实验二 Word排版技术[5篇范例]

第一篇：实验二 Word排版技术

实验二 Word的排版技术

一、实验目的

（1）掌握文本的选定、插入与删除、移动和复制、查找与替换等基本编辑技术（2）掌握文字格式、段落格式的设置（3）掌握页面设置和分栏等基本排版技术

二、实验内容与步骤

注：部分操作步骤后有相关的操作提示，操作提示只列出了部分常用的方法。

操作一

启动Word后，在编辑状态下输入样文1 所示的文档内容（时间关系，也可直接复制），编辑排版后的效果如下图1。

【样文1文档开始】

微机家庭普及化的日子已到来!微机在发达国家中已大量进入家庭。如美国100户家庭中已有微机30～40台，但离完全普及还有距离。其他国家，特别是发展中国家当然还会有相当时日。

微机的发展也有两种趋向，一种意见认为微机应充分发挥技术优势增强其功能使其用途更为广泛。另一种意见认为为家庭中使用的微机不能太复杂，应简化其功能，降低价格，使其以较快的速度广泛进入家庭。看来两种意见各有道理，可能会同时发展。

近年有些公司提出网络计算机的设想，即把微机本身大大简化，大量的功能通过网络来提供，这样可降低本身造价，这与前述趋向有所不同，至今也还有争议。

【样文1文档结束】

图1 按要求完成下列操作：（1））设置A4（210mm×297mm）纸张大小，左右边距设置为2.5厘米，上下边距（即页眉页脚）2.2厘米，其余页面设置的参数不必修改。（通过“文件”|“页面设置”）

（2）以WD3.doc为文件名保存在E盘下以自己学号姓名命名的文件夹中。将文中所有“微机”替换为“微型计算机”。（通过“编辑”菜单|“查找”或“替换”）

（3）将标题(即第一段)设置为小二号空心黑体、红色、居中，添加段落黄色底纹，并设置图案样式为纯色100％，标题段后间距为16磅。（通过“格式”菜单|“字体”、“格式”|“边框和底纹”和“格式”|“段落”）

（4）将正文第一段复制到文档的最后面，成为正文第四段。

（5）将正文第一段文字的格式改为：华文行楷、小四号，加下划线（双波浪线）

（“格式”菜单|“字体”）

（6）用格式刷将正文第一段的格式复制到正文第四段。

（7）将正文各段落左右各缩进1厘米，首行缩进0.8厘米，1.5倍行距，段前间距16磅。（通过“格式”菜单|“段落”）（8）对本文档的页面添加蓝色边框。(通过“格式”菜单|“边框和底纹”|“页面边框”)（9）将正文第二段等分两栏，栏间距为0.6厘米，栏间加分隔线。（通过“格式”菜单|“分栏”）

（10）将正文第一段字符设置每行30字。（首先在该段段首段尾插入连续分节符，再通过“文件”|“页面设置”|“文档网格”）

（11）在页面底端中间插入页码，数字格式选用“Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ„”形式，且“首页显示页码”。(“插入”菜单|“页码”)（12）在页眉插入文件名。（通过“视图”|“页眉和页脚”）（13）最后保存文档。（最好边做边保存）

操作二

启动Word后，在编辑状态下输入样文2所示的文档内容（时间关系，也可直接复制），编辑排版后的效果如下图2。

【样文2文档开始】

打开文件或文件夹

打开我的电脑，然后双击包含该文件的驱动器。

双击要打开的文件或文件夹。

注意

要打开“我的电脑”，请双击桌面上的“我的电脑”图标。

要使用“Windows 资源管理器”打开文件或文件夹，请单击“开始”，把鼠标指向“程序”，再指向“附件”，单击“Windows 资源管理器”，然后双击要打开的文件或文件夹。

如果要打开的文件没有和特定的程序关联，可以右键单击该文件，单击“打开方式”，然后通过选择程序名称来选择用以打开该文件的程序。

可以使用“查看”菜单上的命令更改显示文件的方式。也可以使用“文件夹选项”对话框的“查看”选项卡更改文件和文件夹设置。

【样文2文档结束】

图2 按要求完成下列操作：

（1）设置页面纸型为16开，指定每页35行，每行30字符。（通过“文件”|“页面设置”）

（2）以WD4.doc为文件名保存在E盘下以自己学号姓名命名的文件夹中。（3）将标题，即第一段落居中，字体设置成“楷体_GB2321”、“三号”、蓝色，段后距离0.5行，底下加着重号。（通过“格式”菜单|“字体”、“格式”|“段落”）（4）修改“正文”样式，使中文文字字体为“黑体”，英文字体为“Arial”，大小为“小四号”，并将“正文”样式应用于除标题外的所有段落。（通过“格式”菜单|“样式和格式”）

（5）将正文第一、二段设置项目编号：1.2.。（通过“格式”菜单|“项目符号和编号”|“编号”）

（6）对倒数4个自然段设置为左对齐，并设置相应的项目符号：。（通过“格式”菜单|“项目符号和编号”|“项目符号”选项卡“中的“自定义”按钮）

（7）给正文第3段添加蓝色边框和黄色底纹。（通过 “格式”|“边框和底纹”）（8）在页面底端中间插入页码，首页不显示页码，且第2页页码从1开始。（大家可用Ctrl+Enter快捷健多分几页，通过“视图”|“页眉和页脚”）

