mtDNA异质性及其法医学应用

第一篇：mtDNA异质性及其法医学应用

【关键词】mtdna；异质性

【中图分类号】d919．

2【文献标识码】b

【文章编号】1007—9297(2006)02—0140—0

4线粒体dna(mitochondrial dna，mtdna)是惟一的细胞核外dna。人类mtdna为一裸露的环状双链

结构，长16569 bp，由富含嘌

呤的重链(h链)和富含

嘧啶的轻链(l链)组成。mtdna编码区的序列相对保

守，其非编码区长1 122 bp，又称为控制区。控制区的碱基变异相对集中分布在15996～16401nt和29～408

nt两个区段，分别称为hv i和hvli。后来，lutz等【l】

发现在438～574nt间也存在较多的碱基变异，称为

hvⅲ。mtdna呈母系遗传特征，加之其拷贝数多、突

变率高、抗腐败能力强，具有极高的法医学应用价值。

个体发育源于一个受精卵，理论上同一个体所有的mtdna序列应是一致的。但实际却发现有少数同

一个体的mtdna碱基序列并不完全相同。这种同一

个体mtdna出现两种或两种以上的碱基序列的现象

称为异质性(heteroplasmy)。121其在人体的存在表现为

同一个体不同组织、同一组织不同细胞或同一细胞不

同线粒体之间存在不同的mtdna序列。

一、mtdna异质性形成的可能机理

mtdna异质性发生机制至今还不是很清楚

hauswi~h和laipis(1982)在研究牛线粒体dna多态

性时发现异质性线粒体dna在卵母细胞和胚胎早期

发育阶段发生快速分离的现象，从而提出线粒体dna

遗传的瓶颈理论。[31后来人们多用该理论来解释

mtdna异质性的形成原理。

mtdna异质性的本质是突变．即突变型和野生型

mtdna以不同比例共存，其发生与mtdna拷贝数多、不对称复制及缺乏校正修复机制等密切相关。瓶颈理

论认为：卵母细胞在分化成卵细胞及形成受精卵的过

程中，卵母细胞和受精卵中数千个mtdna子集合群

体(不同序列mtdna混合)，似通过瓶颈一样的阻塞

作用而使各个mtdna子集合群体数量明显减少，只

有少数mtdna进行选择性复制，故一种突变基因型

可以占优势并固定出现在下一代中。ashley等[41发现

该“瓶颈理论”结果与人类mtdna相似，即在单个个

体中异质性的大小可以改变，子代可以有不同的基因

型，仅仅两三代异质性就可以转为同质性。

共存的突变型和野生型mtdna通过减数分裂或

有丝分裂随机分布到子代细胞中，由此细胞中突变型

和野生型mtdna比例随之发生随机增减，也称遗传

渐变，最终，再分裂的子代细胞有向全部为突变型或

野生型mtdna。即同质体的方向发展的趋势，该过程

称为“复制分离”。随着复制分离和遗传渐变的发生，一些mtdna中选择作用不明显的突变建立起同质

体．并以一定的频率保留于人群中．形成mtdna某些

区段的多态性。然而，一些重度突变因复制分离造成的同质体个体极易因自然选择而淘汰。因而，多数重

度突变无法建立起同质体，表现为异质体，异质体在人群中往往只能建立较低频度的多态性。

遗传瓶颈出现在卵细胞形成过程中的推测后来

得到了证实。bendall等【5i研究了180对双胞胎，其中

发现4例有异质性。采用遗传渐变理论模式推算，估

计减数分裂的代间瓶颈大约有2至，100个分子．对于

特定的母子间传递的mtdna估计有3～2o个分子

作者计算人mtdna—hvi的突变和固定的率在1．2x

1o ～2．7×10-5／每代、每位点之间，相当于1个转位

突变／2500年至1转位突变／55000年的范围。调查结

果与其他文献报告基本相符，说明遗传瓶颈相对比较

狭窄，形成了一种制约因素。调查结果也证实，不同的母系间的瓶颈大小确有差异。

一个成年人体内mtdna估计有一兆，mtdna复

制聚合酶缺乏忠实性，受精后的细胞发育过程中出现

变异，形成组织间mtdna型别差异的可能性的确存

在。有研究发现原胚层组织异质性是一致的，胎儿各

组织型别一致，但到了成人，不同组织的异质性分布

【作者简介】翟仙敦(1977一)，女，山西临汾人，硕士研究生，助教，主要从事法医遗传学研究。tel：+86—027—83692645；e—mail：san—

mao506@ 163．corn。

法律与医学杂

志2006年第l3卷(第2期)

