第一篇：植物病理学的发展2
植物病理学的发展
摘要:人是由新石器时代开始，便已启蒙，逐步认识植物的本性，并系统地积累起来而建成一门自然科学。古代人民对植物学的奠基工作主要是在农、药等实用方面，本科及种植的著作。随着世界新技术革命高潮的到来,植物病理学这一古老而又年轻的学科得以产生和发展，特别是在农业领域。遗传模式植物的利用，农业上重要生物的序列测定以及生物信息学和功能基因组学的结合使用促进了农业领域的植物病理学发展。关键词：植物病理学；植物一病原菌；发展；新技术 1 植物病理学的产生
植物病理学成为一门学科，即使从Tillei,和Prevost算也还不到200年的历史，真正形成一门学科要从De Bary算起，那还不过百余年的事。在这百余年之中，植物病理学贡献最多的方面是病原微生物学。当然，最早集中研究的只是真菌调查、真菌分类以及真菌的形态学和个体发育学。当然，最早集中研究的只是真菌调查、真菌分类以及真菌的形态学和个体发育学。只有对少数重要的病原真菌如麦类黑粉菌(包括散黑穗和腥黑粉)和锈菌是研究得比较详细的，也由此而揭发了一些病原真菌的侵染规律，例如锈菌的长短型生活循环和其中的一些转株寄生型。
随着病原真菌的确立，从植物病害整体来看，细菌病害占的比列倒比较小，因此对植物病理学的基本原理也研究得比较少。对于病原真菌和一般真菌的分类研究，从上世纪2O年代起，在美国以康乃尔大学为主，贡献较多我国有许多著名的真菌学家，都在此校进行过研究。植物病理学的发展 2.1植物病理学发展趋势
上世纪的植物病理学有两大发展：
一、对植物抗病性的认识和作物的抗病育种的兴起，以及抗病基因遗传规律的研究，从而证实了抗病基因的复杂性。抗病性可以是单对的，也可是多对而具有加成作用的，此外还有所谓抑制基团等等。因此抗病育种便成为一门专门学科。除此以外，真菌生理小种和生物型的发现又增加了抗病育种的复杂性。美国明尼苏达太学对小麦锈病经过持续几十年的研究，常被称为明尼苏达学派。此派的抗病性是以一个或数个生理小种为对象的，这就是后来称之为垂直抗性的。另有一个学派在上世纪50年代以后提出了水平抗性在实用方面的重要性。水平抗性往往是中度或低度的，但是比较稳定。有一些水平抗性接近于耐病性。
本世纪该学科经多年的研究积累已形成三个有明显优势和特色的研究方向：一是植物分子病毒学及抗病毒基因工程育种，主要研究植物病毒诊断技术、不同植物病毒之间以及病毒与寄主之间的互作方式、病毒相关基因的克隆及抗病毒基因工程等，了解病毒间互作机制、对病害流行学及病害防治有重要的指导作用；二是真菌与植物真菌病害，在半知菌分类、真菌资源的前期利用和植物真菌病害的研究等方面形成了自身的特色，并行成明显优势；三是分子植物病毒学，主要研究植物与病原物互作的分子机理及其利用策略和途径。
2.2 植物病理学发展中的新技术 2.2.1 细胞培养技术
利用细胞培养技术培育抗病品种已广泛投入应用。如利用茎尖组织培养可获得不带病毒的种苗等等都是成功的实例。近年利用D N A重组技术并结合单细胞培养技术来培育抗病品种也进行了大量的研究工作。另外,利用体细胞克隆变异(即组织培养时再生植物的遗传性变异)法培育抗病品种的研究也在进行。
2.2.2 单克隆杭体技术
单克隆抗体技术的发展,为植物病害的快速而准确地诊断提供了新的手段。在美国及欧洲一些国家已经能生产一些植物病毒的单克隆抗体。单克肆抗体技术不仅为检测患病植物的病因提供了非常敏感和特异性的方法,而且对植物病毒、类菌质体和细菌的分类鉴定及血清学亲缘关系的研究等也提供了强有力的手段。单克隆抗体技术由于只能识别单个抗原的位置,不与宿主蛋白起交叉反应,故对难以提纯的病毒特别重要。因此,单克隆抗体技术用来鉴定植物病毒比酶联免疫吸附分析更快更精确。今后几年内,预计这一技术在植病领域中的应用研究将是主要课题之一。
2.2.3 激光技术在植物病理学领域的应用
在植物病理学领域中，激光技术的应用研究已经有了良好的开端，激光照射的杀菌机理是激光的光子激活病菌抱子内的分子，使病菌抱子内温度骤然升高，从而杀死病菌抱子。这些研究表明，激光技术用于植物病害防治将是一种有希望的方法，其实用价值及防病效果如何人们正拭目以待。激光技术的其它应用包括，采用激光粒径测定技术测定在空中运动的药物雾粒直径，为雾粒运动性能的研究提供了有效手段。
2.3植物病理学发展过程的交叉学科 2.3.1分子生物学与植物病理学 分子生物学技术的飞速发展及其在植物病理学中的广泛应用，为植物抗病基因和病原菌无毒基因的克隆奠定了基础。近40个植物抗病基因和30多个病原菌无毒基因的克隆及其结构与功能的明确，有利于深入研究病原菌—寄主之间的相互作用关系，制定更为有效的植物病害防治措施。因此植物抗病基因和病原菌无毒基因等抗病相关基因的克隆策略、结构与功能、抗病分子机制，以及植物抗病基因的研究离不开分子生物学。
2.3.2基因组学在植物病理学
基因组学和后基因组学研究期望能提供植物生物过程一个全面的了解，特别是在病原菌和植物互作方面。另外后基因组学也可以并且应该用于植物病理学研究。其中包括基因组范围敲除突变株的反向遗传研究途径，特别是T—DNA插入突变株在拟南芥基因功能的研究上已经成为有价值的资源。使用蛋白微阵列技术用于抗体检测存在的抗原或用抗原检测抗体蛋白的蛋白组学研究，针对检测生物系统代谢过程的代谢组学研究，针对检测生物系统代谢过程的代谢组学研究也应该结合进来。
为了增强植物抗性，综合的基因组学研究可以加强对最适合调控的候选基因的选择，而且可以预测更为准确的调控结果，更深入地理解植物作为“寄主”的遗传途径。类似的，作为复杂的有机体，对病原菌生物学的深入了解更显示出其在农业上的重要性，因此任何有关基因组学的研究都能够促进新防治方法的产生。例如可以针对特异病原菌的基因遗传方式发明一个新的除草剂或杀菌剂。传统的研发过程包括喷洒各种化学药剂处理杂草和病菌，期望从中找到一种能杀死病菌而对作物无害的药剂。一旦发现了合适的药剂，还要开展大强度的遗传、生理及生化方面的研究来鉴定杂草或真菌何种蛋白受到了影响。这种传统方法费时、昂贵且成功率小。通过针对杂草或病菌特异基因及其遗传方式的研究方法将会大大加快对环境无害的除草剂和杀菌剂的发明。
2.3.3 生物信息学与植物病理学
以往植物病理学家利用电子计算机主要是进行数据分析。而今,电子计算机在植物病理学中的应用范围也十分广泛,包括数据分析和图示、模拟模型、数据收集、文字处理以及信息传递等。当前,电脑在植物病理学科研、教学、情报咨询服务等各方面已经成为一种重要的有时是必需的工具。植物病理学上使用的计算机语言主要是FORTRAN语言和BASIC语言。随着微型机的日益发展,用BASIC语言编写的用于植物病理学的程序也日益多起来。现在已有专门用于植物病理学的软件。在美国明尼苏达州已用电脑来预测马铃薯和甜菜病害。预测稻瘟病发病趋势,符合率达70%，为及时防病提供了信息，减少了损失。
利用生物信息学进行文献检索及情报咨询服务也早已为植物病理学家所采用。还有新农药的开发研究也可借助计算机来帮助进行分子结构设计。植物病理学发展前景
新技术的不断产生植物病理学中应用的评述实为豹斑之窥。应该说,新技术在植物病理中的应用范围是广泛的,前景是辉煌的,随着科学的发展必将得到逐步完善和推广，并且我国是农业大国，但是中国农业的生产技术比较落后，尤其是对农作物病虫草鼠害的防治技术还比较落后，虽然我国的农作物种植面积大，但是产量较低，生产效益较差，农业生产过程中存在很多隐患，因此可以进行此方面的研究真正将农业生产向健康发展态势转变。
第二篇：植物病理学实验大纲
实验部分
实验
一、植物病原学（3学时）
实验目的：认识植物传染性病原物的主要类型及其形态特征、致病机制等，明确重要病原生物的主要分类鉴别特征及其致病特点，初步掌握不同类型病原生物的诊断和鉴定要点，学会识别诊断和防治不同类型病原物所引起病害的一般方法。
实验内容：植物病害的描述方法，包括的病害的病状和病症，病状类型主要有变色、坏死、萎蔫、腐烂、畸形等，病症主要有霉状物、点状物、粉状物等类型；非侵染型病害主要包括缺素、环境因素、药害等类型。
实验
二、植物病原真菌形态与分类（3学时）
实验目的：认识病原物致病性因素及其变异,明确寄主抗病性的类型及其复杂性,初步掌握寄主─病原物相互关系的理论学说，学会用运所学理论分析解决生产上品种抗性丧失问题及其相应的对策。
实验内容：植物病害病原物的营养体形态特征、营养体的变态与组织，真菌繁殖方式：有性无性繁殖类型，以及繁殖体孢子类型；真菌分类概述；病原生物其他类型如：原核生物、病毒、线虫、寄生性种子植物等形态特征。
实验
三、植物病害循环与病程与防治（3学时）
实验目的：认识病害循环和侵染过程，明确病害流行的时空动态、流行类型及影响因素，掌握病害预测预报的一般方法，为今后制订有效的防治病害对策提供理论依据。
实验内容：了解植物病害侵染植物原物侵染植物病发病的过程，影响病程的因素，以及植物病害循环的特点，越冬越夏场所，了解植物病害的防治方法，保护作用、治疗作用，并掌握病害防治的常用技术。
实验
四、小麦病害和杂谷病害（3学时）
实验目的：掌握小麦和杂谷主要病害的症状和病原菌形态。
实验内容：小麦三种锈病；小麦白粉病；小麦根腐病；小麦黄矮病；玉米大斑病；玉米小斑病；玉米丝黑穗；玉米病毒病等的症状标本和玻片标本。
实验
五、薯类和棉花病害（3学时）
实验目的：掌握薯类和棉花主要病害的症状和病原菌形态。
实验内容：马铃薯晚病病；马铃薯病毒病；马铃薯环腐病；棉花苗期病害；棉花枯萎病；棉花黄萎病的症状标本和玻片标本。
主要实验用书及参考书：
《普通植物病理学实验指导》，许志刚主编，中国农业出版社1997； 《农业植物病理学实验实习指导》，李宏连主编，北京农业出版社2001 《植病研究方法》，方中达主编，中国农业出版社1996
第三篇：植物病理学 实验讲稿
园艺植物病理学实验讲稿
生命科学与农林学院
2014年8月
目录
实验一
植物病害症状的观察 实验二
植物病理徒手切片制作 实验三
真菌的形态观察
实验四
鞭毛菌亚门真菌形态观察 实验五
接合菌亚门真菌形态观察 实验六
子囊菌亚门真菌形态观察 实验七
担子菌亚门真菌形态观察 实验八
半知菌亚门真菌形态观察 实验九
培养基的制作 实验十
病原菌的分离培养 实验十一
植物的抗病性鉴定
实验一
植物病害症状的观察
一、实验目的
1.认识各类病害对植物造成的危害，了解植物病害的种类及其多样性，2.初步掌握主要病害的症状表现及其特点，学会植物病害症状的描述，为今后病害的诊断奠定基础。
二、实验原理
植物病害的症状是植物患病后由于异常生理活动而发生在细胞和组织上的病理变化，最后表现为肉眼可见的形态变化。有些症状也可用嗅觉、味觉或触摸进行观察。有的症状是单个细胞表现的症状，在这类症状中，最常见的是受某种病毒侵染的植株中所见到的细胞质内含体。
植物病害的症状可区别为两类不同性质的特征：病状和病征。病状是一定的寄主植物和病原在一定外界条件的影响下相互作用结果的外部表现，是以各自的生理机能或特性为基础的，而每种生物的生理机能，都是在质上有特异性，并且是相对稳定的。病变，作为这种相互作用过程的结果，一般说其发展是定向的。病状作为病变过程的表现，其特征也是较稳定的和具有特异性的。这就是利用病状诊断植物病害的基础。
