微生物进修报告

第一篇：微生物进修报告

微生物进修报告

在医院领导的支持和帮助下，顺利完成在滕州市中心人民医院微生物室进修学习工作。半年来，在带教老师的耐心的讲解和指导下，认真学习，积极工作，通过不断努力，自身工作能力得到了很大的提高，现就半年来的进修学习情况总结如下：

一、理论知识学习情况：

1、强化基础知识学习。为了提高自身理论知识，在工作之余我再次重温周庭银主编的《临床微生物学诊断与图解（第3版）》、倪语星主编的《临床微生物学检验》、周庭银及倪语星主编的《临床微生物检验标准化操作指导（第2版）》、陈东科主编的《实用临床微生物学检验与图谱》等相关业务理论知识，通过自学，进一步提高了自身的理论水平，为工作实践打下了良好的基础。

2、加强知识交流。在进修期间，尽可能的抓住一切机会，主动诚恳地向专业老师请教，积极学习，听取满主任讲课，开阔了自己的知识视野，更加丰富了自己的理论水平。满主任曾从事5年微生物教学工作，既有丰富的理论知识，又有娴熟的实践技能，省内为数不多的微生物学知名专家学者。

二、工作业务实践情况:

经过半年来的工作学习，已经初步掌握了细菌检验业务技能，能够基本独立完成细菌检验工作，其中包括：

1、细菌接种方面：熟练掌握痰、尿液、血液、胸腹水、脑脊液、分泌物以及组织等方面的细菌接种和培养。

2、涂片染色方面：掌握一般细菌涂片染色、特殊细菌涂片染色和抗酸杆菌涂片染色。

3、细菌鉴定方面:能够识别和鉴定上呼吸道等标本的正常菌群；在镜-b+b-cc+c下能够识别G、G、G、G、真菌孢子等细菌形态；基本掌握细菌标本的鉴别和鉴定。

三、今后工作设想：

在以后的工作中，我将继续加强对细菌理论知识的学习，通过工作实践努力提高自身业务素质和技能。相信在科室领导和同事的帮助下以及自身的努力，个人业务能力得到提升，进一步为医院工作以及为患者服务作出新的贡献。

2015年11月9号

第二篇：微生物实习报告

林业与生物技术学院

实习报告

学生姓名：娄钧翼学号：201001220327专业名称：生物科学—微生物班级：生物科学102班指导教师：张昕

2012-6-26

一、实习目的意义

1、通过实习过程掌握酸奶中乳酸细菌的分离纯化

2、土壤中自生固N菌分离、纯化、生长曲线测定 ：通过实习过程，掌握土壤中微生物的分离、纯化和生长曲线测定的技术；

3、参观临安青山污水处理厂：参观污水处理厂，了解其运行模式，以及在污水处理过程中微生物发挥的作用和技术；

4、参观富阳海正药业有限公司：了解一个大公司大企业的运行情况，以及专业方面的一些技术和应用。

二、实习地概况

1、第一个和第二个实验是在学校学六实验室完成的；

2、第三个实验：临安市青山污水处理有限公司成立于2002年3月21日，于2004年5月1日投入试运行，是一个集污水收集、处理于一体的公益事业企业。公司坐落于浙江省临安市青山湖街道研口村发达畈，占地66亩，近期投资8082万元，建成处理能力2万吨/日，收集管网42公里，工艺采用MSBR法，具有脱氨除磷功能的污水处理设施。公司坚持内抓管理强素质，外创先进塑形象，通过规范化、制度化、精细化、科学化的管理来不断提高污水处理水平，努力提升科学管理层次，切实增强企业核心竞争力。公司设备、工艺先进，技术力量雄厚，现有职工21人，其中技术人员15人。公司先后通过了ISO9000和ISO14000质量环境管理体系认证及清洁生产认证。同时被评为浙江省公众满意单位杭州市环境保护模范企业、临安市花园式工厂、临安市安全声场先进单位、临安市卫生先进单位、临安市绿色企业等荣誉称号。