（9）在奇页的页眉设置为“文本编辑”，偶页的页眉设置为“表格操作”，文字为居中对齐方式。（大家可用Ctrl+Enter快捷健多分几页，通过“视图”|“页眉和页脚”）（10）最后保存文档。操作四：将学号姓名文件夹上传 操作五：课后作业

学习指导书p103面：实验一 Word XP文档的基本操作与排版

样文如下： 什么是计算机软件？

软件开发的过程就是人们使用各种电脑语言将人们关心的现实世界映射到电脑世界的过程。现在的电脑的数学理论基础是有电脑的开山鼻祖，大名鼎鼎的图灵于1937年提出的图灵机模型。随后不到十年，电脑就诞生了。我们都知道，他当时的主要任务之一就是用于导弹弹道轨迹的计算。当时的软件开发与现在的大不相同。为了算一道题，要有人事先把完成加减乘除等各类运算的部件像搭积木那样搭起来，如果换一道题目，则要把这些部件分解开来，根据新的要求重新搭建，效率低 „„

第二篇：挑战书二排

挑战书

亲爱的一排战友们：

为了圆满完成这次“百日安全无事故”活动，我们二排谨向你们一排老大哥提出友谊的挑战。我们具体的条件是：

一、提高认识，不断端正态度

这次活动是一次规格较高、难度较大、针对性较强的，也是我支队贯彻武警部队依法从严治警战略方针的具体体现。

我们应做到认识充分，态度端正，从实际出发，自觉练思想、练意志、练作风、练体魄，努力增强高技术条件下组织管理能力、应急救援能力和以现有装备战胜自然灾害和季节性事故的能力，以积极的态度，坚强的斗志，顽强的作风。迎接这次“百日安全无事故”活动的严峻挑战。

二、从难从严，高标准完成规定的各项任务

我们二排担任着驾驶任务，今年中队以爆破任务主，车辆使用频繁，运输爆破器材多，这次活动是对我们贯彻新时期施工任务效果的一个实际检验。我们要把平时练就的本领真正体现在施工一线上，抓安全，讲安全争取做到:人员不失控，车辆无事故，爆破油料无丢失严管控等安全率为100％。

三、以身作则，充分发挥骨干表率作用

这次活动内容也是是对我们全体官兵特别是各级骨干能否发挥表率作用的一次检验。我排班排骨干要坚持以身作则，当好排头兵、狠抓安全中经常性思想工作和经常性管理工作的落实，保证这次的活动圆满完成，提高战友们安全意识;党员、骨干要发挥楷模作用，认真履行各自职责做到吃苦在前，享受在后，积极宣传群众，带领群众，帮助群众;团员青年要积极要求进步。争取将安全无事故活动做到每个人心里，将安全意识做到细微持久，一年365天 天天都要抓、一天24小时，时时都要想。

四、学习雷锋，积极为人民群众多做好事

整条施工线中，我们要途经多个村镇乡村，还要经常和民工打交道 为此在严格执行群众纪律的同时，要不失时机地宣传党的路线、方针政策，大力开展“学雷锋、树新风”活动，做到“走一路红一线，住一地红一片”，当好社会主义精神文明建设的排头兵。

同志们，对这次的“百日安全无事故活动” 让我们振奋精神，士气高昂地迎接考验吧！

此致

敬礼

二排全体战友

2010年9月5日

第三篇：实验 防火墙技术实验

实验九

防火墙技术实验

1、实验目的

防火墙是网络安全的第一道防线，按防火墙的应用部署位置分类，可以分为边界防火墙、个人防火墙和分布式防火墙三类。通过实验，使学生了解各种不同类型防火墙的特点，掌握个人防火墙的工作原理和规则设置方法，掌握根据业务需求制定防火墙策略的方法。

2、题目描述

根据不同的业务需求制定天网防火墙策略，并制定、测试相应的防火墙的规则等。

3、实验要求

基本要求了解各种不同类型防火墙的特点，掌握个人防火墙的工作原理和规则设置方法，掌握根据业务需求制定防火墙策略的方法。提高要求能够使用WindowsDDK开发防火墙。

4、相关知识

1)防火墙的基本原理防火墙（firewall）是一种形象的说法，本是中世纪的一种安全防务：在城堡周围挖掘一道深深的壕沟，进入城堡的人都要经过一个吊桥，吊桥的看守检查每一个来往的行人。对于网络，采用了类似的处理方法，它是一种由计算机硬件和软件的组合，使互联网与内部网之间建立起一个安全网关(securitygateway),也就是一个电子吊桥，从而保护内部网免受非法用户的侵入，它其实就是一个把互联网与内部网（通常指局域网或城域网）隔开的屏障。它决定了哪些内部服务可以被外界访问、可以被哪些人访问，以及哪些外部服务可以被内部人员访问。防火墙必须只允许授权的数据通过，而且防火墙本身也必须能够免于渗透。典型的网络防火墙如下所示。

