土壤有机碳检测方法介绍与自我总结

第一篇：土壤有机碳检测方法介绍与自我总结

土壤有机碳检测方法介绍

土壤有机碳是以有机物形式存在于土壤中的C元素的一种存在形式，作为土壤碳库中的重要组成部分，一方面在土壤品质监测中是一项重要的检测项目，另一方面对研究空气中二氧化碳来源也有很大的作用。

土壤有机碳根据其稳定性可分为活性有机碳、慢性有机碳和惰性有机碳三种，其中活性有机碳是反映土壤肥力和土壤管理措施的较好指标。而根据土壤中有机碳的溶解性质又可分为溶解性有机碳和非溶解性有机碳。非溶解性有机碳属于惰性有机碳，由于不能溶解不能被植物吸收也不易产生迁移，所以在土壤质量监控和环境监测方面没有实际意义，而活性有机碳和慢性有机碳大多属于溶解性有机碳。

目前土壤有机碳的检测方法主要是干烧法和湿氧化法。常用的重铬酸钾和浓硫酸湿氧化滴定技术由于不能确保样品完全氧化，检测效果较差检测结果必须进行修正。而干烧法目前又有土壤直接高温燃烧和土壤经溶液萃取后高温燃烧溶液两种方法。

土壤直接燃烧法大多需在样品燃烧前使用磷酸溶液或盐酸溶液去除土壤中的无机碳。磷酸酸性较弱不易将土壤中的难溶碳酸盐氧化（西南地区广布卡斯特地貌，碳酸岩形成的土壤比重较高），而直接燃烧需要在900℃以上的温度才能保证燃烧完全，碳酸盐在800℃左右就会分解，所以检测结果受无机碳干扰明显。盐酸溶液虽然可将大部分碳酸盐去除，但是残留的盐酸会对催化剂和检测器的寿命造成严重影响，使用时必须将样品再次淋洗、烘干才能上机检测，冲洗过程中又会造成溶解性有机碳的损失，所以检测结果也不是很准确。这正是Tekmar在第6带产品设计生产时取消固体进样器的一个主要原因。所以相对来说检测更准确的则是溶液萃取法。

溶液萃取法是通过一定浓度的盐溶液将土壤中的有机碳转移至液相后再对溶液进行检测的方法。一方面该方法只将溶液中的溶解性碳转移至溶液，溶液再上仪器进行检测，检测过程中仪器会自动清除无机碳，所以检测结果准确可靠；而不溶解性碳（包括难溶性碳酸岩和不溶性有机碳）不是土壤的有效养分或污染物所以实际监测意义不大，这也是为什么中国农科院和中科院下属单位长期将溶液萃取法作为土壤有机碳检测手段的根本原因。

第二篇：骨质疏松症与自我检测

骨质疏松症与自我检测

信息来源：预防保健科 时间：2013-02-20

1.什么是骨质疏松症？

骨质疏松症是一种骨质变脆，从而容易发生骨折的疾病。当人体成长到30岁左右，骨骼强度达到顶峰，然后骨骼强度开始下降，特别是在步入老年后，骨量下降尤为明显。而女性在绝经后的3-5年内，因为雌激素的减少，骨量也会快速丢失。骨质的流失会造成骨骼内部产生海绵样的小孔，骨骼异常疏松，脆弱不堪，即使是轻微的创伤或无外伤的情况下容易发生骨折。

2.那些人容易患骨质疏松症？

① 已经绝经的妇女和65岁以上的人群 ② 有骨质疏松家族史的人群

③ 长期进行低钙饮食、营养缺乏的人群 ④ 身材消瘦、体重偏轻的人群

⑤ 过早闭经或进行过卵巢切除手术的人群 ⑥平时有酗酒或大量吸烟的习惯 ⑦ 爱喝浓茶或长期喝咖啡

⑧ 患有糖尿病、肾功能不全等疾病，以及因为患病而需要长期、大剂量使用免疫抑制剂、糖皮质激素的人群。

3.怎样自我检测骨质疏松？ ①

腰背疼痛、骨痛 ②

身材变矮 ③

驼背 ④

腿抽筋

⑤

脊柱、髋部或腕部任一部位的骨折。

只要出现上面任意一条，便可怀疑您存在骨质疏松。

第三篇：电脑无法开机,自我检测方法

将BIOS电池放电（恢复BIOS出厂默认值）建议插拔一下显卡、内存，清理一下卫生，并且擦亮显卡、内存的金手指。

电脑开机无显示故障的排除方法。

第1步：首先检查电脑的外部接线是否接好，把各个连线重新插一遍，看故障是否排除。第2步：如果故障依旧，接着打开主机箱查看机箱内有无多余金属物，或主板变形造成的短路，闻一下机箱内有无烧焦的糊味，主板上有无烧毁的芯片，CPU周围的电容有无损坏等。第3步：如果没有，接着清理主板上的灰尘，然后检查电脑是否正常。