3、第四个实验：占地16000平方米，累计投资超过2.6亿元，设有60多个单元实验室，集小试、中试与研发支持为一体。始创于1956年的浙江海正药业股份有限公司秉承“执著药物创新，成就健康梦想”的使命和“成为广受尊重的全球化制药企业”的愿景，致力于整合药物研发与生产资源，为全球客户提供更好的产品和服务，通过美国FDA、欧盟EDQM、澳大利亚TGA、韩国KFDA等官方认证的品种达到40多个，销往全球30多个国家和地区。

2009年，公司荣获“全国五一劳动奖状”，海正、HISUN及图形被认定为“中国驰名商标”，入选“中国万种微生物基因组计划”和“国家重大（磅）级药物品种产业化技术创新联盟”。因圆满完成“抗甲流药物中间体生产”的国家任务，受到省政府的通令嘉奖。

2010年，公司入选浙江省医药工业“十强企业”，并荣获“国内最佳产品线十佳工业企业” 称

号，同时被誉为“金蜜蜂奖成长型企业”。

我们主要参观了海正药业在富阳的分公司。

三、材料方法

1、材料：乳酸细菌培养基、酸奶

原理：当乳酸菌生长代谢出乳酸后，会是PH下降而使颜色由绿变为黄绿，也由于PH

值降低，再加上抗生素及厌氧培养的作用，所以一般的微生物不容易在此培养基

上生长。因此十分容易鉴别乳酸菌。

方法 ：1.1(6月7日)配备乳酸细菌培养基(蛋白胨10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,柠檬酸氢二铵2.0G,葡萄糖20.0G,吐温801.0ML,乙酸钠5.0G,磷酸氢二钾2.0G,硫酸镁0.58G,硫酸锰0.25G,琼脂18.0G,蒸馏水1000ML,PH 6.2—6.6)

1.2(6月7日)培养基灭菌

1.3(6月8日)用灭菌后冷却至50摄示度左右的培养基到成平板

1.4(6月8日)用灭菌过的接种环挑取酸奶在平板上划线纯化培养4天左右

1.5(6月12日)挑取平板上菌落制成临时装片观察

2、材料：阿须贝无氮培养基、土壤

方法：2.1(6月12日)配备阿须贝无氮培养基(葡萄糖10.0G, 磷酸氢二钾0.2G, 硫酸

镁0.2G,氯化钠0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸钙5G,琼脂18G,蒸馏水

1000ML,PH7.2)阿须贝无氮培养液(葡萄糖10.0G, 磷酸氢二钾0.2G, 硫酸镁

0.2G,氯化钠0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸钙5G,蒸馏水1000ML,PH7.2)

2.2(6月12日)培养基,培养液灭菌

2.3(6月12日)用灭菌后冷却至50摄示度左右的阿须贝无氮培养基到成平板

2.4(6月12日)用灭菌过的镊子将黄豆大小的菜园土埋入已冷凝的平板培养基上

2.5(6月12日)正面放置28度培养4天

2.6(6月18日)用灭菌过的接种环挑取菌苔在新的阿须贝平板上划线纯化32度

培养

2.7(6月20日)单菌落接入液体培养基中于12.24.36.48H后测吸光值.制备生长

曲线

四、结果分析

1.平板上有一个个单菌落.在显微镜下观察单菌落就只有一种乳酸菌.酸奶中有保加利亚乳 菌与嗜热链球菌二种.2.五、实习感受

通过此次实习，我学到了很多课堂上学不到的东西：亲自动手配培养基，分离、纯化菌类，学会使用分光光度计制作生长曲线，同时参观了一些与微生物紧密相连的公司，了解其运行模式、实践技术和应用。这让我清楚地感到了自己肩上的重任，看清了自己的人生方向，也让我认识到了科研工作应支持仔细认真的工作态度，要有一种平和的心态和不耻下问的精神，不管遇到什么事都要去思考，多听别人的建议，不要太过急燥，要对自己所做的事去负责，不要轻易地去承诺，承诺了就要努力去兑现。实习也培养了我的实际动手能力，增加了实际的操作经验，对实际的科研工作的有了一个新的开始，更好地为我们今后的工作积累经验。

