第一篇：潘小兰心得体会
让学生在书海中遨游
----读《小学生课外阅读的有效指导》心得
高县月江镇福溪小学校潘小兰
对于语文老师来讲，如何培养学生阅读的习惯是一件伤脑筋的事。假期里，闲来无事时，我喜欢拿《小学语文教师》杂志细细品读。其中有一篇《小学生课外阅读的有效指导》给我流下了很深的印象，使我受益匪浅，学习到了许多方法。
在当今信息量激增的社会里，让学生学会搜集，处理信息，培养学生较强的课外阅读能力已迫在眉睫，这也需要我们小学语文教师去引导学生在会读一本书的基础上，走出课堂，走向生活，广泛开展课外阅读活动，博览群书，吸收名家名篇的语言精华。开展语文课外阅读，不仅有利于学生开拓视野，陶冶情操，而且也是学生积累语言，丰富知识的有效方法。
当前，课外阅读活动的开展大多由老师自行组织安排，由于缺乏统一组织规划，难免带有很大的随意性，学生在阅读的质和量上都难以得到保证。
【摘录：《语文课程标准》中已经明确规定：小学第一学段课外阅读总量不少于5 万字，以后逐渐递加。第二学段不少于40万字，第三学段不少于100万字。《语文课程标准》还提倡读整本书，并在附录中提出了关于“课外读物的建议。”那么，我们该做些什么？答案只有一个，那就是指导孩子们进行广泛的课外阅读，让孩子们在一条有航标的书海中遨游。】
一、开展活动，创造良好的读书环境。
有书才可读，环境可育人。基于这种认识，我们首先因地制宜，千方 1
百计地创造条件，在班上营造一个适合读书的环境。
（一）在班级建图书角。
俗话说：：“人多力量大”。举全班之力，集小流成大渠，建成班级图书角。我们采取的方法是：
１、订书。号召班级学生收集起来的废纸和废品挣得的钱订阅书籍。２、捐书。号召班级任课老师和学生主动捐出一些自己的精品收藏，存入图书角备看。
３、借书。从学校图书室借来相关图书并定期更换。
有了这个图书角，大家也就有了一个资源共享、自由阅读、讨论交流的平台，课外阅读也就有了保障。
（二）挤时间博览群书。
时间是课外阅读的保证。【摘录： 调查表明：大量的课外作业不仅占据了学生课外阅读的时间，还造成了学生身心疲乏，降低了读书的兴趣。为挤出阅读时间，我们按照新课标 “少做题，多读书，读好书，多读整部书”的要求，对课堂结构做了调整：首先，改革作业方式，将所有作业都在课堂完成，课间不留作业，家庭作业就是读书。其次是按排读书时间，午饭后的30分钟设定为读课外书时间。另外，我们还把每周五的最后一节课定为自由读书课，学生从班级书角中选择自己喜爱的书籍，不出班级自由阅读，看不完也可以带回家继续读；也可以到学校网络教室，去畅游学校网上“书库”。至于阅读方式，不做特别要求，他们可以一个人静静地读，也可以几个人一块读；可以边读边议，也可以边读边记。】
（三）创设良好的读书氛围。
读书是需要一种环境氛围的。为了让孩子爱上读书，学校在每个教室里贴几句关于读书的名人名言，引发的是学生的理性思考；我也常组织讲故事比赛，读书征文竞赛等活动所激起的是学生的读书兴趣；在教室的花架上放几盆别有情致的花卉和盆景，营造一个美的环境，让学生在欣赏时，不觉中舍弃顽皮和浮躁，使内心回归平静与闲适。通过班级环境的渲染和氛围的营造，对同学们而言，潜移默化中使之产生“我要读书”的内在驱动力。
二、课外阅读需要正确的阅读方法来指导。
针对有些同学读书时走马观花，读多少、忘多少、丢多少，就像竹篮打水，结果一场空，不得长进。有些同学虽然读书很认真，当时凭脑子也记得一些东西，要用时，则什么都捕捉不到了。【摘录：《语文课程标准》中明确规定：学生是“主人”，教师是“引导者和组织者”。】
那么，怎样指导学生掌握课外阅读的方法呢？我采取了以下几步措施。
1、学习老前辈的阅读方法
① 毛泽东的“三复四温”式阅读和“不动笔墨不读书”读书法
② 王梓坤的抄读法
