微生物实验室SOP文件

第一篇：微生物实验室SOP文件

微生物实验室SOP文件

目录

01 试剂贮存和配制区工作制度 02 标本处理区工作制度 03 细菌自动分析区工作制度

04 试剂贮存和配制区标准操作程序 05 标本处理区标准操作程序

06 细菌自动分析区标准操作程序 07 紫外消毒标准操作程序

08 消毒液配制使用标准操作程序 09 普通冰箱使用标准操作程序 10 超低温冰箱标准操作规程 11 洁净工作台使用操作规程 VITEK32型自动分析系统标准操作程序 13 移液器使用标准操作程序 14 高速离心机操作标准操作程序 15 冰箱维护和保养标准操作程序 16 电热恒温水浴箱操作程序 17 洁净工作台维护和保养程序 18 可移动紫外消毒车使用操作程序 19 加样器校准标准操作程序 20 离心机维护保养操作程序 21 温度计校准程序 22 试剂的质检操作程序

23_微生物实验室岗位职责(暂行)24 临床标本的保存程序 25 普通培养阴性操作程序 26 真菌培养阴性操作程序 27 苛养菌培养阴性操作程序 28 抗酸杆菌培养阴性操作程序 29 支原体培养检验操作程序 30 临床检验及收费程序 31 微生物检验收收费价格

01、标本处理区工作制度

进入本区需穿工作服、工作鞋。

本区只能进行：临床标本的保存，标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行。在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒。非本实验室工作人员未经允许不得进入。

02、试剂配制和无菌区工作制度

进入该区需穿专用工作服和工作鞋。

本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。非本实验室工作人员未经允许不得进入。

无菌室公能用于分装培养管或倒制平板培养基操作。

使用前以紫外灯消毒至少30分钟，定期用乳酸熏蒸，彻底消毒。无菌室仅限操作者进入，操作时严格关门。

室内备有空调设备，以保证不因温度而影响工作。

03、试剂配制和无菌区工作制度

进入该区需穿专用工作服和工作鞋。

本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。非本实验室工作人员未经允许不得进入。

无菌室公能用于分装培养管或倒制平板培养基操作。

使用前以紫外灯消毒至少30分钟，定期用乳酸熏蒸，彻底消毒。无菌室仅限操作者进入，操作时严格关门。室内备有空调设备，以保证不因温度而影响工作。

04、仪器自动分析区工作制度

进入本区需穿专用工作服和工作鞋。

本区只能进行：微生物上机鉴定与药敏分析、血培养仪增菌培养、培养基溶解与保温、相关实验记录与报告书写、打印；其它操作不得在此区进行。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁。非本实验室工作人员未经允许不得进入。

05、试剂贮存和配制区标准操作程序

1.目的：规定在本区进行的工作，确保试剂正确贮存和制备。2.适用范围：试剂的贮存和制备。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并遵守本室相关SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4 程序：

4.1 实验人员进入该区须穿本区专用工作服。实验中须戴手套、工作鞋。4.2 实验室所购试剂经验收登记后，按说明书中的要求贮存。4.3 记录温湿度计读数。

4.4 记录冰箱的温度计读数。根据当天的标本验收登记表，取出当天实验须配制和使用的试剂放置于即用冰箱，其余试剂要立即收好放回贮藏冰箱内。4.5 不同厂家的试剂勿混用，同厂家的不同检测项目试剂盒中的相同试剂也不宜混用，除非厂家有特别说明。4.6 做好详细实验记录。

4.7 实验完毕，清洁实验台面。

4.8 每周一清点库存试剂，看有无过期或将近到期的试剂，或作报废处理或排列优先使用，避免浪费，然后记录试剂的详细保存情况。5.引用的文件及表格： 5.1 项目SOP：

5.2 实验室清洁程序： 5.3 冰箱温度记录表： 5.4 温湿度计记录表：

06、标本处理区标准操作程序

1.目的：规定在标本制备区内所进行的工作及其操作。2.适用范围：所有在本区内进行的工作。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

4、标准操作：

4.1.1 实验人员进入该区须穿本室专用工作服 4.1.2 实验中须使用一次性鞋套 4.1.3 戴手手套

4.1.4 手套需常更换每四小时换一次。

4.2 从试剂贮存和准备区取出的试剂放入即用冰箱室试剂存放专区暂存。4.3 记录温湿度计读数。

4.4 记录恒温箱的温度计读数。

4.5 临床标本的接收、保存，细菌手工鉴定或上机前处理在本区内进行。4.6 标本的接收处理和保存按临床标本的管理程序进行：

4.7 不同检测项目的样本核酸的提取和保存按相应检测项目的SOP进行。

4.8 标本接种或涂片在本区的标本处理台内进行，接种后培养基按要求进行培养。菌落观察和处理在生物安全柜内进行。4.9 详细做好实验记录和仪器使用记录。4.10 保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒程序进行清洁、消毒工作。

5.引用的文件及表格

5.1 临床标本的管理程序进行： 5.2 项目SOP：

5.3 实验室清洁程序： 5.4 恒温箱温度记录表： 5.5 温湿度计记录表：

07、细菌自动分析区标准操作程序

1.目的：规定在本区进行的工作，确保靶核酸扩增的准确性和有效性。2.适用范围：血培养、自动分析和报告签发。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.标准操作：

4.1 实验人员进入该区须穿本区工作服。实验中须戴手套、帽子，手套需常更换。4.2本实验室采取VITEK32微生物自动分析技术，因此，微生物自动鉴定和分析和肥达氏试验、外菲氏试验等均在本区内进行。

4.3 鉴定板在标本处理区准备后带入该区，放入充液箱充填，充填菌悬液后加塞，余液连同试管放入消毒桶中消毒，由工人过后洗涤回收试管。

4.4 每月必须进行至少一次所有试卡的质控，每新到的批号试剂要进行质控，过关方能投入使用。

4.5 依据不同检测项目SOP要求设定微生物检验工作程序，并记录备案；未经实验室负责人允许，不得随意更改。

4.6 检测报告的签发依据检测结果报告程序： 4.7 做好仪器和实验记录。

4.8 保持室内空气流通，且在实验完毕后，清洁、消毒工作台面。5.引用的文件：

5.1 检测结果报告程序： 5.2 项目SOP：

5.3 实验室清洁程序：

08、紫外消毒标准操作程序

1.目的：每天实验后，下班后对工作区进行必要的紫外线消毒一小时，保正实验室的清洁。

2.适用范围：适用于本室各工作区中按装于天化板上的紫外线消毒灯。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序：

4.1 实验结束后先对实验室进行必要的清洁工作；

4.2 根据需要设定时间，通常为30分钟，根据需要适当延长时间。4.3 关闭电源开关；

4.4 整个紫外线消毒过程中，相关工作人员不能离开实验室，以防火灾发生。

09、消毒液配制使用标准操作程序

1、目的：配制消毒液，用消毒液擦拭实验台面、用具及浸泡实验废弃物。

2、适用范围：分子生物实验室的工作人员。

3、职责：

3.1实验室工作人员应及时配制消毒液，熟知并遵守本SOP，严防污染发生。3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

4、工作程序：

4.1确定要配制消毒液的量。

4.2 将36%的次氯酸钠配制成10%的稀溶液。以1000毫升为例，取278毫升的36%的次氯酸钠母液，加蒸馏水至1000毫升。

4.3 消佳净：20g加水4000ml,作用20-30分钟。

4.4 所配制的消毒液只限在当天内使用，隔夜如使用时应根据本SOP重新配制。

10、普通冰箱使用标准操作程序

1.目的：确保冰箱的正常使用。

2.适用范围：本SOP适用于本室各类用途使用的普通冰箱、冰柜。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序：

4.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度开关置于4℃，冷冻室温度开关置于-20℃，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。

