武汉大学细胞生物学试卷及答案教案(小编推荐)

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第一篇:武汉大学细胞生物学试卷及答案教案(小编推荐)

mitochondrion线粒体

呈颗粒或短线状,能高效地将有机物中储存的能量转换为细胞生命活动直接能源ATP的半自主性细胞器。2 Apoptosis凋亡

即细胞受基因调控的主动的生理性自杀行为,这种细胞死亡方式是正常的生理过程。Signal hypothesis信号假说

1975年由Blobel和Sabatini提出,即分泌蛋白可能携带N端短信号序列,一旦该序列从核糖体翻译合成,结合因子和蛋白结合,指导其转移到内质网膜,后续翻译过程将在内质网膜上进行。该假说解释了游离核糖体产生非分泌蛋白,而内质网附着核糖体能产生分泌蛋白的差异存在于蛋白本身。4 Cyclin周期蛋白

含量随细胞周期进程变化而变化,一般在细胞间期内积累,在细胞分裂期内消失,在下一个细胞周期又重复这一消长现象的蛋白,为诱导细胞进入M期所必需。5 Stem cell干细胞

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。干细胞具有自我更新和几乎无限增殖的能力,具有迁移至某些特定组织和排除有毒化学因子的能力。6端粒telomere

是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构,它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体,随着细胞分裂而逐渐缩短。其DNA序列相当保守,一般有多个短寡核苷酸串联在一起构成。人类的端粒DNA长5~15千碱基对。它具有保护线性DNA的完整复制、保护染色体末端和决定细胞寿命等功能。

7联会复合体(synaptonemal complex,SC)

在联会的部位形成的一种特殊的复合结构,沿同源染色体长轴分布,宽1.5~2um,在电镜下可以清楚地显示其显微结构,被认为与同源染色体联会和基因重组有关。是减数分裂偶线期两条同源染色体之间形成的一种结构,主要由侧生组分、中间区和连接侧生组分与中间区的SC纤维组成,它与染色体的配对,交换和分离密切相关。8分子伴侣molecular chaperone

一类进化上高度保守的蛋白质家族,协助细胞内蛋白质合成、分选、折叠与装配等。9多聚核糖体polyribosome

多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA分子上,形成的似念珠状结构,能够高效地进行肽链的合成。

10核迁层 核纤层nuclear lamina 紧贴内层核膜下,是一层由纤维蛋白构成的网络结构,它与胞质中间丝、核基质有密切关系。

核纤层普遍存在于高等真核细胞中,是内层核被膜下纤维蛋白片层,其纤维直径为10毫微米左右,纤维纵横排列整齐呈纤维网络状。核纤层在核内与核基质连接,在核外与中等纤维相连,构成贯穿于细胞核和细胞质的统一网架结构体系。

1流式细胞分析

流式细胞计的基本结构:流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。NO作用机理

(NO是作用于邻近细胞。)

NO在血管内皮细胞和神经细胞中生成,由一氧化氮合酶(NOS)催化,以L精氨酸为底物,NADPH为电子供体,生成NO和L瓜氨酸。

NO的作用机理:乙酰胆碱→血管内皮G蛋白耦联受体→激活磷脂酶C→通过第二信使使Ca2+浓度升高→一氧化氮合酶→NO→平滑肌细胞→鸟苷酸环化酶→第二信使cGMP→血管平滑肌细胞的Ca2+离子浓度下降→平滑肌舒张→血管扩张、血流通畅。

血管神经末梢释放乙酰胆碱作用于血管内皮细胞G蛋白耦联受体并激活磷脂酶C,通过第二信使IP3导致细胞质Ca2+水平升高。当Ca2+结合钙调蛋白后,刺激NO合酶催化精氨酸氧化形成瓜氨酸并释放NO。NO通过扩散进入邻近平滑肌细胞,与鸟苷酸环化酶活性中心的Fe2+结合,改变酶的构象,导致酶活性增强和cGMP水平增高。而cGMP通过cGMP依赖的蛋白激酶G的活化,抑制肌动-肌球蛋白复合物信号通路,导致血管平滑肌舒张,血管舒张,从而减轻心脏负荷和心肌的需氧量。(硝酸甘油在体内转化为NO,用于治疗心绞痛)血管内皮细胞和神经细胞是NO的生成细胞。

NO充当了LTP产生过程中突触后神经元将信息反馈到突出前膜的逆行信使。

3细胞松弛素(cytochalasim)是一组真菌的代谢产物,与微丝结合后可以将微丝切断,并结合在微丝末端阻抑肌动蛋白在该部位的聚合,但对微丝的解聚没有明显影响,因而用细胞松弛素处理细胞可以破坏微丝的网络结构,并阻止细胞的运动。用其处理分裂期细胞,则不能形成收缩环使细胞质分裂,最终形成多核细胞。处理迁移的细胞,使其伪足遭到破坏,而运动受到阻止。溶酶体

肿瘤(tumor)是机体在各种致癌因素作用下,组织细胞在基因水平上失去对生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的新生物。一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。抗肿瘤药的作用机制和分类

抗肿瘤药(Antitumor Drugs)是可抑制肿瘤细胞生长,对抗和治疗恶性肿瘤的药物。

过去的药理学曾把抗肿瘤药依据其性质和来源分为6类:即烷化剂、抗代谢药物、抗生素、植物药、激素和杂类。但以上分类不能代表药物的作用机制,来源相同的药物可能作用机制完全不同。所以,目前多根据其作用机制分为以下6类: 1.1细胞毒类药

1.作用于DNA化学结构的药物:

(1)烷化剂:如氮芥、环磷酰胺和噻替派等,能与细胞中的亲核集团发生烷化反应。DNA中鸟嘌呤NT易被烷化,使DNA复制中发生核碱基错误配对。受烷化的鸟嘌呤可以从DNA链上脱失,引起密码解释错乱。双功能基的烷化剂常与DNA双链上各一鸟嘌呤结合形成交叉联结妨碍DNA复制,也可使染色体断裂。DNA结构功能的破坏可导致细胞分裂,增裂停止或死亡。少数受损细胞的DNA可修复而存活下来,引起抗药。

(2)铂类化合物:铂类金属化合物如顺铂(DDP)可与DNA结合,破坏其结构与功能。(3)蒽环类:可嵌入DNA核碱对之间,干扰转录过程,阻止mRNA的形成。如柔红霉素(DNR)、多柔比星(ADM)、表柔比星(EPI)、吡柔比星(THP)及米托蒽醌等都是临床上有效的蒽环类化合物。放线菌素D(ACD)也属此类药等。

(4)破坏DNA的抗生素如丝裂霉素(MMC)的作用机制与烷化剂相同,博来霉素(BLM)可使DNA单链断裂而抑制肿瘤的增殖。2.干扰核酸生物合成的药物:

属于细胞周期特异性抗肿瘤药,分别在不同环节阻止DNA的合成,抑制细胞分裂增殖,属于抗代谢药。根据药物主要干扰的生化步骤或所抑制的靶酶的不同,可进一步分为:① 二氢叶酸还原酶抑制剂(抗叶酸剂),如氨甲蝶呤(MTX)等;②胸苷酸合成酶抑制剂,影响尿嘧啶核苷的甲基化(抗嘧啶剂),如氟尿嘧啶(5FU),喃氟尿嘧啶(FT207)及优福定(UFT)等;③ 嘌呤核苷酸互变抑制剂(抗嘌呤剂),如巯嘌呤(6MP),6-硫鸟嘌呤(6-TG)等;④核苷酸还原酶抑制剂,羟基脲(HU);⑤ DNA 多聚酶抑制剂,如阿糖胞苷(AraC)等。3.作用于核酸转录药物:

作用于核酸转录药物包括放线菌素D、阿克拉霉素和普拉霉素,均是由微生物所产生的抗肿瘤药,为细胞非特异周期药,对处于各周期时相的肿瘤细胞均有杀灭作用。4.拓扑异构酶抑制药:

直接抑制拓扑异构酶,阻止DNA复制及抑制RNA合成。包括拓扑异构酶Ⅰ抑制药和拓扑异构酶Ⅱ抑制药,拓扑异构酶Ⅰ抑制药的代表药有依立替康、拓扑替康、羟喜树碱;拓扑异构酶Ⅱ抑制药的代表药有依托泊苷、替尼泊苷。5.干扰有丝分裂的药物:

(1)影响微管蛋白装配的药物,干扰有丝分裂中纺锤体的形成,使细胞停止于分裂中期,如长春新碱(VCR)、长春花碱(VLB)、紫杉醇及秋水仙碱等。

(2)干扰核蛋白体功能阻止蛋白质合成的药物,如三尖杉酯碱。

(3)影响氨基酸供应阻止蛋白质合成的药物如门冬酰胺酶;可降解血中门冬酰胺,使瘤细胞缺乏此氨基酸,不能合成蛋白质。

1.2 改变机体激素平衡而抑制肿瘤的药物(激素类): 与激素相关的肿瘤如乳腺癌,前列腺癌,子宫内膜腺癌等可通过激素治疗或内分泌腺的切除而使肿瘤缩小。这说明这些起源于激素依赖性组织的肿瘤,仍部分地保留了对激素的依赖性和受体。通过内分泌或激素治疗,直接或间接通过垂体的反馈作用,改变原来机体的激素平衡和肿瘤生长的内环境,可以抑制肿瘤的生长。另一类药物如他莫昔芬则是通过竞争肿瘤表面的受体干扰雌激素对乳腺癌的刺激。而肾上腺皮质激素则可通过影响脂肪酸的代谢而引起淋巴细胞溶解,因之对急性白血病和恶性淋巴瘤有效。激素类药包括雌、孕、雄激素和拮抗药。

1.3生物反应调节剂

生物反应调节剂是一类具有广泛生物学活性和抗肿瘤活性的生物制剂,对机体的免疫功能有增强、调节作用。1.4单克隆抗体

利用基因工程技术所生产的抗肿瘤单克隆抗体(Monoclonal Antibody)已近千种,利妥昔单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、群司珠单抗,通过对受体的高选择亲和性,通过抗体依赖性的细胞毒作用,来杀灭肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞增殖。

二、Weel Cdc基因(cell division cycle gene)细胞分裂周期相关基因

第二篇:武汉大学《信息检索》试卷及答案(两套)

三.选择填空(4 x 5分=20分)

1.C,d,g,I,j

2.a,b,e,g,h

3.c,d,e,g, h

4.c,d,f,g

此题为多项选择题,选错者不倒扣分,但所选答案不得多于5个。

1.下列中不能用于查找期刊论文引用信息的有:

a.SSCI b.CSSCI c.Journal Citation Report d.Ulrich’s International Directory of Periodicals e.SCI

f.A&HCI g.ProQuest Digital Dissertations h.Web of Knowledge i.VIP Chinese Scientific Journal Database

j.Chinese Enterprises and Companies Database

2.检索图书馆学、信息管理学的期刊论文,可用的检索工具有:

a.LISA b.ISA c.BA d.CA e.Web of Knowledge f.Ei g.SSCI h.SCI i.ProQuest Digital Dissertations

3.下列中可用于查找机构信息的有:

a.ProQuest Digital Dissertations b.Ulrich’s International Directory of Periodicals

c.Chinese Enterprises and Companies Database d.Foundation Directory e.Peterson’s Gradline

f.Who is Who g.World of Learning h.Encyclopedia of Associations

4.下列中可用于查找期刊论文信息的有:

a.ProQuest Digital Dissertations b.Ulrich’s International Directory of Periodicals

c.ABI/INFORM d.Elsevier e.Journal Citation Report f.Chinese Academic Journal Fulltext Database

g.OCLC Electronic Collections Online 武汉大学信息管理学院2008-2009学第二学期

《信息检索》考试试卷(A)答案

一、名词解释(5x4=20分)1.信息检索(Information Retrieval)是指将信息按一定的方式组织和存储起来,并根据信息用户的需要找出有关信息的过程。

2.引文索引是一种将科技期刊、专刊、专题丛书等文献资料所发表的论文后所附的参考文献的作者、题目、出处等项目,按照引证与被引证的关系进行排列而编制的索引。

3.China Academic Library and Information System中国高等教育文献保障系统。

4.邻近检索是用一些特定的算符(位置算符)来表达检索词与检索词之间的关系,并且可以不依赖叙词表而直接使用自由词的检索方法。

5.搜索引擎(Search Engine)是一种 Web 上应用的软件系统,它以一定的策略在 Web 上搜集和发现信息,在对信息进行处理和组织后,为用户提供Web信息查询服务。用户可以通过主题浏览和关键词检索的方式搜索所需信息。

二、简答(5x6=30分)

1.电子图书有哪些特点?

存储空间大(磁介质存储密度高、容量大,一张光盘甚至可以存上百部中外名著)、节省资源(不需消耗纸张等物质资源)、使用方便(借助于专门的软件便可使用,可以便捷地编辑和查找特定内容)、传播过程中的无独占性和无损坏性(可以同时供多人使用,可无失真地重复使用)。

2.对搜索引擎的选择与比较主要从哪些方面考虑?

