第一篇：马铃薯组织培养技术要点
马铃薯脱毒种苗组织培养技术要点
班级：园艺112
姓名：马寅
学号：201101070202 摘要：各种病毒、真菌、细菌等对马铃薯的侵染是导致我国马铃薯单产较低的主要原因，马铃薯脱毒种苗有巨大应用前景。本文综合介绍了茎尖培养脱毒法组织培养的各技术要点，收集前沿技术信息。论述了马铃薯脱毒种苗组织培养过程中以及移栽处理。
关键词：马铃薯脱毒种苗 组织培养 移栽
1、马铃薯产业现状及危害其生产的主要因素
栽培种的马铃薯(SolanumtuberosumL．，2n=48)是双子叶种子植物．属茄科(Solanaceae)茄属(Solanum)一年生喜凉草本植物【l】。又名洋芋、土豆，原产南美洲，在我国已有300多年的栽培历史。马铃薯生育期短，产量高，营养丰富，是典型的粮菜两用型作物，是我国四大栽培作物之一。【2】世界马铃薯面积分布的最大特点是以欧、亚两洲种植为主，两者种植面积占世界马铃薯总面积的78％，其中中国、俄罗斯、乌克兰、印度四大生产国占世界种植面积的1／2。而马铃薯的发源地南美洲种植面积只占世界马铃薯总面积的5％。除整个美洲大陆保持相对稳定外，欧洲的种植面积在持续减少，而亚洲、非洲的种植面积在不断增加。马铃薯在生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖。国际马铃薯中心(CIP)和国际食品政策中心(IFPRI)合作研究表明，到2020年为止，全世界对马铃薯的需求将有望增长40％。超过水稻、小麦和玉米的增长。特别是亚洲和非洲对马铃薯的需求将增长更快。[1]
2、马铃薯组织培养的理论体系及研究现状
2.1组织培养及马铃薯组织培养的发展史
19世纪30年代，德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活；1902年，德国植物学家哈伯兰特细胞全能性的理论是植物组培的理论基础。1958年，一个振奋人心的消息从美国传向世界各地，美国植物学家斯蒂瓦特等人，用胡萝卜韧皮部的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植 株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。植物组培的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织——再经过再分化形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。
1955年法国人莫勒尔和他的同事们以马铃薯茎尖为外植体成功地产生无病毒植株，以马铃薯茎尖为外植体成功地产生无病毒植株，20世纪60年代以后由于组织培养技术日趋成熟和完善，世界各地的植物组织培养研究和产业化应用进入迅速发展阶段，几乎所有的马铃薯生产国都使用这项技术进行脱毒快繁，并部分地进行育种研究。2.2脱毒种苗
马铃薯系无性繁殖作物，在生长期间容易受病毒侵染造成退化。一旦感染病毒，无有效药治，病毒在薯块内的积累是导致马铃薯品质、产量下降的主要原因。为了解决这一问题，我国于 20世纪 70 年代初引进了马铃薯茎尖脱毒技术，1976年于内蒙古建立了第 1 个马铃薯脱毒原种场，80 年代逐渐普及到各省、市、自治区。
目前，马铃薯脱病毒的方法主要有 5 种: 茎尖培养脱毒法、热处理脱毒法、热处理结合茎尖培养脱毒法、化学处理脱毒法、愈伤组织培养脱毒法，其中应用最广泛的是茎尖培养脱毒法及其与热处理法相结合的方法。脱毒种苗可以显著减少马铃薯生长期间的病虫害，进而提高马铃薯产量和品质。[4]相关实验及研究已表明，马铃薯脱毒试管苗生长较其他植物组培容易，是组织培养中的模式植物。2.3微型种薯
马铃薯试管薯是指在培养瓶内通过诱导，于试管苗叶腋间形成的直径为2 ～ 10 mm 大小的块茎。微型薯良种繁育体系减少了种薯繁殖周期和有关环节，能够有效保证质量，提高生产水平，加快推广，减少用种量。目前，美国、荷兰等许多国家都在应用微型种薯繁育体系，有的国家已实行了法制化的良种繁育制度。我国在微型种薯方面的研究也取得了一定进展，毛碧增等成功建立了东农303 的高效脱毒微型薯诱导及繁育体系；刘华等用B9结合光照处理诱导试管薯，结果发现所有的黑暗处理都比光周期处理的结薯率高。[3]将脱毒苗定植在网棚，或原原种大田，生产原原种，或定植在温室或网室内诱导脱毒微型薯形成。目前微型薯生产主要采取两种方式：一是试管诱导培养生产微型薯；二是培养试管苗，2 然后通过扦插繁殖，并移栽于无土介质中生产微型薯。[4] 2.4茎尖培养脱毒法及其与热处理法
马铃薯在栽培过程中，植株逐年变小．叶片皱缩卷曲，叶色浓淡不均，茎杆矮小细弱，块茎变形龟裂，产量逐年下降，这些都表明马铃薯已经发生退化。种薯退化是弓1起产量降低和商品性状变差的主要原因聊。据此，科学家从植物生理学、生物化学、栽培技术、栽培环境、种薯贮藏条件、病虫害侵染等方面对马铃薯“退化”进行了深入的研究。研究表明：各种病毒、真菌、细菌等对马铃薯的侵染是导致我国马铃薯单产较低的主要原因。
目前，已知的马铃薯侵染病毒约有30种，由于马铃薯育种体系尚不健全，农民自留种现象普遍致使病毒感染面积占到栽培总面积的80％以上。在我国广大马铃薯产区，危害马铃薯的5种主要病毒为马铃薯x病毒(PVX)、马铃薯A病毒和Y病毒(PVA，PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLILV)，以及马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD)。其中PVY、PLRV是危害最为严重的2类病毒。[5]