4.2关机：若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作：（1）关闭冰箱电源，并拔下电源插头。

（2）清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。

（3）用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用10%次氯酸钠液擦洗一次。（4）保持冰箱门打开待其自然干燥。5.引用的表格

5.1 冰箱温度记录表：

11、超低温冰箱标准操作规程 1.目的：确保低温冰箱的正常使用。

2.适用范围：本SOP适用于 XXX 公司的 XXX 型超低温冰箱。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序

4.1 接通电源，将冰箱的开关置ON位置，此时温度显示屏显示冰箱的实际温度，且数字不停地闪烁。

4.2 温度设定：以调节冰箱温度为-70℃为例说明，按SET键，温度指示显示-85℃，且“8”闪烁，按“↑”键直至“8“变为“7”；按“→”键，此时温度指示为“-75℃”，“5”闪烁，按“↑”键直至“5“变为“0”，按SET键，此时温度指示“-70℃”，且不闪烁。

4.3 设定温度时应注意，一般应以10℃递减方式进行，即每次设定的温度低于冰箱实际温度10℃，待冰箱达到设定温度时再进行调节，直至达到所需温度。4.3 如超低温度遇较长时间停电，其温度显示会不断闪烁，且报警指示灯（ALARM）也闪烁，此时应按上述方法调节。

4.4 由冰箱管理人或其委托人每工作日记录冰箱温度，冰箱温度记录表贴于冰箱门，每月更换1次，存档。

4.5 超低温冰箱由专人保管，试剂和物品应按指定位置存放。

4.6 超低温冰箱全室共用，若室外人员需存放试剂或标本，须经管理人同意。5.引用的表格：

5.1冰箱温度记录表：

12、洁净工作台使用操作规程

1.目的：正确使用洁净工作台。

2.本SOP适用于实验室使用的所有国产医用洁净工作台。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序：

4.1 新安装或长期未使用的工作台，使用前必须用超净真空吸尘器或不产生纤维的物品认真进行清洁工作。

4.2 接通电源，使用前应提前15~30分钟同时开启紫外灯和风机组工作。4.3 当需要调节风机风速时，用工作台操作面板上的风速调节钮进行调节。风机、照明均由批示灯指示其工作状态，工作时，发光。

4.4 工作台面上禁止存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰。4.5 禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免作明显扰动气流的动作；禁止在预过滤进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少，降低净化能力。

4.6 使用结束后，用消毒液清理工作台面后打开紫外灯，15~30分钟后关闭紫外灯，关闭洁净台电源。4.7长期不使用的工作台请拨下电源插头。

13、移液器使用标准操作程序

1.目的：正确使用移液器，确保移液的精确性。2.适用范围：本实验室使用的可调式移液。

3.职责：实验室工作人员必须严格按照本SOP进行操作。4.操作程序：

4.1 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。4.2 装上配套的Tip。4.3 前进移液法

4.3.1 将按钮压至第一停点位置；

4.3.2 将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。

4.3.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。

4.3.4 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换管嘴继续移液操作。4.4 倒退移液法：适用于高粘度液体及/或易起泡沫液体的移液。4.4.1 将操作按钮向下压至第二停点位置。

4.4.2将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下2~3mm深处，然后慢慢松开钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。4.4.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。

4.4.4遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉，或者放回原来的容器中。4.5重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。4.5.1将操作按钮向下压至第二停点位置。

4.5.2将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。

4.5.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量液体仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。

4.5.4将管嘴浸入试剂液面下不远处，然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸入液体。4.5.5重复步序4.5.3和4.5.4继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。

14、离心机操作标准操作程序

1.目的：使每个工作人员能正确地使用本仪器。2.范围：本SOP仅适用于各类普通离心机。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作：

4.1 开机：接通电源，打开仪器电源开关，离心机自检。4.2 按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，平衡放入离心管，旋紧转子盖，关上机盖，此时“Open”键的指标灯亮。（如果接通电源后，机盖为开的状态，则无需此步操作）。

4.3 离心条件的设定：通过按“Temp”、“Speed”、“Time”键的上下箭头分别设定离心的温度、速度和时间。其中离心速度可分为每分钟转速（rpm）和离心力（cfg）两种，可通过同时按下“Speed”键的上下键头相互转换。

4.4 运行：离心条件设定好后，按“Start/Stop”键，离心机启动，“Open”键的指标灯灭。当达到设定的时间后，离心机自动停止，并发出提示音，“Open”键的指标灯亮，按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，取出离心管。*若进行样本的短暂离心，只需按“Short”键数秒即可。

*若需在离心过程中停止离心，则需再按一次“Start/Stop”键。

4.5 关机：离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水，关闭离心机电源，并记录离记机使用情况。

15、冰箱维护和保养标准操作程序

1.目的：对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。2.适用冰箱范围：本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作方法

4.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。4.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。4.3 冰箱内禁止存放与本实验室无关的物品。

4.4 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。

4.5 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。

4.6 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。

4.7 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。4.8 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。

5.引用的表格

5.1 冰箱温度记录表：

16、电热恒温水浴箱操作程序

1.目的：保证水浴箱工作温度恒定。

2.该SOP变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室技术负责人。3.适用水浴箱范围：电热恒温水浴箱 4.标准操作： 4.1水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。4.2在水浴箱内注入清洁温水至总高度1/2～1/3处。

4.3打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。

4.4当水槽内测定温度达到设定温度时，加热中断、指示灯熄灭，温度保持稳定。4.5在每次水浴箱使用前，放入标准温度计同时监测实际水温，以校正温度。4.6水浴箱工作温度波动范围是：预设+2 ℃范围。

4.7每天应使用水银温度计水浴箱应记录每天温度；如温度超出正常范围，该温度应划上红圈，并把修正操作记录下来。

4.8水浴箱内外应保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦拭。

4.9仪器不用时，需套好防尘罩，以免温度控制器受潮影响使用。

17、洁净工作台维护和保养程序

1.目的：对洁净工作台进行适当维护，以保证净化能力。

2.适用范围：本SOP适用于实验室使用的医用洁净工作台（BC1300型）。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.程序：

4.1 根据环境洁净程度，定期将预过滤器中的滤料拆下清洗，一般间隔时间为3~6个月。

4.2 每次使用洁净台后，均需对洁净台进行清洁。

4.3 定期（一般每半年1次）计测工作区风速，如发现不符合技术参数要求，则可调大风机供电电压。当风机组电压调到最大时，工作区风速仍达不到0.3m/s，则必须更换高效空气过滤器。（由厂家或院仪器维修人员进行）4.4 做好维护记录。5.引用的表格：

5.1 仪器设备维护保养记录表：

18、可移动紫外消毒车使用操作程序

1.目的：正确使用紫外消毒车进行消毒。

2.适用范围：适用于本室使用的ZXC型紫外线消毒车（上海跃进医用光学器械厂生厂）。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序： 4.1 打开保护门；

4.2 用手托住灯臂往上抬至需要位置； 4.3 插上电源，打开带灯开关； 4.4 根据需要设定时间； 4.5 使用完毕将按钮摁到底，同时另一手托住灯臂慢慢将灯管放进灯箱内关上保护门。

4.6 不同实验区的紫外线消毒车勿混用。5.引用的表格 5.1消毒记录表：

19、加样器校准标准操作程序

1.目的：保证加样器加样的准确性。

2.加样器范围：各种品牌、型号的固定、可调和多通道加样器。3.职责：本SOP由室负责人执行落实。4.校准程序

4.1校准环境和用具要求：

4.1.1 室温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。

4.1.2电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时为保证天平内的湿度（相对湿度60～90％），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。

4.1.3 小烧杯：5～10ml体积。

4.1.4 测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。

4.1.5 选择校准体积：⑴ 拟校准体积；⑵加样器标定体积的中间体积；⑶最小可调体积（不小于拟校准体积的1％）。(4)如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。