③苏步青的多读、精读法。
2、指导几种课外阅读的方法。
（1）浏览性的泛读。对大部分浅显易懂的书或阅读价值不高的书籍报刊，可采取浏览法，即“随便翻翻”，以大致了解其主要内容，或通过看标题、目录、内容提要、前言等，以求在有限的时间内获取更多有价值的信
息。
（2）探求性的速读。有时读书是为了达到某个特定的目的或完成某项任务，如寻求某个问题的答案，专门搜集某方面的知识等，这就要求“一目十行”。快速阅读的奥秘在于让大脑跑在眼球前面，掌握快速阅读的孩子每分钟能读200多个字，未受训练的每分钟只能读八九十字。速读能求得新知识新信息成倍成倍增长，赶上时代发展的需要。
（3）品味性的精读。对名篇名著和其他文质兼美的优秀作品，需要静心细读，体会立意构思，揣摩布局谋篇，欣赏妙词佳句，像人吃东西那样，经过细嚼慢咽，才能把书中的精华变为自己的知识营养。有的好文章要反复地读几遍，甚至熟读成诵。
（4）圈点勾画。即用相关的符号在书或文章上记录下自己阅读时的见解、感受，分别用各种符号做下标注。
（5）写读书笔记。可作摘抄、编提纲、写体会。
（6）作卡片。为了便于记忆和积累，鼓励学生把名言警句、精彩片断、佳词妙句等写在卡片上，以随身携带，随时翻阅、背诵。
【摘录： 在这里，课外阅读不是将学习内容以定论的形式呈现给学生，而是通过活动的促进和引导，从而摆脱种种禁锢和牵制，放飞学生的心灵，让阅读回归语文生动活泼、丰富多彩的本来面目。学生的学习习惯及学习方式也同样在这里有了转变——启动了学生自主学习的机制。大量地阅读，自由地阅读，放松地阅读，课外阅读成为真实的阅读，他们从而真正体会到阅读过程所产生的酣畅淋漓的心理感受以及由此引发的愉悦感，在阅读中自然而然地获取文意，品味作品的原汁原味。在阅读中思考，在思考中
发现，在发现中感悟，在感悟中成长，把阅读过程由单纯的语言学习过程扩展为思考、创造过程，从而提高语感水平、认识思维水平，将触角延伸至比课本广阔得多、丰富得多的大千世界。】
“一分耕耘，一分收获”，我一直坚信多读一些好书，一定会有许多意外收获，在这人生的黄金时间，我想我会和孩子们一如继往地多读好书，在书的海洋中扬帆远航。
第二篇：潘顺兰的读书心得体会
我读了《新时期教师职业道德》一书，读后感受颇深，受益匪浅。以前，自己作为一名年轻教师，以为只要上好课，完成学校布置的任务就算是一个合格的老师，可读了本书后使我对教师这个职业有了重新认识。《新时期教师职业道德》共用四章内容便清晰的阐述了新时期教师的职业道德问题，其中让我感受最深的是第二章的内容：我们怎样当老师。下面我针对自己的感受谈一下心得。
我们怎样当老师？一个简单的问题。
大家知道，教育过程是教师以生命影响生命，以人格感召人格，以智慧点燃智慧的过程。俗话说“多看书，多学习，才能进一步指导实践！”不然只能是觉得“书到用时方恨少，事非经过不知难。”首先当好老师，要求我们要自觉学习，通过学习要明确教师的责任。教师必须忠诚于人民的教育事业。做到“学为人师，行为世范”。教师的责任具体表现在以下几个方面：
一是教书育人，对学生负责。当好一名合格的老师，在教书育人的同时必须做到对学生负责，注重学生的发展，以学生为本，这就是说教师的责任重于泰山，教师必须做好学生的教育者，生活的导师和道德的引路人等角色。
二是指导家庭教育，对家长负责。教育下一代是全社会的共同任务，作为学生家长，也不能例外。教师必须主动自觉的与学生家长保持密切联系，经常通过各种形式向家长汇报学生在学校的表现，指导家长掌握科学的管理理念和方法，针对学生出现的问题与家长磋商，提高教育的针对性，强化家长的责任意识，让家长成为学校教育的有力助手和有生力量，只有这样，我们才能齐心协力把学生培养好，我们才能成为让家长满意的教师。
