第一篇：微生物菌群的选择及培养(含总结)
微生物菌群的选择与培养
针对所学的关于水污染治理的有关理念，加之对环境微生物这门课程的理解，此次环境微生物这门课程的设计我选用的微生物菌群是对保健、水产、养殖、种植甚至环保等方面都有益的菌群。
一、有益微生物的概念（“EM”菌群）
“EM”是英语Effective和microorganisms的缩写，意为有益微生物群，是日本琉球大学的比嘉夫教授于1983年研制成功的微生物工程技术中综合性最强的新创造。有益微生物群由整个生态系统都存在的五大类微生物（光合细菌、乳酸菌、放线菌、酵母菌、发酵型丝状菌）中的多种有益微生物组成。
这些微生物组合在一个统一体中互相促进，共同组成一个复杂而稳定的具有多元功能的微生物生态系统，在水族箱使用后，可抑制有害微生物，特别是病原菌和腐败菌的活动，从而改善水质，并改善鱼类消化道细菌群落，促进鱼类健康快速生长。其功能要超过硝化细菌和光合细菌。
二、有益微生物群的主要成分
1、光合菌群（好氧型和厌氧型）如光合细菌和蓝藻类。属于独立营养微生物，菌体本身含60％以上的蛋白质，且富含多种维生素，还含有辅酶Ｑ
10、抗病毒物质和促生长因子；它以土壤接受的光和热为能源，将土壤中的硫氢和碳氢化合物中的氢分离出来，变有害物质为无害物质，并以植物根部的分泌物、土壤中的有机物、有害气体（硫化氢等）及二氧化碳、氮等为基质，合成糖类、氨基酸类、维生素类、氮素化合物、抗病毒物质和生理活性物质等，是肥沃土壤和促进动植物生长的主要力量。光合菌群的代谢物质可以被植物直接吸收，还可以成为其它微生物繁殖的养分。
2、乳酸菌群（厌氧型）以嗜酸乳杆菌为主导。它靠摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类形成乳酸。乳酸具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动和有机物的急剧腐败分解。乳酸菌能够分解在常态下不易分解的木质素和纤维素，并使有机物发酵分解。乳酸菌还能够抑制连作障碍产生的致病菌增殖。
3、酵母菌群（好氧型）它利用植物根部产生的分泌物、光合菌合成的氨基酸、糖类及其它有机物质产生发酵力，合成促进根系生长及细胞分裂的活性化物质。酵母菌在有益微生物群中对于促进其它有效微生物（如乳酸菌、放线菌）增殖所需要的基质（食物）提供重要的给养保障。此外，酵母菌产生的单细胞蛋白是动物不可缺少的养分。
4、革兰氏阳性放线菌群（好氧型）它从光合细菌中获取氨基酸、氮素等作为基质，产生出各种抗生物质、维生素及酶，可以直接抑制病原菌。它提前获取有害霉菌和细菌增殖所需要的基质，从而抑制它们的增殖，并创造出其它有益微生物增殖的生存环境。放线菌和光合细菌混合后的净菌作用比放线菌单兵作战的杀伤力要大得多。它对难分解的物质，如木质素、纤维素、甲壳素等具有降解作用，并容易被动植物吸收，增强动植物对各种病害的抵抗力和免疫力。放线菌也会促进固氮菌和VA菌根菌增殖。
5、发酵系的丝状菌群（厌氧型）以发酵酒精时使用的曲霉菌属为主体，它能和其他微生物共存，尤其对土壤中酯的生成有良好效果。因为酒精生成力强，能防止蛆和其他害虫的发生，并可以消除恶臭。
三、“EM”菌群的培育
1、配方
配方一：100公斤干净的水、EM菌种5公斤、红糖5公斤、尿素0.6公斤、磷酸二氢钾200克、维生素C50克；
配方二：100公斤干净的水、EM菌种3公斤、光合细菌2公斤、红糖4公斤、尿素0.4公斤、磷酸二氢钾150克、维生素C50克（此配方不需要长期使用，3个月使用一次即可，平常建议采用配方一）。
2、材料选择
a、塑料桶：选择容量在20公斤以上的塑料桶（卫生条件要求塑料桶能容装饮用水的标准）；
b、红糖：商品名叫赤砂糖，也可用糖蜜代替；
c、EM菌种：如果你现在想采用新方法培育，建议从实验场引进新菌种，如果你是引进的新菌种，半年内可不需要添加光合细菌；
d、光合细菌：耐低酸度的光合菌，一般光合细菌适合生存在PH值5-8的范围；
e、磷酸二氢钾：纯度在90%以上的，不可用肥料用的磷酸二氢钾代替； f、D-异抗坏血酸：为抗氧化剂，也叫维生素C，是一种食品添加剂，不可用药品的维生素C代替，它能延长EM的保质期、提高动植物的抗疾病能力等作用；