防火墙也并不能防止内部人员的蓄意破坏和对内部服务器的攻击，但是，这种攻击比较容易发现和察觉，危害性也比较小，这一般是用公司内部的规则或者给用户不同的权限来控制。

2)防火墙的分类前市场的防火墙产品主要分类如下：

（1）从软、硬件形式上软件防火墙和硬件防火墙以及芯片级防火墙。（2）从防火墙技术“包过滤型”和“应用代理型”两大类。

（3）从防火墙结构单一主机防火墙、路由器集成式防火墙和分布式防火墙三种。（4）按防火墙的应用部署位置边界防火墙、个人防火墙和混合防火墙三大类。（5）按防火墙性能百兆级防火墙和千兆级防火墙两类。3）防火墙的基本规则

■一切未被允许的就是禁止的(No规则)。■一切未被禁止的就是允许的(Yes规则)。

很多防火墙(例如SunScreenEFS、CiscoIOs、FW-1)以顺序方式检查信息包，当防火墙接收到一个信息包时，它先与第一条规则相比较,然后是第二条、第三条„„当它发现一条匹配规则时，就停止检查并应用那条规则。

4）防火墙自身的缺陷和不足

■限制有用的网络服务。防火墙为了提高被保护网络的安全性，限制或关闭了很多有用但存在安全缺陷的网络服务。

■无法防护内部网络用户的攻击。目前防火墙只提供对外部网络用户攻击的防护，对来自内部网络用户的攻击只能依靠内部网络主机系统的安全性。■Internet防火墙无法防范通过防火墙以外的其他途径的攻击。例如，在一个被保护的网络上有一个没有限制的拨出存在，内部网络上的用户就可以直接通过SLIP或PPP联接进入Internet。

■对用户不完全透明，可能带来传输延迟、瓶颈及单点失效。■Internet防火墙也不能完全防止传送已感染病毒的软件或文件。

■防火墙无法防范数据驱动型的攻击。数据驱动型的攻击从表面上看是无害的数据被邮寄或拷贝到Internet主机上，但一旦执行就开始攻击。例如，一个数据型攻击可能导致主机修改与安全相关的文件，使得入侵者很容易获得对系统的访问权。

■不能防备新的网络安全问题。防火墙是一种被动式的防护手段，它只能对现在已知的网络威胁起作用。

5、实验设备

主流配置PC，安装有windows 2000 SP4操作系统，网络环境，天网防火墙个人版。

6、实验步骤

1）从指导老师处得到天网防火墙个人版软件。

2）天网防火墙个人版的安装。按照安装提示完成安装，并重启后系统。

3）系统设置。在防火墙的控制面板中点击“系统设置”按钮，即可展开防火墙系统设置面板。

天网个人版防火墙系统设置界面如下。

防火墙自定义规则重置：占击该按钮，防火墙将弹出窗口，如下：

如果确定，天网防火墙将会把防火墙的安全规则全部恢复为初始设置，你对安全规则的修改和加入的规则将会全部被清除掉。

防火墙设置向导：为了便于用户合理的设置防火墙，天网防火墙个人版专门为用户设计了防火墙设置向导。用户可以跟随它一步一步完成天网防火墙的合理设置。

应用程序权限设置：勾选了该选项之后，所有的应用程序对网络的访问都默认为通行不拦截。这适合在某些特殊情况下，不需要对所有访问网络的应用程序都做审核的时候。（譬如在运行某些游戏程序的时候）

局域网地址：设置在局域网内的地址。防火墙将会以这个地址来区分局域网或者是INTERNET 的IP来源。日志保存：选中每次退出防火墙时自动保存日志，当你退出防火墙的保护时，天网防火墙将会把当日的日志记录自动保存到SkyNet/FireWall/log文件下，打开文件夹便可查看当日的日志记录。

4）安全级别设置天网个人版防火墙的缺省安全级别分为低、中、高三个等级，默认的安全等级为中级。了解安全级别的说明请查看防火墙帮助文件。为了了解规则的设置等情况，我们选择自定义安全级别。

然后点击左边的将打开自定义的IP规则。

从中可以看出，规则的先后顺序为IP规则、ICMP规则、IGMP规则、TCP规则和UDP规则。自定义IP规则的工具条如下，可以使用这些工具完成规则的增加、修改、删除、保存、调整、导入导出操作。重要：规则增加、修改、删除等操作后一定要点击保存图标进行保存，否则无效。

单击规则前面的，可使该规则不起作用，且其形状变为。

5）修改规则双击该规则，或者点击工具条上的修改按钮可以打开该规则的修改窗体。然后按照需求对各部分进行修改。

（1）首先输入规则的“名称”和“说明”，以便于查找和阅读。（2）然后，选择该规则是对进入的数据包还是输出的数据包有效。

（3）“对方的IP地址”，用于确定选择数据包从那里来或是去哪里，这里有几点说明： ■“任何地址”是指数据包从任何地方来，都适合本规则，■“局域网网络地址”是指数据包来自和发向局域网，■“指定地址”是你可以自己输入一个地址，“指定的网络地址”是你可以自己输入一个网络和掩码。

（4）除了录入选择上面内容，还要录入该规则所对应的协议，其中：

■‘IP’协议不用填写内容，注意，如果你录入了IP协议的规则，一点要保证IP协议规则的最后一条的内容是：“对方地址：任何地址；动作：继续下一规则”。

■‘TCP’协议要填入本机的端口范围和对方的端口范围，如果只是指定一个端口，那么可以在起始端口处录入该端口，结束处，录入同样的端口。如果不想指定任何端口，只要在起始端口都录入0。TCP标志比较复杂，你可以查阅其他资料，如果你不选择任何标志，那么将不会对标志作检查。