我知道科研工作是一项需要热情的事业，并且要持之以恒的精神和吃苦耐劳的品质。我觉得重要的是在这段实习期间里，我第一次真正地接触了实验，在实践中了解了一些科研技术，并且在此期间，我参观了一些公司，也与社会有所接触。利用这次难得的机会，也打开了视野，增长了见识，为我们以后进一步走向社会打下坚实的基础。

实习期间，我从末出现无故缺勤。我认真听取老师的指导，对于别人提出的实验建议虚心听取，并能够仔细观察、切身体验、独立思考、综合分析，并努力把学到的知道应用到实际实验操作中去，尽力做到理论和实际相结合的最佳状态，培养了我的耐心和素质。

为期两个多星期的实习结束了，我在两个多星期的实习中学到了很多在课堂上根本就学不到的知识，受益匪浅。回想自己在这期间的实习情况，也有不足之处。对此我思考过，学习经验自然是一个因素，然而更重要的是心态的转变没有做到位，有些实验步骤还是停留在应付的层面上。现在发现了这个不足之处，应该还算是及时吧，因为我明白了何谓工作何谓实际。在接下来的日子里，我会朝这个方向努力，在实验操作方面我会更加谨慎。

本次实习是我第一次亲身感受了所学知识与实际的应用，理论与实际的相结合，让我们大开 眼界，也算是对以前所学知识的一个初审吧!这次实习对于我们以后学习、找工作也真是受益匪浅。我会把这此实习作为我人生的起点，在以后的工作学习中不断要求自己，完善自己，让自己做的更好。

第三篇：进修报告

进修报告

首先要感谢各位领导给予这次进修的机会，在这段进修学习期间也认识到护理事业的魅力。

新疆维吾尔自治区人民医院始建于1934年,历经半个多世纪的沧桑巨变,经过几代人艰苦努力和奋力拼搏,如今医院已发展成为新疆维吾尔自治区一所学科齐全、技术力量雄厚、医疗设备精良，集医疗、教学、科研、预防、保健等于一体的大型综合性三级甲等医院、“爱婴医院”、“全国百佳医院”、自治区“十佳医院”。

医院隶属新疆维吾尔自治区卫生厅领导，现占地面积9.58万平方米，建筑面积12万平方米，医院设有42个临床科室，13个医技检查科室，17个行政职能科室，设有自治区级科研机构4所（急救医院研究所、临床药学研究所、儿科研究所、临床营养研究所），附属护士学校1所，附属社区医院1所。目前，医院实际开放床位1300张，年均诊疗60万人次，年出院病人2.6万余人次，年手术1万余例，现有在职职工2025名，其中正高职称64人，副高职称155人，中级职称418人。

我所在的科室是骨科和胃肠科，骨科学习了两月后一个月都是在胃肠科骨科学习。

骨科是一个大科室有四个小科室我所在是骨一科室开放床位69张，护理人员16名，副高职称1人，中级职称3人，护师3人。护士3人。主要以骨科骨折内固定，全髋关节置换术.刚进科室时，在护士长的带领下简单的熟悉下病房，病区既安静又整洁，护士站只有两把椅子、有一名护士在处理医嘱，护士都在病房做各项治疗，巡回病房，做基础护理，做宣教，与病人沟通，整个科室不管是医患，护患，医护之间都很融洽，感觉病人看到护士就像看到亲人一般。科室工作互相协作有条不紊，护士和护士之间的协作，护士和医生之间的协作都很有紧密，表现出了一个良好的团队协作精神。在这种印象下开始了学习，科室根据职称，学历，业务能力综合素质评选了两名护理组长，分为护甲组，护乙组，两名组长不参与夜班，中午值班等，护甲、护乙每半年调换一次，甲，乙组各带一名护士负责本组的工作，中午由甲、乙组带的两名护士值班，中午吃饭时间只有半小时。组长起到监督带教的作用，工作一起干，自己的组员有不懂的手把手的教，每天下班之前检查病区所有病人的的各项护理操作是否落实到位，能够真正起到组长的作用，每天早上所有当班护士交班后开始了晨间护理，护理车上带着床单，被套，毛巾、一床一巾，湿扫床，同时也会为卧床的病人翻身、拍背、协助患者有效的咳嗽，整理过的病房整整齐齐，几乎看不到属于患者的个人物品。由于是责任包干制，就开始查对医嘱开始配各组的液体，开始用移动护士站（EDA掌上电脑）查对液体，查对完了以后，开始打针，做雾化，会阴护理，肌肉针。十一点左右当天医嘱已打印出来，各责护认真核对后在执行，各责任组发放自己病人的口服药，手术比较多，每天平均6、7台左右，术前给病人做术前指导，全麻病人做深呼吸锻炼，按班次给病人做胃肠道准备，发放手术衣服，打术前针。因手术量较大，手术病