三是团结协作，对教师集体负责。任何一个学生的成长不是一个教师成果，而是一群教师共同努力的结果，这就要求教师必须相互配合，教师个人服从集体，对教师集体负责。
四是行为世范，对社会负责。要求教师要不断提高自己的综合素质，提高自己的教学质量，使自己的教学活动保持旺盛的生命力。用自己的实践履行对社会的责任，成为为人民服务，让人民满意的教师。其次当好老师，要求我们必须有一颗仁慈的心。每一个教师都应该用宽容和耐心去对待学生，做一个仁慈的教师。要成为一名仁慈的教师，必须做到以下几点：
一是对学生无条件的爱。它表现为教师的耐心、冷静、诲人不倦、表现为教师的所有教育手段的出发点都是对学生的热爱，做到这一点非常的难，但我们必须努力去做。回想自己的教学活动，有很多时候做不到上述几点，尤其是学生犯了错误的时候，自己今后一点要改正。二是对学生的高度宽容。教师对学生的仁慈主要表现为爱心和宽容。无论学生犯了什么错误，都要冷静，都要用爱和宽容去化解。学会与学生的共处，学会用学生的眼光看问题，热爱学生。
第三当好老师，要求我们必须做到公正。也就是说要全面照顾到所有学生，学生正处在发展的阶段，难免会出现问题，学生之间有差异这是正常的，我们不能因为这些差异，而放弃了对某一些学生的教育，相反我们更要积极的去对其进行教育。要善待每一位学生，相信每一位学生，不放弃每一位学生，让师爱的阳光洒向每一个学生。教师做到公正，有很多好处，比如： 一是有利于良好的教育环境的形成。
二是有利于教师威信的提高。公正是人格的脊梁。孔子说：“其身正，不令而行；其身不正，虽令不从。”这句话虽然是对从政者说的，但对教师同样适用。由于学生对教师的公正品质期望很高，教师公正与否，当然影响他在学生心目中的形象。一个没有威信或威信不高的教师注定将成为一个成就不高的教师。三是有利于学生的学习积极性的发挥。教师公正的对待每一个学生，会使学生觉得教师对自己重视，会更加努力地学习。
四是有利于学生的道德成长。在学生的心目中，教师往往是公正、无私、善良、正义的代表，对教师有非常美好的期待，因此教师必须做好学生的道德模范和榜样。
五是有利于社会公正的实现。教师公正是社会公正的重要组成部分，而且会影响到学生的公正，因此教师的公正对于社会来说至关重要。
第四当好老师，要求我们一定要注意自己的心态。教师职业繁重的工作、有限地选择和过大的压力总是客观存在的，没有相当的付出和投入，不可能到达成功的彼岸。而在此过程中没有良好的心态，往往会使自己提前垮掉。影响教师心态的因素有以下几种：
一是教师的职业压力。教师的神经整天绷得紧紧地，就怕学生出问题、管不好。同时在教学成绩成为衡量教师的惟一尺子的今天，教师担心成绩落后被淘汰，担心被解聘或转岗等等都使教师产生无限的压力。
二是教师的职业倦怠。由于长期的高压，教师的情绪衰竭，处于过度疲劳状态，对工作满意度低，工作热情和兴趣丧失，情感冷漠。这些都不利于教师的教学活动。因此教师必须克服压力，正确的评价自己的工作，创新自己的教育工作，丰富自己的闲暇生活，使自己“诗意的栖居在大地上”。
第五要当好老师，要求我们要感到自己的幸福。幸福是人生的主题和人生的根本问题。教师幸福是教师职业道德的出发点和归宿，理解教师的幸福是理解教师职业道德和教育理论体系的重要“纽带”。如果一位教师对从事教育事业而不感到幸福，那么她一定不是一位合格的教师。我们要善于在繁忙与劳累的工作中寻找教师幸福的意义。因为教师幸福可以有以下好处：
一是可以提升教师生命的质量。二是可以使教师走向精业。
三是只有教师幸福才能培养出幸福的学生。这一点很重要，只有幸福的老师才能教出幸福的学生。
总之，通过阅读《新时期教师职业道德》这本书让我受益匪浅，不仅全面了解了教师职业道德的相关知识，更使自己明白了怎样去当一名合格的教师。今后自己要把做好一名教师作为自己的人生目标，真正把自己生命的浪花融入到祖国的教育事业中去。
