第一篇：WT-51农残速测仪检测技术要点
WT-51型农残速测仪检测技术要点及注意事项
龚亚茹
(汉中市农产品质量安全监测检验中心，陕西汉中,723000)
摘要：介绍农残速测仪检测原理、方法要点以及使用的注意事项，为农药残留检测工作者提供参考。
关键词：农残速测仪；蔬菜；检测原理；速测方法；注意事项
农产品生产中，农药对病虫害的防治发挥着十分重要的作用，而残留在农产品中的农药又威胁着人民的身体健康，为杜绝农药残留超标的农产品流入市场，加强农残的快速检测已成为农产品日常监管的重要抓手。2010年我省农产品质量安全监管局给各市农检中心统一配送了WT-51农残速测仪，也是2011年全省首届农产品质量安全基层检测技术人员大比武指定速测仪器。通过3a来的实际检测，我们熟练掌握了该仪器的操作方法，并积累了一些经验，在此与农残检测工作者们交流。检测原理
WT-51型农残速测仪检测原理是采用酶抑制率法。在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性，其抑制率与农药浓度呈正相关，正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率的大小可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。农残速测技术要点
2.1 试剂配制与保存
2.1.1缓冲液：取缓冲剂一包入烧杯，量筒量取1000 ml蒸馏水充分溶解，倒进大口塑料瓶，室温保存。
2.1.2显色剂：用移液枪加入10.5 ml缓冲液，加盖摇匀；0～4℃保存。
2.1.3酶液：用移液枪加入3.1 ml缓冲液，加盖摇匀；0～4℃保存，4d内用完。
2.1.4 底物：加入3.1 ml蒸馏水，加盖摇匀；0～4℃保存，14d内用完。1
酶粉和底物的粉剂在冷冻条件下保存，临用前配制。1瓶粉剂配制后可分成小瓶，暂时不用的储存在冷冻室中，待用和用后的试剂在0～4℃保存。酶液反复解冻会影响其活性，最多不超过2次。
2.2 样液制备
取有代表性的干净蔬菜，去掉表面泥土和烂叶，剪成1 cm碎片，用天平准确称取2.00g，放入50mL提取瓶中，加10ml缓冲液振荡2～3 min，取出提取液，静臵3min，待用。样品与缓冲液比例为1:5。
2.3 仪器操作与样品测定
2.3.1仪器预热：接通电源，仪器自检，检查样品池是否漏光及各测量通道光路的光强是否足够，自检结束后待机预热10 min，仪器工作稳定后进行测量。
2.3.2对照测定：用专用移液枪吸取缓冲液2.5ml于比色皿，依次加入0.1ml酶液和0.1ml显色剂摇匀后于37℃静臵15min（每批样品的控制时间应一致），加0.1ml底物摇匀后立即放入仪器比色池内，按对照检测键，记录反应3 min的吸光度变化值。空白对照值的吸光度变化值在0.4～0.8，才可测定样品，否则要重新做空白测定。
2.3.3样品测定：用专用移液枪吸取样品提取液2.5ml于比色皿，其它操作步骤与对照测定相同，最后按样品检测键，记录测量样品的抑制率结果和吸光度变化值。
2.3.4结果判定：测定结果以抑制率表示。根据GB／T5009．199—2003判定标准，当样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需复检2次或者用气相色谱法进一步确定具体的农药品种和含量。3 注意事项
3.1仪器在使用过程中，更换了酶试剂或重新设臵了测量时间，必须进行“对照测量”。缓冲液的配臵一定要用蒸馏水、纯净水或去离子水，不可使用矿物质水，否则在检测过程中干扰较大，影响准确性。
3.2检测室室内温度的影响。检测室温度在20～30℃之间,使用改进后的酶,可以直接在室温下培养,22℃左右培养20 min,25℃以上培养15 min;如果室温低于20℃,必须放进37～38℃培养箱中培养[2]。
3.3 酶活性对检测结果的影响。酶是有生物活性的特殊蛋白，是检测技术成功的关键，要避免试剂污染引起酶活性的变化。在贮藏过程中
