精准医学与临床病理学的发展

第一篇：精准医学与临床病理学的发展

精准医学与临床病理学的发展

摘要：通过病因，发病的形态变化，功能的损害进行对疾病的发生过程和发展规律而进行研究的学科叫做病理学。而对疾病进行预防和治疗，通常考虑个体之间的基因差异，环境导致的差异和个人生活方式的差异所影响的是属于精准医学，目前精准医学主要是在某些癌症方面发挥重要，并未将其应用到大部分疾病的诊断中。关键词：精准医学；临床病理学

美国的总统奥巴马在2015年1月在国情咨文中正式宣布在国策中增加“精准医学计划”，一个美国学者在2月通过杂志发表了关于精准医学新计划文章，提出精准医学目前短期目标是为了使得癌症的治疗能有更好的新手段，而长期目标是为了让其他医疗疾病能有更好的资料，提供更有价值的信息来促进医疗事业发展。1.精准医学

（一）精准医学的含义是以当今医疗为主要的基础，然后随着各种基因组测序技术，生物信息，大数据等新型应用的进步而交叉进行的新型医学。精准医学是通过蛋白质，基因等各种医学技术，把人的数据和疾病的各种数据类型进行有标志性的分析和鉴定，并对它们进行应用，从而寻找正确的疾病产生原因和治疗的关键点，并对每一种疾病的不同种状态和过程进行分类和判断，从而进行有限管理，实现对每种疾病的精准判断，提高疾病治愈率和对[1]治疗的效益。

（二）我国现如今在进行小康社会，更加注重全民健康的标准，开展了一系列关于健康保障的工程，针对全民健康需要，提出了要加快对国内医药品安全的监督，以国产代替进口，从而降低医疗的成本；要发展精准医学的技术，提高医院的医疗技术水平；提高基层的医疗水平，加强规范基层医院管理；推动经济增长，实现全面小康社会，促进经济发展水平。

（三）精准医学总目标是为人民群众提供更为贴心，精准，高效，便民的健康服务，建立起符合国际水准的精准医学的研究体系，要把握住相关的核心价值技术，研发国产新型的设备，提高对重大医疗的防治水平，加快推进健康产业的发展，推动医药卫生健康的改革，为全中国人民建设一个安全健康的社会。2.临床病理学

2.1临床病理学的含义

临床病理学是用精准的判断在临床上实现对疾病的治疗，常见的是对肿瘤细胞的增值进行遏制，从中促进癌症细胞的分化和死亡。这便要求对疾病的判断要有准确细致的分类，还要根据临床的检查，病理的变化，分子的诊断等一系列专业经验来进行判断。由于其专业的特殊性，不仅仅要求病理医生学会关于对病理的诊断和解剖，还要对分子病理的结果进行有效的判断。

2.2临床病理学的作用

（一）病理学是以组织学的诊断作为基础作用，组织学作为传统的组织使用，是一种重要的发挥诊断作用的学科。只有在病理医生正确判断出各种不同疾病的生长级别，才能对疾病标识物进行有效的判断，并做出准确的病理技术诊断。而病理医生在组织学的基础下进行分析，应用各种相应的技术和检测方法对疾病做出更加准确的分析。在当今的医疗时代，临床对病理学的诊断提出了更加严格的要求和更加严谨的态度，未来的病理报告是运用传统的组织学和创新的病理学相结合，从而对临床病理提供更加全面，准确和高效的病理报告。

（二）分子病理学在疾病分析中占据重要的地位。根据对疾病的判断，分子病理的诊断技术是对传统诊断的补充和完善。在面对疾病的隐藏性基因表达时，需要分子病理学对疾病进行更加深入和更加完善全面的表达。因此分子病理学在疾病的分析中占有核心地位，使得更加深入准确的，全面而又规范的对疾病进行有效的分析，提高对疾病的准确性判断，以达到对疾病的更好控制。

（三）病理学的应用有利于揭示疾病的病理特征，早日发现疾病的问题，并为疾病的治疗进行有效的治疗。如对肿瘤患者进行检测高危因素等预后分子指标，从分子水平判断肿瘤的生物学行为及其预后的结果，能够有效的提高对肿瘤患者的治疗水平和提高对肿瘤疾病的判断准确性。由于疾病的变化不稳定性，所以依靠病理学对疾病的诊断，能够有效的对疾病发生病变时进行预防和判断，提高病人治愈率和对治疗的信心。2.3临床病理诊断的发展

临床病理诊断不仅仅要求病理医生对肿瘤进行诊断，而且还要求提供给每一位患者直接相关的信息必须是详尽、精准、具个性化。在精确的医学时代，要依靠医生专业的技术和实践经验，还要对病理的设备进行升级，提高医生的对病理的准确判断，形成一个高要求，高标准的体系。在未来的病理报告中，不仅要做到提供准确的组织病理诊断，还要对分子病理精准诊断，为患者和医生提供判断。3.结束语

综上所述，精准医学时代的出现，对医疗水平的提高带来了新的生机，也为病理科带来了挑战和发展。著名的钟南山院士曾说过“临床病理水平是衡量国家医疗质量的重要标志”。病理医生在精准医疗的时代中将发挥着至关重要的作用，因为病理医生不仅仅是医学的希望，更多的是改善患者未来美好生活的希望。总而言之，精准医学是转变医学研究的一大重点目标，是推动中国精准医学计划发展，实现全面小康的健康社会的又一新起点。即使现在精准医学面临许多严峻的挑战，但是通过医学研究者的共同努力，一定可以推动具有中国社会主义特色的精准医学计划的有效实现。参考文献：

[1]詹启敏.中国精准医学发展的战略需求和重点任务[J].中华神经创伤外科电子杂志,2015,01(5):1-3.[2]罗莉.精准医学与临床病理学的发展[J].武警医学,2016,27(2):109-112.[2]

第二篇：病理学临床病例讨论

病理学临床病理讨论

病例讨论

（一）病史摘要：

李×，男，农民，38岁，与本村张××打架时，被张用棍棒猛击左小腿后侧腓肠肌处，该处皮肤略有损伤，事后小腿肿胀、疼痛难忍。第2天出现红、肿、热、痛，第3天体温上升达390·5C。第4天下肢高度肿胀，下达足背，最大周径为48cm，疼痛更甚，在皮肤裂口处流出血水。在当地医院用大量抗生素治疗，未见疗效。第6天，左足拇趾呈污黑色。第10天黑色达足背，与正常组织分界不清。随后到当地县医院治疗，行左下肢截肢术。

病理检查：

左下肢高度肿胀，左足部污黑色，纵行剖开动、静脉后，见动、静脉血管腔内均有暗红色与灰白色相间的固体物阻塞，长约10cm，与管壁粘着。固体物镜检为混合血栓。

讨论题：

病人所患何病，其发生机制是什么？

病例讨论

（二）病史摘要：

男性，43岁，系突然死亡，由法院委托作病理解剖，检查死亡原因。死者生前身体健壮，无任何疾患。1986年9月23日晚饭后曾带其小孩外出游玩，晚11时回家后，被王××叫到马××家解决家庭纠纷，至半夜2时回家，返家后即言不适，此时患者面色苍白，出冷汗，胸闷不适，回家后一小时死亡。尸检所见：

升主动脉及主动脉弓内膜散在有黄白色粥样斑块，左冠状动脉内膜也有黄白色粥样斑块，管腔狭窄，前降支距动脉口2cm处有血栓形成，血栓长1.5cm，左心室轻度扩张，心肌未见梗死，肺、肝、脾、肾充血状。

病理诊断：冠状动脉（左前降支）粥样硬化及血栓形成，主动脉粥样硬化，左心室轻度扩大，肺、肝、脾、肾淤血。讨论题：

该病人迅速死亡，你考虑死亡原因是什么？

病例讨论

（三）病史摘要：

男性，25岁，于1990年4月23日因畏寒、发热10天，胸痛、盗汗一周入院。10天前因夜间起床受凉后畏寒、发热。7天前夜间突然感觉右胸下部疼痛，在说话、呼吸、活动时加重，同时夜间有盗汗。次

日去医院检查及胸部透视，以右侧渗出性胸膜炎、胸腔积液收入院。入院后卧床休息，第10天下床在室内大便，便后上床，突然胸痛，随之呼吸困难，全身紫绀，抢救无效，很快呼吸、心跳停止而死亡。尸检所见：

右下肢轻度水肿，唇及指甲明显紫绀。右胸膜有纤维性粘连并有结核病变，右肺呈暗红色，质较实，切面亦呈暗红色，含多量淡红色泡沫状液体。在右肺动脉内有一长5cm的血栓性栓子，表面干燥、粗糙，并有红白相间的条纹，与肺动脉壁不粘连，阻塞肺动脉腔。

病理诊断：右肺动脉栓塞，右侧结核性胸膜炎。讨论题：

结合尸检发现，解释此病例由发病至死亡过程。病人死亡的原因是什么？

病例讨论

（四）病史摘要：

女性，25岁，足月妊娠，于1998年2月16日10时，自然破膜，约10分钟后，出现寒战及呼吸困难。立即给予高流量氧吸入，地塞米松、阿托品和速尿等。因病情恶化，继续给予阿托品、654-

2、氨茶碱、西地兰。出现呼吸改变后，给予“呼吸三联”药物静脉推注，行人工呼吸，心脏按摩，并给予“心脏三联”药物行心内注射，于2月17日清晨0时40分因抢救无效而死亡。尸检所见：

双肺明显水肿、淤血及出血，部分区域实变，切面红褐色，用刀刮之，用血性液体顺刀流下。镜下：肺部多数血管内可见数量不等的有形羊水成分，如胎粪、胎脂、角化物、及角化细胞等，但以角化物为多。大部分肺泡腔充满水肿液，部分区域有出血，且较严重，肺泡腔内充满红细胞。全身各脏器充血水肿，心肌有变性。子宫足月妊娠，死胎，胎儿脐带绕颈一周半，两肺可见羊水吸入。

病理诊断：①双肺羊水栓塞，肺水肿；②足月妊娠，死胎。讨论题：

羊水栓塞的发生机制及产妇的死亡原因。

病例讨论

（五）病史摘要：

王××，男性，32岁，农民，因右小腿肿胀疼痛两天就诊。两天前右小腿轻微擦伤出现疼痛，自己在家拔火罐，贴伤湿止痛膏未奏效，小腿部出现明显红肿，继而蔓延到右侧大腿，随到医院诊治。体检：T：

38.40

C，P88次/分，R26次/分，Bp16/10kPa（120/75mmHg）。神志清楚，急性病容，皮肤巩膜无黄染。腹部平软。右侧腰部轻度红肿，右侧大腿、小腿明显肿胀，颜色暗红，皮温稍高，膝关节活动受限。实验实检查：WBC18×109/L，N0.90，尿和大便常规检查未见异常。治疗经过：入院后积极抗感染治疗，采用大剂量抗生素静脉滴注。入院当晚，病情恶化，病人出现烦躁不安，面色苍白，出冷汗，四肢冰凉，脉搏细弱，血压8/4kPa（60/30mmHg），随既心跳停止，抢救无效而死亡。尸检所见：

青年男尸，发育正常，营养良好。右侧腋窝下可触及肿大淋巴结3枚，右侧腰部大片红肿，右侧大腿及小腿明显肿胀，暗红色，张力增高，周径比左侧分别增大5.4cm和3.8cm，足部出现轻度肿胀。切面可见血性液体渗出。腹腔内可见少量淡黄色液体，腹腔各脏器外观未见异常。镜检：心肌细胞轻度肿胀，横纹消失，胞浆内可见少量红染颗粒。肝细胞轻度肿胀，可见多量粉染颗粒，部分肝细胞内可见圆形空泡。肾近曲小管上皮细胞肿胀，刷状缘消失。右侧腋窝下淋巴结内可见充血水肿以及大量中性粒细胞浸润。各器官组织均可见明显的血管扩张充血。右侧大腿及小腿皮下组织和肌肉组织高度水肿，血管高度扩张充血，肌纤维之间空隙增大，在肌纤维和脂肪组织中可见大量中性粒细胞弥漫浸润，部分皮下脂肪组织和肌肉组织坏死，阴囊和腰部病变基本同上。讨论题：

⑴根据尸检材料，作出病理诊断，并找出诊断依据。⑵结合病史讨论疾病的发生发展过程和死亡原因。

病例讨论

（六）病史摘要：

张××，男性，12岁，两周前左侧面部长一疮疖，肿胀疼痛，数天后，被其母用针扎穿并挤出脓性血液。两天后发生寒战、高热、头痛、呕吐，经治疗未见好转，且病情加重，昏迷抽搐而入院。

体检：营养不良，发育较差，神志不清，T390

C，P140次/分，R35次/分。面部有一2cm×3cm的红肿区，略有波动感。

化验：白细胞总数：22×109/L，中性粒细胞：0.87。血培养金黄色葡萄球菌阳性。尸检摘要：

发育、营养差，面部有一2cm×3cm的红肿区，切开有脓血液流出。颅腔：大脑左额区有大量灰黄色脓液填充，脑组织坏死，有4cm×4cm×5cm的脓腔形成。切片观察：脑组织坏死，大量中性粒细胞浸润，并见肉芽组织。

讨论题：

⒈根据资料对本病例作何诊断？ ⒉本例脑部病变是怎样引起的？ ⒊从本病例中应吸取什么教训？

病例讨论

（七）病史摘要：

唐××，男，50岁。上腹部疼痛15年，常在饭后1～2小时疼痛发作，但近二年余疼痛无规律，近半年腹痛加剧，经常呕吐。两个月来，面部及手足浮肿，尿量减少，食欲极差。半小时前排黑色柏油样大便，并呕吐鲜血，突然昏到，急诊入院。体检：消瘦、面色苍白，四肢厥冷，血压：8/5kPa，心音快而弱。两腋下及左锁骨上淋巴结显著肿大，质硬。

化验：WBC5×109

/L，N0.70，L0.25，M0.04。患者入院后出血不止，血压急剧下降，抢救无效死亡。尸检摘要：

全身水肿，两下肢及背部为甚。胸腹腔内分别有500ml淡黄色澄清液体。胃小弯幽门区有4cm×5cm×5cm肿块一个，质硬，表面出血坏死呈溃疡状。取肿块处胃粘膜作病理检查，镜下见局部正常胃粘膜破坏，异型细胞生长，细胞大，核大，染色深，可见不对称核分裂像，腺上皮增生，腺体大小不一，排列紊乱，异型腺体已穿过粘膜肌层浸润达胃肌层及浆膜。肝大、黄色、质软、油腻，镜下见肝细胞内有大小不等之圆形空泡，核被挤向一侧，无异型性，苏丹Ⅲ染色呈桔红色。肾小管上皮细胞肿大，肾小管腔狭窄，肾小管上皮细胞内满布针尖大小伊红色颗粒。讨论题：

⒈作出病理诊断，并按病变发展解释患者出现各种临床表现。

⒉肝、肾发生什么病变，分析其原因。⒊患者死亡原因是什么？

病例讨论

（八）病史摘要：

患者，女，40岁，农民。一月前，出现咳嗽、咳带血丝痰，半月前患者感乏力并发热、喀血。四天前患者开始出现声嘶，头痛，头晕，时有神志不清。

入院检查：T380

C，P105次/分，R17次/分，BP16/10.6kPa，神志不清，瞳孔正常，颈部淋巴结可触及。胸透发现左肺上叶肺不张。血常规：RBC3.8

×1012/L，Hb75g/L，WBC15.8×109

/L。入院后一周，患者突然感觉左下胸锐痛，左胸浊音，呼吸音降低，胸腔穿刺放出400ml血性液体，胸水涂片，查见癌细胞。X线显示左胸腔积液，左肺膨胀不全。患者全身情况差，治疗无效而死亡。尸检所见：

左锁骨上淋巴结肿大，左胸腔内约有350ml黄色混浊液体。双侧肺门淋巴结均有灰白色瘤组织转移。支气管内有白色粘液和脓性分泌物，左支气管和分支均被瘤组织浸润并且被阻塞。左肺高度萎缩，肺表面及小支气管周围均有瘤组织浸润，左肺上部近边缘处有一脓肿，直径3cm，右肺也有小的转移性瘤结节。肺门淋巴结和纵隔淋巴结被瘤组织浸润而粘连成块，双侧锁骨上淋巴结也发生转移。镜检：见圆形或椭圆形分化极差的瘤细胞密布于支气管壁内及周围组织并散布于肺泡、血管和淋巴管内。肝：重1240g，表面有略突起的转移性瘤结节，直径最大约0.5cm，镜下见肝血窦内有多个小的瘤细胞群。脾、胰、肾中均见成群的瘤细胞浸润。讨论题：

⒈作出完整的病理诊断。

⒉病人为什么会出现声音嘶哑？肺部出现肺不张和肺脓肿应如何解释？

病例讨论

（九）病史摘要：

李某，男，50岁。半年前，背米时突然感觉心前区疼痛，同时感左上臂、左肩疼痛，伴气急、肢体冷、面色苍白，出冷汗，经治疗休息后缓解。以后，每当劳累后，心前区疼痛等上述症状时有发生。数周前上五层楼后，心前区剧痛，冷汗淋漓，以后出现呼吸困难、咳嗽、咳粉红色泡沫痰等症状，听诊两肺湿性罗音。今早晨解大便时，突然昏到，神志不清，经抢救无效，次日死亡。尸检所见： 左心室肥大，左心室前壁有多个不规则白色瘢痕灶，其心内膜面有一拇指大附壁血栓。左冠状动脉前降支粥样硬化，其内血栓形成，血管腔闭塞。大脑左半球内小动脉粥样硬化，小动脉瘤形成。左侧内囊，见桃核大坏死灶（软化灶）一个，并见多量出血。双肺体积增大，切面可见泡沫状液体自切面溢出。讨论题：

⒈对本病例应作何诊断？

⒉请按病变发展过程、结合尸检所见，解释上述各种临床表现。

⒊患者的死亡原因是什么？

病例讨论

（十）病史摘要：

赵某，女，32岁。心悸、气急、不能平卧一年，症状加重一周。患者幼时扁桃体经常发炎、发热。1

2岁时出现两膝关节红肿疼痛，以后肩、髋、踝关节也相继肿痛，呈游走性，反复发作，伴发热。当时医院检查抗“O”增高，血沉加快。两周后又出现心悸，活动后加重，经治疗后有所好转。20年来这些症状时好时发，且日渐加重，紫绀明显。近半年来出现夜间端坐呼吸，不能平卧。一周前心悸、气促加剧，伴少尿、腹胀，双下肢浮肿入院。

体检：半卧位，两颊暗红，紫绀，P115次/分，R30次/分，Bp14/8kPa（105/60mmHg），体温正常，两下肢浮肿，右下肢为甚，且左下肢呈暗红色。心尖搏动在左锁骨中线第五肋间外2cm处，心前区闻及Ⅲ级收缩期杂音和Ⅱ级舒张期杂音，两肺下叶闻及湿性罗音，以左下叶为甚。肝右肋下4cm，质地中等，有压痛。

