小鼠游泳实验及解剖总结

第一篇：小鼠游泳实验及解剖总结

小鼠游泳实验及解剖总结

1测试小鼠的抗疲劳能力~有时候还需要测定其恢复能力~但实验周期长，故不作要求~

2首先抓取小鼠，在天平上放一个烧杯，去零，称重，记录小鼠体重，为m g 称保险丝，保险丝体重为小鼠体重百分之十~ Ps 方法：要用到刻度尺，首先称一定长度的保险丝的重量，如记为a cm，重量为n g，则我们要量取的保险丝长度为x=0.1m*a/n

3用细绳系上保险丝（要注意细绳的长度要适当），怎么系呢，系在尾巴根部，用一烧杯扣住小鼠，烧杯开口处有一小嘴，所以让小鼠的尾巴露出来即可~2个人操作，一个人用手按住烧杯，一手捏住小鼠尾巴中部，一人则将系有重物的细绳系在小鼠尾巴中部~

4一人将小鼠放入装有温水的超大量筒，一人开始将小鼠放入烧杯的同时，一人开始计时，等到小鼠下沉10秒，则停止计时。

5记录时间即可啦~ 补充：扔进大量筒之前可以先将小鼠打湿，为什么呢？因为小鼠的毛比较蓬松，里面充了空气，所以当把小鼠放进大量筒后，可能对实验有影响~有时甚至把小鼠毛给刮掉~ 比较严格的实验还要求小鼠要空腹，不然小鼠肚子里有粪便，对小鼠体重也影响~

小鼠解剖

解剖方法类似于蟾蜍解剖~用大头针固定~辨别雌雄，雌性有三孔：尿道，阴道，肛门。雄性少了阴道。对于雄性，有时候可以看到睾丸在外面，有时候在肚子里面~不同小鼠情况可能不同

观察的有心脏，肺部，食道，味，盲肠，颌下腺，舌下腺，腮腺，淋巴，胰脏，脾脏，输卵管，子宫，卵巢等等 颌下腺（2片）深红色，前段一块覆盖着半透明的舌下腺，因为半透明且覆盖在颌下腺上，所以也呈现深红色，所以可以将舌下腺那一片掀开，再放回去，可能比较容易观察，有的小鼠可能淋巴发育比较成熟，会覆盖在舌下腺上，注意区别。

盲肠：没有路的长，很容易辨别的吧。

对于雌性，要分清子宫（类似Y形）输卵管，卵巢的相对位置。

第二篇：小鼠MCAO总结

小鼠MCAO模型

一、实验器材：

1.手术器械：眼科剪

1、显微剪

1、钩镊

1、直镊

1、显微镊

2、止血钳

1、持针器

1、缝合线（2-0/5-0）、缝合针、麻醉剂：10%水合氯醛（350mg/kg）2.栓线：0.18mm（20~25g）、0.20mm(25~30g)；在栓线10mm的位置用黑色记号笔标记；75%酒精清洁后置1: 2500单位肝素化生理盐水中备用。

3.其他用品：酒精棉球、75%酒精、生理盐水、注射器（1ml、2ml）、黑色记号笔、固定鼠用粗线绳、鼠板

二、步骤：Zea Longa 线栓法

1.麻醉：10％水合氯醛腹腔注射（350mg/kg）2.术前准备：仰卧位固定大鼠，备皮消毒 3.分离血管及挂线：

1)自胸骨柄到下颌骨间取长约1cm 正中切口。见下颌下腺，将其分离至两侧；

2)见右侧肩胛舌骨肌、胸骨舌骨肌、二腹肌形成的三角区，镜下分离此三角区内，暴露右侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA）； 3)首先分离CCA于其上挂线1；

4)随后向头侧分离ECA血管及其分支，于ECA上头尾侧分别挂线2、3；

5)然后清除CCA分叉部脂肪，观察ECA分支与ICA关系，分离ICA及ECA分支，于其上挂线4；

6)注意操作轻柔避免迷走神经、舌咽神经、气管损伤，避免过度牵拉血管使其严重移位或断裂。

5.结扎：死结：线1、2；活结：线4；不系结：线3 6.剪口插入：

1)将鼠台逆时针旋转90°，在ECA上距分叉1~1.5mm用显微剪剪一切口； 2)将标记好的线栓由此切口插入CCA 中；

3)将鼠台转回，将线栓从CCA拔出至分叉稍尾侧，右手将线栓转向滑入ICA，右手拉开线4活结，后继续插入ICA，待有阻力时再进入少许，深度1cm+，到达大脑中动脉与前交通之间；

4)顺利插入后将丝线4扎紧，抽出线3减去多余线头。6.缝皮

7.术后：小鼠俯卧位，头略抬高，至于温湿度适宜环境。

三、注意事项：

1.雌性鼠对于牵拉等操作的反应更强烈，故建议选择雄性大鼠作为实验对象。

2.大鼠解剖学变异：一般而言，Fisher-344大鼠MCA解剖变异较小，闭塞后形成的梗死体积一致性好；Wistar-Kyoto 大鼠变异相对最大； 而Sprague-Dawley大鼠介于两者之间。3.麻醉：10%水合氯醛腹腔注射（30ml/kg），一般可持续1~1.5h。如按标准体重计算的麻醉剂量效果欠佳，可使用总量的10%进行追加。需注意反复多次或过量追加易造成动物死亡，或导致清醒推迟而影响再灌注前评分，从而使再灌注时间不能统一界定在2h。水合氯醛可使动物呼吸频率下降50%左右,但一般不会导致动物窒息而死亡。术中严密观察动物呼吸频率、深度及有无痰鸣音等。

4.分离气管前肌肉时注意保护好甲状腺和甲状旁腺。甲状腺呈鲜红色，紧密贴在气管前壁上，甲状旁腺位于甲状腺外上方，颜色略淡。血管分离要到位，使用电凝器可明显减少小血管的出血，从而保证手术野清晰，尤其是肌肉内部的血管和 ECA 的一些细小分

支，未明确时不可随意离断。结扎血管时要注意力度和方向，由于血管被膜被分离后血管表面相当光滑，结扎不牢可能导致难以控制的出血；术中还要注意保护与血管紧密相依的神经，注意观察神经的颜色、反光性和轻触时的感觉，切勿损伤或离断。牵拉迷走神经时可见动物呼吸明显减慢甚至血液呈深紫色，出现肢体末端紫绀。在无法给予辅助通气时，应暂停操作。一般来说，动物呼吸可恢复到麻醉后的平稳状态，血液颜色也可恢复到正常，这时再继续手术较为安全。

5.关于是否结扎 PPA 文献报道尚不一致。可沿ICA一直分离至看到其入颅分支与PPA分叉处，观察线栓走行状况，若顺利将长度约1cm的线栓插入，则可固定线栓而无需对 PPA进行操作； 如只进入5mm左右即遇到明显阻力，则线栓进入PPA的可能性很大，此时可将线栓撤离至ECA/ICA处，提起PPA，以帮助线栓沿ICA进入颅内而最终阻塞MCA。

6.Koizumi等1986年首次报道不开颅经CCA插入尼龙线栓致MCA闭塞；之后，Longa等进行了改良，将栓线从ECA插入，再灌注时将栓线抽回ECA内，通过CCA实现再灌注。Koizumi使用的丝线末段均匀包被硅胶，直径增加近30~40%，插入后不仅可伸入大脑前动脉ACA）近端，肯定阻塞ACA及前交通动脉，而且阻塞MCA及后交通动脉开口处，彻底阻塞MCA及其所有侧枝供应血管，形成供应区域完全缺血，因此局部梗死面积大，均匀一致，各动物间差异较小。Longa使用的4-0尼龙线末端球形扩大，但并非直接闭塞MCA，而是依靠结扎同侧ICA和其球形扩大的末端伸入ACA腔内、阻断经前交通动脉来自对侧ACA的血流形成局灶性脑缺血，但不能阻断来自后交动脉的侧枝供应，且丝线末端伸入ACA腔内位置不同，所起作用差异很大，因此形成的梗死面积很小，各动物之间差异较大。宋红松等建议采用Koizumi方法。丁香园：