要保证其贮藏温度,尤其是酶试剂及底物要在0～4℃温度条件下保存,试剂从冰箱取出，先恢复至室温，摇匀后再使用。试剂使用时，必须遵循“只出不进”原则：即酶、显色剂、底物一旦从试剂瓶中被移取，即使暂时不需要了，也不得返回原试剂瓶中，以免污染原试剂。
3.4 待测样品放入比色池速度的影响。待测样品加入底物后,应马上摇匀放入比色池,否则影响数据的准确性。经日常实践,在小白菜样品检测中,立刻放入的抑制率为23.6%，1min后放入的抑制率为54.7%,可见,加试剂后放入测试仪的速度快慢可影响其结果准确性。
3.5 抑制率≥50％的样品，至少要重复检测2次，才能确定此样品是否合格。葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理这类样品时，可采取整株(体)浸提，避免次生物质干扰。若浸提液色素干扰严重，将浸提液移到另一个烧杯中，加入0.1～0.5g活性炭，振荡3～5min，用吸管吸取上层液至离心管，离心到上层液清澈后取出，放在离心管架上作为样液[3]。
3.6 操作失误对结果的影响。待测试液放人检测仪后若出现操作(按键)失误，必须重新取样检测，绝对不能按原程序继续进行。因为从实际操作中得出，第一次检测结果输出后再次按样品检测键，抑制率会增大10％～20％。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部，GB／T5009.199—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测[S].北京：中国标准出版社，2003.[2]樊建英.蔬菜农药残留监控的难点与对策[J].河北农业科学，2008(2):118-119,122.[3]李华 黄剑飞等.蔬菜农残速测仪检测技术及注意事项[J].现代农业科技，2011（10）：363.
第二篇：农残检测室制度
农残检测室制度
1、本检测室为快速检测农残专用，未经允许，非本室工作人员不得入内。
2、检测人员经培训考核后，持证上岗。
3、严格按照规定的方法步骤、仪器操作程序工作。
4、严格执行取样、留样制度。
5、认真做好每次的检测记录，填写检测结果报告单。
6认真保管好所用试剂，以免发生试剂污染、浪费现象。
第三篇：工作总结-农残检测
工作总结
2008是奥运年，更是凸显出了“绿色奥运”的主题。然而，“三鹿”奶粉的三聚氰胺等重大食品安全事件的发生，食品的安全问题已成为世人关注的焦点之一。食品安全存在的问题不仅危害人们的健康，损害消费者的利益。为了除虫害，有人大量使用高毒甚至剧毒农药，致使蔬菜、果品农药残留严重超标；为了提高产量，有人盲目使用违禁激素；为了增加猪的瘦肉率，有人竟在饲料中掺上“瘦肉精”等，食品安全问题令人担忧。重大食品安全事件不断发生，再次敲响了食品安全问题的警钟。
回顾一年来，我遵守的各项规章制度，积极服从领导的工作安排，工作认真积极努力，任劳任怨。更是在领导和同事的指导和支持下，认真学习和贯彻十七大精神，坚持做好日常的畜禽检疫、农产品检测监督工作，较好地完成了各项工作，现将本工作总结如下。（1）检测方面
工作上大致与去年相同，我主要还是负责两个组市场和超市农产品的监督和检测，每天坚持做好日常的农产品检测监督、畜禽检疫工作。为了解决去年存在的问题，今年我更加注重了与市场检测员以及管理员的沟通，加强了检测力度。在他们的积极配合下，“偷工减料”、“谎报、虚报”等现象基本上没有了，各项工作都完成得很好。
①抓好各个市场的检测工作。平时主要对这些市场超市的农产品检测员进行监督检测，看检测员有无检测和操作是否规范，或者检测出的农产品有无不合格的问题。②要求市场及时发布农产品检测信息。蔬菜类农产品绝大多数是生鲜的，从销售到吃到嘴里时间很短。所以检测很讲究时效，要每天及时准确地公布蔬菜检测结果，严格监督要求各市场超市做好检测及登记工作，这对引导消费者购买放心农产品具有重要意义。③严肃查处不合格产品。检测有问题的立即纠正或者对不合格的农产品进行销毁，以确保农产品在正规的操作环境中做到农产品准入制度的标准。每天抽检回来的样品，也及时检测，若发现有不合格现象的农产品，立即到市场去处理或者销毁，坚决不让不合格农产品流出市场。④做好农产品检测员培训和管理工作。市场、超市检测人员的流动性较大，常常需要培训新人，力求每个市场都配足两名检测员，并做好市场检测人员的培训，直到他们能熟练检测的每一个操作程序。每天尽量做到不漏检。（2）检疫方面
