微生物菌种、毒株的管理规定2013版

第一篇：微生物菌种、毒株的管理规定2013版

微生物菌种、毒株的管理规定

为加强可感染人类的高致病性病原微生物菌种、毒株的管理，保障人体健康和公共卫生安全特制定本规定。

一、菌种、毒株的保藏和管理严格按《中华人民共和国传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《可感染人类的高致病性病原微生物菌种、毒株管理规定》等法律、行政法规的规定执行。

二、设立《微生物实验室菌种登记表》，其内容包括：菌种编号、菌种名称、菌种来源、保存日期、数量、保存条件、存放位置、保管人。

三、严格的登记制度、建立详细的总账及分类账。

四、根据菌种的特性选择适宜的保存方式。采用双人管理。

五、根据菌种情况，定期检测菌种品质，发现菌种变异或退化时应及时报告，并查明原因。

六、菌种的发放需要双保管人员同时在场的情况下才能进行。每次使用标准菌株都应做好使用记录，包括标准品的名称、编号、使用时间等。

七、购买的标准菌株初次复苏使用时，应批量保存在菌种管中，-20℃以下保存。

八、新的标准菌株复苏后，传代最多不超过3次，如超过3次将不再作为标准菌株使用。

九、标准菌株保存管一经解冻使用后，不得再次冻存。

十、菌种必须装在密封的专用容器内高压灭菌销毁，并做好销毁记录。

十一、菌种、毒株失窃要及时报告处理，并有相应的应急预案。

微生物实验室菌种、毒株管理者：

第二篇：病原微生物菌种及毒株样品生物安全事件应急预案

济南市儿童医院

病原微生物菌种及毒株样品生物安全事件应急预案

一、为保证发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，有效遏制实验室生物安全事件危害的进一步扩大，保证相关人员的健康，保证公众健康和社会稳定，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《医疗机构临床实验室管理办法》、《突发公共卫生事件应急条例》、《实验室--生物安全通用要求》、和《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》等有关法律法规，结合本院实际情况，制定本预案。

二、本预案所称病原微生物，是指能够使人致病的微生物。本预案所称实验活动，是指从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。

三、本预案适用于本医院病原微生物实验室发生的生物安全事件。主要包括：

（一）病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏事件。

（二）病原微生物在实验活动中由于采集和取用造成实验室人员感染和向实验室外泄露或扩散事件。

（三）由于不可预测因素所引起的实验室病原微生物泄露或扩散事件。第四条

工作原则为预防为主，常备不懈；设施规范，管理到位；主动监测，反应迅速；依法处理，措施果断；机制通畅，遏制危害。

组织机构及职责

医院生物安全委员会全面负责微生物安全应急事件的各项工作，生物安全办公室负责微生物安全的日常管理工作，办公地点设在医院检验科。

医院生物安全委员会职责：

（一）研究制定医院微生物室生物安全突发事件应急处理预案，并负责预案的相应和终止；

（二）协同医院实验室生物安全管理委员会共同负责建立微生物室生物安全管理制度，指导和监督微生物室的制度落实情况，同时负责生物安全事故的调查和处理工作；

（三）负责指挥医院微生物室生物安全突发事件应急处理工作，协调有关部门的关系，确保应急处理工作快速有效开展，控制危害扩大，最大限度地减少损失；并及时向区卫生局和有关部门报告；

（四）负责医院微生物室生物安全突发事件应急处理专业队伍的建设和培训；

（五）定期或不定期检查微生物室的日常预防及预警工作，提高科室成员的应急处臵能力。

预防预警报告

预防机制

（一）严格贯彻执行《病原微生物实验室生物安全管理条例》，抓紧做好病原微生物室备案登记工作。

（二）病原微生物室要加强实验室标准化建设，对实验室人员配备、设备配臵、个人防护和安全行为等必须按照《实验室生物安全通用要求》严格执行。

（三）病原微生物保藏要制定严格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录，建立档案制度，并指定专人负责。对高致病性病原微生物菌（毒）种和样本要设专库或者专柜单独储存。

（四）增强安全意识，进一步完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守微生物室生物安全管理相关法律法规，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。

（五）加强安全防范，防止不法之徒盗窃病原微生物菌（毒）种和样本用于对人群进行生物化学恐怖攻击，危害公众健康和影响社会稳定。预警机制

（一）建立有效的预警机制，为各种病原微生物菌（毒）种和样本建立档案和使用纪录，每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。