出现差异。tully等(1998)用dgge方法检测21名成年人不同组织如血、骨、毛发、肝、肌肉，发现异质性出

现的程度有差异，有的容易检出 有的不能检测。研究

资料显示，在细胞分化、发育过程中，也可有mtdna

控制区碱基变异。实验观察组织问异质性的发生存在与

卵细胞形成过程中类似的瓶颈，ciafaloni等发现同

一个体不同组织变异型与野生型mtdna出现率有差

异，证实了组织问存在异质性的分离。例如某妇女，经

过多次提取口腔拭子和血样，检测出异质性，同个体

头发材料，5根是16355t，3根是16355c，2根是两种

型的混合物。提示在细胞分化、发育过程中也可能存

在另一种瓶颈。

二、mtdna异质性的类型及好发位置

异质性按其存在形式分为点异质性和长度异质

性两类，它既可发生在代问也可发生于代内。正常人

mtdna异质性高发于控制区，而编码区几乎没有。[6

1通常，异质性序列之间差异仅限于某一个碱基，称

为点异质性。同时出现两个位置碱基序列不同的概率

虽小，但仍有报道：而同时出现3个或者3个以上的情况至今尚未见报道。mtdna序列变异主要是复制过

程中碱基错配，其中转换占90％以上。少数是颠换。点

异质性主要集中于hvi和hvii。hvi碱基转换类型

多发生在嘧啶之间，约为80％。hvii的转换碱基中，嘧啶与嘌呤约各占一半。颠换多发生于c和a之间．

并几乎都集中在hvi。人群中点异质性的发生率因检

测方法的灵敏度不同而差异很大。hvi 16 189nt碱基

替换的发生率很高，其中t—c转换高达l5％。

长度异质性主要发生于hvi 16184 16193 nt

和hvii 303—315 nt的c—stretch区，表现为c数目的差异。在序列测定时可观察到16 189 nt和310 nt

后多个信号峰交叠形成的模糊序列，即“手指样结

构”。[71根据anderson序列，c—stretch分别于16 189 nt

和310nt被t阻断，可能由于复制滑动引起的相同碱

基单调连续趋势，该区被认为是突变的热点 而这一

趋势产生了长度异质性。bendall等[8】也认为长度异质

性形成原因主要是dna 复制滑动。无关个体问

mtdna长度异质性差异较大，根据hvii 303 309

nt碱基c数目的多少，可分为单纯同质性(c7)、轻度

异质性(c8为主)、明显异质性(c8和c9为主)和t—c

转换后序列失控(c10一c14)4种。hvi 16 189nt约

l5％的t—c转换中又有66％形成长度异质性。[91与

hvi不同，hvii的t很少缺失。由此认为hvii的长度

异质性机制是c在303—309 nt区域内的插入和复制

滑动，形成3lont p c的转换。同一母系中，与16 189

· l4l ·

突变相关的长度异质性，分布和变化相对稳定，但无

关个体问差异很大。bini等[1ol研究发现异质性长度c的个数与c—stretch上游的a碱基数目呈负相关，相

对于c数目的不稳定性，同一个体a数目恒定，这一

发现对家系分析和法医学领域中包括单根毛发在内的组织比较有较大意义。一般而言，如果c—stetch区的c多于8个，就会增加长度异质性的几率。⋯

1通常．骨骼肌和神经组织的异质性水平相似，毛

发中相对较高．外周血的异质性最低。[121

三、mtdna异质性检测方法

(一)测序

序列测定是检测mtdna多态性和异质性最常用的方法。尽管一直以来测序被认为是检测突变的金标

准，但若异质性水平低于20％该方法即很难检出，这

也是先前普遍认为异质性发生率很低的原因。克隆后

测序又比pcr产物直接测序更可靠，因其可排除因

pcr过程中taq dna聚合酶滑脱造成的序列改变。

对hvii轻链测序发现，由于临近c—stretch区产生的长度异质性使3lont的异质性比率达50％，这是一种

普通的人为假象，通过对重链的测序可消除该假象。[1

31因此为避免可能存在的影响，mtdna高变区序列测定

要求对重链和轻链进行双向测序，并至少重复一次。

(二)序列特异性寡核苷酸(aso)探针杂交

pcr—aso分析技术先用pcr扩增得到靶dna

片段，再用aso探针与目的dna扩增片段杂交．阳性

结果说明靶dna含有与探针相应的等位基因。尽管

pcr—aso分析技术有操作简单、灵敏度高、特异性好

等优点，但目前所用特异性探针较少，系统的个人识

别能力有限是其局限性之一。多重pcr特异性寡核苷

酸片段用于检测突变链，可以发现小于l％的异质性，然而等位特异性扩增很容易受pcr初始熔链温度的影响，易发生错误的扩增，且无法估计异质性的数量。

(三)限制性片段长度多态性(restriction 哪ent

length polymorphism，rflp)分析

在mtdna高变区，大约有2／3的碱基变异涉及限

制酶识别位点，故可用rflp检测点异质性。与直接测

序相比，荧光rflp分析较低程度的异质性更灵敏一

些。但应注意避免因不完全消化而导致错误的结论。

(四)单链构象多态性(single strand conformation

polymorphism，sscp)分析

pcr—sscp技术可灵敏地检测到单一碱基的突

变，且具有操作简单、快速、成本低、灵敏度高、无假阳

性等特点，适用于大样本dna突变的筛查。但存在影

响因素较多、条件不易掌握及带型难以解释等问题。

· 142 ·

基于毛细管电泳技术发展起来的荧光sscp(f—sscp)