3、马铃薯茎尖脱毒技术的操作规程
3.1材料的选择
实践证明，同一个品种个体之间在产量上或病毒感染程度上都有很大的差异。进行茎尖分生组织培养之前．应于生育期对准备进行脱毒复壮的马铃薯品种或材料，进行田间株选和薯块选择，选择具有该品种典型特性、生长健壮的单株(或无性系)，结合产量情况，选择高产、大薯率高、无病斑的单株作为茎尖脱毒的基础材料，以提高脱毒效果。由于马铃薯纺锤块茎类病毒病(PSTV)在目前用植物茎尖分生组织方法很难脱掉，在进行茎尖剥离脱毒前，应先对人选的块茎进行PSTV检测，淘汰带有PSTV的薯块。[5][6] 3.2材料处理
为提高脱毒效果，脱毒材料在进行茎尖组织剥取前，应进行材料的热处理，以钝化病毒的活性，消除马铃薯卷叶病毒，提高脱毒效果。把入选的马铃薯块茎进行打破休眠和催芽处理，当薯块顶芽生长至lcm后，转入光照培养箱内，以每天12h光照，照度3()()()lx，37℃的高温处理6—8周。3.3取材和消毒
剪取经过热处理后发芽块茎上2～3cm长的芽若干个．用软毛刷轻轻逐个刷 洗后放于烧杯中，用纱布封口。放于自来水下冲洗30min，然后在超净工作台进行严格消毒：先用75％的酒精浸15s，无菌水冲洗2次；再用0．1％的升汞浸泡8-10min(或用5％次氯酸钠浸泡5—20min)，无菌水冲洗5～8次，每次3～5min(用无菌水冲洗过程中要不断的晃动放置材料的容器，以保证漂洗更彻底)，冲洗完后放在灭过菌的培养瓶内待用。3.4剥离茎尖和接种
在超净T作台上，将消毒过的芽置于40x的解剖镜下，一手用一把眼科镊子将芽按住．一手用灭过菌的解剖针将叶片一层一层仔细剥掉，直至露出圆亮的生长点，用锋利的无菌解剖针小心切取0．3mm以下的带l，2个叶原基的茎尖．随即将茎尖接种于已准备好的马铃薯茎尖培养基上，以切面接触琼脂。要注意确保所切下的茎尖不能与已剥去部分、解剖镜台或持芽的镊子接触。另外，在剥离过程中，必须注意使茎尖暴露的时间越短越好，因为超净台的气流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干。所以在选择解剖镜的灯源时，尽量以冷光灯为好．同时在材料下垫一张灭过菌的湿滤纸保湿，每剥一个茎尖后．换一张无菌湿滤纸。由于块摹萌发的芽的数量有限。加上剥离过程中难免损伤到茎尖，导致可剥离的茎尖最少、成苗的机率小．易造成优良品种和材料的丢失。[7] 经过多年的实践，我们总结出一种行之有效的方法：取经严格消毒过的块茎芽(1cm长)接种在不含任何激素的马铃薯快繁培养基上，于25cc每天光照12h的培养室培养，3～4周后．待芽长成含4、5片叶子的小苗时，剪切成单节段，转接于同样的无激素MS培养基上，培养成苗。同样方法扩繁l-2个周期，等苗达一定数量后，再直接用这些苗来剥离茎尖，既能保证材料不丢失，又能增加茎尖的数量，从而能增加成活的机率。
4、茎尖培养与病毒检测
4.1培养基
选择合适的培养基是茎尖培养成功与否的关键，根据我们的经验，以Ms+GA2mg/L+BA0．5mg/L+NAA0．05+肌醇100mg/L+D-泛酸钙0．2mg/L+食用白糖3％+琼脂0．6％，pH5．8，为比较好的培养基组合。4.2培养
茎尖培养对培养器皿无特殊要求，一般以150ml三角瓶或250ml罐头瓶，每瓶 装40ml培养基，为节约培养基，每瓶接种2—3个茎尖，均匀分布于培养基表面。接种好的茎尖放在培养室内培养，温度18-25℃，光照2 000～3 000lx，每天光照12h。培养2周后，培养瓶内的茎尖生长点便明显变大变绿，30—40d即看到明显伸长的小茎，叶原基形成可见的小叶，这时可转入无激素的Ms培养基中。小苗继续生长，并形成根系，4～5个月后即可发育成3—4个叶片的小植株，将其按单节切段，进行扩繁，成苗后，用于病毒检测。
采用离体培养方法，研究了不同浓度多效处理对马铃薯试管苗生长和块茎形成的影响。结果表明，在试管薯诱导条件下，0．1 mg／L多效唑处理促进了‘夏波蒂’提早结薯，使单瓶试管薯鲜重、平均直径和单薯鲜重都显著增加，同时降低了畸形薯率；而单瓶试管薯的结薯数量低于BA+CCC处理，但接近对照。这些结果表明：与广泛应用的矮壮素相比，在马铃薯试管薯生产中使用多效唑能提高试管薯产量和质量，且其使用浓度仅为矮壮素的1／5000，有利于降低残留并节约成本，是矮壮素较好的替代物之一。[6] 适宜的环境条件同样重要。培养室必须清洁、无菌。马铃薯脱毒试管苗在2 000 LX的光照下，每天照16 h。试管苗生长最适宜的温度是白天25-27℃，夜间16-2O℃，一定的昼夜温差有利于试管苗壮苗，培养室的相对湿度为7O-8O，湿度过高过低都不利于试管苗的健壮生长。在阴雨的夏天，要除湿，使湿度降到5O 下，防止真菌，细菌污染。4.3病毒检测
由茎尖分生组织培养获得的小苗，经第一次扩繁后要对其进行严格的病毒检测，以确定材料的脱毒情况。一般采用指示植物鉴定法、电镜检测法或抗血清鉴定法，经病毒检测后，确认是不带病毒的株系，才能进一步利用，对继续带病毒的株系应淘汰或进行再次脱毒。
5、主要存在问题
目前这种离体无性繁殖方法也还存在一些问题，严重制约着马铃薯脱毒推广技术的进一步扩大遗传上的不稳定性。