■‘ICMP’规则要填入类型和代码。如果输入255，表示任何类型和代码都符合本规则。■‘IGMP’不用填写内容。

（5）当一个数据包满足上面的条件时，你就可以对该数据包采取行动了： ■‘通行’指让该数据包畅通无阻的进入或出去。■拦截’指让该数据包无法进入你的机器

■继续下一规则’指不对该数据包作任何处理，由该规则的下一条同协议规则来决定对该包的处理。（6）在执行这些规则的同时，还可以定义是否记录这次规则的处理和这次规则的处理的数据包的主要内容，并用右下脚的“天网防火墙个人版”图标是否闪烁来“警告”，或发出声音提示。

6）新增规则点击工具条的新增规则按钮可以新增一条规则，并弹出该规则的编辑界面。比如新增一条允许

访问WWW端口的规则，可以按如下方法设置。设置完成后点击“确定”，并点击工具条的保存按钮。

7）普通应用程序规则设置天网防火墙个人版增加对应用程序数据传输封包进行底层分析拦截功能，它可以控制应用程序发送和接收数据传输包的类型、通讯端口，并且决定拦截还是通过。在天网防火墙个人版打开的情况下，首次激活的任何应用程序只要有通讯传输数据包发送和接收存在，都会被天网防火墙个人版先截获分析，并弹出窗口，询问你是通过还是禁止。这时可以根据需要来决定是否允许应用程序访问网络。如果不选中“该程序以后按照这次的操作运行”，那么天网防火墙个人版在以后会继续截获该应用程序的数据传输数据包，并且弹出警告窗口。如果选中“该程序以后按照这次的操作运行”选项，该应用程序将自加入到应用程序列表中，可以通过应用程序设置来设置更为详尽的数据传输封包过滤方式。

8）高级应用程序规则设置单击

可以打开详细的应用程序规则设置。单击应用程序规则面板中对应每一条应用程序规则都有几个按钮

点击“选项”即可激活应用程序规则高级设置页面。

“该应用程序可以”窗口是设定该应用程序可以做的动作。其中：是指此应用程序进程可以向外发出连接请求，通常是用于各种客户端软件。则是指此程序可以在本机打开监听的端口来提供网络服务，这通常用于各种服务器端程序中。

9）根据以上功能，分别完成如下不同需求的防火墙规则设置并进行测试。

需求1：ICMP规则允许ping进来，其它禁止，TCP规则允许访问本机的WWW服务和主动模式的FTP服务，其它禁止，UDP禁止。需求2：ICMP规则允许ping出去，其它禁止，TCP规则禁止所有连接本机，允许IE访问Internet的80端口，UDP规则允许DNS解析，其它进出UDP报文禁止。

7、实验思考

1）根据你所了解的网络安全事件，你认为天网防火墙不具备的功能有哪些？ 2）防火墙是不是绝对的安全？攻击防火墙系统的手段有哪些？

第四篇：《生物制药技术》实验

《生物制药技术》实验指导

实验一 金霉素链霉菌培养基的制备（验证型）

实验目的：

1、学会培养基的配制

2、掌握灭菌方法。实验原理：

金霉素链霉菌（Streptomyces aureofaciens）亦称“金色链霉菌”，放线菌门(Actinobacteria)，放线菌纲(Actinobacteria)，放线菌目(Actinomycetales)，链霉菌科(Streptomycetaceae)，链霉菌属(Streptomyces)。在固体培养基上产生金色色素，故名。其菌落为草帽型, 菌落直径一般为3～5毫米, 表面较平坦, 中间有隆起。菌落开始为白色，长孢子后变青色。在显微镜下可以看到短杆状的菌丝。抗菌素工业上用以生产金霉素。

放线菌是一类介于细菌与真菌之间的单细胞微生物。放线菌在土壤中分布最多，大多数生活在含水量较低、有机质丰富和微碱性的土壤中。多数情况下，泥土中散发出的“泥腥味”就是由放线菌中链霉菌产生的土腥素造成的。放线菌大都好氧，属于化能异养，菌丝纤细，分枝，常从一个中心向周围辐射生长。因其生长具辐射状，故名放线菌。放线菌能像真菌那样形成分枝菌丝，并在菌丝末端产生外生的分生孢子，有些种类甚至形成孢子囊，因而曾被误认是真菌。但其菌落较小而致密，不易挑取。不少菌种在医药、农业和工业上广泛应用，可产生抗菌素，现已发现和分离出的由放线菌产生的抗生素多达4 000多种，其中，有50多种抗生素已经广泛地得到应用，如链霉素、红霉素、土霉素、四环素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于临床治疗人的多种疾病；有些可生产蛋白酶、葡萄糖异构酶；有的用于农业生产，如灭瘟素、井冈霉素、庆丰霉素等。

四环素类抗生素是由链霉菌生产或经半合成制取的一类广谱抗生素。抗菌谱极广，包括革兰氏阳性和阴性菌、立克次体、衣原体、支原体和螺旋体。品种主要包括金霉素、四环素和土霉素。器材：