g、尿素：化肥用的即可；
h、水：干净的水，能够饮用的水，自来水需要放置2天以上才能使用，冷开水或纯净水最好。
3、培育方法
把水放入塑料桶中加入红糖→加入EM菌种和光合细菌→尿素和磷酸二氢钾分别溶化后加入→摇均→密封→光照下培育，温度保持在25-35度→每天摇动两次，每次透气半小时→第三天加入D-异抗坏血酸，摇均→第四天停止光照，检测PH值，达到3.8以下培育完成，未达到继续培育→开盖透气，三天后完成培育，密封保存或使用。如果温度偏低、光照不足，培育时间肯定会延长，还有可能造成失败，使用效果也有影响。是否培育完成凭PH测试纸测试PH值在3.8以上即合格。培育中是否有悬浮物产生都是正常情况，一般温度高悬浮物容易产生。如果培育温度偏低，培育的EM气体将减少。培育中有异味是很正常的，PH合格后再透气两天如果异味还很严重，就有可能培育失败了。冬季温度偏低小批量培育可做一个较大点的纸箱或木箱，把培育桶放在箱中，几个桶的中间吊一个60W的灯泡，封好箱盖，即可保证光和温度了，但要注意防火安全。
附录： 有益微生物群在环保业的具体用法
一、机理与作用
利用微生物治理污水和城市生活垃圾是今后环保产业的主攻方向。作用机理是以光合菌群和酵母菌群为主导，协同其它有益微生物共同作用，产生抗氧化物质，通过氧化还原发酵等途径，分解氧化有机物，把有害有毒转化为无害无毒，变有害为有用。在厕所去臭、生活垃圾利用、生活和工业废水治理等环保领域，应用前景广阔且成本低廉。
二、处理方法
目前常用有益微生物群治理环境的方法是用有益微生物群稀释液喷布及有益微生物群发酵料的撒放，采取三级净化槽法、生物膜法、水面喷施法、垃圾发酵法等。
1．三级净化槽法
循环处理反应系统一般是设置净化槽。净化槽由三个大槽组成，排出的污水先贮入第一槽，由有益微生物群微生物进行分解，第二个槽污水中的有机物分解成水和ＣＯ2（二氧化碳），第三个槽将处理过的水再送回最前面的处理槽，如此循环，可增加有益微生物的密度，提高水的抗氧化力。投放比例：第一净化槽按污水接受量的千分之一投入，第二及第三个槽均按水量的万分之一投入（可依据水质调整倍率）。每周投入一次。2．生物膜法
为使有益微生物群微生物在水底滞留繁殖，可用多孔砖石、木炭、竹炭、沸石等在10-50倍有益微生物群稀释液中浸泡2 － 4 天后，抛入污水和放置于出水口。10天换一次。净化有一定流速的水域时，如河床没有淤泥，应投置不会冲走的特制水泥块作为生物膜。3．水面喷施法
按总水量100000∶1 的比例取有益微生物群（加等量红糖），配制100 倍有益微生物群稀释液，密封发酵12小时后，泼洒水面。河流湖泊净化时，水能保持流动状态更好。
4．有益微生物群处理垃圾
（1）有益微生物群提高垃圾处理能力
在垃圾堆埋过程中，如以有益微生物群喷洒处理，可以有效地解决上述的问题，方式包括在垃圾收集时喷或当垃圾运输到垃圾场时喷，两者兼用效果更佳，有益微生物群对垃圾的主要作用有以下几方面：
a.加速垃圾的发酵分解，在短时间内减少堆积垃圾的体积，变相增加总垃圾堆埋量的数目。
b.抑制腐败细菌的生长，改善有机物的分解途径，减少氨和琉化氢的释放量和氨类物质的产生，同时亦减少沼气量。
c.由于有效微生物作用会消耗水份，从而减少污水产生的数量，也改善了污水的水质，减低污染成份，方便将来污水的处理。
d.抑制蚊蝇的蛹、蛆孵化，达到减少蚊蝇孳生的长远效果，减少疾病。e.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的产生。f.促进堆填区土壤化和再生的过程。
（2）有益微生物群垃圾处理技术
在开始处理的前3个月，按每天进场200吨垃圾计算，每天向垃圾喷洒1吨的有益微生物群稀释液，如果垃圾场内有排沼气管道，可用有益微生物群稀释液灌入垃圾底层以增加处理效果，以后按处理进度而定，每天按垃圾数量及垃圾质素而定，向新到垃圾喷洒0.3—0.5吨的10%有益微生物群稀释液，若要增加灭蚊蝇效果，有益微生物群稀释液中可加入约0.5—1%按叶，冬青或其它植物提取剂，以增加对成虫的杀灭效果，此种提取物对人畜无害，绝对合乎环保和卫生要求（以上处理为100倍有益微生物群稀释液）。
（3）使用有益微生物群处理垃圾场后的效果