例如：组织培养条件再生植株器官形成时，可能有许多愈伤组织参与，而这些细胞的遗传成分有的是变异的，有的是小变异的。而通过一个植物器管或一个节段直接长出芽用在具有遗传嵌合性的品种上时，会产生一个严重的问题：不定 芽的形成会招致嵌合体裂解出现纯型植株风险。5.1真菌和细菌污染
真菌和细菌污染是马铃薯组培过程中普偏存在地问题，控制不好很容易发生毁灭性的灾难．必须做到提旱预防及时控制。操作前接种室要定期用甲醛熏蒸或紫外线杀菌，工作人员人内必须穿清洁工作服并套鞋套．严格做好工作人员操作前消毒规程．工作人员操作时候必须带口罩禁止说话．严禁非工作人员出入．培养室内的材料，应该坚持定时查询，发现污染问题及时处理同时适当降低培养室的湿度、温度．减少空气当中细菌数量。5.2“玻璃化”现象
不断进行重复离体繁殖的时候．一部分培养物常常变成水渍状、其植株茎部趋于透明状．这类试管苗的生长和繁殖速度都会下降，最后甚至死亡．称之为“玻璃化”现象，玻璃化的起因是细胞生长过程中的环境变化引起的。试管苗及时进行继代培养，因为长时间培养，不能及时转移，容易出现玻璃化苗。培养基细胞分裂素与生长素比例控制在一定浓度水平。因为过高。[7]易导致玻璃化苗的产生。培养基中琼脂浓度应该控制在一定水平，过低时玻璃化苗比例增加，水浸状严重，同时随着多代培养后变异率越来越高．此外控制一定温度、光照、通风都很重要。5.3快繁消毒问题
脱毒苗在快速繁殖的过程中温室或者网室内棚脱毒苗在快速繁殖的过程中温室或者网室内棚顶、墙壁、地面、土壤、蛭石、沙子以及工作人员严格消毒还不够重视，在实际操作中，门窗和通风口50～60目纱布隔离，防止虫媒再次感染。
6、马铃薯脱毒试管苗移栽与成活
从温室建设，壮苗培育，试管苗移栽，水分管理，病虫害防治等方面可提高其移栽成活率。
6.1移栽的条件① 温室内最低温度不低于6度。② 温室内日照时间不低于12 h。③ 无污染的健壮试管苗。④ 温室无虫，无杂菌，基质浇透水。⑤ 基质pH5.5-6.5。6.2移栽
移栽前，在蛭石中撒入1-3 g／m 60 的多菌灵，2-3 g／m 65 代森锰锌；同时，施入2Og／m。的磷酸二铵，10 g／m。的尿素，30 g／m 的硫酸钾，浇透水，盖上无机膜，全温室喷一遍4O% 的氧化乐果800倍液或50 %抗蚜威800-1 000倍液，关闭门窗，提高基质温度。5-7 d后，揭开无机膜，换气，2-3 d后待用。
(2)移栽时，选择苗高6-8 cm健壮且根系发达的试管苗，打开培养瓶口，置于炼苗室内2-3d。取出试管苗，在6℃中的水中将培养基冲洗干净，浸入强力生根灵6 00O-8 000倍液2-3 min或25 mg/L的ABT生根剂溶液10-15 rain，然后，捞出来，按照4 cm×6 cm进行定植。定植时，用手指将蛭石划开2-3 cm深的沟，把苗根放直，撒1-2 cm厚的蛭石，用雾状喷头喷水或喷雾器喷水，覆盖塑料膜及60-70％ 的遮阳网。保持空气湿度及防止强光直射，散射光有利于缓苗。
7、马铃薯组织培养的前景展望
组织培养是一种打破传统的新型繁衍后代方法，能最大效率地利用空间，使高等作物生 长发育的微生物化，田间马铃薯育种材料圃种植 45000株/hm2在组织培养室每4cm ²培养1株且能多层架放置培养瓶加上繁殖周期短 变异母体材料扩大了500-2000倍。同时由于组织培养条件使染色体突变率的增强若再增设人工诱导突变剂，提高了变异率，所以组织培养在马铃薯育种是一种很有潜力的方法。[9]
参考文献：
[1]屈冬玉，谢开云，金黎平，等．中国马铃薯产业现状与趋势
[2]中国马铃薯学术研讨会与第五届马铃薯大会论文集．2004：230—239． 裴荣信．马铃薯小整薯播种的理论与实践．马铃薯杂志
[3]司怀辉等我国马铃薯组织和细胞培养研究进展，中国马铃薯。
[5]胡赞民;邓向东;陈正华马铃薯脱毒微型薯人工种子工厂化生产技术研究[期刊论文]-中国科学院院刊。
[6]多效唑对马铃薯试管苗生长和块茎形成的影响张志军1，李会珍 2，姚宏亮2，周伟军2(1．浙江大学农学系，浙江杭州310029；2．山西省农业种子总站，山西太原030001)[7]提高马铃薯脱毒试管苗温室移栽成活率的方法孙伟势(陕西省商洛市农业科学研究所，陕西商洛726000 [8]昆明市马铃薯茎尖分生组织培养脱毒技术 昆明市农科院 张丽芳等
[9]马铃薯茎尖脱毒号I央繁技术应用研究进展张思鸣1，王勇2，胡钧铭2，王传之2(1．贵港市种子管理站，广西贵港537100；2．广西大学农学院，广西南宁530005)
第二篇：冬季马铃薯种植技术要点总结
宁南县大行桑套作冬季马铃薯覆膜栽培技术要点
1、种薯处理：必须选用芽长1厘米左右，在散光下炼芽至绿色，出芽整齐的种薯。均忌使用未出芽的种薯，这是为以后破膜方便，减少劳动力的一项关键性技术；要求使用药剂拌种或喷洒，使用一包银法利兑一喷雾器水进行喷洒，晾干水汽后进行播种。
2、栽培方式：采用3尺拉线开厢，每厢种两行；行距6寸，退步行8寸，亩植5000窝；深沟高厢，一次成型，种完后不用再上小厢和大厢。
将地整平整细后拉线挖沟，沟宽以窄板锄挖出宽度为宜，大约7寸左右，深度不少于20厘米；挖好沟后在沟两侧错窝摆放种薯，两个种薯之间的距离是8寸，注意将种薯放在沟底两侧；然后在沟中间或两个种薯中间施用农家肥和一半的马铃薯专用肥，将播种沟填平后再在厢面上施用另一半马铃薯专用肥；最后起高垄，厢面高度不小于30厘米，厢面宽度不超过2尺，在起好的垄大厢面上用芽前除草剂，如乙草胺等对厢面和厢沟进行喷洒一次。