1.注意尽量不要损伤在颈内颈外分叉下的交感神经节。2.栓线进入后颈内动脉后即可逐渐插入了，有时候很顺利一插到底，但有时候在中间就怎么也进不去了，这是因为在血管入颅穿过颅骨时有一个狭窄或者角度。因此，碰上这种明显阻力时，一定不能盲目向前使力插，越插栓线前端变形越进不去且容易损伤血管。这时候正确的作法是往外抽出较多栓线，也许会有一定的动脉血流出，不必慌，只要顺着血管走行调整一下进线角度轻柔的使劲，一般都能进去，反复试几次还不行最好换根栓线，很可能前端也经变形角度变了！颈内动脉的走向为内上方,可以用眼科镊夹住鱼线插,但进去后要注意,别太用力,要不血管就要破了

3.栓线不能在血管里反复进退，否则及容易造成蛛网膜下腔出血，而且很容易误解为模型成功，因为这时的神经功能改变也很明显，但并不是由于栓塞引起的

4.大鼠仰卧时，ICA从CCA分出后下行（向背侧）约5mm又分为两支A，即走向乳突泡（Mastoid bulla）的 翼腭A和进入颅内的ICA的延伸部分。因为翼腭A的走向几乎和分

支前的ICA走向相同，而ICA的延伸部分则是改向头侧走行，所以插线时会很自然的进入翼腭A。进线时，用镊子将ICA轻轻往头侧推一下，使ICA和其延长的分支成一直线，同时顺势插线，可很容易的进入颅内。或使栓线有一定程度的弯曲，且只要保证栓线向屋顶方向弯曲，一般都能将线插如颅内，决不会进入翼腭A。

5.注意手的感觉，轻缓推进，直至感觉到阻力为

止（当遇到阻力后，再插线会见到线弯曲）。可能有人会说，把血管插破了也未感觉到阻力或线遇阻后的弯曲。一个原因是线太硬，另一主要原因是当栓线从血管切口插入后为防止血液从此处流出，需要结扎一条细线，这条线结扎的松紧程度很关键，应在不流血的情况下尽可能的松，这样你会发现进线时很轻松，一旦遇到阻力，就会感觉到。后者至关重要，请体会。

6.栓线一旦进入ACA，就要把上面提到的那根细线适度扎紧（“适度”很重要，会影响到再灌流时大鼠的生死存亡），此时的关键是动作轻柔，不要使ICA有任何的牵拉，否则栓线会脱出ACA，可能会造成缺血失败。血管外的栓线不要留得过长，更不要缝在皮外，大鼠醒来后会自己拔出。

7.如果你用的是中长效麻醉剂，插线成功后，固定丝线，然后让其俯卧位，而且稍稍抬高其颈部，才能确保模型成功。8.术后一定要注意保暖。

9.插入线拴要轻柔熟练，速度尽可能快，以避免时间长了血管内血栓形成。

10.手术后评分的主观因素很大，有用5分制和11分制的，我个人认为用5分制比较准些。11.大鼠大脑中动脉永久性闭塞性脑缺血模型，梗死体积出现的最小时间点可能为2h，体积随时间进行性增大，至12h基本趋于稳定

12.整个试验是很费动物的，存在15-30％的淘汰率（如果你做的好），但注意严格控制自己淘汰的动物（纪录具体情况）。

13.除了刚才说的蛛网膜下腔出血外，还有一些老鼠肺出血明显，整个肺暗红，我也想不出原因，不知道是不是医学临床所说的脑肺综合症.14.术后处理：由于术后动物尚未清醒,因此护理也很重要。但为保证栓线成功,达到预期的阻塞时间,防止栓线脱落暂时把动物留在手术台上,保证动物不会因挣扎而把栓线过早脱落,但仍需监测体温,并注意保暖。再灌注后动物可放入笼中。另外笼中应保持干燥,没有积水及粉尘,防止动物误吸而窒息。我们在实验中发现一些模型症状不典型甚至没有症状,都是由于动物苏醒后极力挣扎使栓线过早脱落所致。手术后大鼠存活期可以满足通常的实验需求,一般来讲,随着栓塞和再灌注损伤时间的延长,死亡率会上升。大鼠在术后24～48小时最容易死亡,这种死亡是严重脑缺血损伤造成的,较直接的因素是脑水肿。用线栓制作持续性局灶性脑缺血模型时,术后要肌注庆大霉素预防感染;如果动物模型要生存1周以上,必要肌注速尿,防止因脑水肿动物在短期内死亡。术后饮水中加入葡萄糖,保证动物术后有充足的能量生存到实验要求的时间。

舍去标准：

⑴栓线插入深度不足18 mm,且无明显神经功能缺损表现或症状很轻的大鼠 ⑵ 蛛网膜下腔出血、MCA起始部或其附近的willis环动脉有凝血块的大鼠，因为这是出血性脑损伤或永久性脑缺血损伤，而非MCAO/Reperfusion损伤。3）手术时出血较多，症状很重的动物。死亡原因分析：

首先要找出死亡原因，解剖死亡大鼠的脑，先看是否有蛛网膜下腔出血，如有出血，表明死因是插线太深，以后注意插线深度；如无出血，则还要再看是否有严重的半球水肿，如水肿严重，则表明死因是脑缺血时间太重，需要缩短缺血时间；如既无出血，又无明显的脑水肿，那就要注意动物状态或生活环境是否太差。

第三篇：解剖总结

第一章 绪论

重点1 解剖学概念、定义。

研究正常人体形态结构，发生发育及其与功能关系的科学。2 人体解剖学的分科

解剖学包括系统解剖学、局部解剖学、断层解剖学、临床解剖学、外科解剖学、X线解剖学、机能解剖学、运动解剖学。细胞、组织、器官、系统的概念，人体系统的划分。细胞：是构成人体最基本的形态单位是细胞 组织：由细胞和细胞间质构成组织

器官：几种不同的组织组合成具有一定形态和功能的结构称器官 系统：若干器官组合起来共同完成某种生理功能，叫系统

人体系统分运动，消化，呼吸，泌尿，生殖，内分泌，脉管，感觉器和神经系统 4解剖学的姿势，方位，切面和轴 基本术语（标准姿态）：身体立直，面向前，两眼向前方平视，两足并拢，足尖向前，上肢下垂于躯干的两侧，掌心向前。

方位：上、下； 前、后； 内侧、外侧； 浅、深；近侧、远侧。轴和面：垂直轴 矢状轴 冠状轴

水平面 矢状面 冠状面 5 学习的观点和方法

观点：1进化发展观点，2形态与功能互相影响的观点，3局部与整体统一的观点，4理论与实际相结合的观点

方法：利用理论联系实际的方法去探讨，研究人体。

第二章 运动系统

1骨的构造：骨主要由骨质、骨膜和骨髓三部分构成

2躯干骨的组成：成人躯干骨包括24块椎骨、一块骶骨、一块尾骨、一块胸骨和12对肋分别参与构成脊柱，胸廓和骨盆。四肢骨的组成：包括上肢骨和下肢骨，分别由肢带骨和自由肢骨组成。3 颅的组成：成人颅由23块颅骨组成。另外有3对听小骨位于颞骨内。4 颅的整体观：顶面观，侧面观，前面观，内面观。5 关节的基本结构，关节面，关节囊，关节腔 6 脊柱的整体观：（1）前面观：椎体自上而下逐渐增大，从骶骨耳状面以下迅速变小，与负重有关。（2）后面观：所有椎骨棘突连贯成纵嵴，颈椎棘突短而分叉，近水平位：胸椎棘突长，呈叠瓦状排列，斜向后下；腰椎棘突呈板状，平身向后。临床做腰椎穿刺常选择3、4腰椎棘突的间隙处进行。（3）侧面观：可见颈胸腰骶4个生理性弯曲，其中胸曲和骶曲凸向前方，分别在出生前、后形成。脊柱的这些弯曲增大了脊柱的弹性，有利于维持人体重心的平衡和减轻震荡。胸廓的构成：由12块胸椎、12对肋、一块胸骨连结而成。8 肩关节构成：由肱骨头和肩胛骨关节盂构成。肘关节构成：由肱挠关节，肱尺关节，挠尺近侧关节构成。10 腕关节构成： 骨盆构成：由骶骨、尾骨和左右髋骨连结而成。具有容纳，保护盆腔器官和传递重力等功能。骨盆性别差异：项目 男性 女性