（二）建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染要立即报告。

（三）定期开展自查，发现安全隐患要迅速预警通报。

（四）预警分级标准。实验室感染根据所操作的病原微生物致病性及其对周围人群和环境危害的严重程度，可将实验室生物安全事故划分为三个等级。分别为一般性实验室安全事故、严重实验室安全事故和重大的实验室安全事故。

Ⅰ级：一般性实验室生物安全事故是指实验室发生了三、四类病原微生物泄露或感染，导致1~5人的感染，并引起轻度的临床症状，事故对实验人员健康和公众安全不产生明显损害的。

Ⅱ级：严重实验室生物安全事故是实验室人员在实验室中，1人感染了二类病原微生物或发生二类病原微生物泄露或菌株丢失等，感染者具有明显的临床表现，但未导致死亡；或尚未造成周围人群和环境危害的或发生一般性实验室感染达5人以上的。

Ⅲ级：重大的实验室生物安全事故是指在实验室中发生一类病原微生物泄露事件或1人及以上感染，且具有明显的临床表现的，并波及和危害到周围人群健康，甚至危害到社会人群的安全；或二类病原微生物2人或以上感染的，或因感染导致人员死亡的；或有一、二类病源微生物菌（毒）种丢失、泄露或导致环境污染等严重危害的。报告机制

（一）病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏的，承运单位、护送人、保藏机构要采取必要的控制措施，并在２小时内分别向承运单位的主管部门、护送人所在单位和保藏机构的主管部门报告，同时向所在地的区卫生行政主管部门报告。发生被盗、被抢、丢失的，还应当向公安机关报告。接到报告的卫生行政主管部门要在２小时内向本级人民政府报告，同时向上级卫生行政主管部门和卫生部报告。

（二）任何单位和个人发现高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本的容器或者包装材料，要及时向附近的卫生行政主管部门报告。接到报告的卫生行政主管部门要及时组织调查核实，并依法采取必要的控制措施。

（三）微生物室工作人员出现与本实验室从事的高致病性病原微生物相关实验活动有关的感染临床症状或者体征时，实验室负责人应当向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告。

（四）微生物室发生高致病性病原微生物泄漏时，工作人员要立即采取控制措施，防止高致病性病原微生物扩散，并同时向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告。

（五）医疗机构及医务人员发现由于实验室感染而引起的与高致病性病原微生物相关的传染病病人、疑似传染病病人，诊治的医疗机构要在２小时内报告所在地的区卫生行政主管部门。接到报告的卫生行政主管部门要在２小时内通报实验室所在地的区卫生行政主管部门。接到通报的县级卫生行政主管部门要在２小时内向本级人民政府报告，并向上级卫生行政主管部门和卫生部报告。同时采取相应的预防、控制措施。

应急响应

应急响应：只要发生了意外，无论何时、何地，相关部门、人员有责任和义务立即作出响应。响应启动：

一般情况下，有下列情形之一者，即可启动实验室感染应急预案：(1)实验人员在检测高致病性病原微生物过程中，发生严重差错或事故，导致病原微生物外溢，且数量较多或样本中病原体浓度较高时，并有实验人员防护不到位，造成直接暴露，极有可能导致感染时；(2)在操作高致病性病原微生物的实验室，遇突发事件，如突然断电，导致送排风系统无法正常运转，或遇到火灾等自然灾害，导致病原体外泄，造成严重污染，使实验人员直接暴露时；

(3)因违反操作规程和安全管理制度，安排未经安全培训和不具备专业能力的进修实习人员从事高致病性病原微生物检测工作，发生严重差错或事故，造成病原微生物扩散，实验操作人员个体防护措施存在缺陷时；

(4)实验过程中，发生病原微生物容器破损外溢或扩散，从事高致病性病原微生物检测的人员，未经预防接种，且所操作的病原微生物能够导致严重疾病，甚至死亡的情况时；

(5)在操作能够通过呼吸道传播、扩散的高致病性病原微生物时，实验人员发现个体防护措施存在缺陷，并直接暴露，且实验人员未经预防接种时。分级响应：

(1)发生一般感染事件时应做好以下工作：

①生物安全委员会立即领导生物安全管理机构（办公室）组织有关部门，全面了解事故发生的情况，督促各有关科（所、室）履行各自的职责，落实各项防控措施，及时予以处臵和纠正。②发生感染或事故的实验室应暂停相关的实验活动。③立即组织专家组进入实验室进行调查。

④对污染区域开展消毒，并对污染和事故可能带来的危害情况进行评估。

(2)较大的实验室感染，在一般实验室事故措施的基础上，应该做好以下工作：

①停止发生事故的实验室所有工作，组织专家进行调查、评估。②感染人员立即送定点医院隔离观察或治疗。

③对发生感染或泄露事件的实验室的所有实相关人员进行医学观察。④事件判定后的2小时内报省卫生行政部门。(3)重大实验室感染，在较大实验室事故措施的基础上，应该做好以下工作：