技术，其灵敏度非常高，特异性好，但技术要求及成本

均很高。

(五)变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel

electrophoresis，dgge)

dgge是基于待测dna片段双螺旋的解链温度

(tm)来进行突变检测的，它具有灵敏度高、分离片段

可回收测序、一次可检测大量样本等优势。1999年，steighner等㈣在评估pcr—dgge技术检测mtdna

hv1序列多态性的可靠性时。所有设计的49对配对

序列(每对仅存在1bp差异)用该技术可全部有效加

以区分。pcr—dgge技术检测异质性的灵敏度高达

l％，远远高于序列测定。但该技术存在实验之初需进

行计算机分析或预试验以确定最佳的分离条件、需使

用带gc—clamp的引物增加了实验费用、gc含量较高的片段不易分析、制备精确的梯度凝胶需要熟练的操

作技巧及复杂的仪器设备、仅能检测突变的存在不能

确定突变的类型等不足

(六)变性高效液相色谱(denaturing high—performance

liquid chromatography，dhplc)技术

dhplc是一种可自动检测单碱基替代及小片段

核苷酸插入或缺失的一种高性价比分离技术．具有自

动化、快速、经济、检出率高、检出dna片段大小范围

广、既可分析已知突变也能筛查未知变异等优点．成为目前分析已知或未知基因突变及单核苷酸多态性的最佳技术平台。目前只有f—sscp技术在敏感性和

特异性方面能与dhplc相媲美。其不足是不能检测

纯合突变(要检测纯合变异一定要预混等量的野生型

样品以产生异源杂合双链)，只能提示突变的存在．无

法确定具体的错配类型及位置，尚需测序进一步确

定；许多片段有多个主要解链温度．需要筛查的温度

点较多，增加了工作量。

dhplc可直接通过异源双链的形成来检测异质

性的存在。如有必要，还可根据保留时间的差异将不

同的片段各自收集后测序

(七)其他检测方法

融解曲线分析、基质辅助激光吸附电离飞行时间

质谱(matrix assisted laser desorption lonization time

of flight mass spectrometry，maldy—tof—ms)．dna

芯片(dna chip)等技术，都可以用于mtdna异质性的检测

四、mtdna异质性的法医学应用及展望

mtdna因其母系遗传特征、进化速率快、拷贝数

多等特点，使其在法医学鉴定中，尤其是对毛干、指甲

法律与医学杂志2006年第13卷(第2期)

等无核生物检材或核dna分型失败的样本具有特殊的应用价值。一方面，由于mtdna异质性的存在，使

其在进行常规个体识别和亲子鉴定等应用时使鉴定

结果产生不确定性；另一方面，mtdna异质性又可作

为个体的特殊标记，增加个体的认定或排除的确定

性。

法医个体识别鉴定中第一次遇到异质性问题是

末代沙皇尼古拉二世的遗骸鉴定案。l15】此后，mtdna

异质性问题逐渐引起法医学界的重视。早期研究认

为．mtdna的异质性在正常人群中很少见，可能与当

时的检测技术缺乏敏感性有关。随着相关技术的发

展．越来越多的文献报道在非编码区检出异质性，并

且以一定的频率存在于正常人群中。2o0o年，tully等

用dgge技术对253个随机个体血样的mtdna

hv1进行了分析．发现35个个体(13．8％)存在异质

性．其中33个为单核苷酸异质．2个为二核苷酸异质，这些异质性共涉及16个不同的核苷酸．进一步证实

了mtdna异质性存在的普遍性。salas等(20o1)报

告1例强奸案的头发．在同一根被害人头发的2个不

同部位取材．竟然发现序列有差异．一个结果是16 09

3t．16 189t：另一个结果是16093c／t．16 189c／t 由于

序列测定检测mtdna异质性灵敏度较低． 因而

mtdna异质性的出现对测序这种在法医学实践中应

用最广泛的mtdna鉴定手段是一种挑战

当比对两份mtdna的序列时．若dna序列相同

则表明这两份检材有可能来自同一个人或同一个母

系亲属，尤其是它们之间还具有相同的异质性时．这

种概率更大。国际法医遗传学会规定．在遇到两个样

本出现一个碱基不同，而且这个碱基位置被公认为是

异质性热点，则不能排除：当遇到两个碱基位置不同

时，如果两个位置都是异质性热点，则不能排除．否则

为不能判断。当出现3个位置的不同时．目前还没有

群体数据显示同一个体异质性同时在3个位置出现的情况，在排除污染、细胞核假基因扩增产物的情况

下，并按照国际法医遗传学会mtdna标准操作方法

执行的，可以做出排除结论。为避免错排．尤其是比较

来自毛发mtdna样品时，建议尽可能多的分析样品．

需要再取其他的材料如多根头发、唾液或血样进行复

查，以减少因异质性存在而被错排的可能性．如果多

份检材的异质性出现在同一位置的同一碱基处．反而

对认定同一个体检材有利

mtdna的异质性发生机制及在人群中、个体内不

同组织中的发生频率究竟有多高． 目前还未明了．有

待于进一步研究。由于异质性的存在．对于个体识别

法律与医学杂志2006年第l3卷(第2期)的鉴定，必须正确评估mtdna在法医常规检案工作的重要性。因此，要对样本做出相应准确可靠的判断，首先要了解群体中异质性的分布情况．熟悉各种异质