患者住院后虽经积极治疗，但症状未见改善，昨日起床去厕所，突然气急、紫绀加重，并发生休克，抢救无效死亡。尸检所见：

①二尖瓣狭窄及关闭不全，左右心均扩大；②左肺见多处楔形实变区（灰红色）；③右肾有一楔形灰白色凹陷病灶；④肝、脾、肺淤血；⑤右下肢股静脉血栓形成；⑥肺动脉主干的左分支内有4cm长，直径1cm的血栓；⑦左心房后壁内膜粗糙，有瘢痕。讨论题：

⒈作出病理诊断。

⒉以病理变化解释患者的各种症状及体征。⒊患者死亡原因是什么？

病例讨论

（十一）病史摘要：

张某，男性，62岁，因突然昏迷2小时而入院。患者10年前发现有高血压，血压24～34/13～16kPa。近年来常感心悸，尤以体力活动时显著。近半个月来常觉后枕部头痛、头晕、四肢发麻。今晨上厕所时突然跌到，不省人事，左侧上下肢不能活动并有小便失禁。

体检：T380

C，P60次/分，Bp28/16kPa。神志昏迷，呼吸深沉，鼾声大，面色潮红，左侧鼻唇沟较浅。颈项强直。心尖搏动明显，呈抬举样，心浊音界向左略扩大，心律齐，主动脉瓣第二心音亢进。左侧上下肢呈弛缓性瘫痪，腱反射消失。化验：WBC18.5×109

/L，N0.80，L0.20。尿：蛋白（＋＋），红细胞（＋），管型（＋），脑脊液呈血性。

入院后给予吸氧、降压药、脱水剂及止血药等治疗，疗效不明显，患者昏迷不断加深，继之呼吸不规则，终因呼吸、心跳停止而死亡。尸检所见： 脑右侧内囊处可见3cm×2cm×2cm之血肿，局部脑组织坏死、出血，脑室内见大量凝血块，脑桥、中脑部分区域亦可见出血灶。心脏增大约为死者右拳1.5倍，左心室壁显著增厚，乳头肌增粗。镜检：心肌纤维明显变粗，核亦肥大。两肾体积缩小，表面呈细颗粒状，切面皮质变薄，皮髓质分界不清。镜检：入球小动脉及肾小球玻璃样变，肾小管萎缩、消失，残留肾小球及肾小管代偿性肥大。肾间质纤维组织增生，散在淋巴细胞浸润。脾中央动脉玻璃样变。讨论题：

⒈本病例患的是什么病？死亡原因是什么？

⒉请对心脏病变作出诊断，并指出其相应的症状和体征。

⒊肾脏病变与高血压的关系如何？

病例讨论

（十二）病史摘要：

患者刘××，男性，68岁，因心悸、气短、腹胀、双下肢浮肿五天来院就诊。10年来病人经常出现咳嗽、咳痰，尤以冬季为甚。近五年以来，自觉心悸、气短、活动后加重，有时双下肢浮肿，但经过休息可以缓解。5天前因受凉病情加重，出现腹胀，不能平卧。病人有吸烟史48年。体格检查：病人端坐呼吸，神智清楚，口唇紫绀，颈静脉怒张，桶状胸，心音遥远，肝脏下缘在右锁骨中线肋缘下4cm，剑突下8cm，脾脏在肋缘下可以触及，腹部叩诊可听见移动性浊音，双下肢凹陷性浮肿。化验室检查：WBC12.0×109/L，PaO29.8kPa（74mmHg），PaCO28.0kPa（60mmHg）。讨论题：

⒈根据学过的病理学知识，为该病人作出诊断，并提出诊断依据。

⒉试分析病人患病的原因和疾病的发展演变过程。

病例讨论

（十三）病史摘要：

患者王××，男性，59岁，10天前因高热3天入院。入院前4个月以来，病人有咳嗽，痰中带血，尔后出现胸闷、气短，食欲不振，明显消瘦，并时有低热。于入院前3天突发寒战高热，体温维持在380

C～400C之间。既往身体健康，吸烟37年。体格检查：T380C，P92次/分，R26次/分，神志清楚，急性病容。皮肤可见出血点，脾脏肿大。左锁骨上可触及直径1cm～2cm的淋巴结4枚，质地硬，无压痛。实验室检查：Hb68g/L，WBC26×109

/L，N0.98。胸部拍片显示左肺下叶主支气管阻塞，近肺门处可见5cm×6cm大小的致密阴影，左肺下叶内可见一直径4cm的空洞。入院后进行积极抗感染治疗，但病情没有缓解。24小时前心率增快，脉搏细弱，血压下降，而后陷入昏迷，经抢救无效死亡。尸检所见：

老年男尸，明显消瘦，皮色苍白，前胸及四肢皮肤可见多数出血点，左锁骨上淋巴结肿大，质地较硬。双下肢凹陷性浮肿。

⑴肺：见左肺门处有一不规则肿块，6cm×5cm×5cm，质硬，切面灰白色。镜检：肿块由异常增生的细胞构成，细胞呈巢状排列，肿瘤细胞体积较大，巢周围细胞呈短梭形，中间呈不规则形，病理性核分裂像多见，可见单个细胞角化，巢间为纤维组织。⑵肝脏：肉眼见包膜紧张，切面外翻，右叶被膜下见3个直径2.5cm的灰白色结节，中心可见坏死出血。镜检：灰白色圆形结节的组织结构与肺门肿块相同。

⑶肾脏：肉眼可见被膜下有多数小脓点。镜检可见肾小管上皮细胞肿胀，内含大量红染颗粒，皮质和髓质内可见多数小脓点。讨论题：

⒈分析该病人患有哪些疾病？并找出诊断依据。⒉根据病史分析各种疾病的相互关系。

病例讨论

（十四）病史摘要：

患者，男性，4岁。发热、咳嗽、咳痰10天，近

2天加重，并出现哮喘。体检：T390

C，P160次/分，R25次/分。患儿呼吸急促、面色苍白、口唇发绀、精神萎靡、鼻翼扇动，双瞳孔等大等圆，颈软。双肺散在中、小水泡音，心音钝，心律齐。实验室检

查：WBC21×109

/L，N0.78，L0.17。X线检查：左、右肺下叶可见灶状阴影。

临床诊断：小叶性肺炎，心力衰竭，入院后曾肌内注射青霉素、链霉素，静脉输入红霉素等，病情逐渐加重，治疗无效死亡。尸检所见：

肺：左、右肺下叶背部散在实变区，切面可见散在粟粒至蚕豆大小不整形灰黄色病灶。镜下，病灶中可见细支气管壁充血并有中性粒细胞浸润，管腔中充满大量中性粒细胞及脱落的上皮细胞，其周围肺泡腔内可见浆液和炎症细胞。讨论题：

⒈临床诊断是否正确？根据是什么？ ⒉患者死因是什么？

病例讨论

（十五）病史摘要： 男性，47岁，农民。浮肿、腹胀3个月，近一周加重。现病史：患者于4年前罹患肝炎，屡经治疗，反复多次发病。近两年全身疲乏，不能参加劳动，并有下肢浮肿。近3个月腹部逐渐膨胀，一周前因过度劳累同时大量饮酒，腹胀加重。患者食欲不振，大便溏泻，每日3～4次，小便量少而黄。

既往史：患者常年嗜酒，除4年前罹患肝炎外无其它疾病。

体格检查：面色萎黄，巩膜及皮肤轻度黄染，颈部两处有蜘蛛痣，心肺未见异常。腹部膨隆，腹围93cm，有中等腹水，腹壁静脉曲张，肝脏于肋缘下未触及，脾大在左肋缘下1.5cm。下肢有轻度浮肿。

实验室检查：RBC3.27×1012/L，Hb70g/L；血清总蛋白52.3g/L，白蛋白24.2g/L，球蛋白28.1g/L；黄疸指数18单位，谷丙转氨酶102单位。X线食管静脉造影提示食管下段静脉曲张。临床诊断：肝硬化（失代偿期）。讨论题：

⒈你是否同意本病的诊断？为什么？

⒉病人为什么会出现腹壁静脉曲张和食管下段静脉曲张？请有病理学知识解释。

⒊本例患者的黄疸、腹水、浮肿、脾大怎么产生的？ ⒋本例肝脏可能出现哪些大体和镜下改变？

病例讨论（十六）病史摘要：

女性，7岁，全身浮肿4天，呼吸困难1天，于1969年10月19日急症入院。患儿于本月13日早晨起床时两眼睑开始出现轻度浮肿，后逐渐加重，并遍及颜面、四肢以及全身，尿量减少，但一般情况尚好。至15日夜间开始出现呼吸困难伴有轻度发热，自述两侧上胸痛。入院当天下午，呼吸困难明显加重，无尿。患儿于两月前下肢发生多个脓疱疮，至今仍有少数未愈，余无特殊病史。

体格检查：T380C，P124次/分，R42次/分，Bp20/8kPa。营养、发育中等，烦躁，呼吸困难，不能平卧，呈急性病容，口周发绀，鼻翼扇动，全身有凹陷性水肿，两下肢有少数脓疱疮。两侧颈静脉轻度怒张。心界稍扩大，心音弱，无杂音，心率124次/分，律齐，两肺可闻及少许湿罗音。腹部膨隆，有轻度移动性浊音，肝右肋下5cm，边缘钝，质地中等，有压痛。

实验室检查：血象：RBC3.6×1012/L，Hb96g/L；WBC13.9×109/L，N0.74，L0.23，M0.01，E0.02。尿常规：蛋白（＋＋＋），红细胞（＋＋），WBC1～3个/低倍，颗粒管型0～1个/高倍。酚红试验：2小时酚红排泄总量45%，血非蛋白氮37.2mg/dl，血沉1小时

26mm。X线：心脏扩大、心搏减弱，肺呈淤血表现。入院后经利尿、强心治疗后，病情未见好转而死亡。尸检所见：

两侧肾脏呈对称性肿大，包膜紧张，表面光滑，色泽红，表面有小点状出血，切面皮质增厚，纹理模糊，但与髓质界限清楚。心脏扩大，肺呈淤血、水肿改变。讨论题：

⒈对本病作出病理诊断，其在组织学上可有哪些改变？

⒉根据病理变化解释临床症状。⒊该病例死因上什么？

病例讨论（十七）病史摘要：

李×，女性，28岁，已婚，恶寒发热6天，腰酸、腰痛、尿频、尿急、尿痛3天。现病史：3天前觉腰部酸痛难受，排尿次数增多，每天多达20次左右，尿频、尿急、尿痛症状明显。既往史：半年前曾有“膀胱炎”病史，出院后，每日小便次数比往日增多，无尿痛。

体检：T400

C，P135次/分，R25次/分，Bp17.95/9.98kPa。心肺无异常，肝脾未触及，右肾区（脊肋角）有明显叩击痛。实验室检查：WBC17.95×109

/L，N0.85，L0.15。尿常规：蛋白（＋），红细胞（＋），白细胞（＋＋＋），未发现管型。早晨中段尿培养有大肠杆菌生长，菌落计数11万/ml尿。讨论题：

⒈患者所患何病？其诊断依据是什么？ ⒉试分析膀胱炎与本次发病的关系如何？ ⒊本例尿检查未发现管型，为什么？

病例讨论（十八）病史摘要：

患者，女，60岁，一年前有不规则阴道出血及大量恶臭白带。半年前开始腹痛，有脓血便，量不多，每日3～4次，同时有里急后重，无发热，食欲尚可。3个月前左下肢肿胀并伴有腰骶部疼痛，小便正常，无咳嗽咳痰。30年前曾有结核病史。体检：Bp20/12kPa（150/90mmHg），轻度贫血貌，体质消瘦，心肺（－）。腹稍胀，下腹部有压痛，左侧腹股沟有一不规则肿块，固定不易推动，下腹壁及左下肢水肿。肛门指诊：直肠前壁可触及一稍硬而不规则的肿块，有压痛，指套带血。妇科检查：外阴水肿，阴道不规则狭窄，宫颈外口有一菜花状肿块突入阴道，并浸润阴道壁。活检，病理报告为鳞状细胞癌。化验检查： 血常规：Hb85g/L；WBC5.6×109/L，N0.72，L0.28。大便常规：脓血便，红细胞（＋＋＋），脓细胞（＋），红细胞（＋＋）。讨论题：

⒈该病人应诊断为什么病？ ⒉脓血便的原因是什么？

⒊下肢水肿的发生机制是什么？

病例讨论（十九）病史摘要：

女性，30岁，农民。1年前人工流产一次，近2个月来阴道不规则出血，时常有咳嗽、咯血、胸痛、头痛、抽搐等症状，伴全身乏力，食欲减退。死前一天早晨起床后突感头痛，随即倒地，昏迷，瞳孔散大，呼吸、心跳停止。尸检所见：

患者消失贫血状，腹腔内有血性液体约400ml，双侧胸腔中也有同样性状液体100ml。

心脏：重320g，外膜光滑，未见增厚、粘连。脾脏：重160g。肝脏：重3200g，表面有数个1～2.5cm直径的出血结节，结节中心出血坏死，中心凹陷，形成癌脐，切面上见数个出血结节，有融和。肺：表面有1cm直径的结节伴出血、坏死。左右两侧肾各120g，未见病变。脑表面有多个出血性病灶，直径1.5cm，脑组织水肿。子宫后壁见直径3cm的出血性结节，质脆而软，浸润子宫肌层并穿破肌壁达浆膜，在子宫后盆腔也有不规则出血性肿块，两侧卵巢上可见黄体囊肿。讨论题：

作出病理诊断并解释临床表现。

病例讨论（二十）病史摘要：

患者，女性，31岁，因心悸、怕热多汗，食欲亢进，消瘦无力，体重减轻，来院就诊。

体格检查：T370C，P98次/分，R20次/分，Bp20/9.3kPa（150/70mmHg）。双眼球突出，睑裂增宽。双侧甲状腺弥漫性对称性中度肿大，听诊有血管杂音。心率98次/分，心尖部可闻及Ⅰ级收缩期杂音。肺部检查无异常发现。腹平软，肝脾未触及。

基础代谢率＋57%（正常范围－10%～＋15%）。T3、T4水平升高，甲状腺摄I131率增高。入院后行甲状腺次全切术，标本送病理检查。病理检查：

肉眼见甲状腺弥漫性肿大，但仍保持甲状腺原有形状，表面光滑。切面结构致密，略呈分叶状，质实，灰红色，呈新鲜牛肉状外观。

镜下可见甲状腺滤泡弥漫性增生，上皮细胞呈柱状，并形成乳头状结构突向滤泡腔。滤泡腔较小，腔内胶质少而稀薄，靠近上皮边缘有成排的吸收空泡。间质血管丰富，明显充血，有大量淋巴细胞浸润并有淋巴滤泡形成。讨论题：

根据上述资料，请写出病理诊断并提出诊断依据。

病例讨论（二十一）病史摘要：

患者，男性，6岁，一个多月来反复发热，食欲减退，盗汗。近一周头痛，喷射性呕吐，嗜睡，阵发

性强直性抽搐。实验室查：WBC13×109

/L，N0.70，L0.12，M0.17，E0.01。血沉48mm/h。T40.20C，住院15天，治疗无效，病情恶化，呼吸困难，抢救无效死亡。尸检所见：

右肺上叶下部肺膜下有一灰白色病灶，并与下叶肺膜粘连，切面病灶大小为2.5cm×1.5cm，全为干酪样坏死物。两肺均可见多数散在的灰白色粟粒大小结核结节。肝脾均可见粟粒样结核结节。

脑膜有多量散在的粟粒结节，脑回扁平，脑沟变浅，脚间池、脑桥池等处的蛛网膜下腔内存有多量灰黄色胶冻样液体。切面脑室扩张，室管膜表面有灰白色渗出物附着，两侧间脑实质有小软化灶。镜下见脑膜普遍充血水肿，有多量结核结节，并有大量淋巴细胞等炎性细胞浸润。讨论题：

患儿死前作何诊断？其依据是什么？

病例讨论（二十二）病史摘要：

患者，男性，18岁。因持续性发热伴腹泻8天，今日解黑便一次而入院。体检：急性病容，表情淡漠。

体温：39.90

C，脉搏：90次/分，呼吸30次/分，肝肋下2cm，质软。脾肋下1.5cm，质软。白细胞总数3.3×109/L，中性粒细胞0.65，淋巴细胞0.32。肥达反应阳性。血培养有伤寒杆菌。入院二周后热退，食欲好转，某日中午进食后而感腹胀，傍晚突然出现下腹剧烈疼痛，伴恶心呕吐。检查：腹肌紧张，右下腹压痛、反跳痛明显。体温：38.50

C，白细胞

总数13×109

/L，中性粒细胞0.85，即进行手术，术中见回肠下端穿孔。讨论题：

⒈对该患者作何诊断？为什么？ ⒉你从本病例中应吸取哪些教训？ 病例讨论（二十三）病史摘要：

患者，21岁，因头痛、发热、呕吐急症入院。患者于25天前因受冷感冒头痛，伴畏寒、发热（体温不详），以后头痛加剧，呈刺跳痛，尤以前额为甚。10天前开始呕吐，呈喷射状，内容为事食物，无血，当地医院按感冒治疗（药物不详），症状无改善。2天前感双下肢麻木，乏力，转入我院。既往无特殊病史。

体检：T400C，P110次/分，Bp19.2/9.6kPa（114/72mmHg）。患者痛苦病容，嗜睡，神志恍惚与医生合作欠佳，双睑无水肿，瞳孔等大对称，对光反射存在，颈硬，无颈静脉怒张。心、肺检查未见异常，腹部稍凹陷，全腹有压痛。神经系统检查：浅反射及腹壁反射减弱，浅感觉存在，深反射减弱，膝反射及跟腱反射未引出，颈强直，克氏征、布氏征阳性。化验检查：WBC9.2×109

/L，N0.59，L0.41。脑脊液检查：压力高，糖低，蛋白高，细胞数高，氯化物显著减少，查见抗酸杆菌。X线检查：双肺上部各有一个结节状阴影，边缘见模糊的云雾状阴影。讨论题：

⒈患者的主要病变是什么？诊断依据是什么？ ⒉本例的症状、体征、化验阳性是怎样引起的？ ⒊本例各病之间的关系如何？

病例讨论（二十四）病史摘要：

患者，男，37岁，因上腹部肿块4月余来我院门诊检查。胸透见横膈抬高，以右侧为著。胸透后下楼时突然面色苍白，四肢厥冷，即紧急抢救。

体检：端坐呼吸，不能平卧。心音弱，心率慢，血压测不到，肺呼吸音粗糙。肝左叶肿大，下界剑突下三指，有饱满感，边缘清楚。经抢救无效，半小时后死亡。

尸检所见：

心包显著扩大，18cm×16cm×12cm,内含暗红色“脓液”约1500ml。肝重800g,左叶中部见一12cm×10cm×10cm之单房性“脓肿”，内含咖啡色粘稠“脓液”，有似烂鱼肠的腐臭味。“脓肿”膈面肝组织及膈肌菲薄，与心尖部心包紧密粘连，并见一通向心包腔的穿孔（直径1cm）。回肠末端有数个溃疡，形状、大小不一，最大者2cm×1.5cm，边缘略呈潜行性。腹腔内含草黄色液体约70ml，肠系膜淋巴结普遍肿大，质软。