骨盆形状 窄而长 宽而短

骨盆上口 心形 椭圆形

骨盆下口 狭小 宽大

骨盆腔 漏斗形 圆桶形

耻骨下角 70°-75° 90°-100° 13 髋关节构成：由髋臼和股骨头构成。膝关节构成：由股骨下端、胫骨上端，髌骨 踝关节构成：由胫、腓骨下端和距骨滑车构成。肌的形态结构：人体的肌按其位置。结构和功能分为心肌、平滑肌和骨骼肌。17 斜方肌位置：位于颈背部浅层，为三角形扁肌，两侧合并为斜方肌。背阔肌位置：位于背下部和胸的后外侧，为全身最大的扁肌，呈三角形。19 竖脊肌的位置：纵列于棘突两侧的沟内。为背肌中最长最大的肌。胸锁乳突肌的起止和作用：以两头分别起自胸骨柄前面和锁骨的胸骨端，斜

向后上方，止于颞骨乳突。作用：两侧同时收缩可仰头；单侧收缩使头颈向同侧屈，面部转向对侧。胸大肌位置：位于胸廓前上部，呈宽而厚的扇形。22 前锯肌位置：位于胸廓侧壁。23 肋间外肌的作用：提肋助吸气。24 腹肌的名称：。

25三角肌的作用：主要作用是外展肩关节；前部肌束可使肩关节屈并旋内，后部肌束则使肩关节伸并旋外。该肌为临床上肌内注射的常用部位之一。肱二头肌的作用：屈肘关节，并使前臂旋后，亦可协助屈关节。28 肱三头肌的作用：伸肘关节，长头可伸肩关节并内收。29 手肌的分群：外侧群、内侧群、中间群。髂腰肌的作用：屈髋关节并旋外.；当下肢固定时，可使躯干和骨盆前屈。31 臀大肌的作用：伸髋关节并旋外。此肌外上部为肌肉注射的常用部位之一。32 股四头肌的作用：

小腿三头肌的作用：使足拓屈，并屈膝关节，站立时能固定膝关节和踝关节，防止身体前倾，是维持人体直立姿势的重要肌之一。

骨的概述：骨是器官，外被骨膜，内含骨髓，有丰富的血管。淋巴管和神经，能不断进行新陈代谢和生长发育。

35脑颅骨的构成：8块。包括额骨，筛骨，蝶骨，枕骨各一块，顶骨，颞骨各两块。

36关节的概述：骨与骨之间的连结装置，称关节或骨连结。

骨骼肌概述：数量众多，全身共有650余块，约占体重的40%。骨骼肌是运动系统的动力部分，在神经系统支配下，通过收缩牵引骨骼而产生运动。

第三章 消化系统 1消化系统的组成：由消化管和消化腺组成。

2牙的形态、构造：每个牙在形态上分为牙冠、牙颈、牙根三部分。3牙周组织包括：牙膜，牙槽骨，牙龈。4舌的外形：

5黏膜的结构：舌系带和舌下阜。

6舌肌的结构：舌肌为骨骼肌，分舌内肌和舌外肌。7:咽的结构：鼻咽、口咽、和喉咽 8食管的位置，分部和狭窄：上端于第6颈椎体下缘平面续咽，下行穿过隔得 食

管裂孔，下端约于第11胸椎左侧与胃连结，全长25cm。分为颈部、胸部、和腹部。

生理狭窄：第一个狭窄咋爱食管的起始处，距中切

牙约15cm；第二个狭窄在食管与左支气管交叉处，距中切牙25cm；第三个狭窄为食管穿过隔得食管裂孔处，距中切牙40cm。

9胃的形态、分部和位置：胃的形态可受体位、体型、年龄和充盈状态等多种因

素影响。

四部分：贲门部，胃底，胃体和幽门部。

在胃中等充盈时，大部分位于左季肋区，小部分位于

腹上区。

10小肠的分部，结构：上起幽门，下连盲肠，成人全长5-7米，分为十二指肠

空肠和回肠三部分。

11十二指肠的分部，结构：介于胃与空肠之间，成人长约25cm，呈c形包挠胰

头，按其位置可分为上部、降部、水平部和升降部四部分。

12大肠的分部：分盲肠、阑尾、结肠、直肠和肛管。

13结肠形态特点：围绕在小肠周围，始于盲肠，终于直肠。分为升结肠，横结肠，降结肠，乙状结肠。

14盲肠的形态特点：是大肠的起始部，长6-8m，位于右髂窝内，下端为盲肠，左接回肠，上续升结肠。

15阑尾的形态：为一蚓状突起，根部连于盲肠的后内侧壁，远端游离，一般长6-8m。阑尾的位置：位置变化较大，多与盲肠一起位于右髂窝内，以回肠前位和盲肠后位较多见。阑尾根部的体表投影：通常在脐与右髂前上脊连线的中、外1/3交点处，该

点称Mc Burney点。

18直肠的弯曲和皱襞

19肛管的形态和结构：长约4cm，上续直肠，末端终止于肛门。

肛柱，肛瓣，肛窦

20肝的形态：呈不规则的楔形，可分为上下两面和前后左右四缘。肝的位置：肝大部分位于右季肋区和腹上区，小部分位于左季肋区。22 肝的体表投影：

23胆囊底的体表投影：在右锁骨中线与右肋弓交点附近。

24肝外胆道的组成：胆囊，肝左管，肝右管，肝总管和胆总管。

25腹膜与腹盆腔器官的关系：分为三类，腹膜内位器官，腹膜间位器官，腹膜

外位器官。

26腹膜形成的主要结构：网膜、系膜、韧带、，腹膜襞、隐窝和陷凹。

第四篇：小鼠缺氧实验实验报告

/ 13 文档可自由编辑 篇二：缺氧

缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

【摘要】目的：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法：通过复制缺氧动物模型，观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果：中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比，存活时间和总耗氧率有显著性差异；复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论：给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率，延长其存活时间（p<0.01）。co 中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间，降低呼吸频率。美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用，已定程度延长小鼠存活时间，延缓呼吸频率的下降。

【关键词】缺氧 氯丙嗪 总耗氧率 co 亚硝酸盐 美兰 存活时间

当供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型，不同类型的缺氧，机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。

1.材料和方法

1.1 实验动物：小白鼠（雌性）。

1.2 药品：氯丙嗪(chlorpromazine)、钠石灰（soda lime)，亚硝酸钠（sodium nitrite)、亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，mb）、0.9％nacl(physiological saline solution)、co(carbon monoxide)。

1.3 器材：100、500ml 广口瓶和测耗氧装置。

1.4 方法

1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

取 2 只性别相同体重相近的小鼠，准确称取体重，并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按 0.1ml/10g 体重腹腔注射 0.25％氯丙嗪，随即安放在冰浴的纱布上

10~15min，使呼吸频率降至 70~80 次/min；生理盐水组按0.1ml/10g 体重腹腔注射生理盐水，室温放置 10－15min，作为对照。/ 13 文档可自由编辑 之后将 2 只小鼠分别放入 100ml 的广口瓶内，连接好测耗氧装置。如右图。

1.4.2 不同原因造成的缺氧

取 2 只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有 5g 钠石灰的 100ml 密闭瓶中；一氧化碳中毒组小鼠放入 500ml 密闭瓶，注入 10ml co 气体。

另取 2 只性别相同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射 50g/l 亚硝酸纳 0.2ml，并随即腹腔注射生理盐水 0.2ml；亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射 50g/l 亚硝酸纳0.2ml 后即刻腹腔注射 10g/l 亚甲基蓝 0.2ml。

2.观察项目

2.1.中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

记录下小鼠的体重 w（g）。从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡，分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间 t（min）、总耗氧量 a（ml）。按以下公式计算出总耗氧率 r[ml/（g·min）]：

r[ml/（g·min）]= a（ml）÷w（g）÷t（min）

2.2.不同原因造成的缺氧

乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率（次/min）。待塞紧瓶塞开始记时后，每隔 5min 测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。

亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率（次/min）。待注射药品后，每隔 5min 测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。