1ml移液枪；铝锅；电炉 试剂：

NaBr母液（100 g／L）KCl母液（100 g／L）

M-促进剂母液（2.5 g／L）实验步骤： 1．种子培养基

种子培养基(g／L)：可溶性淀粉40，黄豆饼粉20，酵母粉5，蛋白胨5，CaCO3 4，(NH4)2SO4 3，MgSO4·7H2O 0.25，KH2PO4 0.25。

先称取黄豆饼粉20g，单独煮沸10分钟，加入少量凉水降温，4层纱布压榨取汁，与其它称好的各成分混合，定容至1L。

每50ml分装到250ml三角瓶中，每组2瓶。2．定向发酵培养基

发酵培养基(g／L)：可溶性淀粉100，黄豆饼粉40，蛋白胨15，CaCO3 5，酵母粉2.5，(NH4)2SO4 3，MgSO4·7H2O 0.25，α—淀粉酶0.1。

配制方法同种子培养基，配好后分装到500ml三角瓶中，每瓶100ml，分别加入如下成分，比较它们对四环素产量的影响：

(1)对照(不加其他成分)；

(2)加入NaBr母液至终浓度为2g／L；(3)加入KCl母液至终浓度为2g／L；

(4)加入NaBr母液至终浓度为2g／L及M-促进剂母液至终浓度为0.025g／L。每两组配一套。3．灭菌

将封好口的培养基121℃灭菌30min。同时灭1ml 剪口移液枪头、1.5mL离心管。（总过程：称量——溶化——定容——分装——封口——灭菌）注意事项：

1．黄豆饼粉煮沸取汁。

2．培养基封口最好用8层纱布或棉花塞，最好不用橡胶塞，以增加透气性。3．灭菌时锅内要补足水分。由于灭菌锅较大，升温排气一定要充分（10min）。补充阅读：

工业发酵中利用生产菌发酵得出最终产物是一个逐级放大的过程，各个不同的阶段对于营养成分的要求也各有特点，根据发酵不同阶段的要求，培养基可分为孢子培养基、种子培养基和发酵培养基三种。

孢子培养基孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多优质的孢子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是：第一，营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖－硝酸盐－其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌丝而不长孢子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三，要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有：麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少，疏松、表面积大，所以是较好孢子培养基。

种子培养基种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌体长得粗壮，成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达到较高的溶解氧，供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH，其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用，有利于菌体迅速生长，所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。最后一级的种子培养基的成分最好能较接近发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，快速生长。

发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。

实验二 金霉素链霉菌的定向发酵（验证型）

实验目的：

1、学习和掌握无菌操作技术。

2、掌握定向发酵四环素的原理。实验原理：

定向发酵是指通过改变培养基组分(加入某些物质)改变微生物代谢途径，使发酵按主观要求产生较多的产物。

金霉素、四环素和土霉素，它们的化学结构极为相似：

R1 R2 Cl H H OH H H

金霉菌原是产生金霉素（Chlortetracycline）的菌种，但因金霉素比四环素只多一个氯离子，所以只要在发酵液中加入某些物质，阻止氯离子进入四环素分子，从而使菌种产生较多的四环素。另外，金色链霉菌在30℃以下时，合成金霉素的能力较强；当温度超过35℃时则只合成四环素。

本实验中，利用溴离子在生物合成过程中对氯离子有竞争性抑制剂作用的原理，以及加入2-硫醇基苯并噻唑(即M—促进剂，分子式：C7H5NS2，通常作为橡胶硫化促进剂)抑制氯化酶的作用，从而增加四环素的产量。材料和试剂：

金霉素链霉菌：购于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（菌种保藏号：CGMCC4.1043；订单号20111133 550元）。实验步骤：

前期准备工作：配制斜面培养基（可选，1号培养基由菌种保藏中心提供）

1、麸皮36.0 g，K2HPO4 0.2 g，MgSO4·7H2O 0.1 g，（NH4）2HPO4 3 g，琼脂 15～20 g，定容至1L，pH 7。

2、可溶性淀粉20g，KN O3 1g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl

0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，定容至1L，pH 7.2~7.5。

1、制备斜面孢子：将保藏的菌种的比例接种于液体培养基中（不加琼脂的斜面培养基），28℃下200 r/min振荡培养，将活化1d后的金霉素链霉菌种接入斜面培养基，28℃培养5～7天，金霉素 土霉素 四环素

待孢子长成灰色，于4℃冰箱中保藏。

2、种子培养：在斜面上用接种铲挑取1cm2左右生长良好的菌体接入装有50ml四环素种子培养基的250ml锥形瓶中，230 r/min、28℃下振荡培养20～24h。

3、发酵培养：以剪口移液枪头取10 ml种子液接入装有100ml发酵培养液的500ml锥形瓶中（注意：同一处理组用同一瓶种子液接种），230 r/min、28℃下振荡培养5 d。用于后面的测定效价和薄层层析实验。