第4步：如果故障依旧，接下来拔掉主板上的Reset线及其他开关、指示灯连线，然后用改锥短路开关，看能否能开机。

第5步：如果不能开机，接着使用最小系统法，将硬盘、软驱、光驱的数据线拔掉，然后检查电脑是否能开机，如果电脑显示器出现开机画面，则说明问题在这几个设备中。接着再逐一把以上几个设备接入电脑，当接入某一个设备时，故障重现，说明故障是由此设备造成的，最后再重点检查此设备。

第6步：如果故障依旧，则故障可能由内存、显卡、CPU、主板等设备引起。接着使用插拔法、交换法等方法分别检查内存、显卡、CPU等设备是否正常，如果有损坏的设备，更换损坏的设备。

第7步：如果内存、显卡、CPU等设备正常，接着将BIOS放电，采用隔离法，将主板安置在机箱外面，接上内存、显卡、CPU等进行测试，如果电脑能显示了，接着再将主板安装到机箱内测试，直到找到故障原因。如果故障依旧则需要将主板返回厂家修理。

第8步：电脑开机无显示但有报警声，当电脑开机启动时，系统BIOS开始进行POST（加电自检），当检测到电脑中某一设备有致命错误时，便控制扬声器发出声音报告错误。因此可能出现开机无显示有报警声的故障。对于电脑开机无显示有报警声故障可以根据BIOS报警声的含义，来检查出现故障的设备，以排除故障。

无法开机，指示灯不亮故障诊断

当电脑出现无法开机故障时，按照下面的方法进行检测：

（1）首先检查电脑的电源线是否连接好。如果正常，接着打开主机箱检查主板电源线是否与主板电源接口连接正常。

（2）如果连接正常，接着查看主机箱内有无多余的金属物或观察主板有无与机箱接触，如果有，则可能由于短路造成的无法开机。

（3）如机箱中没有多余的金属物，主板也没有与机箱接触，接着拔掉主板电源开关线，用镊子将主板电源开关接口短路，电脑如果能够启动，则可能是机箱上的电源开关连接线接触不良或损坏，维修电源开关线即可。

（4）如果将主板电源开关短路电脑不能启动，接着将主板上的电源线拔下，用一根导线将连接主板电源接口的电源接头的绿线孔和旁边的黑线孔连接短路，观察电源的风扇是否转动，如果电扇不转动，则可能是电源损坏，更换电源。

如果电源风扇转动，则故障可能由主板的开关电路故障造成，接着用万用表测试主板的开关电路，并排除故障。

Phoenix的BIOS自检响铃及其意义 1短 系统启动正常

1短1短1短 系统加电初始化失败 1短1短2短 主板错误 1短1短3短 CMOS或电池失效 1短1短4短 ROM BIOS校验错误 1短2短1短 系统时钟错误 1短2短2短 DMA初始化失败 1短2短3短 DMA页寄存器错误 1短3短1短 RAM刷新错误 1短3短2短 基本内存错误 1短3短3短 基本内存错误

1短4短1短 基本内存地址线错误 1短4短2短 基本内存校验错误 1短4短3短 EISA时序器错误 1短4短4短 EISA NMI口错误 2短1短1短 前64K基本内存错误 3短1短1短 DMA寄存器错误 3短1短2短 主DMA寄存器错误