将 4 只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。

3.实验结果

4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重无显著性差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠的耗氧量为 12.7±5.02 ml，生理盐水组小鼠的耗氧量为 16.0±3.01 ml，两者无明显差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活时间为 44.7±17.21 min，生理盐水组小鼠耐缺氧时间为 21.0±3.61，两者相比有高度显著性差异/ 13 文档可自由编辑（p<0.01）；氯丙嗪组小鼠的耗氧率为 0.013±0.005(ml/g/min)，生理盐水组小鼠的耗氧率 0.03±0.002(ml/g/min)，两者相比有高度显著性差异（p<0.01）。见表 1。

表 1.氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表

小鼠体重（g）

样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9

对照 23 19

实验 22 25 22 25 24 22 23 22 22 23.0±1.32&

总耗氧量（ml）

对照

19.5

14.0

16.0

14.0

17.4

17.0

11.5

21.0

13.5

16.0±

3.01

实验

存活时间（min）

总耗氧率（（ml/g/min)

对照

实验 47

35 23 24 59 31 60 71 44.7±17.21*

对照

0.034

0.035

0.033 0.035 0.033 0.034 0.031 0.037 0.029 0.03±

0.002

实验 0.01 0.011 0.013 0.014 0.016 0.015 0.024 0.005 0.012 0.013±0.005#

10.514.310.0

8.0

9.5

19.9

17.0

6.0

19.0

12.7±5.02$

2621.0±

3.6125 25 23 25 22 22 22.9±

x?s

1.96

注：*p<0.01 vs 对照组 ；p<0.01 vs 对照组；&p>0.05 vs 对照组,$p>0.05 vs 对照组 3.2 不同原因造成的缺氧

由表 2 可知，亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间最短，其次为 co中毒组。存活时间最长的是亚硝酸钠＋美兰组，可见美兰具有抗亚硝酸钠中毒的作用。

表 2.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率(次/10 秒）

缺氧类型 乏氧 co 中毒 亚硝酸钠 亚硝酸钠＋

美兰

0min 29.7±4.90 29.7±5.90 29.7±3.54 29.7± 5.68

5min 31.2±6.96 24.7±8.72 26.1±7.13 25.9± 4.99/ 13 文档可自由编辑 10min 30.4±7.52 26.8±9.31

28.7± 8.38

15min 25.0±8.97

28.5± 6.02

20min

30.1±6.83

25min

29.5±6.07

30min

28.9±6.24

5.3 亚硝酸钠中毒与亚硝酸钠+美兰的两组小鼠的存活时间有显著性差异，美兰组存活时间显著延长(p<0.01)。见表 3。

表 3.亚硝酸盐中毒及其美兰的治疗效果

缺氧类型

亚硝酸盐中毒性缺氧 亚硝酸盐中毒性+美兰 存活时间 9.56±1.59 48.67±14.23*

注：p<0.01

3.4 分别观察乏氧性缺氧组、一氧化碳中毒组、亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组的小鼠肝脏组织颜色，如表 3。

表 4.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒的小鼠存活时间和肝血、耳尾唇颜色比较 类别 乏氧

体重(g)19

存活时间(min)

肝血颜色 暗红色

耳尾唇颜色 青紫色（紫绀）

co

nano2 nano2+mb18 18.512 30

樱桃红色 深咖啡色 浅咖啡色

樱桃红色 青石板色 青石板色，稍浅

6.讨论

6.1.实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组，耗氧率也显著低于生理盐水组。氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物，主要阻断脑内多巴胺受体和 α 肾上腺素受体和 m 胆碱受体，具有神经安定作用，它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后，置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止，新陈代谢率降至最低，因此能量利用减/ 13 文档可自由编辑 少，单位时间的耗氧量减少，即耗氧率减小。在氧总量相等的情况下，存活时间就比生理盐水组长。

6.2.乏氧性缺氧，主要表现为动脉血氧分压降低，氧含量减少，组织供养不足。正常毛细血管的血液中氧离血红蛋白浓度约为 26g/l。乏氧性缺氧时，动静脉血中的氧离血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中氧离血红蛋白浓度达到或超过 50 g/l时，可使皮肤和粘膜呈青紫色。

co 与 hb 的亲和力比 o2 大 210 倍，hb 与 co 结合形成碳氢 hb，从而失去运氧功能。co 同时还能抑制红细胞内糖酵解，使其 2,3-dpg 生成减少，氧离曲线左移，妨碍 hbo2 中的氧解离，从而造成组织严重缺氧。此时外呼吸功能正常，故动脉血氧分压及血氧饱和度正常，但 hb数量减少或性质改变，使血氧容量降低。组织中 hbco 增多，故皮肤、粘膜呈樱桃红色。

亚硝酸盐可使 hb 中二价铁氧化成三价铁，形成高铁 hb（hbfe3+oh），三价铁因与羟基牢固结合而丧失携氧能力，加上 hb 四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的 fe2+与氧亲和力增高，导致氧离曲线左移，使组织缺氧。高铁 hb 呈咖啡色或青石板色，因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色[2]。低浓度美兰为还原剂，抑制了氧化剂（亚硝酸钠）的中毒反应，中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间延长 2 倍以上。本实验结果也显示，亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间（表 3），说明美兰具有较好的拮抗作用。

6.3.钠石灰的作用：钠石灰在两个实验中的用途也有很大区别：实验一中缺氧瓶内钠石灰吸收小鼠呼吸产生的 co2 造成负压，利于正确地测出耗氧量；实验二中加入钠石灰是为了排除高碳酸血症对缺氧实验的影响。

参考资料：

1.陆源,夏强.生理科学实验教程.杭州：浙江大学出版社,2004：240.

2.陈季强.基础医学各论（上册）.北京：科学出版社，2004：492，495－496.篇三：小鼠缺氧模型及其分析

缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素

高伟飞

（浙江中医药大学滨江学院级

临床专业临滨 1 班 4 组

20102090114）/ 13 文档可自由编辑 一、实验目的：

1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用

2.复制几种类型缺氧的模型，观察血液颜色的特点，分析其机制

根据大纲要求：

掌握概念：缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧，紫绀、肠源性紫绀。

熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。

熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度，动静脉血氧含量差)。

掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制，掌握各型缺氧的特征（血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化）。

二、实验原理：

当组织供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。

影响机体对缺氧耐受性的因素很多，如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度，观察动物的缺氧耐受性。

三、实验对象：小鼠

四、实验材料：电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸；生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等

五、实验方法：

1、

取 2 只小鼠，注射及处理：号：亚硝酸钠及美兰 0.2ml，左下腹注射号：亚硝酸钠及生理盐水各 0.2ml，左下腹注射

注射完，观察，2 号小鼠立即死亡，1 号小鼠仍存活；然后处死解剖，剪下一片肝脏组

织放于滤纸上，观察肝的颜色。

2、取 2 只小鼠称重，编号 3、4

注射及处理：号：氯丙嗪

0.2ml，左下腹注射号：生理盐水 0.2ml 左下腹注射/ 13 文档可自由编辑 将 3、4 号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶，塞上塞子，记录下量筒的液面，连通耗氧装置，开始计时，直至小鼠死亡，记录下时间和量筒下降的液面刻度

计算两只小鼠的耗氧量

小鼠耗氧率 r（ml/min/g)=a/（w*t.）

六、实验结果：

1、几种类型的缺氧

序号

1.注射及处理 nano2+美兰

0.2ml

2.nano2+生理盐

水 0.2ml

2、不同条件下小鼠缺氧耐受性

序体重注射及处理 存活时

间

氯丙嗪 0.2ml

（冰浴）20.6 生理盐水（常

温）分 18 0.032 27 分 总耗氧量(ml)8 耗氧率(ml/min/g)0.016 血液性缺氧 青石板色 缺氧类型 血液性缺氧 肝脏颜色 暗红色 号（g）18.8

七、实验分析：

1、血液性缺氧：由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。

亚硝酸盐可使血红素中二价铁氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白，导致高铁血红蛋白血症。美兰为还原剂，可抑制氧化剂的中毒反应。因此 1 号小鼠存活，2 号小鼠死亡。

2、不同条件下小鼠缺氧耐受性

氯丙嗪是中枢多巴胺受体的阻断剂，具有镇静、抗精神病、镇吐、降低体温及基础代谢、α-肾上腺素能受体及 m-胆碱能受体阻断、抗组织胺、影响内分泌等作用，再加上冰浴，制造低温环境，使得 3 号小鼠的基础代谢率将为最低，可延长其死亡时间。

