第一篇:肿瘤学考试题
一、名词解释:
1.Krukenberg’s tumor:是指胃肠道粘液癌转移到卵巢,使双侧卵巢增大,镜下见富于粘液的印戒细胞癌弥漫浸润和间质反应性增生。2.肿瘤溶解综合征:是肿瘤治疗过程中最紧急的并发症,由于肿瘤细胞的大量溶解破坏,细胞内物质的快速释放,超过了肝脏代谢和肾脏排泄的能力,使代谢产物蓄积而引起高尿酸血症、高钾血症、高磷血症、低钙血症、代谢性酸中毒等一系列代谢紊乱,进而导致严重的心律失常或急性肾功能衰竭而危及生命.它往往发生在负荷过大、增殖迅速、对化疗高度敏感的肿瘤。
二、简答题:
1.举例说明什么是靶向治疗?
答:靶向治疗,是在细胞分子水平上,针对已经明确的致癌位点(该位点可以是肿瘤细胞内部的一个蛋白分子,也可以是一个基因片段),来设计相应的治疗药物,药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用,使肿瘤细胞特异性死亡,而不会波及肿瘤周围的正常组织细胞,所以分子靶向治疗又被称为“生物导弹”。
(1)用于治疗慢性粒细胞白血病和肠胃间质瘤的格列卫(Gleevec,通用名Imitinib)、伊马替尼、施达赛(Sprycel,通用名Dasatinib);
(2)用于治疗非小细胞肺癌的易瑞沙(Iressa,通用名Gefitinib)和特罗凯(Tarceva,通用名Erlotinib);
(3)用于治疗多发性骨髓瘤的硼替佐米(Velcade,通用名bortezomib);(4)用于治疗HER2基因阳性(过量表达)的乳腺癌的赫塞汀(Herceptin,通用名Trastuzumab);
(5)用于治疗结肠癌和非小细胞肺癌的爱必妥(Erbitux,通用名Cetuximab)和维克替比(Vectibix);
(6)用于治疗肾细胞癌的多吉美(Nexavar)等。2.临床上如何预防紫杉醇过敏? 答:(1)询问过敏史,对于曾发生过紫杉醇严重过敏反应的病人不宜再次使用。既往有其他药物、物质过敏史的病人,使用紫杉醇应谨慎并注意观察。(2)备好监护仪、吸氧装置、升压药、抗过敏药物等急救物品及药品。
(3)预防性应用抗过敏药物,严格遵医嘱在使用紫杉醇前12小时、6小时分别给予服地塞米松20mg,治疗前30分钟肌肉注射非那根25mg。
(4)正确安排用药顺序,先静脉滴注紫杉醇再滴注顺铂,使紫杉醇的毒性减少,对肿瘤细胞杀伤作用更大。(5)药物的配置与输注器具的选择,药液现配现用,在室温下放置不超过5min,使用特制带有过滤装置的聚乙烯输液器,以防紫杉醇溶液中的细小颗粒进入人体。
(6)严格控制输液速度,使用输液泵控制滴速,在开始的10分钟内滴速为每分钟10滴,如病人无不适,控制在3小时内滴完。
(7)观察用药反应,使用多参数监护仪持续监护,检测病人的呼吸、脉搏、血压、血样饱和度。
(8)过敏反应处理:出现过敏反应立即停药并更换输液管,同时另开一条静脉通道,按医嘱给予抗过敏药。症状缓解后,在严密监护下减慢速度继续滴注紫杉醇。如为严重过敏反应,应不宜在使用紫杉醇。
(9)用药后护理,继续心电监护至输完紫杉醇后6小时,如中途曾出现过敏反应继续监护24小时。3.淋巴瘤B症状 答:包括三个方面:(1)发热38℃以上,连续3天以上,且无感染原因;(2)6个月内体重减轻10%以上;(3)盗汗:即入睡后出汗。4.放射性肺炎临床表现