4.2校准步骤：

4.2.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头； 4.2.2 调节好天平；

4.2.3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头；

4.2.4 垂直握住加样器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢（1～3秒）一致的吸取蒸馏水；

4.2.5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；

4.2.6 将加样器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一档，等待1～3秒，再压致第二档，使吸头里的液体完全排出； 4.2.7 记录称量值； 4.2.8 擦干吸头外面；

4.2.9 按上述步骤称量10次；

4.2.10取10次称量值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表Ⅰ所列蒸馏水Z因子计算体积：体积=重量/Z因子 4.2.11按校准结果调节加样器 _ 4.3 新购的合格的移液器出厂前经过厂家校准，使用前无需校准。4.4 每年移液器进行校准一次，自校或由厂家有关部门校准。4.5 做好校准记录。5.引用的表格

5.1仪器设备校准记录表：

20、离心机维护保养操作程序

1.目的：对离心机进行正确的维护，以保证仪器正常运转。2.适用范围：本SOP仅适用于本室使用的离心机。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序：

4.1 离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下，再用中性去污剂（70%的异丙醇/水混合物或乙醇去污染）清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。4.2 转子的清洁：转子会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转子每月进行清洁维护。每月用中性的清洁剂清洁转子一次，并在仪器使用记录本上作好记录，以延长转子的寿命。

4.3 离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水。（此步仅适用于冷冻离心机）

4.4 离心结束后，使离心机盖打开，然后关机。

21、温度计校准程序

1.目的：保证温度计的精确性。

2.适用范围：适用于本实验室所使用的温度计。3.职责：本SOP由室负责人落实。4.程序 _ 4.1 由设备科人员送质检局对温度计进行校准。4.2 每年进行1次。

4.3 经校准过的温度计可作为微量恒温器温度校温的参照。5.引用表格：

5.1 仪器设备校准记录：

22、临床非培养标本的采集及处理操作程序

1.目的：规范临床待检标本的正确采集、送检和处理。2.适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。3.职责：

3.1 所有采集标本的人员均需按本SOP操作，实验室工作人员有责任向临床医生、护士或病人宣教。

3.2 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.操作程序

4.1 本实验室检测标本为：血清或血浆、痰、生殖道拭子标本、尿液及脑脊液和胸腹水。4.2 做好标本签收，核对检验单与标本标签是否清楚无误，送检标本是否正确、合格，给所有标本按顺序编号，按如下操作规程操作。4.3 查找抗酸菌操作:将标本置于水浴蒸箱加温杀菌30分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片，液性标本以3000转/分钟离心5分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片并标注编号后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加温(用酒精灯在玻片下来回加温置染色液冒热气，但无气泡产生为宜)染色10分钟，自来水冲洗净染液，以硫酸美兰复染2分钟，水洗凉干。

镜检与报告：油镜下查找分枝、不规则红色杆菌，按如下标准进行结果报告。1)、镜检100-300个视野（时间不少于4分钟）未发现抗酸菌，继续观察至300个视野仍未发现抗酸菌者报告抗酸菌（—）；

2)、镜检100个视野找到抗酸菌1-2条者，报告抗酸菌可疑（±），或重涂片或重送标本检查；

3)、镜检100个视野找到抗酸菌3-9条者，报告抗酸杆菌阳性（＋）； 4)、镜检10个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（2＋）； 5)、镜检每个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（3＋）； 6)、镜检每个视野找到抗酸菌多于9条者，报告抗酸杆菌阳性（4＋）。4.4 查找普通细菌操作：液性标本取离心沉淀物涂片，拭子或脓性标本直接涂布玻片并标注编号后固定。同时取大肠标准株(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌标准株（ATCC25922）涂片，一起行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗后凉干。油镜下查找菌体并观察球杆比例；观察质控菌是否合格。

4.5 墨汁染色查找隐球菌：液性标本离心取沉淀物涂片，脓性或拭子标本直接涂片并写号，以无菌接种环粘取少量印度墨汁与玻片上标本混匀，压盖玻片，先低倍镜下找到视野再转离倍镜观察。若找到透亮，圆形强折光，有厚荚膜的菌体报告墨汁染色阳性；否则报告阴性。

4.6 白带常规检查：盐水管直接将棉签点至玻片后以高倍镜检有无滴虫；涂片标注编号后固定，行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗凉干后镜检查找革兰氏阴性双球菌、霉菌或阳性球菌、线索细胞等。阴道清洁度的按如下判断标准报告：

Ⅰ度：阴道杆菌为主，并可见大量上皮细胞。

Ⅱ度：有部份阴道杆菌，但亦有部份脓细胞和杂菌，上皮细胞少见。Ⅲ度：仅见少量阴道杆菌和上皮细胞，有大量脓细胞和杂菌。

Ⅳ度：镜下无阴道杆菌，除少量上皮细胞外，主要的几乎全是脓细胞和大量杂菌。4.7 肥达试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排5排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；后稀释管再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出肥达反应试验稀释菌悬液，第一列各加入H诊断菌液0.2 ml,第二列各加入O诊断菌液0.2 ml，第三列各加入甲型诊断菌液0.2 ml,第四列各加入乙型诊断菌液0.2 ml, 第五列各加入丙型诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。

4.8 外菲氏试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排3排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；稀释管留1.0ml再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出外菲氏反应试验稀释菌悬液，第一列各加入OX19诊断菌液0.2 ml,第二列各加入OX2诊断菌液0.2 ml，第三列各加入OXK诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。5.引用表格：

5.1拒收标本记录表：

23、临床标本的保存程序

1.目的：临床标本正确保存，以便必要是复查。

2.适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。3.职责：

3.1 实验室工作人员必须熟知并遵守本SOP，室负责人监督管理。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。4.程序：

4.1 未检测的标本经预处理后及时置-20℃保存。4.2标本当天检测可置4℃保存，如当天不检测应置-20℃保存。报告发出后丢弃。4.3 原始样本在报告发出前均需置4℃保存，不得丢弃。报告发出后保存2天，以备查。保存2天后标本由室负责人酌情处理。

24、实验室岗位职责运行程序(暂行)

1.目的：确保日常工作的顺利进行。2.适用范围：本实验室工作人员。3.职责：

3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。

3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

4.为更好的使日常工作有序进行，尽可能以负责的态度，连续地完成每一个检验的发报，保证结果的可靠性，每日尽可能安排两个工作人员上班，分为两个岗位，各自的工作岗位职责如下。1岗位班、2岗位班采用轮转制。如遇有当班同事休息或值班，第3人就顶上其所上的班。4.1岗位1班(负责样本接收、核对、接种以及上日进行的鉴定和药敏结果进行分析、发报等工作)。

4.1.1 上班后检查细菌自动分析仪、血液自动培养仪工作是否正常，并做好记录。4.1.2 从冰箱内取出当天所需的各种平板：5%绵羊血平皿、中国蓝培养皿、淋病奈瑟菌培养皿、麦康凯平皿等。

4.1.3 负责对上日进行的鉴定和药敏结果进行分析。

4.1.4 负责报告单的打印、核对、登记与录入等工作，签发已核对的所有报告。4.1.5做好菌种的保存，对一些难得的菌株、标准菌株等要注意保存，并做好记录。

4.1.6接收样本：核对各样本与化验单名是否一致，核查各送检样本是否符合要求，否则立即与病房联系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。

4.1.7 样本编号：对合格的样本作出编号。4.1.8 普通培养样本的接种选择：

① 痰液、咽拭子分别接种：血平皿、麦康凯平皿； ② 尿液接种：取100μl接种血平皿、麦康凯平皿； ③ 泌尿生殖道：血平板、麦康凯平板； ④ 大便：SS或中国兰、血平板；