人都要做标记（医生做标记，护士要检查，如有未做的，要及时提醒医生）。由病房护士送到手术室和麻醉师进行术前交接（病人姓名，做手术的部位等）。病人手术期间，护士会根据病人的麻醉方式选择麻醉床，床头备心电监护仪，氧气，这些和我们这里的准备是一样的，病人手术完由麻醉室的工人送回病房，麻醉师也会到病房进行术后的交接（术中的生命体征，皮肤及各种引流管道），接心电监护，吸氧，记录各种引流管的量，做好各种管道的标记，并写在相应的护理记录单上，告知家属一些术后的相关知识，早期让患者进行功能锻炼。1点30分接班开始中午值班，这段时间刚好是换液体高峰，只有2名护士在值班，还要接下手术的病人，中午测量生命体征并且填写在电脑上，打第二天的护理卡及治疗卡，3点30分开始下午上班，为明日手术病人做术前宣教，告知患者练习在床上大小便、做接收新入院病人等，科室每周三组织一次业务学习，业务学习由主讲护师利用休息时间自己备课，每隔一周进行一次危重病查房，业务学习由主讲护师利用休息时间自己备课，危重病人查房先由主管护士简单讲解这一疾病的相关解剖，生理，病理知识，介绍病情，到病房护理查体，最后提出问题，有意见提出来大家一起讨论，补充，通过大家互动，鼓励大家多提问题，形成一种探讨学习的好氛围，从而使大家共同进步，更好的为患者服务，使患者满意，医生放心。在病房里，对容易坠床或是没有家属照看的病人，床头都挂有“严防坠床”“小心跌倒”等安全防范警示语，时刻提醒护士的职责，严防发生事故。对各种特殊用药，特殊操作，都有警示标示，如“膀胱冲洗，各类皮试过敏的”等等。

各组组长带着各自的组员进行晚间护理，查对医嘱，更换饮食单，准备交班。

在胃肠外科为后一个月的学习，开放床位32张，护理人员12人。主要以胃肠外系统手术，胃穿孔，阑尾炎等。由护工人员晨间护理，严格执行查对制度，在进行各项护理操作过程中均有相应的流程表，这些流程均有考核标准；每年由科（室）的专科护士及护理部的人员进行讨论这些操作是否需要改进；医生护士操作前后必须进行严格洗手，配备洗手消毒液，在操作中，如有操作失败，必须更换医疗物品，从不反复使用。病房所有用过的物品、器械均不在病房内洗涤浸泡，统一送供应室处理，以免造成环境污染。凡是接触过病人血液的注射器及针头均放入有盖箱，无需浸泡，装满后送焚烧，其他物品作为一般垃圾堆填处理，无需焚烧。因为他们深知如果自己不遵守规章制度，就会增加感染的机率，从而危及其他人员的生命及健康，医院设有独立的感染控制部门，持续监测各科室的感染情况。

病区内，感受到医护人员对患者的关爱是发自内心的，对病人及病人家属非常友善，真正做到了优质服务。他们对病人提出的合理要求都尽量满足，如果因故不能及时做到，则非常客气地对他们说“麻烦你等等，我处理完手头的事情就马上与您联系”。如果病人家属想咨询病情，护士会马上联系医生。在语言沟通方面，她们也很讲究措辞、态度、语气和方式，说话时永远面带微笑，不能态度生硬。即使是患者在发怒时，也要保持职业形象。如果有患者对某护士的服务不满意，可以投诉，在误会解除之前，这位护士将尽量避免接触该患者，以免加深不愉快的印象。

