良好的微生物实验室操作规范

第一篇：良好的微生物实验室操作规范

良好的微生物实验室操作规范

简介

在微生物实验室中，良好的实验室操作规范是基于很多原则，包括以下活动：无菌技术、培养基的控制、菌种的制备、仪器设备的管理、细致的记录和数据的评估、人员的培训。众所周知，微生物测定数据的可变性、可靠性和重现性是基于公认方法的使用和坚持良好的实验室操作规范。

微生物菌种的维护

生物样本是最灵敏(delicate)的,因为他们生存能力和特性是依赖于适当的处理和贮存。菌种的处理和贮存的标准是使用者的实验室制定的，采用减少污染的机会和减少生长特性变更。小心一致的处理贮存用菌种是微生物测试结果一致性的重要因素。按药典方法方法使用的菌种应该取自国家菌种保藏中心。可以包括冷冻的、冻干的、斜面培养的或是马上使用的形式。在质量控制测试使用前应进行菌种纯度的确定和菌种的鉴别。马上使用的菌种要求确定纯度、鉴别、接种体大小。鉴定的确认，对通常用的实验室菌种，理想的是进行基因水平的分析（如：使用合适的经过验证的探针进行DNA指纹,RNA基因排序,PCR光电导继电器）

菌种的制备和复壮应该参照供应商的说明书或采用己验证批准的方法。种子批技术被推荐用于贮备用菌种的保存。

从国家菌种保藏中心得到的初始菌种在合适的培养基被复壮、培养。部分的贮备菌种（第一次接种或是传代）是悬浮在抗冷冻培养基中，分装至小瓶中，在零下30°或更低的温度下冷冻，直到使用。如果冷冻在零下70°，或是冻干形式，菌种可以持续的保存。这些冷冻的贮存菌种可以每月或每周接种用作工作菌种。一旦打开，制备了工作悬浮液，不能再冷冻。不能用的部分应该丢弃，以减少繁殖能力损失带来的风险和贮存污染带来的风险。

工作用菌种的接种量应该记录，以防止过量接种增加表型变种。一代的定义是从具有繁殖能力的菌种接种微生物到一新鲜制备的具有促微生物生长能力

和培养基中。任何形式的接种都被当做是一次转移传代。

实验室仪器的维护

多数的仪器（培养箱、水浴、灭菌锅）必须遵从标准验证程序包括安装确认、操作确认和性能确认。另外还要求有定期的校验（通常每年一次）。新的设备，实验室关键的，应该根据QCU 批准的方案进行确认。

用于微生物实验室仪器（如：pH计和分光光度计）应按规定的进度表进行定期的校验和测试，以保证其性能。校验的频率和性能的确认是基于仪器的型号的不同和能产生实验室数据的设备的重要程度的不同。

实验室的布局和操作 实验室的布局和设计应考虑良好的微生物操作和安全。本质是最大程度的减少微生物菌种的交叉污染，微生物样本的处理环境也是重要，因为环境也能引起也污染的可能。

一般情况下，实验室应分成洁净区、无菌区和阳性室。如果可能，处理和培养灭菌产品的周围的环境区域应与阳性区完全分离。但是要将阳性和洁净区完全分开是不可能的，那么有必要采取隔离和无菌操作来减少可能的意外污染。这些隔离包括：防护衣、清洁、消毒程序和仅用于洁净无菌的生物安全柜。对于活的菌种引起的溢出和灾祸的程序应放在现场，所有相关技术人员进行上述方法的培训。

部分样品会出现微生物的生长，要求进一步分析来确定污染源。当发现有菌生长，样品应从洁净区立即转入阳性区。接种，着色、菌种鉴定或其它的调查操作应在实验室的阳性室操作。如果可能，发现有菌落生长的样品在实验室的洁净区是不能被打开的。小心隔离污染的样品和原料将减少假阳性结果。

正在进行取样操作活动的人员不能进入阳性室或在阳性室操作处理除非特别小心，包括穿防护服和手套，退出后仔细清净手。理想状态，受权人员进行样品取样操作时，特别是无菌过程的，不能在阳性操作室附近工作。同样，所有微生物样品都应采用无菌取样技术，包括非无菌样品的取样。如果可能，在规定的完全无菌的条件的取样区域进行操作。

要重点考虑的是样品的污染，它能导致假阳性的出现，除非在过程中特别注意无菌操作。取样间应设计好，这要原料和辅料的取样就可以在受控条件下进行，包括无菌衣和无菌取样设备。对于公用系统的取样，如水系统，在完全无菌的条件下是不太可能的；然而，当样品未采用无菌技术取样时应有记录，其可靠性不可避免的下降。

环境监测的取样方法要求对取样的设备（负载或未负载）进行最小化的无菌处理。如果可能，在对取样环境进行取样时，取样的设备应同时配备培养基。

实验室中所有的测试，对关键的测试操作，如：最终剂型的无菌测试，散装产品，生物产品用菌种培养，或是生物产品用细胞培养都应在受控的条件下进行，隔离技术也是可以采用的，无菌的微生物测试。己在显示，隔离技术比人为的洁净区域具有更低的环境污染水平，因此，更能减少假阳性结果的产生。隔离系统的验证是重要的，既能保证环境的完整又能防止假阴性结果的产生，假阴性的结果是由化学消毒物质带入。