八、实验结论：

1、缺氧是这 2 小鼠死亡的共同原因，不同的药物是小鼠死亡的条件，氯丙嗪加上低温可延长小鼠的死亡时间。/ 13 文档可自由编辑 2、高铁蛋白血症（亚硝酸盐中毒）属于血液性缺氧，原因：二价铁离子被氧化为三价铁离子，肝脏呈青石板色。篇四：抗缺氧实验

《中药药理学》

实验教学大纲

（供四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用）

ⅰ

前言

本大纲适用于四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用。编写本大纲的目的是要求学生在学习中药药理学基础课的过程中，通过实验课的学习使学生掌握必要的中药药理实验原理、方法和技能，能正确、合理地使用仪器，为学习中医学基础课、中药学专业课打下牢固的基础；培养学生严肃认真的工作作风、实事求是的科学态度和独立分析问题、解决问题的能力；培养学生观察和分析实验现象的能力，巩固和加深对中药药理现象和规律的理解。现将大纲使用中有关问题说明如下：

一 为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应，并统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一边内容不标示）便于学生重点学习。

二 教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。

三 总教学参考学时为 12 学时。

四 使用教材：《中药药理学实验指导》，由中药药剂教研室自编。

ⅱ

正文

实验一

柴胡对发热家兔的解热作用

一 教学目的观察柴胡对发热家兔及正常兔体温的影响,了解柴胡解热作用的特点

二 教学要求

（一）掌握发热动物模型的制作方法。

（四）掌握肛温计测定家兔体温的方法。

（五）掌握动物模型分组方法。

（六）熟悉实验结果的统计处理方法。

（七）了解实验数据座标图示法。/ 13 文档可自由编辑 三 教学内容

（一）动物选择原则。

（二）测量正常体温值。

（三）分组。

（四）家兔发热模型的制作。

（五）给药。

（六）测量不同时段的体温值。

（七）实验数据的处理与图示法。

（八）实验报告的书写要求。

实验二

生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响(炭末法)

一 教学目的了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄、芒硝配伍的药理意义

二 教学要求

(一)掌握泻下药推进小肠运动的实验方法。

(二)熟悉炭末法。

(三)掌握炭末推进率测量与计算方法。

(四)了解小白鼠幽门与回盲部解剖部位。

三 教学内容

（一）

动物选择原则。

（二）

称重,标记。

（三）分组。

（四）灌胃给药。

（五）处死动物,解剖。

（六）测量尺寸。

（七）计算,实验数据处理。

（八）实验报告的书写要求。

实验三 延胡索及金铃子散镇痛作用

一 教学目的了解用热板法和扭体法筛选镇痛药的实验方法;观察延胡索及金铃子散的镇痛作用。

二 教学要求

（一）掌握热板法与扭体法。

（二）掌握痛阈值的测定方法。/ 13 文档可自由编辑（三）掌握合格小鼠筛选方法。

（四）熟悉实验结果的统计处理方法。

（五）了解实验数据座标图示法。

（六）掌握判定扭体反应的方法。

三 教学内容

（一）动物选择原则。

（二）测量正常痛阈值。

（三）筛选,分组。

（四）给药。

（五）测量不同时段的痛阈值。

（六）实验数据的处理与图示法。

（七）实验报告的书写要求。

实验四 人参抗应激作用

一 教学目的学习小白鼠游泳和耐常压缺氧的实验方法,研究人参抗应激作用。

二 教学要求

（一）掌握小白鼠游泳实验方法。

（二）掌握小白鼠耐常压缺氧的实验方法。

（三）熟悉实验结果的统计处理方法。

三 教学内容

（一）动物选择原则。

（二）测量水温。

（三）筛选,分组。

（四）给药,记时。

（五）测量小鼠游泳时间和耐缺氧时间。

（六）实验数据的处理。

（七）实验报告的书写要求。

ⅲ

教学组织与考核方法

一 实施机构：由中药药剂教研室执行。

二 组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。

三 教学方法：

（一）实验教学：采用启发式、讨论式、交互式课堂教学方式，辅助现代教育技术和传统教学手段。重点内容以介绍为主，一般内容以自学为主。/ 13 文档可自由编辑（二）教学点：在中药药剂实验室教学，承担教师由中药药剂教研室委派。

（三）辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。

四 考核办法：每次实验后批改实验报告，学生的实验操作及报告成绩占课程总评成绩的 20%；实验要点考核占课程期末考试卷面成绩的10%左右。

ⅳ

教学时数分配表

实验内容

教学时数

实验类型

实验一

柴胡对发热家兔的解热作用

验证型 实验二

大黄对小白鼠小肠运动的影响

验证型 实验三 元胡及金铃子散对小白鼠的镇痛作用

验证型 实验四

人参抗应激作用

验证型

合计

篇五：小白鼠的缺氧实验

缺氧对小白鼠体征的影响

（潍坊医学院 2009 级临床 26 班 山东潍坊 261053）

[摘要]目的：观察缺氧对小白鼠体征的影响。

方法：取五只小白鼠，通过制作小白鼠的乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧三种模型并与正常状态的小白鼠作对比，观察小白鼠的行为及皮肤、黏膜、肝脏的变化。

结果：小白鼠的乏氧性缺氧模型肝脏为青紫色，一氧化碳中毒性缺氧模型为樱桃红色，亚硝酸钠中毒性缺氧模型肝脏青石板颜色，正常小白鼠肝脏为红色。

结论：不同的缺氧因素对小白鼠肝脏颜色有不同影响。

[关键词]乏氧性缺氧，一氧化碳中毒性缺氧，亚硝酸钠中毒性缺氧，青石板颜色

前言

缺氧是由于机体供氧不足或组织利用氧障碍引起的机体代谢、功能和形态结构改变的病理过程[1]。理论上由于不同机制的缺氧通过对血红蛋白的影响改变了血红蛋白的颜色从而我们可以复制相应模型以观察其血液的变化。至于类似的实验，前人已经将其机制研究清楚了，做本次实验只是加以验证，观察是否与理论相符合，有时也许会有新的发现，但主要是为以后的临床学习打下基础。

材料与方法/ 13 文档可自由编辑 1.实验材料

器材：小白鼠缺氧瓶、co 发生装置、1ml 注射器、酒精灯、剪刀、镊子。

药品：钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。

动物：小白鼠

2.缺氧模型的制备

2．1 乏氧性缺氧模型的制备

(1)取钠石灰约 5g 及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况，呼吸频率（次/10s），深度，皮肤和口唇粘膜颜色，然后紧塞瓶塞，记录时间，以后每 3min 重复观察上述指标 1 次（如有其他变化则随时记录）直到动物死亡为止。

(2)动物尸体留待 2.2、2.3、2.4 实验做完后，再依次打开其腹腔，比较血液或肝脏颜色。

3.2 一氧化碳中毒性缺氧模型的制备

(1)装好 co 发生装置。

(2)将小白鼠放入广口瓶中，观察其正常表现，然后与 co 发生装置连接。

(3)取甲酸 3ml 放入试管中，加入浓硫酸 2ml，塞紧。（可用酒精灯加热，加速 co 产生，但不可过热以至液体沸腾，因 co 产生过多过快动物迅速死亡，血液颜色改变不明显。）

(4)观察指标与方法同上。

4.3 亚硝酸钠中毒性缺氧模型的制备

(1)取体重相近的两只小鼠，观察正常表现后，向腹腔注入 5%亚硝酸钠 0.3ml，其中一只注入亚硝酸钠后，立即再向腹腔注入 1%美兰溶液 0.3ml，另一只再注入生理盐水 0.3ml。

(2)观察指标与方法同 2.1，比较两鼠表现及死亡时间有无差异。

5.4 解剖正常小白鼠

取一只未做处理正常的小鼠，观察体表特征，后处死，观察其肝脏颜色。

实验结果

类型

呼吸频率、幅度 肝脏颜色

皮肤粘膜颜色

先加深加快

低张性缺氧

后变浅变慢 暗红色

青紫色/ 13 文档可自由编辑 一氧化碳中毒 无改变 樱桃红色

樱桃红色

亚硝酸钠中毒 无改变 青石板颜色 青石板颜色

正常小白鼠 无改变 红色

红色

讨论

1.乏氧性缺氧：轻度缺氧使呼吸中枢兴奋，呼吸先加深加快，重度缺氧抑制呼吸中枢使呼吸变浅变慢，皮肤黏膜呈暗红色则是由于 hb 结合的氧气过少引起，钠石灰用于吸于甁中 co2 以排除 co2 的干扰,po2 降低里，也因肺通气量的增加，呼出较多的co2，使体内 pco2 和 h+浓度降低，从而减弱低氧的刺激作用[2]。