⑤ 各种无菌体液、脑脊液、脓液等标本：血平皿、麦康凯平皿，用增菌肉汤增菌；

⑥ 衣原体、支原体培养+药敏，按说明书接种支原体专用培养基； ⑦ 真菌培养，各种标本均接种沙保弱平皿和真菌斜面培养基；

⑧ 所有标本在接种的同时应进行涂片或对其沉渣进行革兰或抗酸染色，并做相应的记录。

⑨ 规定：临床申请单未明确注明培养目的时，一律按普通培养进行处理。标本送到实验室后特殊培养标本需在1小时内接种，普通培养标本不得超过2小时。4.1.9 培养：一般标本接种后，平板应置于35OC培养箱培养，接种过脑脊液标本、泌尿生殖道标本的血平板还应置于5%-10%CO2环境中；结核培养置于37OC培养箱培养，每星期检查两次有否可疑菌落生长。收到的普通血培养瓶(如AER)应进行瓶内气压平衡处理，厌氧培养瓶直接放入培养箱中。

4.1.10 对新到岗的实习或进修人员应认真交代本岗位的一切事宜并且认真作好带教工作。

4.1.11 厌氧培养应接种血平皿或厌氧平皿置于厌氧袋中培养，同时接种BMP进行普通培养。

4.1.12 标本培养处理后帮助2班将需要的各种标本收集并灭菌处理。4.1.13 负责配制培养基，并做好记录。5.1 岗位2班（负责菌株鉴定与药敏的分析、涂片检查标本的报告、室内质控等）。5.1.1上班后首先核查各个培养箱、冰箱的工作温度是否在设定的范围内，并做好记录；检查各种培养基及试剂的库存量，做好需配制的培养基或需领出的试剂的记录工作，对需购买的试剂、平板、培养基、染色液等应及时记录并告诉室组长，以便及时计划报主任批准。

5.1.2 做好室内常用实验试剂如触酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的质量控制，并做好记录。5.1.3 负责处理上日接种标本的菌种鉴定与药敏试验，观察血液增菌培养瓶，如发现有细菌生长，应按三级报告制度处理。观察培养平板，分析、挑取可疑菌落涂片革兰染色，能上机的做好触酶、凝固酶、氧化酶或接种蛋白胨水等相应的检查后上机，还不能上机或手工试验的则选用相应的平板分纯。用于鉴定或药敏试验的菌落应选取培养18-24小时的纯菌落进行试验。

5.1.4 对一些不适合用仪器检测的细菌，改用手工签定或用标准的K-B法进行药敏。碰到异常的耐药模式，如碰到耐万古霉素的葡萄球菌、粪肠球菌，耐泰能的大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属等报告时一定要慎重。遇到可疑多重耐药菌株时，加做特殊的药敏纸片帮助鉴定。

5.1.5负责控感标本的处理与报告，物体表面菌落计数标本应于收到标本后2小时内处理，消毒液标本应于4小时内处理。处理方法按控感监控标本处理与报告进行。

5.1.6涂片染色：

① 抗酸染色严格按照操作规程，胸腹水、尿液、脑脊液等标本应在5000转/分高速离心10分钟后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后镜检。② G-双球菌涂片，应用滚动式涂片法从波片一端涂向另一端，反复几次，火焰固定后进行革兰氏染色。

③ 脑脊液隐球菌涂片，应快速离心后倒去上清液，沉淀涂片、加相应的优质墨汁混匀后镜检。

5.1.7 对新到岗的实习或进修人员应认真交代本岗位的一切事宜并且认真作好带教工作。

6.注：岗位职责分开是相对的，同事间需要互相协作，互相帮助，共同完成当天的工作。如遇到三个人上班，则其中一个做好室内日常记录的检查完善和控制感染标本的处理工作。如遇一个人上班，则担负1岗位班、2岗位班的所有工作。

25、普通培养阴性操作程序

1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。

2、标本处理、检验与结果报告：

1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。

培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。

2)尿液标本 取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。

培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。

3)引流液 标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。

培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。

5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。

培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。

6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。

培养第24、48小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。

26、真菌培养阴性操作程序

1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。

2、标本处理、检验与结果报告：

1)拭子、分泌物标本 标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

2)尿液标本 取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

3)引流液 标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。培养第24、48、72小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。

27、苛养菌培养阴性操作程序

1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。

2、标本处理、检验与结果报告：

1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血琼脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置C02缸，35℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。

2)尿液标本 取5ml尿液,3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再画线分离后置C02缸，35℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。

3)引流液 标本3000转/分离心5分钟，取离心沉淀物，接种环取样画线分离接种普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板，置C02缸，35℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。

4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始线，再画线分离后置C02缸，35℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出肺炎球菌、嗜血杆菌等苛养菌。

5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于血平板、布氏血平板成原始线，再分离画线后置于C02缸，放入35℃温箱培养。另取约1g标本接种碱性蛋白胨水中，35℃温箱培养24-72小时，再转种高盐平板、中国兰平板、山梨醇麦康凯平板。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出弧菌、螺杆菌等细菌。

6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48小时观察培养液有无混浊，采样转种血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始线，再画线分离后置于C02缸，35℃温箱培养。

培养第24、48、72小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。

28、抗酸培养阴性操作程序

1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。

2、标本处理、检验与结果报告： 液性引流标本(如腹水、尿液、CSF等)直接离心留沉淀物，杂菌污染标本(如大便、痰等)取样置无菌管，加入1N NaOH1ml作用30分钟，再加入1N HCl1ml中和，3000转/分钟离心5分钟，取沉淀物100μl量接种罗氏培养基，置37℃温箱培养。

每星期观察一至两次培养基斜面，结果连续观察七个星期以上未发现有可疑菌落生长，报告未培养出分枝杆菌。

29、支原体培养检验操作程序

一、接收标本：标本与检验单查对正确，标本质量合格。

二、标本处理：接种Uu、Mh培养药敏一体试剂盒：操作前将所需试剂取出置室温30分钟。

1、A排第一孔加入培养液100μL作为阴性对照；

2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子，若为男性尿液取离心沉淀物150μL或阳性标本取50μL于培养液中混匀。

3、将混有标本的培养液各100μL加入A排余下及B排各孔中；

4、各孔加矿物油覆盖，置于37℃温箱培养。第24、48小时分别观察记录结果。结果判断原理：培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂，当有支原体生长时，底物被分解，使PH值升高，培养基由橙黄色变成红色，且清亮为阳性。培养基不变色为阴性。B1孔阳性为解脲支原体阳性；B2孔阳性为人型支原体阳性。药敏孔A排为高浓度，B排为低浓度，变红则耐药，不变红示敏感而不生长。当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感；高浓度不变色低浓度变红为该药物中介；高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。

结果一：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B2孔均不变色，示无人型支原体生长或浓度极低，报告培养出解脲支原体，未培养出人型支原体。结果二：第24 小时B1孔不变色示解脲支原体阴性；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原体，培养出人型支原体附药敏结果。结果三：第24 小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断，报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。

结果四：阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无解脲、人型支原体生长或浓度极低，报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。

结果五：第24、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无支原体生长或浓度极低，报告未培养出解脲及人型支原体。

第二篇：检验科SOP文件

芜湖市第一人民医院检验科管理文件

1、检验科工作制度

2、检验科值班制度

3、血库工作制度

4、临床室工作制度

5、生化室工作制度

6、细菌室工作制度

7、门诊化验室工作制度

8、质量控制工作制度

9、检验科及实验室消毒隔离制度

10、肠道化验室工作制度

11、检验报告单书写登记制度

12、实习生带教计划

13、年轻医生培养计划

14、仪器设备管理制度

15、医疗安全防范制度

16、医患沟通制度

17、门诊检验科服务公约

18、输血科预防感染制度

19、输血科工作质量管理制度 20、输血科报告登记制度

21、输血反应及处理方法制度

22、临床用血安全管理制度 ＜一＞ 科主任职责 ＜二＞ 主管检验师职责 ＜三＞ 检验师职责 ＜四＞ 检验士职责

检验科工作制度

1、检验科应积极配合临床各科的诊疗活动，进行本专业的检验工作。要认真制定各工作室：临床、门诊、生化、血液、细菌等室的工作制度。严格按照规章制度和操作要求，认真地进行本室的检测工作。