实验室记录的维护

合适的数据记录和研究对成功的微生物实验室是重要的。最重要的原则是按照SOP规定操作，SOP应是书面化的，并能反映测试的实际操作是如何进行的，实验室笔记本应能提供所有详细的记录，并保证记录的完整。实验室书写至少应包括以下内容：

日期；

测试物料

微生物测试人员名称

操作程序记录测试偏差 参数的记管理员，的号码 的结果

录（使用的设备，使用微生物菌种，培养基的批号）第二个复核人签名

每一台关键仪器的使用都应在台帐上记录，所有都应根据SOP的要求记录在校正进度表和维护记录上。日志和其它记录形式对实验室记录本起到支持和帮助。设备的温度（水浴，培养箱，灭菌锅）应有记录并可以追踪。

己签发的SOP及其版本应有清楚的记录。数据的改变应用单钱划去并签上日期和缩写。初始的数据不应抹去或复盖。

测试结果应包括初始记数，允许复核者根据最终结果重新计算。数据的分析方法在SOP中应详细描述。

所有的实验室记录应存档避免遗失，现场中应有正式的记录保存和查阅程序。

检验结果的解释

微生物试验结果难以解释，因为下列原因：

微生物是普遍存在于自然界中的，又存在于通常的环境污染，由人类支配的很多类型的特殊的有机物。

实验室分析人员在样品分析和操作中可能引入微生物污染。微生物可能不是均匀的分布在样品和环境中。微生物的分析结果存在相当大的可变性。

因此，从预期结果中获得的微小的不同是没有多大意义的。

因为微生物分析的这些特性，实验分析应非常小心以避免外来的污染，正如本章前面讨论的。同样重要的，从主要微生物观察考虑，结果必须要解释。不仅包括假定污染的种类，而且包括药物成分、辅料或测试环境中存在的有机物。另外，其微生物的生长特性也应该考虑。

当出现的结果与药典正文或其它建立的质量标准不一致时，就应该进行调查。没有满足标准要求的微生物污染，通常有两个明显的原因：可能是实验室的错误或是实验环境产生无效的结果，也可能是产品有一定污染或其它形式的污染使得超出规定的标准或限度。另外一种情况，实验室操作，在多数情况下，应立即通报。

应该对围绕结果的所有情况进行全面的评估。所有实验条件和因应充分考虑，包括数据的漂移，与建立的限度和标准比较。重要的是根据结果的可变性知道观察的统计意义。

实验室环境，对现场取样的保护装置，测试条件下物料的历史数据，物料的种类，特别注意物料中微生物的存活和繁殖在调查中应被考虑。另外，与实验员进行讨论，分析中的实际操作可以得到有价值的信息。来决定结果的可靠性和决定采取和措施。如果可以确定得到不一致结果的明确原因，那么应该采取纠正措施，并记录问题所在。跟踪正式批准和执行的纠正措施，并进行仔细的检查。

如果分析结果是无效的，基于一个可指出的错误，必须记录。实验室应该有证实测试（再测试）的SOP规定，如果必要，再取样。关于再取样，法规和药典没有给出分析结果调查的操作

第二篇：微生物实验室操作规范及其仪器的使用

青岛辰和国际礼品制造有限公司

实验室仪器使用规程

目录

一、微生物实验室操作规程 „„„„„„„„„„„„2

二、无菌间使用规程 „„„„„„„„„„„„3

三、传递窗使用规程 „„„„„„„„„„„„4

四、净化工作台使用规范 „„„„„„„„„„„„5

五、手提式高压灭菌锅使用规范 „„„„„„„„„„ 6

六、全自动高压蒸汽灭菌器使用规程 „„„„„„„„7

七、冰箱使用规程 „„„„„„„„„„„„8

八、天平操作规程 „„„„„„„„„„„„9

九、光学显微镜使用规范 „„„„„„„„„„„„10

十、恒温干燥箱使用规程 „„„„„„„„„„„„11

十一、恒温培养箱使用规范 „„„„„„„„„„„12

十二、霉菌培养箱使用规程 „„„„„„„„„„„ 13

十三、电子恒温水浴锅操作规程 „„„„„„„„„„14

十四、真空干燥箱使用规程 „„„„„„„„„„15

十五、PH计使用规程 „„„„„„„„„„„„16

十六、糖度计的使用规程 „„„„„„„„„„„„17

十七、pHS-3C型酸度计操作规程„„„„„„„„„„18-19

十八、DDS-307型实验室电导率仪操作规程 ………20 1

微生物实验室操作规程

1、工作人员加强有菌观念，无菌操作。

2、每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。

3、入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。

4、实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。

5、非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。

6、做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。

7、标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。

8、实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于 3%来苏儿溶液中 5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用 1:1000高锰酸钾溶液或 3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。