2.co 中毒：呼吸无改变，主要与 pao2 正常有关，皮肤黏膜、肝脏呈樱桃红色。是由于 cohb 引起，co 中毒性缺氧属等张性缺氧，呼吸系统的代偿不明显，故观察到小白鼠的呼吸逐渐减弱直至停止死亡因此加热时不能过猛，以免 co 产

生过多、过快，使小白鼠迅速死亡，来不及观察。

3.亚硝酸钠中毒：呼吸无改变，主要与 pao2 正常有关，皮肤黏膜、肝脏呈青石板颜色，是由于高铁 hb 引起，美兰是一种还原剂，可将 fe3+还原为 fe2+，具有解毒作用，可使亚硝酸钠中毒的小白鼠解救且皮肤黏膜颜色逐渐接近正常。

第五篇：人体解剖生理学实验——解剖生理学实验要求

生理学实验课的目的与要求

一、生理学实验课的重要性

从1628年英国医生威廉·哈维(WillianHarvcy)的《心血运动论》一书的问世开始，生理学便成为一门独立的学科。生理学是建立在实验和观察基础上的学科，生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。因此，生理学的创立和发展离不开生理学实验。生理学实验课的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法，有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。本课程是医学和生命科学专业学生的必修课程。对于其他专业学生，选学生理学实验课，将对个人科学素养的提高十分有益。

二、生理学实验课的目的要求

1．目的

使学生逐步掌握生理学实验的基本方法和基本技术，了解生理学实验设计的基本原则，进而掌握获取生理学知识的技能，提高对实验中各种生理现象的观察、分析能力，以及独立思考和解决问题的能力。同时培养学生的创新意识、科学素养与科研能力。

培养学生科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风。

通过书写实验报告，提高学生分析、归纳问题及文字表达能力，2、要求

提高实验课的教学质量，需要师生共同努力。因此，实验课的要求包括对教师和学生两个方面。

(1)实验前

生理学实验是在具有生命活性的机体上进行的，实验结果易受多方面因素的制约和影响，教师在备课中，明确实验目的要求、统一实验方法步骤、统一实验项目和实验内容，同时要求教师操作熟练。

学生必须认真预习实验指导，了解实验的目的要求、实验设计原理、简要的操作步骤和注意事项，还应复习与本实验有关的理论部分，以提高实验的目的性和主动性，达到进一步巩固有关理论知识的效果。

(2)实验中

教师传授知识要耐心细致，对学生负责。要求学生必须掌握的生理学实验方法和基本操作技术一定要教会，一丝不苟，逐步提高学生的多种能力与综合素质。同时鼓励学生与指导教师自由交换意见，注意引导学生丰富想像力、增强探索与创新意识。

学生应认真听教师讲课，按教师要求进行各项实验操作，仔细观察、认真记录实验中出现的各种生理现象，并对引起生理现象的原因、意义进行分析和思考。

实验用器材、物品要摆放整齐，便于操作。注意保持实验桌面的清洁卫生，随时清除污物。实验桌上不得放置与实验无关的物品。

爱护仪器和实验动物，注意节约实验材料。不经教师许可，不得动用他人或他组的仪器用品，公用物品在使用完后应放回原处，以免影响他人使用。

遵守实验室规则。保持实验室安静，不得大声喧哗，以免影响他人实验。

实验结束前请教师审查实验结果。如有错误，及时补救。未经教师许可，学生不得擅自终止实验或离开实验室。

(3)实验后

学生应将实验用具整理就绪，放回原处。所用手术器械、手术桌和其他手术用品擦洗干净，仪器用干布擦干净。实验用具如有破损或缺少，及时报告指导教师。作好实验室的清洁卫生工作。

按教师要求妥善处理实验动物，不可自行处理。尤其不能将未处死的动物(尤其鼠类)随手丢弃。实验后，关闭水源、电源，经教师允许方可离开实验室。

整理实验记录，按教师要求书写实验报告并及时交给教师批阅。

教师应认真批改实验报告。如发现不合要求的应指明问题，退回重写。

三、实验报告的撰写

书写实验报告是生理学实验课的基本训练之一，师生都应认真对待，以便为日后撰写科研论文打下良好的基础。为了帮助学生写好实验报告，现将其格式和内容要求简述如下：

1．格式

生理学实验报告

姓名

专业

组别

日期

室温

2．内容要求

(1)实验题目

实验题目应与实验报告的内容一致。一次实验课可能完成多个实验，但教师只要求写一两个实验的报告，有的实验要求学生自行命名。这就要求学生独立思考，选择实验题目应与报告内容相符，题目的文字要简而明、概括性强。

(2)目的要求

目的要求应与实验题目密切相关，不写与之无关的内容。文字力求简练。

(3)实验方法

实验方法应按教师的要求写。一般常规实验不必写，而自行设计的实验必须写明实验方法。

(4)实验结果

实验结果是实验报告的重要部分，实验过程中所观察或记录的生理指标，都应如实、正确地在实验结果中剪贴、记述或说明。如果要求用描记图表示，则需要将原始记录进行合理的剪贴、加工，并在图的下方写明图号、图名、图注及必要的文字说明。不得将记录原封不动地附在报告上。如果记录需要用表格形式表示，其两端是开放而不封口的。表号、表名写在表的上方。凡是定量测量资料，均应以正确的单位和数值准确地写在报告上。有些实验结果需要作统计学处理，求出均值、标准差以及显著性检验。为了便于说明和比较，有些实验结果可以列表或绘图表示。

(5)分析讨论

分析讨论是根据所学的理论知识，对实验结果进行科学的分析和解释，并判断实验结果是否与理论相符合。如果出现矛盾，应分析其中的原因。讨论是实验报告的核心部分，必须独立完成。对实验结果进行认真的分析讨论，有助于提高学生分析、思考和文字表达能力。报告不应盲目抄袭书本，要用自己的语言表达(但应注意使用专业术语)。提倡学生根据实验结果提出自己的独到见解与认识，以及需深入探索的课题。

(6)结论

结论是从实验结果和讨论中归纳出来，有高度概括性的结语，也是实验所验证的基本概念、基本原理的简要总结。结论的文字应突出重点、简明扼要。写好结论部分，有助于提高学生归纳、综合问题的能力。

活体解剖技术

生理学实验是以活的动物或人体作为观察对象和实验材料。在动物实验中，活体解剖技术对生理学实验的成败起着至关重要的作用。在实验过程中，学生应着重于学习、掌握这些操作技术，以提高自己的动手能力。

生理学实验方法虽然多种多样，但一般可分为离体实验法和在体实验法两类。离体实验法是将要研究的器官或组织从活的或刚处死的动物体上取出，置于接近正常生理条件的人工环境中，以观察、研究其生理功能。如离体心脏灌流、离体肠段活动及坐骨神经—腓肠肌标本等实验。在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。急性在体实验法是动物在麻醉或毁坏脑(或脊髓)的状态下，用手术的方法暴露某一器官，便于观察、研究其机能及变化规律。如在体心脏活动的观察、肾脏泌尿机能的研究等。急性实验法只能在一定时间内进行观察研究，而且实验后动物不能存活。慢性实验法是在特定条件下，以完整而清醒的动物为对象的实验方法，可以在较长的时间内，连续地反复观察动物的某一生理机能。此法常需要先在动物体上施行某种无菌外科手术，如胃肠道瘘管术，或在机体的一定部位埋藏电极、切除某一器官等，须待动物恢复健康后方可进行实验。这种实验花费时间较长，动物需要特殊的护理，在基础生理学实验中较少安排。