收录范围(索引库中内容的数量、地域范围、语言种类、资源类型、资源的深度和广度)、分类(分类方式是否合理多样、类名是否规范、分类的广度与深度是否合适)、检索功能与效果(是否包含浏览检索和关键词检索功能、是否支持布尔检索、截词检索等高级检索功能、是否有检索帮助和提示功能、检索结果和查全率、查准率及响应时间)、结果处理(结果的排序方式是否多样、是否有去重功能、能否按照用户反馈动态调整和显示检索结果)、页面组织(页面组织是否清晰、类目设置是否合理、界面是否友好)、其他功能与服务(能否满足用户多方面的信息需求)、用户评价(是否有用户评价及统计功能)。

3.网络信息选择的标准有哪些?

权威性(网站及其建站机构的权威性和知名度)、内容(内容应当客观、切题、标题清楚、组织规范、逻辑性强、有明确的范围和边界、有足够的深度和广度、有自己的特色)、时效性(网站内容及其链接应当新颖、应明确地说明其创建和更新周期)、网页设计(应以合理的方式综合使用图像、声音和文字、界面的友好性、清晰直观)、适用性(应保证用户能用较短的时间、点击较少的链接找到所需信息)、用户对象(信息的专业化程度应能满足目标用户的特定需求)、访问次数或被链接次数(网络信息的被访问和被其他网页链接的次数)。

4.查找国内外引文与学位论文分别有哪些数据库?每类中分别举2个英文数据库(包括全称、简称与中译)和1个中文数据库。

(1)查找国内外引文可用引文索引数据库,如查找国外引文可选择《科学引文索引》(SCI)、《社会科学引文索引》(SSCI)、《艺术与人文科学引文索引》(A&HCI),即著名的三大引文索引SCI、SSCI、AHCI;查找国内引文可选择中国科学引文数据库(Chinese Science Citation Database,简称CSCD)、中文社会科学引文索引(Chinese Social Science Citation Information,简称CSSCI)等。

(2)查找国内外学位论文可用学位论文索引与摘要数据库,如CALIS的《学位论文库》,万方数据资源系统中的《中国学位论文数据库》,CNKI的《优秀硕博士论文数据库》,美国博硕士论文库PQDD(ProQuest Digital Dissertations),美国学位论文网络数字图书馆NDLTD(Networked Digital Library of Thesis and Dissertations)等。

5.除商业数据库和搜索引擎外,还可以从哪些途径获取网络信息资源?请至少给出5种,每种举一例。

学科信息门户(如CALIS的学科导航库、SOSIG等)、数字图书馆(如国家数字图书馆)、开放获取资源(如OA期刊、机构知识库等)、专业机构的网站、专业人员的个人网站或博客、国内外政府机构的网站、国家精品课程网站、国外大学的免费课程资源网站等。鼓励自由发挥。

三、选择填空(5x5=25分)

此题为多项选择题,选错者不倒扣分,但全选者不得分。

1.C,d,g,I,j 2.a,b,e,g,h

3.c,d,e,g, h 4.c,d,f,g

四、论述题(30分)

1.从哪些方面全面地查找关于某一主题的研究成果?(20分)

(1)图书的查找,包括图书馆目录、网络书店、读秀、Google Books等图书搜索引擎的使用等;

(2)期刊论文的查找,包括检索国内外的期刊数据库、引文索引库和OA期刊,利用Google Scholar查找等;

(3)学位论文的查找,包括国内外学位论文库的查找;

(4)会议论文的查找,可以通过搜索引擎或专门的会议文献数据库查找相关会议文献;

(5)专利等信息的查找,包括国内外专利数据库、专利局网站的使用;

(6)有关机构和网站等资料的查找等。

2.学习“信息检索”这门课,你最大的收获是什么?请写出你对提高本课教学质量的建议(10分)。

自由发挥,但是,可从同学的答案中看出其是否认真听讲和认真完成平时作业。

此题为多项选择题,选错者不倒扣分,但所选答案不得多于5个。

1.c d e h i

2.a c d e h

3.a c d f h

4.b d e f g

5.a b g i j

1.检索法学论文,可用的检索工具有:

a.ISA b.LISA c SSCI d.SCI e.LEXIS-NEXIS f.Ei g.BA h.EBSCO i.ProQuest

2.下列中可用于查找机构信息的有:

a.Foundation Directory b.Ulrich’s International Directory of Periodicals

c.Chinese Enterprises and Companies Database d.World of Learning e.Peterson’s Gradline

f.Who is Who g.ProQuest Digital Dissertations h.Encyclopedia of Associations

3.下列中可用于查找图书信息的有:

a.British National Bibliography b.American Biography c.http://www.xiexiebang.comKI的《优秀硕博士论文数据库》,美国博硕士论文库PQDD(ProQuest Digital Dissertations),美国学位论文网络数字图书馆NDLTD(Networked Digital Library of Thesis and Dissertations)等。5.请写出国际上著名的三大引文索引的英文全程,简称,与对应的中文名? SCI(科学引文索引)Science Citation Index, SCI、EI(工程索引)Engineering Index、ISTP(科技会议录索引)Index to Scientific & Technical Proceedings 是世界著名的三大科技文献检索系统 6.国际上最著名的会议论文数据库是什么?查找某学科有哪些三大引文索引的源刊物,用什么数据库?

会议论文数据库包括:会议论文索引与摘要,如CALIS会议论文数据库,万方数据资源系统《中国学术会议论文数据库》,OCLC会议数据库——《在会议上提交的文章索引》(Papers First),《会议出版物索引》(Proceedings),Web of Knowledge的会议录引文索引CPCI(Conference Proceedings Citation Index)。7.试论述网络信息选择与评价的主要标准有哪些?

权威性(网站及其建站机构的权威性和知名度)、内容(内容应当客观、切题、标题清楚、组织规范、逻辑性强、有明确的范围和边界、有足够的深度和广度、有自己的特色)、时效性(网站内容及其链接应当新颖、应明确地说明其创建和更新周期)、网页设计(应以合理的方式综合使用图像、声音和文字、界面的友好性、清晰直观)、适用性(应保证用户能用较短的时间、点击较少的链接找到所需信息)、用户对象(信息的专业化程度应能满足目标用户的特定需求)、访问次数或被链接次数(网络信息的被访问和被其他网页链接的次数)。

网络信息资源评价的标准:1网站性能评价:网址评价,形式评价(确定可访问性,确定帮助信息质量,确定使用技术的恰当性),检索功能评价(检索功能是否完善,有否提供简单检索,二次检索,高级检索,检索功能的使用说明,有否提供搜索引擎,搜索引擎的界面),编排设计(简单美观,结构合理,易于浏览),链接(从该网站到别的网站的链接,从别的网站到该网站),传输速度(是否使用大量的图片,是否自动下载音乐或其他多媒体文件,是否将有价值的信息安排在首页,主页速度),2网站内容评价权威性,客观性,独特性,时效性,有序性,交互性,费用,写作质量,网络信息安全

8.请简要概括个人文献管理软件的主要功能。

个人文献管理软件的主要功能:维护书目文献数据库;从其他数据库中下载书目文献;为写作产生合适的书目文献格式;帮助用户完成科技论文的写作。

10.请结合本人检索实践,谈谈信息检索对研究生的益处,获取研究资料工程中存在哪些困难,鼓励在授课内容基础上的自由发挥。

益处:获取旅游信息,帮助省钱,查找官方资料防止上当,提高素质抓住机会,提高效率,看国外的教材和最新课程网站的readings,减轻记忆负担,预测未来(摘自黄如花课件)

第三篇:武汉大学分析化学2005试卷A

武汉大学2005-2006学第一学期《分析化学》期末

考试试卷(A)

一.填空(每空1分。共35分)

1.写出下列各体系的质子条件式:(1)c1(mol/L)NH4

H2PO

4(2)c1(mol/L)NaAc+ c2(mol/L)H3BO

32.符合朗伯-比尔定律的有色溶液,当有色物质的浓度增大时,其最大吸收波长

,透射比

。3.检验两组结果是否存在显著性差异采用

检验法,检验两组数据的精密度是否存在显著性差异采用

检验法。4.二元弱酸H2B,已知pH=1.92时,δ

=δ

;pH=6.22时δ

=δ, 则

H2B HB-HB-B2-H2B的pKa1=

,pKa2=。

5.已知(Fe3+/Fe2+)=0.68V,(Ce4+/Ce3+)=1.44V,则在1mol/L H2SO4溶液中用0.1000 mol/L Ce4+滴定0.1000 mol/L Fe2+,当滴定分数为0.5时的电位为

,化学计量点电位为

,电位突跃范围是

。6.以二甲酚橙(XO)为指示剂在六亚甲基四胺缓冲溶液中用Zn2+滴定EDTA,终点时溶液颜色由_________变为__________。7.某溶液含Fe3+10mg,用等体积的有机溶剂萃取一次后,该溶液中剩余0.1mg,3+则Fe在两相中的分配比=

。8.容量分析法中滴定方式有

, ,和

。9.I2与Na2S2O3的反应式为

。10.以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,测量某物质对不同波长光的吸收程度,所获得的曲线称谓

;光吸收最大处的波长叫做

,可用符号

表示。11.紫外可见分光光度计主要由

,,四部分组成.12.桑德尔灵敏度以符号

表示,等于

;桑德尔灵敏度与溶液浓度

关,与波长

关。13.在纸色谱分离中,是固定相。

14..定量分析过程包括

,,和。

二、简答题(每小题 4分,共20 分,答在所留空白处)1.什么是基准物质?什么是标准溶液? 2.分别简单阐述酸碱滴定指示剂,络合滴定指示剂, 氧化还原滴定指示剂和沉淀滴定指示剂指示滴定终点的原理.3.在进行络合滴定时,为什么要加入缓冲溶液控制滴定体系保持一定的pH? 4.吸光光度法中测量条件的选择应注意哪几点?

5.分析化学中常用的分离和富集方法有哪些?(回答不能少于8种方法)

三、分析方法设计(共15分,写在答题纸上)

1.设计测定含有中性杂质的Na2CO3与Na3PO4混合物中二组分质量分数的分析方案。用简单流程表明主要步骤、滴定剂、指示剂、结果计算公式。(7分)2.某矿样溶液含有Fe3+,Al3+,Ca2+,Mg2+,Mn2+,Cr3+,Cu2+,Co3+,Ni2+等离子,其中铁,铝,钙,镁等含量较高,而锰,铬,铜,镍属万分之一级含量。用学过的知识试设计分离、测定它们的分析方法,(用简单流程方框图表达,并尽可能写出分离方法和测定方法及条件和所用的主要试剂与用途)。(8分)四.计算(共40分,写在答题纸上)1.称取含 KBr 和 KI 的混合试样 1.000 g, 溶解并定容至 200 mL后, 作如下测定:(1)移取 50.00 mL试液, 在近中性条件下, 以溴水充分处理, 此时I-量转变为 IO3-。将溴驱尽, 加入过量 KI 溶液, 酸化, 生成的 I2采用淀粉指示剂, 以 0.1000 mol/L Na2S2O3 溶液滴定至终点时, 消耗 30.00 mL。(5分)(2)另取 50.00 mL 试液, 用H2SO4酸化, 加入足量 K2Cr2O7 溶液处理, 将生成的 I2和 Br2 蒸馏并收集在含有过量 KI 的弱酸性溶液中, 待反应完全后, 以 0.1000 mol/L Na2S2O3溶液滴定其中的 I2至终点时, 消耗 15.00 mL。计算混合试样中 KI 和 KBr 的质量分数。[Mr(KI)= 166.0, Mr(KBr)= 119.0](5分)

2.在pH=10.00的氨性溶液中,以铬黑T(EBT)为指示剂,用0.020mol·L-1EDTA滴定0.20 mol·L-1Ca2+溶液,若事先向Ca2+溶液中加入了0.010mol·L-1Mg2+-EDTA(即为含0.20 mol·L-1Ca2+和0.010mol·L-1Mg2+-EDTA的混合溶液),则终点误差为多少?(已知 pH=10.00时 lgY(H)0.45,lgEBT(H)1.6;

lgKMgY8.7,lgKCaY10.7,lgKCaEBT5.4,lgKMg-EBT7.0)(10分)

3.25ml溶液中含有2.5μgPb2+,用5.0ml二苯硫腙三氯甲烷溶液萃取,萃取率约为100%,然后在波长520nm,1cm比色皿,进行测量,测得透光率为0.445,求摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度。(MPb=207.2)(10分)

4.某矿石含铜约0.12%,用双环己酮草酰二腙显色光度法测定。试样溶解后转入100ml容量瓶中,在适宜条件下显色,定容.用1cm比色皿,在波长600nm测定吸光度,要求测量误差最小,应该称取试样多少克?ε=1.68×104(L·mol-1·cm-1),MCu=63.5)(10分)

考试试卷答案(A)

一、填空(每空1分,共35分)