9、实验过程中，如污染了实验台或地面，应用 3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。

10、使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。

11、所有微生物培养物，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。

12、取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。

13、若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。

14、工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。

15、离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。

16、爱护仪器设备，遵守仪器使用规范，经常清洁，注意防尘和防潮。每天观察培养箱、冰箱、干燥箱的温度，并做好记录。

17、发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。

无菌间使用规程

一、目的建立无菌室管理使用规程，保证操作者正确使用。

二、范围

适用于无菌室操作。

三、责任者

操作人员、无菌室管理人员。

四、内容

4．1无菌室应严禁放置杂物，无关人员严禁入内。

4．2 无菌室应严格保持整洁，防止污染，定期用甲醛熏蒸消毒（每月一次），使用前用0.1%新洁尔灭控式消毒净化工作台。

4．3 实验人员进入无菌室，必须更换无菌衣、帽、鞋等，操作前用0.1%新洁尔灭菌或75%酒精进行手消毒。

4．4 使用前开启紫外灯照射60分钟，同时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理，再开紫外灯照射30分钟。

4．5 检验过程严格按照无菌操作规程操作，爱惜室内用具，使用完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。

4．6 接种环在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可接种培养物。4．7 所有带菌实验用品，须经有效的消毒灭菌处理后再洗刷。严禁污染下水道。4．8 无菌室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开肉汤琼脂平皿30分钟，经37℃培养48h），100级平均菌落数不得过1个/皿，如超过应进行清洁消毒。

传递窗的使用规程

一、目的：保证待处理样品的可靠性传递，尽量避免各区间的空气污染

二、适用范围：每个区的传递窗。

三、职责：所有工作人员在工作中必须严格遵守。

四、步骤：

4.1标准操作：实验人员在所在实验区处理好样品后，欲将样品传递到下一区域时，打开传递窗门，放入欲传递的样品，关闭传递窗门。

4.2 维护

每次实验结束后用1﹪的施康溶液对传递窗内部进行清洁，然后打开传递窗内的紫外灯消毒30分钟，并记录紫外灯照射时间，累计10000小时后报废，更换新的紫外灯。

净化工作台使用规范

一、目的 规范净化工作台操作与维护工作，确保仪器正常运作。

二、适用范围 本实验方法适用于净化工作台操作与维护管理。

三、操作及维护规程

1、操作规程

（1）使用工作台时，应提前50分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，30分钟后关闭杀菌灯（此时日光灯即开启），启动风机。（2）对新安装的或长期未使用的工作台，使用前必需对工作台和周围环镜先用超静真空吸尘器或用不产生纤维的工具进行清洁工作，再采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。（3）操作区内不允许存放不必要的物品，保持工作区的洁净气流流型不受干扰。

（4）操作区内尽量避免作用明显扰乱气流流型的动作。（5）操作区的使用温度不可以超过60℃。

2、维护规程及维护方法

（1）根据环境的洁净程度，可定期（一般2～3个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或给予更换。（2）定期（一般为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时经常用纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果。

（3）操作区平均风速保持在0.32-0.48m/s范围内。

手提式高压蒸汽灭菌锅使用规范

一、操作规程

1、准备：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的去离子水或蒸馏水，使水面与三角搁架相平为宜。

2、放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

3、加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

4、加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间（在温度或者压力达到所需时（一般为121°0.1MPa），需要切断电源，停止加热。当温度下降时，再开启电源开始加热，使温度维持在恒定的范围之内。

5、灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。

二、注意事项：

1、灭菌物品不能堆得太满、太紧，以免影响温度均匀上升。

2、降温时待温度自然降至60℃以下再打开箱门取出物品，以免因温度过高而骤然降温导致玻璃器皿炸裂。

3、在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气。

4、由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。

5、不同类型的物品不应放在一起进行灭菌。

6、在未放气，器内压力尚未降到“0”位以前，绝对不允许打开器盖。

全自动高压蒸汽灭菌器使用规程

一、操作规程

1、在设备使用中，应对安全阀加以维护和检查，当设备闲置较长时间重新使用时，应扳动安全阀上小扳手，检查阀芯是否灵活，防止因弹簧锈蚀影响安全阀起跳。

2、设备工作时，当压力表指示超过0．165Mpa时，安全阀不开启，应立即关闭电源，打开放气阀旋钮，当压力表指针回零时，稍等1-2分钟，再打开容器盖并及时更换安全阀。

二、注意事项

1、堆放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀的出气孔，必须留出空间保证其畅通放气。

2、每次使用前必须检查外桶内水量是否保持在灭菌桶搁脚处。

3、当灭菌器持续工作，在进行新的灭菌作业时，应留有5分钟的时间，并打开上盖让设备有时间冷却。

4、灭菌液体时，应将液体罐装在硬质的耐热玻璃瓶中，以不超过3／4体积为好，瓶口选用棉花纱塞，切勿使用未开孔的橡胶或软木塞。特别注意：在灭菌液体结束时不准立即释放蒸汽，必须待压力表指针回复到零位后方可排放余汽。