乌鲁木齐人民医院护士的敬业精神给我留下了非常深刻的印象。她们是带着快乐的心情来上班。其实她们的护理工作是非常繁重而琐碎的，除了做好大量的基础护理以外，还要配合医生完成很多诊疗性的工作，以及安排患者院外随访等，但是她们依然很乐观的在自己的工作岗位上，能够把自己主管的病人整理的

清爽干净，她们认为“让病人感觉舒适、愉悦！”这才是护理的意义所在，体会到护理的精髓在于体贴，在于照顾，在于人与人之间互相关怀带来的一种认同感！

本次进修学习，开拓了视野，拓宽了思维，理念的转变是我最大的收获，同时也发现了自己在平时的工作中存在很多的不足，今后，我将继续努力学习更多的知识与技能，在护理岗位上更好的为患者服务。

王海燕

2012年8月22日

第四篇：进修报告

心血管专科护士培训心得体会

首先感谢院领导、护理部、科主任及护士长给我这次机会，我很荣幸参加为期三个月的由重庆市卫计委主办的心血管专科护士培训班，同时也感谢科室的护士姐妹们及新桥医院的老师们给我的支持和帮助。通过三个月的脱产学习，于2015年6月获得心血管专科护士资格证，现将学习收获总结如下：

培训包括两个阶段：第一月是理论学习，接下来两个月是临床实践学习，临床实践基地在新桥医院，其中轮转了心内科病房及ccu，心外科ICU、心电图室。

一、系统地学习理论知识及新进展

专科理论知识和相关理论知识，培训内容包括心血管专科疾病及新技术、新进展。还涉及如何做好一个心血管专科护理、护士职业生涯规划、护理沟通技巧、论文的撰写、医学文献的检索等等，为我们授课的老师来自第三军医大学的教授和新桥医院各科室的医学、护理专家。通过一个月的系统学习，使我的心血管专科知识有了很大的提高。

二、临床实训

临床实训的第一个科室是心内科病房，心内科共有230张床位，护士有80余人。心内科成立于1953年，分为心脏血管内科病房、心脏重症监护室、心导管室、心电图室和实验室。在冠心病、心律失常、心肌病、先心病、心力衰竭和外周血管方面形成特色和优势。心内科具有一支强大的护理队伍，护士专业基础知识牢固，学习气氛也很好，团结协作精神也很强，具有丰富的临床经验和分析问题、解决问题的能力，注重病人的病情评估和病情观察，并能运用有效的带教技能言传身教，这都是我在她们那里看到的闪亮点也是我们所要学习的重点。在心内科的每一天都是充实的，每天第一事：早晨在他们的多功能学习室参加多媒体大交班。晨交班后有学习和总结，周一是科主任对上一周的总结和点评。周二是医生组的讲课，包括最新的指南的讲解，周三护理组资深老师运用PPT讲课，内容丰富，获益颇多。周五是科主任对科室本周总结和对科室下周的计划，接下来医生组的病历讨论。在这么一个学习氛围浓厚的环境，只要用心，真的可以学到很多东西。病区管理也是值得我们学习的地方：在病人多，床位周转率快，护理工作十分繁重的情况下，病区宽敞明亮，物品摆放有序；病房安静，整洁，舒适，病区所有物品都做到五常法（常组织、常清洁、常整顿、常规范、常自律），护士管理意识非常强。在科室管理方面：护士积极参与院内的感染控制、教学、皮肤、重症组，并负责参加院内外的相关会议和培训，并负责传达会议精神。培训本科室护士相关知识和技能并进行把关。负责每月或季度对所管项目采集相关数据，进行汇总、分析、组织人员商讨，对所存在的问题提出改进措施，并进行回访。抢救车管理十分规范也是一特色：抢救车盖上张贴打印非常醒目的目录，下面抽屉也有醒目的标识。抢救药品和物品分门别类放置，易拿取，无拥挤凌乱现象。里面还放置了抢救病人护理记录单，便于抢救时记录，快捷规范，护士长不定时抽问药品放置顺序，急救车管理员每周检查一次。在管理新方法方面：在床位缩减、病人多，等候入院时间长的情况下，心内科率先在今年5月开展了院前管理中心，院前管理中心有各3名医生和护士，对患者入院前评估排好入院的先后顺序，作好院前为介入手术病人建立快速的绿色通道，在院前管理中心做好院前筛查，完善相关的术前检查，预约号入院日期，手术患者入院当日可进行相关的的手术治疗，缩短了患者术前等待的时间，并缩短了总的住院日，为病人减少了经济负担的同时也加快了床位的周转率。在一定程度上缓解了病人在大型医院一床难求的困局。