病征是由病原微生物的群体或器官着生在病体表面所构成的，它更直接地暴露了病原物在质上的特点。如真菌子实体在寄主表面形成的霉层、黑点等。由植物病毒、植原体、许多病原细菌、非侵染性植物病害等没有病征的表现。病征的出现与否和出现的明显程度，虽受环境条件的影响很大，但一经表现出来却是相当稳定的特征，所以根据病征能够正确的判定病害。不同植物的任何病害都具有其独特症状，通常在病害发生过程中按一定顺序出现。病理学家正是根据这种顺序出现的症状在田间诊断植物病害。
病状和病征，尤其是前者，作为诊断病害的依据也有其局限性。首先是许多植物病害常产生相似的病状，因此要从各方面的特点去综合判断；其次，植物常因作物品种的变化或受害器官的不同，而使病状有一定幅度的变化；第三，病害的发生发展是一个过程，有初期和后期，病状也随之而发展变化；第四，环境条件对病状和病征有一定的影响，尤其是湿度对病征的产生有显著地作用，加之发病后期病部往往会长出一些腐生菌的繁殖器官。因此，症状的稳定性和特异性只是相对的，要认识症状的特异性和变化的规律，在观察植物病害时，须认真地从症状的发展变化
中去研究和掌握症状的特殊性；观察和采集植物病害标本，仔细地区别病征的那种微小的、似同而异的特征，这样才能正确地诊断病害。
三、实验材料、试剂与器材
1.按照植物病害的病状类型（变色、坏死、斑点、腐烂、畸形）和病征类型（粉状物、霉状物、点状物、菌核、溢脓等）准备植物病害的盒装标本、瓶装浸渍标本及新鲜标本（不同类型的病状和病征的标本可根据当地的情况准备）。
2.各类症状的挂图、模型、多媒体课件等。3.实体显微镜、手持扩大镜、水果刀、载玻片等。
四、实验步骤
（一）病状的观察
1．斑点 观察玉米大斑病、棉花角斑病、棉花黑斑病、大麦条纹病、小麦根腐叶斑病、大葱或大蒜紫斑病、花生网斑病、番茄早疫病、十字花科霜霉病等标本，注意不同类型病害所表现病斑的形状、大小、颜色等的异同以及病斑上有无轮纹、花纹伴生，同时注意观察各类病斑上有无病征以及病征的特点。斑点类发生在叶、茎、果等部位，受病组织局部坏死，一般有明显的边缘。斑点中还可以伴生轮纹、花纹等特点，根据病斑的颜色、形状等特点而分为褐斑、黑斑、紫斑、角斑、条斑、大斑、小斑、胡麻斑、轮纹斑、网斑等多种类型。
2．腐烂 观察甘薯黑斑病和干腐病病薯、马铃薯晚疫病和环腐病病薯、棉苗立枯病、柑桔溃疡病等病害标本，认识该类病害对植物所造成的危害，同时掌握这类病害的病状特点。腐烂类病状发生在植物的各个部位，由于组织分解的程度不同，有软腐、干腐之分。根据腐烂的部位，有根腐、基腐、茎腐、果腐、花腐等名称，还伴随有各种颜色变化的特点，如褐腐、白腐、黑腐等。
3．萎蔫 观察棉花、黄瓜等植物枯萎病、棉花和茄子黄萎病、玉米和茄科植物青枯病、马铃薯环腐病等标本，注意区别枯萎、黄萎、青枯等病状类型，必要时可以剖开病株茎杆观察微管束是否褐变。典型的萎蔫病状是植物根、茎的维官束组织受到破坏而发生的叶片或枝条萎垂现象，皮层组织完好，萎蔫病害常无外表的病征。植物受萎蔫菌侵染后，不一定都能引起萎蔫，发病初期有半边叶片、半个枝条萎垂的现象，但更常见的是全株性萎蔫。
提示 对于萎蔫类病害病状的观察应以新鲜标本为主，有条件时最好在田间进行，这类病害发生具有一定的地域性，观察时要注意其微管束组织的病变，干标本则失去了原有的特点。
4．变色 变色主要有两种类型。一种表现为黄化，是整个植株或叶片部分地或全部地均匀褪绿、变黄，或呈现其它的颜色。多数伴生有整株或部分的畸形。另一种为花叶，病株叶片色泽浓淡不均，深绿与浅绿部分相间夹杂，一般遍及全株，上部叶片较为显著，无病征表现。比较观察烟草花叶病、苹果花叶病、小麦黄矮病、瓜类、十字花科和茄科植物的病毒病病状、注意每一种病害的病状特点。
5．畸形 畸形类病状由不同组织、器官的病变，如叶片的膨肿、皱缩、小叶、蕨叶；果实的缩果及其它畸形；整个植株的徒长、矮缩；局部器官如花器和种子的退化变形和促进性的变态等。瘤、瘿、癌、丛枝和发根也是常见的畸形病状。观察桃缩叶病、十字花科根肿病、马铃薯癌肿病、果树根癌病、桑树根结线虫病、油菜白锈病、番茄蕨叶病、枣疯病、泡桐丛枝病、玉米黑粉病、小麦粒线虫病、水稻恶苗病等，归纳各类标本的病状类型。
（二）病征的观察
1．粉状物 借助手持扩大镜或实体解剖镜观察麦类锈病、十字花科白锈病、麦类白粉病、、玉米黑粉病和麦类黑粉病等病害标本，注意粉状物的颜色、质地和着生状况等。
2．霉状物 借助手持扩大镜或实体解剖镜观察黄瓜霜霉病、甘薯软腐病、瓜类软腐病、柑桔青霉病、番茄灰霉病和番茄叶霉病等病害标本或瓶装标本。注意区别霜霉、黑霉、绵霉、青霉和灰霉等不同类型的霉状物。
3．点状物 取小麦白粉病、瓜类炭疽病、棉花茎枯病、芹菜斑枯病、苹果树腐烂病和麦类赤霉病等病害标本，借助手持扩大镜或实体解剖镜观察，注意点状物是埋生、半埋生还是表生，以及在寄主表面的排列状况、颜色等。
4．菌核 观察油菜菌核病和水稻纹枯病等病害标本，注意菌核的大小、形状、颜色、质地等，并观察菌核萌发状况。
5．溢脓 溢浓为细菌性病害特有的病征。观察水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病、十字花科细菌性软腐病、棉花角斑病和黄瓜角斑病等病害标本，注意溢脓的颜色、出现位置等。用剪刀将植物病组织剪成 4mm 2的小块，放于载玻片上，加一滴水，盖上盖玻片，在显微镜下观察或直接用载玻片对光观察喷菌现象。
五、实验报告及作业
将上述病害标本的发病部位，病状类型和病症类型，填于下表：
植物病害症状观察表
病害名称
发病部位
病状类型
病症类型
1.植物病害的主要特征是什么? 2.症状在病害诊断上有什么作用? 3.植物病害对农业生产的危害性如何?
实验二
植物病理徒手切片制作
一、实验目的
观察植物病害病原物的形态，进行病原物的分类鉴定，研究受病组织的组织结构病变，受病植物组织与病原物的解剖学关系，以及对于难得一见病原物的保存备用等，都需将材料制成适当的显微玻片标本。因此，徒手制片技术也是植物病理学研究的重要手段之一。通过本次实验系统学习实践常用的徒手制片技术，为以后开展植物病理学的有关研究工作奠定坚实的制片技术基础。
二、实验材料、试剂和器材 1．受病植物组织
2.解剖针、刀片、剃刀、移置环、酒精灯、载玻片、盖玻片、毛笔、浅玻皿、浮载剂、70%酒精、乳酚油、展片台、光学显微镜
三、实验内容及方法
徒手制片的方法有整体封藏法、徒手切片法、组织透明制片法和涂抹制片法等多种。限于时间本实验实践最为常用的整体封藏法和徒手切片法两种。(一)
整体封藏法
对于生长在植物病部表面或培基上的菌丝体、分生孢子、分生孢子梗和其他孢子器官以及线虫等，可直接择取少许封藏在适当的浮载剂中，在显微镜下观察，根据材料的特点和观察的目的可采用不同的方法封藏制片。常用的方法的概括为挑、刮、拨、撕四种。
1挑：对于在植物受病部位或基质表面生长繁茂的霉状病原体(如霜霉菌)粉状病原体(如锈菌、白粉菌)以及培养基上的许多培养菌，可用尖细的解剖针等直接挑取封埋制片，挑取病原体的量，在保证选材典型的前提下，越少越好，以免互相重叠，分辩不清。
取黄瓜霜霉病叶，小麦白粉病叶分别挑取霉状物和粉状物镜检病原菌的形态特点。
2刮：对病部病原体稀少，或用放大镜也难辩认霉层的病害标本，可采用两侧具刀的三角刮针(或可用刀片代替)刮取病原物制片。刮的方法是，用刮针的一刃，蘸浮载剂少许，在病部顺同一个方向刮取2—3次，将刮得的病原蘸在载玻片的浮载剂
中封片镜检。浮载剂在保证浮载质量的前提下要尽量少，否则少量的病原体在大滴的浮载剂中极易分散漂流，在显微镜下难以寻找。取玉米小斑病叶，在病斑背面刮制片，镜检分生孢子梗和分生孢子的形态。
3拨：对于产生在植物表皮下或半埋生于基物内的病原体孢子器官。如子囊壳、分生孢子器、闭囊壳等，可将病原体连同寄主组织一同拨下，放入浮载剂中，用两支解剖针，一支稳定材料，另一支拨出植物组织，使病原体外露制片。取小麦全蚀病或白粉病标本，拨小黑点制片，镜检子囊果的形态。
4撕：对于寄生在植物表皮细胞上的病原真菌，也可以将此有病原物的表皮撕下来制片镜检，这种方法不仅能看到病原物形态，而且可以观察病原物与寄主的解剖学关系。
在毛毛雨天自田间取回感染白粉病的麦苗(或在保温箱中取接种染病的麦苗)。用刀片割破叶背表皮再用小镊子轻轻撕下，放在浮载剂中制片镜检白粉病菌分生孢子梗、分生孢子和吸器形态。(二)徒手切片法
欲观察受病组织病变，病菌侵入和寄主体内扩展过程，以及埋生在基物内真菌子实体的形态结构等，都需将有关材料切成薄片，进行镜检，徒手切片是最常用的简便易行的方法，不需要特殊的设备，而且节省时间，切成的片子不仅可作临时观察，也可进一步制成永久性玻片标本。
徒手切片的基本用具是剃刀或刀片。切片时先选取材料并作适当的修整，以左手的食指和姆指捏住材料，中指顶住材料下端，使材料上端突出于手指以上2—3毫米。右手握稳刀，从左向右后方斜向切割。注意刀口必须以材料面垂直。否则所得切面不正。同时双手不应紧靠身体，而是要活动自如。用臂力均匀地沿刀口后部起拉向前方，连续切割4—5片后，用毛笔蘸水轻轻沿刀口取下，放入盛有水的浅玻皿中，在此过程中左手握着的材料不要放下，否则再切时难按原位置拿材料，此外，在切片过程中，必须常用毛笔蘸水湿润材料，以免材料干涸不便切割。
对于过于柔软或较薄的材料，可以夹在“夹持物”中，进行切片更为方便。新鲜胡鲜卜和马铃薯块都可作“夹持物”用。实验室中通常将通草、接骨木或向日葵的茎髓，剪成适当大小，浸于70%酒精中备用。
切割一定数量的薄片后，用移置环在浅玻皿中选取合用的材料薄片，放在载玻片的水滴中，镜检合格者即酒精灯上将水烘干并摆正材料，然后加一滴乳酚油或其浮载剂；放在展片台上略加热，镜检如无气泡，即可小心加盖片，用吸水纸吸除多余的浮载剂，最后贴好标签，平放于切片板上，待干燥适宜时封固。
徒手切片的缺点是对于微小或过大，柔软、多汁、肉质及坚硬的材料不易切取，也难制成连续切片，此外切片的厚薄也难一致。切片机切片即可克服这些缺点。
病名： 学名： 制片人： 时间：
切片的标签制法
四、实验报告及作业
1．每人交两片符合质量要求的玻片标本。
2.整体封藏法和徒手切片法两种基本徒手制片技术都在什么情况下使用? 徒手切法制片有什么优缺点? 怎样解决这种方法本身存在的问题? 附：常用浮载剂及封固剂
1.水作浮载剂：最常用，但易于干燥，仅适于暂时性检查，不易封固保存，且易形成气泡(检查材料以酒精、5%明胶、水或稀肥皂水稍浸，洗净后再以水浮载可除去气泡)。
2.乳酚油：也较常用，成分及配比如下：
苯酚结晶(加热熔化)20ml
乳酸20ml
甘油40ml
蒸馏水20ml