5、对不同类型，不同灭菌要求的物品，如敷料和液体等，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。

6、取放物品时注意不要被蒸气烫伤(可戴上线手套)。

冰箱使用规程

一、操作程序

1、开机：冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，确定其在正常供电状态下。

2、物品的放置

3、将冰箱调节到所需功能。

4、打开冰箱相应功能的箱门，将所需放置/取出的物品，放置/取出在冰箱、冰柜内。

5、物品放置好/取出后，将箱门关严，通过屏幕显示确定其在正常供电情况。

二、安全使用注意事项

1、严禁贮存或靠近易燃、易爆、有腐蚀性物品及易挥发的气体、液体，不得在有可燃气体的环境中存放或使用。

2、实验室使用冰箱内禁止存放与实验无关的物品。储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。

3、放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。

4、箱体表面请勿放置较重或较热的物体，以免变形。

5、保持冰箱出水口通畅。

6、在清洁/除霜时，切不可用有机溶剂、开水及洗衣粉等对冰箱有害的物质。

天平操作规程

1、使用天平前应先观察水准器中气泡是否在圆形水准器正中，如偏离中心，应调节地脚螺栓使气泡保持在水准器正中央，单盘天平（机械式）调整前面的地脚螺栓，电子天平调整后面的地脚螺栓。

2、天平使用前应首先调零，电子天平使用前还应用标准砝码校准。

3、天平门开关时动作要轻，防止震动影响天平精度和准确读数。

4、天平称量时要将天平门关好，严禁开着天平门时读数，防止空气流动对称量结果造成影响。

5、电子天平的去皮键使用要慎重，严禁用去皮键使天平回零。

6、如发现天平的托盘上有污物要立即擦拭干净。天平要经常擦拭，保持洁净，擦拭天平内部时要用洁净的干布或软毛刷，如干布擦不干净可用95%乙醇擦拭，严禁用水擦拭天平内部。

7、同一次分析应用同一台天平，避免系统误差。

8、天平载重不得超过最大负荷。

9、被称物应放在干燥清洁的器皿中称量，挥发性、腐蚀性物体必须放在密封加盖的容器中称量。

10、电子天平接通电源后应预热2小时才能使用。

11、搬动或拆装天平后要检查天平性能。

12、称量完毕后将所用称量纸带走。

13、称量完毕，保持天平清洁，物品按原样摆放整齐

光学显微镜使用规范

1、取镜和放置：右手紧握镜臂，左一手托住镜座取出。（特别禁止单手提显微镜，防止目镜从镜筒中滑脱）。放置桌边时动作要轻。一般应在身体的前面，略偏左，镜筒向前，镜臂向后，距桌边7～10 ㎝处，以便观察和防止掉落。然后安放目镜和物镜。

2、对光：用拇指和中指移动旋转器，使低倍镜对准镜台的通光孔。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察(右眼睁开)，同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。

3、低倍镜的使用方法

（1）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。

（2）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

4、高倍镜的使用方法

（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。

（3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)