四环素的提取和精制（选作）

一、实验目的 ．掌握沉淀法精制四环素的原理、方法和基本操作技术。2 ．熟悉pH 的控制与产量、质最的关系。

二、实验原理

四环素为两性化合物，其等电点为5.4。当溶液pH 等于等电点时，四环素呈游离碱形式，从水溶液中沉淀出来。利用四环素的这一性质，可将四环素从发酵液中提取出来。

在连续结晶过程中，pH 的高低对产量、质量都有一定的影响。四环素的等电点为5.4 , 在pH 4.5~7.5 之间，游离碱在水中的溶解度乎不变。若pH 控制在接近等电点时，沉淀结品虽然比较完全，收率也高，但此时会有大量杂质同时析出，影响产品的色泽和质量；若pH控制得较低一些，对提高产品质量虽有好处，但沉淀结晶不够完全，收率会低些，影响产量。因此，在选择沉淀结晶pH 时，就必须同时考虑到产量、质量的效果。在正常情况下，工艺上控制pH4.8左右。若沉淀结晶质量较差，pH可控制得稍低些，有利于结晶质量的改善，但不能低于4.5，否则收率低，影响产量。

四环素的提取和精制分酸化、纯化、过滤、结晶和淋洗五个步骤。

(1)酸化加入草酸，使积聚在菌丝体内的四环素尽可能多地成为可溶性盐，而转入液相。四环素在酸性条件下较隐定，且草酸与钙离子反应生成不溶性的草酸钙，析出的草酸钙能促进蛋白质的凝固，提高滤液的纯度和过滤速度。

(2）纯化 纯化剂（黄血盐、硫酸锌和硼砂）与草酸一起混合作用，可以除去发酵液中大量酸溶性蛋白质、铁离子和其他多种离子色素以及其他杂质，从而使滤液纯净，并减少发酵液的粘度，利于过滤。其中纯化剂黄血盐能与发酵液中的铁离子作用，生成普鲁士盐而除去铁离子。

(3）过滤 通过过滤，使四环素溶液与菌丝体以及其他杂质分离，再经过复滤、精滤，进一步提高滤液质址，得到澄清的滤液。

(4)结晶

将滤液的pH调节到等电点，在较低温度下析出纯净的四环素。

(5）淋洗 虽然发酵液经酸化后大部分四环素已溶入溶液中，但仍有部分残存在菌渣中，且过滤不可能十分彻底。所以用酸水淋洗，以提高收率。

三、实验试剂及仪器 1．试剂

300 g/L草酸溶液、200 g/L 黄血酸钾溶液、200 g/L 硫酸锌溶液、200 g/L 硼砂溶液、浓氮水、3 g/L草酸溶液。2．仪器

1000 mL 烧杯、搅拌器、布氏漏斗、抽滤瓶、滤纸、量筒、pH 试纸、酸度计、温度计、水泵、表面皿。

四、实验步骤 1．酸化

取600ml 四环素发酵液，置装有机械搅拌的1000 mL烧杯中，开始搅拌，待发酵液温度降至20 ℃ 以下时，缓缓加入草酸溶液，草酸加入量为27～35g/L，并不时测定发酵液的pH。当发酵液pH为1.7~1.8 时（用酸度计测定），酸化完毕。2．纯化

在酸化反应的烧坏中，按酸化的发酵液净体积，搅拌下依次缓慢加入纯化剂（黄血酸钾溶液、硫酸锌溶液、硼砂溶液），每种溶液终浓度均为2 g/L，加入时间间隔15min，以便作用完全。3．过滤

将布氏漏斗装于抽滤瓶上，铺好滤纸，开启水泵，用少量水将滤纸湿润，并使滤纸紧贴布氏漏斗。将纯化后的溶液缓缓倒入布氏漏斗，过滤滤液应完全澄清，否则必须重新过滤，直到完全澄清。4.结晶

将抽滤瓶中的滤液倒入装有机械搅拌的1000 mL烧杯中，开动搅拌，并用水或冰水冷却。待滤液温度冷至5 ～ 7 ℃ 时，徐徐加入经过滤的浓氨水，并随时用pH 试纸测定溶液的pH，当pH 达到4.6 ～4.8 时（用酸度计测定），停止加入氨水，并继续搅拌2 h，使结晶完全。

装好布氏漏斗后，将上述液缓缓倒人布氏漏斗，过滤。结晶液全部倒入后，抽干。用35～45 ℃ 的热水充分洗涤粗碱3 次，抽干，再用0.3 ％草酸洗涤，抽干。

五、注意事项

1．纯化搅拌时间不应少于2h，溶液温度保持在15 ℃ 以下。2．pH 要调准确。

六、结果与讨论 ．计算四环素的得率。．讨论影响四环素得率和纯度的因素。

实验三 四环素、金霉素的薄层层析鉴定（验证型）

实验目的：

掌握薄层层析的原理，四环素族抗生素的定性鉴定方法。实验原理：

层析（色谱，chromatograpby）是相当重要、且相当常见的一种技术，在把微细分散的固体或是附着于固体表面的液体作为固定相，把液体（与上述液体不相混合的）或气体作为移动相的系统中（根据移动相种类的不同，分为液相层析和气相层析二种），使试料混合物中的各成分边保持向两相分布的平衡状态边移动，利用各成分对固定相亲和力不同所引起的移动速度差，将它们彼此分离开的定性与定量分析方法，称为层析，亦称色谱法。用作固定相的有硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等，或是在硅藻土和纤维素那样的无活性的载体上附着适当的液体。将作为固定相的微细粉末状物质装入细长形圆筒中进行的层析称为柱层析（column chromatography），在玻璃板上涂上一层薄而均的支持物（硅胶、纤维素和淀粉等）作为固定相的称为薄层层析（thin layer chromatography），或者用滤纸作为固定相的纸上层析。层析根据固定相与溶质（试料）间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型层析等类型。但这并不是很严格的，有时常见到其中间类型。此外，近来 5 也应用亲和层析，即将与基质类似的化合物（通常为共价键）结合到固定相上，再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。