乳酚油不易干燥，标本可存放几天以上，为使标本易于辩别，常在其中加染料苯胺蓝(棉蓝)，用量是0.05—0.1%(也有的加0.2—0.5%的锥虫蓝等)，因其是酸性染料，可染真菌原生质而不染细胞壁，故对分隔难辨的真菌孢子等可由此染色而看清。此法一般只用观察菌态，不适于测量孢子的大小(因为乳酚油的折射率近于孢子和菌丝体，1.43左右)。另一方面，此法制片，封固比较困难(因为乳酚油易于和封固剂起化学作用而分解)，可用达马树脂(和乳酚油不起化学作用)和等量蜂蜡混配做封固剂，蜂蜡放于玻璃皿中在水槽上熔化(温度勿过高)，达马树脂在铁罐中熔化(温勿过度)，然后将蜂蜡倒入熔化的达马树脂中搅和而成(加少量的贴金胶水，可增进与玻璃的附着力)，封固时以“L”形铜棒等在煤气灯上烧热后，蘸少许封固剂在盖玻片周围封固，此封固剂干燥快，经久不坏。但由于其致癌作用而逐渐被淘汰而改用甘油乳酸液。
3.甘油乳酸液：也可加苯胺蓝等染料，其成分如下：
乳酸
500ml
甘油
1000ml
蒸馏水
500ml
4.水合氯醛碘液：成分配比如下：
水合氯醛
100g
碘化钾
5g
碘
1.5g
水
100ml
碘与碘化钾研和，加水溶解。然后与水合氯醛混合，此浮载剂较好，能使真菌组织透明，并染上颜色，能弥补乳酚油的不足，一一看清细胞壁和其它结构，此法制片只可保存几天，不宜久存，为保存，可除去碘液再用乳酚油浮载后封存。5.甘油：此浮载剂适于保存藻类、水霉菌等柔软标本将标本放在一滴10%的甘油中，加盖玻片，水分蒸发后，随时补加甘油至水分蒸发净，制成的标本玻片平放可经久不坏，(擦去多余甘油，用香脂油或其它封固剂封固，可永久保存)。6.甘油明胶：成分及配方如下：
明胶
5g
甘油
35ml
水
30ml
明胶在水中浸透，加热至35℃溶化，加甘油搅和，用纱布过滤后使用。
徒手切片及其它标本，都可用此剂浮载制片，标本染色(或不染)后，先用甘油脱水(干燥标本可不脱水)，挑取小团甘油明胶放在载片上，微加热，待其熔化而气泡消失后，将标本取出吸除去多余甘油后移入熔化的甘油明胶中，加盖玻片轻轻下压，擦去盖玻片周围的多余甘油明胶。平放十几天，干后长期保存，用香脂或其它固剂封固后长久保存。
此浮载剂对于干燥标本易出气泡，用醋酸甘油先予处理可防此弊，成分配比如下：
醋酸钾(2%水溶液)300ml
甘油
120ml
酒精
180ml
标本放在载玻片上加小滴醋酸甘油，微加热以除气泡，并蒸去大部分油剂，趁热加入小团甘油明胶，熔化后加盖玻片，其后步骤同上。
实验三
真菌的形态观察
真菌分布广泛，种类繁多，已报导的将近
45000多种，是植物病原生物中最主要的一大类群，它所引起的病害占植物病害的80%以上，尽管真菌形态差异很大，但基本结构相似，大多数真菌有营养体和繁殖体之分，营养体是指吸收养分的器官，繁殖体是指从营养体上产生的各种类型的孢子。
真菌产生孢子的机构，无论是有形性的还是无性的，统称为子实体。真菌的孢子分为无性孢子和有性孢子两类。无性孢子有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子；有性孢子有休眠孢子囊、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担子孢子。真菌孢子的形态特征是鉴定和分类学上的重要依据，其营养体及其变态和菌组织体则是真菌分类的重要参考依据，有的还是重要的鉴别特征和分类依据。
一、实验目的
通过本次实验熟悉真菌的营养体和繁殖体的基本形态，为以后真菌病害的病原物鉴定和真菌分类奠定初步基础。
二、实验内容、材料和方法(一)真菌的营养体 1菌丝和菌丝体
除少数原始的类群以外，真菌典型的营养体是极为细小的丝状体，这种丝状体称为菌丝，生长成丛的菌丝称为菌丝体，低等真菌的菌丝是无隔的，大多数真菌是有隔的。
(1)挑取马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)或瓜果腐霉病菌(Pythium aphanidermatum)制片，镜检无隔菌丝。
(2)挑取立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)制片镜检有隔菌丝。
(3)观察各种病原真菌在平面和斜面培养基上形成的菌落，注意菌落大小、形状、厚薄、质地、颜色等形态特点。2菌丝组织体
有些真菌的菌丝体，在一定的条件下或一定的发育阶段，可形成特殊的组织体，常见有菌核、子座和根状菌索。
(1)菌核：菌核是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的一种休眠体，既是真菌贮藏养分的器官，又是真菌用以度过不良环境的休眠机构，菌核大小不一，色泽和形状也各不相同。菌核中的菌丝组织已有分化现象，外皮组织细胞排列紧密，色深壁厚，具有保护作用，为拟薄壁组织；内层细胞壁薄色淡，排列疏松，仍可维持营养作用，为疏丝组织。
肉眼观察麦角病、油菜菌核病、黄瓜菌核病和大葱菌核病标本，比较菌核形状、大小、颜色；镜检细辛菌核病的菌核制片，注意比较表皮与内部组织细胞的排列特点。
(2)子座：子座是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的容纳子实体的座垫状结构，或由菌丝体与部分寄主组织结合而成的称为假子座。子座是真菌从营养体到繁殖体的过渡机构，除可在其上或其内形成子实体外，也有度过不良环境的作用。
肉眼观察稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)的分生孢子座；镜检苹果树腐烂病菌(Valsa mali)和稻
香
柱菌(Epichloe typhina)所形成的子座制片，注意子座形状，着生部位及内部繁殖体类别。
(3)根状菌索：少数高等真菌的菌丝体还可纠结成绳索状的组织体，形如高等植物的根，故称根状菌索，其作用是帮助菌体蔓延和抵抗不良环境，根状菌萦组织也有表皮和内部组织的分化。
肉眼观察林木上根状菌索的外部形状，注意和菌核比较，找出二者区别。
3菌丝体上分化出的吸收养分组织
(1)吸器：是寄生在细胞间的真菌，特别是一些专性寄生菌在菌丝体上形成的吸收养分的器官，形状有球状、丝状、掌状、裂片状等。
镜检小麦白粉病菌(Blumeria graminis)吸器制备片，注意吸器的形状及其形成的部位。
(2)假根：为伸入基物内的菌丝体，形如高等植物的根系，故称假根。假根除用其吸收养分外，还有固着菌体的作用。
挑取培养基中培养的甘薯软腐病菌(Rhizopus nigricans)的菌丝(注意针尖要插入培养基内)制片镜检或镜检根足霉(Rhizopus sp.)制备片，注意假根与普通营养菌丝的区别。
(3)附着胞：从幻灯片或照片观察病菌侵染寄主植物形成附着胞的形态。
(4)菌环和菌网：捕食性真菌常由菌丝分化成菌环和菌网组织来捕捉线虫等小动物，然后再由菌丝侵入线虫体内吸取营养。(二)真菌的繁殖体——孢子
真菌的繁殖方式分无性和有性两种，分别产生无性孢子和有性孢子两大类型。真菌的无性繁殖包括断裂、出芽和产生孢子等，真菌的有性生殖包括质配、核配和减数分裂三个阶段。
1无性孢子：不经过性细胞或性器官的结合便能产生孢子，称为无性孢子。真菌产生的无性孢子类型很多，主要的有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子。
(1)游动孢子：游动孢子为鞭毛菌亚门真菌特有的无性孢子，产生在由菌丝顶端细胞或由菌丝分化成的孢子囊梗的顶端细胞膨大形成的孢子囊内、具鞭毛，能游动。
制片镜检用线麻粒诱发的绵霉和水霉的游动孢子囊和游动孢子，镜检番茄晚疫病菌(Phytophthora infestans)的游动孢囊梗、游动孢子囊和游动孢子。(2)孢囊孢子：孢囊孢子为接合菌亚门真菌特有的无性孢子，生成方式和游动孢子相似，也是内生的，但无鞭毛，不能游动。
挑取黑根霉(Rhizopus sp.)制片(或取制备片)镜检孢子囊梗，孢子囊和孢囊孢子，注意观察孢子囊的形态及其着生位置及孢囊孢子的形态，颜色和产生的数目。(3)分生孢子：子囊菌亚门真菌和大部分半知菌亚门真菌都产生分生孢子，分生孢子外生在分生孢子梗上，形状、大小、颜色不一，单生，链生或集生，分生孢子梗
有的散生，有的束生，有的产生在分生孢子盘上或分生孢子器内，产生在分生孢子器内的分生孢子也叫器孢子。
取玉米大斑病(Exserohilum turcicum)的病叶，用刀片轻轻刮取病斑上的霉状物制片镜检分生孢子梗和分生孢子或挑取斜面培养基上培养的小麦根腐病菌(Bipolaris sativum)制片镜检分生孢子梗和分生孢子，另取苹果灰斑病(Phyllosticta pirina)制片镜检分生孢子器和器孢子，注意分生孢子的形状，色泽，细胞数目及着生情况。(4)厚垣孢子：镜检厚垣孢子制备片，菌丝中或孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。
2有性孢子：由两个不同的性细胞或性器官相结合而产生的孢子叫有性孢子，有性孢子主要有以下4种。
(1)卵孢子：部分鞭毛菌亚门真菌的有性孢子，由菌丝上产生的两种异形配子囊交配产生。制片镜检谷子白发病菌(Sclerospora graminicola)的卵孢子或镜检大豆霜霉病菌(Peronospora manshurica)卵孢子制备片，注意卵孢子形状、大小、颜色，孢壁形态。
(2)接合孢子：为接合菌亚门真菌的有性孢子，由两个同形配子囊交配而成。镜检毛霉(Mucor)接合孢子制片，注意接合孢子的大小，形状，颜色及表现特点。(3)子囊孢子：为子囊菌亚门真菌产生的有性孢子，由两个异形配子囊交配生成，子囊孢子产生在子囊内，多为8个，子囊除极少数子囊菌裸生外，多数子囊菌生于子囊果中。取山楂白粉病(Podosphaera oxyacanthae)病叶，用解剖针将白粉上的小黑点(闭囊壳)仔细拨至载玻片上的水滴中，加盖片并轻轻压破闭囊壳，镜检闭囊壳，子囊、子囊孢子和附属丝的形态，特别注意子囊的数目和附属丝的特点，另取油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotium 132)制备片，镜检子囊盘、子囊和子囊孢子。
(4)担孢子：为担子菌亚门真菌的有性孢子，由菌丝结合后减数分裂而成，外生于担子或先菌丝上。挑取萌发的玉米丝黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana)制片镜检冬孢子、先菌丝及担孢子的形态，另取小麦腥黑穗病菌(Tilletia caries)冬孢子萌发的制备
片，镜检冬孢子、先菌丝及担孢子的形态，比较两种黑粉病菌的区别。
另外还有一种有性孢子为休眠孢子囊，由两个游动配子结合而成，为二倍体，萌发时减数分裂释放出单倍体的游动孢子。如壶菌、根肿菌可产生休眠孢子囊，根肿菌产生的休眠孢子囊萌发时通常只释放出一个游动孢子，有时也称为休眠孢子。
三、实验报告及作业
1绘有隔菌丝，无隔菌丝和菌核剖面图。
2绘分生孢子、孢囊孢子、卵孢子及子囊孢子的形态图。 3菌丝有无隔膜是否反应一定的进化关系? 4菌核和子座在形态和功能上有何不同?
5真菌吸器的有无与寄生性的强弱是否有一定关系?
6分生孢子和孢囊孢子的生成过程，形成数量(与产孢细胞比较)及着生部位等方面
有何不同?
7卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担子孢子在有性生殖过程中形成的时期有何不同?