心外科ICU是我轮转的第二个科室，心外科ICU8楼有24张床位，主要收治先心术后和危重的患儿。ICU9楼有15张床位，主要收治成人患者，如冠脉搭桥术、先心术后患者。走进心外科ICU的第一感觉是忙碌、安静、整洁。病区的物品、仪器摆放有序，标识清晰。墙面张贴有各种管道护理的要点和各种仪器的操作流程、报警的原因与处理和注意事项，大多是我们工作中经常会用到或遇到的问题，非常实用，让即使是刚上班的护士也不会觉得慌乱。备用病床的监护仪、呼吸机处于清洁、备用状态。每个病床床头柜有一个篮子专门放置水杯、纸巾等小物品，避免桌面的凌乱。床尾有两个夹子来夹放胸片、CT等报告方便医生查阅的同时也使床单元的物品摆放更加规范。在病人管道管理方面十分到位：入住心外ICU的患者都是冠脉搭桥术、各种复杂先心术后的患者，术后有心包引流管、胸腔引流管、中心静脉置管、呼吸机、留置尿管，多通道静脉输液管道等繁多的管道，都有清晰的的标识，管道安放有序，无凌乱感。有排班方面：护士长在晨交班完毕后根据患者的数量和病情，灵活安排护士分管床位，新老搭配两人一组分管5张床，对病人实行责任制整体护理，为病人提供优质的护理服务的同时保证了护理的安全和人力资源的合理利用。在病人管理方面：心外科ICU的护士老师们给我的最深的印象是专业知识扎实，十分敬业。面对冠脉搭桥等大手术或疑难心血管术后的病人从容不迫，十分有序的连接好各种管道和仪器的连接线，迅速对病人作出初步评估，制定好护理计划和护理措施，并能准确根据病情和病人的需要作出相应的调整。管床护士对自己分管病人病情十分熟悉，并能根据血气分析等化验值作出准确的判断及时汇报给医生。压疮管理也非常到位：对于全麻术后的病人，压疮的发生率为零。交接班认真查看病人的皮肤，不放过每一个细节，并根据病人的情况及时采取的干预措施。、在心电图室期间，有幸聆听了钟杭美主任、罗昭林教授的精彩讲课，把心电图知识的重点、难点用深入浅出的方法传授给我们。通过大量的看图，不断的分析和总结，我的心电图知识有了一定的进步。

培训期间老师们对专业精益求精和敬业敬业精神感染着我们，领略了新桥医院的护理精英们为护理事业所作出的努力与贡献。同时也使自己对护理这份工作增添了更多的热情，学习是一种形式，感受是一种心得和收获，学以致用是我们的目的。在此，再次感谢医院给我提供了这样一次宝贵的学习机会，让我接触并学习了先进的护理技术及护理理念。亲身体念和感受了一个具有先进管理经验和优良的服务体系医院的运作模式。学习是我拓宽了视野，增长了见识，我会把所学到好的方法和经验运用到实际临床工作中来，更好地为病人服务，把护理工作做得更好。

心内科：王建琼

2015年6月15日

第五篇：兽医微生物实习报告

一．实习目的为了使学生能够理论联系实际，通过亲自实地解剖感染小鼠，对小鼠的心、肝、脾进行麦康凯琼脂平板划线培养，以柯赫法则为这次实习的主线，达到鉴定出小鼠感染的菌种的目的，熟练运用微生物实验课的所涉及的实验操作和方法，提高实验动手能力，分析实验过程中可能出现的问题，并解决问题。特开设微生物教学实习，掌握基本技能，加深理论部分的理解，能够独立诊断出传染病病菌，获得严谨的科学实验素养。