①对发生感染或泄露事件的实验室进行封锁，组织专家进入进行调查、评估。

②事件判定后立即报市卫生行政部门。④调查处理后，对实验室进行全面彻底消毒。先期处臵

发生感染或泄露事件的实验室应停止实验活动，并按照相关程序做好现场应急处臵，生物安全委员会办公室接到报告后应该对感染事件的基本情况和信息进行核实，并负责召集单位生物安全委员会成员，对所发生的实验室差错或事故的严重程度与可能产生的危害进行分析评估，以确定实验室差错或事故性质可能造成的后果，并对受暴露的实验人员采取医学观察或隔离治疗等措施，最后根据所造成的后果的危害大小和严重程度进行感染事件等级认定。具体措施如下：

（一）封闭被病原微生物污染的实验室或者可能造成病原微生物扩散的场所；

（二）开展流行病学调查；

（三）对病人进行隔离治疗，对相关人员进行医学检查；

（四）对密切接触者进行医学观察；

（五）进行现场消毒；

（六）其他需要采取的预防、控制措施。具体应急预案

1、刺伤、切割伤或擦伤处理：

1)立即停止工作。2)伤口挤血，水或消毒剂冲洗消毒。3)除去防护服并进行医学处理。4)去急诊室诊治，急诊室对伤者进行必要的检查和处臵，填写“职业暴露记录单”并报质量管理科，记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录。

2、潜在感染性物质的食入处理：

1)立即停止工作。2)应脱下防护服并进行医学处理。3)观察和必要的预防治疗，去急诊室诊治，对伤者进行必要的检查和处臵，填写“异常事件报告单”并报质量管理科，记录受伤原因和相关的微生物。4)要报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留完整适当的医疗记录。

3、潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）处理： 1)所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。2)应当立即通知实验室负责人。3)为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室。4)应张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在实验室负责人的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。5)填写《职业暴露记录单》。

4、容器破碎及感染性物质的溢出处理：

1)做好个人防护，戴手套，穿防护服，必要时戴眼罩和护目镜。2)用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。3)然后在上面倒上消毒剂，通常用健之素。由外向内进行处理。4)并使其作用适当时间（30分钟），将布、纸巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片应用镊子清理。5)然后再用消毒剂擦拭污染区域。6)如果用簸箕清理破碎物，应当对他们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。7)如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将原件臵于盛放污染性废弃物的容器内。8)填写《职业暴露记录单》。

5、未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂处理：1)如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭（例如30min）使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭（例如30min）。2)所有操作都应戴厚实的手套（如厚橡胶手套），必要时可在外面戴一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子，或用镊子夹着的棉花来进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，然后回收。3)离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭，并再次擦拭，然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。4)填写《职业暴露记录单》。

6、在可封闭的离心桶（安全杯）内离心管发生破裂处理： 1)所有密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。)如果怀疑在安全杯内发生破损，应该松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌。3)填写《职业暴露记录单》。

7、有腐蚀、有毒、含微生物样品进入眼睛、污染台面处理： 1)若有上述样品进入眼睛，立即用护眼冲洗器仔细冲洗。2)冲洗后去眼科就诊，对伤者进行必要的检查和处臵，填写“异常事件报告单”并报质量管理科，记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录。3)若污染台面，即用0.1%健之素。

事件综合评估

根据生物安全事件报告的具体情况，确定评估主体；领导小组组织专家小组对评估主体进行危害评估。

（一）生物安全事件原因调查。对生物安全事件发生的具体原因、应急处理情况、接触人员的感染情况、引起疾病流行的可能性等进行调查。

（二）标本、样品采集和检验。对污染的物品、区域、接触人员和可疑感染的生物进行采样和检测，以评估确定事件的性质和危害。

（三）生物安全事件危害范围评估。根据引发生物安全事件的病原微生物具体种类、接触人员和泄露范围，评估确定生物安全事件危害范围。

现场调查和取证人员要采取适宜的防护措施。疫情的解除

（四）解除封锁的条件是：对污染区进行必要的安全处理，如对病原体进行彻底的消毒或销毁；根据情况进行必要的杀虫、灭鼠；对小隔离区进行终末消毒，并从最后一例病人算起，经过一个最长潜伏期仍无新的病例发生，报请批准封锁的主管部门解除封锁。