实验四
鞭毛菌亚门真菌形态观察
鞭毛菌是一类低等真菌，其中不少是水生的。它们的共同特征是无性繁殖时产生有鞭毛的游动孢子。根据菌体的形态和游动孢子鞭毛的特征分为根肿菌纲、壶菌纲、丝壶菌纲和卵菌纲。其中与植物病害关系较为密切的有根肿菌纲、壶菌纲、卵菌纲。
一、实验目的
了解鞭毛菌亚门中根肿菌纲、壶菌纲和卵菌纲真菌的主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点，同时学习使用检索表来鉴定病菌，为分类鉴定打下初步基础。
二、实验仪器与用品
显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备；载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、刀片、通草、酒精灯、无菌水等。
三、实验材料
1．芸苔根肿菌（Plasmodiophora brassicae）2.马铃薯粉痂菌（Spongospora subterranea）3．禾谷多粘霉（Polymyxa graminis）
4.玉蜀黍节壶菌（Physoderma maydis）
5．串囊水霉（Saprolegnia.monilifera）
6.稻绵霉（Achlya oryzae）
7.瓜果腐霉（Ｐythium aphanidermatum）
8.致病疫霉（Phytophthora infestans）
9.禾生指梗霉(Sclerospora graminicola)
10.葡萄霜霉病菌（Plasmopara viticola）
11.寄生霜霉（Peronopora parasitica）
12.瓜类霜霉病菌（Pseudoperonospora cubensis）
13.莴苣盘梗霉（Bremia lactucae）
14.十字花科白锈病菌（Albugo candida）
以上病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片，多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）以及水霉和腐霉游动孢子形成与释放的录相带等。
四、实验内容和方法
（一）根肿菌纲（Plasmodiophoromycetes）
1.芸苔根肿菌 取甘蓝根肿菌切片，镜检切片中的病原菌。有的寄主细胞内可见到许多堆集在一起的鱼籽状颗粒，是病菌的休眠孢子。休眠孢子近球形。
2.马铃薯粉痂菌 镜检马铃薯粉痂病菌切片，在寄主根的皮层组织的受害细胞中可看
到病原菌的休眠孢子，球形至多角形，多个休眠孢子聚集呈海绵状或空心球。
3.禾谷多粘霉 选取有褐点的根，用解剖刀或镊子撕取小麦根基皮层，制成临时玻片，镜检。病菌的休眠孢子常有规律地呈条状排列。
提示 被寄生的表皮细胞呈褐色小点，必须仔细观察才能见到。
（二）壶菌纲（Chytridiomycetes）
玉蜀黍节壶菌（Physoderma maydis）观察由玉蜀黍节壶菌引起的玉米褐斑病标本。用针挑取受害病组织内呈黄色粉末状物制成临时玻片，或对病组织作徒手切片，镜检可见到许多金黄色扁球状的休眠孢子，休眠孢子椭圆形，一面扁平有盖。
（三）卵菌纲(Oomycetes)水霉目(Saprolegniales)
1.串囊水霉 引起水稻烂秧，又称水稻烂秧水霉菌。孢子囊圆筒形或棍棒状，层出式，即新的孢子囊从老的空孢子囊内基部长出，游动孢子具明显的两游现象。
2.水稻烂秧绵霉菌 孢子囊圆筒形或棍棒状，合轴分枝，新的孢子囊从老孢子囊的基部外侧长出，呈聚伞形排列，游动孢子第一个活动时期很短，休止孢在孢子囊顶部孔口处聚集成团。
霜霉目（Peronosorales）
1.腐霉属（Pythium）观察瓜果的腐烂病病果上的白色菌丝体，将生长旺盛的小块菌丝体移至清水中培养24～48h，菌丝顶端即形成大量游动孢子囊，用针挑取在清水中培养过的菌丝，观察腐霉菌的游动孢子囊，丝状、姜瓣状或球状等，顶生或间生，无特殊分化的孢囊梗。孢子囊不脱落，萌发时在其顶端产生一管状物，原生质经管状物排出而形成泡囊。游动孢子产生在泡囊内。
2.疫霉属（Phytophthora）取马铃薯或番茄晚疫病标本制片观察。孢囊梗2~3支成丛自气孔伸出，假轴状分枝，小梗基部膨大，多次产生孢子囊，使孢子囊梗上部呈节状；孢子囊近球状、卵形或梨形等，具乳突。
3.霜疫霉属（Peronophthora）取荔枝霜疫霉病标本挑取霉层观察，孢囊梗直立，双叉锐角分枝，孢囊梗多级有限生长。孢子囊柠檬形、椭圆形，乳突明显。
4.霜霉属（Peronospora）取十字花科植物（油菜、白菜等）的霜霉病标本从叶背面刮取霉层观察，孢囊梗二叉状锐角分枝，末端尖锐。
按照寄生霜霉的观察方法，选取禾生指梗霉、葡萄霜霉病菌、瓜类霜霉病菌、莴苣盘梗霉等材料，对照下列检索表，制片观察各种霜霉病的病原菌或观察病菌永久玻片标本，掌握霜霉科几个常见属的主要形态特征。霜霉科主要属的检索表
1.孢囊梗粗壮，上部为重复2～3次的不规则二叉分枝…………指梗霉属（Sclerospora）1.孢囊梗较细……………………………………………………………………………………2 2.孢囊梗单轴分枝，小轴与主轴成直角，分枝末端平钝………单轴霉属（Plasmopara）2.孢囊梗呈现锐角二叉分枝……………………………………………………………………3 3.分枝两侧不对称，顶端尖锐……………………………假霜霉属（Pseudoperonospora）3.分枝两侧对称…………………………………………………………………………………4 4.分枝顶端尖细……………………………………………………… 霜霉属（Peronospora）4.分枝顶部膨大，呈盘状，具3～4个指状周生小梗…………………盘梗霉属（Bremia）5.白锈菌属（Albugo）镜检苋菜白锈病菌组织切片，或取以上病叶徒手切片制成临时玻片镜检。孢囊梗平行排列在寄主表皮下，短棍棒形，孢子囊串生。白锈菌危害症状是在寄主表面产生乳白色或粉状的疱斑，这是病菌在寄主表皮下形成的孢子囊堆，白色粉状物是成熟的孢子囊。
五、实验报告及作业
1.鞭毛菌亚门真菌的共同特征和分类依据是什么？
2.以营养体、无性繁殖、有性生殖来比较鞭毛菌亚门三个纲的区别。
3.观察十字花科蔬菜根肿病菌、马铃薯粉痂病菌、禾谷多粘霉菌、玉米褐斑病菌、水霉菌或绵霉菌，绘休眠孢子囊或游动孢子囊图。
4.绘瓜果腐霉病菌、马铃薯晚疫病菌或十字花科蔬菜白锈病菌孢囊梗、孢子囊，卵孢子图。
5.绘瓜类霜霉病菌、莴苣霜霉病菌、葡萄霜霉病菌孢囊梗、孢子囊图。6.详绘大白菜霜霉病和粟白发病的病原形态图（包括无性繁殖和有性生殖）。7.卵菌纲真菌有哪些特点？结合它们的生物学特性、寄生性及病害特点说明本纲真菌进化的情况。
实验五
接合菌亚门真菌形态观察
接合菌亚门真菌的共同特征是有性生殖产生接合孢子。大多数是腐生的，少数可以引起农产品的腐烂。接合菌营养体为发达的无隔菌丝体，无性繁殖产生具细胞壁的孢囊孢子，有性生殖产生接合孢子。孢子囊的形态、孢囊孢子释放以及寄生性等是重要的分类依据。
一、实验目的
通过实验掌握接合菌的一般形态及其所致病害的症状类型，了解同宗配合和异宗配合的含义及同型配子囊、异型配子囊的差别。
二、实验仪器与用品
显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备；灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子等。
三、实验材料
甘薯软腐病新鲜标本、挂图、病原菌永久玻片，多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）等；根霉属的甘薯软腐病、犁头霉和毛霉“﹢、﹣”菌株的斜面培养物或培养皿平板培养物；三角瓶装PDA培养基。
四、实验内容和方法
（一）甘薯软腐病症状观察
受害甘薯变软腐烂，有时散发出酒味，病薯表面长出白色、灰色至黑色毛状物。仔细观察，能见到白色菌丝体中有许多小黑点。小黑点是病菌的孢子囊。
用针挑取霉层制片、镜检，观察孢子囊、孢囊孢子、孢囊梗及囊轴、假根的形态。
（二）匐枝根霉培养物的镜检观察
用挑针仔细地从培养的匐枝根霉菌中挑取少许连有培养基的培养物，制成临时玻片，在低倍镜下检查。或者用实体解剖镜直接观察培养皿上的菌体。观察菌丝的形态和具有分枝的孢囊梗及其基部的假根，孢囊梗之间有匍枝状的菌丝相连，在孢囊梗基部有深入寄主细胞或基质中分枝状的假根。在每一个孢囊梗的顶端产生一个圆球状的孢子囊，用高倍镜观察孢子囊内部的构造，在未成熟的孢子囊内，往往只有大量的小颗粒体，接近成熟的或成熟的孢子囊内则充满了许多褐色圆形的孢囊孢
子。孢子囊壁破裂后，孢子散出，露出锣锤形的囊轴。
（三）接合孢子观察
取根霉属和犁头霉属接合孢子玻片观察，并注意原配子囊、配囊柄及配子囊的发育特点。成熟的接合孢子深褐色，表面粗糙。犁头霉菌的接合孢子在配子囊柄的着生处有附属丝，注意观察配囊柄的形状及大小。
（四）异宗配合现象观察
取融化了的PDA培养基、灭菌培养皿置于铺有湿纱布的桌上，在洒精灯火焰附近，按无菌操作要求，将培养基倒进灭菌培养皿内，每个 9cm 皿内倒入10～15ml培养基，冷却后即成平板。取具有“﹢、﹣”性征分化并有亲和性的匐枝根霉、犁头霉或毛霉两个菌株，分别按下列图示方式接种到三个培养皿的平板上，在培养皿的底部写上所接种的菌株编号、接种日期，在 25°C 温箱中培养一周，观察异宗配合现象。记录哪个培养皿中形成了接合孢子。
五、实验报告及作业
1.接合菌亚门真菌的主要特点是什么？与鞭毛菌亚门有何区别？
2.根据+、-菌株平板接种培养结果，说明其产生接合孢子的原因？
3.何为同型配子囊、异型配子囊？
4.哪些接合菌与病虫害的生物防治有关？怎样利用它们？
5.绘匍枝根霉菌孢子囊、孢囊梗、孢囊孢子、假根、匍匐菌丝和接合孢子形态图。
实验六
子囊菌亚门真菌形态观察
子囊菌是一类高等真菌。菌丝体一般都很发达，有隔膜，具分枝，有的菌丝体可以形成菌核、子座等机构。子囊菌的共同特点是有性生殖产生子囊和子囊孢子。子囊菌所致病害的种类很多，其中许多是重要的经济作物病害。子囊菌亚门分纲的主要依据是子囊果及子实层的有无、子囊果的类型、子囊的特征等。据此分6个纲：半子囊菌纲、不整囊菌纲、核菌纲、腔菌纲、盘菌纲和虫囊菌纲。
一、实验目的
通过实验，了解子囊菌亚门各个纲病原菌的主要形态特征，掌握子囊菌中与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致主要病害的症状特点。
二、实验仪器与用品
显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备；灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、刀片、通草、擦镜纸、无菌水等。
三、实验材料
1.桃缩叶病(Tapharina deformans)和李袋果病(T.pruni)2.散囊菌(Eurotium sp.)3.禾白粉病菌(Blumeria graminis)
4.向日葵白粉病菌(Erysiphe cichoracearum)5.瓜白粉病菌(Sphaerotheca fuliginea)
6.桃白粉病菌(Podosphaera tridactyla)7.洋槐白粉病菌(Microsphaera sp.)
8.桑里白粉病菌(Phyllactinia corylea)9.葡萄白粉病菌(Uncinula necator)
10.甘薯黑斑病菌(Ceratocystis fimbriata)11.玉蜀黍赤霉菌(Gibberella zeae)
12.苹果树腐烂病菌(Valsa mali)13.小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis)14.黑麦麦角菌(Claviceps purpurea)15.竹多腔菌(Myriangium haraeanum)
16.葱叶枯病菌(Mycosphaerella sp.)17.苜蓿轮纹病菌(Pleospora herbarum)
18.核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）
19.紫云英菌核病菌(S.trifoliorum)
以上病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片、多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）。
四、实验内容和方法
（一）半子囊菌纲(Hemiascomycetes)
外囊菌属(Taphrina)取桃缩叶病或李袋果病材料作临时玻片，在显微镜下检
查。可看见子囊在寄主叶片的表皮下排列成栅栏状，形成无包被的子囊层，子囊下有足胞，常含孢子4～8个。子囊圆筒形，近球形或椭圆形。
（二）不整囊菌纲(Plectomycetes)
散囊菌属(Eurotium)观察示范镜下散囊菌的闭囊壳、子囊或散在闭囊壳内的子囊孢子。闭囊壳壁薄，只有2~3层细胞构成。子囊孢子单胞、近圆形。
（三）核菌纲(Pyrenomycetes)白粉菌目(Erysiphales)
本目是专性寄生菌。白粉菌侵染植物可引起多种植物的白粉病。白粉菌菌丝表生，在寄主体表扩展蔓延。一般在叶部引起褪绿或黄色斑，以后叶面出现白色或灰白色的粉状物，即白粉菌的无性繁殖形成的分生孢子。生长后期，在病部形成许多黑色小颗粒。这些小黑点是白粉菌的闭囊壳。闭囊壳有附属丝，附属丝呈丝状，其形态因种而异。闭囊壳内子囊数目也不一样，一至多个。附属丝的形状和子囊数目的多少是分属的依据。
选取小麦白粉病、向日葵白粉病、瓜白粉病、桃白粉病、洋槐白粉病、桑里白粉病、葡萄白粉病等不同材料。在实体解剖镜下观察闭囊壳及附属丝的轮廓及形态。挑取闭囊壳作临时玻片，在显微镜下检查。注意闭囊壳的形状、有无孔口、闭囊壳表面附属丝的形状和着生部位。然后轻轻挤压盖玻片，使闭囊壳破裂。观察闭囊壳内的子囊，数数是单子囊还是多子囊。
对照下列检索表，观察各种白粉病的病原菌永久玻片或标本，掌握白粉菌科几个常见属的主要形态特征及所致病害症状。白粉菌主要属检索表
1.闭囊壳内单个子囊……………………………………………………………………………2 1.闭囊壳内多个子囊……………………………………………………………………………3 2.附属丝菌丝状…………………………………………………… 单囊壳属(Sphaerotheca)2.附属丝刚直，较粗，顶端二叉状重复分枝，分枝末端螺旋状卷曲………… ………………………………………………………………叉丝单囊壳属(Podosphaera)3.附属丝菌丝状…………………………………………………………………………………4 3.附属丝非菌丝状………………………………………………………………………………5 4.附属丝发育不良，较短……………………………………… 布氏白粉菌属（Blumeria）