a.7—10天内垃圾场的旧垃圾臭味会明显减少甚至消失，新到垃圾如在垃圾收集站进行有益微生物群处理，臭味亦会明显降低。
b.苍蝇捕集率会于7天后开始减少，配合植物提取剂60%以上。
c.沼气产生量会于30天内明显减少，长期使用沼气量可减少40%以上。d.垃圾渗滤液排出量会卡30天内开始减少，COD及BOD 值稳定下降，数值视垃圾场使用年龄及垃圾性质而定。
（4）综合效益分析
a.减少垃圾污水产生量，改善污水的水质，减低将来污水的处理费用。b.加速垃圾分解，减少体积，增加总垃圾堆埋量而减少垃圾处理成本。c.减少臭气释放量，减少蚊蝇，提高人员的健康和工作效率。d.减少沼气，避免因沼气意外而造成的经济和生命损失。
e.减少污水产生的数量，改善了污水水质，减低垃圾污水的污染。f.加速垃圾分解，减少垃圾的体积，促进堆填区土壤化和再生的过程。g.抑制腐败细菌的生长，降低沼气，氨和琉化氢的产生，减低大气污染。h.抑制蚊虫的蛹孵化，长远达到减少蚊蝇和疾病的效果。i.减少杀虫剂的使用。
j.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的产生。
实习心得
通过这次为期一个星期的环境微生物课程设计，不仅让我从各方面了解了微生物的类型及培养方式，还让我认识到微生物的不同菌群对我们水利类专业的贡献。
首先，本次微生物的实习，让我对于书本上的知识有了全面的认识，微生物不仅在微生物学上很重要，它还和我们的生活息息相关，就我这次所选用的“EM”菌群而言，它广泛运用于养殖和生活用水、城市垃圾的处理等各方面；其次，也让我明白不能单方面从书本来浅显的理解微生物，微生物不是分类学上的名词，而是囊括了细菌、真菌、病毒等一大类生物群体，我们不仅要了解各类型微生物的结构、繁殖、培育等，还要了解它的生活习性以及对环境的利弊；最后，综合对微生物各方面的了解，我们还要把有益于人类的各种微生物群充分运用于生活中。
在这次课程设计中，我也发现了很多连我自己也弄不明白的盲点，除了运用老师教导的知识外，我也查看了各类书籍及资料，已达到更近一步了解微生物的目的。就拿微生物菌群的培养来说，不同类型的微生物培养基选用的营养物质也有差异，还有外在环境条件对微生物菌群的影响等等，我们必需要综合各方面考量，使微生物培育达到更好的效果。
总的来说，这次实习不仅完善了我对书本上知识的学习，达到了学以致用的作用，还更好的来发现了自己的不足，从而加以弥补，也让我了解到微生物学的重要性。
第二篇：微生物,痰培养相关总结
关于痰标本
1.痰标本中需要检测的主要致病菌：肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌（可引起原发性肺炎）、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌（各种器官的化脓性感染，呼吸道的有气管炎、肺炎脓胸等）、铜绿假单胞菌(条件致病菌，院感主要病原菌之一，在人体抵抗力低下时可引起呼吸道感染等感染，该菌引起的慢性肺部感染占有较大比例)。
2.非病原菌：酵母菌、草绿色链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌。3.省医院对痰标本的处理过程：
1）每个接收的痰标本进行痰涂片（老师称之为痰质控片），镜下观察痰标本是否合格。合格的痰标本标准为WBC>25/LP,EPC<10/LP或二者比值大于2.5。由于种种原因，不合格的痰标本是不会退回的。痰质控片记录的相关信息包括：每低倍镜下的WBC数和EPC数，若查见细菌，报告细菌的种类（如G+C、G-b）、排列方式、数量（几个+）。还要记录真菌和孢子的镜检结果。不合格的痰标本依然会接种（若申请单上有培养）。痰质控片的作用：在筛查标本接种出来的平板时根据痰质控片的结果进行相关分析。
2）痰标本接种：接种三种平板，分别是血平板、麦康凯平板、巧克力平板（安图筛选嗜血杆菌的平板，名称为CAH）。
3）孵育和接种平板筛选：接收的痰标本均要两夜的孵育。第一夜过夜孵育后取出进行平板筛选，做好相关记录。第二次过夜孵育后取出再筛选一次，和前一天的记录相比较，记录或改正相关筛选结果。孵育两夜的意义在于防止某些生长缓慢的致病菌被漏检。4.关于如何筛选需要进行下一步检验的标本 1)数量标准