性出现的概率和相应位置。这就要求对群体进行异质

性调查，建立相应的异质性数据库，从而为线粒体

dna在法医学上的应用提供有效保证。异质性的检出

在很大程度上依赖检测方法的灵敏度．但目前尚未有

标准化的方法来检测mtdna异质性．需要开发一种

标准化的检测方法作为金标准。

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(收稿：2005—1 1—22；修回：2006—03—02)、!|、(上接第s4页)

良后果承担完全责任。建议我国借鉴美国的相关规定

来立法。

4．智能障碍(痴呆)和遗忘综合征：这类吸毒者的脑病理改变程度相当严重，恢复正常的可能性不大，即使评定有刑事责任能力，也无受审能力和服刑能

力，为节省办案成本和发扬人道主义精神，建议对他

们评定为部分或者无刑事责任能力。

5．残留性或迟发性精神障碍

其中的痴呆和遗忘综合征按“智能障碍(痴呆)和

遗忘综合征”处理，其他的均评定为有刑事责任能力。

为缩减控制吸毒人数，有法学人士主张我国刑法

应规定吸毒为犯罪行为。事实上，吸毒人群的确是犯

罪的高危人群，吸毒者成瘾后一般都有人格改变，变

得缺乏责任心、喜欢说谎、自制力差和懒散等，加上作

为下临床诊断的主要症状之一，也就是意识障碍，它

不同于别的精神症状．即医生鉴定时往往不能当场直

接发现该症状，确定有无意识障碍主要依靠警方收集的材料和被鉴定人案发后的积极配合，能指望爱说谎的吸毒者积极配合查证吗?有鉴于此，鉴定医生诊断其

精神障碍的准确性和法庭对部分刑事责任能力结论的采信度不无疑问。所以，笔者仍继续主张对精神异常的吸毒者犯罪一般以完全刑事责任能力评定为最优。如

果吸毒诱发了自身原有的精神病，且本人对作案行为

丧失或减弱辨认或者控制能力，则评定为部分刑事责

任能力。不评定无刑事责任能力是因为吸毒本身为法

律所禁止，行为人未尽戒毒义务有一定的主观过错，对

这部分过错本人应该承担相应的法律责任。

第二篇：PCR技术的法医学应用

PCR技术的法医学应用

PCR技术可以从一滴血、一个细胞中扩增出足量 DNA产物供分析检验。PCR技术的应用解决了许多以往血清学方法无能为力的问题，而且离体蛋白质在自然界中的稳定性远不如核酸。所以 DNA的PCR检验具有独到的优越性。目前，人们已建立了各种生物样品如血液、血斑、精液、性交混合物、肌肉、单根毛发、上皮细胞、牙齿、骨骼中制备 DNA的实验方法。目前PCR技术的法医学应用主要有： 1．VNTR多态性

该方法扩增位点靶基因多态性串联重复核心序列数目不同而形成。目前报道有十几种，比较成熟的有APOB、PMCT118、P33.6、P33.4、PYNZ22等位点。该方法简单，结

果易分析，缺点是在片段长度差异较大时，长片段可能被漏扩增，引起错误判断。2．性别鉴定

PCR性别鉴定目前应用于各种生物检材检验。通过扩增y染色体特异位点鉴定，用Alu序列作对照，也可以同时扩增x、y染色体特异性片段进行鉴定。3．STR分型检验

STR为短串联重复序列（Short Tandom Repeat）,形成多态性原理与VNTR相似，只是重复单位数3-6bp，片段长度100-400 bp。STR与VNTR分布也不同，VNTR主要分布在染色体端粒，而STR则存在于整个基因组，估计人类基因组有50万个STR位点，因此是巨大的遗传差异研究对象。

STR位点的突出特点是基因组内基因座多，多态片段短，在生物性检材个人识别鉴定中实用价值极高，高度腐败的检材只要保存了靶DNA，STR位点就可能扩增成功。STR的PCR扩增时间短，变性、退火和延伸每步只需30~60S，可在一个半小时左右完成30个循环。检测方法灵敏度高，甚至<1ng模板DNA都可扩增出多态片段。STR的扩增产物经高分辨聚丙烯酰胺凝胶电泳，用等位基因梯阶分子量标准物，即可准确的判断等位基因长度。可获得不连续的基因频率分布，便于Hardy-Weinberg平衡检验和偶合概率计算。