责任与奖惩

（一）突发事件应急处臵工作实行责任追究制。

（二）对突发事件应急管理工作中做出突出贡献的集体和个人要给予表彰和奖励。

（三）对应急管理工作中出现的失职、渎职行为，应追究其责任

保障措施

（一）不断完善实验技术操作规程和技术规范，强化实验室规范化建设。

（二）加强对涉及实验室生物安全的监测与预警、疫情分析评估、流行病学调查、消毒隔离技术等方面的业务培训。加强实验室业务人员法制化管理和法律责任方面的。

（三）病原微生物实验室设立单位要自觉遵守国家相关的法律法规，定期开展自查，不断完善实验室检查制度。

第三篇：微生物菌种纯度检测技术规程

微生物菌种纯度检测技术规程范围

本规程规定了古菌、细菌、真菌、病毒（种）纯度检测的程序和方法。

本规程适用于从事微生物菌种资源保藏及研究的机构、大学、企业、个人等。术语、定义

下列术语和定义适用于本规程

2.1

纯度检测 purity check

指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。

2.2

纯培养pure culture

由单个细胞的后代组成的培养物，即单细胞培养物或无性繁殖系。通常是由挑取单个菌落或利用单胞分离技术，移种繁殖获得。菌种的纯度检测

3.1 古菌和细菌的纯度检测

3.1.1 菌落形态

在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。

3.1.2 细胞形态

对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜等特征应相似

3.1.3 芽孢大小、位置、形状

宜检测样品是否形成芽孢，对形成芽孢的菌种，其芽孢大小、位置、形状应相似。

3.2 放线菌菌种纯度检测

3.2.1 菌落形态

在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线,挑取单菌落，适宜培养后，在同一平板上单菌落形状、大小、表面状况、质地、光泽、颜色等应相似。如怀疑为细菌污染，则30℃液体培养24小时，培养液不应浑浊，如浑浊则视为细菌污染。

3.2.2 培养特征

分别接种三种以上培养基，在三种以上培养基上的培养特征应想同，包括气生菌丝、基内菌丝、可溶性色素的颜色等。

3.2.3 孢子丝及孢囊

在特定的培养基、培养温度及培养时间等条件下，孢子着生方式、孢子丝形态及其颜色或孢囊着生位置（气丝或基丝）、孢囊的形状，大小应呈现出一致性。

3.3 酵母菌种纯度检测

3.3.1 菌落形态

应对菌落形态相似性进行检测。在特定的培养基上，通过对待检测菌株进行稀释或划线涂布平板获取单菌落，一定的培养条件下，比较同一平板内，菌落的大小、形状、颜色、隆起、表面状况、质地、光泽等应一致。

3.3.2 个体形态

应对检测样品的个体形态进行检测。在指定的培养基及培养条件下，细胞形状、大小及细胞的增殖方式应一致。

3.3.3 繁殖方式

酵母繁殖的方式应一致，如是芽殖，出芽的方位、数量应一致。

3.4 丝状真菌菌种纯度检测

3.4.1 菌落特征

菌落的形态等表观特征应一致。

3.4.2 菌丝特征

在特定的培养基和培养条件下，菌丝分隔、菌丝形态等应一致。

3.4.3 其他主要显微特征应一致

3.4.4 检测是否有细菌污染

3.4.5 对于外观上不能确定菌种纯度的，利用单胞分离技术获得纯培养物进行对比，其菌丝、孢子等特征应与原始菌株的描述一致。

3.5 病毒的纯度检测

3.5.1 纯粹检查

应将待检病毒液直接接种含硫乙醇酸盐培养基（T.G）、酪蛋白胨琼脂培养基（G.A）、葡萄糖蛋白胨汤。通过一定温度时间培养后，检查结果应无细菌生长为纯粹。

3.5.2 支原体检查

检测由禽胚组织或其细胞所培养的病毒应用改良Frey氏培养基。检测其它培养方法所得病毒应用支原体培养基。任何一次琼脂平板上出现支原体菌落，判为阳性。阳性对照中至少有一个平板长菌落，而阴性对照中无菌落生长，则检验有效。

3.5.3 外源病毒检查

病毒类制品在毒种选育和生产过程中，经常使用动物或细胞基质培养，因此，有可能造成外源因子（特别是外源病毒因子）的污染。为了保证制品质量，需要对毒种和细胞进行外源因子检测。

3.5.3.1 病毒种子批外源因子检查

对病毒主种子批或工作种子批，应抽取足够检测试验需要量的供试品进行病毒外源因子检测。在试验前应用特异性抗体（血清）中和本病毒（或单克隆抗体），所用的抗体免疫源应采用与生产疫苗（或制品）不同种而且无外源因子污染的细胞（或动物）制品。如果病毒曾在禽类组织或细胞中繁殖过，则抗体不能用禽类来制备。若用鸡胚，应来自SPF鸡群。以下方法可以选择一种或多种进行。