答:轻者无症状。可在放射治疗后立即出现刺激性咳嗽,多数在放射治疗2~3个月后出现症状,个别在停止放射治疗半年后出现刺激性干咳,活动后加剧,伴有气急,心悸和胸痛。不发热或低热,偶有高热,体温高达40℃。放射性损伤产生肋骨骨折,局部有疼痛。放射性食管炎可产生吞咽困难。随肺纤维化加剧逐渐出现呼吸困难。易发生呼吸道感染而使症状加重,出现发绀。
体检可发现胸部放射局部的皮肤萎缩变硬。多数肺部无阳性体征,肺内纤维化广泛时呈端坐呼吸,呼吸音普遍减弱,可闻及捻发音或爆裂音(crepitant rales or crackles)。继发细菌感染可出现干、湿啰音。偶有胸膜摩擦音。伴发肺源性心脏病则可出现颈静脉充盈、肝大及压痛,全身水肿等右心衰竭的表现。
由于放射性肺炎和肺纤维化,肺顺应性下降,肺活量、肺总量、残气量,、第一秒用力呼气量减少,表现为限制性通气障碍。通气/血流比例降低,气体弥散障碍,导致低氧血症。肺功能检查可早期发现本病。往往早于胸片的发现。
5.列举肿瘤科常用止痛药物、毒副反应及处理措施 答:
6.与人类肿瘤发生相关的致瘤性病毒与相关疾病
答:1)乳头状瘤病毒——人宫颈癌;2)乙型肝炎病毒——肝癌;3)EB病毒——鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤;4)HTLV——人类T细胞性白血病。7.试述微卫星不稳定性与错配修复基因
答:微卫星多态性是微卫星不稳定性(microsatelliteinstabilityMI)的表现。微卫星多态性表现于同一微卫星位点在不同个体之间以及同一个体的正常组织与某些异常组织之间微卫星位点的重复单位的数目不同。微卫星多态性的检测采用PCR方法。选择位于微卫星序列两侧的合适引物,对基因组DNA进行PCR扩增,将扩增产物以变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分析。对不同的标记引物,如荧光物质同位素,生物素可分别采用不同的显示方法,不带标记的引物可以银染显色后观察结果。与正常组织相比较,若某一等位基因条带消失或相对密度减少50%以上,记为杂合性缺失(loss ofheterozygosity,LOH;若等位基因条带增多和大小有改变则记为MI。传统的细胞遗传学核型分析检测LOH,将遗漏亚显微(submicroscopical)缺失,而微卫星标志物覆盖了许多基因组中的目的区域,克服了这个限制。MI的产生原因可能是DNA复制过程中的“链滑”(strand slippage)现象。DNA复制过程中,当复制复合物复制一个重复单位(repeat unit)后,子链与模板链分离,然后与下一个或下几个重复单位重新结合,使一个或几个重复单位形成“环凸”(looped out)区域。正常情况下该结构可被错配修复系统(mis2 match repair system)所校正,但校正系统失常时,子链DNA如继续延伸即可引起突变。
错配修复基因超家族属于管家基因(housekeeping genes),它们可查出并纠正DNA复制及DNA损伤过程中出现的未配或错配的碱基,控制复制和重组的精确性。该基因家族的突变将导致突变表型,表现为MI增加以及活性基因的高突变。研究资料表明,错配修复途径的不同缺陷可对各个微卫星家族有不同的影响。
8.结直肠癌发生的参与基因有哪些?请绘出其发生的多步骤、多阶段过程及参与基因。
答:参与基因:APC基因、DCC基因、p53基因、Ras基因、DNA甲基化异常、转移相关基因—nm23基因、CD15基因、NF1基因、p16基因等。