显微镜检查：于肝“脓肿”及肠溃疡周边部分查见阿米巴滋养体。讨论题：

⒈从病理学角度分析本病的发生、发展及死亡原因？

⒉本病例的病理诊断及其依据是什么？ ⒊总结本病例的病理临床特点？

1.临床检查参考值：

成人心脏 男：300g 女：250g 2.临床检查参考值： 白细胞计数及分类

成人（4～10）×109

/L（4000～10000/μl）

儿童（5～12）×109

/L（5000～12000/μl）中性粒细胞（N）0.50～0.70（50%～70%）嗜酸性粒细胞（E）0.005～0.05（0.5%～5%）淋巴细胞（L）0.20～0.40（20%～40%）单核细胞（M）0.03～0.08（3%～8%）红细胞计数（RBC）

男性4.0～5.5×1012

/L（400万～550万/μl）

女性3.5～5.0×1012

/L（350万～500万/μl）血红蛋白（Hb）

男性120～160g/L（12～16g/dl）女性110～150g/L（11～15g/dl）3.临床检查参考值：

体温（T）36.3～37.30

C 血压（BP）

收缩压≤18.6kPa（140mmHg）舒张压≤12kPa（90mmHg）心率（P）60～100次/分 呼吸频率（R）16～20次/分 4.临床检查参考值： 动脉血氧分压（PaO2）

12.7～13.3kPa（95～100mmHg）动脉血二氧化碳分压（PaCO2）4.7～6.0kPa（34～45mmHg）5.临床检查参考值：

血清总蛋白60～80g/L（6～8g/dl）白蛋白40～55g/L（4～4.5g/dl）球蛋白20～30g/L（2～3g/dl）白蛋白 /球蛋白比值1.5～2.5：1 谷丙转氨酶Reitman法（40Kμ）6.临床检查参考值：

2小时酚红排泄总量＞55%

血非蛋白氮14.3～25.0mmol/L（20～35mg/dl），红细胞沉降率 Westergren法 男性≤10mm/h 女性≤15mm/h

第三篇：临床医学教育与医学人才培养

临床医学教育与医学人才培养

临床教学是高等医学院校学生在校期间的终末环节,它为理论提供了实践的机会,是医学生向临床医生过渡的最重要阶段。可为培养高质量的合格医学人才奠定坚实的基础。本文提出了强化临床医学教育与医学人才培养的重要性,进一步探索临床教育教学方法及完善临床教育教学管理策略。

医学教育分为基础医学教育与临床医学教育两大部分,是实践性强的专业技能教育。临床阶段的学习是培养医学生职业道德素质、专业知识结构、临床综合技能的重要途径,是医学生从事临床工作之前职业训练的重要阶段,是深化理论知识、提高综合素质、培养独立工作能力的重要环节[1]。作为高等医学院校,是基础教育和临床教育相结合的一个整体。基础教育重在理论教育,而临床教学是高等医学院校学生在校期间的终末环节,它为理论提供了实践的机会,是医学生向临床医生过渡的最重要阶段。所以临床医学教育为培养高质量的合格的医学人才奠定了坚实的基础。

强化临床教育教学的重要性临床教师的水平、教学方法等直接影响了医学人才的培养质量。附属医院本身承担繁重的医疗工作,同时还承担医学院大量的临床教学任务。教学意识淡化是临床教学工作中一个长期存在的问题。如何增强临床医生的教学观念、明确医教研并重的意义,树立“医疗是命脉、教学是基础、科研是精髓、质量是根本”的意识显得尤为重要。

为了提高临床教学意识,我们通过召开教学经验交流会,使医院坚定医教研并重的理念,认识到临床教学对提高医院医疗水平、科研能力等医院内涵建设方面具有不可替代的促进作用,为医院的长远发展起到推动作用。教学工作同时可以督促临床教师不断学习,多方面了解国内外学术领域新进展,提高自身业务水平,增强自身的综合实力,从而极大地促进教学意识的提高。有人把医、教、研三者的地位和作用概括为:医疗是今天,科研是明天,教育是未来。重视临床医学教育,培养高质量的医学人才,是保证附属医院可持续发展的基石。

探索临床教育教学方法 重视岗前教育 医学生由课堂到病房,角色发生了变化,岗前教育就显得十分重要。为了使医学生紧跟医学发展的新形势,应将“医师资格方案”、“执业医师资格实践技能考核实施”、“实习带教管理与医疗保障制度改革同步”[2]等相关内容,以及“医疗安全与法制教育”、“缺陷病历分析”、“医院感染知识”、“突发公共卫生事件应急条例”等内容纳入实习大纲,不断完善岗前培训的内容,并对医学生进行入科前指导、观摩实际操作等,为他们进入科室、病房后的系统培训打好基础。

加强临床技能训练,提高教育教学质量 在教学实践中,应把临床基本技能教学改革作为教学研究的重点,使毕业实习学生熟练掌握基本技能。近年来,作为附属医院,我院将“学生的临床技能训练和临床实践能力的培养”放在了重要位置。第一,安排专人负责学生技能操作训练。第二,我们建立了适合临床教学的临床技能培训中心,为学生的学习提供了良好的培训场所。第三,拟定了适合我院的一对一操作技能培训制度,对专业教研室的老师进行严格选拔,对所在科室实习学生专一负责,并要求学生对一些基本的技能操作如四大穿刺、消毒铺巾、切开缝合、换药拆线等必须熟练掌握。我们对带教老师进行定期的考核,提高了临床教学质量和教学效果。

临床综合能力多站考试(简称MSECS)的教学,重视临床实践能力 临床综合能力多站考试(Multi-ple Station Examination of Clinical Skills,简称MSECS)是以检查基本技能和临床思维为重点的一种新型考试方法,在一定程度上能克服重读书轻实践的弊端,能更全面地评价学生的知识和技能[3]。考试客观、公正,爱伤观念强,且考试方式、内容与执业医师考试接轨。以往临床技能考试方法的缺陷与不足,已被越来越多的国内外医学教育专家们关注和重视。

学生多选题考试的得分与重要的临床技能无关。在此类考试中死记硬背下来的知识无法保证至临床实践中仍能记住并得到运用,存在着考试方法本身的缺陷。通常采用的由各实习医院带教医师对学生临床技能评分的做法也不尽人意。我们具体的做法可以与执业医师的考试形式相同。MSECS的应用是提高教学质量的有效方法。其考核重点是基本技能和临床思维能力,在一定程度上促使学生既重视理论学习更重视临床实践,应成为以后考核方式改革的趋势。

完善临床教育教学管理 促进教育教学管理的规范化和制度化 在临床教育教学实践中,我院一贯坚持以质量为核心,根据各主要教学环节的标准及临床教学基地建设的基本要求,制定了一系列教学管理规章制度,如《教学规范手册》、《临床医学实习医师职责》、《实习生管理规定》、《实习医师守则》、《医患沟通规范手册》等文件。

并根据形势发展的需要不断完善教学病种收治制度、教学查房制度、疑难病例讨论制度、实习医生病历书写制度等,形成了规范有效的教学质量保证机制。对规范日常教学管理,保证教学有序进行以及提高教学和管理质量提供了制度保障。在临床教育教学过程中,我们以教学环节管理为切入点,按照理论授课、课间见习、毕业实习及考核考试等不同的教学环节进行督导,特别注重发挥教研室的主导作用,确保教育教学质量。

充分调动教师教学的积极性,加强教研室及师资队伍建设 在临床教育教学过程中,教师的工作态度、业务水平、教学方法等与教学效果息息相关。临床教师具有医师和教师双重身份,尤其是青年教师往往存在教学经验不足,临床带教的规范性、系统性等方面亦存在差距,这就需要提高临床教师的教学水平与素质。具体方法:对分配来我院工作的青年医师进行教育理论岗前培训,使其明确自己的教师职责。具体培训内容包括思想道德、专业水平、教学能力和基础理论等方面,可选派教学经验丰富的教授进行专题讲座或示范教学查房,严格要求青年教师规范教学文档,抓好教学环节的培训。教研室主任要对青年教师严格考核,经同意并试讲通过后才允许进行理论授课。通过培训可以激励青年医师刻苦学习,苦练教学和医疗基本功,达到充实和更新理论知识、拓宽知识面、全面提高教师素质的目的。

我院实施业绩量化考核奖惩机制,对教学工作的先进科室和优秀教师进行表彰和奖励,逐步实现将教学工作量与奖励及职称评定挂钩,充分体现了对临床教师辛勤工作的尊重和肯定。鼓励教师参与教学研究和创新,从而对本科临床教学起到了促进、强化及提高的作用。我院根据专业特点设诊断学、内科学、外科学、妇产科学、儿科学、医学影像学、口腔科学等27个教研室,教研室设置齐全。目前我院本科临床教学及实习带教教师全部具有本科以上学历,并且相当一部分老师为硕士及博士学历,注重师资队伍梯队建设,为提高临床医学教育教学水平奠定了坚实的基础。

对临床教育教学进行监督指导提高教育教学质量是教学工作的核心,对其实施有效的质量监督是促进教育教学质量不断改进、提高和完善的重要手段。一个完整的教学质量监督体系总体包括两个方面:一是内部监督体系和自我评价,二是上级主管部门的监督和评价。

附属医院建立完善的教学质量监督体系是保证教学质量的有效环节,是实现良性循环运行机制的重要保证,可推进医院自身教育质量、教学水平的不断提高。实施内部教学质量监督不仅要对教学过程或教学部门进行监督,还要对医院的各个教学工作环节进行监督,从而发现潜藏的或由来已久的影响教学质量的各种问题,并寻找出积极可行的解决办法[4]。

小结:医学院校教学管理部门对临床教学进行监督指导,可以使附属医院和教学医院教学工作进一步规范化、科学化,使教学管理部门、教师和学生按行为准则办事,并可及时发现问题、解决问题和总结经验,促进教学管理工作的持续改进,推动教学各环节的工作协调进行,最终达到不断提高教学质量的目的。更多相关参考：。

第四篇：血栓的病理学研究及与临床联系

血栓的病理学研究及与临床联系

一、 下列关于混合血栓的说法，错误的是（）C  血栓的类型不包括（）D  混合血栓的镜下构成，说法不正确的是（）D  下列关于透明血栓的说法错误的是（）C  下列关于白色血栓的说法，错误的是（）B  股静脉内较大的血栓完全机化需要多久（）B  下列哪一项不属于附壁血栓（）B  下列关于红色血栓的说法错误的是（）A  下列关于白色血栓的形态，说法错误的是（）A  血栓的结局不包括（）A

二、 心血管内膜损伤导致血栓形成常见疾病不包括（）B  下列哪种疾病不易形成血栓（）D  正常血流中，红细胞和白细胞在血流中的（），其外是血小板，最外层是血浆 B  有利于血栓形成的血流状态改变不包括（）C  静脉血栓多见的原因不包括（）C  内皮细胞损伤促进血小板的活化，表现为（）D  血液凝固性增加的常见原因不包括（）B  动脉和心脏血栓形成的原因是（）B  血栓形成第一步是（）A  静脉血栓形成的原因是（）A

三、 血栓形成过程中，对于血小板黏集的说法，错误的是（）C  在血栓形成过程中，血栓头是指（）D  血小板血栓镜下特点，错误的是（）C  在血栓形成过程中，血栓尾是指（）B  血栓形成的起始点是（）D  血栓形成过程中，血小板黏附的特点是（）B   临床上，常用（）防治血栓性疾病，因其具有抑制血小板凝集等抗凝作用。A 血栓形成过程中，对于血小板的黏附说法错误的是（）A

四、 下列哪项不属于血栓形成阻塞动脉血管后的临床表现（）B  脑萎缩的病理变化不包括（）B  在血栓运行途径中，随血流方向通过主动脉系统和左心最常阻塞于（）B        阻塞血管的异常物质成为栓子，下列不属于栓子的是（）D 血栓对机体不利的影响不包括（）A 血栓对机体的影响取决于下列哪些因素（）C 风湿性心脏病二尖瓣狭窄的病理表现可呈（）A 体循环动脉栓塞血栓（）来自于左心 D 在血栓运行途径中，随血流方向通过静脉系统和右心可引起（）A 血栓形成阻塞动脉血管后所致脑功能下降，其表现不包括（）C

五、 下列关于血栓形成的说法，正确的是（）B  正常血液中存在凝血系统和抗凝血系统，处于（）状态 C  损伤的内皮细胞的促凝作用不包括（）C  血栓形成的条件不包括（）D  关于心血管内皮细胞的说法，错误的是（）B  血栓性疾病的两种病理过程包括（）D  完整内皮细胞的抗凝作用不包括（）A  在凝血系统中，凝血因子激活，产生（），形成微量的纤维蛋白沉着于心、血管内膜上，保证了血液潜在的可凝固性 A

第五篇：《临床技术操作规范 病理学分册》（范文）

《临床技术操作规范•病理学分册》

第1章 总 则

一、为提高病理学诊断质量，促进临床工作，依据《中华人民共和国执 业医师法》精神，结合医院病理科工作的特点，制定本规范。

二、医院病理科和承担医院病理科任务的医学院校病理教研室的主要临 床任务是通过活体组织病理学检查（简称活检）、细胞病理学检查（简 称细胞学检查）和尸体剖检（简称尸检）等作出疾病的病理学诊断（或 称病理诊断）。具有一定规模的病理科，应积极开展教学、培训病理医 师和科学研究等项工作。

三、病理学诊断是病理医师应用病理学知识、有关技术和个人专业实践 经验，对送检的患者标本（或称检材，包括活体组织、细胞和尸体等）进行病理学检查，结合有关临床资料，通过分析、综合后，作出的关于 该标本病理变化性质的判断和具体疾病的诊断。病理学诊断为临床医师 确定疾病诊断、制定治疗方案、评估疾病预后和总结诊治疾病经验等提 供重要的、有时是决定性的依据，并在疾病预防，特别是传染病预防中 发挥重要作用。

四、病理学诊断报告书（或称病理诊断报告）是关于疾病诊断的重要医 学文书。当涉及医、患间医疗争议时，相关的病理学诊断报告书具有法 律意义。病理学诊断报告书应由具有执业资格的注册主治医师以上（含 主治医师）的病理医师签发。各医院可酌情准予条件适宜的高年资病理 科住院医师试行签署病理学诊断报告书。低年资病理科住院医师、病理 科进修医师和非病理学专业的医师不得签署病理学诊断报告书。

五、病理学检查是临床医师与病理医师为确立疾病诊断而进行的合作行 为，是有关临床科室与病理科之间特殊形式的会诊。临床医师和病理医 师双方皆应认真履行各自的义务和承担相应的责任。

六、病理学检查申请单是临床医师向病理医师发出的会诊邀请单。病理 学检查申请单的作用是：临床医师向病理医师传递关于患者的主要临床 信息（包括症状、体征、各种辅助检查结果和手术所见等）、诊断意向 和就具体病例对病理学检查提出的某些特殊要求，为进行病理学检查和 病理学诊断提供重要的参考资料或依据。病理学检查申请单是疾病诊治 过程中的有效医学文书，各项信息必须真实，应由主管患者的临床医师 亲自（或指导有关医师）逐项认真填写并签名。

七、临床医师应保证送检标本与相应的病理学检查申请单内容的真实性 和一致性，所送检材应具有病变代表性和可检查性，并应是标本的全 部。

八、患者或患者的授权人应向医师提供有关患者的真实信息（包括姓 名、性别、年龄、病史和可能涉及诊断需要的隐私信息）。病理医师应 尊重和保护患者的隐私。患者或患者的授权人应保证其自送检材的真实 性、完整性和可检查性。

九、病理科应努力为临床、为患者提供优质服务，遵照本规范的要求加 强科室建设，制订完善的科室管理制度，并实施有效的质量监控。

十、病理科工作人员应恪尽职守，做好本职工作。病理医师应及时对标 本进行检查和发出病理学诊断报告书，认真对待临床医师就病理学诊断 提出的咨询，必要时应复查有关的标本和切片，并予以答复。病理科技 术人员应严格执行本规范的技术操作规程，提供合格的病理学常规染色 片、特殊染色片和可靠的其他相关检测结果，并确保经过技术流程处理 的检材真实无误。

第2章 病理学检查常规

第一节 普通活体组织病理学检查常规

一、申请单和标本的验收

(一)病理科应有专人验收普通活体组织病理学检查(常规活检)申 请单和送检的标本。

(二)病理科验收人员必须：

1． 同时接受同一患者的申请单和标本。

2． 认真核对每例申请单与送检标本及其标志（联号条或其他写明患者 姓名、送检单位和送检日期等的标记）是否一致；对于送检的微小标 本，必须认真核对送检容器内或滤纸上是否确有组织及其数量。发现疑 问时，应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。

3．认真检查标本的标志是否牢附于放置标本的容器上。

4．认真查阅申请单的各项目是否填写清楚，包括：①患者基本情况［姓 名、性别、年龄，送检单位（医院、科室）、床位、门诊号/住院号、送 检日期、取材部位、标本数量等］，②患者临床情况［病史（症状和体 征）、化验/影象学检查结果、手术（包括内镜检查）所见、既往病理学 检查情况（包括原病理号和诊断）和临床诊断等］。5．在申请单上详细记录患者或患方有关人员的明确地址、邮编及电话号 码，以便必要时进行联络，并有助于随访患者。

(三)验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。

(四)下列情况的申请单和标本不予接收：

1．申请单与相关标本未同时送达病理科；

2．申请单中填写的内容与送检标本不符合；

3．标本上无有关患者姓名、科室等标志；

4．申请单内填写的字迹潦草不清；

5．申请单中漏填重要项目；

6．标本严重自溶、腐败、干涸等；

7．标本过小，不能或难以制做切片；

8．其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。

病理科不能接收的申请单和标本一律当即退回，不予存放。

(五)临床医师采取的标本应尽快置放于盛有固定液（4%中性甲醛，即1 0%中性福尔马林）的容器内，固定液至少为标本体积的5倍。对于需作 特殊项目检查（如微生物、电镜、免疫组织化学、分子生物学等）的标 本，应按相关的技术要求进行固定或预处理。