4.附属丝较长………………………………………………………………粉菌属(Erysiphe)5.附属丝刚直，基部膨大，顶端尖锐…………………………………球针壳属(Phyllactinia)5.附属丝基部不膨大……………………………………………………………………………6 6.附属丝粗，刚直，顶端二叉状重复分枝，分枝末端卷曲……叉丝壳属(Microsphaera)6.附属丝不分枝，顶端卷曲………………………………………… 钩丝壳属(Uncinula)
球壳菌目（Sphaeriales）
1.长喙壳属(Ceratocystis)观察甘薯黑斑病菌培养物，挑取病菌灰白色物中间深褐色或黑色毛刺状小点，观察病菌的子囊壳。子囊壳深色、球形，有长颈，开口处有须状物，称口须。轻压盖玻片将子囊壳压破，成熟的子囊孢子头盔状，子囊壁早期胶化消解。
2.赤霉属（Gibberella）取培养在麦粒上的玉蜀黍赤霉菌子囊壳，制成临时玻片镜检，在显微镜下观察。子囊壳蓝色或紫色，散生或聚生。子囊孢子多个细胞，梭形。
3.黑腐皮壳属（Valsa）取苹果树腐烂病菌切片镜检，子囊壳埋生在子座内，有长颈伸出子座。子囊孢子单细胞，香蕉形。
4.顶囊壳属（Gaeumannomyces）观察小麦全蚀病害标本，注意病株基部根系生长不良，茎基部叶鞘枯腐，叶鞘内有黑色小颗粒状物，即病菌的子囊壳。取含有子囊壳叶鞘做切片，置显微镜下观察子囊壳形态，子囊壳顶端有短喙；子囊孢子细线状，多细胞。
5.麦角菌属（Claviceps）取黑麦麦角菌切片，置显微镜下观察，头状子座内壁周围有瓶状子囊壳，子囊壳开口向外。子囊壳内有子囊和子囊孢子。子囊细长，子囊孢子线形。
（四）腔菌纲(Loculoascomycetes)
1.多腔菌属（Myriangium）取竹多腔菌切片置显微镜下观察，可见到很发达的子囊座组织。子囊球形，单生，子囊孢子有纵横隔膜, 砖格状。
2.球腔菌属（Mycosphaerella）取葱叶枯病菌切片，置显微镜下观察,单腔多子囊。子囊圆柱形至棍棒形，有双层壁。子囊初期束生，后平行排列；子囊孢子椭圆形，双胞。
3.格孢腔菌属（(Pleospora)取苜蓿轮纹病病菌切片，置显微镜下观察，囊孢子长圆
形或卵圆形，砖格状（多细胞，有纵横分隔）。
(五)盘菌纲(Discomycetes)核盘菌属（Sclerotinia）取油菜菌核病菌子囊盘切片，置显微镜下观察，子囊盘具长柄；子囊孢子椭圆形或纺锤形。观察油菜菌核病症状及菌核萌发标本，菌核球形至豆瓣形，鼠粪状，一般生子囊盘4～5个。菌核上形成的子囊盘具长柄。
五、实验报告及作业
1.子囊菌亚门各纲的主要特征是什么？ 2.绘外囊菌属和散囊菌属的形态图。
3.白粉属和单丝壳属、叉丝壳属和叉丝单囊壳属的主要区别是什么？ 4.绘白粉属、叉丝单囊壳属、球针壳属、钩丝壳属的形态图。5.绘赤霉属、多腔菌属、核盘菌属形态图。6.子囊菌有性繁殖体的病征类型和特点是什么？
实验七
担子菌亚门真菌形态观察
担子菌亚门真菌一般称作担子菌，是真菌中最高等的。其共同特征是有性生殖产生担孢子。担子菌亚门的分纲依据是担子果的有无，担子果的发育类型可分为三个纲：冬孢菌纲、层菌纲、腹菌纲。与植物病害关系密切的是冬孢菌纲。根据担子的来源及特征，担孢子的数目及位置，冬孢菌纲分为锈菌目和黑粉菌目。锈菌的分类主要依据冬孢子的形态，排列和萌发的方式。而黑粉菌的分类主要依据冬孢子的萌发方式，孢子的分隔，排列及其大小，形状及是否有不孕细胞等进行分类。
一、实验目的
通过实验了解担子菌亚门冬孢菌纲主要病原菌的形态特征，掌握锈菌目和黑粉菌目中与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致主要病害的症状特点。
二、实验仪器与用品
显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备，灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、蒸馏水滴瓶、通草、刀片、擦镜纸、酒精灯、无菌水、PDA培养基等。
三、实验材料
锈菌目（Uredinales）：
1.菜豆锈菌（Uromyces.appendiculatus）2.禾柄锈菌（Puccinia graminis f.sp.tritici）3.禾叶锈菌（Puccinia recondita）
4.禾条锈菌（Puccinia striiformis）
5.梨胶锈菌（Gymnosporangium haraeanum）6.蔷薇多胞锈菌（Phragmidium rosae-multiflorae）7.亚麻锈菌（Melampsora lini）
8.花椒鞘锈菌（Coleosporium xanthoxyli）9.松栎锈菌（Cronartium quercum）
10.枣层锈菌（Phakopsora zizyphi-vulgaris）
黑粉菌目（Ustilaginales）：
1.小麦散黑粉菌（Ustilago tritici）
2.玉蜀黍黑粉菌（U.maydis）
3.丝轴黑粉菌（Sphacelotheca reiliana）
4.高粱坚粒黑粉菌（Sphacelotheca sorghi）5.高粱散粒黑粉菌（Sphacelotheca cruenta）6.高粱团黑粉菌（Sorosporium ehrenbergii）7.小麦网腥黑穗菌（Tilletia caries）
8.小麦光腥黑穗菌（Tilletia tritici）9.稻尾孢黑粉菌（Neovossia horrida）
10.稻叶黑粉菌（Entyloma oryzae）11.小麦条黑粉菌（Urocystis tritici）
以上病菌引起的病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片和病菌的PDA培养物;多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）。
四、实验内容和方法
（一）冬孢子萌发试验
冬孢菌纲不同类型冬孢子萌发方法是不同的，几种常见的冬孢子的萌发方法如下：
1．小麦网腥黑穗菌和光腥黑穗菌 将冬孢子撒在保湿器皿内的用1%硝酸钙液润湿的滤纸上，在17～ 22℃ 下培养，每天于日光灯下照射4h，3d后检查萌发情况。
2．小麦条锈病菌 取带冬孢子病叶在0.5～1%柠檬酸中浸15min，再放于两层潮湿的滤纸之间，于-2~-5℃ 下冷冻5d后，挑取冬孢子置于水滴内，在冰箱内（4℃）保存48h即可萌发。
（二）锈菌目（Uredinales）
1.单胞锈菌属（Uromyces）观察菜豆锈病或茭白锈病标本，挑取冬孢子制成玻片观察。冬孢子具柄，单细胞。
2.柄锈菌属 观察小麦杆锈病、小麦叶锈病或小麦条锈病标本，冬孢子堆黑色。将有冬孢子堆的寄主叶片组织切下，制切片于显微镜下观察。冬孢子有一隔膜，分隔处稍缢缩，柄不胶化。
4.胶锈菌属（Gymnosporangium）从用水浸泡过的胶锈菌冬孢子角上用挑针挑取冬孢子制片观察，冬孢子双胞，分隔处不缢缩或稍缢缩。柄丝状，很长，含胶质。
5.多胞锈属（Phragmidium）挑取玫瑰锈病组织上的冬孢子，制片观察，冬孢子多细胞，通常下部膨大易胶化。
6.栅锈菌属（Melampsora）取亚麻锈菌病组织制作徒手切片观察。冬孢子无柄，集成壳状或垫状，冬孢子仅侧面结合成一层，埋生于寄主表皮下。
7.鞘锈菌属（Coleosporium）取花椒锈病组织制作切片观察，冬孢子堆生于叶背或排列成环状，圆形黄褐色。冬孢子无柄，集成壳状或垫状的孢子粒，集生于寄主表皮层下。
8.柱锈菌属（Cronartium）取马尾松锈病标本制片观察，冬孢子堆生于叶背，毛状，冬孢子梭形。
9.层锈菌属（Phakopsora）取枣锈病组织制作切片观察，冬孢子堆呈黑色，冬孢子
排成2～4层，长椭圆形或多角形。
（三）黑粉菌目（Ustilaginales）
1.黑粉菌属（Ustilago）孢子堆外露，很少由寄主组织长期包裹，担子分隔，担孢子生在担子每一细胞的侧面。
挑取小麦散黑粉（穗）病组织上的冬孢子制成玻片观察。冬孢子球形或近球形。另取冬孢子萌发切片观察。冬孢子萌发产生4个细胞的担子，从担子的不同细胞分别生出丝状分枝，不产生担孢子。
挑取玉米瘤黑粉病组织上的冬孢子制片观察，冬孢子球形至卵形。另取冬孢子萌发切片观察。冬孢子萌发时产生有隔担子，担子顶端或分隔处侧生梭形的担孢子。
2.轴黑粉菌属（Sphacelotheca）冬孢子堆周围有膜（不孕菌丝），中央有寄主组织，担子分隔，担孢子生在担子每一细胞的侧面。
挑取高粱丝黑穗病组织上的冬孢子制片观察。冬孢子卵圆形或球形，暗褐色，有时混生有不孕细胞，不孕细胞无色透明。
取高粱坚粒黑穗病标本观察。孢子堆生于子房中，冬孢子多圆形或近圆形，不孕细胞长圆形至近圆形。
取高粱散粒黑穗病标本观察。冬孢子堆有由菌丝体组成的灰白色被膜，冬孢子球形，分散。
3.团黑粉菌属（Sorosporium）观察高粱长粒黑穗病标本，病粒（即菌瘿）外层包有一层浅黄色薄膜。孢子堆结合成孢子球，孢子球的结合很松。稍加压就分散，无不孕细胞。
4.腥黑粉菌属（Tilletia）取小麦网腥黑穗病或小麦光腥黑穗病标本观察。冬孢子单生，孢子堆成熟时呈粉未状，冬孢子较小。孢子堆生于子房内，外包果皮，内部充满黑紫色粉状孢子，有腥味。
5.尾孢黑粉菌属（Neovossia）取水稻粒黑穗病标本挑片观察，孢子堆寄生于子房内，产生黑粉。挑取黑粉制片，显微镜下可见，孢子球形，常有一部分未成熟的透明孢子。
6.叶黑粉菌属（Entyloma）取水稻叶黑粉病标本，切片观察。孢子堆生于叶的两面，圆形至长条形。孢子多角形，结合紧密。取萌发的担孢子玻片观察，担孢子顶
生于担子上，纺锤形。
7.条黑粉菌属（Urocystis）取小麦秆黑粉病标本，制片观察。一至多个厚垣孢子集结成牢固的孢子球，孢子球外有淡色而小的不孕细胞包围。
五、实验报告及作业
1.绘黑粉菌属、腥黑粉菌属和条黑粉菌属冬孢子形态图。2.绘腥黑粉菌属冬孢子萌发图。
3.绘柄锈菌属、单胞锈菌属、栅锈菌属和胶锈菌属冬孢子形态图。
实验八
半知菌亚门真菌形态观察
半知菌亚门真菌的种类很多，其中不少是植物病害的重要病原菌。半知菌的分类主要是根据无性阶段的形态特征，包括分生孢子的形态、载孢体的类型、产孢方式等。半知菌亚门分3个纲。芽孢纲：营养体为单细胞或发育程度不同的菌丝体或假菌丝，通过产生芽孢子繁殖；丝孢纲：营养体是发达的菌丝体，分生孢子不产生在分生孢子盘或分生孢子器内；腔孢纲：分生孢子产生在分生孢子盘或分生孢子器内。与植物病害关系比较密切的是丝孢纲和腔孢纲。
一、实验目的
通过实验认识半知菌子实体的类型及重要致病菌属的形态特征，掌握常见植物病原半知菌属的鉴别特征。
二、实验仪器与用品
显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备，灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、刀片、通草、酒精灯、放大镜，恒温箱，方木块，剪刀等。
三、实验材料
半知菌引起的病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片和病菌的PDA培养物；多媒体教学课件（包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料）。
丝孢纲（Hyphomycetes）
1.立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）
2.齐整小核菌（Sclerotium rolfsii）
3.稻梨孢（Pyricularia oryzae）
4.玉蜀黍平脐蠕孢（Bipolaris maydis）
5.玉米大斑突脐蠕孢（Exserohilum turcicum）
6.大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）
7.芸苔链格孢（Alternaria brassicae）
8.球座尾孢（Cercospora personata）
9.梨黑星孢（Fusicladium virescens）
10.灰葡萄孢（Botrytis cinerea）
11.粉红聚端孢（Trichothecium roseum）
12.意大利青霉（Penicillium italicum）
13.褐孢霉（Fulvia fulva）
14.尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）
腔孢纲（Coelomycetes）
1.胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）2.葡萄痂圆孢（Sphaceloma ampelinum）
3.梨壳囊孢（Cytospora carphosperma）
4.芹菜生壳针孢（Septoria apiicola）
5.高粱生壳二孢（Ascochyta sorghina）
6.甜菜蛇眼病菌（Phoma beta）
7.梨叶点霉（Phyllosticta pyrina）
四、实验内容和方法
（一）丝孢纲
1.丝核菌属（Rhizoctonia）观察预先培养的棉花立枯病菌或小麦纹枯病菌菌落。菌核褐色至黑褐色。挑取菌丝制片观察，菌丝粗壮，菌丝分枝呈直角，分隔处常缢缩。
2.小核菌属（Sclerotium）取花生白绢病或小麦、大豆、棉花、烟草等白绢病菌标本或培养观察，病菌菌丝白色绢丝状；菌核圆形至长圆形，褐色至黑色，表面暗色，中心无色，组织致密，干时极硬，彼此无菌丝相连。
3.梨孢属（Pyricularia）取水稻稻瘟病标本，用挑针挑取病叶上的霉状物制片观察。分生孢子梗细长，淡褐色，顶部以合轴式延伸，呈曲膝状，分生孢子多胞，梨形。
4.平脐蠕孢属（Bipolaris）取玉米小斑病叶，挑取病斑上的霉层观察。分生孢子梗单生或丛生，上部呈曲膝状弯曲；分生孢子蠕虫形或长椭圆形，多胞，脐点稍微突出，平截状。
5.突脐蠕孢属（Exserohilum）取玉米大斑病病叶，用挑针挑或刮取其上的黑色霉状物制片，置显微镜下观察。其分生孢子梗暗色，具分隔，一般少分枝，上部呈曲膝状。分生孢子棱形，多胞，脐点明显突出于基细胞外部。