2、各病区检验标本及化验单，应于每日早晨8：00前送交检验科（急诊除外）一般检验当日下午下班前发出报告。门诊常规随到随做随报。急诊检验申请单要注明“急”字、优先检验，凡送、收、发的检验标本及申请单都要严格核对姓名、床号、名称、号码等。不符合规定退回重新留取。

3、检验单要遂次填写明确，必须由操作者签全名方可有效，如遇检验结果可疑时，应立即与临床科联系复查。遇有检验目的项目之外的阳性结果要主动报告。认真做好检验结果的登记工作和报告单发出前的消毒审核工作。

4、使用剧毒、腐蚀、易燃、易爆试剂时要严格执行技术操作，注意安全。

5、检验室要保持清洁、安静。特殊标本如血液发出报告后保留24小时至48小时，一般标本如尿、大便及一切用具应立即浸泡消毒，传染性标本污染的器皿应煮沸消毒清洗。标本检测后一律消毒后废弃。

6、各种设备、器械要求专人保管、保养。化学试剂专人保管。同时配合医院做好院内感染监控检测工作。

7、建立实验室室内质量控制制度。积极参加室间质量控制，以保证检验质量。同时定期向临床科室进行质量随访。

8、配合临床引进新技术、开展新项目。同时认真做好进修实习人员的培训工作。

9、严格值班制度，坚守工作岗位，遵守院规。提高医疗安全意识，提高检验质量，协调各专业间的关系和各室技术环节的连结，重视门诊窗口工作，发挥专业特长，提高科室整体水平。

检验科值班制度

1、值班人员应坚守工作岗位，认真做好本范围内的工作。不得在值班期间会客，携带家属。值班期间严禁酗酒、打牌或做其他私活,随时检查门窗、水电及各种设备、提高安全防范意识。

2、值班认真要遵守劳动纪律不迟到、不早退、按时到岗，认真做好交接班登记、交接明确、核对无误、下一班人员未到上一班人员不得离开岗位，以防突发事件发生，不得任意换班，如有特殊情况要经科主任同意才可换班。

3、值班人员应在值班时间完成急诊检验，立即电话通知临床医师，血型、交叉配血检验不得交班，值班人员在接班前检查设备、仪器的完好性、冰箱、温箱有无故障，明确责任。

4、值班期间遇有重大的难以处理、应立即请示报告总值班人员，并及时通知科主任，协助解决。

血库工作制度

1、血库冰箱要定期观察温度，发现故障时，应立即联系有关人员及时修理或将血转移至备用冰箱。

2、冰箱内血袋排列应按采血日的先后由前向后排。己剪辫配血而未用的血，要即时按排输用，防止污染报废。

3、接到交叉配血单及标本时，应核对无误后进行交叉配血。

4、发血时，取血者与发血者共同进行核对。要求血袋无破损，血型无误，血液无溶血、无凝块和无污染等情况。

5、血液出库一律不得退还。出库后认真核对、登记。

6、输血出现反应反馈到血库，血库工作人员应立即帮助查找原因。

7、血库要保持整洁，不得在室内吸烟、聊天和大声喧哗。

临床室工作制度

1、坚守工作岗位，不得擅自脱岗。工作时集中精力，认真细心，严格按照操作规程进行操作，遇有检验结果与临床不符或有疑问时，应以复查，防止差错事故发生。

2、急诊病人检查应认真、及时。反馈数据要求准确，标本与检验单要求认真核对，按照检验要求逐项检验。

3、报告单书写清楚，保持清洁，不得任意涂改，送发前室负责人或该室高年资检验人员予于审核，后进行消毒方可送出。

4、试剂配制要准确、新鲜，防止变质影响结果。认真做好临床室内质量控制，参加室间质控。

5、经常保持室内整齐，注意消毒工作，对具有传染标本和容器应消毒后清洗，防止交叉感染。废弃标本送至指定地点。

6、保持室内卫生，不得吸烟、聊天、喧哗。

生化实验室工作制度

1、生化检验是一种重要的现代化实验诊断技术。工作者必须严格遵守操作规程，对全自动生化仪、半自动生化仪及其他设备专人保管，定期保养。每天开机前和检验结束关机前都要认真检查，遇有异常不能解决，即时与科主任联系，请设备科协助解决。

2、每日送检标本必须认真核对姓名、床号、住院号、病区等。标本在未发报告前应于保存，以便复检。报告后标本一般保存24小时至48小时。同时做好室内室间质量控制。

3、化剂多具有毒性、腐蚀性。要妥善保管，橱柜要加锁。易燃易爆物品专人保管。严格遵守实验室的安全规则，防止意外发生。

4、实验室的一切废品、污物切勿乱扔，应投入指定地点。废弃标本要浸泡消毒，一次性物品要浸泡消毒后归入指定地点焚烧。工作结束要消毒地面、洗手、切断仪器电源等。

5、室内保持静，不得吸烟。

细菌室工作制度

1、坚守工作岗位，加强工作责任心，认真细心按照操作规程进行操作，提高送检标本阳性率。

2、操作间及无菌室每天早晨上班前紫外线消毒30分钟。标本处理后用500mg/L次氯酸钠消毒台面。

3、进入无菌间要先换鞋、戴帽、戴口罩进行操作，室内禁止吸烟，外人免进，保持清洁。

4、培养基制备、试剂配制都应登记，每日观察温箱温度，接种后或处理后的标本要先用500mg/L次氯酸钠浸泡，后煮沸消毒后清洗。

5、如有不慎将含菌培养皿打破，不可心慌乱，要用500mg/L次氯酸钠处理，工作完毕用次氯酸钠泡手。地面每日擦洗一次。

6、涉及到血清试验要做阴阳性对照，做好菌种保存工作。

门诊化验室工作制度

1、门诊化验室依据门诊各科申请化验单，按操作规程进行操作，门诊是窗口，要求接待病人热情，说话和气，尽量方便病人，提高服务质量。

2、检验前办理交费手续，急诊化验优先。对远道及危重病人、年老病人要多加照顾，耐心细心解释。坚守工作岗位，加强工作责任心。

3、填写报告要求整洁，不应涂改，签全名发出。遇有检验结果与临床不符，要即时与临床医生联系或重取标本。

4、试剂配制要新鲜，尿仪要定期做空白对照。血球仪定期用标准新鲜血液检测，严把质量关，同时与临床室一道做好血液室室间质控。

5、严格交接班制度，不脱岗、不串岗。保持室内清洁，不得聊天喧哗。

6、做好一次性采血工作。一次性废弃物品浸泡后焚毁，不得作其他处理。

质量控制制度

1、认真做好本职工作，加强责任心。生化、细菌、血液（RBC、WBC、Hb、DC）免疫、血凝参加省室间质控可以对室内质控起到监督、促进作用。要求各室按规定要求尽职尽责，做出好成绩。

2、认真做好室内质控。生化每天按常规标本代入质控血清，抓系统误差和过失误差，重视偶然误差，对出现质控物测得值>3SD时，要及时查找原因纠正，每月绘制质控图。临床血液定期用标准血对照检测。