1.(1)[H+]+[H3PO4]= [OH-]+[NH3] +[HPO42-]+2[PO43-]

(2)[H+]+[HAc]=[H2BO3-]+[OH-]

2.不变,减小 4.t检验法;F检验法 5.1.92;6.22 6.0.68V;1.06V;0.86-1.26V 7.黄;红 8.99:1 9.直接滴定;反滴定;置换滴定;间接滴定 8.I2 + 2S2O32-=2I-+ S4O62-

10.吸收光谱曲线;最大吸收波长;λmax

11.光源;单色器;吸收池;检测部分 12.S;M/ε;无关;有关 13.水或H2O

14.采样与制样,称样;样品分解;分离与测定;结果计算和数据处理(无称样,答4个也算全对)

二、简答题

1.能用于直接配制或标定标准溶液的物质;是一种已知准确浓度的的溶液。2.酸碱指示剂变色是随着酸度的变化,指示剂结合或离解出H+,结构发生变化,从而发生颜色改变;络合指示剂与金属离子络合前后颜色不同,游离的试剂为一种颜色,与金属离子形成络合物又一种颜色;氧化还原指示剂变色分为几种情况:一种是随氧化还原电位变化的试剂,在氧化态和还原态,结构不同,各有不同颜色,如二苯胺磺酸钠,还原态无色,氧化态紫红色;另一种自身指示剂,如高锰酸钾;还有显色指示剂如I2,与淀粉显兰色。沉淀滴定指示剂,是根据溶度积大小,在化学计量点被测物质沉淀基本完全后,指示剂与被测离子形成有色沉淀或有色络合物指示终点。还有吸附指示剂,吸附在沉淀表面后发生颜色变化。

3.络合滴定过程中,随着络合物的生成,不断有H+释放出,使体系酸度增大,会降低络合物的条件稳定常数,使滴定突跃减小;也会使指示剂变色范围改变,导致测定误差大。所以,要加入缓冲溶液控制溶液pH;还用于控制金属离子的水解。

4.测量波长选具有最大光吸收,干扰最小;吸光度读数在0.2-0.8范围,最好接近0.4343;选择适当参比溶液。

5.蒸馏,挥发,萃取,沉淀,离子交换,薄层色谱,纸色谱,电泳,毛细管电泳,气浮分离法,超临界流体萃取,反相分配色谱,超临界流体色谱;膜分离;固相微萃取等(答8个得满分,少一个扣0.5分)

三、分析方法设计(共15分,写在答题纸上)

1.设计测定含有中性杂质的Na2CO3与Na3PO4混合物中二组分质量分数的分析方案。用简单流程表明主要步骤、滴定剂、指示剂、结果计算公式。(7分)

Na2CO3 + Na3PO│ 甲基橙为指示剂

│ 用标准HCl滴定,消耗V1(mL)

↓(3分)

H2CO3 + NaH2PO4

│ 煮沸除尽CO│

│ 百里酚酞为指示剂

│ 用标准NaOH滴定,消耗V2(mL)↓

Na2HPO4(2分)

c(NaOH)V2M(Na3PO4)

w(Na3PO4)= ──────────── ×100%(1分)

m样

(c(HCl)V1-2c(NaOH)V2)M(Na2CO3)

w(Na2CO3)= ───────────────────── ×100%(1分)m样

2.某矿样溶液含有Fe3+, ,Ca2+,Mg2+,Mn2+,Cr3+,Cu2+,Co3+,Ni2+等离子,其中铁,铝,钙,镁等含量较高,而锰,铬,铜,镍属万分之一级含量。用学过的知识试设计分离、测定它们的分析方法,(用简单流程方框图表达,并尽可能写出分离方法和测定方法及条件和所用的主要试剂与用途)。(8分)评分标准:除去标准答案外,下列情况回答也得分

1.用草酸沉淀钙,重量法,得2分

2.用8-羟基喹啉沉淀分离,重量法测定铝,得2分

3.铜试剂萃取光度测定铜,2分

4.氧化Mn2+为MnO42-分

答:(1)在铵盐存在下,用氨水调节矿样溶液pH为8-9,高价金属离子Fe3+,Al3+沉淀;Cr3+,Cu2+,Co3+,Ni2+氨络合物和Ca2+,Mg2+存在溶液中;Mn2+部分沉淀。使分离。(3分)

(2)过滤,沉淀用浓盐酸酸溶解,定容,取一定体积,用SnCl2还原Fe3+为Fe2+,过量SnCl2用高汞氧化,在1-2mol/L硫酸-磷酸混酸中,用K2Cr2O7标准溶液氧化还原滴定,二苯胺磺酸钠为指示剂。测定Fe3+。(2分,不说用SnCl23+2+还原Fe为Fe也给2分)

↓ 计算结果

(3)分取含有Fe3+,Al3+的试液一定体积,调到pH5-6,加入过量EDTA,XO(二甲酚橙)为指示剂,Zn标准溶液返滴测定Al3+。(1分)

计算结果

(4)取含有Cr3+,Cu2+,Co3+,Ni2+氨络合物和Ca2+,Mg2+溶液一定体积,在pH=10的氨性缓冲溶液中,铬黑T为指示剂,EDTA络合滴定Ca2+,Mg2+。(1分)

计算结果

(5)再取含有Cr3+,Cu2+,Co3+,Ni2+氨络合物和Ca2+,Mg2+溶液一定体积,pH9的氨性缓冲溶液中,丁二肟显色,光度法测定。同条件作工作曲线。(1分)

计算结果

四.计算(共40分,写在答题纸上)

评分细则:1.选3个得分最多的题目计入总分

2.公式列对,得题目全分的一半 3.单位错1-3个,扣0.5分

4.最后结果不对,其它全对,扣总分的五分之一 1.(1)1 KI  1 IO3- 3 I2

 6 S2O32-(5分)

──×0.1000×30.00×166.0

w(KI)= ───────────────×100% = 33.20%

50.00

1.000× ───×1000

200.0

(2)2 KI  1 I2  2 Na2S2O3(5分)

 2 KBr  1 Br2 1 I2 2 Na2S2O3

n(KBr)= 0.1000×15.00-1/6×0.1000×30.00 = 1.000(mmol)

1.000×119.0

w(KBr)= ────────────×100% = 47.60%

50.00

1.000× ────×1000

200.0 2.解: 根据题意:

lgK’CaY=10.7-0.45=10.25, lgK’MgY=8.7-0.45=8.25,(2分)lgK’CaIn=5.4-1.6=3.8, lgK’MgIn=7.0-1.6=5.4,(2分)pMgep=lgK’MgIn=5.4, [Mg2+]=10-5.4,(1分)

[Y]=[MgY]/K’MgY[Mg2+]=0.010/(2×108.25×10-5.4)=5×10-5.85;(1分)[Ca2+]ep=[CaY]/K’CaY[Y]=0.020/(2×1010.25×5×10-5.85)=2×10-7.4.Et=([Y’]-[Ca2+]-[Mg2+])/cCasp×100%

=(5×10-5.85-2×10-7.4-10-5.4)/0.010×100%=0.03%(4分)

3.解:根据A=-lgT,求A=-lg 0.445 = 0.352 根据题意2.5μg Pb进入5.0ml氯仿中,其浓度为:

(2分)

该萃取法的摩尔吸光系数为

=1.46×105(L·mol-1·cm-1)(3分)桑德尔灵敏度

S=M/ε=207.2/(1.46×105)=0.0014μg•cm-2(5分)

4.解: 根据光度测量误差公式可知:当吸光度A=0.434时,误差最小,已知b=1, ε=1.68×104,根据A=εbc

c = A/εb=0.434/(1.68×104×1)

=2.58×10-5(mol/L)(5分)100ml有色溶液中Cu的含量为

m=cVM = 2.58×10-5×100×10-3×63.5

=1.64×10-4(g)

已知某矿含铜约0.12%,则应称取试样质量为:(1.64×10-4/ms)×100=0.12

ms=0.14g(5分)

第四篇:2001到2011年武汉大学分子生物学和细胞生物学真题

武 汉 大 学

2001年攻读硕士学位研究生入学考试试题 科目名称:分子生物学

科目代码: 477

一、解释概念(20分,每个4分)卫星DNA

复制体

逆转座子

反式激活因子

衰减子与衰减作用

二、填空(30分,每空1分,请将答案写在答卷上)1.从病毒到高等生物的研究表明,遗传物质是。

2.冈崎片段的发现证实了双链DNA的复制,在复制过程中,一条新生链的合成 是的,称为

链;而另一条链的合成是

的,称为

链。

3.大肠菌中有三种DNA聚合酶,其中的pol I的作用是,而pol III的作用是

。pol I和pol III都有的三种活性是、、。

4.由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物,因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。已发现有一种端粒蛋白称为,它由

构成,可以使单链DNA的5’延长。

5.对DNA损伤有几种修复系统,其中只有

修复系统可以造成DNA变异,与这一系统有关的一套基因平时受到一称为的抑制蛋白所抑制,它发挥抑制作用是结合在一段约20bp长的称为

的DNA序列上,当DNA损伤时,另一种蛋白质称为

把这种抑制蛋白水解后,修复系统的基因才会被激活。

6.真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA,RNA pol I负责合成 ,RNA pol II负责合成 ,RNA pol III负责合成。

7.大分子互相作用是分子生物学的重要内容,包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用,蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关,这些结构花式是

, 。

8.NO是气体小分子信号,它可由

脱氨产生,它的作用方式是直接与

酶作用使产生cGMP(环式GMP)。

9.真核mRNA的5’ 端通常有帽子结构,3’ 端有polyA。在polyA上游有一保守序列称为polyA信号,其序列为

。polyA能提高mRNA的翻译水平是由于:(1)

(2)。

10.G-蛋白关联受体是一类重要的细胞表面受体,它的结构特色是

,它发挥信号传递作用的两条途径是

途径和

途径。

三、问答题(50分)1.说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分)2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分)3.简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分)4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分)

武 汉 大 学 2002年攻读硕士学位研究生入学考试试题

科目名称:分子生物学

科目代码: 935

一、填空每空1分,共40分)1.测定蛋白分子量的主要方法是

。而要较准确测定DNA分子量的方法是根据DNA分子量的大小而采取不同的方法,分子量<5×106时用,分子量=5-100×106时用,分子量大于100×106时用。

2.长度为20um的DNA分子,其长与宽的比是

,该DNA分子含有

碱基对。

3.细菌中,体内DNA重组需要RecA、RecB参加,RecA起

作用,RecB起

作用。4.许多蛋白质能解开DNA双螺旋,32-prote重要性质

和,所以能使DNA变性。5.Meselson-Stahl实验中用的E.coli长时间在15N中培养后转入14N中。转入14N培养基中之后,1/2,1,世代时。总DNA中15N15N,15N14N, 14N14N的比例如下:(本题共两分)世代

15N15N

15N14N

14N14N 1/2

6.原核生物转录水平的调控方式主要有①

和④

7.一个plasmid载体含有一个大肠杆菌Lac操纵子的promotor-operator和外源基因,则这个基因的表达可以这样来控制,向培养基加入

则转录开始,要使转录停止,可以加入

。8.紫外线诱导的胸腺嘧啶二聚体的修复可以通过四种途径进行,它们是、、、和。

其中

是对模板进行修复,而

修复引起突变。

9.在基因表达调控中,常常涉及顺式调控因子和反式调控因子,顺式调控因子是指

,反式调控因子是指。

10.蛋白负责特定基因的开关。在数百种来源于原核和真核的DNA-结合蛋白中发现以下几种结构花式(motif)。它们是,和

。它们通常以

和,深入到DNA双螺旋的大沟中与DNA相互作用。

11.逆转病毒即使本身并没有病毒癌基因,也可以致癌,当病毒cDNA整合于

时病毒cDNA中

能激活细胞的原癌基因的表达。

12.P53一种重要的抑癌蛋白,它的两个主要功能是(1)

(2)

。P53的两个等位基因中只要其中一个变异就可能使癌发生,这是因为P53蛋白是的形式存在和行使功能的。13.细胞快速适应高浓度胞外信号的途径是。

二、选择:(每题2分,共20分)1.关于遗传密码的论述,哪些是正确的

A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生 B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译水平上的调控。C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。

D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。2.关于遗传密码的论述,哪些是正确的

A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生

B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译水平上的调控。C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。

D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。3.DNA polymerasel的哪个活性是使DNA复制保持忠实性的关链因素 A、聚合活性

B、5’-3’外切活性 C、3’-5’ 外切活性 D、逆转录酶活性

4.一个λphage感染它的溶源菌时,下列情况将发生 A、进入正常的噬菌体循环产生50个左右的噬菌体粒子 B、λ-DNA可以环化但不复制 C 细菌细胞将被杀死 D、原噬菌体将被割离 E、λ-DNA将不能注入