3.5.3.1.1 动物试验法

3.5.3.1.1.1 小鼠试验法

取15－20g小鼠至少10只，用经抗血清中和后的病毒悬液，每只脑内接种0.03ml，同时腹腔接种0.5ml。至少观察21天。在观察期内至少有80％最初接种的小鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染，为符合要求。解剖所用在试验24小时后死亡或有患病体征的小鼠，直接观察期病理改变，并将有病变的相应的组织悬液通过脑内和颅腔接种另外至少5只15－20g小鼠，并观察21天，如果没有小鼠出现病毒感染，则符合要求。

3.5.3.1.1.2 乳鼠试验法

取出生后24小时内的乳鼠至少10只，用经抗血清中和后的病毒悬液，脑内接种0.01ml，同时腹腔接种至少0.1ml。每天观察，至少14天。在观察内至少有80％最初接种的乳鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染，为符合要求。解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的乳鼠，直接肉眼观察其病理改变，并取有病变的相应的组织和脑、脾制备成悬液通过脑内和腹腔接种另外至少5只出生后24小时内乳鼠，并每天观察至接种第14天，如果没有小鼠出现病毒感染，则符合要求。

3.5.3.1.2 细胞培养法

3.5.3.1.2.1 非血吸附检查

用经抗血清中和后的病毒悬液，接种于生产用的同种的细胞。细胞至少接种6瓶，每瓶病毒悬液接种量不少于培养液总量的25％。于36±1℃培养，观察14天，必要时可更换细胞培养液，未见细胞病变（CPE）为阴性，符合要求。

3.5.3.1.2.2 血吸附病毒检查

上述接种病毒的各个细胞于第6－8天后和第14天，取出2瓶进行血吸附病毒检查。用0.2％－0.5%鸡和豚鼠红细胞混合菌悬液覆盖于细胞表面，分别置于2－8℃，20－25℃，30分钟后显微镜下观察，未见血球吸附现象为阴性，符合要求。

3.5.3.1.3 鸡胚检查法

在禽类组织或细胞中繁殖过的病毒种子需用鸡胚检查禽类病毒的污染。选用9－11日和5－7日龄两组SPF鸡胚，每组至少5只，分别于尿囊腔和卵黄囊接种经抗体血清中和后的病毒悬液，每胚0.5ml。孵育7日后，取尿囊液用豚鼠和鸡血细胞混合悬液做血球凝集试验应为阴性。被接种的鸡胚至少80％存活7天，试验有效。

3.5.3.2 生产用细胞外源因子检查

3.5.3.2.1 细胞直接观察

每批生产用细胞应留取5％（或不少于500ml）,细胞悬液不接种病毒，作为对照细胞加入与疫苗生产相同的细胞维持液，置于与疫苗生产相同的条件下培养，观察14天，在显微镜下观察是否有细胞病变（CPE）出现，无细胞病变（CPE）出现者为阴性，符合要求。在观察期末至少有80％的对照细胞培养物存活，试验有效。

3.5.3.2.2 血清吸附病毒检查

对生产用细胞外源因子检查的（1）项细胞培养物在观察期末取至少25％的细胞培养瓶进行血吸附病毒检查。（方法同病毒种子批外源因子检查的血吸附病毒检查）

参考文献

[1] 刘志恒，姜成林主编.放线菌现代生物学与生物技术.北京：科学出版社,Pp1-353.2004

[2] 杨苏声主编.细菌分类学.北京：中国农业大学出版社,Pp1-145.1997

[3] 沈萍，彭珍荣主译.《微生物学》，第五版，中文版,高等教育出版社，2004

[4] 中国科学院微生物研究所《常见与常用真菌》编写组.常见与常用真菌.北京：科学出版社,P1-317，1978

[5] 中国科学院微生物研究所《菌种保藏手册》编著组.菌种保藏手册.北京：科学出版社,P1-839，1980

[6] David R.Boone et al.Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology.Second Edition.Volume One.Springer.2001

[7] Kirk P.M., P.F.Cannon, J.C.David and J.A.Stalpers(ed).Dictionary of the Fungi.9th edition.CABI Publishing.2001