3、地膜覆盖：覆膜有两种方式，一是播种后立即覆膜；二是整块田出苗达10%左右开始覆膜，地膜应该选择宽膜，宽度不少于3尺。无论是哪种覆膜方式都要注意即时破膜，避免马铃薯烧苗，要随时检查马铃薯出苗情况，发现有出苗顶膜的情况就要马上破膜，就在破膜处抓土覆盖。
4、施肥：马铃薯覆膜栽培采用的是将所有肥料作为底肥一次性施入的方式，以后不再施肥。亩用腐熟农家肥1000-1500公斤，马铃薯专用肥50公斤（氮、磷、钾的含量为15：15：15），现蕾期亩用磷酸二氢钾一包（400克）兑水4喷雾器（大约60公斤）进行叶面喷施两次（每隔10天再喷一次）。
5、水浆管理：以田间土壤干湿度决定灌水次数，灌水灌浸厢水，速灌速排。
第三篇：关于植物组织培养技术感想
关于植物组织培养技术的感想
植物组织培养俗称植物克隆，是当今国际农业领域的一项高新植物育苗技术，是在无菌条件下，将植物器官、组织、花药、体细胞甚至原生质体等外植体接种到人工配制的培养基上培育成植株的技术。研究人员可以通过研究外植体其在不受植物体其他部分干扰的条件下的生长和分化规律，另一方面，研究植物体的器官、组织和细胞在改变培养条件，包括培养基的配方、光照和培养温度等的生长、分化和发育规律，从而解决植物形态建成中的实际问题，为农林、医学等生产提供理论基础及实践指导。
一、植物组织培养的原理
植物细胞的全能性是指植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，整个过程包括细胞的脱分化和再分化过程。植物组织培养是利用植物细胞全能性，将其从植物体中分离出来，这一过程称细胞脱分化，然后在一定的培养条件下经再分化，最后形成完整的植株的过程。
二、植物组织培养的基础条件
植物组织培养的技术条件主要包括培养基的配制、无菌条件和培养条件等。
（一）培养基的配制
植物组织培养中一个关键的步骤。对组织培养的外植体生长而言，培养基的组分是一个决定性的因素，不同的植物材料要求不同的培养基，适于诱导愈伤组织的培养基不一定适于器官分化，适于固体培养的培养基不一定适于液体培养，因此要想获得成功，必须精心选择适宜的培养基。根据培养基的物理状态，可将植物组织培养分为固体培养和液体培养。不同的外植体、不同的培养方法、不同的培养目的等，都要求采用不同的培养基。
一般来说植物体对土壤的pH值有一定的要求，所以外植体培养基也不例外。目前，在植物组织培养上常用的培养基有十几种，其主要成分是大致如下：首先，培养基中含有大量的水分，可以满足外植体生长对水分的需要。
其次，培养基中的矿质元素包括植物必需的大量矿质元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、Cl以及非必需的Na等。糖除了给外植体提供碳源外，还可调节培养基的渗透势。碳源一般采用蔗糖，少量采用葡萄糖，浓度各有不同。
植物生长素和细胞分裂素要根据培养的目的适当选用。可采用IAA、IBA和NAA、KT、6-BA、ZT等。在诱导根和芽的等不同分化时段，还需根据要求调整培养基养分的比值。维生素B(硫胺素)是必需的，而烟酸、B16虽属于不必需，但对生长有促进作用，所以一般也添加到培养基中。有些培养基中还包括氨基酸、水解酪蛋白、酵母汁、椰子乳等有机附加物，以促进细胞的分化。
（二）无菌条件
根据前面的配制可知，由于营养基的营养十分丰富，微生物极易滋生而造成污染，因此，在植物组织培养的整个过程中都必须保持严格的无菌条件。所以消毒显得重要。外植体的消毒通常采用氯化汞、过氧化氢、次氯酸钙、次氯酸钠或70%的酒精等，消毒后需用无菌水充分冲洗。用具必须进行高温高压灭菌。培养室要尽量保持无菌状态，定期用紫外灯照射和用杀菌剂熏蒸杀菌。
(三)培养条件
自然界中的植物体所需的光、温、水、气，植物组织培养时也同样所需要。水分和氧气条件一般容易得到满足，而植物组织培养条件可通过人为控制光照和温度，温度一般控制在25~28℃之间，有的还要求有昼夜温差，主要通过控制光强和光周期进行调节。人工光照一般采用日光灯，也可以透光的玻璃培养室利用自然光照。
三、植物组织培养的优缺点
（一）植物组织培养技术优点
植物可以不受生长季节限制地繁殖；不携带病毒，防止植物病毒的危害，极大的提高了农业生产效率；培养周期短，短时间内大批量的培育出所需要的植物新个体；可用组培中的愈伤组织制取特殊的生化制品；可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物；可诱导之分化成需要的器官，如根和芽；解决有些植物产种子少或无的难题，如将香蕉进行组培得到人工种以方便移种。
（二）植物组织培养的缺点
为了满足人们生活需要，吃饭问题已经与组培快繁密不可分了。由于培养基几乎完全属于人为调配获得的，这就导致一个问题，调控的人是否理解植物的特性、是否熟悉培养基的理论和植物生理、是否有足够的经验来驾驭组织培养技术，这几点都决定了组培育苗的品质。如果严格把关组培过程的话，那么组织培养或快速繁殖所获得的苗，跟叶插、砍头苗完全一样，能最大程度的保留了植物的完整基因组。这是组培快繁的最大优势，这也就决定了目前重要的作物、名贵花卉的繁殖和保存也都是组培快繁的途径实现的。