3、各种血清学试验按照要求作阴阳性对照，检测试剂的有效期、灵敏度。各类试剂、培养基配制后要做阴阳对照保证质量。标准血清检测效价。

4、严格按照操作规程操作认真做好每项试验，准确及时发出报告。

5、认真填写报告单，不得涂改。每日审核后发出。并经常与临床科室联系，反馈意见，改进工作。

检验科及实验室消毒隔离制度

1、检验科及实验室的工作人员须在工作时间穿工作衣，必要时戴帽、口罩、手套。

2、严格执行无菌消毒制度，随时注意手的清洁消毒。

3、抽取血液标本坚持一人一针一管一巾一皮条。必须严格执行消毒无菌。

4、各种废弃标本应分类处理（焚烧、入污水池、消毒和灭菌）。

5、化验用过的各种器具应及时消毒、清洗处理。

6、化验报告单应消毒后发出。

7、化验室及实验室保持清洁卫生，操作后对各种物体表面及室内空气每天进行常规消毒处理。

肠道化验室工作制度

1、坚守工作岗位，加强责任心，认真细心，按照操作规程进行操作。尽力提高检出率。做到一粪三检。

2、标本按时接种、转种。发现可凝菌种要即时与防疫站及临床医生、防保科联系，控制疫情发展。并配合疫控科做到疫情控制工作。

3、认真做好病人地址及各类登记，做好传染病卡报工作，坚决做到不迟报、不漏报。

4、室内保持清洁，紫外线照射，次氯酸钠消毒台面、地面。工作完毕后要洗手关好水电。室内保持安静。

检验报告单书写登记制度

1、检验报告单书写要求规范化，用国家规定的简体字，字体瑞正，报告单力戒污染，检验人员签全名方可有效，填写报告时间，部分检验报告附上正常参考值。

2、收到标本应核对病人姓名、年龄、病区、床号、住院号等。按检验项目分送各室。根据不同要求及时登记处理查对。

3、登记本封面应写明起始与终止日期，起用新登记本继前登记，旧登记本应妥善保存，并注意保存。

4、登记本要逐栏填写，字迹清楚，数据准确，检验结果或检验原始记录及发出的报告单要一致，电脑登记要求备份，防止仪器故障丢失。

5、急诊检验应专册登记（生化）其他急诊要注明“急”、科别及操作者姓名。

实习生带教计划

1、实习生进科，按实习大纲制定学生实习内容及各室轮转计划表。

2、进室前先熟悉操作规程注意事项，由老师示范。在老师指导下由学生动手操作。确定专人带教。报告单经过老师审阅后方可发出。

3、负责实习生每个阶段实习成绩的考核、评分、评语。

4、安排实习生政治学习和业务学习。在帮助他们完成学习的同时教育他们树立良好的医德、医风。更好地为病人服务。

5、认真执行考勤制度，有事做到请假。遵守医院内一切规章制度。

年轻医生培养计划

1、加强思想教育，遵守院内一切规章制度，树立良好的医德医风，全心全意为病人服务的工作态度。

2、新分配的同志首先在全科各科轮转培训，使其全部了解工作的环境、范围和职责。培训结束，考核合格方可上岗参加晚夜班及独立工作。

3、加强业务学习，不定期对年轻同志进行抽查，培养他们自觉学习业务知识，了解国内外专业科技动态，不断提高业务能力。

4、新购设备尽力按排年轻同志轮流掌握操作及保养技术，严格报告单填写制度。工作中做到奖罚分明。

5、根据各人的业务能力，侧重加强培养，让一些业务较强、工作较认真的同志担任各室的主要负责工作，重点进行培养。

6、争取每一至二年送一名检验人员外出进修。

仪器设备管理制度

一、大型设备由专人保养、维护。并认真做好记录。

二、定期请设备科同志或厂家工程师来进行指导，加强维护保养。

三、每天操作完毕按照程序进行清洗、关机。教育科内同志不得随意打开（除急诊需要）。

四、有微机系统的不得随意玩游戏或其他之用。

医疗安全防范制度

一、严格执行院内各项规章制度，坚守工作岗位。

二、严格执行本专业技术操作规程，并于操作前做好标本的检查核对，报告单发出前要进行审核、消毒。

三、认真做好每天的室内质控工作，对异常值要认真复查方可报告。急诊标本要尽快检测后立即电话通知病房，异常结果要及时与开单医生联系，进行沟通，不得延误抢救。

四、严格交接班制度，尤其是血库。做到口头、书面双交接，同时做好血制品发放，杜绝差错。门诊、病区标本书面交接签字，责任到人。

五、积极参加省临检中心的室间质控考核。不断学习，掌握新技术的进展，不断引进新项目。

六、要做好检验结果的登记和备份工作，发出报告后的血液标本要冰箱保存三天，同时做好医疗废弃物的处理工作。

七、严格进货渠道，检查试剂的质量和有效期，对设备要专人保养和保管，定期检查，并要求书面记录。

医患沟通制度

1、加强门诊窗口患者咨询工作。热情接待每一位来院就诊的病人，耐心解释、认真指导和交待各种检验前标本的留取注意事项，确保检测的准确。

2、门、病区实行24小时工作，早晨抽血提供早餐，保证下午4点发出报告。方便行走不便及远道病人。

3、对一些异常结果要求复查后报告，及时与开单医生联系，以便及早治疗。对一些临床症状与检验结果不符的病例也及时进行沟通，查找原因。

4、外地病人需当日返回来不及取报告者，我们可帮助提供邮寄报告单。

5、对一些常期慢性病的老年患者如糖尿病、肾病等可电话联系，必要时上门帮助抽血。

6、对病人提出的一些意见和建议，认真听取和改进。对一些检测值有异议的，采取复查。给病人满意有服务。

门诊检验科服务公约

1、诊检验科一年365天每天实行24小时工作制，双休日、节假日照常开诊，随时准备接待广大就诊患者。

2、早晨空腹抽血，免费提供早餐。具体抽血时间安排如下：

上午6：30－8：00前空腹抽血，肝肾功能、血脂、血糖、心肌酶谱、电解质、血尿淀粉酶等生化检验项目当天下午4：00发报告。上午8：00以后抽血者，第二天下午4：00发报告，停电等特殊情况例外。

3、患者在就诊科室开化验单后，请及时到门诊检验科联系有关抽血事宜，急诊检测项目如血型、血常规、血糖、血钾、血尿淀粉酶等随到随做，及时准确的发出报告，为临床诊治患者提供可靠的诊断依据。

4、热情接待门诊检验科的就诊患者，认真向每位患 者交待各种检测标本留取的注事项，以确保检测结果的及时、准确、可靠。

5、加强对门诊就诊患者的咨询服务，端正服务态度，提高医疗质量。对患者提出的疑问和咨询做好耐心细致的解释工作，认真听取患者提出的意见和建议，对一些有益的意见和建议做到认真吸收和采钠，及时改进我们门诊工作中存在的不足之处，全心全意为就诊患者提供快而便及的优质服务，使患者早诊断、早治疗、早康复是我们的最大心愿。