1993年在英国Colin等报导用复合扩增对12个STR位点进行研究，总排除率达1x10-14，表明STR复合扩增可以认定同一。STR在法医学中应用优点在于：

(1)操作方便简便，通过多位点累计，可以同一认定；(2)灵敏度高，复合扩增可以节约检材；(3)片段较小，适宜部分降解DNA的扩增。

4．线粒体测序技术

线粒体是真核细胞中与 能量代谢有关的细胞器，一个细胞中线粒体数的范围约为1000~10000个，所以线粒体DNA分析比细胞核DNA分析要灵敏得多，线粒体测序分析另一特点是可以对无核细胞检材，如毛干、红细胞骨头、指甲等进行分析，而且细胞核DNA进行测序分析必须用克隆的方法纯化出单一的DNA分子才能进行测序分析，而线粒体DNA可直接经PCR扩增测序。进一步研究表明，线粒体是母系遗传方式遗传的，所以一母所生子女应有相同的线粒体DNA序列。线粒体多变区在D区。扩增D区多态片段测序，就可以进行个体识别。

目前，世界上绝大多数法医 DNA鉴定实验室主要工作就是应用STR-PCR分型检验技术进行个体识别、亲权鉴定等工作。

第三篇：脑功能磁共振成像及其法医学应用前景

【摘要】脑功能磁共振成像是近年来磁共振成像技术的一项新发展。它不仅能清晰、准确地显示脑组织的解剖和

病理改变，还能同时观察到脑皮层功能活动时的信息，可无创、实时地对大脑的功能活动进行成像。为法医学领域中所涉

及的人体损伤程度鉴定和伤残等级评估以及对法医精神病领域中认知功能的界定．从单一形态学研究到形态与功能相

结

合的系统研究开辟了一条崭新的道路。本文就人脑的功能活动磁共振成像的概念、原理、优势、临床研究状况及法医学

应用前景进行综述。

【关键词】脑功能磁共振成像；法医病理学

【中图分类号】d919．1： r445．

2【文献标识码】b

【文章编号】1007—9297(2004)04—0291—0

4technology of functional magnetic resonance imaging of brain and appucation prospects in forensic medicine． ca i ji一，0 tao，pan hong-fu，et ．forensic pathology department，school ofleg~l medicine，sichuan university,chengdu

61004

1【abstract】technology of functional magnetic resonance imaging of brmn(fmrib)is a new approach developed in the

resent years． it can not only show clearly and accurately the changes of tissues，autopsy and pathology of the brain，but also

show the information of the activity of the brain in time without harm． it can be widely used in forensic medicine such as injury

gradated evaluation，disability evaluation and cognition in forensic assessment in psychiatry providing a new method from pure

morphological study to morphology-function combination study．this article reviewed the fmrib conceptions，principles，advan—

tages，the conditions of clinical study and application prospects in forensic medicine

．

【key words】functional magnetic resonance imaging of brain；forensic medicine

一、脑功能磁共振成像的概念与原理

(一)概念

脑功能磁共振成像(functional mri，fmri1，是一种

新兴的影像学检查技术。它以脑功能活动时引起的血

氧浓度改变为基础，采用不同颜色直接实时地将脑功

能变化反映在mr图像上，突破了既往研究脑功能的黑箱技术，以往的影像学检查技术绝大部分是依赖于

被检组织形态学的改变，而功能性成像这一领域一直

为正电子发射体层摄影(positron emission tomographv．

pet)所独有。随着mr技术的发展，fmri能在特定的脑功能活动时或血液动力学变化时对脑组织进行实时的功能成像，对人脑在生理和病理状态下的功能活动

进行有效的评价。其时间分辨率和空间分辨率均较高，一次成像即可同时获得解剖和功能影像，是目前人们

用mr方法研究大脑皮层功能活动的最主要方法

ri为脑科学研究提供了直观有效的研究手段．为医

学影像学的研究和临床开辟了全新的领域 lli

(二)基本原理

神经活动与血流动力学变化之间的密切关联是

ri的基础。人体各种生理活动都由相应的大脑皮层

[作者简介] 蔡继峰，四川大学华西基础与法医学院病理教研室在读研究生，tel；+86—28-89592918：e-ma11：cj f-j1feng@163

． com

。292。

第四篇：法医学题库

//课程名称：法医学（此题注解表示以下试题内容所属的课程）

//说明1：试题分类是指对试题进行归类管理，其格式可采用：XXX章/XXX节 //说明2：“所属知识点”是指一个试题所考核的知识点 //说明3：其他格式编排说明详见“技术规范文档” //说明4：以下试题的内容描述仅表示其编排格式。

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

[命题人]：温永启

[所属单位]：刑事科学技术系

[题型]：单选题

下列关于表皮剥脱的描述错误的是()A.多发生在钝器打击、坠落、交通事故等情况 B.剥脱处呈点、片状，露出湿润的真皮 C.剥脱处亦可形成皮革样化

D.剥脱处皮屑翻卷的方向与作用力方向相背 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/擦伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