转基因植物食品对我们来说已经是一个公开的话题，也是借助组培快繁平台来完成，我们生活中至少接触30种转基因植物的衍生产品。资料显示这些衍生产品的缺点也比较明显：1）表现为“硬化”不足，即从实验室进入温室后进行驯化栽培时间不够，行内称作“硬化”。2）激素残留明显，或者对激素的敏感性变化，少部分苗会在后期发根后呈现出一些残留激素效应，这种效应不会超过一年，表现为容易出侧芽、大量畸形根、生长周期紊乱、开花增多等。但是这种情况并不是组培快繁苗所特有，用激素诱导的叶插和砍头苗也会出现这种症状，甚至更夸张！因此这一点并不是鉴别组培苗的根本。3）对有性繁殖的影响，由于组培快繁获得的苗都是小苗，需要经过硬化和长期的温室栽培才可能开花，所以一般存在对有性繁殖无影响。4）根原基异常，由于激素环境下会对导致根原基维管束的排列紊乱，这就导致了出根可能会受到抑制，正常的根无法顺利萌发。
四、植物组织培养在生产实践上的应用
（一）植物体的无性快速繁殖及脱毒
用组织培养技术进行植物的无性快速繁殖，已广泛应用于一些花卉、果树等园艺作物、农作物以及林木的育苗。如广东、广西和海南岛香蕉的种植已大多采用试管苗，甘蔗和兰花试管苗也已大量应用于生产，柑橘、菠萝、草莓、桉树以及其他许多花卉等也利用试管苗进行栽培。
受病毒感染的马铃薯植株，除了茎尖生长锥外，其他部位往往都带有病毒。因此，继续用块茎作繁殖材料，必将导致后代植株染病。若利用茎尖生长锥作外植体进行无性快速繁殖，所生产出的幼苗将不带病毒，从而达到脱毒的目的，可解决马铃薯品种的退化问题。利用组织培养技术进行无性快速繁殖具有许多优缺点，在实际生产中应该注意扬长避短，本着良心去做事，最好是建立相应的法规并严格执行。
（二）花粉培养和单倍体育种
利用花粉进行组织培养可以获得单倍体植株。进行单倍体育种，可以加速育种的进程并可获得纯系。我国已培育出10多种花粉植株，如水稻、小麦、大黑麦、小黑麦、玉米、甜菜、茄子、烟草、辣椒、杨树和橡胶树等，其中小麦“花培一号”、烟草“单育一号”等优良品种已广泛应用于生产。
（三）人工种子
将植物组织培养中产生的体细胞胚包裹在含有养分的胶囊内，可像种子一样直接播种到大田用于生产，即所谓的人工种子。天然种子中的胚是合子胚，而人工种子中的胚是体胚，胚乳和种皮也是人工的。目前，已有胡萝卜、芹菜、苜蓿、棉花、玉米、水稻、橡胶树等几十种植物的人工种子试种成功，但成本相对较高，美国己大规模生产树木的人工种子。
（四）原生质体培养和体细胞杂交
采用酶法去除细胞壁的原生质体培养，不仅是研究细胞生命活动机理的良好体系之一，还可以通过原生质体培养开展原生质体融合与体细胞杂交，获得新品系、新品种。从理论上讲，细胞杂交比有性杂交可得到更多的不同类型。
五、总结
目前，植物组培方式以固体培养基培养为主，液体培养基培养由于具有物质交换快，生长速度快，产生的代谢物质不会在组织周围积累等优点，值得大力研究与推广。同时要有计划、有步骤地引进先进的植物组培苗生产配套设施，建立健全培养室组培快繁与温室栽培相配套的组培苗生产体系，确保培育出高质量的商品化组培苗。
总之，植物组织培养技术仍处于发展阶段，还存在许多问题，其潜力也没有得到充分发挥，许多机理有待深入探索，相信但随着科技的进步和社会的发展，问题可以逐步得以解决。希望在不久的将来，植物组织培养技术能够我国开发西部、建设森林城市、绿化山川、防风固沙、退耕还林、以及调整农村产业结构中发挥巨大作用，该项技术将会在我国甚至全世界将发挥举足轻重的作用。
第四篇：马铃薯种植技术
马铃薯种植技术
最佳答案 每100克土豆所含营养如下 名 称 数 量
水分(克)79.8 热量(千卡)76 能量(千焦)318 蛋白质(克)2 脂肪(克)0.2
碳水化合物(克)17.2
膳食纤维(克)0.7
胆固醇(毫克)0 灰份(克)0.8
维生素A(毫克)5 胡萝卜素(毫克)30 硫胺素(微克)0.08 核黄素(毫克)0.04 尼克酸(毫克)1.1 维生素C(毫克)27 维生素E(T)(毫克)0.34 a-E 0.08(β-γ)-E 0.1
δ-E 0.16 钙(毫克)8
磷(毫克)40
钾(毫克)342 钠(毫克)2.7 镁(毫克)23 铁(毫克)0.8 锌(毫克)0.37 硒(微克)0.78 铜(毫克)0.12 锰(毫克)0.14 碘(毫克)1.2
脱毒马铃薯大西洋栽培技术
一、品种习性：大西洋为油炸加工型品种，生育期从出苗至收获85－90天左右，该品种较感晚疫病，既需冷凉的栽培环境又不耐低温，因此生产中苗期应做好防冻工作，而各个技术环节都应抓好疫病的防治。
二、地块选择与准备：马铃薯是地下块茎作物，需要深厚、疏松因此在地块的选择上要尽可能选择疏松的沙质壤土作为栽培田块，在渗水能力较差的水稻田种植，要推行高畦栽培，以利清沟排渍，增强土壤通透性。生产地点应集中连片，以便收购，烟区不提倡发展，种植区绝对不能与烤烟或其它茄科作物相邻或轮作。田块选择好后进行冬翻晒白，开深沟起
高畦，畦宽90－100cm，畦高30cm，沟宽20－25cm。大西洋需肥量大，每1000kg块茎需吸收
氮5.8kg、磷2.5kg、钾10.8kg，NPK比约为2：1：4。特别是前中期吸收养分较多，因此要施
足基肥，基肥以有机肥和磷钾肥为主，有机肥每亩需要1500kg以上，在整畦时施入，化肥选
择氮磷钾含量都为15％的含硫复合肥，每亩50kg，播种前在畦中间开沟施入。
三、种薯的处理：种薯的贮藏应选择冷凉干燥的环境通风贮藏，播种前挑掉病、烂薯
块再进行消毒与催芽，消毒一般用福尔马林1份兑水200份，浸种5分钟后充分摊凉，催芽可