5.下面的部分二倍体中,哪些表型是组成型地合成β-半乳糖苷酶

A I+o+z+y+

B i+o+z+y-

C i+ocz+y+

D i+ocz-y+

i-ocz-y+

I+o+z+y+

I-o+z+y+

I+ocz+y+

E I+o+z+y+

i-o+z+y+

6.关于真核基因表达调控特点的论述哪些是正确的

A、真核基因组基因数目多、大多数含内含子、且与组蛋白及非组蛋白结合形成核小体及其超螺旋等结构影响基因活性

B、转录在核内、翻译在细胞质中进行,绝大多数mRNA的形成要通过RNA是否被运输来控制基因表达

C、真核mRNA寿命长,为翻译水平的调控提供了较大的余地

D、真核基因表达调控可在DNA水平的调控(拷贝数、重排)、转录水平、转录后水平(RNA加工和运输)和翻译水平等多层次调控

E、原核基因表达调控活动范围比真核更大

7.人们为研究某一目的基因的结构,打算用基因工程的办法得此基因,请你在正面载体中选一最合适的载体 A、表达载体 B、分泌性载体 C、克隆载体 D、转移载体 E、穿梭载体

8.当培养基中不存在糖时,正面哪一种是gal operon上结合的蛋白质情况 A、结合有CAP-cAMP和RNA聚合酶两种蛋白质 B、不结合蛋白质

C、结合有阻遇蛋白和CAP-cAMP蛋白

9.正面关于真核生物启动子的叙述,哪些是正确的? A、真核生物有三种RNA聚合酶,它们利用同一种启动子 B、DNA polymerase II利用的启动子只有一种类型

C、RNA polymerase I利用的启动子分两部分:40~-+5和-165~-40 10.人们打算克隆并鉴定一个分子量为36-45kb的真核单拷贝基因,首先必须使用下边哪套系统,然后再进行鉴定。

A、用cosmid为载体建立基因文库 B、用pBR322为载体建立基因文库 C、用M13为载体建立基因文库

D、用λCharon4A为载体建立基因文库

11.与细菌中发现的转录调控相比,真核细胞中的转录调控有以下区别,其中哪一项是错误的? A、真核RNA polymerase单独不能起作用 B、真核基因在转录前,需多种转录因子(general transcription factors)先在启动了上装配成复合物

C、起始复合物装配过程包括许多步骤,每个步骤都受到调控信号或调控因子的影响 D、在真核中大多数基因调控蛋白不能在离开它们所影响的基因相当远的地方起作用

三、问答:

1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)

2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)

3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)

4、你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)

武 汉 大 学

2003年攻读硕士学位研究生入学考试试题

科目名称:分子生物学

科目代码: 717 注意:所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效

一、下列名词翻译成中文,并简要解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Domains and motifs

2.Alternative splicing

3.Reporter genes 4.The PCR cycle

5.Restriction mapping

6.Multiple cloning sites 7.DNA libraries

8.Proteomics

9.Replicon 10.Semi-conservative replication

二、简答题

(共5题,每题8分,共40分)1,请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。2,简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。

3,简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。

4,简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。5,简述cDNA文库的构建过程。

三、论述题

(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分)

1.人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么? 2.什么是操纵子(operon)?试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。

3.请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。4.试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面? 5.限制性核酸内切酶有哪几种类型?哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么?请简要说明其理由。

武 汉 大 学

2004年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 科目名称:分子生物学

科目代码:

注意:所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效 一,名词翻译与解释

1,synonymous codons

2,RNA editing

3,Spliceosome 4,Microarray

5, Plaque hybridization

6, Open reading frame 7,Ribozyme

8,RFLP

9,Site specific recombination 10,RNA interference 二,简答题(共5小题,每小题10分,共50分)1,简述真核生物 rRNA基因,tRNA 基因和mRNA基因的转录机制。2,原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子?其转座机制有那些? 3,简述真核生物 DNA复制中,端粒复制与染色体其他部分DNA复制的异同和生物学意义。4,原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段?简述各阶段的主要事件。

5,列举4种可用来检测,鉴定转基因动,植物的分子生物学技术和方法,简述选择这些技术的理由。

三,论述题

1,试述环境因素对DNA的损伤以及生物体中存在的DNA损伤修复系统。如果DNA损伤没有被修复会造成什么后果? 2,试比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么?为什么原核生物一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因? 3,在进行基因工程时,载体是携带靶DN**段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具,请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点? 4,人类基因组计划基本完成表明:人类基因组约有3乘10的9次方bp(而大肠杆菌的基因组约为4。6乘10的6次方bp),其中仅有百分之一的基因组DNA直接编码蛋白质,约有百分之二十四的基因组DNA为内含子,而百分七十五的基因组DNA为其他非编码序列。试从(1)传代中遗传信息的保持;(2)基因表达调空的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意义。

武 汉 大 学

2005年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 科目名称:分子生物学

科目代码:

注意:所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效

一、名解(4/10)1 Ubiquitin ribosomal binding site siRNA miRNA

proteome DNA foot printing single nucleotide polymorphism

chromosome walking 8 haplotype

zoo blot transcription unit

二、简答(5/10)1简述真核细胞rRNA tRNA 和mRNA转录使用的聚合酶及各 RNA前体(precursor)加工的基本过程? 2 研究表明蛋白质组比基因组更复杂,蛋白质组中存在的蛋白质数目比基因组中存在的基因数目要

多许多,这是如何造成的,你如何解释这种现象? 3 简述原核与真核细胞染色体结构的差别 在分子生物学研究中经常用各种载体进行研究工作,试问有哪些不同大小类型的载体,各自的主要特点是什么? 5 简述DNA损伤修复的机制,在什么情况下DNA损伤会引起DNA突变?

三、论述4/15 1蛋白质与核酸的相互作用存在于基因表达的各个水平上,请分别举例说明在基因复制RNA转录和蛋白质翻译过程中二者的相互作用。一个真核细胞的蛋白质编码基因有哪些结构元件(或组建)组成(包括各种调控元件)?请画图表示,并说名各元件的功能与作用? 3 请设计一组试验来(1)克隆一个你所感兴趣的人类基因(2)并对基因产物大量表达与纯化(3)然后研究该基因的生物学功能 生命科学的研究已进入后基因组时代,试从“分子生物学”的角度来谈谈你对后基因组时代的认识,并预测后基因组时代里“分子生物学”发展的未来

武 汉 大 学

2006年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 科目名称:分子生物学

科目代码:

注意:所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效

一、名解4*10

1、DNA Microarray

2、Spliceosome

3、Cosmid vector

4、Proteasome

5、Zinc finger domain

6、DNase I hypersensitivity

7、Insulator

8、Post-transcriptional gene silencing

9、Reverse transcription PCR

10、Missense mutation

二、简答题 10*5

1、简述microRNA 的基因调控功能与机制。

2、简述染色体端粒复制的问题,人正常细胞和癌细胞的端粒复制有何不同?

3、真核生物基因组中含有几种类型的DNA序列?你如何设计实验来证明?

4、简述RNA编辑(RNA editing)的机制及其对基因表达的影响。

5、下面的DNA序列中含有一个假象基因,编码仅5个氨基酸。请写出这些氨基酸的密码子以及终止密码子,并指出RNA转录的模版是哪条链?启动子在该序列左侧还是右侧? 5-TCATGCTAGACACGTAATAGCATATGGGA-3 3-AGTACGATCTGTGCATTATCGTATACCCT-5

三、论述题15*4

1、论述一个真核基因产生有功能的蛋白质需要经过哪些分子生物学工程(event)?列出每个过程发生的细胞位置和参与的主要酶和蛋白因子。

2、有哪几种类型的遗传重组?其重组的特点如何?

3、DNA的甲基化在遗传信息的传递、DNA复制和DNA损伤修复等过程中有什么重要意义?请举例说明。

4、假如你进入实验室开始研究一个小鼠DNA结合蛋白的生物学功能:(1)、请设计实验确定其编码基因在小鼠细胞内的表达水平?(2)、请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有DNA结合功能?(3)、如何确定该蛋白在小鼠体内(in vivo)的生物学功能。

2007年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目:分子生物学

科目代码:475

一、名词翻译与解释(共10小题 ,每小题4分 ,共40分)

1、Transcriptome

2、Translesion replication

3、Riboswitch

4、Synonymous mutation

5、Tandem gene cluster

6、Frameshift

7、Nucleosome positioning

8、Non-autonomous transposon

9、Holliday junction

10、Polymerase switching

二、简答题(共5小题 ,每小题10分 ,共50分)

1、试从DNA和RNA结构的不同解释为什么DNA被广泛作为遗传信息的承载者?RNA在细胞内行使哪些功能?

2、什么是蛋白质组?什么是蛋白质组学?如何理解高等生物细胞中一个基因组可以产生多少个蛋白质组?

3、什么是解旋酶(helicase)?请设计实验并画设计图证明一个DNA解旋酶是具有3’→5’还是5’→3’解旋活性 ?

4、论述原核生物基因表达调控的主要策略,并举例进行详细说明?

5、核糖体是蛋白质合成的主要机器。请问原核生物有哪些亚基和分子组成?核糖体在蛋白质翻译过程中有哪些功能位点 ?起什么作用 ?

三、论述题(共4小题 ,每题15分 ,共60分)

1、在真核生物中 ,成熟的mRNA序列往往与基因组DNA序列之间存在许多差异,有些序列甚至在基因组DNA上根本没有相应的互补序列。另外 ,同一种基因的DNA常常会转录出多种mRNA。请解释并说明产生这些现象的机制及其意义。

2、真核细胞mRNA的Ⅱ型RNA聚合酶转录 ,需要Ⅱ型启动子和转录因子TFⅡA ,TFⅡB ,TFⅡD ,TFⅡE 和TFⅡH等。(1)请设计实验证明这些转录因子和RNA聚合酶Ⅱ结合到启动子的顺序;(2)请设计实验证明TFⅡD复合体可以单独准确结合到启动子TATA box上;(3)TFⅡD复合体包括哪些蛋白质?如果你有其中一个蛋白质的抗体 ,并知道其他几个蛋白质的大小 ,请设计实验验证TFⅡD复合体的组分。

3、DNA复制具有很高的准确性(accuracy)或保真度(fidelity), 出错率低于1010分之一。请解释:(1)DNA复制过程中和复制后有哪些机制保证复制的准确性 ?(2)为什么RNA聚合酶的保真度比DNA复制低 ?9(3)DNA复制的错误或突变对生物本身有何意义 ?

4、两位美国科学家Fire博士和Mello博士在分子生物学研究领域做出了重大贡献 ,并因此获得了2006的诺贝尔生理与医学奖。试论述其获奖成果中发现的重要分子生物学机制以及对分子生物学研究的重要影响。武

2008年攻读硕士学位研究生入学考试试题

科目:分子生物学

科目代码:879

一、名词翻译与解释(共10小题 ,每小题4分 ,共40分)Missence mutation Polysome Non-Watson-Crick base pairing Tandem mass spectrometry Shine-Dalgarno sequence tmRNA allostery activation Blue-white screening Attenuator

二、简答题(共5小题 ,每小题10分 ,共50分)

1、请描述两个经典实验证明遗传物质是DNA而不是蛋白质。

2、翻译过程中需要哪四种组分?它们的功能是什么?

3、在遗传物质复制、转录和翻译过程中如何确保其准确性?

4、真核细胞转录和加工中哪些过程是相偶联的?它们是如何偶联的?

5、酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用?

三、论述题(共4小题 ,每题15分 ,共60分)

1、在真核生物转录中,有哪三种序列构成核心启动子?请说明Ⅱ型启动子中有哪些因子构成起始复合替,除了这些还有哪些是构成复合体所必须的?它们各有什么功能?

2、人的基因组大概有2.5~3万个基因,但它们构成的生物体蛋白质种类却有20多万种。人的基因组是怎样以有限的基因形成如此多的蛋白质的?

3、有一研究生想使他所感兴趣的一大肠杆菌的基因严格受碳源控制,在葡萄糖供应时,该基因不表达,当供应乳糖时,该基因大量表达?你如何帮助他实现这种想法?依据是什么?

4、miRNA在癌细胞中有的高水平表达,有的低水平表达。请解释什么是miRNA?并推测上面两种类型的miRNA各有什么生物学功能?有一种miRNA-21在癌细胞中高水平表达,请设计实验得到该miRNA的生物学功能。

武汉大学2009年攻读硕士学位研究生入学考试试题 分子生物学

一、名词翻译与解释

1.Regulatory gene

2.Real-time PCR 3.Nick translation

4.Generic promoter 5.Histone code

6.Proteomics 7.Gene targeting

8.Single nucleotide polymorphism 9.Alternative mRNA processing

10.Replicon

二、简答题

1.什么是DNA损伤?生物体DNA损伤与哪些因素有关?生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤,并进行DNA损伤修复? 2.表观(epigenetic)遗传修饰包括哪些内容?并举一例说明其在基因的表达调控和染色体重塑等方面有哪些重要作用?

3.反式作用因子是直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件上参与调控靶基因转录效率的蛋白质,试问反式作用因子的DNA结合结构域有哪几种类型?特点如何?

4.PCR的原理是什么?在PCR反应中是否循环次数越多所合成的产物数量也越多?为什么?