检验科工作人员职责

＜一＞科主任（主任技师）职责：

1、在院长领导下，负责本科的检验、教学、科研、行政、血库管理工作。制定科室工作计划并组织实施。督促检查、定期总结汇报。

2、督促科内人员认真执行各项规章制度和技术操作。做好登记、统计和消毒隔离工作。请购试剂、报销工作，经常检查安全措施严防差错事故发生。

3、参加部分检验工作并组织有关人员检查检验质量、达到质控标准。

4、开展与临床有关的科研，学习新技术，开展新项目，不断提高检验质量和检验水平。

5、负责本科人员的业务培训，技术考核，搞好进修、实习人员的教学带教工作。

6、确定本科人员的分工、轮换和值班。

7、努力提高自身业务技术水平，撰写论文。

＜二＞主管检验师职责

1、在科主任领导下进行工作，熟悉掌握各种临床检验理论及操作技术，熟悉本科常用仪器、设备的使用和维护。

2、参加科室部分检验工作，担任特殊检验工作和技术工作。解决本科业务上复杂疑难问题，经常检查检验质量。

3、担任教学和进修、实习人员的培训工作，做好科内人员的业务学习和技术考核工作。

4、了解国内外检验技术动态，开展新技术、新项目。提高自身业务素质，积极撰写论文。

＜三＞检验师职责

1、在科主任、主管检验师领导下，掌握各项操作常规，了解临床检验理论、正常值及临床意义。

2、能独立处理常规技术业务，掌握仪器的性能及使用维修技术。

3、准确配制、校正化学试剂及掌握操作规程。

4、完成进修、实习生带教任务。每年完成工作小结。

＜四＞检验士职责

1、在上级检验师的指导下，担任各项检验工作。

2、收集检验标本，在检验师指导下进行特殊检验。

3、担任部分试剂配制、部分培养基配制。认真做好常规工作的登记。

4、担任一定检验器材的洗刷。做好消毒隔离工作。

5、每年写读书笔记一篇。

血库血液入库、核对、储存工作制度

1、全血、血液成分入库前要认真核对验收。核对验收内容包括：运输条件、物理外观、血袋封闭及包装是否合格，标签填写是否清楚齐全如供血机构名称、许可证号、供血者姓名或条形码编号、血型、血液品种、容量、采血日期、血液成分的制备日期及时间、有效期及时间、血袋编码/条形码、储存条件等。

2、输血科/血库要认真做好血液出入、核对、颁发的登记工作，有关资料要保存十年。

3、按A、O、B、AB血型将全血、血液成分分别储存于血库专用冰箱不同层内或不同专用冰箱内，并有明显的标识。

4、各类血液制品要严格按照各个品种的保存温度及保存期进行存放，当储血冰箱的温度自动控制记录和报警装置发出报警信号时，要立即检查原因并及时解决和做好记录。

5.储血冰箱内严禁存放其他物品，每周消毒一次，冰箱内空气培养每月一次；无霉菌生长或培养皿90MM细菌生长菌落[8CFU/10分钟或200CFU/M3为合格。

血库发血工作制度

1、交叉配血合格后，通知医护人员到血库取血。

2、取血与发血双方必须共同核对受血者姓名、性别、住院号、科别、床号、血型、血液有效期和交叉配血试验结果以及血液成分的外观颜色、是否浑浊等，核对准确无误后，由双方共同签字方可发出。

3、凡血袋有下列情形之一的，一律不得发出如标签破损、字迹不清、血袋有破损漏血、血液中有明显凝块、血浆呈乳糜状及暗灰色、血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒、未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血、红细胞层呈紫红色、过期血或其他必须查证的情况等。

4、血液发出后，受血者和供血者的血样必须保存于2-6℃冰箱内至少7天，以便在发生不良反应时查找原因。

5、血库的各类血液制品如红细胞悬液、血浆及其他血制品等一但发出后一律不得退回。

血库交叉配血工作制度

1、受血者交叉配血试验的血标本必须是输血前三天之内的标本的。

2、血库工作人员要逐项核对输血申请单、受血者和供血者的血样，复查受血者与供血者的ABO血型{正、反定型}，并检查患者的RH（D）血型{急诊抢救患者紧急输血时RH（D）血型检查可除外}，复查正确无误时方可进行交叉配血。

3、凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者均应进行交叉配血试验，机采浓缩血小板应ABO同型输注。

4、凡遇有交叉配血不合或对有输血史、妊娠史及短期内需要接受多次输血的患者应主动与临床取得联系并及时向市中心血站汇报。

5、工作人员单独值班时，在操作完毕后要自己进行检查复合，并认真填写交叉配血试验结果，严防差错事故的发生。

第三篇：微生物实验室守则

微生物實驗室守則

1.須著長及膝蓋之實驗衣，並穿著長褲，若有長髮應予以適當束結，嚴禁穿著拖鞋或涼鞋。實驗室內嚴禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。

2.非必要物品勿置於實驗室之桌面，實驗結束後，需加以清理，物品並應歸於原位。

3.實驗前後消毒桌面及手部，實驗時操作桌面應隨時保持乾淨。

4.應熟悉實驗室內所有設備，配置及正確操作方法。

5.顯微鏡使用後應清理乾淨，並清點附件是否齊備，關閉電源後再拔掉插頭，並歸定位，發現有任何異狀，即報告指導老師處理，任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。

6.不可於點燃酒精燈時噴酒精，並隨時注意自己及他人之安全，酒精燈不用時應即熄滅。

7.實驗所用之菌體有些為致病菌，故須以無菌操作且避免用手及口的動作，如咬手指或用舌頭舔濕標籤。

8.實驗用之所有菌體或器具未經許可嚴禁攜出室外。9.接種針（環）於接菌前後務必以酒精燈滅菌。

10.含菌體之容器，應妥予加蓋，非必要時切勿任意打開。

11.實驗後待丟棄物品應妥善包裹或予殺菌處理再丟棄；固體培養基則不得倒入水槽中。

12.實驗結束後，應確實關閉所有不用之電源。

13.任何意外事件，應即報告助教及指導老師，亦應熟知其應變措施。

14.實驗操作過程中必須隨時注意自身及他人之安全，若有危及自身及他人安全之事件或違反實驗守則者，本實驗課成績一律以零分計。

微生物實驗室守則

1.須著長及膝蓋之實驗衣，並穿著長褲，若有長髮應予以適當束結，嚴禁穿著拖鞋或涼鞋。實驗室內嚴禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。

2.非必要物品勿置於實驗室之桌面，實驗結束後，需加以清理，物品並應歸於原位。3.實驗前後消毒桌面及手部，實驗時操作桌面應隨時保持乾淨。

4.應熟悉實驗室內所有設備，配置及正確操作方法。

5.顯微鏡使用後應清理乾淨，並清點附件是否齊備，關閉電源後再拔掉插頭，並歸定位，發現有任何異狀，即報告指導老師處理，任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。

6.於點燃酒精燈時噴酒精，並隨時注意自己及他人之安全，酒精燈不用時應即熄滅。

7.實驗所用之菌體有些為致病菌，故須以無菌操作且避免用手及口的動作，如咬手指或用舌頭舔濕標籤。

8.實驗用之所有菌體或器具未經許可嚴禁攜出室外。

9.接種針（環）於接菌前後務必以酒精燈滅菌。

10.含菌體之容器，應妥予加蓋，非必要時切勿任意打開。

11.實驗後待丟棄物品應妥善包裹或予殺菌處理再丟棄；固體培養基則不得倒入水槽中。

12.實驗結束後，應確實關閉所有不用之電源。13.任何意外事件，應即報告助教及指導老師，亦應熟知其應變措施。

14.實驗操作過程中必須隨時注意自身及他人之安全，若有危及自身及他人安全之事件或違反實驗守則者，本實驗課成績一律以零分計。

第四篇：微生物实验室规则

微生物实验室规则

1、进实验室应穿工作服，离室时脱去放在指定处所，工作服应定期消毒洗涤。

2、非必要物品勿带入实验室。

3、实验室内应保持肃静；不得高声谈笑；不准吸烟和进食；无菌室在工作前、工作后均须全面清扫、消毒。

4、如带有细菌的增菌液污染桌面或地面，应立即用消毒溶液倾覆其上，半小时后方可抹去；如有污染物污染工作服，应立即将工作服脱去以高压蒸汽法灭菌。

5、如有污染物污染手部，应立即将手浸泡消毒液内，经5分钟后，再用肥皂和水刷洗干净。如有污染物吸入口内，应立即吐出，并以大量清水漱口，根据需要亦可服用有关药物以防发生感染染。

6、接种环用后应立即在酒精灯火焰上烧灼灭菌；沾菌的吸管、玻片等用后应分别浸泡在盛有消毒液的玻璃缸内，其他已污染的试管、平皿等亦必须置于专用容器内，经灭菌后再进行洗涤。