利用室内自然催芽，如播种前10－15天仍未见芽眼，可用1ppm的“九二0”浸种15分钟后捞
起，进入室外湿润沙床或湿润畦中，搭弓形架覆膜借助阳光和温催芽，一般10－15天后可长
出1－2cm的壮芽。
薯块过大在播种前可进行切块处理，以保证每亩所需的播种密度。切块时应保证每块薯
块都要带有芽眼，薯块大小不宜低于40g，切薯块的刀具需准备两把，浸在高锰酸钾溶液中
消毒，轮换使用，切块后切口需沾草木灰消毒，并摊凉8小时以上再进行播种。
四、播种期选择：适期早播可避开后期高温高湿气候的不利影大西洋播种期安排要以
避晚霜冻害和块茎膨大期避开25度以上高温天气为依据。当土层10cm温度达
7－8度时，越早
播种产量越高。但是播种过早则极可能遭受冻害影响，在没有防冻保护措施下栽培，大西洋
在零度以下既受冻害，造成绝收，这点各乡镇在示范推广时应反复强调防冻措施的重要性，切不可麻痹大意。播种过迟，晚疫病发生严重，而且商品薯没有好的市场价格，直接影响
种植效益。
五、播种： 每亩播种量需确保在3000至4000株，实行宽行窄株，每畦播两行，株距
30cm，播种深度5－7cm，种薯在播前进行分选，将芽长相近的薯块安排在同一块播种，播种
时，芽眼朝下，切口朝上，减少烂薯，促进生长发达根系，播后用火烧土拌腐熟猪粪或鸡鸭
粪盖种，然后搭建中膜或地膜小拱棚防寒。出苗后密切注意棚温，棚温过高应及时揭膜通
风，出苗一个月后除去拱棚。
六、田间管理：
1、间苗：出苗后及时间苗，每穴保留一根最强壮的幼苗，其余的越
早去除对产量影响越小。间出的苗与不发芽的种薯要带出田外深埋处理。
2、追肥：出苗后10天内进行第一次追肥，可用稀薄的人粪尿浇施，以保证马铃薯幼苗
生长所需的氮肥，为中后期的生长打好基础。现蕾期进行第二次追肥，以钾肥为主，配合适
量氮磷肥，以满足结薯需要。施肥上应注意适氮增钾，防止光长秧不结薯。如施氮过多表现
徒长，用0.02％硫酸镁溶液喷施，可抑制徒长。
3、排水：田间湿度过大是病害发生的主要原因，因此要防止田间积水，降低田间湿
度。其方法是高畦栽培，深挖边沟，水沟深度需在50cm以上，而且做到沟沟相通，遇雨能迅
速排走田间积水，同时要防止田间杂草丛生，经常进行清沟，这些工作需在雨季来临前完
成。
4、中耕培土：整个生长过程一般要求中耕2－3次，齐苗时结合间苗进行第一次深中
耕，以提高地温，促进发苗；团棵期进行第二次中耕和浅培土，以利多结薯；封垄前进行第
三次中耕培土，累积培土厚度为10－20cm，畦高35－40cm，培土能加厚结薯层次，有效提高
产量，同时避免薯块外露，降低品质。
5、病虫害防治：脱毒马铃薯大西洋主要病害为晚疫病和叶斑病，虫害主要是蚜虫和地
老虎。病害防治要以防为主，综合防治，通过各种农业措施降低田间湿度，出苗后20天起，每隔7－10天喷一次药，连喷3次以上。药剂选择上推荐使用代森锰锌、雷多米尔、农用链霉
素、杀毒矾等药剂，各种药济的使用一定要轮换使用，应密切关注病害的发生发展，及时采
取措施，最大限度降低病害造成的损失。防治虫害则在播种时每亩施入2kg呋喃丹，可起到
较好的防效。
七、收获贮藏： 大西洋成熟期的判断有以下两个方法，一是薯块表面出现密集网纹，二是茎叶出现枯黄。大西洋薯块采收前4－5天，要割去地上枝蔓，并选择在无雨天气采收，采收时应注意保证薯块的完整性，避免机械损伤。采收后的贮藏环境一定要避光、阴凉、通
风，切不可阳光直射。
马铃薯新品种高产栽培技术要点
随着种子事业的蓬勃发展，近年来很多种薯专业村、繁种户引进许多新品种，但是由于对新品种种植技术不甚了解，使其种薯生产缺苗断条，腐烂严重，收效甚微，效益平平。为使繁种户提高生产技术水平，创高产，增效益。我公司进行了实地跟踪服务，聘请专家到田间进行技术指导，最后总结出几项高产栽培技术要点，现推广到户，望种植新品种的农民朋友遵照执行，确保“高一优”农业生产的顺利发展。
近年来市场较流行的新品种有：早大白、鲁引
1、荷兰
15、中薯系列等这几个新品种，种植时必须遵循如下要点：
一、困种催芽，困种催芽是保证提早出苗，出好苗，苗齐苗壮的重要技术措施，应做到“不催好芽，不下地栽种”。催芽的方法很多，但一般常用的方法是在播前20天出窖，将种薯放到10-15℃环境中，薯堆高40-80cm。用黑布盖上，每5天左右翻动一次，使上下均匀，共2-3次，困种15天。翻动期间严格淘汰病薯，是防止不出苗的关键，待幼芽冒出时将种薯取出，平摊于光亮室内，使其均匀见光，达到白芽变成浓绿色、较粗壮、长度在0.5cm为宜，然后切块。注意必须先困种后切栽子。不许先切栽子，然后装入化肥袋困种，造成栽子未下田就腐烂。
二、切块技术，切块（割栽子）应考虑土壤墒情而定，一般每块不要低于20—25克；每个切块带有1-2个芽眼，切块应有相当厚度，多带薯肉，充分利用顶芽优势。顶芽要纵向切，侧芽要横向切，高产栽培应淘汰基芽（尾芽），以确保种薯高产。切块时，切刀应进行消毒处理，遇到病薯时要换刀在切，常用方法用3%高锰酸钾溶液或来苏儿浸刀，也可用盐水浸刀，边切边挑出病薯,严格防止病薯下田。
三、薯块处理，切完的薯块，切不可立即下田，应立即用敌克松或福美霜或甲霜灵锰锌加多菌灵拌种杀菌，促进薯块伤口愈合，干爽后才能下田，有条件的可用生产调节剂喷洒栽子，凉干成膜后，再下田播种，对种薯起到防止病菌感染浸入，促进植物生长，防病增产的作用。