手工接种：血平板上第四区有5个菌落，表示有105，已经达到治病的数量。可以继续往下做鉴定和/或药敏。
仪器接种：因使用消化液，计数需有107（痰标本使用消化液，使很多胞内菌释放，上机前都是加过生理盐水的，经过这两步那么这个判断治病的数量级是如何得出的，经验，实验结果？）。2)其他
在微生物室的老师经过一定时间的经验积累，对于常见的致病菌，根据其菌落形态就可以将其鉴别出来。比如通常情况下在血平板上G+菌的菌落较小，圆形，光滑，而G-菌的菌落较大，扁平，粗糙。而痰标本接种后的血平板上哪些细菌需要进行下一步试验不仅需要相应的理论知识作基础还需要经验积累。
在血平板上达到量的细菌，还要看是否是优势生长和纯量生长。但是优势生长的细菌并不一定是致病菌，如培养出来的全是口腔的正常菌群，相对来说，必定有优势生长得细菌。所以优势生长得细菌要是相关的致病菌。
在引起呼吸道感染的G-b有肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等。是否痰标本培养出G-b就一定是致病菌？答案是痰中出现革兰阴性菌不一定就是致病菌。因为某些病人，如ICU病人，在呼吸道插管存在的情况下，呼吸道是与外界相通的，这时就会定植很多细菌，如铜绿假单胞菌，这些细菌只是定植但不会引起感染。如果一个病人来自ICU，且是第二次或者多次做痰培养的时候，培养出大量纯量的铜绿假单胞菌或者鲍曼不动杆菌（这两种菌常从ICU病人分离到）就需要考虑是定植菌。省医院遇到这样的情况只会报一个该细菌的量，而不是进行鉴定和/或药敏。判断一株细菌是不是致病菌，单独在实验室很难做到，必须与临床联系。有的时候，即使从痰标本中只分离到根本不占优势几个菌落的革兰阴性或阳性菌，这种细菌也可能是真正引起感染的致病菌。痰标本的培养、鉴定和药敏结果通常情况下对临床医生只是起到一个辅助的作用，如果病人有症状，也分离到相应的致病菌，那么可以帮助临床医生肯定诊断。如果培养结果和临床症状不相符合，临床医生会从多方面考虑原因（送检标本不合格，某种细菌实验室检出能力低）并且经验性用药（病人有明确的感染症状）。
总之，致病菌的筛选不仅需要检验工作者的丰富经验还需要多和临床沟通，多了解临床才能做好。
（整理的报告内容根据省医院老师的讲解和相关资料查询而得，不一定完全正确，而且必定不全面。在接下来的学习中会去完善。有错误的地方希望郭老师指出！）
第三篇：微生物实验关于空白染菌的几个情况总结说明
微生物实验关于空白染菌的几个情况总结说明
一、空白平板上有细菌生长的原因比较多
1、培养基有可能没有灭彻底，灭菌锅没坏的话这个可能性应该不大
2、做空白用无菌水，对吧，是灭菌的蒸馏水。
3、培养基空培养，验证培养基配制的没有问题
4、无菌操作。如果染菌的在培养皿边缘，则是操作过程有误，比如接菌时碰到下皿了；如果不是边缘，就是无菌水没灭彻底
1、培养基是否灭菌彻底?培养基是否是再次使用?培养基的包装情况和保存时间是否太久了
2、生理盐水是否灭菌彻底？配制时间是否太久了？
3、平皿、吸管是否灭菌彻底？保存方式和时间
4、操作时，无菌操作是否存在问题？
5、实验室环境中微生物的污染状况？可以用平皿沉降法对空气菌落作一下测定。
二、检测自来水的细菌总数时,为什么做空白对照试验?如果空白对照试验有少数几个菌落说明
（1）阴性对照试验目的：
1、如果试验中用到缓冲液、稀释液等，可以说明该些缓冲液稀释液是无菌的，不影响正常实验结果的。
2、可以说明在整个试验操作过程中，步骤方法操作都得当整确，无微生物带入。
（2）因此，如果阴性对照平板上有菌落，可能有如下原因：
1、缓冲液、稀释液被污染
2、实验过程中操作不当，将阳性菌大肠埃希菌不慎带入阴性对照
3、试验环境差，比如洁净室无菌空气被污染；或者生物安全柜、净化工作台失效。
以排除其他方面带来的细菌，比如说来自培养基或接种时的空气等，如果空白对照试验内有少数菌落，则检测的自来水细菌数内要扣除对照组的几个菌落。
三、空白的作用
1、为了验证实验前的准备灭菌是否有效、2、和过程中是否有污染
3、主要是操作不当引起的污染引起的污染，如果空白有菌落说明实验失败，结果不可信，最好重做。
第四篇：关于用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物入境检疫暂行规定