第三篇：心得体会--兰小飞
学习心得
视频讲座、培训一切皆是浮云。真正决定一个人的成功是在与思想和行动力。而成功不仅仅是几个视频讲座、几期培训就能让你走上成功之道.学习目的决定学习效果；学习心态决定学习心得。理解、体会胜于记忆、记录。所讲的不一定全部适用与自己。自己所缺的正是所要借鉴的。所谓的“拿来主义”并不是让我们按部就班，用以别人勾勒出的成功之道的框架来规划自己的人生。这样的人毫无意义。因为思想空间完全被他人所占据。我们要“拿来”的是适合自己的，自己所缺漏的。并不是照单全收。
或许某个时候这些讲座可以称之为垃圾。那必定在你成功之后，因为你的过程就是经验。人的一生别人左右不了，关键在于自己。所想、所做、所经历、所实现的良性循环才能决定成功。认识自己、看清社会、结合实际、制定目标、计划实施这才是最确切的形容每个草根的成功之道。
作为陈安之也好，曾仕强也好。他们所讲的一切也都是在经历过之后，人只有亲身经历了，才能领悟到为人处事之内涵。或许在你经历过后、成功的那一天，比他们演讲的更为精彩。人生是由自己勾勒出，如何炫目多彩，全在于自己。想要自己的人生耀眼，从现在起做好点点滴滴、围绕着心中的蓝图，用心刻画。
第四篇：2012-1-12潘兰芳工作总结
湖南德客隆置业投资有限公司湘潭项目部潘兰芳同志个人工作总结
转眼间兔年即将过去了，我来到公司也将近半年了。从7月底踏进公司，我参与了公司两次开盘，一次次硕果累累，感受了1#、2#楼喜封金顶的热烈氛围，作为一名德客隆人我是幸运的。回头看，这半年来，我也成长了许多。7月份进入公司，正好开始接受金鹏售楼软件的学习，为以后的工作打下了坚实的基础。培训完，马上开始了在售楼部的收银工作，收银虽然不是一项很复杂的工作，但也要求我们十分谨慎，每天下午将当天收的现金全部缴存银行，并制作EXCEL台账，报会计审核。紧接着迎来了公司第一次盛大开盘，9月4日我们德客隆制造了湘潭房产界的传奇，一开盘1#、2#楼就全部售罄。这也是对我们财务人员工作的一次考核，因为在接下来的7天，我们迎来的是100多个客户签合同，在这一周中，我们忙得几乎连吃饭的时候的没有。
开盘只是工作的开始，马上是10月份的房交会，这一次又是财务人员的一场时间战，在短短三天内，我们必须完成140多个客户的网签工作。又一次我们不负使命，及时的完成了工作。
之后我又被安排负责客户公积金贷款的工作,与公积金中心的信贷人员衔接，收集客户相关资料，并将资料按要求制作成册，上报公积金。1#、2#总共有24个申请公积金贷款的客户，到目前为止已经有18个客户的贷款（共计417万元）申请审批成功，8个客户已经放贷，其他客户已在房产局做完了预抵押工作，等待公积金放款。还有2个客户的资料已经上报公积金待审批，预计春节前可以审批下来。剩下的4个客户，2个是长沙铁道部门的，自己办理，还有2个没有签网签合同，无法办理。
在进行公积金贷款工作的同时，我还兼跑房产局，给客户做预告登记，预抵押，带客户面签，一系列繁琐的工作。几乎每天三点一线，公司--公积金--房产局，忙碌但是很充实。
忙碌的时间总是过得特别快，这一年对公司来说是个丰收年，对我来说也意义非凡，一个全新的领域，一个全新的起航。
潘兰芳
2012-01-06
第五篇：小兰老师
盐城师范学院论文设计
基因工程在生物制药领域的应用
孙中楼
[摘 要] 本文主要介绍了基因工程的概念、基因工程技术开发生物药物的一般过程及一些以开发利用的基因工程药物,生物药物较传统的化学药物、中草药的优越性及它的特殊疗效,同时探讨了今后利用基因工程技术进行药物开发、研究的发展方向及广阔的应用前景。[关键词] 基因工程 基因治疗 基因重组 生物药物基因工程概述