四、播前选地选茬，马铃薯应选取肥力较好，土壤松软的沙壤土，排水良好的平川地或坡岗地。（PH值在5.6—6.5微酸性土壤为宜）周围30m距离内不能种植茄
科作物，特别是黄烟。糜谷茬、麦茬、葱蒜茬为最好，其次是玉米、豆茬，提倡种薯地应选南北垅向栽培，东西垅栽培一般减产二成左右。其它白菜茬、甜菜茬、均不能用来种马铃薯。必须注意有严重药害的地块不能种马铃薯，特别是用过氯嘧黄隆、豆乙合剂、咪唑乙烟酸（普施特）、氟磺胺草醚等的地块，二至四年不能种马铃薯，若种就要严重减产或绝产。
五、播种技术
（1）播期应选土壤深度10cm处，地温在8℃以上为宜，早熟品种最佳播期一般在5月8—15日，晚熟品种在5月1 日至5月5日。借鉴物候期作参考，一般选在地气起来后3至5天播种为宜，播种深以8cm为宜。施肥10-12cm深为宜，要种肥分离。
（2）播种时土壤湿度大时（手握成团），芽眼宜向上栽植，湿度中等 时芽眼向上向下均可，湿度过小时，芽眼宜向下栽植，特别干旱时应采取提前引沟，等雨后播种为宜。
（3）由于新品种薯块大，产量高，结薯集中的特点，要求深栽，浅埋，多次覆土，即要求栽在垅沟里，然后浅覆土镇压保墒，避免张口垅，以利提高地温，促进早出苗，当出齐苗后，再通过田间中耕作业而逐渐增加覆土层。垅的型状应是大方头型，切忌尖型垅，最好用小方犁覆土。
六、合理密植
合理密植是实现高产的中心环节，也是控制薯型、减少腐烂、提高种用价值的关键措施。其表现为苗匀、茎粗、薯多、个大，高产实验证明马铃薯种植适宜密度70cm垅距，株距18-20cm，亩保苗在4800—5300株为宜。
七、合理施肥
1、马铃薯是高产喜肥作物，合理增施腐熟的马粪和过圈肥等农家肥料，配合施用适量化肥，是大幅度提高马铃薯产量极为重要的技术措施，根据我县实际，每亩施优质农家肥2500kg，剩余部分结合化肥作种肥施用，常用配方两种：
①尿素5-7.5kg/667㎡，二铵15-20kg/667㎡，硫酸钾10-12.5kg/667㎡或马铃薯专用肥35至40kg/667㎡。
②最新高产施肥配方底肥每667㎡用：磁化肥7.5kg、尿素2.5kg、二铵2.5kg、生物钾1kg，活化磷1kg共计17kg，成本约42元/667㎡，播前地头混合搅拌均匀。
施肥方法：实行种肥分离，用精量播种机播肥，深度20cm，覆土8-10cm。常规施肥方法最好在播种前将氮肥和磷肥混合掺入腐熟的有机肥中，条施沟内，然后播种。
2、适时追肥与防治病害相结合
①在株高10cm需喷强力增产宝5ml加抗病毒1号3ml。加水15kg667㎡喷洒，要求四轮四档大油门作业（扎根）。
②株高20cm喷洒中华大肥王200g加300g尿素，加水15kg/667㎡叶片喷。（长秧）
③盛花期之后，应分三至五次用克露或乙磷铝或杀毒矾或甲霜灵锰锌或薯瘟消或薯病疫杀加多菌灵，按剂
量每隔七至十天对种薯田进行喷撒防治晚疫病。④开花后期，叶喷氨基酸微肥或用磷酸二氢钾促进结薯膨大以利增产增收。
八、耕作要求
提倡一耢、两铲、三趟栽培模式，早熟品种要早铲、早趟，花前耕作完毕，为防畸型薯的产生要求宽宽的垅台，窄窄的垄沟，深松35cm此项措施是决定产量高低，薯型好坏的一项重要措施，保持薯在垅下10cm为宜。
九、防病事项
1、防病要及时：晚疫病在大气湿度85%，温度22-24℃易发生流行，一般在开花初期·就要喷药防治，以防为主，防治结合。
2、为防止地上茎叶得病后出传入地下茎块中，造成种薯烂尾部，应及时拔出地上部秧子，这是防止烂薯的一项重要措施，时间一般在8月15日左右，植物初渐黄化时，双脚踩住将秧拔出后运出地外。
3、防病的同时要注意防虫害，用50%敌敌畏乳油1000倍液防治瓢虫。用40%氧化乐果2000倍液防治蚜虫。
十、贮藏办法
贮藏是马铃薯一种生理生化过程，马铃薯淀粉在10—16℃时稳定，0—10℃时淀粉转化成糖，同时发热，此时窖门应敞开。种薯贮存最佳温度是1—3℃，在4—13℃时是糖转化成淀粉阶段，此时最适合于淀粉加工，贮藏湿度85%最好；超过85%到93%时，窖易结顶，须用高温喷灯处理，窖内应放上温度湿度计。每天观察一次，发现特殊情况应及时处理。窖门为进气孔，同时应加出气孔，窖上立个出气炉筒，利用窖门和出气炉筒子的高低差，形成空气循环，窖内保持空气新鲜，种薯贮藏在窖内的高度为：早熟品种在窖内高度为1.3—1.6m，晚熟品种在窖内高度为1.7m，散积堆放时，窖内堆放应平展，避免形成气道，使空气易流通，抑制生芽。袋积应小于2.7m,总体观察贮藏量不能少于窖的2/3，太少易冻，太多易伤热，此十项新技术是确保马铃薯新品种种植成功
第五篇：园林植物组织培养技术测试题一
《园林植物组织培养技术》测试题
一、填空题（每空0.5分，共15分）
1.植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型。
2.糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的_________。而且还能___________
3.无病毒植物的鉴定常用的方法有__________法、___________法、__________法。4.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。
5.7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位。
6．植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养。