一年来，我经常利用空余时间来学习有关的专业知识，工作上也积累了更多的经验，对家禽检疫有了一定的进步。学会了怎么去辨别家禽宰前是否健康、是死的或是有病变的酮体。慢慢认识到，宰杀刀口不外翻，切面较平滑；放血不良，肉呈暗红或黑红，卧侧皮下组织、胸腹膜、器官呈现紫红色沉积性充血；肉尸、体表往往有肉眼可见病变；淋巴结通常肿大，切面有各种疾病相应的病理变化。病死禽类肉尸的皮肤、冠、肉髯呈现暗红、青紫色，眼部污秽不洁，眼球下陷，肛门松弛或污秽。
由于全国禽流感疫情的不断发生，我站在工作上也要求我们加大了检疫的力度，每天下午也要到市场去检疫巡逻。认真执行“家畜家禽防疫条例”，坚决做到，“查证验证”、“无证补检”，并对检疫不合格的动物和动物产品，包括染疫或者疑似染疫动物和动物产品，病死或死因不明的动物及其产品，进行无害化处理；无法作无害化处理的，予以销毁，确保上市动物及动物产品卫生安全。卫生是防疫中比较重要的以部分，所以平时在做好检疫工作的同时，还督促市场超市搞好环境卫生，定期派发消毒药做好消毒工作。另外还认真学习相关知识，在市场检疫过程和咨询活动中向群众宣传防疫知识。（3）工作中存在的问题
一是检测监督方面：①市场及超市管理人员认识不到位、思想麻痹是造成对农产品质量安全管理不重视的主要原因，个别农贸市场超市安全意识不强，认为这项工作与己无关；②市场准入工作难度大,受周边环境制约，涉及管理部门多，条件不够成熟；③与市场的检测人员的沟通、交流不够深入。需大力宣传《农产品质量安全法》，营造良好的社会氛围，建立健全农产品质量安全制度，完善农产品质量安全网络。
二是检疫方面：①猪肉的“检验证”经常存在漏写或者没有准确写销售地址的情况；②对于畜禽及其产品的检疫理论基础知识还不够扎实，在检疫实践上的运用还有待提高。现在我正认真加强专业理论知识的学习，虚心向老同事们学习经验。（4）今后的工作重点
在今后的工作中，我将会继续努力，认真学习和贯彻十七大精神，学习《动物防疫法》、《食品安全法》等法规，利用空余时间多看书，认真学习和掌握更多的专业知识，经常向领导汇报自己在工作中的问题和感受，及时纠正和弥补自身的不足和缺陷，不断的总结与反省，不断地鞭策自己并充实能量，努力提高自己的工作能力和自身素质，积累经验，进一步增强责任感和使命感，为食品安全作出自己的一份努力。
第四篇：绿洲农残检测试剂盒说明书
随着我国经济的快速发展和人民生活水平的迅速提高，食品安全快速检测技术逐步受到重视，涌现出了不少新的技术和产品，到目前已有五十多种。蔬菜农药残留快速检测作为最早开发的项目，其技术和产品也最为成熟，成为食品安全检测的必检项目。
绿洲生化企业经过二十年的不懈努力，为我国农残快速检测作出了重要的贡献。2001年农业部发布了蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法行业标准（NY/T 448-2001），接着卫生部又颁布了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测国家标准方法（GB/T 5009.199-2003），这两个标准都采用了基于昆虫毒理学之胆碱酯酶抑制原理而建立起来的酶抑制率法（分光光度法），我们不但提供了成熟的技术和产品，而且积极参与了标准的制定工作。
一、检测原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，胆碱酯酶(ChE)催化神经传导代谢产物类似物（碘化硫代乙酰胆碱ATCI或碘化硫代丁酰胆碱BTCI）水解，其水解产物与显色剂（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）发生反应，产生黄色物质，用分光光度计或农残测试仪在412nm处测定吸光度的变化值（△A），计算出抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药残留的存在。