3短1短3短 主中断处理寄存器错误 3短1短4短 从中断处理寄存器错误 3短2短4短 键盘控制器错误

3短1短3短 主中断处理寄存器错误 3短4短2短 显示错误 3短4短3短 时钟错误

4短2短2短 关机错误 4短2短3短 A20门错误

4短2短4短 保护模式中断错误 4短3短1短 内存错误 4短3短3短 时钟2错误 4短3短4短 时钟错误

4短4短1短 串行口错误 4短4短2短 并行口错误

4短4短3短 数字协处理器错误

AMI 的BIOS自检响铃及其意义

1短: 内存刷新失败。更换内存条。

2短: 内存ECC较验错误。在CMOS Setup中将内存关于ECC校验的选项设为Disabled就可以解决，不过最根本的解决办法还是更换一条内存。

3短: 系统基本内存（第1个64kB）检查失败。换内存。4短: 系统时钟出错。

5短: 中央处理器（CPU）错误。6短: 键盘控制器错误。

7短: 系统实模式错误，不能切换到保护模式。

8短: 显示内存错误。显示内存有问题，更换显卡试试。

9短: ROM BIOS检验和错误。

1长3短: 内存错误。内存损坏，更换即可。

1长8短: 显示测试错误。显示器数据线没插好或显示卡没插牢。高频率常响： CPU过热报警。

Award 的BIOS自检响铃及其意义

1短: 系统正常启动。这是我们每天都能听到的，也表明机器没有任何问题。2短: 常规错误，请进入CMOS Setup，重新设置不正确的选项。

1长1短: RAM或主板出错。换一条内存试试，若还是不行，只好更换主板。1长2短: 显示器或显示卡错误。

1长3短: 键盘控制器错误。检查主板。

1长9短: 主板Flash RAM或EPROM错误，BIOS损坏。换块Flash RAM试试。不断地响（长声）: 内存条未插紧或损坏。重插内存条，若还是不行，只有更换 一条内存。

不停地响: 电源、显示器未和显示卡连接好。检查一下所有的插头。重复短响: 电源问题。无声音无显示: 电源问题。

第四篇：碳计量方法专题培训培训总结

“碳计量方法专题培训”培训总结

2010年4月2日，本人作为北京经开投资开发股份有限公司成员参加了国家发改委培训中心主办的“碳计量方法专题培训班”。

我国是《联合国气候变化框架公约》和《京都议定书》的缔约方，中国政府已郑重向全世界宣布：到2020年，单位国内生产总值（GDP）二氧化碳排放量比2005年下降40%-45%。国务院常务会议在提出上述目标的同时，还提出要把绿色发展作为我国在可持续发展框架下应对气候变化的重要手段。国家发展和改革委员会是中国政府应对气候变化工作的综合协调主管部门。因此，学习碳排放计算方法是落实控制目标要求的一项必不可少的技术基础。

通过本次培训和国家发改委CDM中心主任扬宏伟的讲授，系统学习了以下内容：目前我国节能减排工作面临的形势和任务；节能提高能效的政策措施；优化经济结构的主要路径和方法；优化能源结构的主要路径和方法；植树造林，增加碳汇的战略思路；我国实用节能减排技术介绍与分析；国际通行碳计量、碳认证方法；不同领域碳计量、碳认证案例分析与介绍；清洁发展机制项目中介公司、节能技术推广公司与开展不同领域碳计量、碳认证业务工作的有机结合。

参加本次会议的是全国各地区与碳排放相关行业的管理人员，会上我代表北京经开公司与各地政府有关人员及相关企业界人士进行了相关交流和业务探讨。尤其是，可再生能源和节能、环保、金融机构等相关行业项目管理人员对经开公司目前开展的低碳高端产业园区具有浓厚的兴趣。在会后，我们介绍了目前北京经开公司开展的低碳产业、低碳产业地产等相关碳计量工作的进展和公司未来低碳战略的定位等。

总体来说，本次培训收获很大，强烈感受到目前国内与碳排放相关的整个行业迅猛发展的势头，从政府节能减排、碳政策的制定，研究机构的碳计量、碳产业、碳研发，再到企业的节能减排、碳金融、碳融资、项目合作等。发展低碳经济必将成为势不可挡的中国经济发展潮流。

第五篇：细胞凋亡检测方法总结

1、磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法）

磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素（FITC、PE）或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。

PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。

碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

在双变量流式细胞仪的散点图上，左下象限显示活细胞，为（FITC-/PI-）；右上象限是非活细胞，即坏死细胞，为（FITC+/PI+）；而右下象限为早期凋亡细胞，显现（FITC+/PI-）。右上象限为独立的核（FITC-/PI+）。

Annexin-V可以再钙离子存在的情况下，和细胞表面外翻的磷脂酰丝氨酸结合，而磷脂酰丝氨酸的外翻是细胞凋亡的早期事件。

PI是一种DNA染料，当细胞凋亡的晚期，细胞的细胞膜通透性增加，PI从而进入细胞核与DNA结合。

所以

Annexin-V阴性-PI阴性 代表正常细胞

Annexin-V阳性-PI阴性 代表凋亡早期的细胞

Annexin-V阳性-PI阳性 代表凋亡晚期的细胞或坏死的细胞

Annexin-V阴性-PI阳性 一般不存在这一群细胞，如果出现这一团细胞可能是PI标记时间过长，或者操作过于剧烈而伤害到原本正常的细胞。（还有一种说法是凋亡最后阶段的细胞，细胞已经没有细胞膜了说以不结合Annexin-V而只结合PI）