恒温干燥箱使用规程

一、目的

建立恒温干燥箱的操作规程，保证操作人员正确操作。

二、范围

适用于样品的干燥、玻璃仪器的烘干。

三、职责

操作人员对本规程的实施负责。

四、操作程序

1、接通电源，打开电源开关。

2、设置加热温度

3、待温度达到设置温度并无异常情况，稳定后放入样品，开始记时至所需干燥程度。

五、注意事项

1、设置温度时，通常将温度设置稍低于实验温度，待温度达到设置温度后，再设置到实验温度。

2、新购电热恒温干燥箱应校检合格方能使用，所有电热恒温干燥箱每年由计量所校检一次。

3、干燥箱安装在室内干燥和水平处，禁止震动和腐蚀。

4、使用时注意安全用电，电源刀闸容量和电源导线容量要足够，并要有良好的接地线。

5、箱内放入试品时不能太密，散热板上不能放试品，以免影响热气向上流动。

恒温培养箱使用规范

一、目的：建立恒温培养箱标准操作及维修保养规程，用以保证实验仪器操作的一致性。

二、操作前准备：对箱体内清洁，消毒合格后，执行如下程序。

三、操作过程

1、接通电源，开启电源开关。

2、调节调节器按钮，至调节温度档，并调节至所需温度，点击确认按钮，加热指示灯亮，培养箱进入升温状态。

3、如温度已超过所需温度时，可将节器按钮调至调节温度档，并调节至所需温度，待温度降至所需温度时，即将调整至红灯指示灯自动熄灭点，好能自动控制所需温度。

4、箱内之温度应按照温度表指示为准。

四、维修保养及注意事项

1、恒温培养箱必须有效接地，以保证使用安全。

2、在通电使用时忌用手触及箱左侧空间内的电器部分，或用湿布揩抹及用水冲洗。

3、电源线不可缠绕在金属物上或放置在潮湿的地方。必须防止橡皮老化以及漏电。

4、实验物放置在箱内不宜过挤，使空气流动畅通，保持箱内平均受热，在实验时，应将顶部适当旋开，使湿空气外逸以利于调节箱内温度。

5、箱内外应每日保持清洁，每次使用完毕应当进行清洁。

6、若长时间停用，应将电源切断。

霉菌培养箱操作规程

一、目的：建立霉菌培养箱的操作规程，保证正确使用。

二、操作规程

1、通电：将本机电源插头插入电源座中，按面板上电源开关，开关指示灯亮，表示电源已接通。

2、按动面板上照明开关，开关指示灯亮，同时箱内照明灯点亮。再按一下灯熄灭。

3、控温仪菜单操作：按照使用说明书调节。

4、培养箱应经常保持清洁，切忌用酸、化学稀释、汽油、苯之类的化学物品清洗箱内的任何部件。

5、在使用过程中，遇到突然停电时，应及时将电源插头拔下，至少待5分钟后方可重新通电启用。

6、开机正式使用前，清楚操作程序后方可开机使用。

7、外壳必须有效接地，以保证使用安全。

8清洁：每月对培养箱内部进行清洁，用消毒液进行擦拭消毒，用干净的微湿的抹布将外表面擦拭干净。

三、注意事项

1、仪器必须安放在坚固平整的地面上，以免运转时产生不必要的麻烦。电源应有可靠接地确保安全。

2、培养箱的门不宜经常打开且不宜长时间打开

3、培养箱放置的空间要足够大

电子恒温水浴锅使用规程

一、操作规程

1、将水浴锅放在固定的平台上，电源电压必须与产品要求的电压相符，电源插座应采用三孔安全插座，必须安装地线。

2、使用前先将水加入箱内，水位必须高于隔板，切勿无水或水位低于隔板加热，以防损坏加热管。

3、插上电源，打开开关，将控温设定旋钮调至所需要的温度刻度。绿灯亮表示升温，红灯亮表示定温。

二、注意事项

注水时不可将水流入控制箱内，以防发生触电，不用时将水及时放掉，并擦干净保持清洁，以利于延长使用寿命。

真空干燥箱的使用规程

一、操作过程：

1、需要干燥处理的物品放入真空干燥箱内，将箱门关上，并关闭放气阀，开启真空阀，在开启真空泵电源开始抽气，使箱内达到真空度-0.1MPa，关闭真空阀，在关闭真空泵电源开关。

2、把真空干燥箱电源开关拨至开处，选择所需的设定温度，箱内温度开始上升，当箱内温度接近设定温度时，加热指示灯忽亮忽熄，反复多次，一般120min以内搁板层面进入恒温状态。

3、当所需工作温度较低时，可采用二次设定方式，如所需工作温度60℃，第一次可先设定50℃，等温度过冲开始回落后，再第二次设定60℃，这样可降低甚至杜绝温度过冲现象，尽快进入恒温状态。

4、根据不同物品不同潮湿程度，选择不同的干燥时间，如干燥时间长，真空度下降，需要再次抽气恢复真空度，应先开启真空泵电机开关，再开启真空阀。

5、干燥结束后，应先关闭电源，旋动放气阀，解除箱内真空状态，再打开箱门取出物品。（解除真空后，因密封圈与玻璃门吸紧变形不易立即打开箱门，应稍等片刻等密封圈恢复原形后，才能方便开启箱门。

二、注意事项：

1、真空箱外壳必须有效接地，以保证使用安全。

2、真空箱不连续抽气使用时，应先关闭真空阀，在关闭真空泵电机电源，否则真空泵油要倒灌至箱内。

3、取出被处理物品时，如处理的是易燃物品，必须带温度冷却至低于燃点后，才能放入空气，以免发生氧化反应引起燃烧。

4、真空箱无防爆装置，不得放入易爆物品干燥。

5、非必要时，请勿随意拆开边门，以免损坏电器系统。

三、维护与保养：

1、真空箱应经常保持清洁，箱门玻璃应用松软棉布擦拭，切记用反应的化学溶剂擦拭，以免发生化学反应和擦伤玻璃。

2、如真空箱长期不用，应在电镀件上涂中性油脂或凡士林，以防腐蚀，并套好塑料薄膜防尘罩放在干燥的室内，以免电器件受潮而影响使用。

PH计的使用规程

一、使用方法：

1、测PH值：功能开关置PH档，调节温度补偿旋钮，使旋钮所指值和被测溶液温度一致，接上PH复合电极（或PH电极、参比电极）。用去离子水（或二次蒸馏水，下同）清洗电极，再用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，仪器显示被测溶液的PH值。

2、测离子浓度：功能开关置MV档，接上相应的离子选择电极，参比电极。用去离子水清洗电极，再用滤纸吸干，插入被测溶液中，仪器显示的即该离子浓度时的电极电位（MV值）。