一、手术器械及其用途

(一)常用手术器械

根据生理学实验的需要，常用手术器械包括手术刀、手术剪、金冠剪、手术镊、眼科剪、蛙类毁髓针、玻璃分针等。

1．手术刀

主要用于切开皮肤或脏器。常用手术刀为刀柄和刀片组合式，也有刀柄和刀片相连的。根据手术的部位与性质，可以选用大小、形状不同的手术刀片。常用的执刀方法有4种：

(1)执弓式

这是一种常用的执刀方法，动作范围广而灵活，用于腹部、颈部或股部的皮肤切口。

(2)执笔式

此法用力轻柔而操作精巧，用于切割短小而精确的切口，如解剖神经、血管，作腹膜小切口等。

(3)握持式

常用于切割范围较广、用力较大的切口，如切开较长的皮肤、截肢等。

(4)反挑式

此法多使用刀口向弯曲面的手术刀片，常用于向上挑开组织，以免损伤深部组织。

2．手术剪

主要用于剪皮肤或肌肉等粗软组织。此外，也可用来分离组织，即利用剪刀的尖端，插入组织间隙，分离无大血管的结缔组织等。手术剪分尖头剪和钝头剪。其尖端还有直、弯之别。生理学实验中常习惯于用弯型手术剪剪毛。另外，还有一种小型手术剪，称眼科剪，主要用于剪血管或神经等柔软组织。眼科剪也有直头与弯头之分。

3、手术镊

主要用于夹持或牵拉切口处的皮肤或肌肉组织。眼科镊用于夹持细软组织。手术镊有圆头、尖头两种，又有直头和弯头、有齿和无齿之别，而且长短不一，大小不等，可根据手术需要选用。通常，有齿镊主要用于夹持较坚韧或较厚的组织，如皮肤、筋膜、肌腱等；无齿镊主要用于夹持较细软的组织，如血管、黏膜等。

4．金冠剪

金冠剪尖端粗短，易于着力，可用于剪开皮肤、内脏、肌肉、骨骼及绳线等。持剪姿势同一般手术剪。

5．毁髓针

专门用来毁坏蛙类脑和脊髓的器械。分为针柄和针部，持针姿势一般采用执笔式。

6．玻璃分针

专用于分离神经与血管的工具。尖端圆滑，直头或弯头，分离时不易损伤神经与血管。玻璃分针尖端容易碰断，使用时要小心，如尖端破碎时会损伤组织，不可再使用。持玻璃分针的姿势同执笔式。

(二)哺乳类动物用手术器械

主要作用是分离组织和止血，不同类型的止血钳又有不同的用途。执止血钳的姿势均与执剪刀的姿势相同。常用止血钳有以下3种：

(1)直止血钳

分长短两种类型，又有有齿和无齿之别。无齿止血钳主要用以夹住浅层出血点，以便止血，也可用于浅部的组织分离。有齿止血钳主要用于强韧组织的止血，提起皮肤等。

(2)弯止血钳

与直型的大同小异，也分长短两种，主要用于深部组织或内脏出血点的止血。

(3)蚊式止血钳(蚊嘴钳)此种止血钳头端细小，又称小止血钳，适用于细嫩组织的止血和分离，不宜钳夹大块或坚硬组织。

2．持针器

主要用于夹持缝针，缝合组织。持针器的头端较短，口内有槽。使用时，用持针器的尖端夹持缝针近尾端1／3处。

3，咬骨钳

主要用于咬切骨组织，如打开颅腔或骨髓腔等。咬骨钳有剪刀式和小蝶式及双关节咬骨钳，前者适用于剪开骨片，后者适用于咬断骨组织。

4．颅骨钻

颅骨钻有多种类型。主要用于开颅时钻孔。

5，缝针

用于缝合各种组织。缝针有圆针和三棱针两种，又有直型和弯型之别，而且其大小不一。圆针多用于缝合软组织，三棱针用于穿皮固定缝合，弯针用于缝合深部组织。主要用于短期阻断动脉血流，如动脉插管时使用。

二、活体解剖技术

1．动物的选择

常用的实验动物有狗、猫、兔、大白鼠、小白鼠、豚鼠、鸽、鸭、蟾蜍或蛙等。无论选用哪种动物，均需健康。一般地说，健康的哺乳动物毛色光泽、两眼明亮、眼和鼻五分泌物、鼻端潮而凉、反应灵活、食欲良好。健康的蛙或蟾蜍则皮肤湿润、喜爱活动，静止时后肢蹲坐、前肢支撑、头部和躯干挺起等。

动物种类的选择需根据实验内容而定，使其解剖和生理特点适合于预定实验的要求。如研究主动脉神经传人冲动的作用时，常选用兔作为实验对象，因为兔的主动脉神经在颈部自成一束，与迷走神经伴行，易于寻找和分离；观察心脏传导组织的电活动时，常选用狗的浦肯野氏纤维及兔的窦房结作为实验材料，因为狗的浦肯野氏纤维在心室内较为粗大，很容易解剖分离。在生理学的研究中，特别是基础理论研究中，合理地选择实验动物，常常是实验成败的关键，但并非越是高等动物越好。在选择实验动物时，应根据实验需要，因地制宜地加以考虑。

2．动物的麻醉

在慢性实验或急性在体实验中，施行手术之前必须将动物麻醉。麻醉可使动物在手术或实验过程中减少疼痛，保持安静，保证实验的顺利进行。麻醉剂的种类繁多，作用原理不尽相凤除了麻痹中枢神经系统以外，还会引起其他生理机能的变化，因此，在应用时需根据动物的种类以及实验或手术的性质慎重加以选择。麻醉必须适度，过深或过浅均会给手术或实验带来不良影响。麻醉的深浅可从呼吸、某些反射的消失、肌肉的紧张程度和瞳孔的大小加以判断。人们常用刺激角膜以观察角膜反射、夹捏后肢股部肌肉等简易方法了解动物的麻醉深度。适度的麻醉状态是呼吸深慢而平稳，角膜反射与运动反应消失，肌肉松弛。

(1)常用麻醉剂的种类及用法

麻醉剂可分为局部麻醉剂和全身麻醉剂两种。局部麻醉剂0．5％～1．0％盐酸普鲁卡因或2％盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉。在生理学实验中，多采用全身麻醉剂，如挥发性的乙醚，氟烷和非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等，以下分别加以介绍。

乙醚(ether)是一种呼吸性麻醉剂，适用于各种实验动物。在用乙醚麻醉猫、兔或鼠类时，可将动物放在特制的玻璃钟罩内，同时放人浸有乙醚的脱脂棉，动物在吸人后的15—20 min开始发挥作用。在麻醉狗时，可用特制的麻醉口罩套在动物嘴上，慢慢将乙醚滴在口罩上进行麻醉。

乙醚对呼吸道有刺激黏液分泌的作用，为防止呼吸道堵塞，可用硫酸阿托品皮下或肌肉注射。乙醚麻醉有易于掌握、比较安全和作用时间短等优点，但麻醉后也容易苏醒，需要专人管理麻醉，以防过早苏醒或麻醉过量。

戊巴比妥钠(pentobarbitalsodium)适用于各类实验动物。常配制成5％的水溶液。一般由静脉或腹腔注射。戊巴比妥钠作用开始快，一次给药的麻醉有效时间约2～4 h，不需要特殊护理。如在实验中需要补充注射时，可再由静脉注射1／5剂量，仍可维持l～2 h。麻醉过量时，动物可产生严重的呼吸和循环抑制而导致死亡。

硫喷妥钠(pentothalsodium)为淡黄色粉末，水溶液不稳定，一般需在使用前配制，常用的浓度为：2．5％～5％，静脉注射，不宜作皮下或肌肉注射。静脉注射后作用较快，但苏醒也快，麻醉时间较短，一般约1．5 h。实验过程中可重复注射，以维持麻醉的深度。

氨基甲酸乙酯(ethylcarbamate)又称乌拉坦或脲酯。氨基甲酸乙酯易溶于水，常用浓度为20％～25％，适用于多数动物：狗、猫、兔多用静脉或腹腔注射，鸟类多用肌肉注射，蛙类用皮下淋巴囊注射。

氯醛糖(ehloralose)溶解度较小，常用浓度为1％，使用前须加热促其溶解，但不可煮沸。常采用静脉或腹腔注射，可维持麻醉状态3～4 h。与氨基甲酸乙酯合并常用于电生理实验中。