(六)病理医师只对病理科实际验收标本的病理诊断负责。

(七)病理科应建立与送检方交接申请单和标本的手续制度。具体交接方 法由各医院病理科自行制订。

二、申请单和标本的编号、登记

(一)病理科验收人员应在已验收的申请单上注明验收日期并及时、准确 编号（病理号），并逐项录入活检标本登记簿或计算机内。严防病理号 的错编、错登。

(二)标本的病理号可按年编序，或连续性（不分）编序。(三)同一病例同一次的申请单、活检标本登记簿（包括计算机录入）、放置标本的容器、组织的石蜡包埋块（简称蜡块）及其切片等的病理号 必须完全一致。

(四)病理科应建立验收人员与组织取材人员之间申请单和标本的交接制度。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(五)在病理科内移送标本时，必须确保安全，严防放置标本的容器倾 覆、破损和标本的散乱、缺失等。

三、标本的预处理

标本验收人员对已验收的标本酌情更换适宜的容器，补充足量的固定 液；对于体积大的标本，值班取材的病理医师在不影响主要病灶定位的 情况下，及时、规范地予以剖开，以便充分固定。

四、标本的巨检、组织学取材和记录

对于核验无误的标本，应按照下列程序进行操作：①肉眼检查标本（巨 检）；②切取组织块（简称取材）；③将巨检和取材情况记录于活检记 录单上（活检记录单印于活检申请单的背面）。巨检和取材的技术操作 参见第3章第四节。

巨检和取材时的注意事项：

(一)巨检和取材必须由病理医师进行，应配备人员负责记录。

(二)巨检和取材过程中，应严防污染工作人员和周围环境。

(三)标本一般应经适当固定后再行取材。已知具有传染性（例如结核 病、病毒性肝炎等）的标本，应在不污染环境和／或不扩散传染的原则 下，经必要的初步巨检或切开后，立即置于盛有足量固定液的专用容器 内，充分固定后再行常规巨检和取材。

(四)病理医师在对每例标本进行巨检和取材前，应与记录人员认真核对 该例标本及其标志与申请单的相关内容是否一致。若对申请单填写的内 容或／和标本有疑问（例如患者姓名有误，标本内容、数量、病变特征 与申请单填写的情况不符等），应暂行搁置，尽快与送检方联系，查明 原因，确保无误后，再行巨检和取材。必要时，可邀请有关临床医师共 同检查标本和取材。对于有疑问的标本，在消除疑问前不得进行巨检和 取材，应将有关标本连同其申请单一并暂时妥存。

(五)病理医师进行巨检和取材时，记录人员应根据病理申请单内容，向 巨检医师报告患者的基本临床情况、手术所见、标本情况（采取部位、数量等）和送检医师的特殊要求等，并如实、清楚地将病理医师的口头 描述记录于活检记录单上。必要时，应在活检记录单上（或另附纸）绘 简图显示巨检所见和标示取材部位。取材者应核对记录内容。

(六)具有医学学术价值的标本可摄影存档，并酌情妥为保存。

(七)病理科宜积极推行巨检和取材的录音记录。每次巨检和取材结束 后，应由专人立即对录音内容进行文字整理，记录于活检记录单上（手 录或用计算机录入、打印）。有关的录音资料应保存至病理诊断报告书 发出后两周。

(八)细小标本取材时，可用伊红点染并用软薄纸妥善包裹。

(九)每例标本取材前、后，应用流水彻底清洗取材台面和所有相关器 物，严防检材被无关组织或其他异物污染，严防细小检材被流水冲失。

(十)巨检和取材必须按照本规范的要求进行操作（参见第3章第四 节）。对于由不同部位或不同病变区域切取的组织块，应在其病理号之 后再加编次级号（例如：－1，－2，－3，„„；A,，B，C，„„等）。

(十一)巨检／取材者和记录人员应相互配合、核查，确保所取组织块及 其编号标签准确地置于用于脱水的容器（脱水盒等）内。

(十二)标本巨检和取材后剩余的组织／器官应置入适当容器内，添加适 量4%中性甲醛并附有相关病理号和患者姓名等标志，然后按取材日期有 序地妥为保存。取材剩余的标本一般保存至病理诊断报告书发出后两 周。

(十三)病理医师在每批标本巨检和取材后，应与记录人员共同核对取材 内容，并在活检记录单／取材工作单上签名和签署日期。

(十四)取材后剩余的病理标本属于污染源，应遵照有关规定处理。

(十五)巨检／取材医师或记录人员与制片的技术人员认真办理交接手 续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

五、组织切片制备的基本要求

(一)组织制片过程中，应确保切片号与蜡块号一致。

(二)制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含需要脱钙、脱脂 等特殊处理的标本）。

(三)制片完成后，技术人员应检查制片质量，并加贴标有本病理科病理 号的标签。常规石蜡-HE染色片的优良率应≥95%，优秀率不<35％。不合格切片应立即重做。切片质量的基本标准参见第3章第一节的附 表。

(四)制片过程发生意外情况时，有关技术人员和技术室负责人应及时向 科主任报告，并积极设法予以补救。

(五)制片完成后，技术人员应将所制切片与其相应的活检记录单／取材 工作单等进行认真核对，确认无误后，将切片连同相关的活检申请单／ 活检记录单／取材工作单等一并移交给病理医师。双方经核对无误后，办理移交签字手续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(六)常规活检组织切片制备技术的基本要求参见第3章第一节。

六、组织切片的光学显微镜检查和病理诊断

(一)病理医师进行病理诊断时：

1．应认真阅读申请单提供的各项资料，必要时（尤其是疑难病例），应 向有关临床医师了解更多的临床信息。

2．应认真阅读活检记录单中关于标本巨检的描述；负责复检的病理医师 必要时亲自观察标本，补充或订正病变描述，指导或亲自补取组织块。

3．应了解患者既往病理学检查情况（包括切片的病理诊断和有关文字记 录）：①由本病理科既往受理者，必须及时调阅相关切片等病理学检查 资料；②非本病理科既往受理者，应积极协助患者从有关病理科商借相 关切片等病理学检查资料参阅。

4．应在活检记录单上签署“医嘱”，告知技术人员进行必要的深切片、连切片、特殊染色和其他相关技术检测。

5．应全面、细致地阅片，注意各种有意义的病变。

(二)进行初检的病理医师，应提出初诊意见，送交主检病理医师复查。

(三)主检病理医师对难以明确诊断的病例,可以：

1．提请科内上级医师会诊或进行科内读片讨论（会诊）；

2．与有关临床医师进行临床－病理会诊；

3．必要时约见患者（尤其门诊患者）或患者亲属（或其他患方相关人 员），了解病情，说明病理诊断的疑难情况和延期签发病理学诊断报告 书的原因等；

4．于签发病理学诊断报告书前进行科外病理会诊(“诊断报告前病理会 诊”)，应将各方面会诊意见的原件（或复印件）作为档案资料贴附于有 关患者的活检记录单中备查；

5．必要时，建议临床医师重复活检，或密切随查。

(四)主检病理医师根据常规切片的镜下观察，结合标本巨检、相关技术 检查结果、有关临床资料和参考病理会诊意见等，作出病理诊断或提出 病理诊断意见（意向），清楚地书写于活检记录单的有关栏目中、并亲 笔签名。各方会诊意见不

一、难以明确诊断时，主检医师可参考会诊意 见酌情诊断，或在病理学诊断报告书中将各方会诊意见列出，供临床医 师参考。

(五)对打印的病理学诊断报告书，主检病理医师应与活检记录单上的病 理诊断文字进行核对，并亲笔签名。［参见本节下文：“

八、常规活检 病理学诊断报告书及其签发”］

七、相关诊断技术的选用

病理医师可借助于组织化学染色（包括特殊染色）、免疫组织化学染 色、电子显微镜技术、分子生物学技术、流式细胞技术等相关诊断技术 检查提供的佐证，对某些病例（尤其是疑难病例）进行病理诊断。（参 见第4章）

八、病理学诊断报告书及其签发

(一)病理诊断表述的基本类型

Ⅰ类：检材部位／疾病名称／病变性质明确和基本明确的病理诊断。

Ⅱ类：不能完全肯定疾病名称/病变性质，或是对于拟诊的疾病名称／病 变性质有所保留的病理诊断意向，可在拟诊疾病／病变名称之前冠以诸 如病变可“符合为”、“考虑为”、“倾向为”、“提示为”、“可能 为”、“疑为”、“不能排除（除外）”之类的词语。

Ⅲ类：检材切片所显示的病变不足以诊断为某种疾病（即不能做出Ⅰ类 或

Ⅱ类病理诊断），只能进行病变的形态描述。

Ⅳ类：送检标本因过于细小、破碎、固定不当、自溶、严重受挤压（变 形）、被烧灼、干涸等，无法做出病理诊断。

(二)病理学诊断报告书的基本内容

1．患者的基本情况，包括病理号，姓名，性别，年龄，送检医院／科室（住院／门诊），住院号／门诊号，送检／收验日期等。

2．巨检病变和镜下病变要点描述（一般性病变和细小标本可酌情简述或 省略）。

3．与病理诊断相关技术的检查结果。

4．病理诊断的表述（参见上文“病理诊断表述的基本类型”）。

5．对于疑难病例或作出Ⅱ、Ⅲ类病理诊断的病例，可酌情就病理诊断及 其相关问题附加：①建议（例如进行其他有关检查、再做活检、科外病 理学会诊、密切随诊／随访等）；②注释／讨论。

6．经过本病理科或／和科外病理会诊的病例，可将各方病理会诊 意见列于该例患者的病理学诊断报告书中。

(三)病理学诊断报告书的书写要求

1．病理学诊断报告书的文字表述力求严谨、恰当、精练、条理和层 次清楚。

2．病理学诊断报告书应为一式二份，一份交予送检方，另一份随同患者 的病理学检查申请单／病理学检查记录单一并存档。主检病理医师必须 在每一份病理学诊断报告书上签名，不能以个人印章代替签名，不能由 他人代为签名；主检病理医师签名的字迹应能辨认。

3．手书的病理学诊断报告书必须二联复写，必须文字规范、字迹清楚，不得潦草、涂改。

4．手书和计算机打印的病理学诊断报告书中的关键性文字，例如

“癌”、“瘤”、“阳性”、“阴性”和数字等，要认真核对，不得有 误。

5．计算机打印的图文病理学诊断报告书提供的病变图象要准确，具有典 型（代表）性，放大倍数适当。

6．患者的基本情况项目必须严格按照送检临床医师填写的文字抄写或用 计算机输录于病理学诊断报告书中，并认真核查无误，签发报告书的病 理医师和病理科的其他人员都不得改动。7．病理医师不得签发虚假的病理学诊断报告书，不得向临床医师和患方 人员提供有病理医师签名的空白病理学诊断报告书。

(四)病理学诊断报告书的发送

1．病理科自接受送检标本至签发该例病理学诊断报告书的时间，一般情 况下为5个工作日以内；

2．由于某些原因（包括深切片、补取材制片、特殊染色、免疫组 织化学染色、脱钙、疑难病例会诊或传染性标本延长固定时间等）延迟 取材、制片，或是进行其他相关技术检测，不能如期签发病理学诊断报 告书时，应以口头或书面告知有关临床医师或患方，说明迟发病理学诊 断报告书的原因。

3．病理科应有专人发送病理学诊断报告书。住院患者的病理学诊断报告 书应发送至有关临床科室。病理科所在医院门诊患者和外院患者病理学 诊断报告书的发送方法，由各医院病理科自行制订。

4．病理学诊断报告书的经收人员（包括患方人员）必须履行签收手续。

5．病理科已发出的病理学诊断报告书被遗失时，一般不予补发；必要 时，经病理科主任同意可以抄件形式补发。

九、资料管理

普通活体组织病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五 节。

十、会 诊

病理学会诊是普通活体组织病理学诊断过程的重要环节，有关规定参见本章第 六节。

第二节 手术中快速活体组织病理学检查常规

一、概 述

(一)手术中快速活体组织病理学检查（快速活检）是临床医师在实施手术 过程中，就与手术方案有关的疾病诊断问题请求病理医师快速进行的急会诊，尤其需要临床医师与病理医师间的密切合作。

(二)快速活检要求病理医师在很短时间内，根据对切除标本的巨检和组织块快 速冷冻切片（或快速石蜡切片）的观察，向手术医师提供的参考性病理诊断意 见。与常规石蜡切片的病理诊断相比，快速活检会诊具有更多的局限性和误诊 的可能性。有的病例难以快速诊断，需要等待常规石蜡切片进一步明确诊断。因此，应向临床医师说明快速活检的：①局限性、②适用范围、③慎用范围和 ④不宜应用范围。

(三)有关临床医师应于手术前向患者和／或患者授权人说明快速活检的意义和 局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解。患者和／或患者授权人应在由 医院制定的《手术中快速活检患方知情同意书》签署意见和签名。

(四)主持手术的临床医师应在手术前一天向病理科递交快速活检申请单，填写 患者的病史，重要的影象学、实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题 等。尽可能不在手术进行过程中临时申请快速活检。

(五)手术中快速活检应由经过该项工作训练的主治医师以上的病理医师主持。尚不具备相应条件的病理科不应勉强开展手术中快速活检。

(六)负责快速活检的主检病理医师应了解患者的①临床情况，②手术所见，③ 既往有关的病理学检查情况。

二、适用范围

(一)需要确定病变性质（如肿瘤或非肿瘤／良性肿瘤或恶性肿瘤等），以

决定手术方案的标本。

(二)了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋 巴结转移等。

(三)确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。

(四)确认切除的组织，例如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。

三、慎用范围

涉及截肢和其他会严重致残的根治性手术切除的标本。需要此类手术治疗的患者，其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。

四、不宜应用范围

(一)疑为恶性淋巴瘤。

(二)过小的标本（检材长径≤0.2cm者）。(三)术前易于进行常规活检者。

(四)脂肪组织、骨组织和钙化组织。

(五)需要依据核分裂象计数判断良、恶性的软组织肿瘤。(六)主要根据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤。(七)已知具有传染性的标本（例如结核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申请单和标本的验收、编号和登记

手术中快速活体组织病理学检查申请单和标本的验收、编号和登记参照本章第一节中“一”至“三”项的有关规定。

六、标本的巨检、取材和记录

(一)病理科验收快速活检申请单和标本后，应参照本章第一节中“四”项的有关规定，立即进行标本的巨检、取材和记录。

(二)主持快速活检的病理医师应亲自参与标本的巨检和取材（或指导取 材）。

(三)通常选取具有代表性的病变组织1～2块，需要时，增加取材块数。

七、组织切片的制备(一)冷冻切片

1．完成冷冻HE染色切片制备的时间通常应为20～25分钟。

2．恒冷箱切片机制片：至少应于切片前1小时开机预冷，冷室温度一般为-15～-20℃。常规开展冷冻切片快速病理学诊断的病理科，恒冷箱切片机宜处于24小时恒温待机状态。

3．其他方法的冷冻切片制备参见第3章第一节。(二)快速石蜡切片

1．完成快速石蜡－HE染色切片的时间通常为30分钟。2．快速石蜡切片的制备方法参见第3章第一节。

(三)制备好的冷冻／快速石蜡-HE染色切片，加贴标有本病理科病理号的 标签后，立即交由主检病理医师进行诊断。

八、手术中快速活检会诊意见及其签发

(一)有条件的病理科宜由两位中／高级称职的病理医师共同签署快速活检的病理诊断意见。对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中快速活检，应由两位高级称职的病理医师共同签署会诊意见。主检病理医师签名的字迹应能辨认。

(二)快速活检诊断意见一般在收到送检标本后40分钟内发出；同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本，其发出报告的时间依次类推。对于疑难病变，可酌情延时报告。

(三)对于难以即时快速诊断的病变（例如病变不典型、交界性肿瘤病变或送检组织不足以明确诊断等），主检病理医师应向手术医师说明情况，恰如其分地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片进一步明确病理诊断。

(四)主检病理医师签署的快速活检病理诊断意见，宜以文字形式报告（具体发出方式由各医院自行决定）。快速活检病理诊断意见报告书发出前应认真核对无误。

九、冷冻切片后剩余组织的处理

(一)冷冻切片后剩余的冷冻组织（简称 “冻对”）和冷冻切片取材后剩余、未曾冷冻的组织（简称“冻剩”），均应保存，用以制备常规石蜡切片，以便与冷冻切片进行对照观察。

（二）“冻对”／“冻剩”组织的蜡块和切片需与同一病例手术后送检的切除标本编为同一病理号，并作出综合性诊断。

(三)当冷冻切片病理诊断意见与其“冻对”组织的常规石蜡-HE片的 病理诊断不一致时，该例的病理诊断一般应以石蜡-HE片诊断为准。

十、资料管理

手术中快速活体组织病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

第三节 细胞病理学检查常规

一、申请单和标本的验收、编号和登记

(一)病理科应参照本章第一节（常规活体组织病理学检查常规）中“一” 和“二”项的规定，进行细胞病理学检查(细胞学检查)申请单和标本的验收、编号和登记。

(二)用于细胞学检查的标本必须新鲜，取材后应尽快送至病理科(或细胞病理学室,下同)；病理科核验检材无误后，应尽快进行涂片和染色。

(三)病理科验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。

二、细胞涂片、组织印片和压片的基本要求

(一)细胞涂片、组织印片和压片（参见第3章第二节）。(二)肿物细针穿刺物涂片

1.应由掌握细针穿刺技术的注册医师或注册助理医师，按照细针穿刺技术操作常规，亲自对确有适应症且无禁忌症的患者采取穿刺物。2.适应症：通常为：

(1)浅表肿物：乳腺、甲状腺、涎腺、淋巴结、前列腺、皮下软组织和骨等。(2)胸腔肿物：肺、胸膜和纵隔等。

(3)腹腔肿物：肝、胰、肾、肾上腺、腹腔内、腹膜后和盆腔内等。(4)颅内肿物。

3．禁忌症：患者有难以控制的咳嗽、肺动脉高压症、进行性肺气肿、出血 性体质及“晕针史”等。

（三）对于核验无误的送检标本，应立即依序进行：①涂片、印片或 压片，②固定和③染色。

三、细胞病理学诊断报告书及其签发

(一)细胞病理学诊断可为临床医师诊断疾病（尤其是肿瘤）提供重要参考 依据。

(二)细胞病理学诊断报告书必须由具有主检资格的注册病理医师签署后发出。主检病理医师签名的字迹应能辨认。(三)细胞病理学诊断表述的基本类型

1.直接表述性诊断：适用于穿刺标本的细胞病理学诊断报告。根据形态学观察的实际情况，对于某种疾病／病变做出肯定性（Ⅰ类）、不同程度意向性（Ⅱ类）细胞学诊断，或是提供形态描述性（Ⅲ类）细胞学诊断，或是告知无法做出（Ⅳ类）细胞学诊断。[参考本章第一节的八(一)项：“病理学诊断表述的基本类型”]

2.间接分级性诊断：用于查找恶性肿瘤细胞的诊断。Ⅰ级：未见恶性细胞 Ⅱ级：查见核异质细胞 Ⅱa：轻度核异质细胞 Ⅱb：重度核异质细胞 Ⅲ级：查见可疑恶性细胞 Ⅳ级：查见高度可疑恶性细胞 Ⅴ级：查见恶性细胞