分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。一般是水相和有机溶剂相。常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等亲水物质，这些物质能储留相当量的水。被分离物质在两相中都能溶解，但分配系数不同，展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。一种溶质在两种互不混溶的溶剂系统中分配时，在一定温度下达到平衡后，溶质在固定相和流动相溶剂中的浓度之比为一常数，称为分配系数。当欲被分离的各种物质在固定相和流动相中的分配系数不同时，它们就能被分离开。分配系数大的移动快（阻力小）。

薄层层析是以薄层材料为支持物，在密闭容器中，样品在其上展开。当斑点不易为肉眼观察时，可利用适当的显色剂，或通过紫外灯下产生荧光的方法进行观察。通过这种展开操作，各成分呈斑点状移动到各自的位置上，再根据Rf值的测定进行鉴定。薄层色谱法具有分离与鉴定的双重功能，通过薄层图谱与对照品的图谱相比较，除了能鉴出有效成分或特征成分外，还以完整的色谱图作为一个整体对制剂加以鉴别。薄层色谱分析法由于简便、快速，能有效地、直观地反映药品地真实性、稳定性，现已成为药物制剂的鉴别和质量控制的行之有效的方法之一。薄层层析是鉴别抗生素的方法之一，层析后进行显色，并绘制层析图谱，根据层析图谱对抗生素进行鉴定。本实验以四环素、金霉素标准品溶液作为对照对发酵液进行鉴定。

仪器和设备：

1.玻璃层析缸

2.层析板（薄层层析硅胶烟台芝罘区黄务硅胶开发实验厂有售）3.毛细玻璃管或微量注射器 4.紫外投射仪 试剂：

四环素、金霉素标准品 用0.01M盐酸溶解定容，4℃冰箱保存（可使用7天）。展开剂：正丁醇：醋酸：水(4∶1∶5)2L。凡士林 实验步骤：

1．层析板处理

层析板105℃烘烤过夜，均匀喷上0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PH4.5)，于空气中晾干、备用。

2．点样

选取两种定向发酵液加草酸酸化至pH为1.5～2.0，取上清约l.2 ml于1.5ml离心管中，10000 rpm，5min，备用。在距层析板底边2.5~3 cm起始线上(用铅笔划线，做出点样点记号)，用毛细玻璃管在薄层层析板上点四环素标准品和金霉素标准品溶液3次，发酵液上清点8～10次，点样点不大于0.4cm，每次都要吹干后再点。（一般效价在1000u／ml以上点3次，500～1000u／ml点4次，200～500u／ml点5次）。剩余的发酵液上清于4℃冰箱保存。

3.层析（展开）

用正丁醇：醋酸：水(4∶1∶5)的上相作展开剂。层析前需预先用展开剂预平衡层析缸，可在缸中倒入2cm高的展开剂，密闭，一般保持15－30分钟。然后将层析板置于盛有展开剂的层析缸中，在室温下展层6～8h（与温度有关）。封口不严可涂抹凡士林。

4．荧光显影

待溶剂前沿展至板的一半以上时将层析板取出，标出溶剂前沿，于通风橱中晾干，用氨水熏数秒钟后即可在紫外灯下显影，画出黄色斑点，分别算出Rf值。（四环素标准品慢和金霉素标准品快）

无水四环素在波长365nm下显黄色荧光，根据与标准对照可定性测定。注意事项：

因四环素能和钙盐形成不溶性化合物，故发酵液中的四环素浓度不高，预处理时通常用草酸将发酵液酸化至pH＝1.5～2.0，使四环素尽量溶解。

点样时必须注意勿损伤薄层表面。要控制好点样量，样品太少，斑点不清楚，难以观察，但样品量太多时往往出现斑点太大或拖尾现象。

若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。

作展开剂中极少量强极性溶剂(0.5％)或pH值的改变可显著改善拖尾现象。

实验四 四环素的效价测定（综合型）

实验目的：

1、了解抗生素效价的表示方法

2、学习抗生素的测定方法 实验原理：

实验利用比色法测定四环素和金霉素的效价。效价(titer或titre)是评价抗生素效能的标准，它代表抗生素对微生物的抗菌效力，也是衡量发酵液中抗生素含量的尺度，人们以1µg金霉素或四环素标准品为1个单位，0.6µg青霉素G钠盐为1个单位。

四环素和金霉素在酸性条件下，加热，可产生黄色的脱水金霉素和脱水四环素，其色度与含量成正比。

在碱性条件下，四环素较稳定，而金霉素则生成无色的异金霉素：

根据上述原理，可以在酸性条件下，利用比色法测定四环素、金霉素混合液的总效价；而四环素效价的测定可在碱性条件下，使金霉素生成无色的异金霉素，然后再在酸性条件下，使四环素生成黄色的脱水四环素，经比色测得四环素效价。总效价与四环素效价二者之差即为金霉素的效价。本实验只测定四环素的效价。