5.增强子和绝缘子在基因表达调控中的作用和特点有哪些?

三、论述题

1.论述转座子的类别、结构和转座机制及在基因表达与分子进化中的作用。2.在进行遗传重组和基因克隆与表达的研究中,对分子克隆的载体与宿主系统的选择有非常重要的作用。请论述各主要载体系统的特点及其宿主系统。

3.从转录后水平上进行比较,论述原核生物和真核生物RNA加工的异同点。

4.什么是HapMap计划、ENCODE计划、Jim计划、Proteome计划?这些计划与人类基因组计划有何联系?这些计划对分子生物学的发展和生命活动的分子机制有什么影响和意义?

武汉大学

2010年攻读硕士研究生学位研究生入学考试题 分子生物学 科目代码 638

一、名解(4*10=40)

1.epigenttic change 2.peptide mass fingerprinting 3.RNA splicing 4.house keeping gene 5.frame-shift mutation 6.DNA binding domain 7.Shine-Dlagarno sequence 8.Gel retardation 9.chromatin immunoprecipitation 10.Rho-dependent transcription termination

二、简答(5*10=50)

1.什么是CPG岛?一段DNA序列中的CPG岛高度甲基化的含义是什么? 2.说出5种RNA的名称及其功能。3.什么是enhancer?它有哪些特点?

4.真枋生物DNA与原核生物DNA复制有哪些差异? 5.简述突变类型及其遗传效应。

三、论述题(3*20=60)

1.请描述乳糖操纵子的调控机制。

2某科学家发现一种新的野生植物,准备对该植物开展分子生物学研究,请设计实验制备该植物的cDNA文库。

3.2009年三名美国科学家获诺贝尔生理或医学奖,请分析他们为什么获奖,解释他们对分子生物学的贡献。并用他们的发现解释克隆的多莉羊早衰死亡的一个原因。

武汉大学2011年分子生物学真题

一、科学名词解释及翻译 1.Chromatin remodeling 2.Internal ribosome entry site 3.Alternative splicing 4.Non-autonomous transposon 5.Shine-Dalgarno sequence 6.Realtime PCR 7.Ribozyme 8.SOS response 9.Telomerase 10.Suppressor mutation

二,简答题

1.简述色氨酸操纵子的调控机制。

2.DNA在复制过程中如何保持准确性?

3.分别阐述克隆载体和表达载体(各5种)及其特点和用途。4.什么是RNA editing?它的机制是什么?

5.什么是染色体步移?它的作用是什么?三,论述题

1.真核生物转录调控因子的类型和特点?阐述根据一种转录调控因子的特点建立的分子生物学技术的及其应用。

2.真核生物和原核生物的基因组的特点及差异?已知某基因的cDNA(长14Kb),如何用实验证明该生物基因还有内含子?如何确定内含子在全长中的比例?如何用实验确定某未知基因的功能?

3.每种基因a是诱导表达基因,在分子B(小分子化合物)的作用下可以诱导表达。已知该基因的序列,该基因上启动子的序列。已知某调控元件的序列为ACGTCG,基因c表达的蛋白C可以结合在该调控元件上,试用三种证明该调控元件可以诱导基因a表达。

2001年细胞生物学

一。名词解释2.5*10 1.apoptosis body

2.receptor mediated endocytosis

3.lamina

4.nuclease hypersensitive site

5.gap junction 6.Hayflick limitation 7.Kinetochore

8.molecular chaperones 9.leader peptide 10.dedifferentiation

二。简答题 5*8

1.冰冻断裂术将溶酶体膜撕裂出PS,ES,PF,EF四个面,请绘一简图标明。

2.医生对心脏已经停止跳动的病人采取电击抢救,请说明其心肌细胞是如何同步启搏的。3.为什么凋亡细胞的核DNA电泳图谱呈梯状分布带。而病理坏死细胞却呈弥散状连续分布? 4.将某动物细胞的体细胞核移植到另一去核的体细胞之中,然后其余实验步骤完全按照动物克隆的方式,问能否培育出一头克隆动物来? 为什么?

5.切取病毒感染马铃薯植株的顶芽进行组织培养,这是大量繁育无毒苗的成功技术。试述其去除病毒的原因。

6.有人认为既然已经有放大几十万倍的电镜,可以不用光镜了,请反驳这种观点的错误。7.出生6个月之内的婴儿可由母乳获得抗病的抗体, 试述这些抗体是如何由母亲血液转移到婴儿血液中的。

8.1999年报道,我国科学家成功实现将离体的B型血液改造成O型,请解释其原理。

三。问答题(前两题10,最后一题15)

1.概述Cyclin与CDK在细胞周期调控的工作机制及其在各期引起的下游事件。

2.试述在细胞质中合成的线粒体内膜蛋白及叶绿体类囊体膜蛋白是如何运送到位与装配的。

3.综述细胞外被中糖蛋白在细胞内合成,组装和运输的全过程及其对于细胞的主要生理功能。

2002年细胞生物学 一。名词解释2.5*10 1.nucleosome

2.contact inhibition

3.Telomerase

4.exocytosis 5.gap junction 6.Kinetochore

7.heterochromatin 8.channel protein 9.dynein arm

10.molecular switches

二。简答题 5*8

1.分别以一句话简述1999年和2001年诺贝尔奖获奖项目中有关细胞生物学的内容。

2.体外培养的癌细胞为什么能悬浮培养,而正常细胞却只能贴壁培养。

3.医学界大力提倡母乳哺婴,请以细胞生物学知识解释此举措对母婴保健各有何好处? 4.若用生物氧化抑制剂氰化钾处理,培养细胞会出现怎样的形态变化?

5.肿瘤细胞与同类型组织正常细胞融合而成的杂交细胞,会出现什么细胞生理变化?为什 么?

6.同一个体的不同组织细胞对电离辐射的敏感性不同,这是什么原因? 7.扫描隧道显微镜是纳米生物学研究工具,为何能用来观察活的生物样品? 8.具有融合蛋白的病毒是通过什么途径进入被感染细胞的?

三。问答题(前两题10,最后一题15)

1.概述G蛋白偶联受体介导的信号通路的组成,特点及主要功能。

2.以动物细胞从胞外选择性摄取低密度脂蛋白LDL为例,说明受体介导的网络(或称笼形)蛋白有被小泡内吞的过程及生理意义。

3.概述Cyclin与CDK在细胞周期调控的作用原理及主要下游事件。

2003年细胞生物学 一。名词解释 4*11 1.totipotency 2.carrier 3.oncogene 4.cytoskeleton 5.cell recognition

6.Telomerase 7.stem cell

8.signal peptide 9.ribosome

10.molecular chaperone

11.cell apoptosis

二。简答题 1-6 每题6分, 7 10分 总计46分

1.小肠上皮细胞膜上载体蛋白转运葡萄糖,为何有时是协助扩散,有时又是协同运输? 2.植物细胞中既有叶绿体这种产能细胞器,为什么还必须有线粒体存在? 3.为什么凡是蛋白质合成旺盛的细胞中核仁都明显偏大?

4.核糖体的大小亚单位在蛋白质合成过程前后的装配和解离有何生物学意义? 5.氯霉素等抗生素具有广谱杀菌作用,其原因是什么? 6.以一种荧光染料检验细胞活性的实验方案和原理。

7.经诱变处理发现生活受精卵不能启动分裂,试推测突变基因可能主要涉及哪些细胞生理过程的调控?

三。问答题(每题15)

1.概述酪氨酸蛋白激酶受体介导的RTK-Ras信号通路的特点及功能。

2.分别简述三种不同有被膜泡的结构组分,运行方式和生理作用。3.试述植物细胞的特有结构及其功能。

4.分别举例说明影响细胞分化的主要原因。

2004年细胞生物学

一、名解3*10

1、embryo stem cell

2、cytoplast

3、extracellular matrix

4、signal sequence

5、facilitated diffusion

6、maturation-promoting factor MPF

7、telomere

8、proteomics

9、molecular switches

10、green fluorescent prptein GFP

二、简答题8*6 1,细胞生物学实验的镜检标本制备中为什么必须取材新鲜且迅速固定?投射电镜观察的样品为什必须事先进行脱水处理?

2、简述磷酸肌醇信号通路的途径,特点,主要下游事件和生物功能。

3、有机磷酸农药的毒理机制是抑制乙酸胆碱酯酶活性,为什么这类农药依照成人畜中毒死亡?

4、为什么体外培养的癌细胞能在悬浮条件下增殖生长,而正常细胞却只能在贴壁培养是增殖生长?

5、FDA、DAPI、Cochicine(秋水仙素)等试剂在细胞生物学研究中的主要用途有哪些?简述其原理

6、请谈谈如何理解目前生物学研究中分子生物学向细胞生物学回归的现象。

三、论述18*4

1、在细胞与外界(基质、细胞)的接触中涉及细胞表面的那些分子?这些分子个有什么作用? 2,概述细胞周期蛋白B在分裂后期的降解途径、机理和调控因素。

3、分述下列4种蛋白质的合成部位、转运途径和组装场所;G 蛋白偶联受体、RuBp羧化酶、酸性磷酸酶、核糖体蛋白

4、试述动植物细胞凋亡的一般过程、特点、常用检测方法及原理。

武汉大学2005考研细胞生物学试题

一名词解释(3X10)

1、cristae

2、plasmodesmata

3、spindle

4、synapsis

5、lectin

6、amitosis

7、prokaryotic cell

8、apoptosis body

9、plasmid

10、somatic protoplast

二、简答10*6

1、简述2002年和2004年Nobel Prize项目中关于细胞生物学的研究内容主题。

2、用剧烈匀浆方法分离获得的叶绿体,可在光诱导下产生ATP和NADPH,但不能固定CO2 推测此状态叶绿体结构发生了什么问题?

3、为什么低血糖症患者通常会发生脑供氧不足而头晕的症状?

4、在某些生物体发育的特定时期,一些细胞中的染色体形态会发生巨大变化,简述这些染色体的结

构特点及其功能。

5、如何检验细胞膜的完整性,减述其原理及操作。

6、请简单谈谈下列仪器的主要用途和特点;(1)干涉相差显微镜(ICM)(2)激光共聚焦扫描显微镜(Confocal)(3)电荷偶联仪(CCD)(4)流式细胞仪(Flow cytometry)

三、问答题15*4

1、为什么在内质网膜上进行共转移的信号肽仅为一段导向信号序列,而线粒体和叶绿体膜上的后转移的导肽和转运肽中却往往包含两段(或两段以上)的导向序列?

2、中间纤维有哪些类型?又分别位于哪些细胞中?某学者对小鼠胚胎实施里两种中间纤维A和B的基因敲除Knockout实验,其结果是新生鼠崽瘫软少动且体表皮大面积发生水泡,请判断A和B分别是何种类型的中间纤维及其功能。

3、细胞周期受到哪些细胞内因子的调控?调控机理如何?哪些环境因子将对细胞周期产生重要影响?

4、概述真核生物核基因组与细胞质基因组的主要特征,以及它们在细胞功能上的协调统一。

2006年细胞生物学

一、名解3*10

1、totipotency

2、cell recognition

3、dedifferentiation

4、leucoplast

5、adaptor protein

6、karyotype

7、monoclonal antibody

8、protein sorting

9、calmoldulin

10、ribozyme

二、简答1~5,8;6~9,5。

1、真核细胞中为何以游离钙离子,而不是以钠离子作为胞内第三信使?(注:细胞质基质中游离钙离子浓度维持在 ,而钠离子浓度维持在。)

2、细胞质膜外表面也存在M6P(甘露糖-6-磷酸)受体蛋白,试解释其功能。

3、人类许多癌症患者(约占30%)是与ras基因(编码Ras蛋白)突变有关,试分析其机理。

4、植物叶肉细胞中既然存在大量叶绿体这种产能细胞器,为什么还须有线粒体?

5、PCC实验中,当M期细胞与S期细胞融合后,S期PCC染色体在光学显微镜下呈现什么形状,为什么?

6、请简述一种细胞生物学研究中常用的荧光标记与观察技术,列出其主要技术流程。

7、相差显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜在细胞生物学研究中各有何用途及特点?

8、在进行组织原位杂交定位分析制样时,为什么常用冰冻切片方法,而不用石蜡切片方法?

9、细胞工程中,哪些方法可以诱导细胞融合?各有何特点?

三、论述题15*4

1、细胞信号传递中有哪些正、负反馈机制来调控信号放大及信号终止?

2、细胞质基质中合成的某些蛋白可转移入线粒体功能部位,这一现象支持哪种关于半自主性细胞器起源的学说?为什么?

3、什么是干细胞?请概述干细胞的类型与功能,并简要叙述干细胞研究的意义与前景。

4、简述膜泡的主要类型(包括有被小泡和其它形式小泡)及各类型膜泡的结构、运输途径与生物学功能。

2008年攻读硕士学位研究生入学考试试题 科目名称:细胞生物学(A卷)科目代码:640

一、名词翻译与解释(共10小题,每小题3分,共30分)

1、integrin

2、telomerase

3、kinesin

4、ion channel

5、transcytosis

6、somatm cell

7、cytoskeleton

8、apoptosis

9、equatorial plate

10、adultstem cell

二、简答题(共7小题,第1-5小题各8分,第6、7小题各10分,共60分)l、在物质跨膜运输中,协助扩散和主动运输有何异同?