提示 观察时注意与平脐蠕孢属的区别，主要在于其脐点是否突出。
6．镰孢属（Fusarium）取瓜类枯萎病菌培养观察，气生菌丝白色，绒毛状，在PDA培养基上底部呈淡黄色或淡紫色；挑针挑取培养物制片观察，小型分生孢子量大，无色，卵圆形，单胞，偶尔双胞；大型分生孢子无色，纺锺形或镰刀形，1～5个隔膜，基部有时有一显著的突起，称足胞。
提示 有时可观察到厚垣孢子，顶生或间生于菌丝体上。
7.轮枝孢属（Verticillium）取培养好的棉花黄萎病菌平皿，直接放于显微镜载物台上观察，其分生孢子梗细长直立具分隔，呈轮状分枝。分生孢子梗呈直角分枝，分生孢子单胞，生于分枝顶端。
提示 培养菌用的培养基不宜太厚以便透射光能穿透，平皿放到载物台上小心移动，使视野覆盖菌落边缘，这样才能找到理想的轮状分枝结构。
8.链格孢属（Alternaria）取白菜黑斑病病叶，用挑针挑取病斑上的黑色霉状物制片，显微镜下观察。分生孢子长棍棒状，具纵横分隔，呈砖格状，顶端有一长条形喙状细胞。
9.尾孢属（Cercospora）取芹菜早疫病（斑点病）病叶，挑取霉层制片，分生孢子梗不分枝或少有分枝；分生孢子单生，鞭状，具多数分隔。
10.黑星孢属（Fusicladium）挑取梨黑星病叶上的煤烟状霉层制片，分生孢子梗暗色，顶部稍屈曲，孢痕明显；分生孢子淡褐色，1～2胞，瓜子形。
提示 注意分生孢子梗的孢痕，在显微镜透射光源照射下呈现亮点。
11.葡萄孢属（Botrytis）取黄瓜或番茄灰霉病标本，挑取其上的灰霉状物制片观察。分生孢子梗顶端分枝，末端膨大并产生小突起，其上着生多数分生孢子，外观呈葡萄穗状。
12.聚端孢属（Trichothecium）取棉铃红粉病标本，挑取霉层制片观察，分生孢子梗直立，少分隔或不分隔，分生孢子无色双胞，洋梨形，常以基部交错相连的方式在孢子梗顶端聚集成孢子链。
13.青霉属（Penicillium）取柑桔青霉病标本或病菌培养，挑片观察。分生孢子梗集结成束，“扫帚状”分枝，分枝末端为瓶状小梗，生孢子着生在瓶状小梗上。褐孢霉属（Fulvia）取番茄叶霉病标本，挑取霉层制片显微镜下观察。分生孢子梗基部细，上部粗，分生孢子串生，孢子链常分枝并有芽状突起。
（二）腔孢纲
1.炭疽菌属（Colletotrichum）取苹果炭疽病标本制片观察，分生孢子盘埋生于寄主表皮下，垫状无刚毛，成熟后突破表皮，分生孢子梗平行排列成一层，分生孢子单胞。
提示 切片时最好用新鲜采集的标本，如果标本干燥可用蒸馏水湿润一下再进行切片，切出的丝条越薄越好，若用乳酚油作浮载剂效果更好。
2.痂圆孢属（Sphaceloma）取葡萄黑痘病标本，切片观察，孢子梗排列紧密，自盘状子座基部产生；分生孢子盘黑色；分生孢子梗极短，紧密排列于子座上，分生孢子无色单胞，中部缢缩，内含1—2个油球。
3．壳囊孢属（Cytospora）取梨树腐烂病病树皮，徒手切片观察，子座暗褐色，多腔室，似迷宫状，分生孢子器着生于瘤状子座组织内；分生孢子香蕉形。分生孢子与胶体物质混合，吸水膨胀后连同孢子自孔口挤出成为分生孢子角。
4．壳针孢属（Septoria）取芹菜斑枯病病叶，做徒手切片，分生孢子器球形；分生孢子无色，针状，多胞。
提示 分生孢子的横隔须经染色后才能观察清楚；切片操作的最后一步即将切片放到载物台上时再加水浮载样品，这样立即观察可看到分生孢子自孔口向外喷射的现象。
5.壳二孢属（Ascochyta）取高粱粗斑病标本制作切片观察，分生孢子器黑色，分生孢子器扁球形，分生孢子圆筒形，双胞无色。
6．茎点霉属（Phoma）取甜菜蛇眼病标本，切片观察，分生孢子器着生于寄主表皮下，呈轮纹状排列，分生孢子器球形，分生孢子无色单胞，卵圆形。
7．叶点霉属（Phyllosticta）多寄生于叶上。取苹果灰斑病叶，制作徒手切片观察，分生孢子器球形，有孔口，分生孢子极小（小于15μm），卵圆形。
提示 叶点霉属的形态与茎点霉属很难区分，应结合发病部位一起认识。
五、实验报告及作业
1.绘梨孢属、尾孢属和镰孢霉属的分生孢子梗和分生孢子形态图。2.绘炭疽菌属、盘二孢属的分生孢子盘和分生孢子形态图。
实验九
培养基的制作
一、实验目的
了解培养基的配制原理，掌握培养基的制备方法。
二、实验原理
在植物病理学研究工作中经常要使用各种不同的培养基。培养基是按照生物生长繁殖所需要的各种营养，用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、无机盐、维生素以及水份等。微生物在培养基上生长繁殖还必须在最适pH范围内才能生长得更好，因此对不同种类的微生物应将培养基调节到一定的pH值范围。
培养基的种类很多，不同的微生物所需要的培养基不同。依物理性状可分为液体的、固体的和半固体的三种。固体培养基是在液体培养基中加入1.5～2%的琼脂，半固体培养基是加入0.2～0.5%的琼脂。琼脂（agar）又称琼胶或洋菜，是由海藻加工而成，其化学性质稳定，一般微生物均不能分解利用。它在 95℃ 热水中溶化成溶胶，冷却到 45℃ 以下时又重新凝固，故一般实验中常用它作为凝固剂。
根据营养物质来源的不同，培养基可分为天然、半合成和合成培养基三类。天然培养基是以自然界原有的有机物为材料经灭菌后制成，如马铃薯、胡萝卜、水果、大麦粒、高粱粒等。半合成培养基中既有一些天然的有机物质，又有一些成分简单或明确的化合物。如常用的马铃薯葡萄糖培养基（PDA），肉汁胨培养基（NA）等。合成培养基是由一些成分明确的化合物配制而成的，没有任何成分不明确的物质，常用于研究微生物的生理生化性状，如查氏（Czapek）培养基等。
根据培养基用途不同，可分为生长繁殖培养基、富集培养基、贮存培养基、选择性培养基和鉴别培养基等。在植物病理学研究中，最常用培养基有马铃薯葡萄糖培养基，主要用于分离培养病原真菌。
在培养基配制完之后，必须经过灭菌，以便彻底杀死其中原有的一切微生物。
三、实验材料、试剂与仪器
1．材料 马铃薯。
2．试剂 葡萄糖、琼脂等。
3．仪器与用品 高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（或酸度计）、试管、铝锅、搅拌棒、三角瓶、烧杯、漏斗、量筒、纱布、棉花、天平等。
四、实验步骤
PDA培养基（马铃薯葡萄糖培养基）配方
去皮马铃薯 200g
葡萄糖 20g 琼脂 15～20g
蒸馏水 1000ml 自然pH
在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，这样配制的培养基也称为PSA培养基。1．称量 称量去皮马铃薯 200g，葡萄糖 20g，琼脂15-20g。
提示 琼脂加入的量取决于琼脂的质量，质量好的 15g 就够了，质量差的应适当增加。另外，在夏天气温较高时，适当增加用量。
2．将马铃薯切成小块，放入锅中，加水1000ml，煮沸30min。用纱布滤去马铃薯残渣。
3．将马铃薯滤液放回锅中，加入琼脂，加热熔化。
提示在琼脂融化的过程中，需要用玻璃棒不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
4．加入葡萄糖。葡萄糖容溶解后，加入适量的水以补充加热过程中损失的水分，定容至1000ml。
提示 通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度，1000ml，2000ml等，在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。
5．分装 根据不同的实验目的，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。分装试管，其量为管高的1/5，灭菌后制成斜面。分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。
6．加塞 在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花，棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，故在植物病理学研究工作中普遍使用。正确的棉塞是形状、大小、松紧与管口或瓶口完全适合，过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松则达不到滤菌的目的且棉塞过小往往容易掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有1/3在外，2/3在试管内。分装过程中注意不要使培养基沾染在管（瓶）口上以免浸湿棉塞，引起污染。如不使用棉塞也可用橡皮塞或特制的金属、塑料试管帽，为让空气可以自由进出，橡皮塞不要过紧，灭菌前应夹一纱线在管口。
7．包扎 加塞后，将试管用线绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等
8．灭菌 将上述培养基以0.103Mpa，121C , 高压蒸气灭菌20min。
9．搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷至 50C 左右（以防斜面上冷凝水太多），将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
培养基经灭菌后，必须放在 37℃ 温箱培养24h，无菌生长者方可使用。PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时，可用1mol/LNaOH或1mol/LHCl溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
提示 pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。配制低pH的琼脂培养基时，若预先调好pH并在高压蒸气下灭菌，则琼脂因水解不能凝固。因此，应将培养基的成分和琼脂分开灭菌后再混合，或在中性pH条件下灭菌，再调整pH。
五、实验报告及作业
各组上交按计划制备的培养基。
1．为什么有的培养基要调pH值，有的可以不调
2．加压蒸气灭菌为什么比干热灭菌所要求的温度低、时间短
3．想一想，试一试，将几只试管包扎在一起比较牢固？
第四篇：植物病理学实习报告
一、实习目的：
本次教学实习是《植物病理学》专业课程的重要组成部分，通过课程教学实习，掌握几种重要作物病害症状的特点及病原物形态特征，了解病情调查、病害标本的采集和制作、病原的鉴定以及病害的田间诊断调查研究的常规方法，提高学生诊断和研究病害的能力。二、指导教师：高克祥 李安娜
三、实习时间：
2010年5月30日——5月31日； 6月6日——6月7日四、实习地点：
1、山农大南校区实验田
2、徂徕山林场
五、实习内容：
5月30日，我们XX年级农药专业的同学们来到山农大南校区实验田，开始了为期4天的教学实习之行。
（一）、南校区实验田里收获多
上午，高老师在实验室里为大家介绍了本次实习的安排和方法。即以田间调查、集中采集为主，结合室内病害诊断鉴定，根据课堂讲授内容和田间病害发生具体情况，重点进行病情调查，学习采集、制作和初步鉴定植物病害标本的方法,了解当地植物常见病害种类、症状特征和发生情况,为识别植物病害，安全保存植物病害标本奠定基础。随后，高老师和李老师带领我们去了山农大南校区实验田，了解了杨树皱叶病、苹果锈病、小麦叶锈、条锈、纹枯、丛矮等大田作物病害。下午，按照计划，我们小组对大田作物病害的标本材料进行了补充采集和压制整理。在采集标本时，我们把标本夹、标本纸、锯子、剪刀、小刀、等工具准备好。针对植物病害的特点，我们采取了一下采集方法：
（1）采集具有典型症状的病害标本，尽可能采集到不同时期、不同发病部位的标本。（2）采集有病征的病害标本，以便进行病原物鉴定工作。真菌病害的病原一般有无性、有性两个阶段，应尽量在不同的时期分别采集。有些真菌的有性子实体常在地面的病残体上产生，也要注意采集。（3）避免病原物混杂，采集时对病原物容易混杂、污染的标本，如锈病、黑粉病、白粉病等要分别用纸夹（包）好，以免观察病原物时发生差错。（4）随采集随压制，或用湿布包好，防止变形、干燥卷缩，给标本制作造成困难。（5）随采集随记载，记录的内容一般包括标本编号、寄主名称、病害名称、病害危害情况、采集地点、采集环境、采集日期、采集人等项目。标本应挂有标签，标签上的编号与同一份标本在记录本上的编号必须相符，以便查对。（6）每种标本采集的数量不能太少，一般叶斑病类标本应在50张以上。（二）、徂徕山之行
5月31日，经过2个小时的车程，在经历了山路上校车爆胎的危险之后，我们到达了徂徕山林场，开始了对经济果树类植物病害的识别和标本采集。在徂徕山林场。我校校友、徂徕山林场主任为大家介绍了林场的发展以及相关植物病害的特点。在这里，我们认识了板栗、核桃、山楂等相关病害。大家热情高涨，发现了很多比较典型的病害材料。得到了老师的称赞。
（三）、病害专项调查
6月6日，高老师带领我们又来到山农大南校区植保、农学等学院的实验田，了解了烟草、紫叶李等植物的相关病害。下午，我们组在山农大实验田对小麦进行了病害专项调查。
调查采取以小组为单位，田间现场调查麦类作物病害发生的种类，重点调查小麦赤霉病、小麦锈病和大麦条纹病，根据调查结果列出植物病害的病情指数及发病率。在小麦病害重点调查过程中，我们小组专门对其病害进行了深入细致的调查。了解到农大实验田里小麦病害的分布、发病率、发病程度等。并用分级计数法进行了病害发病程度统计。根据直接计数不能反映发病程度的差异，我们选择了分级以后再计算。其分级标准，每一级都用百分率表示，很容易计算它的平均百分率。分级计数法的级别，有的不是据百分率分级的，得到的结果是每一级中有多少个体。针对这种情况，计算病情指数来表示发病程度。每一级用一个代表数值，然后用公式计算：
×100
病情指数=
∑（病级株数×代表数值）株数总和×发病最重级的代表值
发病最重的病情指数是100，无病的是0，所以这个数值就能表示发病的程度。
附：表1 枝、叶、果病害的分级标准
级 别
分 级 标 准
代表值
株数
12345合 计无病25%枝、叶或果发病25%-50%枝、叶或果发病51%-75%枝、叶或果发病76%以上枝、叶或果发病012343755744612224表2干部病害的分级标准级 别
分 级 标 准
代表值
株数