第二篇:肿瘤自我鉴定
原创范文
====绝非网络复制,个人原创,有效避免雷同=== 肿瘤学专业
大学生活转瞬即逝,转眼之间,作为肿瘤学专业的我即将告别大学生活,告别亲爱的同学和敬爱的老师,告别我的母校——×××大学。美好的时光总是太短暂,也走得太匆匆。如今站在临毕业的门坎上,回首在×××大学肿瘤学专业学习和生活的点点滴滴,感慨颇多,有过期待,也有过迷茫,有过欢笑,也有过悲伤。
本人在肿瘤学专业老师的教诲下,在肿瘤学班同学们的帮助下,通过不断地学习肿瘤学专业理论知识和参与肿瘤学专业相关实践活动,本人肿瘤学专业素质和个人能力得到了提高,完全符合
×××大篇二:肿瘤学专业毕业自我鉴定范文下载word 注:
毕业生自我鉴定的撰写,简言之,就是毕业生对自己在校期间思想政治、道德品质、专业学习、课外活动、社会工作等方面的总结,严肃认真,实事求是,以肯定成绩、实践能力为主,并提出今后的努力和发展方向,以便在今后的学习、工作中发扬优点,克服缺点。希望本范文模板能给毕业生提供帮助。
肿瘤学专业毕业生自我鉴定
光阴似箭,转眼间四年的大学生活即将结束,从二0xx年进入xx大学肿瘤学专业就读以来,经过老师的精心指导和自己的刻苦努力,本人各方面都有较大提高,顺利完成了学业。回首四年,对我来说是不平凡的四年,是收获的四年,是不断汲取养分的四年,是成长的四年,是值得怀念的四年。在毕业之际,总结了这四年来的点点滴滴,我成长了不少,同时也深刻的认识到:学无止境,需要加紧步伐去完善自己,提高技能,实现人生价值。
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注:
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第三篇:肿瘤名词解释
肿瘤名词解释
异型性:肿瘤组织结构与细胞形态与相应正常组织发生不同程度的差异。间变:肿瘤细胞缺乏分化,异异型性明显。
转移:恶性肿瘤细胞从原发部位侵入淋巴管,血管,体腔,迁徙到其他部位,继续生长,发展为同种类型的肿瘤的过程。
恶病质:晚期的恶性肿瘤病人,发生机体严重消瘦,贫血,厌食,全身衰弱的症状
癌前病变:某些疾病或病变虽然本身不是恶性肿瘤,但有发展成恶性肿瘤的潜力,其发生相应恶性肿瘤的风险增加。这些疾病或病变称为癌前疾病或癌前病变。
非典型增生:描述细胞增生并出现异型性,常发生于上皮,包括被覆上皮(如鳞状上皮和尿路上皮)和腺上皮(如子宫内膜腺上皮,乳腺导管上皮)
原位癌:发生于上皮,指异型增生的细胞在形态,生物学特性上与癌细胞相同,常累及上皮全层但未冲破基膜向下润,也称上皮内癌。
癌基因:是在研究肿瘤病毒(特别是反转录病毒)制瘤过程中认识到的。肿瘤抑制基因:在细胞生长和增殖的调控中起重要作用的基因。这些基因的产物有抑制细胞生长的作用。当等位基因变异或缺失时,其功能丧失,导致细胞发生转化。端粒:染色体末端存在一种称为端粒的DNA重复序列,其长度随着细胞的复制逐渐缩短。
第四篇:肿瘤制度
肿瘤科工作制度目录
一、基本医疗服务保障制度
二、肿瘤科医疗安全管理制度
三、肿瘤科查房制度
四、肿瘤科医疗会诊制度
五、肿瘤多学科联合会诊制度
六、肿瘤科知情同意制度
一、基本医疗服务保障制度
1、为保证医疗服务质量,加强医疗保障管理,健全医疗保障险管理制度,由医务科负责监督制度落实。
2、医院应在显著位置公示定点医疗机构资格证书(正本)、对优质服务便民措施、常用药品及收费项目价格进行公示,为就医人员提供清洁舒适的就医环境。