(四)细胞病理学诊断的局限性（假阴性或假阳性诊断）

1.假阴性：是指在恶性肿瘤患者的有关标本中未能查见恶性细胞。假阴性

率一般为10%左右。因此，细胞病理学检查的阴性结果并不能否定临床医师的恶性肿瘤诊断。

2.假阳性：是指在非恶性肿瘤患者的有关标本中查见了“恶性细胞”。假阳 性率通常≤1%。因此，细胞病理学诊断应密切结合患者的临床资料，对于临床上未考虑为恶性肿瘤患者的阳性细胞学诊断应持慎重态度。(五)细胞病理学诊断报告书的基本内容

1．患者的基本情况项目，包括病理号、姓名、性别、年龄、送检医院／科室（住院／门诊）、住院号／门诊号、送检／收验日期等。

2.细胞病理学诊断的表述（参见上项“细胞病理学诊断报告表述的基本类型”）。

3.必要时或条件允许时，可酌情就细胞病理学诊断及其相关问题附加：①

某些建议（例如进行其他有关检查、再做活检、病理科外病理学会诊、密切随查/随访等）；②注释／讨论。

4.经过本病理科或/和科外病理会诊的病例，可将各方的细胞病理学诊断意见附于该例的细胞病理学诊断报告书中。(六)细胞病理学诊断报告书的书写要求

1.参照本章第一节（“常规活体组织病理学检查常规”）中“八

（二）”项的有关规定。

2.计算机图文打印的细胞病理学诊断报告书提供的细胞学图象应具有典型（代表）性，放大倍数适当。

(七)细胞病理学诊断报告书的发送

1.病理科自接受送检标本至签发细胞病理学诊断报告书的时间，一般情况 下为1～2个工作日。

2.因某些原因（包括特殊染色、免疫组化染色、疑难会诊等）不能如期签发细胞病理学诊断报告书时，应以口头或书面告知有关临床医师或患方，说明迟发报告书的原因。

3．病理科应有专人发送细胞病理学诊断报告书。住院患者的细胞病理学诊 断报告书应发送至有关临床科室；本院门诊患者和外院患者的细胞病理学诊断报告书的发送方法由各医院病理科自行制定。

4．细胞病理学诊断报告书的经收人员（包括患方人员）必须履行病理科规 定的签收手续。

5．已由病理科发出的细胞病理学诊断报告书被遗失时，一般不予补发；必 要时，经病理科主任同意可以抄件形式补发。

四、资料管理

细胞病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

五、会 诊

细胞病理学会诊是细胞病理学诊断过程的重要环节，有关规定参见本章第六节。

第四节 尸体剖检（尸检）的诊断常规

一、尸检的受理

(一)必须遵照国家有关规定受理尸检。

(二)受理尸检范围：①普通病理尸检；②涉及医、患争议的尸检（由卫生 行政主管部门指定的尸检机构实施）。

(三)受理尸检部门：具备独立尸检能力的①医院病理科，②医学院校的病理学教研室，③经医政部门注册的病理诊断中心。

(四)主持尸检（主检）人员：应是接受过尸检训练、具有中级以上专业职称的病理学医师或病理学教师。必要时，邀请法医参与尸检。

(五)申请或委托尸检方：①有关医院，②卫生行政部门，③司法机关，④死者的亲属或代理人，或⑤被受理尸检方认可的其他申请或委托方。

(六)申请或委托尸检方必须向受理尸检方递交：①死者的死亡证明，②有申请或委托方当事人签名、负责人签名和加盖委托单位公章的尸检申请书或委托书，③逐项认真填写的尸检申请书（包括死者的临床资料要点和其他需要说明的情况）。

(七)死者亲属或代理人签署说明尸检有关事项的《死者亲属或代理人委托 尸检知情同意书》（由受理尸检方制定），确认以下事项： 1．同意有关受理尸检机构对于死者进行尸检。

2．授权主持尸检人员根据实际需要确定尸检的术式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式。

3．主持尸检人员负责遗体尸检后的体表切口缝合，不参与尸检后遗体的其 他安置事项。

4．明确新生儿和围生期胎儿尸检后的尸体处理方式。

5．同意对尸检过程进行必要的摄影、录像，并确认是否同意教学示教。6．尸检病理学诊断报告书可提供死者所患的主要疾病和死因；难以作出明 确结论时，可仅提交病变描述性尸检报告。7．尸检病理学诊断报告书发送给委托尸检方。(八)下列情况的尸检可不受理：

1．委托尸检手续不完备者（包括未按规定交纳尸检费用者）；

2．拒签《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》者（包括对于尸检的术 式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式等持有异义从而影响尸检实施和尸检结论形成者）；

3．委托尸检方与受理尸检方就涉及尸检的某些重要问题未能达成协议者； 4.死者死亡超过48小时未经冷冻、或冷冻超过7日者；

5．疑因或确因烈性传染病死亡的病例，尸检方不具备相应尸检设施条件者； 6．因其他情况不能受理者。

二、尸检前的准备工作(一)尸检室环境的准备。

(二)尸检基本器材和工作服的准备。

(三)安排实施尸检的专业人员和技术人员。(四)将拟行剖验的尸体移送至尸检室。

(五)主持尸检人员确认尸检手续完备（死亡证明、尸检申请书或委托书、死者的临床资料要点等），并请死者亲属或委托代理人确认尸体。

(六)主持尸检人员认真阅读、熟悉有关死者的临床资料要点（必要时阅读死者的生前病历），了解申请或委托方对于尸检的要求和尸检时需要注意的问题。(七)进行尸检编号并登录于尸检登记薄上。

(八)尸检过程现场文字（或语音）记录、摄影或录象工作的准备。

三、尸检的卫生管理

(一)制订尸检室卫生管理制度并认真实施。

(二)尸检人员和尸检室内其他人员必须认真做好个人和工作环境的卫生防护。(三)疑为或确诊为烈性传染病死者的尸检，必须遵照传染病尸检的有关规 定进行操作。

(四)尸检结束后卫生处置

1．认真清洗尸检台和尸检室，并进行环境消毒。2．认真清洗尸检工作服和器械等，并进行消毒。3．按照有关规定认真处理尸检污物。4．尸检人员在专用卫生间内淋浴。

5．进行上述各项卫生处置过程中必须严防污染有关人员和尸检室内、外环境。

四、尸检的技术操作

尸检的技术操作规范参见第3章的第三节。

五、尸检组织的切片制备

尸检组织切片制备的技术操作规范参见第3章第一节。

六、尸检组织的病理学相关技术检查

尸检组织病理学相关技术检查的规范参见第4章。

七、尸检组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断

(一)光镜检查切片，客观地描述和记录各系统、器官的病变要点；

(二)在综合镜检和巨检（肉眼检查）所见的基础上，结合死者生前的临床资料等形成尸检的病理诊断。

(三)有关镜检诊断的其他事项参见本章第一节的一

（六）项（“组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断”）。

八、尸检档案资料(一)基本内容

1.一般资料：包括死者的尸检号、姓名、性别、年龄、籍贯、民族、出

生地、住址、死亡时间、尸检时间和地点、相关医院（临床科室、住院号／门诊号／急症号）、委托或申请尸检单位及主持尸检人员和助手等。2.尸检申请书或委托书。3.有关的临床资料。

4.由死者亲属或代理人签署的《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》。5.尸检所见（附有必要的图像资料）。包括：(1)对有关尸体及其死亡征象的确认。(2)体表检查所见。

(3)体腔（胸腔、心包腔、腹腔）检查所见。

(4)脏器检查所见：依序逐个描述各脏器的肉眼检查和光学显微镜检查所见。(5)特殊检查结果。例如毒物、病原生物学等检查（附有关检查报告）。

6.病理学诊断和尸检病理学诊断报告书副本（参见下项“尸检病理学诊断报告书及其签发”）。7.死亡原因。8.小结。

9．讨论。包括：

(1)主要疾病及其诊断依据、发生和发展特点。

(2)主要疾病／病变之间、主要疾病与继发／伴发疾病之间的相互关系。(3)从临床与病理相结合的角度，参考有关文献，进行讨论。

10.其他资料。包括照片及其底片、幻灯片、图表、临床病理讨论记录、参考文献和电子信息资料等。

(二)受理尸检单位，应积极实施尸检档案资料的计算机管理。

九、尸检病理学诊断报告书及其签发

(一)尸检病理学诊断报告书(简称尸检报告书或尸检报告)是关于尸检的正式病理学报告。

(二)尸检病理学诊断报告书的基本内容：①主要疾病（与死亡直接相关的疾病）；②继发疾病（与主要疾病密切相关的疾病）；③伴发疾病（与主要疾病无密切关系的疾病）。可酌情进行死因分析、小结和讨论。疾病诊断力求使用国际医学规范术语，并按各疾病的致死重要性和因果关系排序。

(三)尸检病理学诊断报告书必须由主检人员签名后发出。主检人员签名的字迹应能辨认。

(四)尸检病理学诊断报告书应一式两份（正本和副本），两份报告书具有

同等效力。报告书的正本随同其他尸检资料一并归档，报告书的副本发给委托尸检方。手书的尸检病理学诊断报告书应二联复写，必须文字规范、字迹清楚，不得涂改。

(五)尸检病理学诊断报告书通常在尸检后45个工作日内发出。由于病变复 杂或其他原因不能按时发出尸检病理学诊断报告书时，可酌情延迟发出并应向委托尸检方说明迟发原因。

十、尸检资料的管理

尸检资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

第五节 病理学检查资料的管理

一、概 述

(一)常规活检、手术中快速活检、细胞病理学检查和尸检等的文字资料（含电子信息资料）、非文字资料（组织的石蜡包埋块、切片等）以及其他相关资料均为有价值的医学资料，皆由受理病理学检查的病理科按照本规范规定的期限妥为保存。病理科必须设立病理档案资料室和制订病理档案资料管理制度（包括病理检查资料的归档、借用和归还手续等），并有专人管理。应积极实行病理学检查资料的计算机管理。

(二)各种病理学检查的文字资料应装订成册保存。

(三)据以做出常规活检、快速活检、尸检病理学诊断的原始组织学切片和

查见肿瘤细胞或可疑肿瘤细胞的玻片必须妥善保存。未查见恶性肿瘤细胞的玻片，于诊断报告书发出后保存2周。

二、患者查询病理学检查资料的期限(一)门诊患者为送检后15年。(二)住院患者为送检后30年。

三、活检、尸检大体标本的保存期限(一)活检：自签发病理学诊断报告书之日起保存2～4周，具体保存期限由 各医院自行规定。(二)尸检

1.普通病理尸检：自签发病理学诊断报告书之日起保存3个月。2.涉及医、患争议的尸检：按照尸检前有关各方签署的协议办理。

四、病理学检查资料的借用

(一)医院必须制订关于借用病理学检查资料的办法并严格实施。(二)关于患方借用病理组织学切片，应注意：

1．患方人员申请借用有关患者的活检切片、尸检切片时，应按照医院制定 的有关规定办理手续。

2．申请借用切片的患方人员必须：①出示本人身份证等有效证件并保留其复印件；②填写借片申请单并签名；③支付规定的借片押金（待归还切片时退还）。

3． 病理科据以作出诊断的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相关 病例的复制切片。复制切片借出（或售出）前，应确认该切片的病变与原切片相同或基本相同。

4． 患方借出的切片应妥善保存，必须在规定的期限内归还。患方借出的切 片若有破损、丢失等，应按规定支付赔偿金，并承担相应责任。

5．病理科因故不能向患方出借或出售有关切片时，由双方协商解决病理学会诊问题。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片；有条件的单位可酌情进行远程病理会诊。

(三)关于患方借用细胞病理学玻片

1．一个病例的同一次检查有多张查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑 阳性片”时，可允许患方借用其中的一张。借用手续参见上项(二)。

2．一个病例仅有一张为查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑阳性片”时，该阳性片或可疑阳性片原则上不予外借。其会诊问题由双方协商解决。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片。(四)关于借用检材组织的石蜡包埋块

1.活检和尸检检材组织的石蜡包埋块（简称蜡块）是无法复制的病理学检 查资料，属于诊断病理学的重要基础档案，原则上不外借。必要时，可由病理科向患方提供未经染色的切片（通称白片）。

3． 患方外借病理切片会诊时，受理会诊的病理科若确实需要有关病例病理 检材的蜡块，可由有关病理科双方协商解决。

第六节 病理学会诊

一、具有一定规模的病理科应定期举行科内病理会诊或读片讨论会。

二、积极推动建立地域性病理会诊中心。

三、加强临床－病理会诊。

四、应由具有高级职称的病理医师接受病理科内、外的病理学会诊。

五、接受外院的病理会诊时，由会诊的病理医师签发《病理学会诊咨询意见书》，并在该《意见书》上写明：“病理医师个人会诊咨询意见，仅供原病理诊断的病理医师参考”。由作出原病理诊断的病理医师自行决定是否采纳病理会诊咨询意见和采纳的程度。做出原诊断的病理科应将《病理会诊咨询意见书》的原件或其复印件贴附于有关患者的病理检查记录单上，一并归档。

六、加做相关技术检测方能作出诊断的会诊病例，会诊医师应在《意见书》中予以说明，并向患方进行适当解释。

七、对病理诊断时间较为长久病例的会诊，应考虑到做出原诊断时期的诊断病理学理论、技术水平、相应病变／疾病的定性诊断标准和原诊断病理科当时的客观条件。

八、有条件的病理科可开展远程病理会诊。

第七节 病理科的基本设施

一、病理科基本设施的指导原则

(一)保证病理科完成基本工作任务。(二)保护病理工作人员免受污染。(三)保护环境免受污染。

二、病理科的基本工作空间

(一)病理科的常规工作需要在下列的各自独立的房间内进行：

1．收发室（检材的接收、登记，病理诊断报告书的发放，病理资料查询等）2．巨检和取材室（检材的肉眼检查和切取组织块，贮存取材后的剩余检材）3．常规切片前的预处理室（组织块的脱水、透明和浸蜡）4．制片室（石蜡切片／冷冻切片／细胞学涂片的制做和染色）5．病理组织学诊断室

6．细胞病理学诊断（酌情附设组织穿刺室）7．病理会诊室 8．病理档案资料室

9．大体标本制作室和陈列室

10．尸检室及其配套空间（三级医院建立，包括准备室、尸检室、肉眼检查和取材室、更衣／淋浴室、标本储藏室等）11．储藏室 12．淋浴室 13．办公室

(二)较高技术层次的病理科还应设置： 1．特殊染色和免疫组织化学染色实验室 2．细胞遗传和分子病理学实验室

3．其他特殊检测实验室（例如超薄切片制备、电镜检测、细胞培养、流式细胞术和其他新技术实验室）

4．图书／电子信息／学术活动室 5．进修病理医师教室。

三、病理科常规活检和快速活检工作的基本设施(一)收发室 1． 办公设施

2． 紫外线消毒柜（用于活检申请单等消毒）3． 合于个人和环境防污染要求的上、下水系统 4． 其他相关设备

(二)病理标本巨检和取材室

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备 3．室内高效通风设施

4．封闭式高效能通风柜厨(用于巨检和取材，应便于清洗、消毒，并安装足够照明和紫外线消毒设备)5．合于个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池）

6．流水冲洗装置

7．冷水和热水供给系统

8．自动录音设备（酌情安装，用于记录医师巨检标本时的语言描述）9．标本储存柜（安装排风设备）10．隔离服装（消毒后使用）11．其他相关设备。

(三)常规切片的预处理室和常规/快速制片室

1．排放有毒物质的室内高效通风设施（用于组织块和石蜡切片的 人工脱水流程）

2．符合个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池）

3．室内紫外线消毒设备

4．封闭式高效能通风柜厨（用于人工脱水流程）5．实验台

6．脱水设备：①人工脱水器具或/和②半自动或全封闭自动脱水机 7．组织块石蜡包埋机 8．石蜡切片机

*9．恒温冷冻切片机

*10．石蜡快速切片机 ［* 9和10：两项皆配备或配备一项］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀机 ［# 11和12：两项皆配备或配备一项］ 13．冰箱 14．恒温箱 15．烤箱

16．有关试剂和试剂柜 17．天平

18．染色用器具

19．普通光学显微镜（用于染色质量控制）20．其他相关设备

(四)特殊染色和免疫组织化学染色实验室

1．用于染色的实验室环境设施和染色的常规设备［参见上文：(三)常规切片的预处理室和制片室］

2．微波炉或其他抗原修复设备 3．有关试剂和试剂柜

4．自动免疫组化染色仪（具有一定规模的病理科，酌情）5．其他相关设备

(五)病理组织学诊断室和病理会诊室

1．双筒显微镜（每名病理医师配备一台）

*2．双头和／或多头显微镜（用于共览会诊和培训示教）

*3．计算机和打印机（酌情连接局域网，用于病理学检查资料的储存和调阅）*4．显微摄影设备，计算机图像分析、电子图像存储和放映设备 [* 2～4：具有一定规模的病理科配置] 5．远程会诊系统（酌情）6．其他相关设备(六)病理档案资料室

1．用于储存切片、蜡块和文字资料的柜具

2．计算机和打印机（酌情连接局域网，用于病理学检查资料的储存和调阅）3．秘书办公设施（具有一定规模的病理科）4．其他相关设备

(七)必要的专业参考书和基本的专业期刊（具有一定规模的病理科应设立 图书资料室）

(八)病理大体标本制作室和陈列室 1．制作病理大体标本的工具

2．用于陈列病理大体标本的展览柜（配备照明装置）3．其他相关设备

(九)办公室：必要的办公设备(十)储藏室：必要设施(十一)淋浴室：必备设施

四、细胞病理学检查工作的基本设施(一)肿物穿刺取材室：

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备

3．用于实施穿刺术的检查床、椅 4．穿刺用器械和器械柜

5．穿刺用、急救用药物和药品柜 6．其他相关设备

(二)细胞学涂片制片室：

1．用于染色的实验室环境设施和常规设备［参见本节的三(三)项：“常规切片的预处理室和常规／快速制片室”］)2．可调速离心机

3．自动细胞病理学检查系统（具有一定规模的病理科，酌情）4．其他相关设备

(三)细胞病理学诊断室：参见本节的三(五)项（病理组织学诊断室和病理会诊室）。

(四)独立设置（不隶属于病理科）的细胞病理学科室：需要其他必要空间的基本设备（参见本节的 “

三、病理科常规和快速活检工作的基本设备”）。

五、尸检工作的基本设施(一)尸检准备室

1． 尸检专用器械和柜具 2． 参与尸检人员用隔离用衣物和消毒器物 3． 办公设施 4． 消毒设施

5． 其他相关设备(二)普通尸检室

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备 3．室内高效通风设施

4．设计合理、适用的尸检台［具有合于个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池），便于清洗、消毒。］ 5．适宜的照明装置 6．冷水和热水供给系统