对于酶抑制率法来说，胆碱酯酶制剂是最为关键的因素，其质量技术水平决定了检测的灵敏度、稳定性和可靠性。胆碱酯酶制剂的研发工作一直是本公司的重点，我们研究了大量的酶源材料，在提取方法和保持酶活性稳定技术等方面也积累了丰富的经验，是目前国内唯一可以根据客户需求，生产不同灵敏度和活性的液体酶制剂的生产厂家，产量和质量都一直处于国内领先水平，其中比较有代表性的产品如下：
AB204农残速测试剂按照国家标准GB/T5009.199-2003配制500份装/套缓 冲 剂10包每包加500mL蒸馏水或纯净水溶解常温存放
胆碱酯酶10瓶不用配制，直接取用4℃冰箱保存每份加100μL
显 色 剂2瓶加25mL缓冲液溶解4℃冰箱保存每份加100μL 底 物4瓶加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解4℃冰箱保存每份加100μL或者加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解4℃冰箱保存每份加20μL 酶 活 力空白对照1分钟吸光度变化值(ΔΑ0）在0.15-0.3之间。
使用方法：请按照国家标准方法GB/T 5009.199-2003操作，或根据农药残留测试仪的使用说明进行测试。
1、使用方法
取2g果蔬样品（块茎类取4g)，叶菜剪成1cm左右见方的碎片，块茎类取横截面样品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL缓冲液，振荡1～2min，倒出提取液，静置2min，待测。若提取液混浊或杂质太多可过滤后再测。
2、测试
对照测试：于反应瓶中加入2.5mL缓冲液，再分别加入100μL酶液和显色剂，混匀，静置反应10min后加入100μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖。按〈B〉键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时180s，计时完毕，显示屏显示吸光度增量及抑制率。在进行对照测试时，2～8通道可同时进行样品测试。
样品测试：于反应瓶中加入2.5mL待测液，再分别加入100μL酶液和显色剂，混匀，静置反应10min后加入100μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，及时放入仪器的测量室通道，合上盖。按〈M〉键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时180s，计时完毕，显示屏显示吸光度增量及抑制率。数据自动保存，如有需要按〈P〉键打印。
3、结果判定
以分光光度计测试(412 nm波长)时，按下式计算抑制率：
抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100
以农药残留快速测试仪检测时其抑制率一般可自动计算。若样品抑制率≥50%，表示样品农残超标，为阳性结果。阳性结果的样品需做2次以上重复检测，多次检测仍呈阳性需用气相色谱等仪器做进一步确认。
二、检测灵敏度
由于采用的标准方法的不同，取样量、检测程序和判定标准也有所不同，如国标法以抑制率≥50%判定为阳性，而农业部行业标准则以抑制率≥70%判定为阳性。我们进行了大量的对比实验，发现在实际检测中，两种方法的最终检测灵敏度还是基本一致的。我们用农药标准液对农残速测试剂的最低检测限进行了多次测试，并通过了中国广州分析测试中心和农业部蔬菜水果质量监督检验测试中心(广州)等专业检验机构的检测验证，结果如下：
农残速测试剂对几种常见农药的最低检测限(mg/kg)农药名称 敌敌畏
好年冬 辛硫磷 甲胺磷