3、科室应加强医疗保险政策的学习和宣传,坚持“以病人为中心”的服务准则,热心为参保人员服务,在诊疗过程中严格执行首诊负责制和因病施治的原则,合理检查,合理用药,合理治疗,合理控制医疗费用。
4、科室在为参保人员提供医疗服务时应认真核验就诊人员的医疗保险(离休干部)病历、社会保险卡及医疗保险证(以下统称“证、卡”),为保证参保人员治疗的连续性和用药的安全性,接诊医师应查阅门诊病历上的前次就医配药记录,对本次患者的检查、治疗、用药等医疗行为应在病历上明确记录。参保人员因行动不便委托他人代配药的,由被委托人在专用病历上签字。
5、科室严格遵守药品处方限量管理的规定:急性病3-5天、慢性病7-10天、需长期服药的慢性病30天、同类药品不超过2种;住院病人出院时不得带与本次住院病情无关的药品。
6、严格掌握参保人员出入院标准,及时办理出入院手续。不得将不符合住院标准者收治入院,严禁分解住院和挂床住院。
7、医护人员要核对参保病人诊疗手册,如发现住院者与所持证件不相符合时,应及时扣留相关证件并及时报告医务科,严禁冒名顶替住院。
8、做好医保病人入院宣教和医保政策的宣传工作,按要求签定医保病人自费项目同意书,因自费药品或检查未签字造成病人的费用拒付,则由主管医师负责赔偿。
9、严格控制药品比例,科室要按照医院制定各科药品比例指标进行控制;严格控制自费药品比例,原则上不使用自费药品;超标药品比例也将纳入当月院考评。
10、严格内置材料及特检、特治(包括价格在500元以上医用材料)审批工作,要求尽可能使用国产、进口价格低廉的产品。各医保中心(包括外地医保)要求医师填写内置材料审批表到医保办审批后才能使用,急症病人可以先使用后审批(术后3天内)。
11、严格执行物价标准收费政策,不能分解收费、多收费、漏收费、套用收费,因乱收费造成的拒付费用由科室承担。
12、以下不属于基本医疗保险支付范围的疾病均不能纳入医保: 美容、非功能障碍性整容及矫形术、交通事故、自杀、他杀、误服、职业病、性病等。
二、肿瘤科医疗安全管理制度
1遵守劳动纪律,不迟到,不早退。早晨提前十分钟到岗,根据值日表自觉打扫办公室卫生。值夜班期间,要坚守工作岗位,绝对不允许脱岗,串岗。下夜班的大夫须处理完病人,安排好自己的工作,上午十点半以后休班。有特殊事情要向科主任请假。
2爱岗敬业,一定要珍惜自己的工作机会。今天工作不努力,明天努力找工作。3每周排班表由科主任签字后按时送医务处,便于安排下一周工作。定于每周四为科会时间,主要是对上一周的工作情况做一下总结,找出问题,提出改正问题的方法。同时完成医疗质量自查情况和业务学习。
4坚持各项医疗核心制度,包括交接班制度,新入院病人集体讨论制度,疑难危重病例讨论制度,查房制度,住院医师24小时负责制度,病历书写制度 新入院病人集体讨论制度:
对新入院的病人,要熟悉该病种的相关知识,由主管医师汇报病历,并提出自己的诊治方案,集体发言讨论。查房制度;大查房前将自己分管的病例准备好,粘贴好化验单及各项辅助检查单,查房时要带好听诊器等必需器械,要主动准确的汇报病情变化.。大查房期间尽量减少外出。对于一般病人,主管大夫至少要上、下午各查一次房。对于重症病人,要随时观察病情变化,及时向上级大夫汇报,及时作出处理。疑难危重病例讨论制度:
对于分管疑难危重病例,要及时提出申请,组织科内讨论或者科室会诊,并做好详细的书面记录。
住院医师24小时负责制度:
分管病人的大夫原则上都要遵守住院医师24小时负责制,手机24小时开机,不论什么时候,绝对不能耽误工作,全程负责分管病人的诊疗计划实施,了解每个病人的心理情绪变化,经常和病人及家属沟通,用“心”去服务好每一个病人。对每个病人要做好随访工作,要重视病人之间的宣传。病历书写制度
按时正规地书写病历,做到内容充实,字迹清楚,不能涂改,不缺项,不漏项。按时记病程记录,上级医师查房记录,阶段小结。有病情变化及医嘱更改,要及时记录。要及时完成出院病历的整理。要及时完成各项医患沟通及协议书的签字,确保医疗质量安全!同时,在医患沟通时一定要讲究艺术沟通,让病人及家属要充分理解并接受我们的治疗方案。加强业务学习制度
坚持每周科室集中学习,同时利用大查房,交班时间学习业务知识。
三、肿瘤科查房制度
1.科主任、高级职称医师查房每周1-2次主治医师、住院医师、护士长和有关人员参加。主治医师查房每天1次查房一般在上午进行。住院医师对所管病员每日至少查房2次。.对危重病员住院医师应随时观察病情变化并及时处理必要时可请上级医师临时检查病员。3.查房时要逐级严格要求。查房前医护人员要做好准备工作。如病历、X光片、各项有关检查报告单及所需用的检查器材等。主管医师要简要报告病历、当前病情并提出需要解决的问题。上级查房医师可根据情况做必要的检查和病情分析,并做出肯定性的指示。.护士长每周组织一次护理查房,主要检查护理质量,研究解决疑难问题等。5.查房内容
1)科主任、高级职称医师查房,解决疑难病例的诊治,审查新 入院、危重病员的诊断、治疗计划,决定特殊检查治疗。抽查医嘱、病历、护理质量,听取医师、护士对诊疗护理的意见,进行相应的临床新技术和新进展的介绍及必要的教学工作。
2)主治医生查房对所管病员进行系统查房,尤其对新入院、危重、诊断未明、治疗效果不好的病员进行重点检查与讨论,听取主管医师和护士的诊疗护理意见,了解病员病情变化倾听病员陈述并征求病员的意见,检查病历并纠正存在问题,检查医嘱执行情况及治疗效果,决定转科、出转院问题等。
3)住院医师查房巡视所管病员,重点巡视危重、疑难、新入
院、手术后的病员,检查化验报告单,分析检查结果,提出进一步检查或治疗意见,检查当天医嘱执行情况,开具临时医嘱,了解病员饮食情况,主动征求病员对医疗、护理等方面的意见。
四、肿瘤科医疗会诊制度
(一)科内会诊制度:
科内会诊应每周举行一次,全科人员参加。主要对本科的疑难病例、危重病例、出现严重并发症病例或具有科研教学价值的病例等进行全科会诊。会诊由科主任或总住院医师负责组织和召集。会诊时由主管医师报告病历、诊治情况以及要求会诊的目的。通过广泛讨论,明确诊断治疗意见,提高科室人员的业务水平。
(二)科间会诊制度: 患者病情超出本科专业范围,需要其他专科协助诊疗者,需行科间会诊。科间会诊由主管医师提出,填写会诊单,写明会诊要求和目的,送交被邀请科室。应邀科室应在24小时内派主治医师以上人员进行会诊。会诊时主管医师应在场陪同,介绍病情,听取会诊意见。会诊后要填写会诊记录
(三)全院会诊:
病情疑难复杂且需要多科共同协作者、突发公共卫生事件、重大医疗纠纷或某些特殊患者等应进行全院会诊。全院会诊由科室主任提出,报医务处同意或由医务处指定并决定会诊日期。会诊科室应提前将会诊病例的病情摘要、会诊目的和拟邀请人员报医疗服务部,由其通知有关科室人员参加。会诊时由医务处或申请会诊科室主任主持召开,业务副院长和医务处原则上应该参加并作总结归纳,应力求统一明确诊治意见。主管医师认真做好会诊记录,并将会诊意见摘要记入病程记录。应有选择性地对全院死亡病例、纠纷病例等进行学术性、回顾性、借鉴性的总结分析和讨论,原则一年举行≥2次,由医疗服务部主持,参加人员为医院医疗质量控制与管理委员会成员和相关科室人员。