二、维护和注意事项：

1、电极输入插头保持高度清洁，并保证接触良好（有污迹时可用99%工业酒精擦净）。

2、与仪器配套使用的有关电极的使用和维护保养，请务必参考有关电极使用说明书。

3、仪器不使用时请将选择电极插口保护帽套上。

糖度计的使用规程

一、糖度计的原理

利用手持式折光仪测定果蔬中的总可溶性固形物（Total Soluble Solid，TSS）含量，可大致表示果蔬的含糖量。光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象，且入射角正弦之比恒为定值，此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下（同一温度、压力）成正比例，故测定果蔬汁液的折光率，可求出果蔬汁液的浓度（含糖量的多少）。常用仪器是手持式折光仪，也称糖镜、手持式糖度计，通过测定果蔬可溶性固形物含量（含糖量），可了解果蔬的品质，大约估计果实的成熟度。

二、、操作步骤

打开手持式折光仪盖板(a)，用干净的纱布或卷纸小心擦干棱镜玻璃面。2.在棱镜玻璃面上滴2滴蒸馏水，盖上盖板。于水平状态，从接眼部（b）处观察，检查视野中明暗交界线是否处在刻度的零线上。

3.若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋，使分界线面刚好落在零线上。4.打开盖板，用纱布或卷纸将水擦干，然后如上法在棱镜玻璃面上滴2滴果蔬汁，进行观测，读取视野中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（%）（糖的大致含量）。5.重复三次。

pHS-3C型酸度计操作规程

一、操作规程

1、接通电源，打开开关，并将功能开关置pH档，接上复合电极预热20min。2、复合电极用纯化水清洗干净，并用滤纸吸干，将复合电极插入一pH（接近待测溶液的pH）的标准缓冲溶液中；调节定位旋钮，使仪器显示的pH值与该标准缓冲溶液在此温度下的pH值相同。、把电极从此pH的标准缓冲溶液中取出，用纯化水清洗干净，并用滤纸吸干，插入另一pH（两个PH包含待测溶液pH）的标准缓冲溶液中，调节斜率旋钮，使仪器显示pH值与该溶液在此温度下的pH值相同。、把标准缓冲溶液中取出，用纯化水清洗干净，用滤纸吸干，插入被测溶液中，等仪器显示的pH值在1min内改变不超过±0.05时，此时仪器显示的pH值即是被测溶液的pH值。、对弱缓冲液（如水）的pH值测定，先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液校正仪器后测定供试液，并重取供试液再测，直至pH值的读数在1min内改变不超过±0.05为止，然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器，再如上法测定二次pH值的读数相差不超过0.1，取二次读数的平均值为其PH值。、测量完毕，用纯化水冲洗电极，再用滤纸吸干；套上电极保护套（套中盛满电极保护液）。二 注意事项、测定前，按各品种项下的规定，选择二种pH值相差3个单位的标准缓冲液，使供试液的pH值处于二者之间。、取与供试液pH值较接近的第一种标准缓冲液对仪器进行校正（定位），使仪器示值与标准缓冲液数值一致。、仪器定位后，再用第二种标准缓冲液核对仪器示值，误差应不大于±0.02pH单位。若大于此偏差，则小心调节斜率，使示值与第二种标准缓冲液的表列数值相符。重复上述定位与斜率调节操作，至仪器示值与标准缓冲液的规定数值相差不大于0.02pH单位。否则，须检查仪器或更换电极后，再行校正符合要求。4、配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新滤过的冷蒸馏水，其pH值应为5.5～7.0。、标准缓冲液一般可使用2～3个月，如有浑浊、发霉或沉淀等现象时，不能继续使用。、电极玻璃很薄，使用时要小心保护。、电极插入溶液后要充分搅拌均匀（2~3min），待溶液静止后（2~3min）再读数。

8、复合电极的外参比补充液是3M的氯化钾溶液（55.9g分析纯氯化钾溶解于250ml去离子水中）。电极的引出端，必须保持干净和干燥，绝对防止短路。9、仪器标定好后，不能再动定位和斜率旋钮，否则必须重新标定。

DDS-307型实验室电导率仪操作规程

一、仪器正常工作条件 环境湿度：（5~40）℃； 相对湿度：不大于90% 供电电源：9V直流外接电源（内正外负）300mA 除地磁场外，周围无其他电磁场干扰。

二仪器的使用 1仪器的连接

先将电导电极连接到仪器后面板的测量插座上（插头 插座上的定位销对准后，按下插头顶部可使插头插入插座。如欲拔出插头，则捏其外套往外拔即可）。将随机所配直流电源连接到仪器后面板的9V插座上，直流电源的另一端连接到交流220V市电上。2 仪器的初始化

a．初次使用本仪器必须根据所配套电导电极的电极常数对仪器进行初始化 b．开机，按仪器的“电源”键，使仪器显示屏点亮，按“MOD”键。使仪器“常数”点亮并闪耀，同时显示上一次设定的电导电极常数值，仪器出厂时的设定值为1.000；

c．根据所配电导电极的电极常数，再按仪器的常数“▲ ▼”键，使仪器显示值与电导电极的电极常数值相一致。

d．按仪器的“ENT”键确认，仪器的电导电极常数设定完成，仪器自动进入温度补偿系数的设定，此时仪器“系数”点亮并且闪耀，同时仪器显示上一次设定的温度补偿系数，仪器出厂时的设定值为2.0 e．根据被测介质不同选择不同的温度系数，常规测量使用2.0，即温度补偿系数为2.0% f．按仪器的“ENT”键确认，仪器的温度补偿系数设定完成，仪器回到测量状态。如果不调电导电极，再下一次使用时没有必要对仪器进行初始化。直接开机进入测量即可。3电导率的测量