1234合 计无病病斑横向长度占树干周长的1/5以下病斑横向长度占树干周长的1/5-3/5病斑横向长度占树干周长的3/5以上012337557446212最后，我们小组在一块实验田里随机选取94株小麦进行了病害程度分析，最终计算出本块实验田小麦的发病率为33.6%。
通过此次田间调查，我们小组进一步认识了常见小麦病害的症状。了解到本地小麦病害的主要种类、危害情况；通过联系实际的调查，分析它们的发生危害程度，从而巩固和深化了课堂学习的内容，熟练掌握了病情指数的计算方法。
（四）实验室里辨真伪
6月7日，大家在实验室里对采集的到植物病害材料进行了整理、分类。对实习中不知道的病害材料进行了镜检。
在标本制作过程中，对于含水量少的标本，我们组采集随采随压制，保持了标本的原形；对于含水量多的标本，我们等到自然散失一些水分后，再进行了压制；同时，我们对有些标本进行了可适当加工，如标本的茎过粗或叶子过多，先剪掉一部分再压制，防止标本因受压不匀，或叶片重叠而变形。有些全株性的标本，将标本折成适当形状第五篇：植物病理学实习心得[定稿]
篇一：植物病理学实习总结报告
植物病理学实习总结报告
学院：资源环境学院 年级：2008级
专业：植物保护微生物工程 组别：第三小组 姓名：戴泽翰 学号：200830200508 指导老师：李敏慧、刘琼光、周国辉、徐大高、杨媚、谢辉、何艺郡
目录
一、前言-------------------------3
二、实习目的与意义---------3
三、实习内容与方法---------3 实验一 植物病害标本的采集和制作------------4 实验二 植物病原的分离与培养-------------------8 实验三 植物病原真菌玻片标本制作------------12 实验四 植物病原线虫的分离及形态观察------14 实验五 植物病毒（香蕉束顶病毒）检测------15
四、实习（验）结果与分析------------------------------18
五、收获与体会---------------19
六、参考文献------------------20 植物病理学实习总结报告
戴泽翰 200830200508 08植保微生物1班
一、前言
植物病理学是主要研究引起农作物病害发生的各种生物与非生物引子及其致病机制、病原物与寄主间相互关系和控制病害发生、减轻发病程度、减少病害所致损失的原理及具体措施的一个重要农业学科。学习基本的植物病理学、流行学知识，掌握常见农业病害鉴别和病原物采集、分离等技能，是对作为高等农科院校植保专业学生提出的要求。为巩固和印证所学的植物病理知识，增强学生对本地区主要作物及主要植物病害的直观认识，我校资环学院为植保专业安排了植物病理学课的实习，以加强学生理论结合实际，提高分析问题和解决问题的能力，二、实习目的与意义
(一)巩固和印证所学植物病理学基础理论知识(二)熟练掌握植物病理学实验操作技能(三)通过室内外观察，认识本地区主要作物及主要植物病害的形态特征(四)加强理论联系实际，提高分析问题和解决问题的能力
三、实习内容与方法
(一)植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定(二)植物病原的分离与培养
(三)植物病原真菌玻片标本制作
(四)线虫病害标本的采集、分离与鉴定(五)植物病毒（香蕉束顶病毒）检测
实验一 植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定
一、实验目的
植物病害标本是植物病害及其分布的事务性记载，有了标本即可在室外观察的基础上，开展室内各方面的工作，特别是病害诊断和病原物的分离鉴定工作，没有合格的标本更无从谈起。因此，病害标本的采集和制作是植物病害研究和实验的基本建设工作，植病标本的采取和制作是植保人员必须掌握的的基本技术之一。通过本次标本采集和制作实践实习，学习标本采集和制作的常用方法
二、实验步骤
（一）标本采集
1、外出实习地点(1)华农大农场
(2)华农大增城宁西基地(3)广州白云区蔬菜地
2、采集方式与标本采集要求
(1)直接从病害植株以手、刀、剪刀提取 病样。
(2)症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。
(3)真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。
(4)每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会 混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。
(5)采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。
(6)寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。(7)适于干制的标本，应随采随压于标本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小 麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。
(8)柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。(10)黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。(11)每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。
（二）标本制作
1本实验采取干制法制作腊叶标本。
2基本原理：利用标本纸快速把病样标本脱水，并加压把标本压成美观的平面标本。干燥愈快愈能保持标本原有的色泽。
3操作：
（1）把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，整形后分层压在标本夹中，放一层标本纸（每层3-4张）放一层标本，每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜，用绳子将标本夹压紧。
（2）每隔一至两天就打开标本夹检查标本纸的干湿程度，及时更换较湿的标本纸。在第一次换纸时，同时将标本整形，使其达到既美观又便于观察的要求。（3）将完全干燥的病样标本用透明胶、双面胶等固定在白纸上，纸张右下角写上标签（标签内容依次为寄主名称、病害名称、病原物中文名及拉丁文学名、采集地点、采集人姓名、采集日期、）
（三）实验结果
1、制作了丝瓜霜霉病、玉米小斑病、水稻纹枯病、水稻白叶枯病、玉米黑粉病、茶轮斑病、竹黑痣病、玫瑰黑斑病、稻曲病的标本。（见图1-1,1-2）
图1-1 篇二：植物病理学实习报告
实习报告 实习科目：植物病理学 实习时间：
指导老师：
学 院：
班 级：
组 员：
目录
一、实习目的??? 2
二、实习地点及时间 2
三、内容及方法?? 2 1.野外调查„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2 2.室内整理„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
四、实习结果??? 3 1.主要林木病害„„„„„„„„„„„„„„„ 3 1）毛竹斑枯病„„„„„„„„„„„„„„„„ 3 2）竹竿基腐病„„„„„„„„„„„„„„„„ 3 3）灰霉病„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4 4）桂花叶枯病„„„„„„„„„„„„„„„„ 4 5）桂花叶斑病„„„„„„„„„„„„„„„„ 5 6）紫薇白粉病„„„„„„„„„„„„„„„„ 5 7）梨锈病„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 5 8）桃树穿孔病„„„„„„„„„„„„„„„„ 6 9）月季灰霉病„„„„„„„„„„„„„„„„ 7 10）葡萄霜霉病„„„„„„„„„„„„„„„ 7 11）葡萄叶斑病„„„„„„„„„„„„„„„ 7 12）烟煤病„„„„„„„„„„„„„„„„„ 8 2.标准地调查结果„„„„„„„„„„„„„„ 8 1）
2）3）
4）油茶软腐病„„„„„„„„„„„„„„„ 9 梨锈病„„„„„„„„„„„„„„„„„ 9 葡萄白腐病„„„„„„„„„„„„„„„ 9 葡萄霜霉病„„„„„„„„„„„„„„„ 10
五、主要病害图示? 10
六、实习心得??? 11
一、实习目的
为了掌握几种重要作物病害症状的特点及病原物形态特征，了解病情调查、病害标本的采集和制作、病原的鉴定以及病害的田间诊断调查研究的常规方法，提高我们诊断和研究病害的能力。同时，通过本次的教学实习，我们将实践与理论相结合，使得对所学的知识更加牢固，并加深对课本理论的理解和记忆，增强我们 的动手能力，学会将理论知识运用到实践中去
二、．实习地点及时间
实习地点：湖南省浏阳市大围山镇金钟桥村大围之珠 实习时间：2012年7月
三．内容及方法
本次实习内容包括两大部分，野外调查和室内整理，病害调查方法主要分为线路调查和标准地调查。我们在此次实习中以标准地调查为主。
1.野外调查
（1）调查地点：金钟桥村大围之珠农庄前面的葡萄园还有附近
不远的小山坡
（2）调查方法：标准地调查，划定调查范围，再对这片地的植
株生病情况作详细的记录，根据标准表格算出这
片标准地的病情指数
2.室内整理
室内整理包括标本的识别与制作，鉴定所采集的标本，对几中严重的病害进行描述，并制作常见的病害标本。
四、实习结果 1.主要林木病害 1）.毛竹斑枯病
叶斑枯病是毛竹营林建设中常见的病害,一旦发生病害,轻者竹叶局部失绿形成枯斑,重者竹叶卷曲、脱落,竹梢枯死,出笋量急剧减少。
2）.竹竿基腐病
病竹秆基部的第三到第五节的竹壁上首先出现，初为黄褐色到紫褐色的点状小斑，星状或条状分布。这时因竹秆基部有笋箨包裹，不易被发觉。这些小病斑迅速向上扩展，并相互联合成为条状或块状大斑。受到侵染的竹肉组织变为浅褐色，向上扩展的速度远比外壁上的病斑为快。当病斑一旦到达竹节处，则迅速横向发展，使竹节整圈或大部变为褐色，并以此竹节为基点，大幅度地沿着竹秆内的输导组织向上扩展，同时从竹秆内部逐渐向外壁蔓延。在竹秆上可以看到从竹节上发展的块状或条状的云纹斑，颜色初为黑褐色，后转变为淡褐色。病斑中部凹陷或有纵向皱纹，表面出现泪状液滴或白色粘液，干后留下白色粉状物，竹节处更为明显。这些粉状物不易用手指揩掉。
3）.灰霉病 灰霉病是露地、保护地作物常见且比较难防治的一种真菌性病害，属低温高湿型病害，病原菌生长温度为2～30℃，温度20～25℃、湿度持续90%以上时为病害高发期。灰霉病由灰葡萄孢菌侵染所致，属真菌病害，花、果、叶、茎均可发病。果实染病，青果受害重，残留的柱头或花瓣多先被侵染，后向果实扩展，致使果皮呈灰白色，并生有厚厚的灰色霉层，呈水腐状，叶片发病从叶尖开始，沿叶脉间成“v”形向内扩展，灰褐色，边有深浅相间的纹状线，病键交界分明。该病害是一种典型的气传病害，可随空气、水流以及农事作业传播。在实际病害防治过程中，难以采取有效措施彻底切断传染源；在病原菌侵入的情况下，也难以彻底消灭病原菌，如药剂喷施，难以解决空气及露水中的病原菌；而单独熏棚，不能重点解决病叶、病果等病残体上或内部的病原菌。灰霉病病苗色浅，叶片、叶柄发病呈灰白色，水渍状，组织软化至腐烂，高湿时表面生有灰霉。幼茎多在叶柄基部初生不规则水浸斑，很快变软腐烂，缢缩或折倒，最后病苗腐烂枯萎病死。
4）.桂花叶枯病
在叶片的叶缘、叶尖发生。开始为淡褐色小点，后渐扩大为不规则的大型斑块，若几个病斑连接，全叶便干枯1/3-1/2。病斑灰褐色至红褐色，有时脆裂，边缘色深，稍隆 篇三：农业植物病理学实习报告
《农业植物病理学》
实习总结报告
姓 名： 学 号： 2011 年级专业班级： 11植物保护安检1班
2013年10月
目 录
一 前言：目的与意义„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„..1 二 实习内容与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„..„1 三 实习结果与分析„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 1 实习地点概述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 2 农作物病害采集及鉴定统计„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 豆科作物病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2
水稻病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4
旱粮作物病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4
香蕉病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6
其他果树病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„8 茄科和葫芦科病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„9 油料作物病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„14
甘蔗病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„14
花卉病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„16
蔬菜病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„20
其他病害„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„25