所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子, 构成遗传物质的新组合, 并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内, 而能持续稳定地繁殖[1]。
基因工程的第一个重要特征是跨越天然物种屏障的能力,即把来自任何一种生物的基因放置在与其毫无亲缘关系的新寄主生物细胞中去的能力。这表明人们有可能按照主观愿望创造出自然界中不存在的新物种。第二个特征是, 它强调了一种确定的DNA 小片段在新寄主细胞中进行扩增的事实,才能制备到大量纯化的DNA 片断, 从而拓宽了分子生物学的领域, 使之在生物制药领域有巨大的应用。
基因工程自从20世纪70年代初期问世以来, 无论是在基础理论研究领域, 还是在生产实际应用方面, 都已经取得了惊人的成绩。基因组核苷酸全序列的测定与分析, 是基因工程技术促进基础生物学研究的一个出色范例。2001年2月12日, 由6国的科学家共同参与的国际人类基因组公布了人类基因组图谱及初步分析结果, 这结果为人们提供了约3000多个基因可用来制药, 将推进基因制药产业的快速发展[2]。由于基因克隆技术的发展, 已使得基因工程技术在工业生产尤其是制药生产中发挥了重要作用。以前人们利用微生物自身生产有用的产品, 如利用青霉菌生产青霉素、利用链霉菌生产链霉素等。但是从这些生物体中分离纯化这些药物, 不仅成本昂贵, 而且技术上也相当困难。如今将编码这些药物的基因克隆并转移到合适的生物体内进行有效的表达, 就可以方便地提取到大量的有用药物。基因工程技术开发药物的一般过程
利用基因工程技术开发一个药物, 一般要经过以下几个步骤: ① 目的基因片断的获得: 可以通过化学合成的方法来合成已知核苷酸序列的DNA 片段;也可以通过从生物组织细胞中提取分离得到, 对于真核生物则需要建立cDNA 文库。② 将获得的目的基因片
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断扩增后与适当的载体连接后, 再导入适当的表达系统。③ 在适宜的培养条件下, 使目的基因在表达系统中大量表达目的药物。④将目的药物提取、分离、纯化,然后制成相应的制剂。
以上方法大部分是以微生物或组织细胞作为表达系统,通过微生物发酵或组织细胞培养来进行药物生产。近年来, 通过转基因动物来进行药物生产的“生物药厂”成为目前转基因动物研究的最活跃的领域, 也是基因工程制药中最富有诱人前景的行业。转基因动物制药具有生产成本低、投资周期短、表达量高、与天然产物完全一致、容易分离纯化等优势, 尤其是适合于一些用量大、结构复杂的血液因子, 如人血红蛋白(Hb)、人血白蛋白(HSA)、蛋白C(Pro tein C)等。英国的爱丁堡制药公司通过转基因羊生产α1-抗胰蛋白酶(α1-AAT)用于治疗肺气肿, 每升羊奶中产16 g AAT, 占奶蛋白含量的30%, 估计每只泌乳期母羊可产70 g AAT[3]。另外, 转基因植物制药比转基因动物制药更为安全, 因为后者有可能污染人类的病原体。目前, 已经开发出许多转基因植物药物, 例如脑啡肽、α-干扰素和人血清蛋白, 以及两种最昂贵的药物即葡萄糖脑苷脂酶和粒细胞-巨噬细胞群集落因子等[4]。基因工程药物
基因工程药物自20 世纪70 年代末期以来, 有了飞跃的发展。1978 年首次通过大肠杆菌生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素, 1980 年美国联邦最高法院裁定微生物基因工程可以获得专利, 1982 年第一个由基因工程菌生产的药物—— 胰岛素, 在美国和英国获准使用以来,各种基因工程药物犹如雨后春笋, 得到了蓬勃发展。我国的医药技术的研发和产业化也取得了长足的进展。3.1 抗生素类