第四篇：病原微生物菌种及毒株样品生物安全事件应急预案

病原微生物菌种及毒株样品生物安全事件应急预案

总则

第一条

为保证发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，有效遏制实验室生物安全事件危害的进一步扩大，保证相关人员的健康，保证公众健康和社会稳定，根据 《 中华人民共和国传染病防治法 》、《 病原微生物实验室生物安全管理条例））、《 医疗机构临床实验室管理办法））、《 突发公共卫生事件应急条例 》、《 实验室一生物安全通用要求 》、和 《 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定 》 等有关法律法规，结合本院实际情况，制定本预案。

第二条

本预案所称病原微生物，是指能够使人致病的微生物。

本预案所称实验活动，是指从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。

第三条

本预案适用于本医院病原微生物实验室发生的生物安全事件。主要包括：

（一）病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏事件。

（二）病原微生物在实验活动中由于采集和取用造成实验室人员感染和向实验室外泄露或扩散事件。

（三）由于不可预测因素所引起的实验室病原微生物泄露或扩散事件。

第四条

工作原则为预防为主，常备不懈；设施规范，管理到位；主动监测，反应迅速；依法处理，措施果断；机制通畅，遏制危害。

组织机构及职责

医院生物安全委员会全而负责微生物安全应急事件的各项工作，生物安全办公室负责微生物安全的日常管理工作，办公地点设在医院检验科。

医院生物安全委员会职责：

（一）研究制定医院微生物室生物安全突发事件应急处理预案，并负责预案的相应和终止；

（二）协同医院实验室生物安全管理委员会共同负责建立微生物室生物安全管理制度，指导和监督微生物室的制度落实情况，同时负责生物安全事故的调查和处理工作；

（三）负责指挥医院微生物室生物安全突发事件应急处理工作，协调有关部门的关系，确保应急处理工作快速有效开展，控制危害扩大，最大限度地减少损失；并及时向区卫生局和有关部门报告；

（四）负责医院微生物室生物安全突发事件应急处理专业队伍的建设和培训；

（五）定期或不定期检查微生物室的日常预防及预警工作，提高科室成员的应急处置能力。

预防预警报告

预防机制

（一）严格贯彻执行 《 病原微生物实验室生物安全管理条例 》，抓紧做好病原微生物室备案登记工作。

（二）病原微生物室要加强实验室标准化建设，对实验室人员配备、设备配置、个人防护和安全行为等必须按照 《 实验室生物安全通用要求 》 严格执行。

（三）病原微生物保藏要制定严格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录，建立档案制度，并指定专人负责。对高致病性病原微生物菌（毒）种和样本要设专库或者专柜单独储存。

（四）增强安全意识，进一步完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和

措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守微生物室生物安全管理相关法律法规，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。

（五）加强安全防范，防止不法之徒盗窃病原微生物菌（毒）种和样本用于对人群进行生物化学恐怖攻击，危害公众健康和影响社会稳定。

预警机制

（一）建立有效的预警机制，为各种病原微生物菌（毒）种和样本建立档案和使用纪录，每次使用后及时登与发现遗失或被盗，立即报告。

（二）建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染要立即报告。

（三）定期开展自查，发现安全隐患要迅速预警通报。

（四）预警分级标准。实验室感染根据所操作的病原微生物致病性及其对周围人群和环境危害的严重程度，可将实验室生物安全事故划分为三个等级。分别为一般性实验室安全事故、严重实验室安全事故和重人的实验室安全事故。

I 级：一般性实验室生物安全事故是指实验室发生了三、四类病原微生物泄露或感染，导致 1~5人的感染，并引起轻度的临床症状，事故对实验人员健康和公众安全不产生明显损害的。II级：严重实验室生物安全事故是实验室人员在实验室中，1 人感染了二类病原微生物或发生二类病原微生物泄露或菌株丢失等，感染者具有明显的临床表现，但未导致死亡；或尚未造成周围人群和环境危害的或发生一般性实验室感染达 5 人以上的。

III级：重大的实验室生物安全事故是指在实验室中发生一类病原微生物泄露事件或 1 人及以上感染，且具有明显的临床表现的，并波及和危害到周围人群健康，甚至危害到社会人群的安全；或二类病原微生物 2 人或以上感染的，或因感染导致人员死亡的；或有一、二类病源微生物菌（毒）种丢失、泄露或导致环境污染等严重危害的。

报告机制

（一）病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏的，承运单位、护送人、保藏机构要采取必要的控制措施，并在 2 小时内分别向承运单位的主管部门、护送人所在单位和保藏机构的主管部门报告，同时向所在地的区卫生行政主管部门报告。发生被盗、被抢、丢失的，还应当向公安机关报地的区卫生行政主管部门报告。发生被盗、被抢、丢失的，还应当向公安机关报告。接到报告的卫生行政主管部门要在 2 小时内向本级人民政府报心，同时向上级卫生行政主管部门和卫生部报告。

