验室现有人员5人，其中特聘教授1人、硕士学历2人、本科1人，专科1人。

项目介绍：

1。病原微生物PCR定性检测项目：

1)人类疱疹病毒筛查(HHV1-HHV8)

同时筛查8种人类疱疹病毒

2)出血性膀胱炎病毒(BKV、JCV、SV40)

3)人类T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV1-RNA)

4)真菌PCR

2。病原微生物PCR定量检测项目：

人类疱疹病毒

1)单纯疱疹病毒(HSV-

1、HSV-2)

2)水痘-带状疱疹病毒(VZV)

3)EB病毒(EBV)

4)巨细胞病毒(CMV)

5)人类疱疹病毒6型(HHV-6)

6)人类疱疹病毒7型(HHV-7)

7)人类疱疹病毒8型(HHV-8)

呼吸道病毒：

1)呼吸道合胞病毒

2)腺病毒(ADV)

肠道病毒：

1)柯萨奇病毒

2)轮状病毒

其他特殊病原微生物：

1)微小病毒B19

2)结核杆菌 3)卡氏肺囊虫 4)支原体

3。其它病原微生物检测项目： 1)内毒素

2)真菌1，3-β-D葡聚糖检测(G试验)

第五篇：莆田市动物病原微生物实验室生物安全管理责任书

莆田市秀屿区动物病原微生物

实验室生物安全管理责任书

根据《动物防疫法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《兽医实验室生物安全管理规范》、《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》和《福建省农业厅办公室转发农业部办公厅关于做好两会期间动物病原微生物实验室生物安全管理工作的通知》（闽农厅办

[2011]48号）等相关法律法规、规章规定要求，特签订本责任书。

一、乙方应制定动物病原微生物实验室生物安全管理责任制和责任追究制，明确本部门是生物安全第一责任人，落实兽医实验室责任领导和具体责任人，并接受当地畜牧兽医行政主管部门的监督检查。

二、乙方应健全和完善动物病原微生物实验室生物安全应急处置机制和安全应急预案，确保应急处置有力、有序、有效。

三、乙方应加强动物病原微生物实验室内部管理，建立健全动物病原微生物菌（毒）种保管、病原分离、实验室操作等生物安全管理的规章制度、技术规范以及操作规程，建立健全消毒处理、自身防护和安全卫生等安全保障制度，并确保各项工作落到实处。

四、乙方应加强实验室人员的学习培训，特别是要加强对农业部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》、《实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）》等规范的学习培训，熟练掌握相应标准和要求。同时，要进一步加强对从事实验室管理和技术人员的技能培训、考核工作，努力提高实验室工作人员的专业技能和

实践操作水平，有效防范实验室生物安全事故的发生。

五、乙方应严格遵守《病原微生物实验室生物安全管理条例》，严禁未经审批违法从事高致病性动物病原微生物或疑似高致病性动物病原微生物实验活动的，或擅自改变病原微生物检测项目范围。

六、如违反有关病原微生物实验室生物安全管理的法律、法规、规章、标准、规范、规范性文件的规定，由此产生的法律责任由乙方负责。

七、本责任书一式贰份，双方各执一份。

甲方：莆田市秀屿区农业局乙方：莆田市秀屿区动物疫病

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