(四)院外会诊:
邀请外院医师会诊或派本院医师到外院会诊,须按照卫生部《医师外出会诊管理暂行规定》(卫生部42号令)有关规定执行。
五、肿瘤多学科联合会诊制度
为加强肿瘤诊治的科学化和规范化,提高肿瘤治愈率和生存质量,减轻病人经济负担,我院实行肿瘤多学科专家联合会诊制度。联合会诊是由专病诊治科室和肿瘤内科、影像诊断科、病理科的多科专家组成,根据卫生部下发的市、县级医院常见肿瘤规范化诊疗指南(试行)对肿瘤患者根据疾病的分期、肿瘤病理类型和病人的机体状况制定合理的诊疗方案和最佳优化治疗流程,并解决晚期和临床疑难病例的诊断与治疗问题。
一、肿瘤多学科协作小组成员 组长:肿瘤科主任 秘书:肿瘤科副主任
组员:全院临床、医技科室主任。
二、职责
组长对患者的综合诊治方案有最终决定权并对治疗方案负责;定期召集召开小组会议,研究改进工作中存在的问题;向医疗处提出需医院协调的建议;对工作人员进行业务知识培训。秘书负责会议记录和档案的保存。组员对患者本专业诊治方案有最终决定权。定期参加小组会议,组织本科室人员进行业务知识培训,自查本科室工作流程的执行情况。
三、工作流程
1、各内科医师发现门诊肿瘤患者时,首诊医师完成病历,引导病人到肿瘤内科就诊。肿瘤内科医师请相关外科专业医师会诊,共同对患者病情进行综合评估,以确定最佳的治疗方法。各外科医师发现门诊肿瘤患者时,首诊医师完成病历,请肿瘤内科医师会诊,共同对患者病情进行综合评估,以确定最佳的治疗方法。病人如需手术治疗,则收住外科系列相关科室。病人如需化放疗,则收住肿瘤科。各科室将会诊情况在门诊病人登记本中登记,并请会诊医师签全名。
2、住院过程中发现的肿瘤患者或肿瘤患者入院完成各项常规检查及针对性检查之后,及时请相关科室交叉会诊,外科系列科室请肿瘤科会诊、肿瘤科请外科系列专业科室会诊,对患者病情进行综合评估,以确定最佳的治疗方法,填写会诊单和病例讨论记录。优先手术治疗的安排手术,优先化疗的安排化疗,优先放射治疗的安排放射治疗,确保患者能够得到科学合理及时有效的治疗。
3、肿瘤患者外科手术后,一旦度过术后早期康复阶段立即请肿瘤科会诊,将病人转至肿瘤科进行术后辅助治疗
4、医技检查科室发现肿瘤病人,电话通知肿瘤科和相关外科专业科室医师会诊,对患者病情进行综合评估,及时进行医患沟通,确定诊疗科室,对病人进行诊疗。医技科室建立肿瘤患者登记本,对以上内容进行登记,请会诊医师在登记本中签名。
四、扣罚 各科室未认真遵守本规定内容视为跨专业收治病人,一经发现按医院检查标准进行考核分数扣罚,同时将该病人的收入划拨到相应科室。造成医疗纠纷或事故的,按医院规定加倍处理。
六、肿瘤科知情同意制度
1.患者知情同意即是患者对病情、诊疗(放疗、化疗)方案、风险益处、费用开支、临床试验等真实情况有了解与被告知的权利,患者在知情的情况下有选择、接受与拒绝的权利。
2.履行患者知情同意可根据操作难易程度、可能发生并发症的风险与后果等情况,决定是口头告知或是同时履行书面同意手续。
3.由患者本人或其监护人、委托代理人行使知情同意权,对不能完全具备自主行为能力的患者,应由符合相关法律规定的人代为行使知情同意权。4.对知情同意的内容,由主管医师用以患者易懂的方式和语言充分告知患者,履行签字同意手续。