2、为什么蛋白质类型激素的受体皆分布在细胞质膜表面,而甾族类型激素的受体却分布在细胞质基质或细胞核之中?

3、细胞显微操作技术主要可用于哪些生物工程研究?为什么必须采用倒置显微镜?

4、请设计实验,用四种方法证实某种细胞是生活的。

5、某种肌肉遗传病是由于基因突变产生了肌膜上乙酰胆碱受体的自身抗体所引起的,试推测此患者的主要病征及病理原因。

6、最近美国和日本科学家分别将人体皮肤细胞改造成类似胚胎干细胞,这一成果在理论上、实践:有何意义?

7、G蛋白偶联受体多肽的七次跨膜结构是如何形成的?在哪里形成,又如何到达质膜上的?为什么在质膜上的N端是朝向细胞外的?

三、论述题(共4小题,每小题15分,共60分)

1、试述细胞外空间的各种结构及其功能。

2、概述受体酪氨酸激酶介导的RTK-Ras信号通路的特点及功能。

3、概述细胞识别的分子基础及细胞识别所引起的细胞效应。

4、检验了四瓶体外培养同步化细胞,得知其细胞周期运转分别是被阻隔在Gl、G1/S、S和G2/M监控点之前,试问这四瓶细胞受阻的MPF因子分别是由哪类细胞周期蛋白与哪类CDK组合而成的?受阻的主要生化事件是什么?

第五篇:细胞生物学教案

第八章 细胞核与染色体 第一节 细胞核(nucleus)概述

细胞核是储存遗传物质的场所,除成熟的植物筛管和哺乳类红细胞没有细胞核外,所有真核细胞都有细胞核。

细胞核的主要包括:核被膜;②核仁;③核基质;④染色质;⑤核纤层: 第二节 核被膜与核孔复合体

包在核外的双层膜结构。将DNA与胞质隔开,形成核内特殊微环境,保护DNA分子免受损伤;使 DNA复制和RNA翻译表达在时空上分隔开来;

此外染色质定位于核膜上,有利于解旋、复制、凝缩、平均分配到子核;核被膜还是核质物质交换的通道。

一、核被膜

1、外核膜:面向胞质,附有核糖体,并与RER相连,是RER特化部分。

细胞骨架成分常与外核膜相连,起固定作用及维持细胞核形态

2、内核膜面向核基质,与外核膜平行,表面光滑,无核糖体。内表面网络状纤维蛋白质:核纤层,支持核膜。

3、核周间隙(perinuclear space):又称核周腔,是两层核膜间的空隙,宽20~40nm,腔内电子密度低,不含固定结构。核周隙与内质网腔相通 两层核膜相互平行但不连续,常在某些部位融合形成环状开口,即核孔

二、核孔复合体(NPC)核孔是核内外膜融合形成的开口,在核孔上镶嵌着一种复杂的结构:核孔复合体。所有的真核细胞其间期核上都存在NPC.活动旺盛的细胞中核孔数目多,反之少

1、核孔复合体的结构:呈八角形,外径120nm,结构如fish-trap(捕鱼篓),包括 ①胞质环或外环:位于胞质侧,环上有8条纤维对称分布伸向胞质;

②核质环或内环:位于核质侧,对称连有8条纤维,向核内伸入50-70nm,末端形成1个小环,小环也由8个颗粒构成,笼子状结构;

③栓(plug)或转运器:核孔中央的一个栓状颗粒; ④辐(Spoke):核孔边缘伸向核孔中央的突出物。

2、核孔复合体与物质运输

核孔是细胞核与细胞质间物质交换的通道

双功能:被动运输(小分子物质自由扩散通过核孔进入核)和主动运输(信号识别与载体介导的过程,需ATP,并有饱和动力学特征.)双向:出核(核中合成的RNA、核糖体亚基通运到胞质)和入核(核蛋白在胞质合成,通过核孔定向输入核)转运

三、核纤层:位于内核膜下方的一种纤维网络.由核纤蛋白单体组装起来的多聚体纤维 核纤层的作用

1.保持核的形态:是核被膜支架,用高盐、非离子去污剂和核酸酶去除大部分核物质,核纤层仍能维持核轮廓.核纤层与核骨架及穿过核被膜中间纤维相连,使胞质骨架和核骨架成一连续网络结构

2.参与染色质和核的组装:核纤层在细胞分裂时呈周期性变化,在间期核中,核纤层提供了染色质在核周边锚定位点。在前期结束时,核纤层被磷酸化,核膜解体。B型核纤肽与核膜残余小泡结合,A型溶于胞质中。在末期,核纤肽去磷酸化重新组装,介导了核膜的重建 第三节 染色质

一、染色质与染色体的概念

染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,是间期细胞遗传物质的存在形式。

染色体是指细胞在有丝分裂或减数分裂过程中,由染色质聚缩而成的棒状结构 两者的主要区别:不在于组成,而在于包装程度的不同

二、染色质的化学组成

染色质由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成,DNA与组蛋白的含量比较恒定,非组蛋白含量随生理状态变化较大,RNA含量最少。

(一)染色质DNA

DNA是遗传信息的携带者

生物的遗传信息储存在DNA的核苷酸序列中,即DNA的一级结构。

DNA的序列可分3种类型:单一序列、中度重复序列(101-5)和高度重复序列(>105)。DNA还存在丰富的二级结构,主要有3种类型:B-DNA、Z-DNA、A-DNA。生物基因组中的基因大体可分为两大类:

1)非重复的编码DNA序列;2)中度重复序列:储存着选择性表达信息3)高度重复序列:(二)染色质蛋白质

染色质蛋白负责DNA分子遗传信息的组织、复制和阅读.DNA结合蛋白主要包括两大类:

1.组蛋白(与DNA非特异性地结合):组蛋白属碱性蛋白,富含带正电荷Arg,Lys等碱性aa,能够与带负电荷的磷酸基团作用,等电点一般都在Ph10.0以上,其含量恒定,真核细胞中有5种组蛋白,分为两类:一类是高度保守的核心组蛋白或核小体组蛋白,另一类是可变的连接组蛋白

2.非组蛋白(与DNA特异性结合):与特异DNA序列结合的蛋白,又称序列特异性DNA结合蛋白。特性:①属酸性蛋白,带负电荷。是一类不均一蛋白,具组织特异性和发育阶段特异性②整个细胞周期都合成,而组蛋白只在S期合成;③能识别特异的DNA序列,识别信息在DNA本身,位点在大沟,识别与结合靠氢键和离子键。

非组蛋白的功能是:①帮助DNA分子折叠,以形成不同的结构域,从而有利于DNA的复制和基因的转录;②协助启动DNA复制;③控制基因转录,调节基因表达。

(三)染色质的基本结构-核小体:核小体是一种串珠状结构,由核心颗粒和连结线DNA两部分组成,三、染色质的包装:从DNA—染色体

染色质是以核小体作为基本单位进行包装压缩的,共经四级包装:DNA--核小体--螺线管--超螺线管--染色体

三、异染色质和常染色质

间期核染色质可分异染色质和常染色质。

常染色质是进行活跃转录的部位,呈疏松的环状,电镜下表现为浅染;易被核酸酶在一些敏感的位点降解。异染色质的特点:间期处于凝缩状态,无转录活性,也称非活动染色质;是遗传惰性区;细胞周期中表现为晚复制、早凝缩,即异固缩

结构异染色质:在所有细胞内都呈异固缩的染色质,多定位于着丝粒区,端粒,次缢痕及染色体臂的某些节段,在间期聚集成多个染色中心,由相对简单的高度重复序列构成。兼性异染色质:指不同细胞类型或不同发育时期出现的异染色质区

四、中期染色体结构: 染色体是细胞在有丝分裂中期遗传物质特定的存在形式,是间期染色质紧密包装的结果。中期染色体形态稳定是染色体形态和计数最佳时期

1、着丝粒和动粒

着丝粒是染色体中连接两个染色单体、并将染色单体分为短臂和长臂的结构。该区域染色浅且内缢,也叫主缢痕.着丝粒的基本功能:(1)将两条染色单体结合在一起;(2)为动粒的装配提供结合位点。动粒由着丝粒结合蛋白在有丝分裂期间装配起来、附着于主缢痕外侧的圆盘状结构 每1个中期染色体含有两个动粒,位于着丝粒两侧

2、次缢痕与核仁组织区

除主缢痕,染色体上其它的缢缩部位称次缢痕,也是染色体重要标志 核仁组织区:是特定染色体的次级缢痕处

3、随体(satellite)和端粒(telomere): 随体:位于染色体末端的圆形片段,通过次缢痕与染色体主体相连,染色体主要特征之一。末端的随体称端随体,两个次缢痕间称中间随体。端粒是染色体两个端部特化结构。作用是维持染色体的稳定性。打断染色体,没端粒的染色体末端有粘性,会与其它片段相连或两端相连成环状 染色体DNA的3种功能元件

DNA的准确复制和分离,有赖于3个功能单位①自主复制序列(ARS)②着丝粒序列(CEN)③端粒序列(TEL)

四、巨大染色体

(一)多线染色体:特点:①体积巨大:②多线性:每条染色体由500-4000条解旋的染色体合并在一起形成。③同源染色体紧密配对,合并成1个染色体④横带纹:染色后呈现出明暗相间的带纹。⑤膨突和环:幼虫发育某个阶段,多线染色体某些带区疏松膨大,形成膨突(puff)。膨突是基因活跃转录部位

(二)灯刷染色体 :是卵母细胞第一次减数分裂时,停留在双线期的染色体。二价体,含4条单体,由轴和侧丝组成

第四节 核仁(nucleolus)圆球形,1-2个,或3-5个。核位置不固定:中央或近核膜,数量和大小因细胞种类和功能而异。蛋白质合成旺盛和分裂增殖快的细胞有较大和数目较多的核仁,反之核仁很小或缺。在有丝分裂期呈现周期性消失与重建:在前期消失,末期又重现。主要功能是转录rRNA和组装核糖体亚单位。

一、核仁的结构

无界膜包围,电镜下可辨认的区域有3个: ①纤维中心(FC):②致密纤维组分(DFC):③颗粒组分(GC):

二、核仁的功能

核仁是合成核糖体的工厂,涉及rRNA的转录加工和核糖体大小亚基的装配。

每个rRNA基因转录单位由RNA聚合酶Ⅰ转录,产生相同的初始转录物:前rRNA。负责前rRNA加工的酶是RNase。

核糖体的装配和rRNA合成同时进行,前体rRNA的加工是以核蛋白方式进行的。

45S前rRNA首先与蛋白结合形成80S的RNP,然后再剪切形成大小不同的核糖体亚单位前体

编码5S rRNA的基因不在NORs,是由RNA聚合酶Ⅲ所转录,转录后经适当加工即参与核糖体大亚单位的装配

实验证明,在30min内,小亚基(含18S rRNA)即装配出现在细胞质中,而大亚基(含28S、5.8S和5S)装配约需1小时才能完成

核糖体的成熟主要发生在被转移到细胞质后。

三、核仁周期

核仁是一种动态结构,随细胞周期变化而变化,即形成-消失-形成,这种变化称为核仁周期 在细胞有丝分裂期,核仁变小,并逐渐消失;在分裂末期,rRNA的合成重新开始,核仁形成。分子机制尚不清楚

第四节 核基质(nuclear matrix)

核基质或称核骨架(nucleoskeleton)为真核细胞核内由蛋白质组成的网络结构。具体是指除核被膜、染色质、核纤层及核仁以外的核内网架体系。它与DNA复制,RNA转录和加工,染色体组装及等生命活动密切相关。核骨架的功能

1.为DNA复制提供支架,DNA是以复制环形式锚定在核骨架上,骨架上有DNA复制所需酶,DNA自主复制序列(ARS)也结合在骨架上。

2.是基因转录加工场所,RNA的转录也需DNA锚定在核骨架上,骨架上有RNA聚合酶结合位点,RNA合成是在骨架上进行。新合成RNA也结合在骨架上,并在此加工和修饰。

3.参与染色体构建,核骨架与染色体骨架为同一类物质,30nm纤维结合在核骨架上,形成放射环状结构,进一步包装成光镜可见的染色体。第十章 细胞骨架

细胞骨架:真核细胞中的蛋白纤维网络结构。

细胞骨架除维持细胞形态,还能承受外力、保证细胞结构有序,还参与许多生命活动: 牵引染色体分离;

物质运输小泡和细胞器沿细胞骨架定向转运;

肌细胞中,细胞骨架和结合蛋白组成动力系统;白细胞迁移、精子游动、神经细胞轴突和树突的伸展与骨架有关;