（二）任何单位和个人发现高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本的容器或者包装材料，要及时向附近的卫生行政主管部门报告。接到报告的卫生行政主管部门要及时组织调查核实，并依法采取必要的控制措施。

（三）微生物室工作人员出现与本实验室从事的高致病性病原微生物相关实验活动有关的感染临床症状或者体征时，实验室负责人应当向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告。

（四）微生物室发生高致病性病原微生物泄漏时，工作人员要立即采取控制措施，防止高致病性病原微生物扩散，并同时向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告。

（五）医疗机构及医务人员发现由于实验室感染而引起的与高致病性病原微生物相关的传染病病人、疑似传染病病人，诊治的医疗机构要在 2 小时内报告所在地的区卫生行政主管部门。接到报告的卫生行政主管部门要在 2 小时内通报实验室所在地的区卫生行政主管部门。接到通报的县级卫生行政主管部门要在 2 小时内向本级人民政府报告，并向上级卫生行政主管部门和卫生部报告。同时采取相应的预防、控制措施。

应急响应

应急响应：只要发生了意外，无论何时、何地，相关部门、人员有责任和义务立即作出响

应。

响应启动：

一般情况下，有下列情形之一者，即可启动实验室感染应急预案：

(l）实验人员在检测高致病性病原微生物过程中，发生严重差错或事故，导致病原微生物外溢，且数量较多或样本中病原体浓度较高时，并有实验人员防护不到位，造成直接暴露，极有可能导致感染时；

(2）在操作高致病性病原微生物的实验室，遇突发事件，如突然断电，导致送排风系统无法正常运转，或遇到火灾等自然灾害，导致病原体外泄，造成严重污染，使实验人员直接暴露时；

(3）因违反操作规程和安全管理制度，安排未经安全培训和不具备专业能力的进修实习人员从事高致病性病原微生物检测工作，发生严重差错或事故，造成病原微生物扩散，实验操作人员个体防护措施存在缺陷时；

(4）实验过程中，发生病原微生物容器破损外溢或扩散，从事高致病性病原微生物检测的人员，未经预防接种，且所操作的病原微生物能够导致严重疾病，甚至死亡的情况时；(5）在操作能够通过呼吸道传播、扩散的高致病性病原微生物时，实验人员发现个体防护措施存在缺陷，并直接暴露，且实验人员未经预防接种时。

分级响应：

(1）发生一般感染事件时应做好以下工作：

① 生物安全委员会立即领导生物安全管理机构（办公室）组织有关部门，全面了解事故发

生的情况，督促各有关科（所、室）履行各自的职责，落实各项防控措施，及时予以处置和纠正。

② 发生感染或事故的实验室应暂停相关的实验活动。

③ 立即组织专家组进入实验室进行调查。

④ 对污染区域开展消毒，并对污染和事故可能带来的危害情况进行评估。

(2）较大的实验室感染，在一般实验室事故措施的基础上，应该做好以下工作：① 停止发生事故的实验室所有工作，组织专家进行调查、评估。

② 感染人员立即送定点医院隔离观察或治疗。

③ 对发生感染或泄露事件的实验室的所有实相关人员进行医学观察。

④ 事件判定后的 2 小时内报省卫生行政部门。

(3）重大实验室感染，在较大实验室事故措施的基础上，应该做好以下工作：

① 对发生感染或泄露事件的实验室进行封锁，组织专家进入进行调查、评估。② 事件判定后立即报市卫生行政部门。

④ 调查处理后，对实验室进行全面彻底消毒。

先期处置

发生感染或泄露事件的实验室应停止实验活动，并按照相关程序做好现场应急处置，生物安全委员会办公室接到报告后应该对感染事件的基本情况和信息进行核实，并负责召集单位生物安全委员会成员，对所发生的实验室差错或事故的严重程度与可能产生的危害进行分析评估，以确定实验室差错或事故性质可能造成的后果，并对受暴露的实验人员采取医学观察或隔离治疗等措施，最后根据所造成的后果的危害大小和严重程度进行感染事件等级认定。具体措施如下：