二．实习材料

实验动物：一只被感染小鼠，一只健康小鼠

实验器械，主要包括：小鼠解剖工具手术剪、镊子、蜡盘、钉子，接种棒、酒精灯、打火机、记号笔、手套、载玻片、枪头、注射器、离心管。

实验材料：麦康凯琼脂平板、各种染色液（结晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黄水）、蒸馏水、培养基（普通肉汤培养基、蛋白胨培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、固体培养基）、PBS重悬液、生化试验材料（微量发酵管（葡、乳、枸、尿素、麦、甘醇、蔗、硫）、对二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基红、vp甲乙液）。

实验主要仪器：离心机，分光光度器，温箱，摇床，超净工作台

三．实习内容

以柯赫法则为主线，通过对感染小鼠的剖解采样、分离培养、镜检、扩增培养，然后把得到的纯培养物对健康小鼠进行再次接种以获得被感染小鼠，再次重复以上操作，把获得的纯培养物通过镜检观察和做生化实验来鉴定出感染小鼠的致病菌。

四．实习操作进程

第一天：实验设计、讨论症状、分离剖解实验设计：以小组为单位进行实验设计，明确此次实验主要法则是：柯赫法则。在老师的指导下确定此次实习的主要步骤，讨论实验中可能遇到的问题以及注意事项。讨论症状：比较观察健康小鼠与病鼠，可见到病鼠一般呈萎靡状，不活跃。每组领取一只感染小鼠观察症状，体表基本正常。分离剖解：先将麦康凯琼脂平板分三区，依次写上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴，将小鼠摇晕，采用颈椎脱臼法将小鼠处死。将小鼠尸体仰卧固定于蜡盘上，充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔软部用剪刀剪一小口，然后从该小口处往上、往下剪将皮毛剥离，剥离腹膜暴露出肝脏和脾，可观察到有轻微的肝肿胀，颜色变淡。将肝和脾切开一小口，用接种环取样，在麦康凯琼脂平板的相应区域进行划线分离。再打开胸腔观察，可见胸腔有出血现象和凝血块，剪开心包膜，将心脏切一小口，用接种环取样，在麦康凯琼脂平板的相应区域进行划线分离。写上班级组别，日期，置于温箱中培养至第二天早上8点。

第二天：挑取单菌落，镜检，扩增培养，重悬，测OD配浓度，小鼠腹腔注射挑取单菌落：观察麦康凯琼脂平板上菌落的形态为圆形，边缘整齐，表面光滑，暗红色，圆心处颜色较边缘浅。挑去单个菌落，画上记号准备做后续试验。镜检：选取所挑选菌落的一半进行抹片。取干净玻片，滴半滴去离子水，用接种环挑取菌进行抹片、干燥固定、采用格兰染色法染色：草酸铵结晶紫染色1-2’，水洗，革兰氏碘液媒染1-2’，水洗，95%酒精脱色约30’’-1’，水洗，沙黄水溶液复染10 ’ ’-30 ’ ’，水洗。吸干，镜检。观察到该菌被染成红色，是格兰阴性菌。扩增培养：选取剩余的菌接种到肉汤培养基中，置于温箱培养9个小时至菌的生长对数期。4 重悬测OD值配浓度：下午5点左右，将培养的菌转入无菌小管中离心，离心后可见菌沉

于管底，在超净工作台内操作，去上清液，用枪头吸取PBS液至去了上清液的菌管中，反复吹打使其重悬，然后再次离心，去上清，重悬，通过分光光度计测得OD590的值，配成2*10^7CFU浓度的菌液。小鼠腹腔注射：每组挑选一只健康小鼠，在头部或尾部做上记号，用右手抓住鼠尾，将其摇晕，令其前爪抓住铁丝盖上，然后用左手的拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤，并翻转左后使其腹部朝上，将其尾巴夹在左手掌与小指之间，右手把持注射器吸取2mL菌液，在股后侧面插入针头，先刺入皮下，后进入腹腔，注射时阻力，皮肤也无泡隆起。注射完将小鼠放回鼠笼即可。