因四环素能和钙盐形成不溶性化合物，故发酵液中的四环素浓度不高，预处理时通常用草酸将发酵液酸化至pH＝1.5～2.0，使四环素尽量溶解。发酵液中，由于杂质的干扰，将影响比色的正确性，因此加入乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)作为螯合剂，掩饰金属离子的干扰，改变四环素脱水条件(降低酸度或延长加热时间)，可以减少杂质对比色反应的干扰。实验步骤：

取上述保存的处理发酵液上清l ml(效价约为1000U／m1)于50ml容量瓶中，加入lml浓度为lg／l00ml EDTA溶液，加蒸馏水9ml，再加入lml浓度为3mol／L的NaOH，在20~25℃下保温15min后，加入2.5ml浓度为6mol／L的HCl，煮沸15min后，冷却，稀释至刻度，在分光光度计上于440nm处测定其吸光度值。（紫外为100-390nm；可见光为380-780nm，根据波长选择石英比色池或玻璃比色池，否则玻璃对于紫外光有吸收）

对照样品（不加诱导剂）的前处理方法与上述步骤一样，只是在加入HCl后，不加热，稀释至刻度，作为测定样品的空白对照, 调零。

四环素标准品（1000U/ml）取1ml于50ml容量瓶中，加1ml浓度为6mol／L的HCl，水浴煮沸15min后，冷却，稀释至50ml，380nm测吸光度。（以蒸馏水作为空白测定）

以定向发酵培养基中的对照组作为空白对照，测定其它三个处理组的吸光度。（有时可能因对照组处理不当而使其它组的读数为负值，这时可以以蒸馏水作为空白。）

计算公式：

发酵液中四环素的效价=

A发酵 A四环素标准

×四环素标准品的效价

第五篇：关于二排的军训口号

关于二排的军训口号

在学习、工作或生活中，大家一定没少看到过口号吧，口号往往带有很强的倾向性，它的引导和鼓动作用十分明显。那么都有哪些类型的口号呢？下面是小编帮大家整理的关于二排的军训口号，欢迎阅读，希望大家能够喜欢。

1、首战用我，用我必胜！

2、武艺练不精，不算合格兵！

3、战时怎么打，平时就怎么练！

4、服从命令听从指挥团结互助争创佳绩

5、认真学习刻苦训练文武兼备百炼成钢

6、加强国防教育提高国防意识增强国防观念

7、服从命令，听从指挥，团结互助，争创佳绩！

8、磨练顽强的斗志，培养吃苦的精神，锤炼良好的品质

9、苦不苦想一想红军曾经二万五累不累看一看咱们的革命老前辈

10、学在协和，成就未来。日新月异，时不我待。体魄健康，意志如钢。

11、军纪如铁，意志如钢，北京奥运，再创辉煌！

12、以奥运健儿为最佳榜样刻苦训练锐意进取

13、学政治学军事全面提高自身素质

14、流血流汗不流泪掉皮掉肉不掉队

15、军爱民民拥军军民团结一家人

16、认真学习刻苦训练文武兼备百炼成钢

17、服从命令听从指挥团结互助争创佳绩

1、挑战极限超越自我自强不息厚德载物

2、秣马扬帆，团结向前，青春无限，拼搏永远。

3、奥运在我心，校运与我行

4、不畏高温，勇往直前（高温天气用语）

5、坚持不懈，努力进取（通用）

6、磨练意志，挑战自我7、创造自己，超越自己

8、继承人民军队光荣传统和优良作风为民族复兴刻苦学习

9、发扬集体主义和革命英雄主义精神为祖国富强立志成才

10、磨练顽强的`斗志，培养吃苦的精神，锤炼良好的品质

11、服从命令听从指挥团结互助争创佳绩

12、认真学习刻苦训练文武兼备百炼成钢

13、苦不苦想想红军二万五累不累看看革命老前辈

14、以奥运健儿为榜样刻苦训练锐意进取

15、学政治学军事全面提高自身素质

16、流血流汗不流泪掉皮掉肉不掉队

17、军爱民民拥军军民团结一家人

18、加强国防教育提高国防意识增强国防观念

1、让火炬继续传递人类的梦想，让我们用青春奔向奥运的方向！

2、同心同德，求实创新，齐育桃李芳天下。

3、军中骄子，校园精英，铿锵__连，勇往直前！

4、明德尚行，矢志报国，磨砺青春，升华自我。

5、天骄xxx，不懈追求，勇往直前，争创一流！

6、流血流汗不流泪，掉皮掉肉不掉队。

7、精英__连，豪情满天，重志诚橙，勇往直前！

8、增强国防意识，激发爱国热情。

9、有体魄，能拼搏；有知识，能创新。

10、集体的荣誉，就是我的荣誉。

11、轻伤不下火线，小病不下训练场，勇于挑战极限、12、历经一番血泪苦，敢教自我换新颜。

13、军纪如铁，意志如钢，勇挑重担，力创一流。

14、自律自强，奋发进取，共绘一中馨未来、15、做学校的主人，自理、自律、自强。

16、成功从好习惯开始。

17、做学习的主人，勤学、善思、好问。

18、甜酸苦辣勤训练，一二三四展英姿。

19、继承人民军队光荣传统和优良作风，为民族复兴刻苦学习。

20、军鹰xx连，翱翔九天，搏风抗雨，共创辉煌！

21、磨练顽强的斗志，培养吃苦的精神，锤炼良好的品质。

22、三大纪律，八项注意，个个要牢记。