7．阶梯式看台（示教用）8．其他相关设备

(三)传染病用尸检室：严格按照关于传染病管理法规的要求建设。(四)更衣／淋浴室：必备设施

(五)病理标本巨检和取材室［参见本节的三(二)项：“病理标本巨检和取材室”］

(六)常规切片室：隶属于病理科的尸检室可不另设（参见本节的三(三)项：“常规切片的预处理室和常规／快速制片室”）(七)标本储藏室：必要设施

六、病理学相关技术实验室的基本设施

应用特殊染色和组织化学、免疫组织化学、塑料包埋组织切片制备、电子显微镜超微病理诊断检材制备、图像分析、流式细胞分析（FCM）、聚合酶链反应（PCR）、细胞和分子细胞遗传学、病理学摄影技术和其他新开发、引进的病理学相关技术的病理科，应个根据有关技术要求，建立具有必备基本设施的实验室。

《临床技术操作规范•病理学分册》/ 第三章 病理学基本技术规范

第一节 病理组织学诊断检材的制备技术

一、组织的固定

㈠凡需要进行病理组织学检查的标本（器官或组织），于离体（活体或尸体）后，应尽快置放（浸泡）于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5~10倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，应适当大一些。临床科室切取的标本置放于容器中固定后，应尽快送交病理科继续固定。未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片。

㈡常规固定液为4%中性甲醛（10%中性福尔马林），应预先多量配制贮存，以备随时使用。小标本的固定时间为4~6小时，大标本为18~24小时或更久。㈢根据病理学特殊检查（特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等）的需要，应选用其他适宜的固定液进行固定［参见后述的“㈦固定液的常用种类和制备”］。㈣器官、组织固定的基本方法 ［另参见本章第四节（病理标本的肉眼检查和组织学切片取材技术）］

1．食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官：依规范方法剪开后，按其自然状态平铺于硬纸板上（重点暴露黏膜面或内表面的病变处），并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或内表面朝向容器的液面，并覆盖薄层脱脂棉）。

2．肝、脾：由器官背面，沿其长轴每间隔1.5~2.0cm纵向平行剖开，切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中，容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。

3．肺叶：放入固定液中的肺叶漂浮于液面，需在肺表面覆盖薄层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。

4．肾：沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面（深达于肾盏），再行固定。5．淋巴结：先用4%中性甲醛固定1小时后，再沿其长轴切成数片（厚2 ~3mm），继续固定。

6．骨组织：先锯成小片（若是长骨应作横向锯片），在4%中性甲醛中固定24小时后，再进行脱钙。

7．微小组织或液体沉淀物：先用拭纸或滤纸妥为包裹（需用大头针扎牢），然后放入专用小盒内进行中性4%甲醛固定，以防检材遗失。

8．凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号（病理号）。㈤多数固定液对人体有害，需要防护，必须在封闭的通风条件下进行操作。㈥组织块的切取和固定：①由较大标本切取用于制作切片的组织块（取材）时，应与标本的断面平行，组织块厚度一般为0.3 cm(不应>0.5cm)，面积一般在1~1.5×1~1.5以内。②切取组织块的形状，在充分包括肉眼病变的前提下尽量规则些（例如方形、矩形、三角形等）；由一个标本切取的多块组织的形状有所不同，便于蜡块与其相应切片的核对。③固定组织块的固定液量，一般应为组织块总体积的5~10倍以上。④室内常温（25℃左右）下的固定时间为3~24小时；低温（4℃）下的固定时间应延长。⑤固定组织块的容器要大一些。⑥组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。㈦常用固定液

1．4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液

甲醛（40%）100 ml 无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4.0g 蒸馏水 900ml 2．乙醇－甲醛（酒精－福尔马林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml 95%乙醇 900ml ［说明］一般组织块经乙醇－甲醛固定1～2小时后，即可移入95%乙醇内脱水。

3．Carnoy固定液 无水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［说明］组织化学染色的常用固定液，组织经Carnoy液固定1～2小时后，即可移入无水乙醇中脱水。4．Zenker固定液 升汞 5.0g 重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 蒸馏水（加至）100ml ［说明］配制本液时，先将升汞溶于蒸馏水中、加温至40～50℃溶解后，再加入重铬酸钾，最后加入硫酸钠，贮存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。组织块需固定12~24小时。切片染色前，需进行脱汞沉淀处理。5．Bouin固定液

饱和苦味酸水溶液（约1.22%）75ml 甲醛（40%）25ml 冰醋酸 5ml ［说明］本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定12～24小时即可（小块组织只需固定数小时）。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色，可用水洗涤12小时后进入乙醇脱水（兼脱色）。不必将组织中的黄色除净（残存于组织中的苦味酸无碍染色）

6．过碘酸－赖氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液：赖氨酸 1.827g 蒸馏水 50ml 0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)50ml B液：8%多聚甲醛水溶液 100ml ［说明］本液临用时配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入过碘酸钠，使液体终浓度为2%。组织块在4℃下固定36~54小时。本液对细胞结构和抗原性保存较好。

7．B5（醋酸钠－升汞－甲醛）固定液 无水醋酸钠 1.25g 升汞 6.0g 蒸馏水 90ml ［说明］将以上物质混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛称为B4固定液（蒸馏水为100 ml）。

8．丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定10分钟。

二、常规石蜡包埋组织切片（常规切片）的制备

㈠组织块依序进行：①水洗，②脱水，③透明，④浸蜡，⑤包埋和⑥切片。㈡组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为 易燃、有毒物，必须专人管理，2m以内不得有明火，局部环境应有良好的通风和消防设施。

㈢常规切片的手工操作（步骤次序和各步骤的持续时间）1．水洗：用流水冲洗已经固定的组织块30min。2．脱水（常温下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min（2）80%乙醇 60~120min（3）95%乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ 60~120min（5）无水乙醇Ⅰ 60~120min（6）无水乙醇Ⅱ 60~120min（7）无水乙醇Ⅲ 60min ［注意事项］①未经充分固定的组织不得进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为组织块总体积的5～10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换（500ml乙醇可用于500个组织块脱水；加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时，提示需要更换）。⑤较大组织块的脱水时间长于较小者，应将两者分开进行脱水。⑥组织置于无水乙醇内的时间不宜过长（以免硬化）。⑦丙酮脱水性能强，会使组织块过缩、硬脆，不宜用以替代无水乙醇。3．透明

（1）二甲苯Ⅰ 20min（2）二甲苯Ⅱ 20min（3）二甲苯Ⅲ 20min ［注意事项］①二甲苯的容积应为组织块总体积的5～10倍以上。②组织块在二甲苯中透明的时间不宜过长（以防组织硬、脆），并依不同种类组织及其大小而异；组织呈现棕黄或暗红色透明即可。③二甲苯应及时过滤、更换。④组织经二甲苯适度处理后不显透明时，常提示该组织的固定或脱水不充分，应查找原因并妥善处理。4．浸蜡

（1）石蜡Ⅰ（45~50℃）60min（2）石蜡Ⅱ（56~58℃）60min（3）石蜡Ⅲ（56~58℃）60min ［注意事项］①熔化石蜡必须有专人负责，必须在熔蜡箱内或水浴中（70 ℃）进行，不得用明火加温。②熔蜡的容积应为组织块总体积的5～10倍以上。③组织块经二甲苯适度透明后方可转入浸蜡过程，应尽可能减少将透明后组织块表面的二甲苯带入熔蜡中。④浸蜡时间适宜，过短时浸蜡不充分（组织过软），过长时组织硬脆。⑤熔蜡应及时过滤、更换。5．包埋

（1）先将熔化的石蜡倾入包埋模具中，再用加热的弯曲钝头镊子轻轻夹取已经过浸蜡的组织块，使组织块的最大面或被特别指定处的组织面向下埋入熔蜡中；应将组织块平正地置放于包埋模具底面的中央处；包埋于同一蜡块内的多块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮肤和黏膜组织必须垂直包埋（立埋）。

（2）将与组织块相关的病理号小条置入包埋模具内熔蜡的一侧。

（3）待包埋模具内的熔蜡表面凝固后，即将模具移入冷水中加速凝固。

（4）从包埋模具中取出凝固的包埋蜡块（简称蜡快），用刀片去除组织块周围的过多石蜡（组织块周围保留1~2mm石蜡为宜）。将包埋蜡块修整成为规则的正方形或长方形。

（5）将病理号小条牢固地烙贴在蜡块一侧（编号应清晰可见）。（6）把修整好的蜡块烙贴在支持器上，以备切片。（7）使用包埋机的方法按有关厂商的说明书操作。（8）注意事项

①应将组织块严格分件包埋。包埋时一定要首先认真核对组织块的病理号（包括亚号）、块数和取材医师对包埋面的要求，准确地包入相应的病理号小条。发生包埋差错时，必须立即与取材医师和病理科当班负责人取得联系，及时处置。

②必须严防各种异物污染，勿将无关组织（包括缝线、纸屑或其他异物（尤其是硬质异物）埋入蜡块内。

③包埋过程要操作迅速，以免组织块尚未埋妥前熔蜡凝固。

④包埋用的熔蜡应纯净，熔点适宜。浸蜡Ⅰ用软蜡（熔点为45~50℃），浸蜡Ⅱ、Ⅲ和包埋用蜡均用硬蜡（熔点为56~58℃）。⑤包埋用熔蜡使用前应将先静置沉淀、过滤。

⑥熔蜡时不得使用明火，以防燃烧。包埋用熔蜡的温度应<65℃；包埋用的镊子不可加温过高，以免烫伤组织。6．切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必须锋利。使用切片刀时，必须精心磨备（在低倍显微镜下确认刀刃无缺口）；使用一次性切片刀片时，应及时更新。（2）载玻片必须洁净、光亮。

（3）将切片刀或刀片安装在持刀座上（以15°为宜）。

（4）将蜡块固定于持支持器上，并调整蜡块和刀刃至适当位置（刀刃与蜡块表面呈5°夹角）。

（5）细心移动刀座或蜡块支持器，使蜡块与刀刃接触，旋紧刀座和蜡块支持器。

（6）修块（粗切）：用右手匀速旋转切片机轮，修切蜡块表面至包埋其中的组织块完整地全部切到。修块粗切片的厚度为15～20μm。［注意：对于医嘱再次深切片（特别是在原切片中发现了有意义病变而进行的深切片），应尽量少修块，以尽量好地获得有关病变的连续性。］

（7）调节切片厚度调节器（一般为4~6μm），进行切片，切出的蜡片应连续成带，完整无缺，厚度适宜（3～5μm）、均匀，无刀痕、颤痕、皱折、开裂、缺损、松解等。

（8）以专用小镊子轻轻夹取完整、无刀痕、厚薄均匀的蜡片，放入伸展器的温水中（45℃左右），使切片全面展开。［注意：必须水温适宜、洁净（尤其是水面）；每切完一个蜡块后，必须认真清理水面，不得遗留其它病例的组织碎片，以免污染。］

（9）将蜡片附贴于涂有蛋白甘油或经3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)处理过的载玻片上（HE染色时酌情使用，可省略，必要时）。蜡片应置放在载玻片右（或左）2/3处的中央，留出载玻片左（或右）1/3的位置用于贴附标签。蜡片与载玻片之间无气泡。

（10）必须立即在置放了蜡片的载玻片一端（待贴标签的一端），用优质记号笔或刻号笔准确、清楚标记其相应的病理号（包括亚号）。［注意：必须确保载玻片上的病理号与相关组织石蜡包埋块的病理号完全一致，不得错写或漏写病理号。］

（11）将置放了蜡片的载玻片呈45℃角斜置片刻；待载玻片上的水分流下 后，将其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可进行染色。（12）注意事项 ①组织块固定、脱水、透明和浸蜡的质量直接影响切片制备。切片过程中遇到的困难首先应注意从切片前的上述各环节中寻找原因。

②切片机的质量是制备优质切片的重要前提。要使用质量好的切片机，规范地切片，精心维护切片机。

③经由内窥镜、穿刺等获取的细小组织，应间断性连续切片多面（一般至少制备6张蜡片，必要时制备更多张）。需作特殊染色、免疫组化染色等的病例，可预制蜡片备用。

④切片人员应细心操作，防范被切片刀具割伤。

㈣常规切片的自动组织处理机操作（步骤次序和各步骤的持续时间，总计需要14小时）

1．乙醇－甲醛（AF）固定液 2×60min 2．95%乙醇Ⅰ 2×60min 3．95%乙醇Ⅱ 2×60min 4．无水乙醇Ⅰ 60min 5．无水乙醇Ⅱ 60min 6．二甲苯Ⅰ 30min 7．二甲苯Ⅱ 30min 8．石蜡Ⅰ 30min 9．石蜡Ⅱ 60min 10．石蜡Ⅲ 90min 11．包埋

（1）手工常规包埋：参见上述的“㈠手工操作”项。（2）用组织包埋机时，按有关厂商说明书的规定操作。13．切片：参见上述的“㈠手工操作”项。14．注意事项

（1）必须按有关说明书的规定，使用和维护自动组织处理机、包埋机、磨刀机、封盖玻片机等仪器等。

（2）要严防因停电、机械故障等造成的组织块损坏。一旦发生此类事故，必须及时向科主任报告，尽快采取应急措施妥善处置。

（3）使用自动组织处理机时：①合理设定的运行时间（充分利用夜间）。②固定、脱水的环境温度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蜡的容积，要大于组织块总体积的5～10倍以上，并应经常过滤，保持清洁；应经常检查试剂的浓度，及时更新。④对于多量组织块，可按其大小分批进行处理；小块组织可适当缩短处理时间。

三、快速石蜡包埋组织切片的制备 ㈠煮沸固定切片法

1．固定：切取大小适宜（厚度<2mm）的组织块，尽快置入装有5~8ml 10%中性4％甲醛的试管中煮沸1min，然后已入冷水中。2．脱水

（1）将已经煮沸固定的组织块取出，用刀片将其厚度修切至<1.5mm，随 即置入盛有5~8 ml丙酮的试管中，煮沸2 min，然后将丙酮倾弃。

（2）再向该试管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重复3~4次。3．浸蜡：将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出，用吸水纸去除其表面液体，随即置入75~80℃熔化的石蜡中，待组织块下沉、不再出现气泡时（约需30s），即可包埋。4．包埋、切片和染色。

（1）用热镊子将预制的蜡块表面熔化，埋入已经浸蜡的组织块。

（2）待埋入组织块的蜡块表面凝固后，即用载玻片轻压蜡块表面片刻，使 蜡块表面平整。

（3）将蜡块置入冰水中，使其变硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。（5）将载玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。（6）迅速进行HE染色。5．注意事项

（1）为了尽量缩短制片时间，必须预先作好有关准备工作，备齐取材用具、试管、固定液、丙酮、酒精灯、火柴（或其他引火器）、包埋用蜡块、载玻片和染色试剂等，放在固定部位待用。

（2）全部制片过程一般在20~25min内完成。

（3）制片后剩余组织块应作常规石蜡包埋切片染色，进一步诊断。（4）含脂肪较多的组织，须经多次丙酮处理。

（5）用于组织固定、脱水、透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、更换。（6）丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物，进行上述各项流程时，2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱，不得使用干烤箱操作。㈡超声波快速处理仪石蜡切片法（参照有关厂商的说明书操作）。

四、冷冻组织切片的制备

㈠应用恒冷箱切片机制备切片：是目前最适用方法。恒冷箱切片机种类较多，应严格按有关厂商的说明书操作。用于切片的标本必须未曾固定。㈡应用开放式冷冻切片机制备切片 1．二氧化碳制冷切片

（1）将组织块放在冷冻台上，滴加OCT或羟甲基纤维素液于组织块周围（将组织块包埋），使固定在切片机上的切片刀接近组织块表面。

（2）间断开放液态二氧化碳桶的开关，喷冻组织块和切片刀，使组织块冻结和切片刀制冷。

（3）迅速移动切片刀进行切片：先将组织块修平，然后调节厚度至8~12μm处进行切片。

（4）用毛笔将切片展开，贴附于载玻片上，稍干后，置于冷冻切片固定液中固定1min，随即进行HE染色。也可用毛笔将切片托入水中，再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

（5）组织块也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷冻切片。2．半导体致冷切片

（1）切片刀与持刀器之间要间隔一层云母片或硬纸片。将冷刀致冷器粘在刀面上。

（2）将组织冷冻台安装在半导体切片机上。

（3）将冷冻台和切片刀致冷器上的导线连接在控制台直流电源上（注意：正负电极不可接反）。

（4）连接致冷器的冷却水管并开始放水，然后开启电源；冷却水管中的水流量不宜过大，在使用过程不得断水。

（5）调整冷冻温度调节器，至切片刀和冷冻台呈现霜冻。（6）将新鲜组织块或已固定的组织放在冷冻台中央，滴加水或OCT，或用水调成糊状的甲基纤维素于组织块周围（将组织块包埋）。（7）待组织块冷冻适当后，进行切片。

（8）对于未经固定的新鲜组织，用毛笔将制作满意的切片展平，立即裱贴于盖玻片或载玻片上，待冷冻的切片刚要融化时，立即将其置于冷冻切片固定液中固定1min。对于已经固定的组织块，可用毛笔将制作满意的切片托入水中，再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

（9）切片完毕后，先关闭电源，再关闭冷却水，待冰霜融化后擦干机器，加罩。

3．甲醇致冷切片（按有关厂商的仪器说明书操作）。4．氯乙烷致冷切片

（1）将新鲜的或已经固定的组织块置于支持器中央，加少许水或OCT。

（2）连续喷射氯乙烷于组织块上，待组织块冻结后，改为间歇喷射，使冻结适度，立即切片。使用氯乙烷时应注意防火、防爆。

（3）进行组织切片的裱贴、固定和染色（与上述方法相同）。㈢注意事项

1．制作冷冻切片所需的试剂和设备等应处于随时可供使用状态。

2．切取的组织块大小适宜（厚度<2mm），并尽快置于冷冻组织切片机上制备切片。

3．调节冷冻程度，试切合适时便迅速切片。冷冻不足无法切片，冷冻过度 切片易碎。

4．冷冻切片固定液（1）乙醚-乙醇液

无水乙醚 1份 95%乙醇 1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3～5滴

五、脱钙方法

骨和其他钙化组织，通常需要脱去钙盐后进行切片。骨组织脱钙前需先行固定。

㈠常规脱钙法：

1． 将骨组织锯成薄片（约1×1×0.3cm）。2． 在AF中或4％中性甲醛中固定6～12h。

3． 将骨片置于5%硝酸（急需时可置于37℃温箱）中脱钙，至用针轻刺可 入时为止，约需12~24h（小块骨组织脱钙仅需2~3h），其间可更新脱钙液2～3次。

4． 流水冲洗1~2h。

5． 移入5%甲明矾液，2~4h。6． 流水冲洗2~3h。7． 按常规脱水。8．石蜡包埋。㈡电解脱钙法：

将骨片置于装有8%硝酸和10%甲酸混合液的电泳槽（有盖的方形玻璃标本 缸或烧杯）内的阳极处，6V直流电源下持续电解30min~3h，至用针轻刺可入时为止。

㈢骨髓组织脱钙：可浸泡于苦味酸乙醇饱和液（占85%）、甲醛（占10%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同时进行固定和脱钙）。㈣注意事项

