HIV快速检测点实验室基本标准Microsoft Word 文档 [五篇]

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第一篇:HIV快速检测点实验室基本标准Microsoft Word 文档

成都新都西桥医院

HIV快速检测点实验室基本标准

(一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。

1、人员条件

至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。

2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。

3、仪器设备条件

配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、温度计、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

(二)艾滋病检测点。

1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。

2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。

3、设备条件:需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

成都新都西桥医院 2014年9月17日

第二篇:HIV快速检测实验室

HIV初筛实验室操作规范

(一)一、抽 血 标 准 操 作 规 程

1、适 用 范 围

需做血液检测的对象。

2、试 剂 与 材 料

碘酒、酒精棉、棉签、橡皮止血带、注射器(一次性采血器)、试管、止血棉。

3、操 作 步 骤

3.1 核对被检者姓名并标价试管;

3.2 请被检者入座,伸出手臂放在采血垫上;

3.3 用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头;

3.4 选择静脉,用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭(直径约6cm左右)消毒;

3.5 用酒精棉脱碘;

3.6 把一次性注射器(一次性采血器)打开,在采血部位穿刺静脉,抽取血液;

3.7 放松橡皮止血带,拔出针头,同时请被检者用止血棉压迫止血。

二、酒 精 棉 球 的 制 备 1.试剂与材料

无水乙醇(分析纯)、消毒蒸馏水若干、消毒量筒(1000ml)、消毒盛器 2.操作步骤

2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。

2.2 取165ml消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中,再加入一瓶500ml无水乙醇充分 混匀。2.3 把配好的75%酒精到入放有消毒棉的盛器中

三、样品的采集和处理.范围

本章规定了用于艾滋病病毒(HIV)检测的血清、浆和全血样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。.操作步骤.1 样品的采集和处理

艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下: 2.1.1血清样品采集和处理

2.1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1~2小时,待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min,吸出血请备用。

2.1.1.2如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。

2.1.2 抗凝血样品采集和处理

2.1.2.1用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽去静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。

2.1.2.2应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或柠檬酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。

2.1.2.3用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。(病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。)2.1.3 采集样品注意事项

2.1.3.1采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒有特殊要求)。

2.1.3.2采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应带双层手套。2.2 样品的保存

2.2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20度以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8度。

2.2.2用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80度。

2.2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。2.3 样品的运送

2.3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。2.3.2应采用WHO提出的三级包装系统

2.3.2.1 第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。

2.3.2.2 第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。

2.3.2.3 第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。

2.3.3 血清和血浆样品应在2~8度条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18~23度运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。2.3.4 运送感染性材料必须有记录。

2.3.5 如分离血浆仍有困难,可直接将抗凝血-20度以下冻存,采用冰壶冷藏运输,避免冻融。

2.3.6 特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快专递形式投寄,但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好,避免使用玻璃容器,以保证不会破碎和溢漏。2.4 样品的接收

2.4.1 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。

2.4.2 核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出,对样品管和盛器消毒,同时报告有关领导和专家。

2.4.3 检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受,则应将样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。

2.4.4 打开标本容器时要小心,以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能溅出,则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜,以防皮肤或粘膜污染。2.4.5 因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。2.4.6 接受样品时应填写样品接受单。

四、电 热 恒 温 水 浴 箱 操 作 规 程 1.概 述:

本电热恒温水浴箱主要用于科研单位、医疗单位及化验所检查化验病理血清等用。2.技术性能:

工作环境:常温常压条件下正常工作。

技术指标:温度调节范围:37℃~65℃

温度波动: ±

1℃

温度均匀性: ± 1℃ 3.使用方法:

3.1使用是必须加入温水,可缩短加热时间和节约用电。3.2打开电源开关,电源指示灯亮表示电源接通。

3.3旋转恒温控制器旋钮,加热指示灯亮表示电源接通,当温度表上的温度达到所需使用的温度时,将恒温控制器的旋钮调整在恒温指示灯忽亮忽熄点,待数分钟后即能自动恒温控制。

3.4恒温控制器的刻度,仅可作温度对照指示,并非温度指示刻度。4.点检程序:

4.1 为保证水浴箱温度的 准确性必须每日使用温度计测量水浴箱内水温,并做好日温度记录。

4.2每半年由设备科检测校正一次,且附有原始记录。5.注意事项:

5.1箱外壳必须有效接地。

5.2在未加水前,切勿开电源,以防止电热管内的电热丝烧坏。5.3非必要时,请勿拆开右册盖板,以利安全。

文县妇幼保健站

第三篇:HIV抗体快速检测程序

HIV抗体快速检测程序

目的:用于人对血清HIV抗体检测,用于HIV感染的辅助诊断。监测血液筛查。同时规范本检测点抗体快速检测的方法。保证检测质量和工作有序进行。

适用范围

适用于本艾滋病检测点筛查实验室、检测方法

8.1撕开HIV1+2检测板包装袋,取出检测板水平放置于实验台。8.2在S加样孔中滴2——3滴血清或血浆,不再加稀释液。8.3在15——30分钟内观察结果,超时需重新检测。