注：在实际生产过程中，最低检测限可能会随产品种类和酶活性的变化而有所波动，并可以根据客户的具体需求做出调整。
最低检测限
0.01 0.05 0.1 0.2
农药名称 毒死蜱 马拉硫磷 乐果 氧化乐果
最低检测限
0.5 0.5 1.0 0.6
农药名称 灭多威 敌百虫 呋喃丹 对硫磷
最低检测限
0.1 0.1 0.05 0.4三、保存条件及保质期
本公司的农残速测试剂稳定性较好，可以常温运输或邮寄，长期存放应在4℃冰箱中，保质期为12个月；室温或常温保存时，保质期为3～6个月。
四、注意事项
1、任何试剂使用时，用一瓶打开一瓶，用完后才使用新的，防止试剂变质。
2、酶、底物和显色剂碰到一起会马上发生生化反应，移液器和容器都应各自贴上标签，单独使用，以免交叉污染。
3、从任何试剂瓶吸出的试剂，禁止再次注射回试剂瓶
第五篇：农残检测操作流程（写写帮推荐）
农残检测操作流程
取出冰箱内的酶试剂→开机预热15分钟→蔬菜样品的全部秤取→加提取液→酶试剂的配制 → 仪器调“0” → 仪器调“100” → 提取样品→加酶液和显色剂→做好记录→检测对照 →检测样品→联网上传数据 注意事项：
1、采样
采样要做好记录，所采样品为即将上市或正在上市的蔬菜，样品要新鲜、洁净、不带泥浆。绿叶菜类蔬菜至少从不同5个点上取5株，对于大棵绿叶菜可取不同点上5株蔬菜外叶；茄果瓜类等大果型蔬菜至少从不同3个点上取3个果实。要求每个样品单独存放，并做好标记。
2、酶试剂保存
（1）未开封酶制剂存放在-18℃。
（2）每次检测时先将酶和底物取出，等降到室温后再进行配置。
（3）配置好的酶和底物最多在4℃的冰箱内存放4天，使用时降到室温后重做对照。（4）显色剂：存放于棕色瓶，避光保存，最多使用30天。
（5）提取液：每次配置时清洗试剂瓶，配置好的试剂在常温下保存，如在冰箱内存放的，要在降到室温后再提取。
3、秤取
（1）叶菜类：至少取不同株上的5片叶片叠加，剪成1cm见方秤取1克。如芹菜、香菜、草头等羽状或小叶片直接剪叶片。
（2）茄果瓜类：取果实的表皮，1cm见方，至少从不同的3个果实上削取1克。
（3）特例：番茄要削取青、坚硬部分果皮。红椒、葱蒜类、芳香类蔬菜尽量减少伤口，可以采用同比例放大提取方法。
4、提取
（1）使用移液枪或移液管提取5ml提取液，严禁使用针筒、试管等移液。（2）烧杯中的蔬菜要放平，提取液要埋没蔬菜。（3）提取时间：静置10分钟，使用振荡器3分钟。
（4）使用移液枪提取2.5ml提取液，严禁直接倒入带有刻度的试管，目测。
5、酶制剂配置
（1）酶制剂配置一定要使用蒸馏水；（2）酶和底物等降到室温后再配置。
6、校正
（1）每次检测，速测仪都要进行调“0”和调“100”。（2）联机后，每个通道先放入黑块，调“0”，之后取出黑块，放入比色皿，调“100”。（3）在调“0”和调“100”时要等数值或曲线稳定5秒后，再点确认。
7、加试剂
（1）加试剂时移液枪一定要垂直试管，不能让试剂留在试管壁上，加好后要摇匀。
（2）每组加酶和显色剂后要记录好时间，并列表每5分钟加一组酶和显色剂。在第一组反映15分钟后加底物。
8、对照
（1）每开一瓶酶试剂要做一次对照；（2）对照时间要和检测时间同步，各为3分钟。（3）对照可以在加酶和显色剂后直接加底物，马上上机检测。
9、上机检测
要求加一个底物马上上机点“检测”，不可以一组全部加好底物，上机，再一个一个点检测。
10、烧杯
每次使用完毕后要清洗干净倒置在干净纱布上，每周要进行一次浸泡清洗，保持烧杯壁干净透明，不留水垢。
11、试管
每次使用完毕后要清洗干净倒置在试管架上，每周要进行一次浸泡清洗，保持试管壁干净透明，不留水垢。
12、比色皿
（1）每次使用后用蒸馏水冲洗3次，方可再次使用。使用完清洗后要倒置，等水渍干后放入比色皿盒中保存。（2）比色皿的光面不能用手触摸，当光面透明度下降时要更换新的使用。
13、洗液瓶
每次使用完毕后要清洗，并倒置。
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