1．骨片等脱钙组织的厚度适宜。

2．脱钙组织与脱钙液的体积比>1:30。

3．脱钙过程中应不时摇动，多次更换脱钙液。4．脱钙时间不可过长。

5．微波处理可加速脱钙过程。

6．脱钙后的组织必须用流水充分冲洗。

7．用于包埋的石蜡硬度适中（不要过软或过硬）。

六、苏木素－伊红（HE）染色

HE染色是应用最广泛的组织病理学常规染色技术。㈠染色程序

1．石蜡切片HE染色（常规HE染色）

（1）二甲苯Ⅰ 5～10min（2）二甲苯Ⅱ 5～10min（3）无水乙醇Ⅰ 1～3min（4）无水乙醇Ⅱ 1～3min（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min（7）80%乙醇 1min（8）蒸馏水 1min（9）苏木素液染色 5～10min（10）流水洗去苏木素液 1min（11）1%盐酸-乙醇 1～3s（12）稍水洗 1～2s（13）返蓝（用温水或1%氨水等）5～10s（14）流水冲洗 1～2min（15）蒸馏水洗 1～2min（16）0.5%伊红液染色 1～3min（17）蒸馏水稍洗 1～2s（18）80%乙醇 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min（21）无水乙醇Ⅰ 3～5min（22）无水乙醇Ⅱ 3～5min（23）石炭酸-二甲苯 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（26）二甲苯Ⅲ 3～5min（27）中性树胶封固

注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。2．冰冻切片HE染色

（1）冰冻切片固定 10～30s（2）稍水洗 1～2s（3）苏木素液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去苏木素液 5～10s（5）1%盐酸-乙醇 1～3s（6）稍水洗 1～2min（7）返蓝（用温水或1%氨水等）5～10s（8）流水冲洗 15～30s（9）0.5%伊红液染色 1～2min（10）蒸馏水稍洗 1～2min（11）80%乙醇 1～2min（12）95%乙醇 1～2min（13）无水乙醇Ⅰ 1～2min（14）无水乙醇Ⅱ 1～2min（15）石炭酸-二甲苯 2～3min（16）二甲苯Ⅰ 2～3min（17）二甲苯Ⅱ 2～3min（18）中性树胶封固

注：①（7）和（8）项可省去，但（9）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（15）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。

㈡染色结果：细胞核呈蓝色，细胞浆、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。㈢染色注意事项

1．切片染色前，应彻底脱蜡。

2．用含有升汞液体固定的组织，其切片染色前应先脱去汞盐：（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）Lugol液 20min（3）流水冲洗 5min（4）95%乙醇 10min（5）水洗 1min（6）5%次亚硫酸钠水溶液 5min（7）流水冲洗 5min（8）显微镜观察除汞满意后，转入HE染色 3．脱除福尔马林色素（必要时）：（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）1%NaOH(1ml)与80%乙醇（99ml）混合液 10min（3）流水冲洗 5min（4）转入HE染色

4．严格执行HE染色流程，用显微镜控制细胞核的苏木素染色质量。HE染片应着色鲜艳，红、蓝分明，对比清晰。5．载玻片自二甲苯中取出后，应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡，外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

6．必须在载玻片的一端牢贴标签。标签上应印有病理科所在的医院名称。标签上应清楚显示有关的病理号及其亚号；标签上的病理号应准确无误，无涂改。7．制片完成后，技术人员应对切片与其相应的病理学检查记录单或取材工作记录单认真进行核对；确认无误后，将制备好的切片连同相关的活检申请单/活检记录单以及取材工作单等一并移交给有关的病理医师；交接双方经核对无误后，办理移交签字手续。

8．石蜡切片-HE染色的优良率（甲、乙级切片所占的比率）应≥85%。石蜡切片-HE染色质量的基本标准列于附表。

9．制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含进行脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本）。

10．制片过程出现意外情况时，技术室人员应及时向病理医师和科主任报告，设法予以补救。

附表 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准

优 质 标 准

满 分 质 量 缺 陷 减 分

⒈组织切面完整，①组织稍不完整：减1～3分 ②不完整：减4～10分

内镜咬检、穿刺标本切面数 10 ③未达到规定面数：减5分

⒉切片薄(3～5μm)，厚薄均匀 10 ①切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～10分

②厚薄不均匀：减3～5分

⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 10 ①有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断：减2分

②有刀痕、裂隙、颤痕，影响诊断：减5分

⒋切片平坦，无皱褶、折叠 10 ①有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2分

②有皱褶折或折叠，影响诊断：各减5分

⒌切片无污染 10 有污染：减10分

⒍无气泡（切片与载玻片间/ 10 ①有气泡：减3分 盖片与切片、载玻片间），②胶液外溢：减3分

盖片周围无胶液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差：减1～3分

②组织结构模糊：减5～7分

⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 10 ①细胞核着色灰淡或过蓝：减5分

②红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5分

⒐切片无松散，裱贴位置适当 10 ①切片松散：减5分

②切片裱贴位置不当：减5分

⒑切片整洁，①切片不整洁：减3分

标签端正粘牢，编号清晰 10 ②标签粘贴不牢：减3分

③编号不清晰：减4分

合 计 100

切片质量分级标准： ①甲级片： ≥90分（优）

②乙级片：75～89分（良）

③丙级片：60～74分（基本合格）

④丁级片： ≤59分（不合格）

㈣HE染色试剂的配制 1．苏木素染液

（1）Harri苏木素染液

苏木素 1g 无水乙醇 10ml 硫酸铝钾 20g 蒸馏水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾；然后将该两液合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌溶液至深紫色，随即用冰水冷却，恢复至室温后过滤备用。使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

（2）Gill改良苏木素液

苏木素 2g 无水乙醇 250ml 硫酸铝钾 17g 蒸馏水 750ml 碘酸钠 0.2g 冰醋酸 20ml 先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水溶解硫酸铝钾；然后将该两液混合，再依次加入碘酸钠和冰醋酸。使用前过滤。

（3）Mayer改良苏木素液

A液：苏木素 2g 无水乙醇 40ml B液：硫酸铝钾 100g 蒸馏水 600ml 将苏木素溶于无水乙醇中（A液）；稍加热，使硫酸铝钾溶于蒸馏水中（B液）。将A液与B液混合后煮沸2min，再用蒸馏水补足至600 ml，加入400mg碘化钠充分混匀。染液呈紫红色。2.盐酸－乙醇分化液

浓盐酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3．伊红液

（1）0.25～0.5%伊红Y水溶液

伊红Y 0.25～0.5 g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 1滴

（2）0.5%伊红Y-氯化钙水溶液

伊红Y 0.5 g 蒸馏水 100 ml 无水氯化钙 0.5 g（3）0.25～0.5%伊红Y-乙醇溶液。

伊红Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4．石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二节 细胞学诊断检材的制备技术

一、细胞涂片、组织印片和压片的制备

（一）涂片质量的基本要求

1．将检材涂布于载玻片的右（或左）2/3处，另1/3部位粘贴标签。2．单向涂布检材，避免细胞变形。3．均匀涂布检材，涂片厚薄适当。

4．红细胞过多的涂片，可酌情进行溶解红细胞处理。

（二）涂片方法

1．涂抹法：用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹于载玻片上。2．拉片法：将一滴检材置于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其 上并予轻压，再将该两张载玻片朝反向拉动，从而获得两张涂片。3．推片法：将一滴检液置于载玻片的右端，再用另一张窄边光滑的载

玻片作为推片，并以与滴液载玻片成40°夹角、自右向左匀力推动检液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1．送检的痰液应是由肺内咳出，最好是清晨空腹时自肺内深咳出的痰液。2．核查无误的收验痰液，应立即制作涂片（通常为2～3张）。3．用细签或无钩镊子挑取痰液置于载玻片上，并左右往复薄涂，随即投入固定液中。

4．痰液中呈现下列性状的成分可能含有癌细胞，应注意挑取制作涂片：①血丝；②灰白色痰丝（形如白色细线，微细螺旋状，牵引时可伸长）；③透明痰液（可拉成较长细丝）。［及时在细胞学检查申请单上记录痰液性状］ 5．检查痰液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。

（四）黏膜、皮肤表面刮取（刷取、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1．阴道排出物、子宫颈刮取物涂片：通常由妇产科医师将已制作、固定后的涂片送交病理科检查。［注意由子宫颈外口上皮移行带刮取细胞涂片］

2．支气管镜、胃镜等内腔镜的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由内腔镜医师制作、固定后送交病理科检查。

3．食管、胃拉网涂片：由食管拉出的套网气囊适量放气后，将气囊套网在载玻片滚动涂片，尤应将套囊上血丝、灰白色物制作涂片；涂片通常由有关临床医师将已制作、固定后的刷片送交病理科检查。套网中的小块组织可用来制作石蜡包埋切片。

4．眼、耳、鼻、咽、口腔、皮肤等处病变（溃疡性病变等）的分泌物涂片。

（五）液体涂片的制作

液体标本（检材）包括乳头溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、脑脊液、穿

刺液、冲洗液、灌注液等。除乳头溢液外，其他液体检材一般均应先行离心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液体检材也可用细胞涂片离心机（cytospin）直接制作细胞涂片。制作好的涂片应立即固定和染色。［及时在细胞学检查申请单上记录液体标本的性状和数量］

液体标本的离心沉淀物较多时，将制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫镜纸或绸布将其包裹，制作石蜡包埋切片。1．乳头溢液：直接滴于载玻片上制作涂片。

（1）患者乳腺触及肿物时：用手指自肿物远方沿乳腺导管引流方向轻力按 模挤压，获取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。

（2）患者乳腺未触及肿物时：可自乳晕周围向乳腺外周轻力按模挤压，获取溢液。

2．胸水和腹水

（1）由患者体内抽取的胸水或腹水应尽快送交病理科验收，检液量以200～500ml为宜。因故（例如远途）延时送达时，需在标本中加入40%的甲醛（加入量为送检胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理盐水。

（2）胸水、腹水的离心：采取容器底部的液体10ml（包括可能存在的沉淀物），移入离心管内进行离心。

（3）离心后，倾去全部上清液，将离心管底部含有沉淀物的液体摇匀并用吸管吸出适量，滴注于载玻片上，制作涂片。3．尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有胶状物时，应先将其除去。清除方法：用0.5ml/L氢氧化钠调节尿液Ph至6.0；离心后，倾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定细胞），静置5min后加入蒸馏水并轻摇（溶去胶状物）；再次离心后，取沉淀物制作涂片。检查尿液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。4．胃液、胃冲洗液：制作方法同胸、腹水。5．脑脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）脑脊液内细胞一般较少，可用微孔滤膜过滤法、沉淀法或纤维捕捉法收集细胞，制作涂片。

6．冲洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：参见上述的胸水、腹水项。

二、肿物细针穿刺物涂片的制备

（一）实施细针穿刺术前的准备工作

1．实施细针穿刺术的病理医师应先了解患者临床情况，向患者和/或患者授权人说明实施穿刺术的意义、局限性和其他相关问题等，取得患者和/或患方的知情和理解，并签署由各医院制订的《申请实施细针穿刺术细胞病理学诊断患方知情同意书》。

2．合格的手术操作环境。

3．必备的适用手术器械和其他相关设施。

（二）肿物穿刺术的操作要点：

1．确认肿物部位并估计其大小、与皮表距离和质地（实／囊性、硬度等），以指导穿刺的方向、深度和用力程度。2．必须严格实行无菌操作。

3．根据肿物大小及其血供情况选择适用型号的穿刺用针头。穿刺用针头的外径为0.6～0.9mm，安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。4．针吸法穿刺术操作要点

（1）进行穿刺前，先将安装了穿刺用针头的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定肿物，将安装在空注射器上的穿刺用针头刺入肿物（注射器内无空气）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其间变换针头方向3～4次），遂使肿物不同部位的多较内容吸进入针头和注射器内。

（3）将注射器与针头分离（管内负压因而解除）；随后，再将该注射器与仍插于肿物内的针头相接，拔出针头，穿刺结束。

（4）迅速推动注射器的管芯，尽快地将位于穿刺针头内的少量吸出物排射在2～3张清洁的载玻片上，进行涂片。

5．涂片方法：用针头将载玻片上的吸出物轻轻均匀拨开，或用推片法朝一个方向展开（不可双向往返推移）。

6．吸出物过少时，可用向离心管内冲洗穿刺针头；再将冲洗液离心，然后取其沉淀物涂片［参见上述一

（五）项“液体涂片的制作”］。

7．吸出物较多时，可适量50％乙醇－生理盐水液将涂片后注射器和针头内剩余的吸出物冲洗至离心管中，离心后，取其沉淀物制作常规石蜡包埋切片。8．吸出物中含有细小组织块时，应将其制作常规石蜡包埋切片。

9．内脏肿物穿刺时，必须在影象学检查的引导下用较长细针进行穿刺。10．穿刺操作完成后，即在细胞病理学检查单上书写穿刺记录。

三、组织印片、压片的制备

（一）组织印片：

1．用锋利刀片剖开刚切取的新鲜肿瘤组织或淋巴结等，然后用清洁载玻片轻压于组织剖面处，将组织表面的细胞成分印在玻片上。用稍微加温的载玻片制备印片时，可印得较多细胞。

2．制作淋巴结印片前，应先用滤纸吸去淋巴结切面上的血液、组织液。

（二）压片：

1．选取微小薄片组织平铺于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其上并予轻压。

2．脑组织质软，易于制作压片；稍硬的组织需切成细碎薄片制作压片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必须湿固定，即涂片后立即进行固定。乳头溢液涂片和液体标本离心沉淀物涂片，应待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央区域未干）时进行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色和免疫细胞化学染色的涂片，必须干固定，即待涂片稍干后再进行固定。

（二）固定液

1．乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2．乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。较常用。3．甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色 和免疫细胞化学染色。

4．丙酮：适用于酶类染色。

5．Carnoy液：由无水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，适用于显

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3～5min后，应移入95%乙醇中继续固定。

6．对于液体标本的离心沉淀物、食管拉网获取的小块组织或吸出物中的细小组织块等，固定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常规石蜡包埋切片。

（三）固定方法 1．浸入法：

（1）将稍为干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液内至少15 ～ 30min。

（2）因细胞容易脱落，宜以一个盛有固定液的容器只固定一例标本的涂片；一个容器固定多例涂片时，有可能造成的肿瘤细胞交叉污染。（3）必要时可将标本涂在硅化载玻片上，以防脱落。（4）固定液重复使用时，应先用滤纸过滤。

（5）95%乙醇固定液多次重复使用时，需测定其浓度比重，乙醇浓度低于90%时应予弃用。

2．滴加法：将固定液滴加于平放的干燥涂片上，应避免因固定液挥发造成沉淀。

（四）固定后未染色涂片的保存或邮寄：涂片固定15min后取出，立即滴加数滴甘油于涂膜上。对该涂片进行染色前，应先将其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于细胞病理学涂片检查的是苏木素－伊红（HE）染色和巴氏染色。一些特殊染色、组织化学染色和免疫组织化学染色也用于细胞病理学的涂片检查（参见第4章第一、二节）。

（一）苏木素－伊红（HE）染色（参见本章第一节的“六”项）。

（二）巴氏（Papanicolaou）染色

巴氏染色时，细胞透明度好，细胞结构清晰，色彩丰富而鲜艳，主要用于妇科细胞学涂片、痰涂片和富含鳞状上皮细胞的涂片检查。1．试剂配制

（1）Harri苏木素液（参见本章第一节的“六”项）（2）盐酸－乙醇液

浓盐酸 1ml 70%乙醇 99ml（3）橙黄G6液

橙黄G6 0.5g 蒸馏水 5ml 无水乙醇 95ml 磷钨酸 0.015g 先将橙黄G溶于蒸馏水中，再加入无水乙醇，然后加入磷钨酸。

（4）EA36染液

①EA36储备液

A液：亮绿0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。B液：伊红0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。C液：俾士麦棕0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36储备液的A液 45 ml EA36储备液的B液 45 ml EA36储备液的C 液 10 ml 磷钨酸 0.2 g 碳酸锂饱和水溶液 1 滴 2．染色程序

（1）将已经固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

（2）蒸馏水洗2 min。

（3）苏木素液染核10～12 min，自来水洗。

（4）盐酸-乙醇液分化约20～30s，至涂片呈淡橙红色。

（5）流水冲洗10～15min，蒸馏水洗。

（6）依次用80%、95%乙醇脱水，各2min。

（7）橙黄G6液染色3～5min。

（8）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（9）EA36工作液染色3～5 min。

（10）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（11）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

3．染色结果：细胞核呈深蓝色，核仁呈红色；不同分化类型的鳞状上皮细胞，其胞浆颜色各异：角化细胞呈粉红色，不全角化细胞呈橙黄色，角化前细胞呈淡蓝或淡绿色；红细胞呈橙红或鲜红色，白细胞的胞浆呈淡蓝绿色；粘液呈淡蓝或粉红色。

（三）瑞氏（Wright）染色

瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于检查肿瘤细胞。1．试剂配制

（1）瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 将瑞氏染料放入研钵内，加入适量甲醇与之混合研磨，使染料逐渐溶解。将溶解的染液倾入另一玻璃瓶内，然后再加入适量甲醇继续研磨；未溶解的染料如此反复多次，直至染料完全溶解、甲醇用完为止。染液避光保存备用。

（2）磷酸盐缓冲液

无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4g 蒸馏水 1 000ml pH：6.5～7.0 2.染色程序

（1）涂片自然干燥。

（2）滴加瑞氏液染色1min。

（2）滴加等量的磷酸缓冲液，轻轻摇荡玻片或用洗耳胶球在玻片上轻轻吹 气，使两液体混合均匀，持续10～15min。（4）流水洗去染液。

（5）涂片风干后，二甲苯透明，中性树胶封片。

3.染色结果：胞核呈紫红色，胞浆呈紫蓝色，粘液呈粉红色或淡蓝色。

（四）May-Grünwald-姬姆萨（Giemsa）染色

May-Grünwald-姬姆萨染色适用于造血系统的细胞涂片和鉴别恶型淋巴瘤的类型。May-Grünwald原液和姬姆萨原液配制繁琐，可直接购买。1．试剂配制

（1）May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸馏水 6～10份

使用前配制。

（2）姬姆萨工作液

姬姆萨原液 1份 蒸馏水 6～10份

使用前配制。2．染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸馏水洗1～2min。（2）May-Grünwald工作液染15～30min。