发病症状„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„26 3主要农作物病害发生与为害程度调查„„„„„„„„„„„„„„37 四 收获与体会„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„.40 五 问题与建议„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„.41 六 主要参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„41
一、前言：目的与意义
1、巩固《农业植物病理学》的基础理论知识；
2、进一步熟练掌握植物病理学，特别是农业植物病理学的基本技能；
3、通过田间调查和室内镜检等，学会诊断本地区主要植物病害，学会病害调查的基本方法；
4、加强理论联系实际，在实践中不断的提高分析问题和解决问题的能力。
二、实习内容与方法
1.农作物病害标本采集与鉴定
以组为单位采集、鉴定和制作一定数量的病害标本，然后进行病害标本室内处理：症状识别、显微镜检、病原鉴定。
2.主要农作物病害发生与为害程度调查
对主要农作物病害的田间发生与为害程度进行调查，掌握田间调查取样方法、取样方式、取样数量和取样单位等，并实地进行病害发生情况及为程度调查，详细记载相关数据，认真进行分析、总结。3.实习总结并提交实习总结报告
实习结束后，要求以组为单位制作ppt，进行实习总结报告。每位同学按实习报告规定格式撰写、提交实习报告、综合性实验报告各一份，主要内容包括此次实习的主要内容、工作成绩、收获、建议及意见。
三、实习结果与分析
1.实习地点概述
①东莞香蕉蔬菜研究所：香蕉、茄子、豆角、玉米等。②增城宁西教学科研基地：玉米、水稻、火龙果、各种瓜类等。③广州太和镇大田：驳骨丹、双带剑兰、糖胶树、木棉、蜘蛛兰等。④广州市桥钟村农场：生菜、白菜、姜、花生、葱等。⑤学校农场：玉米、水稻、菜心、甘蓝、甘蔗、辣椒、甘薯等。
2.农作物病害采集及鉴定统计
在水稻、蔬菜、杂粮及花卉等44种作物上共采集及鉴定的病害有88种，其中，真菌性病害有71种，细菌性病害有8种，病毒性病害有9种（详见下表）。
①豆科作物病害
篇四：植物病理学实习总结
植物病理学实习总结
实习时间：一周实习地点：河南农业大学校区及三区，毛庄，森林公园及浮戏山
实习目的：学习实地认识各种植物病害并采集标本，学习制作标本的方法，学习用不同的培养基培养真菌和细菌，学习制作玻片并观察玻片来判断病原物是什么。
实习中认识的病害及病原物介绍：
芍药白粉病
症状：在叶面产生白色、近圆形的白粉状霉斑，白斑
向四周蔓延，连接成边缘不整齐的大片白粉斑，其上布满白色至灰白色粉状物。叶上布满白粉状霉,即病菌的菌丝体、分生孢子梗及分生孢子。发病后期有时叶片上产生黑褐色小点,为病菌的有性世代闭囊壳。
南瓜霜霉病
发病初期叶片背面出现水浸状黄色斑点，病斑逐渐
扩大后，受叶脉限制呈黄褐色不规则的多角形病斑。在
潮湿条件下，病斑背面长有灰黑色霉层。发病重时，病
斑连成片，使叶片变黄干枯、易破碎，植株一片枯黄 病原菌：真菌病害，病菌以在土壤或病株残体上的孢子囊及潜
伏在种子内的菌丝体越冬或越夏。以孢子囊随风雨进行传播，从寄主叶片表皮直接侵入，引起初次侵染，以后随气流和雨水
进行多次再侵染。
番茄晚疫病
叶片染病多从叶尖、叶缘开始病叶出现水浸状暗绿色病斑，当向叶脉和茎蔓延后茎杆染病产生长条状暗褐色凹陷条斑。
病原物：致病疫霉菌，菌丝丝状，分隔
番茄早疫病
主要危害叶片，在茎基部产生暗褐色病斑，稍凹陷有轮纹。多从植株下部叶片向上发展，初呈水浸状暗绿色病斑，扩大后呈圆形或不规则形的轮纹斑，边缘多具浅绿色或黄色的晕环，中部呈同心轮纹。
病原物：早疫病是由茄链格孢菌侵染所致，在真菌分类中，属于半知菌门链格孢属。
番茄早疫病和番茄晚疫病的区别：番茄早疫病在生长期都可以发病。侵害叶、茎、果实各个部位，以叶片和茎叶分枝处最易发病。病害一般多从下部叶片开始发生，逐渐向上扩展。叶片上最初可见到深褐色小斑点，扩大后呈圆形或近圆形，外围有黄色或黄绿色的晕环，病斑灰褐色，有深褐色的同心轮纹，有时多个病斑连在一起，形成大形不规则病斑。番茄晚疫病在番茄的整个生育期均可发生，幼苗、茎、叶、和果实均可受害，以叶和青果受害为重。幼苗染病，病斑由叶向叶脉和茎蔓延，使茎变细并呈黑褐色，植株萎蔫或倒伏；叶片受害多从叶尖、叶缘开始发病，初为暗绿色水浸状不规则病斑，扩大后转为褐色。
烟草花叶病
叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形。
病原物：有病毒引起
洋葱紫斑病
危害初期呈水浸状白色点斑，病斑扩大快，迅速形成宽1～3厘米、长2～4厘米纺锤形的凹陷斑，先为淡褐色，随后变为褐色至晴紫色，周围具有黄色晕圈。此后有的逐渐褪色并形成同心轮纹，湿度大时斑面上产生黑褐色煤粉状霉。
病原菌称为葱链格孢菌。
梨锈病
叶片被害后叶片正面产生圆形小病斑，随着病斑的扩大，病斑中央产生蜜黄色微凸的小粒点（病菌性孢子器），潮湿时小粒点上溢出淡黄色黏液，之后病斑组织变肥厚，正面凹陷，背面隆起并长出几根至十几根灰白色或淡黄色的细管状物即锈孢子器，内有大量褐色锈孢子，成熟后从锈孢子器顶端开列散出。
病原物：病原属担子菌亚门胶柄锈属真菌。性孢子器葫芦形，埋生于表皮下；性孢子纺锤形，单胞无色。锈子器长简形，丛生于叶背面。锈孢子近圆形，橙黄色，表面有瘤状细胞。
花生褐斑病
初为褪绿小点，后扩展成近圆形或不规则形小斑，病斑较黑斑病大而色浅，叶正面呈暗褐或茶褐色，背面呈褐或黄褐色，病斑周围有亮黄色晕圈。湿度大进病斑上可见灰褐色粉状霉层。
病原物：落花生尾孢，属半知菌亚门真菌。子座多散生于病斑正面，深褐色。分生孢子梗丛生或散生于子座上，黄褐色，病菌以子座、菌丝团或子囊腔在病残体上越冬。翌年条件适宜，产生分生孢子，借风雨传播进行初侵染和再浸染。菌丝直接伸入细胞间隙和细胞内吸取营养。
茄子黄萎病
初期叶缘及叶脉间出现褪绿斑,病株初在晴天中午呈萎蔫状,早晚尚能恢复,经一段时间后不再恢复,叶缘上卷变褐脱落,病株逐渐枯死, 病原物：茄子黄萎病病菌为半知菌门真菌的大丽轮枝菌，病菌分生孢子梗直立,细长,上有数层轮状排列的小梗,梗顶生椭圆形、单胞、无色的分生孢子。
桃缩叶病
嫩叶刚伸出时就显现卷曲状，叶片逐渐开展，卷曲及皱缩的程度随之增加，致全叶呈波纹状凹凸，严重时叶片完全变形。
桃缩叶病的病原物为畸形外囊菌。
黄瓜靶斑病
黄瓜靶斑病又称“黄点子病”，起初为黄色水浸状斑点，发病
中期病斑扩大为圆形或不规则形，易穿孔，叶正面病斑粗糙不平，病斑整体褐色，中央灰白色、半透明。后期病斑直径可达10~15毫米，病斑中央有一明显的眼状靶心。
病原物：由半知菌的棒孢菌引起的病害。
南瓜角斑病
主要为害叶片。叶片上产生多角形或不规则形病斑，受叶脉限制。大小1～5毫米，初为浅褐色，后中间变灰白色，边缘明显，中心稍下凹，病斑周围不形成晕圈，后期病部正背长出很多小黑点。严重时病斑融合成片，致叶片早枯。
病原菌：真菌半知菌门瓜角斑壳针孢。
在实习的过程中，我们认识了很多植物病害，采集了很多标本，对于不能肯定的植物病害，我们小组成员查阅了很多资料，并在玻璃皿中培养了许多未知病原物，然后分离出病原物，做成玻片在显微镜下观察病菌形态，然后判断是属于那个门哪个科。我们还进行了细菌和真菌的培养，分离土壤微生物。在实践中，我们不仅学到了植物病害方面的知识，还增强了实际动手操作能力。篇五：植物病理学实习总结
植物病理学实地参观实习报告
专业： 姓名： 学号：
一、实习地点：郫县种植示范基地，仁寿县种植示范基地
二、实习目的：学习实地认识各种植物病害，将课本知识用于实际，实践教学
三、实习中认识的病害及病原物介绍：
1.豇豆锈病
症状：本病多发生在较老的叶片上，茎和豆荚也发生。叶
片初生黄白色的斑点，稍隆起，后逐渐扩大，呈黄褐色疱斑(夏
孢子堆)，表皮破裂，散出红(黄)褐色粉末状物(夏孢子)。夏
孢子堆多发生在叶片背面，严重时也发生在叶面上。后期在夏
孢子堆或病叶其他部位上产生黑色的冬孢子堆。有时在叶片正
面及茎、荚上产生黄色小斑点(性孢子器)。
病原：豇豆单胞锈菌(uromyces vignae barclay)2.南瓜白粉病
症状：叶片染病，发病初期在叶面或叶片背面产生白
色粉状小圆斑，后逐渐扩大为不规则形的白粉状霉斑，逐
渐多个粉斑连接成整张叶片。发病叶片的细胞和组织被侵
染后并不死亡，抹去病斑上的粉层，叶片表现为褪绿或变
黄，发病后期病斑呈灰色或灰褐色，上有黑色的小粒点（即
为病菌的闭囊壳），发病末期病叶组织变为黄褐色而枯死。
病原：单丝壳白粉病sphaerotheca fuliginea和二孢白粉菌erysiphe cucurbitacearum侵染引起 3.番茄晚疫病
症状：幼苗、成株期均可发病，危害叶、茎、果，但以
成株期的叶片和青果受害较重。幼苗感病时出现暗绿色水浸
状病斑，由叶片向主茎发展，使叶柄和茎变细呈黑褐色而腐
烂折倒，全株萎蔫，湿度大时病部产生白色霉层。成株期叶
片染病多从下部叶片的叶尖或叶缘开始，形成暗绿色水浸状
的圆形或不规则形边缘不明显的病斑，扩大后呈褐色。湿度大时叶背病健交界处出现白霉（病菌孢子囊及孢囊梗），干燥时病部干枯，脆而易破裂。茎部病斑最初呈黑色凹陷，后变黑褐色而腐烂，易引起主茎病部以上枝叶萎蔫。青果染病，病斑呈油浸状暗绿色，后变黑褐色，稍凹陷，病部较硬，病斑表面粗糙，边缘呈明显的云纹状。湿度大时长出白霉，迅速腐烂。
病原：致病疫霉菌phytophthora infestans(mont.)de bary 侵染引起
4.水稻白叶枯病
症状：秧苗在低温下不显症状，高温下秧苗病斑短条状，小而狭，扩展后叶片很快枯黄凋萎；⑴叶缘型：是一种慢
性症状，先从叶缘或叶尖开始发病，发现暗缘色水渍状短
线病斑，最后粳稻上的病斑变灰白色，籼稻上为橙黄色或
黄褐色，病健明显。⑵青枯型：是一种急性症状。植株病
感后，尤其是茎基部或根部受伤而感病，叶片呈现失水青
枯，没有明显的病斑边缘，往往是全叶青枯；病部青灰色
或绿色，叶片边缘略有皱缩或卷曲。
病原：xanthomonas oryzae水稻黄单胞菌
5.水稻纹枯病
病症：叶鞘染病 在近水面处产生暗绿色水浸状边缘
模糊小斑，后渐扩大呈椭圆形或云纹形，中部呈灰绿或 灰褐色，湿度低时中部呈淡黄或灰白色，中部组织破坏
呈半透明状，边缘暗褐。发病严重时数个病斑融合形成
大病斑，呈不规则状云纹斑，常致叶片发黄枯死。叶片
染病 病斑也呈云纹状，边缘褪黄，发病快时病斑呈污绿色，叶片很快腐烂，茎秆受害 症状似叶片，后期呈黄褐色，易折。穗颈部受害 初为污绿色，后变灰褐，常不能抽穗，抽穗的秕谷较多，千粒重下降。湿度大时，病部长出白色网状菌丝，后汇聚成白色菌丝团，形成菌核，菌核深褐色，易脱落。高温条件下病斑上产生一层白色粉霉层即病菌的担子和担孢子。
病原：thanatephorus cucumeris(frank)donk.瓜亡革菌
6.水稻稻瘟病
病症：在整个生育期都能发生。分蘖至拔节期为害较重。由于气候条件和品种
抗病性不同，病斑分为四种类型。慢性型病斑：开始在叶上产生暗绿色小斑，渐
扩大为梭菜斑，常有延伸的褐色坏死线。病斑中央灰白色，边缘褐色，外有淡黄色晕圈，叶背有灰色霉层，病斑较多
时连片形成不规则大斑，这种病斑发展较慢。急性型病斑：
在感病品种上形成暗绿色近圆形或椭圆形病斑，叶片两面
都产生褐色霉层，条件不适应发病时转变为慢性型病斑。
白点型病斑：感病的嫩叶发病后，产生白色近圆形小斑，不产生孢子，气候条件利其扩展时，可转为急性型病斑。
褐点型病斑：多在高抗品种或老叶上，产生针尖大小的褐点只产生于叶脉间，较少产孢，该病在叶舌、叶耳、叶枕等部位也可发病。节温：常在抽穗后发生，初在稻节上产生褐色小点，后渐绕节扩展，使病部变黑，易折断。发生早的形成枯白穗。仅在一侧发生的造成茎秆弯曲。
病原：phyricularia grisea(cooke)sacc.称灰梨孢
7.大豆霜霉病
病症：病苗子叶无症,第一对真叶从基部开始出现褪
绿斑块,沿主脉及支脉蔓延,直至全叶褪绿。以后全株各
叶片均出现症状。花期前后气候潮湿时,病斑背面密生灰
色霉层,最后病叶变黄转褐而枯死。叶片受再侵染时,形
成褪绿小斑点,以后变成褐色小点,背面产生霉层。受害
重的叶片干枯,早期脱落。
病原：东北霜霉(peronospora man-schurica(naum.)syd.)8.玉米茎基腐病
病症：发病初期，植株的叶片突起，出现青灰色干枯，似霜害；
根系和茎基部呈现出水渍状腐烂。进一步发展为叶片逐渐变黄，根和
茎基部逐渐变褐色，髓部维管束变色，茎基部中空并软化，致使整株
倒伏。发病轻的也使果穗下垂，粒重下降。首先是根系发病，局部产
生淡褐色水渍状病斑，逐渐扩展到整个根系，呈褐色腐烂状，最后根
变空心，根毛稀少，植株易拔起；病株叶片自上而下呈水渍状，很快
变成青灰色枯死，然后逐渐变黄；果穗下垂，穗柄柔韧，不易掰下；籽粒干瘪，无光泽，千粒重下降。9.玉米黑粉病
病症：为害植株地上部的茎、叶、雌穗、雄穗、腋芽等幼嫩组织。受害组织受病原菌刺激肿大成瘤。病瘤未成熟时，外披白色或淡红色具光泽的柔嫩组织，以后变为灰白或灰黑色，最后外膜破裂，放出黑粉即病菌厚垣孢子。病瘤形状和大小因发病部位不同而异。计片和叶鞘上瘤大小似豆粒，不产生或很少产生黑粉。茎节、果穗上瘤大如拳头。同一植株上常多处生瘤，或同一位置数个瘤聚在一起。植株茎秆多扭曲，病株较矮小。受害早，果穗小，甚至不能结穗。该病能侵害植株任何部位，形成肿瘤，破裂后散出黑粉，别于丝黑穗病。丝黑穗病一般只侵害果穗和雄穗，并有杂乱的黑色丝状物。
病原：ustilago maydis（dc.）corda玉蜀黍黑粉菌
10.大豆花叶病 病症：由于大豆品种不同，气温高低、病毒种类以及
感病时期早晚，表现症状常有很大差异。大约有以下几
种病状类型：①黄斑型：一般与轻花叶型和皱缩花叶型
混合发生。老叶上出现不规则黄色斑块，叶不皱缩，上 部嫩叶多呈皱缩花叶状。②芽枯型：植株顶梢及侧枝芽
呈红褐色或褐色，萎缩卷曲，最后变黑色枯死，并发脆
易断，植株矮化；开花期多数花芽萎蔫不结荚。结荚期荚上生圆形或不规则褐色斑块，荚多畸形。
病原：
soybean mosaic virus大豆花叶病毒
四、实习心得
在实习的过程中，我们认识了很多植物病害，对于不能肯定的植物病害，我查阅了很多资料，确定了它们的具体种类，但对于老师说的水稻锈病，我不敢苟同，我觉得应该是水稻白叶枯病。通过这次实习让我深刻的了解了水稻、玉米、大豆、番茄等作物的常见病害，使课本中那些石板的知识变得活跃，让我受益良多。并且回来后查阅资料，也丰富了我的课余知识；让我对其有更加深刻的了解，使得记忆深刻。
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