5.对危重患者,需实施有创诊疗、输血、血液制品、麻醉时,在患者无法履行知情同意手续又无法与家属联系或无法在短时间内到达,病情可能危及患者生命安全时,应紧急请示报告科主任、医务处,院总值班批准。
6.临床医师在对病人初步诊断后要向病人进行告知疾病特点及检查、治疗方法、治疗的后果、可能出现的不良反应等,对于特殊检查、特殊治疗(包括放疗及化疗)应在取得病人的理解同意后,方可实施。
7.如果病人对检查、治疗有疑虑,拒绝接受医嘱或处理,主管医师应在病程录中作详细记录,并向病人做出进一步的解释,病人仍拒绝接受处理等情况,也应在病程记录中说明,并向上级医师或科主任报告。
8.如果病人执意不同意接受应该施行的检查或治疗,则不可实行,但应告知可能产生的后果,由病人或委托人在知情同意书上签字。
9.进行临床试验、药品试验、医疗器械试验、输血以及其他特殊检查或治疗前必须签署特殊检查、特殊治疗知情同意书。主管医师应向病人及家属告知特殊检查、特殊治疗的相关情况,由病人及家属签署同意检查、治疗的意见。
第五篇:肿瘤检测样本
1、新鲜组织(包括手术和活检组织)肿瘤新鲜冷冻材料可提取出最高品质的DNA、RNA。在手术现场取样的情况也比较多,但需要在显微镜下确认肿瘤细胞含量。周围炎症严重的肿瘤、黏液产生过高的肿瘤、病变中心广泛纤维化的肿瘤细胞不能采集,以免产生假阴性结果。切割后取其中一半,并利用另一半切面制作组织标本,然后进行确认。
手术切除的组织样本理想的保存方法是迅速置于液氮中,然后保存于液氮罐或-80℃冰箱,这一过程应在手术样本离体后30分钟内完成。由于组织样本通常需先进行病理学分析,在分析完成后应尽早将组织样本置于稳定剂中,避免核酸降解。
2、石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)
10%中性福尔马林固定手术切除样本,按病理学操作规范进行取材。制作石蜡切片时,切取5片连续切片,其中1片进行HE染色,确认肿瘤细胞的含量。在高灵敏度检测方法中,可考虑使用活检标本。
DNA容易受固定的影响,长时间(1周以上)浸泡在福尔马林中的样本的DNA会被片段化,不能检出突变。活检材料的固定时间一般是24小时,对于穿刺等活检样本,固定时间控制在6~24小时为佳。
3、胸腹水等细胞学样本
用胸腹水中的肿瘤细胞用于基因检测时,必须确认肿瘤细胞,穿刺获得胸腹水样本提交给细胞病理检查之后,剩余液体冷藏/冷冻保存,也可在含有细胞成分的离心沉淀中加入含有蛋白质变性剂的缓冲液(AL缓冲液,Qiagen公司)等室温保存。由于细胞学样本的肿瘤细胞含量较低,因此必须使用高灵敏度检测方法。
4、血浆样本
循环DNA(circulating free DNA,cfDNA)是存在于血浆中的游离DNA,肿瘤来源的DNA占血浆游离DNA的比例在不同肿瘤及病例中相差悬殊(0.01~93%),从而限制了外周血在肿瘤分子检测时的应用。目前已有多篇文献证实可利用从血浆游离DNA检出突变,但需要使用ARMS法等灵敏度非常高的检测方法。
采集外周血提取血浆游离DNA进行检测,取样时应使用一次性密闭EDTA抗凝真空采血管,采集6~10ml全血,冷藏运输,6小时内分离血浆,提取游离DNA,保存到-80℃冰箱中,并避免反复冻融。如外周血需长时间运输,建议用商品化的游离DNA样本保存管,在常温条件下,cfDNA在全血中可稳定保存7天。