传统的抗生素生产, 主要利用化学合成或微生物发酵来获得, 其生产过程中菌种的表达水平比较低, 生产成本比较高, 而且在使用过程中容易产生耐药菌群。而利用基因工程技术可以对生产菌种进行基因改造, 得到表达水平高、产品目的性强的菌株, 如大肠杆菌生产青霉素酰胺酶。德国一个科研小组对生产半合成青霉素的材料6 APA, 用基因工程来增强大肠杆菌的青霉素酰胺酶活性。将大肠杆菌的基因PBR 322 的质粒克隆化所形成的菌株, 其酶活力比原株提高50 倍, 从而提高6APA 生产能力。我国王以光利用基因重组技术对螺旋霉素产生菌进行改造, 增强了丙酰基转移酶的基因在螺旋霉素产生菌中的表达, 并提高了丙酰螺旋霉素的产量[5]。3.2 活性多肽类
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在人体中存在一系列含量较低, 但生理活性很高, 而且在人体代谢过程中起着重要的调节作用的活性多肽类物质如激素等, 这些物质在临床上可以作为药物来治疗相应的因此类物质失衡而造成的疾病。此类药物的制剂多来源于各种动物的脏器, 生产方法复杂, 成本高, 个别产品还必须从动物的尸体中进行提取, 无法进行大规模工业化生产,自基因工程技术问世以来, 通过基因重组技术, 可以由微生物进行生产, 这是基因工程技术的最大成就之一, 以下是这类药物中比较典型的两个。3.2.1 胰岛素
Genentech 公司在1978 年, 由Goeddel 等学者应用基因重组技术开发出使用大肠杆菌生产人胰岛素。随着基因工程技术的不断发展, 生产胰岛素的工艺和技术也不断得到完善, 在临床上已经完全取代了由动物脏器提取得到的产品。目前, 我国新疆转基因羊已能够成功表达人胰岛素原[6] , 为胰岛素的生产开发了新途径。3.2.2 生长素
人类生长素临床用于治疗侏儒症和肌肉萎缩症, 传统制造方法是由人脑下垂体抽提精制而得, 其原料来源困难, 产量受到极大限制。全世界侏儒症患者中仅有1%可以得到治疗, 原因是生长素价格极其昂贵, 达每克5 000 美元。1979 年Genentech 公司由Goeddel 等学者应用基因重组技术首先开发出使用大肠杆菌生产人生长素,近年来还开发了以酵母菌来生产生长素, 其产量可达到1.4×106 ～4.7×106 分子/ 细胞。目前, 我国基因工程人生长素已研制成功, 并投入市场和用于临床使用。
除上述药物外, 运用基因工程技术生产的这类药物还有神经生长因子(PDGH)、人基底成纤维细胞生长因子、绒毛膜促性腺激素等。3.3 细胞免疫调节因子
基因工程技术用于细胞免疫调节因子的产品较多, 临床广泛应用于抗肿瘤和免疫调节等。近年来, 由于基因重组和细胞融合两大技术的进步, 加上高压液相层析技术、氨基酸序列分析装置以及蛋白质的精制和解析技术的改进, 使一些调节细胞免疫活性物质的研究和开发得到快速发展, 如干扰素(INF)、白介素(IL)、集落刺激因子(CSF)和肿瘤坏死因子(TNF)等。
干扰素是其中研究较为广泛, 技术比较成熟, 产业化较早的一个产品。第一代干扰素是从血液中进行提取而得到。据芬兰的K Cantell 报道, 处理23 000 L 血液, 所得纯度1%以下的干扰素不足100 mg , 所以产量很低。而且由于血源质量不能保证, 可能造成血源性传染病的传播。第二代干扰素是采用基因工程技术进行生产的, 其生产水平可达250 000