7．在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以__________mm、带__________个叶原基为好
8.在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__________，而与脱毒效果成__________。
9.去除植物病毒的主要方法是_______和_______两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。
10.进行植物组织培养最基本的前提条件是_______。
11.植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_______培养和_______培养。12.在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。
13.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_______℃，培养基的PH值范围是_______。
14.病毒在植物体中的分布规律为___________________________________________
二、不定项选择题（每题2分，共24分）1.培养室里的度一般保持在_________
A 30～40%；B 50～60%；C 70～80%；D 80～90% 2.下列不属于生长素类的植物激素是_________。A Kt；B IAA；C NAA；D IBA 3.影响培养基凝固程度因素有_________。
A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH 4.活性炭在组织培养中的作用有_________。
A吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化； C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长； D增加培养基中的养分；
5.下列具有细胞全能性的细胞是：_________。
A 成熟的老细胞；B 幼嫩的组织细胞；C 愈伤组织细胞D 番茄的受精合子 6.高温易被破坏分解的植物激素是_________。A IAA；B GA；C NAA；D Zt 7.脱落酸（ABA）需要用_________法灭菌。
A 灼烧灭菌；B 干热灭菌；C 过滤灭菌D高压湿热灭菌
8.同一植株下列_________部位病毒的含量最低。
9.环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分，湿度过高时，易引起棉塞长霉，A 叶片细胞；B 茎尖生长点细胞；C 茎节细胞；D 根尖生长点细胞 9.能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：A GA；B IAA；C NAA；D Zt
10.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是_________。A吸附有毒物质；
B减少褐变，防止玻璃化；
C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长； 11.植物组培时，培养温度一般控制在_________
A 23~27℃B 25+2℃C ＜30℃D ＞15℃ 12.在植物组织培养中，培养基的pH一般为_________ A 低于5.0B 5.6~6.5C 6.0~7.0D 7.0以上
三、判断题（每题1分，共10分）
1.一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。
2.一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。3.一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。4.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。5.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。6.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。
7.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，不易培养。
8.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。
造成污染。
10.杀死、消除或抑制部分微生物，使之不发生作用称为消毒
四、名词解释（每题3分，共12分）1.植物组织培养 2.脱分化 3.接种 4.外植体
五、简答题（共14分）
1.植物组织培养有哪些特点?（4分）
2.培养基的组成是什么（3分）；为什么要在配制培养基前配制母液？（3..植物组织培养的应用原理是什么?(3分)
4分）
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