第三天：观察小鼠发病情况

小组成员分时间段观察小鼠感染情况，见小鼠濒死的尽快解剖接种分离致病菌。若 一整天未见小鼠有异常情况的等第二天解剖

第四天：剖解划线培养

虽然小鼠未见萎靡，由于预订的感染时间差不多，可以进行解剖接种第一天的操作，可见体表有淤血点，剖开的小鼠肝脏流出大量的血液。其余均同第一天的操作，将麦康凯琼脂平板的上所接的菌置于温箱中培养。

第五天：生化鉴定

观察到平板上只有一个较小的暗红色菌落，挑取该菌落进行扩增培养9小时至细菌生长的对数期。下午6点观察，培养液依旧是澄清的，很可能没有长菌。为做进一步的验证，进行生化试验。将该菌接入微量发酵管（）和蛋白胨以及葡萄糖蛋白胨中，培养至第二天看结果。

第六天：观察结果，整理报告

生化试验无任何反应，说明接的菌为杂菌或污物，整理实验报告并分析失败原因。

六．实验结果与分析

此次试验失败

给小鼠攻毒，未能分离出致病菌，因此也无法鉴定出小鼠被感染的病原菌为何种肠杆菌科

试验失败原因可能有：

1、接种棒火焰消毒后，等待冷却的时间过短，接种棒接种菌时将菌烫死

2、由于小鼠的免疫力强，使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了，因此未接种到治病菌

3.给小鼠注射的量或浓度还不够未能达到使小鼠感染的目的4、在第一次从小鼠体内分离出来的菌可能不是致病菌，或者麦康凯琼脂平板上培养出来的 菌落不止一种，而我们挑选到的某一菌落恰好不是致病菌。

5、在进行腹腔注射时，可能没有注射到腹腔，而只注射到皮下，或者其它部位。

6、采样时可能由于接种环未完全伸入到心、肝、脾的组织中，或者伸到的组织里 恰好没有致病菌

7、可能由于小鼠感染的时间过短，还未达到菌生长曲线的高峰期

七．思考与总结此次试验失败的原因有很多在我看来最有可能的原因有以下几点：

（1）小鼠免疫:由于这些小鼠是实验室的小鼠，长期被用来做各种致病菌的实验，使得它们获得一定的免疫，所以虽然注射了足够使小鼠感染发病的剂量，但也被小鼠免疫掉了，而无法从小鼠体内获得病料。

（2）病料不够：从学姐那了解到，她们做攻毒实验的动物，都是将整个组织块磨碎以后，再接到培养基上，而我们做实验是只是用接种棒挑取一点，接种棒上粘到的病料比较少或根本没有，因此培养不出菌。

（3）挑取的单菌落未必是致病菌：由于平板上长出可能不止一种菌，因此挑到的单菌落，未必是致病菌。

2为什么扩增出来的菌不直接注射小鼠，而要经过离心？

因为菌可能会产生毒素，若直接注射可能就无法判断使小鼠发病的到底是毒素作用，还是因为病菌在小鼠体内繁殖感染而造成的。肠杆菌科有哪些，特征有哪些？

学生自我鉴定：

2011年5月16号到21号期间进行了维持一周的微生物实习，在微生物实习期间，我能够做到主动和小组成员交流、合作、解决问题，认真完成实验操作，学会灵活运用自己的专业知识解决问题。

通过这段时期的实习，我们对无菌操作有了进一步的理解，掌握了仪器操作的基本技能，巩固了理论部分的知识，也了解到公共卫生意识的重要性。

实习不过短短的五天，在这短暂的五天内，我们有过发现时的喜悦，有过解剖小鼠时的紧张，有过培养不出菌时的困惑，但最终我们收获了知识，也收获了友谊，在合作中共同进步，在困难中共同进退，一切的困难便能迎刃而解。

这次微生物实习为我们专业的继续拓展提供了宝贵的经验，为动物医学本科专业的我们学习后续课程奠定扎实的基础。