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分子/ 细胞, 每升可含2.5 亿单位, 成本显著下降, 产品纯度很高, 含量可达90%以上[7]。目前, 已经商品化的基因工程干扰素有α、β、γ三种, 而且生产技术也在不断完善。俄罗斯科学家构建了以假单胞菌为载体的表达系统来生产基因工程干扰素, 与传统的大肠杆菌表达系统相比其培养周期短, 细胞易于破碎便于提取。随着基因重组技术的不断发展, 一些研究人员对干扰素基因进行改造, 构建靶向干扰素基因及表达载体。利用限制性内切酶分别从含有抗乙型肝炎S 抗原(HbsAg)人源单链抗体与人干扰素a 质粒中切出目的基因, 连接到pET 22b 质粒中, 构建成单链抗体靶向干扰素表达载体, 在大肠杆菌中表达成功[8]。3.4 疫苗
传统的疫苗是病源微生物的减毒或灭活物质, 但这些疫苗都不理想, 有可能发生回复突变, 恢复毒性;或者因为灭活不适当引起疾病流行。利用基因工程技术生产的新型疫苗, 可以克服传统疫苗价格昂贵、安全性能差等缺点, 能为目前尚无有效疫苗的某些特殊疾病如艾滋病, 提供有效的治疗手段。
第一个商品化的基因工程疫苗是抗人乙型肝炎病毒(HBV)的疫苗。我国大约有10%的人口受到HBV 的侵害, HBV 的感染通常还与特殊的肝癌(HCC)有着密切的关系, 每年全世界死于HCC 的病人有30 万左右。HBV 具有高度的寄主专一性, 只能感染人类和黑猩猩, 这意味着只能从肝炎患者身上才能获得有限数量的病毒, 供做疫苗使用, 而且从患者血液中提取制备的疫苗, 还有传染艾滋病的可能。利用基因工程技术生产的抗HBV 疫苗克服了传统疫苗的缺点, 质量和安全性高, 用量极少, 一般剂量为10 mg 以下, 接种3 次, 为普通药品用量的千分之一。1982 年P Valenzuela 等人将S 基因(HBV 表面抗原基因)的一个片段克隆在一种载体上, 结果在酵母中合成出来HBV 表面抗原(HbsAg)颗粒, 其产量达25ug/ L , 酵母表达系统现在已经能够大规模生产供给人类使用的重组肝炎疫苗[9]。
大约20 年前, 人们发现“裸露”DNA 注入体内能够诱发免疫反应, 科学家们进行了大量研究, 开发出了新型的核酸疫苗。所谓核酸疫苗, 是指将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA 或RNA)直接转移到动物体内, 通过宿主表达系统合成抗原蛋白, 诱导宿主对该抗原蛋白产生免疫应答, 以达到预防和治疗疾病的目的[10]。现已开发出多种核酸疫苗, 例如: 流感核酸疫苗、艾滋病疫苗、狂犬病疫苗、结核病疫苗[11] 和乙型肝炎疫苗和戊肝疫苗等[12]。3.5 基因治疗制品
基因治疗在1990 年开始进行实验, 1993 年美国FDA 给人类基因治疗下的定义为:
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“基于对活性细胞遗传物质的改变而进行的医学治疗, 这种改变可以在活体外进行, 然后应用于人体, 或者直接在人体内进行”。因此,基因治疗存在两种方式, 即间接体内法和体内法。间接体内法主要是通过在体外进行基因转移, 筛选可表达外源基因的细胞, 然后再转移到体内;体内法则是直接在体内改变与修复遗传物质。随着分子生物学、基因重组技术的发展, 有关目的基因的获得方法已趋成熟, 但是, 目的基因的转移传递系统、目的基因的表达调控以及疗效和安全性还需进一步研究证实。目前, 基因转移系统主要是两类: 一类是由病毒介导的基因转移系统, 主要包括逆转录病毒(Rt)、腺病毒(Ad)、疱疹病毒(HSV)和腺病毒相关病毒(AAV)载体等。Naldini 等开发出一种基于HIV 的重组Rt 载体, 不需要辅助细胞, 能广泛感染各种非分裂细胞, 同时保留了能整合在宿主染色体上的特点。世界上第一例基因治疗所采用的载体即是Rt 载体, 治疗腺苷酸脱羧酶缺乏所致的严重联合免疫缺乏症(ADA-SCID)。另外一类是非病毒介导的基因转移系统, 包括脂质体、分子偶联载体、基因枪和裸DNA 等[13]。