有关挫裂创叙述错误的是（）

A.常伴有表皮剥脱、皮下出血 B.创壁光滑、整齐

C.创腔常见组织间桥 D.常伴有骨折 答案：B

分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> } [试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

对挫伤的法医学意义描述不正确的是（）A.可证明外力作用 B.可推断致伤物的种类

C.可判明生前伤 D.可认定致伤物 答案：D

分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/挫伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

皮下出血的特点（）

A.可发生在任何受损部位 B.范围边界模糊

C.颜色较浅呈淡紫红色 D.表面无异常 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/挫伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

挫伤的定义为钝器打击造成的（）

A.皮内出血 B.皮下出血

C.皮肤完整性破坏 D.皮内或皮下出血 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/挫伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

最能反应致伤物作用面特征的挫伤部位是（）

A.皮内 B.皮下

C.骨骼 D.帽状腱膜下 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/挫伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节 概述

内脏破裂的常见情况不包括（）

A 拳击脚踢 B 锐器穿刺 C 机械性窒息 D 交通事故 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/内脏损伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节概述

对表皮剥脱的法医学意义描述不正确的是（）A.判断生前伤、死后伤 B.判断死亡时间

C.推断致伤物 D.判断案件性质 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/擦伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第一节概述

下列哪项不属于皮下出血与尸斑的鉴别要点（）A.分布及边界是否清楚 B.镶边挫伤带 C.压之是否退色

D.切开有无血水样物质流出 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第一节 概述/基本形态/挫伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤

下列哪项不属于钝器作用方式（）A.子弹射入人体 B.盲人撞击电线柱 C.高坠

D.汽车与外人相撞 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤/概念 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤

棍棒打击人体不能形成的损伤是()A.中空性皮下出血 B.条状挫裂创

C.内脏碎裂 D.脊柱压缩性骨折 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤/分类/棍棒伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤

棍棒打击人体不能形成()A.中空性皮下出血 B.条状挫裂创

C.尸斑 D.颅骨的线状或舟状骨折

答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤/分类/棍棒伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第四节 火器伤

霰弹创的基本特征不包括()A.创口多、损伤面大 B.创口中心密集、周边疏散

C.创口周围无挫伤带 D.多无射出口 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第四节 火器伤/枪弹创/形态特征 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

他杀切创部位的特点()A.自己的手能触及的部位 B.身体的任何部位

C.身体易受伤的部位 D.第二性征及关节部位 答案：B

分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/分类/切创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

锐器创的特点（）

A.创壁光滑 B.创缘不整齐

C.创腔有组织间桥 D.创缘伴有表皮剥脱 答案：A

分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/形态特征 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第四节 火器伤

下列有关枪弹创描述不正确的是（）A.近距离射击时，射入口小于射出口 B.远距离射击时，射入口小于射出口 C.近距离射击时，射入口周围能检出火药颗粒 D.射入口可检见挫伤轮

答案：A

分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第四节 火器伤/枪弹创/形态特征 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第四节 火器伤

下列哪项不能作为判定枪弹射入口的依据（）A.皮肤创口中心组织缺损 B.创口周围皮肤外翻 C.挫伤轮与擦拭轮 D.烟晕火药颗粒

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第四节 火器伤/枪弹创/形态特征 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

切创常见的部位不包括（）

A.腕部 B.颈部 C.头部 D.腹股沟部 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/分类/切创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

下列哪项不属锐器创的特点（）A.创腔间有组织间桥 B.创角锐利 C.创缘整齐 D.创壁平整

答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/形态特征 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

下列哪些描述是错误的（）

A.切创多在颈部、腕部、腹股沟部、面部；砍创多在头面部、颈部及四肢 B.切创创角锐利，并有延长线；砍创创角锐利，无延长线

C.切创创缘整齐，难以发现表皮剥脱和皮下出血 D.切创不伤及骨质；砍创多伤及骨质，形成砍痕或骨折 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/分类/切创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

关于刺创特征的描述错误的是（）A.创口小 B.创腔深

C.常伤及内部器官或大血管 D.刺入口形状大于刺器横断面 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/分类/刺创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定

下列有关他杀损伤描述不正确的是（）A.可发生在伤者不易或难以形成损伤的部位 B.重伤多，致命伤可有多处 C.分布范围广，排列多紊乱 D.无抵抗伤或防卫伤 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定/死亡方式/他杀伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定

下述属于自杀损伤特点的是（）A.两处以上的致命伤

B.损伤分布集中、排列平行 C.颈部挥鞭状损伤 D.损伤手段残忍 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定/死亡方式/自杀伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定

判断生前伤与死后伤的依据（）A.超生反应 B.损伤的部位

C.生活反应 D.损伤的轻重程度 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第五节 机械性损伤的法医学鉴定/生前伤与死后伤的鉴别 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤

下列哪项不属于他杀切创特点（）A.切口位于颈部和其它部位，常在卧位造成 B.常有试切创

C.切创刀口方向零乱 D.伤势较重 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第三节 锐器伤/分类/切创 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤

“竹打中空”是（）A.表皮剥脱 B.皮内出血 C.锐器伤 D.挫裂创

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第四章 机械性损伤/第二节 钝器伤/分类/棍棒伤 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断

夏季尸体周围发现蛹壳和幼蝇，说明死者死亡时间为（）A.一周左右 B.二周左右 C.三周左右 D.1个月

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断/根据蝇蛆生长发育情况进行推断 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断

春秋季节室温下，测尸体温度为22℃，如人体正常体温为37℃，则死者死亡时间约为（A.15小时 B.20小时 C.36小时 D.15天

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断/根据尸体现象进行推断 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

人死亡后发生自溶最快的器官是（）A.胃肠 B.胰腺 C.肝脏 D.心脏 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/自溶 认知层次：理解）试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

容易与皮下出血混淆的尸体现象是（）A.尸斑

B.皮革样化 C.尸绿 D.腐败水泡 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第二节 晚期尸体现象

下列哪一项属于保存型尸体现象（）A.白骨化 B.尸僵 C.皮革样化 D.尸蜡 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第二节 晚期尸体现象/保存型尸体现象/尸蜡 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

影响尸斑发展的因素不包括（）A.尸长

B.血液是否流动状 C.体位是否固定 D.有无外力压迫 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

1.人体死亡后最早出现的尸体现象是下面的哪一个？（）

A.超生发应

B.肌肉松弛 C.尸冷

D.尸僵 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/肌肉松驰 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

仰卧位尸体尸斑不出现于（）A.胸部 B.项部

C.下肢后部未受压处 D.背部未受压处

答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象 一般情况下，扩散期尸斑出现的时间是在死后（）A.2小时 B.12小时

C.24小时 D.48小时 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/概述

下列哪项不属于尸体现象的法医学意义（）A.确证死亡 B.推断致伤物 C.推断死亡时间 D.提示死亡原因 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/概述/法医学意义 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

有关水中尸体，描述正确的是（）A.出现皮革样化

B.尸斑较浅

C.尸绿出现在头、胸部

D.不出现角膜混浊 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

冻死者，尸斑颜色呈（）A.鲜红色

B.暗紫红色

C.樱红色

D.紫色 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

一氧化碳中毒死亡，尸斑颜色呈（）A.鲜红色

B.暗紫红色

C.樱红色

D.紫色 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第二章 死亡/第三节 死亡分类

下述不属于暴力死的是（）A.自杀死

B.他杀死

C.意外死

D.自然死 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第二章 死亡/第三节 死亡分类/暴力死/性质 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

下列哪项不是尸体肌肉松弛后表现（）A.瞳孔散大

B.口紧闭

C.眼睛半闭

D.面部沟纹变浅 答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/肌肉松驰 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第二节 晚期尸体现象

尸体在下列哪种环境中，腐败最快（）

A.空气中

B.河水中

C.土壤中

D.沙漠中 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第二节 晚期尸体现象/毁坏型尸体现象/尸体腐败 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

下列哪项死亡现象，可以推断尸体有无被移动（）A.皮革样化大

B.尸体痉挛

C.尸斑

D.角膜混浊 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸斑 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

尸体痉挛是一种特殊的（）现象 A.尸僵 B.生物学 C.腐败 D.局部干燥 答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸体痉挛 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象

影响尸僵发展的因素不包括（）A.个体因素 B.死亡原因 C.饮食状况 D.死前肌肉运动情况 答案：C 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸僵 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断 根据以下尸体现象的程度:尸僵开始缓解,角膜混浊加重,瞳孔可辨,腹部出现尸 绿,口鼻眼蝇卵或蛆出现,其死亡时间为（）A.12-15 小时 B.24小时 C.24-48 小时 D.2-3 天

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断/根据蝇蛆生长发育情况进行推断 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断

根据以下尸体现象的发生程度,尸斑大片融合,指压不退色,尸僵延及全身,角膜 轻度混浊,推断死亡时间为（）A.1-4 小时 B.4-6 小时 C.6-12 小时 D.12-15 小时

答案： D 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第一节 早期尸体现象/尸僵 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断

[试题分类]: 第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断

根据尸温、尸斑、尸僵等尸体现象推断死亡时间在以下哪种情况下有意义（）A.尸体腐败发生以前 B.腐败发生以后数周 C.腐败发生以后数月 D.尸体低温或冰冻保存

答案：A 分数：2 难度：2 所属知识点：第三章 尸体现象/第三节 死亡时间的推断/根据尸体现象进行推断 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第一章 绪论/第一节 法医学概述

下列哪项是法医病理学的首要任务（）A．确定死亡方式

B．死者个人识别

C．推测死亡时间

D．确定死因 答案：D 分数：2 难度：2 所属知识点：第一章 绪论/第一节 法医学概述/法医学学科分类 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