（一）封闭被病原微生物污染的实验室或者可能造成病原微生物扩散的场所；

（二）开展流行病学调查；

（三）对病人进行隔离治疗，对相关人员进行医学检查；

（四）对密切接触者进行医学观察；

（五）进行现场消毒；

（六）其他需要采取的预防、控制措施。

具体应急预案、刺伤、切割伤或擦伤处理： l）立即停止工作。2）伤口挤血，水或消毒剂冲洗消毒。3）除去防护服并进行医学处理。4）去急诊室诊治，急诊室对伤者进行必要的检查和处置，填写“异常事件报告单”并报质最管理科，记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录、潜在感染性物质的食入处理：

l）立即停止工作。2）应脱下防护服并进行医学处理。3）观察和必要的预防治疗，去急诊室诊治，对伤者进行必要的检查和处置，填写“异常事件报告单”并报质量管理科，记录受伤原因和相关的微生物。4）要报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留完核适当的医疗记录。、潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）处理：

l）所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。2）应当立即通知实验室负责人。3）为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室。4）应张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在实验室负责人的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。5）填写 《 异常事件报告单 》。、容器破碎及感染性物质的溢出处理：

l）做好个人防护，戴手套，穿防护服，必要时戴眼罩和护目镜。2）用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。3）然后在上面倒上消毒剂，通常用施康。由外向内进行处理。4）并使其作用适当时间（30 分钟），将布、纸巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片应用镊子清理。5）然后再用消毒剂擦拭污染区域。6）如果用簸箕清理破碎物，应当对他们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。7)如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。8）填写 《 异常事件报告单 》。、未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂处理：

l）如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭（例如 3Omin）使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭（例如 30min）。2）所有操作都应戴厚实的手套（如厚橡胶手套），必要时可在外面戴一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子，或用摄子夹着的棉花来进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀 J 性的、己知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，然后回收。3）离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭，并再次擦拭，然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。4）填写 《 异常事件报告单 》。、在可封闭的离心桶（安全杯）内离心管发生破裂处理：

l）所有密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。）如果怀疑在安全杯内发生破损，应该松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌。3）填写 《 异常事件报告单 》。、有腐蚀、有毒、含微生物样品进入眼睛、污染台面处理：

l）若有上述样品进入眼睛，立即用护眼冲洗器仔细冲洗。2）冲洗后去眼科就诊，对伤者进行必要的检查和处置，填写“异常事件报告单”并报质量管理科，记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录。3）若污染台面，即用 1 : 100 施康或 0.5 ％过氧乙酸消毒。

事件综合评估

根据生物安全事件报告的具体情况，确定评估主体；领导小组组织专家小组对评估主体进行危害评估。

（一）生物安全事件原因调查。对生物安全事件发生的具体原因、应急处理情况、接触人员的感染情况、引起疾病流行的可能性等进行调查。

（二）标本、样品采集和检验。对污染的物品、区域、接触人员和可疑感染的生物进行采样和检测，以评估确定事件的性质和危害。

（三）生物安全事件危害范围评估。根据引发生物安全事件的病原微生物具体种类、接触人员和泄露范围，评估确定生物安全事件危害范围。现场调查和取证人员要采取适宜的防护措施。疫情的解除

（四）解除封锁的条件是：对污染区进行必要的安全处理，如对病原体进行彻底的消毒或销毁；根据情况进行必要的杀虫、灭鼠；对小隔离区进行终末消毒，并从最后一例病人算起，经过一个最长潜伏期仍无新的病例发生，报请批准封锁的主管部门解除封锁。

责任与奖惩

（一）突发事件应急处置工作实行责任迫究制。

（二）对突发事件应急管理工作中做出突出贡献的集体和个人要给予表彰和奖励。

（三）对应急管理工作中出现的失职、读职行为，应追究其责任

保障措施

（一）不断完善实验技术操作规程和技术规范，强化实验室规范化建设。

（二）加强对涉及实验室生物安全的监测与预警、疫情分析评估、流行病学调查、消毒隔离技术等方面的业务培训。加强实验室业务人员法制化管理和法律责任方面的。

（三）病原微生物实验室设立单位要自觉遵守国家相关的法律法规，定期开展自查，不断完善实验室检查制度。

第五篇：微生物室菌种管理及应急程序

检验科微生物室菌种管理规定及应急预案

1.0目的

为确保微生物实验室菌种保管安全，避免微生物实验室菌种生物安全事故的发生。2.0范围

适用于微生物实验室所有工作人员及管理人员。3.0职责

3.1微生物室组长负责微生物实验室菌种管理。3.2科室主任为生物菌种保管安全 状立即去急诊科治疗。

5.3 当发现菌株丢失时，立即报告实验室负责人，经调查，若确定丢失时，由实验室负责人上报科室负责人，并上报医院感染管理科进一步调查处理。6.0支持文件

其它未尽事项严格按照下列文件执行：《中华人民共和国传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《中国医学微生物菌种保藏管理办法》、《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法》。