非挥发性麻醉剂使用简便，维持时间较长，实验中无需专人照管，麻醉深度也较易掌握，因此为大多数实验室采用。其缺点是苏醒缓慢。

(2)麻醉剂的给药途径及方法

静脉注射

腹腔注射 肌肉注射 皮下注射 淋巴囊注射

3．动物的固定

急性在体实验的手术过程中，必须将麻醉动物稳妥地加以固定，以限制动物的活动，保证实验或手术的顺利进行。一般使用各种动物的头夹和固定绑带将动物固定于手术台上，但随手术部位和实验内容的差别，动物的固定方法也不相同。生理学实验中最常使用的动物固定方法有两种：背位(仰卧位)固定法和腹位(俯卧位)固定法，其中关键性的固定部位是头部和四肢。

(1)背位(仰卧位)固定法

将动物的背部直接接触手术台的固定方法。在呼吸、循环，消化及泌尿等实验中均采用此法。各类哺乳动物(兔、狗、猫等)的背位固定法大同小异，现以免为代表加以说明。

头部的固定：头部的固定通常使用头部固定夹，有兔头夹、猫头夹和狗头夹之分。使用时可将相应的头夹固定于手术台前端的直棒上，然后将已麻醉的动将兔头夹的半圆铁圈由背部夹持于动物的颈部，然后将金属加以固定，但不可过分压迫鼻部，以免影响呼吸。部有一直铁棒，其上有一半圆铁圈，均可上下移动，固定时把内，半圆铁圈的下方，再将直铁棒插入上下颌之间，犬齿之后圈下移，适度地压在动物的鼻梁上，若无动物头夹，也可取线绳代替，将线绳压紧动物的上颌，固定于手术台上，方法简便易行，也可达到固定头部的目的。四肢的固定：在头部固定之后，即可固定四肢，四肢用绑带(或四肢夹)固定。先将绑带按图打活结，再套进动物前肢的腕关节和后肢踝关节，将绑带收紧，后肢的绑带可直接拉紧分别扎于手术台两侧的木钩上。除特殊要求外，前肢的固定方法应为：将两前肢平放在胸部的两侧，再把捆绑前肢的两条绑带从动物背部交叉穿过，并压在对侧前肢的前臂上，最后拉紧绑带，固定于手术台两侧的木钩上。这样即将动物稳妥地固定于手术台上。

(2)腹位(俯卧位)固定法

腹位固定是动物的腹部直接接触手术台的固定方法。这种固定法适用进行脑、脊髓的实验。兔、猫头部的固定常用马蹄形头固定器。其方法是在两侧眼眶下部剪去一小块毛皮，暴露颧骨突，用带1 毫米钻头的骨钻打一个孔，将固定器两侧的尖头金属棒紧紧嵌入小孔内，加以固定，再调节固定器中间的金属棒高度，使其尖端紧嵌在两齿缝之间，旋紧螺旋固定之。如果需要头部上仰，可提高固定器前端的垂直铁柱；如需头部下俯，可将该铁柱放低。

动物四肢的固定同前，用绑带缚紧后直接拉紧固定于手术台两侧的木钩上(或直接用手术台两侧的四肢固定夹夹住)，前肢的绑带可不进行交叉。

(3)蛙类固定法

蛙和蟾蜍的固定法也分背位和腹位两种。规范的固定方法是使用蛙腿夹和蛙板，方法较简单。将蛙腿夹套在蛙四肢的腕关节和踝关节处，拉紧四肢插入蛙板上的小孔内即可。如无这些器材，可用大头针将四肢直接钉在木板上。

实验设计

实验目的

进行实验设计，可以引导学生训练科学的思维方法、树立创新意识与钻研精神，培养学生探索未知领域的积极性与主动索取知识的能力；同时，还可以培养学生严谨的科学态度与实事求是的工作作风。

设计要求

实验设计应在教师的指导下完成。考虑到学生应熟悉常用生理仪器的操作和使用方法，并掌握动物实验的一般技术，通常安排在实验课的最后几周进行。

教师可预先提出实验设计要求，介绍本实验室的现有条件，对动物、设备、药品等方面的准备要细致，使学生可以充分利用所需的条件。

学生设计的实验要有创新性。要在原有实验指导的基础上有所创新，通过查阅文献资料，提出解决问题的思路，并对其科学性和可行性进行论证。最后提出实验方案。

实验设计选题应包括以下内容：

设计的科学依据，拟解决的关键问题，采用的方法手段，观察内容和测定指标，预期结果等。建议在教师的指导下，以小组为单位进行开题报告。

一个完整的实验设计如同申请一项科研课题，应包括：

1．课题名称

所设计实验的题目，要具体、明确、清楚。

2．目的与意义

设计的实验要解决什么问题，有何理论或实际意义。

3．基本原理

所设计实验的科学依据。4．动物、器材与药品

所需动物的种类、实验仪器和药品清单。5．进行实验的方法、步骤、观察指标与程序 6，预期结果

验证原理或新的发现。实验设计原则

1．科学公正

科学性是实验设计的核心。所设计的实验必须有充分的理论依据或科学推论，切忌盲目、无任何根据的凭空设想。大胆设想、创新是建立在对已有知识掌握的坚实基础之上的。对实验的数据处理要客观，实事求是，切忌编造、篡改、弄虚作假。发现与预期结果不符的数据要认真分析，去伪存真。

2．条件一致

在实验设计时，要考虑到待测因素本身的条件必须前后一致，尽量避免非受控因素的干扰。如电刺激参数；给药的剂型、剂量；动物的品种、性别、体重；环境温度、湿度等。

3．对照重复

生理实验的目的在于发现某一因素(条件)对机体活动的影响。因此必须有对照进行比较。

对照的基本原则是：除待检测的因素(条件)有所区别外，对照实验与检测实验的其他条件应完全相同。

欲证明待测因素(条件)所引起的反应具有某种客观规律性(非偶然发生)，那么，实验结果必须是可以重复的。只有反复重现的结果才有可信性。真理必须经得起实践的检验。

4．量效关系

如果待测因素(条件)与某种反应之间存在内在联系，则二者之间除因果关系外，还应表现出量效关系。如了解药物的作用时，应注意观察不同药物浓度时的反应；观察电刺激与肌肉收缩的关系时，应测试不同刺激强度、频率时肌肉的收缩反应。

5．测试指标

为了保证实验数据的准确，应对测试仪器进行认真的定标。如电子仪器的放大倍数、零点平衡的调节、标准试剂的配置等。

6.统计处理

对获得的实验原始数据或资料应核实、分类整理，开采取适当的数理统计方法进行处理，找出规律。通过计算机作出统计表或坐标图和直方图。

7．综合论证

科学结论的取得，需考虑多方面的因素。如观测某一神经因素的作用时，不仅用刺激的方法，也可用切断、损毁、拮抗药物及受体阻断剂等方法进行验证。另外，有些生理指标受到时间、温度、湿度、环境等多种因素的影响，因此应考虑机体动态的变化。机体是一个统一的整体，各系统、器官之间存在着相互作用和相互制约的关系，必须用整合的观点去分析实验结果。

[参考选题]

、1、影响心输出量的各种因素

2、温度、体位、呼吸、运动对血压的影响

3、抗利尿激素对水通透性作用的观察

4、去甲肾上腺素对血管紧张性的影响

实验的组织与实施

目的要求

使学生获得独立进行科学研究的初步训练，提高组织实施能力，增强分析问题和解决问题的综合能力，为进一步从事科学研究奠定基础。组织实施步骤

实验准备

实验准备工作，包括动物的选择、药品的配置、仪器的安装与调试等。实验准备应在实验员指导下进行。

实验过程中

实验按计划实施后，应有详细的实验过程记录。记录应及时、完整、精确。要保持记录的原始性和真实性。小组成员要有明确分工及相互合作。在实验过程中一般严格按照实验设计既定方案操作，但也可根据具体情况对实验方案进行修改，直至得到理想的实验结果。

实验完成后

以小组或个人为单位，写出翔实的实验总结报告。报告格式应包括： 题目、作者、指导教师、摘要、关键词、前言、材料与方法、实验结果、讨论、结论与参考文献。实验结果中的数据要附必要的图、表或照片。

评定成绩

在总结报告完成后，还需进行答辩。教师依据实验方案、实验过程、实验报告、答辩表现等综合评定成绩。