植物细胞中骨架指导细胞壁的合成。

细胞骨架主要由3类蛋白纤丝构成:微管、微丝、中间纤维。微管主要分布于在细胞核周围,并呈现放射状向细胞质四周扩散; 微丝主要分布在细胞质膜的内侧; 中间纤维分布在整个细胞。

第一节 微丝:是由肌动蛋白组成的直径7nm纤维,又称肌动蛋白纤维。

微丝和它的结合蛋白以及肌球蛋白三者构成化学机械系统,利用化学能产生机械运动。肌动蛋白是微丝的结构单位.所有真核细胞有肌动蛋白,进化高度保守。微丝的功能

形成应力纤维

2、微绒毛

3、细胞的变形运动

4、细胞的爬行

5、胞质分裂

6、顶体反应

7、细胞内运输

8、细质环流 第二节 微管

微管是细胞质骨架的主要成分,是由微管蛋白构成的中空管状结构,外径平均24nm,内径15nm.长度变化不定.细胞内微管呈网状和束状分布,能与其它蛋白共同组装成纺锤体、基体、中心粒、纤毛、鞭毛、轴突、神经管等结构

一、微管的基本构件:微管蛋白:微管是由ɑ微管蛋白和β微管蛋白组成。

二、微管的类型:微管有单体、双联体和三联体3种

4、微管的极性:①装配的方向性②装配速度不同

6、影响微管稳定性的药物:秋水仙素,紫杉醇

四、微管结合蛋白(MAP): Ⅰ型和Ⅱ型

MAP的功能:①使微管相互交联成束,也可使微管同质膜、微丝和中间纤维交联。②通过与微管成核点作用促进微管的聚合。③在细胞内沿微管转运囊泡和颗粒④提高微管的稳定性

六、微管的功能

1、支架作用

2、细胞内物质的运输

3、纤毛与鞭毛的运动

4、参与细胞的有丝分裂与减数分裂

第三节 中间纤维

直径为10nm,直径介于微管和微丝之间得名。

IF是一种坚韧、耐久的蛋白质纤维,较稳定,既不受细胞松弛素的影响也不受秋水仙素影响 IF具组织特异性,不同类型细胞含不同IF蛋白。多数细胞含有1种中间纤维,少数含2种以上。

一、类型

IF是一类形态相似,组成有明显差异的蛋白质,成分比微丝和微管复杂,依组织来源及免疫原性分5类:

1、角蛋白

2、结蛋白

3、胶质纤维酸性蛋白

4、波形纤维蛋白

5、神经丝蛋白

二、结构

中间纤维蛋白分子含一个310个氨基酸残基组成的α螺旋杆状区,及两端非螺旋化的球形头部(N端)和尾部(C端)。

杆状区高度保守,由螺旋1和螺旋2构成,每个螺旋区还分为A、B2个亚区,由3个非螺旋式的连结区连结在一起。头部和尾部的氨基序列在不同类型中间纤维中差异大,可进一步分为①H亚区:同源区;②V亚区:可变区;③E亚区:末端区。

四、IF的结合蛋白

IF的结合蛋白(IFAP)的功能是介导中间纤维交联成束、成网,或交联到质膜或其它骨架成分上,已知的IFAPs约15种,主要有:丝聚蛋白,网蛋白,锚蛋白,BPAG1,桥粒斑蛋白Ⅰ和Ⅱ

IFAPs的共同特点:①具有中间纤维特异性。②表达有细胞专一性。③不同的IFAP可存在于同一细胞中与不同的中间纤维组织状态相联系。④在细胞中某些IFAP的表达与细胞的功能和发育状态有关。

五、中间纤维的功能:了解较少,尚没找到与IF特异结合的药物,主要有三个方面:①为细胞提供机械强度支持②参与细胞连接③维持细胞核稳定

细胞周期:细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程。

M期细胞总能诱导非有丝分裂细胞中的染色体凝聚:染色体超前凝聚(PCC)

M期细胞可以诱导PCC,提示在M期细胞中存在一种诱导染色体凝集的因子,称促成熟因子MPF 不同细胞周期蛋白分别在细胞周期的不同时期表达,并与不同CDK(细胞周期依赖性蛋白激酶)结合,调节CDK的激酶活性(周期蛋白是一些调节复合物中的调节亚基部分,而CDK就是催化亚基部分。)周期蛋白不仅仅起激活CDK的作用,还决定了CDK何时、何处、将何种底物磷酸化,从而推动细胞周期的前进。各类周期蛋白均含有一段约100个氨基酸的保守序列,称为周期蛋白框,介导周期蛋白与CDK结合。泛素(ubiquitin)由76个氨基酸组成,高度保守,普遍存在于真核细胞,故名泛素。

共价结合泛素的蛋白质能被蛋白酶体识别和降解,这是细胞内短寿命蛋白和一些异常蛋白降解的普遍途径,泛素相当于蛋白质被摧毁的标签。26S蛋白酶体是一个大型的蛋白酶,可将泛素化的蛋白质分解成短肽。细胞生长因子是一大类与细胞增殖有关的信号物,已发现几十种,具促进细胞增殖功能,又称有丝分裂原 细胞分化是胚胎细胞分裂后,未定形的细胞在形态和生化组成上向专一性或特异性方向发展的过程 细胞分化的结果是演变成特定表型的细胞类群,这些细胞在形态上特化,在功能上专一化

影响细胞分化的因素

1、细胞质对细胞分化的诱导

2、细胞间的相互作用对细胞分化的诱导

3、形态发生过程中的位置效

4、激素对细胞分化的影响

5、分化的抑制

细胞分化是基因选择性表达的结果,但基因表达与分化之间具体关系仍不清.第二节 干细胞(stem cell)

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我更新能力的多潜能细胞,在一定条件下能分化成多种功能的细胞

1、根据干细胞所处的发育阶段分:胚胎干细胞和成体干细胞

2、根据干细胞发育的潜能分:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞

受精卵能够分化出各种细胞、组织,形成一个完整的个体,其分化潜能称为全能性(totipotent)。

1、转分化:一种类型的分化细胞转变成另一种类型分化细胞的现象

2、脱分化:分化细胞失去其特有的结构与功能变成具有未分化细胞特征的过程:植物愈伤组织

再生:狭义:指生物的器官损伤后,长出与原来形态、功能相同的结构的现象:广义:从分子、细胞到组织器官都有再生

(四)干细胞的特征

1、终生保持未分化或低分化特征

2、能无限分裂

3、在机体的中的数目、位置相对恒定

4、具有自我更新能力

5、具多向分化潜能,能分化成不同类型的组织细胞

6、分裂的慢周期性,大多数干细胞处于G0期

7、两种分裂方式: ①对称分裂:形成两个相同的干细胞②不对称分裂:形成一个干细胞和一个祖细胞。

胚胎干细胞是指从胚胎内细胞团或原始生殖细胞筛选分离出的具有多能性或全能性的细胞。

1、主要特性①在不同条件下具不同的功能状态:有抑制因子时呈未分化状态生长;无抑制因子时分化成各种细胞;悬浮培养时可形成胚状体②具有发育分化成各种类型细胞的多潜能

2、胚胎干细胞的应用①作为生产克隆动物的高效材料:作核供体;ES与胚胎嵌合克服远缘杂交困难②生产转基因动物的高效载体:以ES作载体进行外源基因的合理整合,进行细胞水平研究③发育生物学研究的体外模式:比较ES细胞体外分化不同阶段基因转录和表达,研究胚胎发育及细胞分化的机制④新型药物的筛选:代替实验动物⑤加快组织工程的发展:人工诱导定向分化,培育出特定的组织和器官,用于医学治疗的目的

成体组织器官中,很多细胞仍具自我更新及分化产生不同组织细胞的能力,即成体干细胞。第三节 癌细胞

癌细胞是一种突变的体细胞,脱离了细胞社会的控制,能无限增殖产生肿瘤,并对有机体的组织和器官形成破坏。

肿瘤可分为良性和恶性肿瘤两大类。

良性肿瘤:生长缓慢,与周围组织界限清楚,不发生转移,对人体健康危害不大。

恶性肿瘤:生长迅速,可转移到身体其它部位,还会产生有害物质,破坏正常器官结构,使机体功能失调,威胁生命。

肿瘤组织由实质和间质两部分构成,实质是肿瘤细胞,是肿瘤的主要成分,具有组织来源特异性。

间质起支持和营养肿瘤实质的作用,不具特异性,一般由结缔组织和血管组成,有时还有淋巴管。

癌细胞主要是指恶性肿瘤细胞,具特征:

1、失去生长与分裂的接触抑制:正常细胞体外培养时在培养器皿表面形成单层后即停止分裂,也即是细胞达到相互接触后停止分裂,称接触抑制;而恶性细胞失去了这种接触抑制作用,形成多层堆积的聚集体。

2、细胞周期失控,能持续的分裂与增殖。

3、具有迁移性,细胞粘着和连接相关的成分发生变异或缺失,相关信号通路受阻,细胞失去与细胞间和细胞外基质间的联结,易从肿瘤上脱落。许多癌细胞具有变形运动能力,并且能产生酶类,使血管基底层和结缔组织穿孔,使它向其它组织迁移

4、定着依赖性丧失:正常真核细胞,除成熟血细胞外,须粘附于特定的细胞外基质上才能抑制凋亡而存活,称定着依赖性(anchorage dependence)。肿瘤细胞失去定着依赖性,可在琼脂、甲基纤维素等支撑物上生长。

5、去分化现象:肿瘤细胞中表达的胎儿同功酶达20余种。胎儿甲种球蛋白(甲胎蛋白)为胎儿所特有,但在肝癌细胞中表达,可做肝癌早期检定的标志特征。

6、体外培养的癌细胞对生长因子(血清)的需求量显著降低:癌细胞能通过自分泌刺激其细胞增殖。某些瘤细胞还能释放血管生成因子,促进血管向肿瘤生长。获取营养物质。

7、代谢旺盛:肿瘤组织的DNA和RNA聚合酶活性均高于正常组织,核酸分解过程明显降低,DNA和RNA的含量均明显增高。

8、蛋白质合成及分解代谢都增强,但合成代谢超过分解代谢,并可夺取正常组织的蛋白质分解产物,使机体处于严重消耗的恶病质状态。

9、线粒体功能障碍:即使在氧供应充分时也主要以糖酵解途径获能。

10、可移植性:正常细胞移植时,因免疫排斥,不易存活。但肿瘤细胞具可移植性,人肿瘤细胞可移植到鼠类,形成移植瘤。

11、死亡特性改变:正常细胞在生长因子不足或受到伤害时就会启动PCD;癌细胞丧失了PCD机制。

12、染色体异常:常出现非整倍性染色体组,有丧失或增加。

13、细胞骨架变化:细胞骨架少而杂乱无章,导致形态变化很大。

二、肿瘤形成包括始发突变、潜伏、促癌和演进等过程

(一)肿瘤形成的内因

恶性肿瘤的形成往往涉及多个基因的突变,与原癌基因、抑癌基因突变的逐渐积累有关。

1、原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必需,进化上高等保守。原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。

2、癌基因(oncogene):依其来源可分为两类:①细胞癌基因:多由原癌基因突变而来。编码的蛋白使细胞生长不受控制,促进细胞癌变。②病毒癌基因

原癌基因的激活:基因本身或其调控区发生了变异,导致基因的过表达,或产物蛋白活性增强,使细胞过度增殖,形成肿瘤。

3、抑癌基因的产物是抑制细胞增殖,促进细胞分化,并抑制细胞迁移,起负调控作用,抑癌基因的突变是隐性突变或功能丧失突变。

正常二倍体细胞中,每一抑癌基因有两个拷贝,只有当两个拷贝都失活时才使细胞增殖失控

二、肿瘤形成的外因:人类肿瘤80%是由于与外界致癌物接触引起,依性质可分为化学、生物和物理致癌物3大类。依在致癌过程的作用分为:启动剂、促进剂、完全致癌物。第十三章 细胞衰老与凋亡

①生理性衰老:随年龄增长所表现出的生理退化,一切生物皆存在②病理性衰老:由于内在或外在原因使人体发生病理性变化,使衰老提前发生,称早衰③心理性衰老:由于心态的提前老化而影响整体功能 第一节 细胞衰老

一、衰老的概念

衰老(aging,senescence):随年龄增加,生物内环境稳定性下降,结构与生理机能退行性变化,趋向死亡不可逆的过程。

衰老发生在整体水平、种群水平、个体水平、细胞水平以及分子水平等层次。机体的衰老并不等于所有细胞的衰老,但细胞的衰老与机体衰老密切相关

二、细胞的寿限:Hayflick界限(Hayflick limitation):细胞在体外培养条件下,即使条件适宜,细胞也不能无限制地进行分裂,而是有一定界限

2、细胞的寿限

各类细胞的寿命各不相同,一般来说,能够保持持续分裂能力的细胞相对不容易衰老,分化程度高又不分裂的细胞寿命大多有限 人体细胞的动态分类

人体细胞寿命依增殖,分化,生存时间,分4类

①更新组织:执行某种功能的特化细胞,一定时间后衰老死亡,由新细胞分化补充,如上皮细胞、血细胞。②稳定组织细胞:分化程度较高,功能专一,一般没明显衰老,不分裂,但终生保持分裂能力,受破坏时,其余细胞也能分裂,补充失去的细胞,如肝、肾细胞。