2.线粒体膜电位变化的检测

实验原理

JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1 聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光（FL-2 通道）；在线粒体膜电位较低时，JC-1 不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1 为单体(monomer)，可以产生绿色荧光（FL-1 通道）。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-1 单体的最大激发波长为 514nm，最大发射波长为 527nm；JC-1 聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为 585nm，最大发射波长为 590nm。

A-C 为对照，细胞亚群(R1)在 FL-2和FL-1 通道同时显示 JC-1 的荧光信号。D-F 显示 JC-1在FL-2通道荧光信号降低的细胞亚群(R2)显著增加，证明线粒体膜电位△Ψm 下降，细胞发生凋亡。凋亡与线粒体膜电位的去极化相关。细胞凋亡时线粒体膜电位发生去极化，JC-1进入线粒体以单体形式存在，仅在Fl-1通道有荧光。

检测原理

正常细胞：JC-1聚集在线粒体内，形成多聚体，呈鲜红色荧光，细胞质内有绿色；即红光++，绿光++。

凋亡细胞：由于线粒体跨膜电位的破坏，不能聚集到线粒体内，红色荧光减弱，单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。即红光+，绿光++

3、Caspase-3活性的检测

Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。

(1)Western blot 分析Procaspase-3的活化，以及活化的Caspase-3及对底物多聚ADP-核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]等的裂解。

(2)荧光分光光度计分析

检测原理：活化的Caspsae与其特异性底物DEVD-pNA结合切割，释放出游离pNA，通过测定其吸光度，根据其发光强度的高低代表其活化程度。

(3)流式细胞术分析

PharMingen 多克隆或单克隆 Caspase-3 抗体可以识别 Caspase-3 活化形式，它特异性识别由无活性的 Pro-Caspase-3 活化水解后的暴露的断裂端, 荧光标记多克隆兔抗 Active-Caspase-3 抗体为流式细胞术分析凋亡细胞的 Caspase-3 而设计。1、2、3是早期凋亡现象；

4、5是晚期凋亡现象。

4、TUNEL法(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)

细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法，对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征，可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞形态测定，并可检测出极少量的凋亡细胞，因而在细胞凋亡的研究中被广泛采用。

5、DNA ladder 细胞凋亡晚期，核酸内切酶在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。细胞经处理后，采用常规方法分离提纯DNA，进行琼脂糖凝胶和溴化乙啶染色，在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder。在琼脂糖凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA ladder)。坏死细胞---连续性条带。

一、形态学观察方法

1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。【苏木精 — 伊红染色法，(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。】

2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。

3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。

4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，胞质紧实，细胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。

一、细胞凋亡的形态学检测

1、光学显微镜和倒置显微镜

（1）未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。

（2）染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。

2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA特异性染料有：HO 33342(Hoechst 33342)，HO 33258(Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。

Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。

DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml。

结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased），部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体(图1)。

3、透射电子显微镜观察

结果评判：凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的细胞核内染色质高度盘绕，出现许多称为气穴现象（cavitations）的空泡结构(图2)；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；细胞凋亡的晚期，细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。图2

七、凋亡相关蛋白TFAR19蛋白的表达和细胞定位分析

TFAR19（PDCD5）是由本研究室在国际上首先报导的一个拥有自己知识产权的人类新基因，前期的功能研究表明，它是促进细胞凋亡的增强剂。利用荧光素（FITC）标记的TFAR19单克隆抗体为探针，对细胞凋亡过程中TFAR19蛋白的表达水平及定位研究发现，凋亡早期TFAR19表达水平增高并出现快速核转位现象，伴随着细胞核形态学的变化，持续较长时间，在凋亡小体中仍然可见。同时我们发现，凋亡早期TFAR19蛋白的核转位早于磷脂酰丝氨酸（PS）外翻和细胞核DNA的片段化，提示TFAR19蛋白的核转位是细胞凋亡更早期发生的事件之一。进一步的研究证明，凋亡早期TFAR19的核转位具有普遍意义，不同细胞凋亡早期均出现TFAR19高表达和核转位。这为研究细胞凋亡早期所发生的事件，提供了一种新的技术和指标。