【分类号】 40200119850
3【标题】 卫生部、农牧渔业部、中国专利局颁发《关于用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物入境检疫暂行规定》的通知
【时效性】 有效
【颁布单位】 卫生部＼农牧渔业部＼中国专利局
【颁布日期】 19850910
【实施日期】 19850910
【失效日期】
【内容分类】 专利申请审批程序
【文号】
【名称】 卫生部、农牧渔业部、中国专利局颁发《关于用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物入境检疫暂行规定》的通知
【题注】
【章名】 前言
中国国际贸易促进委员会、中国专利代理有限公司、上海专利事务所、中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心、中国典型培养物保藏中心、各卫生检疫所、动植物检疫所、站：
根据《中华人民共和国国境卫生检疫条例》、《中华人民共和国进出口动植物检疫条例》和《中华人民共和国专利法实施细则》等有关规定，现制定《关于用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物入境检疫暂行规定》，现发给你们，请遵照执行。
【章名】 附件：卫生部、农牧渔业部、中国专利局关于用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物入境检疫暂行规定
一、外国申请人向我国提出涉及微生物的专利申请，将微生物菌（毒）种、培养物交中国专利局指定的保藏单位保藏的，应事先由其委托的涉外专利代理机构向卫生部或农牧渔业部办理入境许可审批手续。
与人、环境卫生有关的微生物菌（毒）种、培养物，由卫生部审批；与动物、植物有关的微生物菌（毒）种、培养物，由农牧渔业部审批；与人畜共患性疾病有关的，应由卫生部和农牧渔业部协商后联合审批。审批单位一般应在收到微生物菌（毒）种、培养物入境申请后一周内，作出决定，并通知申请人。
二、审批单位根据国家颁布的有关法令、条例进行审批。对微生物菌（毒）种、培养物进口时，要求包装绝对安全，不得造成污染。
三、涉外专利代理机构在办理入境许可审批手续时，应向审批单位提交申请入境的微生物菌（毒）种、培养物的名称、来源、数量、用途，对人和动植物有否危害等简要资料。
四、经审批单位同意，涉外专利代理机构方可通知外国专利申请人将微生物菌（毒）种培养物寄入我国或携带入境。进口时涉外专利代理机构应将外国委托人的有关证明及审批单位的许可单向进口的国境卫生检疫机关或口岸动植物检疫机关报检。国境卫生检疫机关或口岸参锛煲呋亟邮鼙旌螅笆辈檠椋判小Ｈ舴⑾纸诘奈⑸锞ǘ荆┲帧⑴嘌镉胫ぜ环虬安环弦螅从枰酝嘶鼗蛎皇障佟?/p>
五、微生物菌（毒）种、培养物保藏单位应对微生物菌（毒）种、培养物妥善保藏，确保安全，严防扩散。
六、任何人要求获取用于专利程序的微生物菌（毒）种、培养物样品供国内使用的，除按中国专利局《用于专利程序的微生物保藏办法》办理外，均应经卫生部或农牧渔业部批准。
第五篇：微生物室菌种管理及应急程序
检验科微生物室菌种管理规定及应急预案
1.0目的
为确保微生物实验室菌种保管安全，避免微生物实验室菌种生物安全事故的发生。2.0范围
适用于微生物实验室所有工作人员及管理人员。3.0职责
3.1微生物室组长负责微生物实验室菌种管理。3.2科室主任为生物菌种保管安全 状立即去急诊科治疗。
5.3 当发现菌株丢失时，立即报告实验室负责人，经调查，若确定丢失时，由实验室负责人上报科室负责人，并上报医院感染管理科进一步调查处理。6.0支持文件
其它未尽事项严格按照下列文件执行：《中华人民共和国传染病防治法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《中国医学微生物菌种保藏管理办法》、《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法》。
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