a． 开机，仪器自动进入测量状态。(如果仪器已初始化，就没有必要对仪器进行再一次初始化)； b． 按仪器的“▲ ▼”，此时仪器的温度符号“℃”闪耀，表明仪器处于温度调整状态，使仪器的温度显示值与被测介质的温度相一致，按仪器的“ENT”键确认，仪器返回测量状态；

c． 用蒸馏水清洗电导电极，再用被测试样清洗电导电极

d． 把电导电极插入被测溶液中，用玻璃棒搅拌溶液，使溶液均匀，仪器显示被测介质的电导率值

第三篇：微生物实验室检测规范

一、实验室管理制度

1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。

2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。

3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。

4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。

5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。

6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。

二、仪器配备、管理使用制度

1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH计、高速离心机。

2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。

3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。

4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。

5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。

6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。

7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。

三、药品管理、使用制度

1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。

2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。

3．领用药品试剂，需填写请领单、由使用人和室负责人签字，任何人无权私自出借或馈送药品试剂，本单位科、室间或外单位互借时需经科室负责人签字。

4．称取药品试剂应按操作规范进行，用后盖好，必要时可封口或黑纸包裹，不使用过期或变质药品。

四、玻璃器皿管理、使用制度

1．根据测试项目的要求，申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求，硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。

2．大型器皿建立帐目，每年清查一次，一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登记清单。

3．玻璃器皿使用前应除去污垢，并用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h后，用清水冲洗干净备用。

4．器皿使用后随时清洗，染菌后应严格高压灭菌，不得乱弃乱扔。

五、安全制度

1．进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。

2．在进行高压、干烤、消毒等工作时，工作人员不得擅自离现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行，试验过程中如产生毒气时应在避毒柜内操作。

3．严禁用口直接吸取药品和菌液，按无菌操作进行，如发生菌液，病原体溅出容器外时，应立即用有效消毒剂进行彻底消毒，安全处理后方有离开现场。

4．工作完毕，两手用清水肥皂洗净，必要时可用新洁尔灭、过氧乙酸泡手，然后用水冲洗，工作服应经常清洗，保持整洁，必要时高压消毒。

5．实验完毕，即时清理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行消毒灭菌处理。

6．每日下班，尤其节假日前后认真检查水、暖气、电和正在使用的仪器设备，关好门窗，方可离去。

六、环境条件要求

1.实验室内要经常保持清洁卫生，每天上下班应进行清扫整理，桌柜等表面应每天用消毒液擦拭，保持无尘，杜绝污染。

2.实验室应井然有序，不得存放实验室外及个人物品、仪器等，实验室用品要摆放合理，并有固定位置。

3.随时保持实验室卫生，不得乱扔纸屑等杂物，测试用过的废弃物要倒在固定的箱筒内，并及时处理。

4.实验室应具有优良的采光条件和照明设备。

5.实验室工作台面应保持水平和无渗漏，墙壁和地面应当光滑和容易清洗。

6.实验室布局要合理，一般实验室应有准备间和无菌室，无菌室应有良好的通风条件，如安装空调设备及过滤设备，无菌室内空气测试应基本达到无菌。

7.严禁利用实验室作会议室及其他文娱活动和学习场所。

第四篇：微生物实验室无菌操作技术规范

1.目的

规范无菌操作流程，减少及避免发生染菌现象出现。

2.使用范围

无菌室及洁净区的操作。

3.无菌操作技术原则

3.1 环境要清洁，在每次无菌操作结束后都需要对环境进行清理、清洗；且避免操作前进行清扫。

3.2 做好个人卫生，进入无菌室前需修剪指甲、洗手，穿好无菌服，帽子需遮住所有头发，口罩遮住口鼻。

3.3 在无菌操作时，不可讲话，打喷嚏，对怀疑染菌的无菌物品，不可使用。

4.内容

4.1.1准备：工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲；备齐用物（如：接种针、接种环、酒精灯、斜面、平皿、摇瓶、75%酒精棉、无菌水等）；核对无菌用品，接种菌种的种类、型号。

4.1.2 所有实验使用的物品都需要进行消毒、灭杀；进入洁净区前需要经传递窗进行紫外表面消毒30min以上；

4.1.3 开始实验前需要打开超净台的紫外灯，消毒半个小时以上；超净台避免放入过多的物品（一般只放入当次的实验所有的物品），所使用的试剂和耗材都需事先进行灭菌（灭菌日期超过4天的需重新消毒）。

4.1.4 进入洁净区前关闭紫外灯，并打开风机，等待半个小时以上，使臭氧尽量排放干净。4.1.5 除去手腕等部位的饰品，穿好无菌服，戴好头套、口罩，做到“三不漏”：不暴漏头发，不暴漏口鼻，不暴漏躯干皮肤和衣物。4.1.6双手要进行清洗、消毒。