9、检测结果判断

9.1阳性:出现质控线和任意一条或两反应线均为阳性。9.2阴性:仅在质控区出现一条红线,则实验结果为阴性。9.3无效:无质控红线,或只有反应线,检测无效。须重新检测。样品同时标记编号及姓名保存,准确记录信息。质量控制

13.3检测样品不得溶血、混浊、污染。不符合优良标本应重新采样。13.4试剂如带质控品,起用前按要求做阳性、阴性质控对照,并做质控记录。

13.5每批试剂盒的购进、厂家、批号、效期及使用、保存数据均应有详细原始记录。

第四篇:艾滋病检测实验室基本标准

全国艾滋病检测工作管理办法

附:艾滋病检测实验室基本标准

二、艾滋病检测确证实验室

(一)人员条件。至少由5名医技人员组成,其中专职人员至少2名,具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。

(二)建筑条件。需有独立的血清学检测实验室,分为清洁区、半污染区和污染区,符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。

(三)仪器设备条件。配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。具有建立血清库和数据库的设备条件。

三、艾滋病检测筛查实验室

(一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。

1、人员条件:至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。

2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。

3、仪器设备条件:配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

(二)艾滋病检测点。

1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。

2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。

3、设备条件:需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

第五篇:艾滋病检测筛查实验室基本标准

艾滋病检测筛查实验室基本标准

(一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。

1、人员条件

至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。

2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。

3、仪器设备条件

配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

(二)艾滋病检测点。

1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。

2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。

3、设备条件:需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。艾滋病检测筛查实验室职能

包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市(地)级疾病预防控制中心;艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。

1、艾滋病筛查中心实验室职能。

(1)负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。

(2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。

(3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。

(4)负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导;协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作,给予技术支持和指导。

2、艾滋病筛查实验室职能。

(1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验,根据需要可开展其他艾滋病检测工作。

(2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。

(3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。

(4)对自愿咨询检测工作提供技术支持。

3、艾滋病检测点职能。

(1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。

(2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。

(3)定期汇总艾滋病检测资料,并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。

(4)开展艾滋病自愿咨询检测工作。艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室

资质认定评审标准 组织和管理

1.1实验室或其所在组织应有明确的法律地位,经省卫生厅批准设置,持有医疗机构执业许可证。

1.2管理层应负责质量管理体系的设计、实施、维持及改进,包括: a)为所有人员提供履行其职责所需的适当的权力和资源;

b)制定政策和程序,确保机密信息受到保护;

c)明确组织和管理机构以及实验室及其他相关机构的关系;

d)规定所有人员的职责权力和相互关系。1.3有艾滋病检测相关的管理体系文件。

1.4定期组织对质量管理体系运行情况进行检查,及时更新体系文件。2 人员条件

2.1实验室至少三名实验室技术人员,其中一名中级以上技术职称,均接受过上级专业技术培训及生物安全培训,并获得培训证书,由单位核发上岗证。2.2负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验。

2.3已取得证书的人员每两年必须接受一次复训,非卫生专业技术人员不得从事艾滋病检测工作。

2.4实验室人员分工及职责明确,样品采集与受理、检测、运送,仪器维护及生物安全质量管理均应分工及职责明确。

2.5实验室或所在组织应保存人员的资格、培训、技能和经历等技术档案及个人健康有关记录。3 设施、环境条件

3.1艾滋病实验室应为二级生物安全实验室 3.1.1应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计;

3.1.2每个实验室应有洗手池,洗手池应设置在靠近出口处;

3.1.3实验室门口处应有挂衣装置,个人便装与实验室工作服应分开放置; 3.1.4实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀; 3.1.5地面应防滑,不铺设地毯; 3.1.6实验台面应防水,耐腐蚀、耐热; 3.1.7实验室如有可开启的窗户,应设置纱窗;

3.1.8实验室内应保证工作照明且避免不必要的反光和强光;

3.1.9应有足够的存储空间摆放物品以方便使用,在实验室工作区域外应有供长期使用的存储空间,在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件; 3.2三区划分合理规范,清洁区、半污染区、污染区明显分开。

3.3相邻实验室部门之间如有不相容的业务活动,有效分隔或采取打电话防止交叉污染。

3.4实验室整体布局应保证办公区和实验区分离。4 仪器设备(含标准物质、试剂、实验消耗品)4.1实验室应必备仪器设备如下:

酶标仪、洗板机、加样器、恒温培养箱(水浴箱)、普通冰箱、离心机、生物安全柜、高压灭菌器、洗眼装置、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品。