[试题分类]: 第一章 绪论/第三节 法医学发展简史

《洗冤集录》的作者是（）A.王充 B.宋慈 C.张仲景 D.郑克

答案：B 分数：2 难度：2 所属知识点：第一章 绪论/第三节 法医学发展简史/中国法医学发展史 认知层次：理解 试题分析：{ <在此编写对该题的解题过程> }

第五篇：法医学习题

第一章 绪论

1、名词解释：法医学法科学法医学鉴定补充鉴定复核鉴定

2、问答题：

（1）、医学生学习法医学的目的与要求？

（2）、中国古代法医学的标志及成就？

（3）、法医学有哪些分支学科？目前法医学发展的特点及趋势？ 第二章 死亡与死亡学说

l、名词解释；脑死亡假死死亡学说超生反应根本死因直接死因辅助死因诱因 死因竞争死因联合主要／次要死因

2、问答题：

（1）脑死亡的概念及诊断标准？

（2）死亡原因与死亡机制的区别？如何对一死亡进行死因分析？

（3）死亡性质及死亡方式？ 第三章 死后变化与尸体现象

l、早期、晚期尸体现象有哪些及法医学意义？

2、法医学尸体检验与病理学尸体解剖有何区别？

3、推断死亡时间有哪些方法？ 第四章 机械性损伤

1、名词解释：损伤机械性损伤擦伤挫伤创骨折肢体断碎神经源性休克钝器伤锐 器伤“竹打中空”高坠伤切创砍创刺创剪创枪弹创弥漫性轴索损伤对冲伤冲击伤

2、问答题：

(1)挫裂创和锐器创的鉴定？

(2)切创、砍倒和刺创的区别，(3)机械性损伤死亡方式的鉴别？

(4)弥漫性轴索损伤病理变化特征和临床意义’

(5)）生前和死后伤的鉴别？

（6）接触射击时射人口的形态特征？（7）如何推断损伤时间？

第五章 高低温损伤与死亡

1、名词解释：烧伤（死）烫伤（死）斗拳姿态 热作用呼吸道综合征 硬膜外“热血肿” 维斯涅夫斯基斑

2、问答题：

（1）烧死与死后焚尸的鉴别？

（2）外伤性硬脑膜外血肿与硬脑膜外“热血肿”的鉴别？ 第六章 电击伤与电击死

1、名词解释；电击伤 电击死 电流斑 皮肤金属化 电击纹

2、问答题：典型电流斑的形态学特征？

第七章 机械性窒息

1、名词解释：机械性窒息缢死扼死溺死Tardieu氏斑性窒息

2、问答题；

（1）、什么叫机械性窒息？根据发生的原因，可分哪些类型？

（2）、机械性窒息的过程和表现有哪些？

（3）、机械性窒息死亡机制有哪些？

（4）、机械性窒息的尸体征象有哪些？

u）、缢死的缢型有哪些？简述缢沟的特征与组织学改变？

（6）、从现场、尸体现象、缢沟、死因等列表叙述生前自缢与死后悬尸的鉴别，（7）、简述自勒、他勒的特征？

（8）、简述扼痕的特征？

（9）、列表叙述生前溺死与死后人水的鉴别？

第八章 法医学活体检验和鉴定

1、名词解释：法医学活体鉴定重伤轻伤

2、问答题：简述损伤程度与伤残程度鉴定的有关法律、法规、注意事项？

第九章 法医精神病

1、名词解释：刑事责任能力民事行为能力

2、问答题：

（1）、简述法医精神病学鉴定的对象？

（2）、简述法医精神病学鉴定的程序及应提供的材料？

第十章 个人识别

1、什么是个人识别？尸体个人识别的对象有哪些？

2、尸体个人识别需解决的问题有哪些？

3、活体个人识别的主要内容有哪些？

第十一章 猝 死

1、名词解释：猝死即时死婴幼儿猝死综合征青壮年猝死综合征

3、问答题；

1）、诊断早期心肌缺血的诊断指标，2）、猝死的法医学鉴定要点。第十二章 强好与性犯罪 i、强奸的概念。

2、如何进行强奸案的法医学鉴定？

第十三章 中 毒

1、如何进行中毒案例的法医学鉴定？

2、毒物的量与毒物进人机体的途径对是否中毒有何影响？

第十四章 吸毒与药物滥用 l、什么是毒品？什么是吸毒？

2、吸毒的危害有哪些？

3、什么是药物滥用？

4、什么是毒品犯罪？ 第十五章 法医学物证检验

1、什么是物证？有哪些种类？

2、如何保证物证的真实性及可靠性？

3、血痕检验的程序？

4、血型的定义及种类有哪些？

5、什么是第一代、第二代、及第三代DNA遗传标记？

第十六章 亲权鉴定

1、如何选择亲权鉴定的遗传标记？

2、亲权鉴定的概念、原则及方法？

第十七章 医疗纠纷

1、什么是医疗事故的构成要素？

2、知情同意权的概念，医务人员应如何落实知情同意权Z3、医疗意外与医疗事故的区别？

4、医疗事故罪与故意杀人罪、非法行医罪的区别？

5、如何预防医疗纠纷与医疗事故？

6、发生医疗纠纷后应如何处理？