另外, 反义核苷酸技术也应用于基因治疗, 尤其在抗乙肝病毒的基因治疗方面, 包括反义DNA、反义RNA 和核酶RNA 等。2001 年, Ro baczew ska 等首次通过静脉给予反义DNA, 选择性抑制北京鸭HBV 在鸭肝脏中的复制和表达, 证明了反义DNA 在动物实验中的有效性[14]。美国Viag ene 公司研究出一种被称为“艾滋病毒免疫制剂”,该药为一种鼠逆病毒与核心蛋白编码的基因序列和HIV 表面抗原RNA 结合产物, 在小鼠和灵长类动物试验中确定该药能诱导出强的HIV-特异性杀伤细胞。结束语
基因工程技术使药品开发发生了根本性的转变。传统的
药品开发方式是在大量的化学合成物质和微生物代谢产物中进行随机筛选, 得到其中的有效成分作为新的药物。采用基因工程技术开发新药, 是通过对致病机理的研究, 找到那些可用于治疗目的的有效成分以及其编码基因, 经过基因重组将其转入适当的载体, 大量表达其有效成分作为治疗药物。同时,基因工程技术给药品生产技术带来了革命性变化。过去一些生产困难的产品, 如激素、酶、抗体等一些生物活性物质, 通过基因工程手段可以高质量、高收率地付诸生产, 同时生产成本也大幅度降低, 提高了患者的用药水平和生活质量。
基因工程技术在传统医药不能有效治疗的一些疾病, 如癌症、艾滋病、遗传病等的诊断、治疗和预防等方面提供了有效的新手段, 并取得了一些重大的突破。如发现了致癌基因,可使癌症的早期诊断和治疗药物的开发成为可能。随着分子生物学和基因重组技术的发展, 我们相信这些严重危害人类生命的疾病, 在不久的将来会得到有效的预防和治疗。
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[参考文献] 1 吴乃虎.基因工程原理(上).第2 版.北京: 科学出版社, 2001.45 2 丁锡申.基因制药产业化发展概况.生物工程进展, 2001, 21(5): 4 3 张磊, 田莉.转基因动物制药发展现状及前景.天津药学, 2001, 13(1): 5 4 Gl ynis Giddings , 汪开治.利用转基因植物生产生物药.生物技术通报, 2001,(5): 36 5 王以光.基因工程技术在大环内酯抗生素及硫霉素改造中的应用.医学研究通讯, 2002, 31(2): 23 6 庄林根.制药新技术的发展与新世纪展望.中国药学杂志, 2002, 37(1): 1 7 王文仲.应用微生物.北京: 中国医药科技出版社, 1996.454～455 8 夏小兵, 成军, 杨继珍.抗Hb sAg 单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达.中华肝脏病杂志, 2002, 10(1): 28 9 吴乃虎.基因工程原理(下).第2 版.北京: 科学出版社, 2001.376 10 李海星, 曹郁生, 陈燕.核酸疫苗研究, 药学进展, 2002, 26(4): 220 11 李学荣, 余新炳.核酸疫苗及其免疫机制研究.中国人兽病共患杂志, 2000, 16(6): 22 12 徐菲莉, 赵飞审.核酸疫苗及其在传染病学中的应用.地方病通报, 2000, 15(3): 87 13 刁勇, 王广基, 许瑞安.基因治疗研究进展.药学进展, 2001, 25(1): 12 14 杨光, 司建华.抗乙肝病毒基因疗法的研究现状.国外医学情报, 2002, 23(8): 10
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