7、用于消毒的酒精应放在加盖搪瓷缸内，如不慎着火，应立即用搪瓷盖盖上与空气隔绝即可灭掉火焰。

8、工作完毕时工作台用沾有消毒液的抹布擦拭干净，地面应用墩布擦拭干净。

9、检验人员应具备高度责任感，以严谨的科学态度从事检验工作。

第五篇：微生物实验室管理制度

目 的：规范微生物室管理规范，以保证微生物实验的顺利进行。范 围：适用于微生物实验室

依 据：GB/T 19489-2008《实验室 生物安全通用要求》； 执行部门：化验室微生物检验室

职 责：1.微生物检验员负责微生物实验室的管理。2.实验室主管负责对微生物实验室管理情况进行检查。内 容：

本中心微生物实验室管理制度包括微生物实验室人员管理制度、微生物室出入管理 制度、微生物室环境管理制度、微生物室的使用管理制度。微生物实验室药品管理制度。

1.微生物实验室的人员管理

1.1 微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其他人员须经主管人员批准后方可进入和使 用。

1.2 微生物实验室的人员需经过相关的培训。2.微生物实验室出入管理 2.1 人员出入管理：

2.1.1 人员进入微生物实验室洁净区前，需要洗手消毒；在一级缓冲室换实验服、戴帽子、换鞋后，进入风淋室，风淋后，进入二级缓冲室准备实验。2.1.2 实验操作前须带上无菌手套和口罩。2.2 物料出入管理：

2.2.1 物料进入微生物实验室以前，脱去外包装或者用酒精棉球擦拭后，放置于传递窗中。2.2.2 物料放置于传递窗后，开启紫外0.5小时，同时将微生物实验室内的净化系统、紫外 灯打开。

2.2.3 紫外开启0.5小时以后，关闭紫外，并将物品转移于实验操作台上。

2.2.4 实验完毕后，微生物实验室物品经传递窗传出后，经高温灭菌后废液、废物倒入废液桶处理。

3.微生物实验室的环境管理 3.1 微生物实验室的清洁管理

微生物实验室的清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体的清洁部位、方式方法、频率见下表所示：

3.2 微生物实验室常用消毒剂及其配制

4.微生物实验室的使用管理

4.1 微生物实验室使用之前，应先开启微生物实验室自净系统30分钟。每次使用前应用消毒 液擦拭超净工作台及其他一切可能引起污染的死角，然后开紫外灯灭菌30分钟，同时开启超净工作台。操作完毕后，用消毒液擦拭台面，做好卫生，开紫外灯30分钟，并记录紫外灯照射时间。注：当紫外灯使用1000小时应更换。

4.2 微生物实验室使用时，应同时进行沉降菌监测，将含有营养琼脂培养基培养皿在各监测点正向放置，打开盖子，暴露30分钟，然后盖上，将营养琼脂培养基放入30～35℃培养箱培养48小时，观察结果，每皿菌落数应≤1个，否则应加强清洁消毒工作，必要时验证生物安全柜的性能。5.微生物实验室药品及培养基管理制度

药品及培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。5.1 药品及培养基的采购及接收

微生物实验室所用的药品及培养基必须是符合国家相关资质的公司所出产的。实验室根据检验需要申购所需的培养基并做好相应的接收记录。5.1培养基的接收

微生物检验室应指定专人负责培养基的管理，在接收培养基时，应核对培养基的品名、来源、批号、生产日期、有效期、数量，脱水培养基应附有处方和使用说明，并做好接收记录。5.2培养基的制备

培养基可按处方配制，也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基。在制备培养基时，应选择质量符合要求的脱水培养基或单独配方组分进行配制。脱水 培养基应附有处方和使用说明，配制时应按使用说明上的要求操作以确保培养基的质量符合要求，不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下贮藏，如低温、干燥和避光，所有的容器应密封，尤其是盛放脱水培养基的容器。商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外，还应注明有效期、贮藏条件、适用性检查试验的质控菌和用途。

为保证培养基质量的稳定可靠，各脱水培养基或各配方组分应准确称量，并要求有一定的精确度。配制培养基最常用的溶剂是纯化水，特殊情况下，可能需要用去离子水和蒸馏水。应记录各称量物的重量和水的使用量。配制培养基所用容器和配套器具应洁净，可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留，对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌，以保证培养基的无菌性。

脱水培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基颜色变深。如需要添加其他组分时，加入后应充分混匀。应按照生产商提供或使用者验证的参数进行培养基的灭菌。商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料。培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术，特殊培养基可采用薄膜过滤除菌。

培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或pH 的改变。因此，培养基应采用验证的灭菌程序灭菌，培养基灭菌方法和条件，应通过无菌性试验和促生长试验进行验证。此外，对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证，以保证在一定装载方式下的正常热分布。温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热，过度灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量。灭菌器中培养基的容积和装载方式也将影响加热的速度。因此，应根据灭菌培养基的特性，进行全面的灭菌程序验证。应确定每批培养基灭菌后的pH值（冷却至室温25 ℃ 测定）。若培养基处方中未列出pH 值的范围，除非经验证表明培养基的pH 值允许的变化范围很宽，否则，pH值的范围不能超过规定值士0.2。

制成平板或分装于试管的培养基应进行下列检查：容器和盖子不得破裂，装量应相同，尽量避免形成气泡，固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪，在冷藏温度下不得形成结晶，不得污染微生物等。应检查和记录批数量、有效期及培养基的无菌检查。5.3 培养基的贮藏

自配的培养基应标记名称、批号、配制日期等信息，并在已验证的条件下贮藏。商品化的成品培养基标签上应标有名称、批号、生产日期、失效期及培养基的有关特性，生产商和使用者应根据培养基使用说明书上的要求进行贮藏，所采用的贮藏和运输条件应使成品培养基最低限度的失去水分并提供机械保护。

培养基灭菌后若贮藏在高压灭菌器中，质量可能会受影响，一般不提倡这种存放法。琼脂培养基不得在O ℃ 或O ℃ 以下存放，因为冷冻可能破坏凝胶特性。

培养基应避光保存，若要长期保存，应置于密闭容器中以防止水分流失。琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一般不超过1周，且应密闭包装，若延长保存期限，保存期需经验证确定。固体培养基灭菌后的再融化只允许1 次，以避免因过度受热造成培养基质量下降或微生物污染。培养基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加热。若使用微波炉，应避免培养基过度受热及水分的蒸发，更要注意安全。融化的培养基应置于45 ～50 ℃ 的水浴中，不得超过8 小时。倾注培养基时，应擦干培养基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴进人培养基中造成污染。使用过的培养基（包括失效的培养基）应按照国家污染废物处理相关规定进行。5.4 质量控制试验

实验室应对试验用培养基建立质量控制程序，以确保所用培养基质量符合相关检测的需要。实验室配制或商品化的成品培养基的质量依赖于其制备过程，采用不适宜方法制备的培养基将影响微生物的生长或复苏，从而影响试验结果的可靠性。所有配制好的培养基均应进行质量控制试验。实验室配制的培养基的常规监控项目是pH、适用性检查试验，定期的稳定性检查以确定有效期。

培养基在有效期内应依据适用性检查试验确定培养基质量是否符合要求。有效期的长短将取决于在一定存放条件下（包括容器特性及密封性）的培养基其组成成分的稳定性。

除药典附录另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可只进行1 次。

如果培养基的制备过程未经验证，那么每一批培养基均要进行适用性检查试验，试验的菌种可根据培养基的用途从相关附录中进行选择，也可增加从生产环境及产品中常见的污染菌株。培养基的质屋控制试验若不符合规定，应寻找不合格的原因，以防止问题重复出现。任何不符合要求的培养基均不能使用。

用于环境监控的培养基须特别防护，最好要双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，那么在使用前应进行100 ％的预培养以防止外来的污染物带到环境中及避免出现假阳性结果。