4.2使用国家规定需要强检的仪器设备,必须经计量检定机构定期检定,非国家强检仪器设备,应建立自检/自校方法,定期进行校准、维护、消毒,确保其功能状态符合要求。

4.3保持影响检验性能和安全防护的每件设备的记录,至少包括:

a)设备的标识;b)设备的制造商名称、型号、序列号或其他唯一性识别;c)制造商的联系人和电话;d)到货日期及投入运行日期;e)接收时的状态;f)制造商的说明书或其存放处;g)证实设备可以使用的设备性能记录;h)已执行及计划进行的维护;i)设备的损坏、故障、改动或修理;j)预计更换日期;k)检定/自校/验证报告的证书及证明复件。4.4仪器设备的标识管理,实验室控制的需要校准或自检的设备应贴标识标明其状态,校准时间和下次校准时间。

4.5选购的检测试剂须经SFDA注册,并收集保存供应商或制造商的资质和溯源性文件。

4.6质控品正确保存、分装、使用应规范

4.6.1按一周实验用量分装、分类、标记、封口、-20℃冻存于非自动除霜冰箱中; 4.6.2外部对照血清不可反复冻融,一旦融化后应该存放28℃,供一周内使用。5

HIV抗体检测质量控制与管理

5.1实验室应设计内部质量控制体系以监控检验结果达到预期的质量标准。5.2应特别注意消除在样品处理、申请、检验和报告过程中的错误。5.3样品的采集、处理、接收、保存、运送规范

5.3.1样品采集和处理:按全国艾滋病检测技术规范第一章要求;

5.3.2样品接收与受理:统一收样,统一编号,接收样品时应填写样品接收单,包括受检者姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、检验结果、送检日期、报告日期、备注(必要时记录通信地址)等;

5.3.3样品保存:应放于-20℃,一周内进行检测的样品存放2-8℃,包括HIV阳性标本的类型、贮存量、贮存温度、贮存起始时间以及标本保管人姓名; 5.3.4样品运送:专人运送,采用WHO提出的三级包装系统,运送感染性材料应有记录;

5.3.5筛查阳性的样品,应填写HIV抗体复检化验单,送上级实验室进一步检测,并有送检记录及追踪结果。5.4出具的检测报告、原始记录规范

5.4.1原始记录:标明空白对照、阳性对照、阴性对照、外部对照以及待检样品的位置。注明试剂盒厂家、测定方法、批号、效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期;

5.4.2检测报告:应统一格式和唯一性标识;

5.4.3检测报告以打印的书面方式报告检测结果,不允许任何方式的涂改; 5.4.4检测报告应有检测者和授权签字人签名,检测报告结果在发放过程严格保密。

5.5建立质控图(L-J质控图或者即刻法质控图),正确记录,并应用于每批样品 检测结果判断。

5.5.1每一次实验必须使用外部对照质控血清,绘制质量控制图;

5.5.2当出现失控时,必须找出问题原因,找出解除故障的方法,并消除原因。5.6应参加有资质机构组织的能力验证或实验室间比对。

5.7实验室资料有专人保管,检测资料存档、备份、安全和保密,实验原始记录表、打印数据、免疫印迹试验的膜反应条带或其照片、检测记录表、标本登记、标本保存记录都应该妥善存档保存15年以上。5.8废弃物处理

5.8.1实验室废弃物须进行分类处理;从实验室出来的污染废物,应高压消毒后再进行处理。并做好相应的记录,一般包括消毒日期、数量、消毒方法、操作者等;5.8.2消毒后的废弃物转运处置应有明确规定和转运交接记录。6 实验室安全防护和职业暴露 6.1生物安全防护

6.1.1建立实验安全制度和个人防护、保健制度并执行;

6.1.2建立应对突发事件的措施和实验室意外事故处理措施并执行。6.2职业暴露后预防建立艾滋病的职业暴露后预防措施并执行。7

SOP的制定

7.1在建立质量管理体系时,除制定必要的管理体系文件外,还必须制定与艾滋病检测相关的SOP,SOP通常包括(但不限于)以下内容:

a)标题和编号; b)编写和修改日期; c)编写和修订人员姓名; d)方法、目的和应用范围;

e)SOP由各岗位工作人员起草,实验室主任审定,并应定期修订,修订应该在实验室主管人员(技术负责人)的领导下进行,每年至少1次。

7.2所有工作人员要在所从事工作的SOP文件上签名表示已经阅读并掌握了有关内容(或学习记录)。

7.3 SOP至少应包括如下内容:

a)样本的接收、登记和处理; b)检测方法和步骤; c)仪器的检定和使用维护; d)实验中的质量控制; e)结果的解释和报告; f)保密程序;

g)检测数据的记录和保存; h)实验室的清理和消毒; j)实验室安全防护。

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