4.1.7要经风淋室风淋30秒后再进入洁净室。4.1.8在局部百级区域操作要戴一次性无菌手套。4.1.9 实验操作过程中应尽量减少进入洁净区的人员（不超过4人/间）并尽量减少人员走动。4.1.10 所有要放入超净工作台的物品都需进过消毒液喷洒擦拭消毒。

4.1.11无菌物品若取离超净台则视为已污染，不得放回再用；无菌液体在取离超净台前必须密封其开口；密封的无菌液体容器在放入超净台后，对其开口前须对开口在酒精灯火焰上烧烤。

4.1.12在拆开任何一次性无菌使用耗材的包装时都要在超净台内完成，并须同时保证与细菌直接接触的使用端/面不得与超净台内的任何物品发生触碰。4.1.13工作台面上的用品要放置有序、布局合理，一般说酒精灯（当工作不需要时也可不用）在中间，右手使用的物品在右侧，左手使用的物品在左侧。工作时忌忙乱而要有序。4.1.14 开始操作前先用医用酒精对双手进行消毒。4.1.15点燃洁净工作台内的酒精灯，在打开/关闭试剂瓶口、试管口时应将瓶口或者试管口过火；接种针、接种环在使用前或在与台面发生碰触后应经过火焰的灼烧；接种针/接种环过火操作方法为：使其头部到身部反正面在火焰上各烤燎通红；烧过的器械要冷却后才能使用，以免对细菌造成损伤。

4.1.16操作前试管（或摇瓶）口需要在火焰上方反转镣铐两周。4.1.17操作时左手拿试管（或摇瓶），右手拇指、食指、中指操作接种针（接种环），右手小指和无名指夹住瓶塞，取下瓶塞，瓶塞再反转镣铐两周后开始操作。4.1.18在超净台内，尽量避免瓶口长时间敞开直立。

4.1.19盖封瓶口时，应将瓶口和瓶盖内面各自在火焰上燎烤两周再盖上瓶盖。

4.1.20实验用胶塞、橡皮乳头等橡胶和塑料用品在过火焰时也不能时间过长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养的细胞。4.2 无菌液体标准转移程序：

4.2.1无菌液体的转移须在超净台进行，转移过程要尽量保持密闭，必须用移液管或移液器来完成操作；

4.2.2 移液管上方口应塞入棉絮（脱脂棉），用牛皮纸包好进行消毒灭杀；

4.2.3无菌液体瓶再封口时，须将瓶口和瓶盖分别燎烤2周后再封盖；封盖后须贴上相应的标签；

4.2.4在使用移液管转移液体时，应保证移液管尖端距移液器边缘1cm以上；在使用移液管时，每次液体吸入量不应超过移液管的警示标记，更不能触及移液管上方的防尘棉絮；在使用移液管移出废液时，移液管尖端应距废液缸5cm以上；在将细胞悬液转移至培养瓶中时，移液管尖端应距培养瓶0.5cm以上；

4.2.5放置吸管时管口应向下倾斜，以防液体倒流入橡皮乳头内而引起污染或者损坏电动移液枪；

4.2.6向离心管、细胞冻存管、培养瓶、培养皿内添加液态物质时，所加入的量不应超过管上所标示的最大量；

4.2.7实验人员在操作时，应保证开口离心管或开口试剂的上方为不可逾越区；严格禁止采用双臂交叉的方式来拿取尚在开口状态的离心管或试剂瓶；在面向操作台工作时勿大声讲话或咳嗽，以免喷出的唾沫把细菌带入工作台面发生污染；

4.2.8在使用细胞刮刀时，手握部位应尽量远离培养瓶口，以防污染；

4.2.9如果在转移任何液态物质的过程中出现滴漏，则应立即使用消毒液浸泡的棉球或纱布擦净；

4.2.10使用完毕的实验耗材应在第一时间内处理完毕，避免堆积在超净台内或层流罩上，以防污染；

4.2.11当所有操作完成后，应及时使用消毒液对台面进行清理；擦拭完毕后再开启紫外灯照射一个小时。

第五篇：微生物实验室安全管理规范

微生物实验室安全管理规范

1微生物室接种、培养、鉴定等有传染性风险操作必须在无菌室内进行，非本室工作人员严禁入内。微生物室工作人员，在所有的细菌培养处理过程中都应戴乳胶手套，穿隔离衣，戴口罩，采取正确的自我保护措施。拒收不符合要求的培养基、培养管等。

4必须在生物安全柜内进行细菌暴露性操作，严防操作产生可能含有高浓度的致病菌或真菌的气溶胶。

5严格执行微生物实验室技术操作规范、操作规程，自觉参加有关知识培训，及时更新知识。6防止接触用于培养的塞子和胶带等可能含有高浓度的致病菌的一切物体。

7及时处理在培养过程中产生的污染物，严防病原微生物的扩散，微生物实验室的废弃物必须高压灭菌。

8发现可疑高致病性病原微生物时，必须立即向室负责人报告。

9发生实验室生物安全事故时立即按生物安全事故处理预案执行。