③恒久组织细胞:高度分化细胞,一生没细胞更替,破坏后不能得补充。如神经细胞,骨骼细胞和心肌细胞。

④可耗尽组织细胞:卵巢实质细胞,一生中逐渐消耗,不能得到补充,最后消耗殆尽。

三、细胞衰老的形态学特征

细胞衰老主要是细胞生理生化的变化,也反映在细胞形态结构和功能上:

1、细胞内水分的减少:蛋白质水合能力下降,衰老细胞水分减少,细胞皱缩,体积缩小。

2、核变化:核膜内折,染色体固缩化,端粒缩短

3、线粒体的变化:随年龄增大,数量减少,体积增大,内容物呈网状化并形成多囊体,mtDNA缺失突变

4、质膜的变化:流动性下降,磷脂减少,不饱和脂肪酸下降;膜脂过氧化,对刺激反应性下降

5、内质网的变化:RER趋向减少和无序化

6、蛋白质合成:核糖体合成效率及准确性降低

7、色素生成及致密体形成:色素生成随衰老而增加,并在溶酶体或线粒体中沉积

四、分子水平的变化

衰老细胞DNA、蛋白质和脂类等成分损伤,代谢能力降低,主要表现:

DNA:复制与转录受抑制,个别基因异常激活,端粒DNA丢失,线粒体DNA特异缺失,DNA氧化、断裂、缺失和交联,甲基化程度降低。RNA:mRNA和tRNA含量降低。

蛋白质:含成下降,蛋白质糖基化、氨甲酰化、脱氨基等修饰,使蛋白质稳定性、抗原性、可消化性下降,自由基使肽断裂、交联而变性。aa由左旋变右旋

酶分子:活性中心被氧化,Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丢失,酶分子二级结构、溶解度、等电点改变,酶失活

脂类:不饱和脂肪酸被氧化,引起膜脂间或与脂蛋白间交联,膜流动性下降。

四、细胞衰老的分子机制

对衰老机理具有不同学说,主要有: 差错学说(Error theories):强调衰老是由于细胞中的各种错误积累引起.遗传学说(Genetic/Programmed theories):强调衰老是遗传决定的自然演进过程。第二节 细胞坏死与凋亡

死亡是生命的普遍现象,但细胞死亡并非与机体死亡同步。正常组织中,常发生“正常”的细胞死亡,它是维持组织机能和形态所必需。

细胞死亡的方式通常有2种①细胞坏死(necrosis)。②细胞凋亡(apoptosis)。

一、细胞坏死

细胞受到化学因素(如酸、碱、毒物)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素伤害,引起细胞死亡的现象。是一种被动死亡

细胞坏死初期,细胞质膜通透性增加,线粒体和ER肿胀、崩解,结构脂滴游离、空泡化,蛋白质颗粒增多,核发生固缩。胞质蛋白变性、凝固或碎裂,嗜碱性核蛋白降解,细胞质呈强嗜酸性,坏死细胞苏木精/伊红染色,胞质呈红色,原有微细结构消失

坏死后期,细胞膜破裂,细胞内容物流出,引起周围组织炎症反应。

二、细胞凋亡(cell apoptosis)

又称程序性细胞死亡(PCD):是细胞接受基因指令后的主动死亡。

凋亡的细胞散落在正常组织中,无炎症反应,不遗留疤痕。死亡细胞的碎片很快被巨噬细胞或相邻细胞所清除,不影响其它细胞的功能

程序性细胞死亡表现出明显的形态学特征:

①核酸内切酶活化,使染色质DNA在核小体连接部位断裂,形成约200bp整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状;

②染色质在核膜下聚集成染色质块,细胞不断脱水,胞质凝缩,核膜在核孔处断裂,细胞以出芽方式形成凋亡小体(apoptotic body);

③凋亡小体内有结构完整的细胞器、凝缩的染色质,可被邻近细胞吞噬消化,始终有膜封闭,没内溶物释放,不引起炎症。

第三节 细胞凋亡的分子机理

细胞凋亡和增殖是生命的基本现象,是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段以细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞,保证了胚胎的正常发育; 在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变细胞,保证了机体健康。细胞凋亡是受基因调控的精确过程 apoptosis的途径主要有:

1、胞外信号激活细胞内凋亡酶caspase;

2、线粒体释放凋亡酶激活因子激活caspase 活化的caspase可将胞内重要蛋白降解,引起细胞凋亡。叶绿体与线粒体结构和功能的比较

叶绿体和线粒体都是真核细胞中与能量代谢相关的细胞器,有着相同的起源和增殖方式,且都是半自主性细胞器。但两者在结构与功能上也有很大的不同: 结构上,线粒体是双膜结构,有两个区室,而叶绿体是三膜结构,有三个区室。

线粒体内膜向内折皱成嵴,ATP合酶位于嵴上,主要功能是传递电子和合成ATP。而叶绿体内膜少有内折。•功能上,线粒体是有机物氧化的场所,通过氧化磷酸化将释放的自由能转变成可利用的化学能储存在ATP。叶绿体是光能的捕获者和有机物的制造者,光能的捕获和转化是通过光合作用来完成的。但两者都是通过电子传递和建立H+梯度来实现能量的转换。

•在质子梯度建立上二者有许多相似,也有区别,叶绿体中H+梯度是在类囊体膜两侧建立,在线粒体中,H+梯度是在内膜两侧建立的.微丝的功能

1.形成应力纤维:在粘着斑的细胞质膜的下方有肌动蛋白成束排列,这种结构即称应力纤维 非肌细胞中的应力纤维与肌原纤维类似:含原肌球蛋白、myosin II、细丝蛋白和α辅肌动蛋白 培养的成纤维细胞中具有丰富的应力纤维,并通过粘着斑固定在基质上。应力纤维在细胞形态发生、分化和组织形成起重要作用

2、微绒毛:肠上皮细胞微绒毛有轴心微丝,微丝呈同向平行排列,(+)端指向微绒毛的尖端。不含肌球蛋白等,无收缩功能,起维持微绒毛形状的作用

3、细胞的变形运动:变形虫、巨噬细胞和白细胞等没运动器官,能依靠细胞形态的变化进行移动,称变形运动。靠胞质环流形成伪足,细胞沿伪足方向前进。

细胞内流动的细胞质称内质,从尾部流向伪足,并在细胞两侧形成较硬的外质。细胞后部外质破坏向前提供新的内质,产生内质和外质的循环转化,引起细胞前移。

外质与内质间的转变称凝胶-溶胶转变,实质是肌动蛋白聚合体与单体间的转变

4、细胞的爬行

高等动物中的细胞移动是很多活动所必需,如伤口的愈合、防止感染、血块凝集等,但难以观察,只能用培养的细胞观察 分为四步:

微丝纤维生长,细胞表面突出,形成片足; 在片足与基质接触的位置形成粘着斑; myosin作用下微丝纤维滑动,细胞主体前移; 解除细胞后方粘着点。如此循环,细胞前移动

5、胞质分裂:有丝分裂末期,2个将分离的子细胞之间产生收缩环,收缩环由平行排列的微丝和myosin II组成。随着收缩环的收缩,两个子细胞的胞质分离。在细胞松驰素存在的情况下,不能形成胞质分裂环。

6、顶体反应:精卵结合时,微丝使顶体突出穿入卵子的胶质里,融合后受精卵细胞表面积增大,形成微绒毛,微丝参与形成微绒毛,有利于吸收营养。

7、细胞内运输:微丝可作为马达蛋白进行物质运输的轨道,如小泡的运输,可通过肌球蛋白Ⅰ同微丝蛋白结合,将小泡沿微丝的(-)端向(+)端运输

8、细质环流:由肌动蛋白与肌球蛋白相互作用引起。在胞质环流中,肌动蛋白的排列方向相同,(+)端朝向细胞质流动的方向,肌球蛋白可沿着肌动蛋白纤维(-)端向(+)端移动。微管的功能

1、支架作用

微管具一定机械强度,能抗压和抗弯曲,给细胞提供了机械支持力,使细胞维持一定的形态。在培养的细胞中,微管呈放射状排列在核外,(+)端指向质膜,形成平贴在培养皿上的形状。微管能帮助细胞产生极性,在神经轴突中,微管束沿长轴排列,确定轴突的方向.微管对细胞内部结构及细胞表面突起的维持具有重要作用

2、细胞内物质的运输

微管是胞内物质运输路轨,破坏微管会抑制运输

与微管结合起运输作用的马达蛋白有两类:驱动蛋白kinesin,动力蛋白dynein,均需ATP供能。①Kinesin由1条轻链和2条重链构成,具2个球形的头,是动力产生部位,1个扇形尾,是货物结合部位。通过结合和水解ATP,使颈部构象改变,两个头部交替与微管结合,沿 “行走”,将“尾部”结合的“货物”从微管(-)端转运到(+)端。

②动力蛋白Dynein分子量巨大,由两条相同的重链和一些轻链及结合蛋白构成(鞭毛二联微管外臂的动力蛋白具有三个重链)。作用主要有:

A.在有丝分裂中推动染色体的分离;B.驱动鞭毛的运动;C.向着微管(-)极运输小泡,与驱动蛋白运输方向相反

3、纤毛与鞭毛的运动

纤毛与鞭毛是细胞特化结构,两者没绝对界限,短而多者称纤毛,长者而少称鞭毛,直径相似。

两者结构相似:由基体和鞭杆2部分构成,鞭杆轴心含9+2排列的微管:9个二联微管和1对中央微管构成。二联微管由AB两个管组成,A管对着相邻的B管伸出两条动力蛋白臂,并向鞭毛中央发出一条辐。基体的微管为9+0,且为三联微管,类似中心粒 轴心的主要蛋白结构有: ①微管蛋白二聚体,无秋水仙素结合位点;②动力蛋白臂:由二联体的A亚基伸出,与相邻二联体B亚基相互作用使纤毛弯曲.动力蛋白也是ATP酶,能被Ca2+、Mg2+所激活;

③微管连接蛋白:将相邻二联体连接在一起; ④放射幅条:9条,二联体A亚基伸向中央微管; ⑤内鞘:包裹中央微管

纤毛和鞭毛运动的微管滑动模型: ① A管上的动力蛋白与相邻二联管B管接触,使动力蛋白结合的ATP水解,并释放出ADP+Pi;②ATP水解改变了动力蛋白头部的构象和角度,使头部向相邻二联管的正端滑动,使相邻二连管间产生弯曲力;③新结合的ATP,促使动力蛋白头部与B管脱离;④ATP水解使动力蛋白头部角度复原,与相邻二联管的B管上的另一位点结合,开始下一循环

4、参与细胞的有丝分裂与减数分裂

细胞分裂过程中染色体的分离是靠纺锤体的形成、运动和解聚开完成的

纺锤体又称有丝分裂器,它是在有丝分裂期间,从中心粒形成的各种微管:动粒微管、极微管、星微管等 绿色丝状就是微管结构

有丝分裂器的形成有赖于中心体的复制,并分别移到两极。中心体在细胞周期中具有复制-分离-复制的周期,称中心体循环

中心体循环始于G1期,两个子代中心粒达到了足够长度,但仍处于同一中心体,有丝分裂早期,中心体裂开,每对中心粒移向细胞相反的两端,然后装配成有丝分裂器

在有丝分裂过程中,染色体的分离依靠两种力的作用:①动粒微管去装配产生的拉力;②极微管聚合产生的推力

根据所使用的力,有丝分裂可分为两个阶段:后期A和后期B 后期A,染色体运动的力主要是由动粒微管去装配产生的拉力,此时的运动称向极运动 后期B,染色体运动的力主要是极微管聚合产生的推力,此时的运动称染色体极分离运动 微管去聚合作用假说:主要解释后期A向极运动的一种模型:

微管的正端插入动粒的外层,微管蛋白和动粒蛋白分子有亲合性,微管蛋白在此端可以去组装。在动粒中,ATP分子水解可提供能量,驱动微管上的动力蛋白向两极移动,将染色体拉向两极 纺锤体微管滑动假说:是关于后期B染色体分离机制的一种假说: 首先,极微管在正端添加二聚合体延长,使两极的极微管重叠; 然后,在重叠的极微管之间产生滑动,形成将两极分开的力 中间纤维的功能:

了解较少,尚没找到与IF特异结合的药物,主要有三个方面:

①为细胞提供机械强度支持:IF在细胞质内形成了一个完整的支撑网络系统,并通过整联蛋白与质膜和细胞外基质相连;在内部可直接与MT和MF及其它细胞器相连,赋予了细胞一定强度和支撑力。②参与细胞连接:参与了桥粒和半桥粒连接 ③维持细胞核稳定:核纤层蛋白是IF的一种

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