（3）自来水冲洗，洗去载玻片上的染液，蒸馏水稍洗。

（4）姬姆萨工作液染15～30min。

（5）自来水冲洗，洗去载玻片上的染液。

（6）涂片风干后，二甲苯透明，中性树胶封片。3．染色结果：胞核呈紫红色，胞浆和核仁呈蓝紫色。

（五）Rakoff染色

Rakoff染色用于阴道细胞学涂片快速测定雌激素水平。1． 试剂配制

（1）5%淡绿水溶液 83ml（2）1%伊红水溶液 17ml 将两液混合后使用。2．染色程序

（1）用细胞刷沿阴道侧壁刷取黏膜鳞状上皮细胞，放入装有1~2ml生理盐水的试管内。（2）在试管内滴入3滴Rakoff染液，用细胞刷在染液中轻摇混合。

（3）将1~2滴混合液滴于载玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性树胶封片。

染色结果：鳞状上皮细胞的嗜酸性和嗜碱性胞浆区分明显。角化前细胞的核呈网状，角化细胞的固缩核呈基本不着色的空泡状。

（六）猩红－固绿染色

猩红－固绿染色用于显示性染色体。1．试剂配制（1）猩红染液

水溶性比布里西猩红 1.0g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml（2）固绿染液: 固绿 0.5g 磷钼酸 0.3g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2． 染色步骤

（1）涂片经95%乙醇固定后，置于70%乙醇中2min。

（2）猩红染液中5min。（3）50%乙醇中漂清多余染液。

（4）固绿染液中分化2~5h。每小时在显微镜下观察胞浆和网状核膜是否呈现绿色；如果绿色满意，立即取出涂片（一般约需4h）。固缩核呈鲜红色。

（5）50%乙醇中5min。

（6）依次置于70%、95%和无水乙醇中各2min。

（7）置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明，各2min。

（8）中性树胶封片。

染色结果：胞核呈淡绿色；性染色质呈粉红色、V字形或贴着于细胞膜呈三角形。在性染色质周围可见空泡。

（七）Fouchet染色

Fouchet染色用于显示胆色素。1．染液配制 Fouchet染液

A液：25%三氯醋酸水溶液 B液：10%三氯化铁水溶液

A、B液皆小量新鲜配制为宜。使用时，取A、B液各30ml混匀（当天使用）。

2．染色步骤

（1）涂片经95%酒精固定后，置于蒸镏水中漂洗。

（2）Fouchet液中染5min。

（3）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

（4）苦味品红溶液中染5min。（5）95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

（6）无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脱水。

（7）二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明，中性树胶封片。

3．染色结果：胆色素呈橄榄绿色，胶原纤维呈红色，涂片背景呈黄色。

（八）硫酸亚铁染色

硫酸亚铁染色用于显示黑色素。1．试剂配制

（1）2.5%硫酸亚铁水溶液（2）铁氰化钾醋酸液 铁氰化钾 1g 蒸馏水 99ml 冰醋酸 1ml（3）1%冰醋酸水溶液

（4）核固红液[参见第4章第一节的八

（三）项（爱先蓝法）] 2．染色程序

（1）涂片经95%酒精固定后，置于蒸镏水中漂洗1~2min。（2）2.5%硫酸亚铁溶液中1h。

（3）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗，各1min。（4）铁氰化钾醋酸液中30min。（5）1%冰醋酸液中1min。（6）蒸镏水漂洗。

（7）核固红液中染1~2min。（8）蒸镏水漂洗。

（9）依次95%乙醇、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。3．染色结果：黑色素呈深绿或深蓝色，涂片背景呈红色或粉红色。

（九）快速硝酸银染色

快速硝酸银染色用于显示卡氏肺囊虫和真菌。1．试剂配制

（1）硝酸银乌洛托品

常备液：3%乌洛托品溶液100ml与5%的硝酸银溶液5ml充分混合。

工作液：常备液25ml、蒸镏水25ml与5%硼酸钠2ml充分混合。（2）固绿

常备液：固绿0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液：常备液10ml与蒸镏水40ml混合（3）5%铬酸溶液

1%亚硫酸氢钠溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸钠溶液 2．染色步骤

（1）涂片经95%乙醇固定后，置于蒸镏水中漂洗1min。（2）5%铬酸溶液（43℃水浴）中2min。（3）5%铬酸溶液（58℃水浴）中15min。（4）自来水漂洗。

（5）1%亚硫酸氢钠溶液中30s。（6）自来水冲洗15s。

（7）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。（8）硝酸银工作液（43℃水浴）中2min。（9）硝酸银工作液（58℃水浴）中23min。（10）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。（11）0.2%氯化金溶液中30s。（12）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（13）2%硫代硫酸钠溶液中1min。（14）自来水冲洗15s。（15）固绿工作液中染30s。（16）自来水冲洗15s。（17）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（18）95%酒精、无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

3．染色结果：卡氏肺囊虫和真菌皆呈黑色，形状清晰；糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色；涂片背景呈淡绿色。

（十）高碘酸-无色品红（PAS）染色

PAS染色用于显示多糖（糖原及黏蛋白等）。［参见第4章第一节的八

（一）项（高碘酸－无色品红法）］

［《临床技术操作规范•病理学分册》／第四章 病理学相关技术规范］ 第九节 病理学摄影技术

一、概 述

（一）病理医师根据病理学诊断、教学和研究的需要确定病理学摄影的内容，进行客观、准确的图像记录。

（二）病理学摄影的客体包括：①患者体表病征，②大体标本（手术切除和尸检标本的肉眼病变），③组织学切片（光学显微镜下病变），④超薄切片（透射电子显微镜下超微病变），⑤冷冻蚀刻标本（扫描电子显微镜下超微病变），⑥细胞培养标本，⑦细胞和分子细胞遗传学检测结果，⑧尸检过程，⑨动物实验标本和⑩文字、图像资料翻拍等。

二、普通摄影

（一）普通摄影是应用普通照相机拍摄客体的图像，包括患者体表病征，大体标本的肉眼病变，尸检过程，动物实验标本和文字、图像资料等。摄影时应注意病征或病变显示、光照、角度等，适度调节距离、光圈、速度。

（二）患者体表病征摄影

1．需征得患者或患方有关人员同意。2．应遮盖患者的面容和隐私部位。

（三）大体标本摄影

1．于标本下面铺垫色泽反差鲜明、协调的平整背景（纸或布），并需置放标尺和相关标本的病理号，必要时添加箭头等符号标志指示重点部位。2．因照相机固定于翻拍机上，宜选用较慢的快门速度，以增加景深。

（四）尸检过程摄影

1．宜用28～135mm变焦镜头的135相机进行摄影。

2．重要病变的原位摄影：应包括局部肉眼病变特征（“近拍”）及其与毗邻结构的解剖关系（“全景”），突出重要病变，兼顾显示全貌。3．离体标本摄影［参见上文：“

（二）大体标本摄影”］

（五）文字、图像资料翻拍 1．应用翻拍机进行摄影。

2．在翻拍相机的两侧一般至少安装2～4盏100W灯光，与照明直线呈45º角，以使光线均匀。摄影条件可用测光表确定。

（六）底片的选择

1．黑白摄影：扩印照片者，可用ASA100速度底片；制作幻灯片者可用ASA25～50速度底片。2．彩色摄影：

（1）用日光型彩色底片摄影时，需用雷登80系列平衡滤色片把色温调到5600ºK状态；用灯光照射者，无需平衡滤色片。

（2）用灯光型彩色底片在日光下摄影时，需用平衡滤色片把色温调到3200ºK状态。

三、光学显微镜（光镜）摄影

（一）光镜显微摄影是应用显微照相机拍摄通过光学显微镜放大40～1000倍的客体图像。

（二）摄影用显微镜性能要求 1．具有摄影目镜筒。

2．能通过目镜筒对图像进行对焦。3．具有光镜选择移动杆。

4．物镜具有分辨率良好平视场象。

5．聚光镜具有孔径光阑和调节光轴中心的机构。6．具有视场光阑。

7．光源亮度足够，电压可以调节。8．具有插入滤色镜的槽口。

（三）显微摄影的基本装置

1．具有自动输片机构的35mm照相机背。

2．具有对不同光照条件进行光路调节的调节杆。3．具有能对不同标本面积进行自动测光的装置。

4．具有与显微镜相连接的接圈、平场消色差物镜(Splan，Dplan)和聚光镜。5．具有显微摄影控制台。目前较常用的有日产Olympus PM-10及PM-20等显微摄影装置。常用参数项目包括：①快门按钮(EXPOSE)，②底片类型选择键(FORMAT)，③感光度旋钮(ASA/ISO)，④倒易律失效的补偿旋钮(RECIPROCITY)，⑤曝光增减旋钮(EXPOSURE ADJ)，⑥快门速度调节旋钮(MODE/EXPOSURE TIME)，⑦卷片按钮(OFF/MINDING)，⑧停片进片按钮(NO WINDING)，⑨自动曝光锁按钮(AEOCK)，⑩时间回忆按钮(TIME RECALL)。

（四）显微摄影要点

1．显微照相机必须安放稳定，具有一定防震性，室内光线应暗些以避免散射光进入目镜。

2．选择适当的彩色或黑白底片装入照相机身（暗盒）。拍摄常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色切片的病变，宜用感光度ASA为100的彩色或黑白底片；拍摄培养细胞和免疫荧光染色标本，宜用感光度ASA为400的彩色或黑白底片。

3．调节照明和光照

（1）打开电源，调节电压（约在9伏）。（2）视场光阑收缩到取景框边缘外。

（3）孔径光阑调到物镜孔径数值的60％～80％，例如孔径为0.25的10×物镜，聚光镜上光阑应调到：0.25×60％～80％＝0.15～0.2。（4）光通路调节

①常规摄影：先将视野与照明合轴、再将聚光镜调中，使光线同时调到①观察目镜和②取景目镜的视野之中，以便于边观察边曝光摄影。如图像分布均匀，将曝光增减旋钮（EXPOSURE ADJ）调至“1”处。

②暗视野、荧光和偏振光摄影：将光线100％调到取景目镜的视野之中，用调焦镜观察视野中的标本图像，进行摄影。如图像分布不均匀，应将曝光增减旋钮调于0.25～4之间。

4．调节和校准取景目镜于标准状态：旋转调焦镜镜筒上的圆环，使取景框中央的双十字线达到最清晰。

5．将切片等标本放置在载物台上，先用观察目镜选定摄影图像，再用取景目镜调整摄影图像，并转动微调旋钮，同时使图像与取景框中的双十字线像达到最清晰。

6．用彩色底片摄影时，必须用色温计调节色温：①将光通路100％到达色温计上（由调焦镜中看不到光线）；②观察色温指示表，用平衡滤色镜（使用日光型底片时用雷登80系列）和灯光亮度将色温调至最佳色温点（日光型底片的色温点为5600K左右，灯光型底片的色温点定为3200K左右）

7．用黑白底片摄影时，必须按下列对应关系选择滤色片以提高图像反差和清晰度：

标本颜色 红 橙 黄 绿 深蓝 滤 色 镜 蓝、绿 蓝、绿 蓝 红、蓝 深绿、橙

8．检查光线可达到底片的位置，确定正确的曝光时间和进行曝光；或用自动摄影控制台上的按键曝光。

9．记录图像的摄影日期、摄影编号、样品编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

10．将已全部摄影过的底片退回底片暗盒内，取出底片并进行暗室冲洗等后期处理。

四、电子显微镜(电镜)摄影

（一）透射电镜摄影

1．检查电镜工作状态，确认样本无漂移现象，选择好曝光条件。2．调节好灯丝像，消正像散。3．选择视野，确定放大倍数。

4．调整物镜光阑：样品反差较强时，使用较大的物镜光阑孔，直至反差适中为止；反差小时，宜用较小的光阑孔。

5．样本聚焦在低倍电镜（＜1500倍）图像时，可采用摇摆聚焦法用肉眼定位；样品聚焦在高倍电镜（＞1500倍）图像时，除用肉眼观察定位外，还需采用系列拍照法：于确定焦点后，用细调钮聚焦，增加物镜电流，每调动一级最小钮拍摄一张底片，总计拍摄4～5张，从中选择最佳底片。6．放平荧光屏，传送底片使之进入摄影位置。

7．调定曝光亮度和速度，然后启动快门进行曝光；曝光结束后，将底片送入储存盒内。将底片全部摄影的储存盒取出，进行暗室冲洗等后期处理。

8．用于透射电镜摄影的底片一般为色盲片（对红光不感光），曝光时间为2～4s，ASA［中文？］为8～25s。

（二）扫描电镜摄影 1．检查电镜工作状态

（1）加速电压强度的选择：取决于样品的性质、图像反差和放大倍率。高倍观察时一般需要较高的加速电压，低倍观察时需要较低的加速电压。

（2）聚光镜电流的选择：在保证图像亮度和反差要求前提下，尽可能加大聚光镜电流，以提高照片分辨力，加大景深。

（3）物镜光阑孔的选择：对于表面结构高低差异大的样本可用较小的光阑孔，以获较大景深；低倍镜下观察时，可选用较大光阑孔，以增加视野内的信号强度。

（4）选择摄影扫描速度。

（5）视野选择：与透射电镜相同。

2．确定曝光时间。在扫描电镜照相机处于光关？F8或F11情况下，照片的曝光时间在50～100s之间。

3．样品的聚焦程度主要依靠操作人员的肉眼观察。拍摄较低放大倍数（＜1000倍）的图像，以调节粗聚焦钮为主；拍摄较高放大倍数（＞1000倍）图像，应先调节粗聚焦钮，再调节细聚焦钮。

4．图像消像散：①先调节X方向旋钮，消除X方向的像散；②再调节Y方向旋钮，消除Y方向的像散；③最后再调节细聚焦钮，直到图像最清晰为止。

5．调节高度和反差：扫描电镜一般装有亮度和反差自动调节按钮，按动该钮即可得到反差适当的图像。

6．拍摄：将照相机中的底片调至摄影位置，按动面板上的摄影快门钮，荧光屏上便由上而下自动扫描图像；扫描结束后，即完成一幅照片拍摄。

7．底片选择：扫描电镜装有120或135照相机，故一般选择感光速度为ASA100的120或135胶卷，；装有Polaroid后背相机的扫描电镜，可进行一次成像。

8．记录图像的摄影日期、摄影编号、样本编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

五、暗室技术

（一）暗室技术用于：①普通摄影、显微镜摄影和电镜摄影底片的冲洗，及其照片的洗印和放大；②幻灯片的制作等。

（二）摄影底片的冲洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片（色盲片或电镜底片可在红灯下取出）→ ②将底片卷入螺旋形的槽内或显影架上 → ③清水湿润2min → ④显影3～12min（20℃）→ ⑤定影10～20min（20℃）→ ⑥水洗30min → ⑦凉干底片 → ⑧分类装入底片袋内，并做好记录。

（三）试剂配制

1.显影液：有多种配方，组成成分大同小异。下列的D‐11配方兼用于冲洗底片和照片的洗印和放大显影： 水（50℃）500ml 米吐尔 1.0g 无水亚硫酸钠 75 g 对苯二酚 9.0g 无水碳酸钠 25 g 溴化钾 5 g 加水至1 000ml 冲洗电镜底片、色盲片和制做幻灯片、显影照片等，需要极强反差，可用以上配方的原液显影。普通摄影用的全色底片对反差要求不很高，可将原液用清水稀释成1:2～1:4的工作液。2．停影液

水 750ml 28％醋酸 48ml 加水至1000ml 3.定影液：较常用下列的F‐5酸性坚膜定影液 水（50℃）600ml 硫代硫酸钠 240g 无水亚硫酸钠 15g 28％醋酸 48ml 硼砂（结晶）7.5g 硫酸铝钾 15 g 加水至1000ml

（四）照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相纸。这类相纸根据反差分为特软性、软性、中性、硬性和特硬性等5种，即0、1、2、3、4号相纸。较常用者为3号相纸。

1.洗印：在印相箱中操作（一般装有自动定时曝光控制器），主要用于制做透射电镜摄影的照片。已经曝光的像纸进入冲洗操作程序（同底片的冲洗程序）。

2.放大：在放大机上操作，主要用于制做显微镜摄影的照片。（1）操作程序

①放大镜头焦距的选择参见下表：

底片规格 135 120 120 120 120（16张）（12张）（10张）（8张）负 片 负 片 负 片 底片尺寸

(mm×mm)24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 镜头焦距

(mm)50 75 75～80 80～90 90～105 135 150 175

②装入底片：将底片的乳剂面向下，目测聚焦，使放大的图像结构清晰。③选择相纸：常用3号放大纸。

④确定镜头光圈和曝光时间：对于正常反差的底片，将镜头光圈缩小到f/5.6至f/8之间，曝光时间控制在8～20s为宜。⑤将曝光后放大纸进入显影、定影程序中。

六、数码摄影技术

数码摄影通常包括：①拍摄、②下载（将所拍摄的照片由数码相机下载到电脑中）、③修饰（加工处理等后期制作）和④分享（将经过修饰的照片输出，例如打印等）4个步骤。

（一）选择适当的照片质量要求

数码相机的照片质量（解像度）分为①精细、②正常、③经济等档次。图像质量越好，每张照片占用的存储空间越大，在相同内存的情况下，解存储的照片数量越小。因此，在拍摄之前，应先根据需要，设定对于照片的质量要求，即设定压缩比。

设定压缩比的原则是：①对照片质量要求越低，压缩比可越高；②只在监视器或电视机上观察图像而不打印时，压缩比可高些，可选择“正常”甚至“经济”档拍摄储存量小的图像。③需要打印照片（尤其欲获大幅彩色照片）时，压缩比越低越好，应选择“精细”档，最好选择不压缩的拍摄存储方式。

（二）力求曝光准确

1．数码相机的感光度最低为ISO60，最高为ISO6400，多在ISO100左右。ISO额定值较低时，解像度高、色调范围宽和反差低；ISO额定值较高时，解像度低、色调范围宽和反差高。2．选择感光度的原则：（1）检查光线是否足够。

（2）尽量用较低的感光度拍摄。

（3）曝光时间不要过长。照度低时，应尽量利用闪光拍摄。避免进行高感光度的长时间曝光。

（4）曝光准确与否决定于对照片质量的要求。

（三）注意对焦条件。

（四）注意用光。

（五）准确使用快门和光圈：宜用自动模式（Auto）拍摄。使用手动相机或将自动相机设置于手动模式时，需要随时进行调整。

（六）正确设定白平衡：拍摄前设定自动白平衡，或是将白平衡调整设定在与拍摄光照条件一致的档上。

（七）正确使用存储媒介：向数码相机内插入移动式存储卡时，一定要到位；从相机中取出存储卡时，要防止滑落到坚硬的物面上，以免不能读取照片的某些数据，甚至损坏存储卡。

（八）勿距摄影客体过远：适当拍摄距离为5～15尺。拍摄小物体、文件等时，应启动数码相机的近摄功能。