第一篇：生物技术制药课程实习报告格式
福建农林大学植物保护学院
（黑体，字号小三）
生物技术制药课程实习报告
（黑体，字号小二）
（以下黑体，字号小三）
姓名：
学号：
成绩：
指导老师：陈宇熹
实习地点：福建农林大学植物保护学院制药工
程系校内实训基地
实习时间：2010.6.28～7.9目的与意义（一级标题，小三号黑体，段前0.5行，段后0.5行）
（正文部分宋体，字号体小四，行距固定值20磅，段落首行缩进2字符）2 课程实习内容（一级标题，小三号黑体，段前0.5行，段后0.5行）
2.1全自动机械搅拌不锈钢发酵罐（500L）（二级标题，四号黑体，段前0.5行，段后0.5行）
2.1.1 全自动机械搅拌不锈钢发酵罐原理（三级标题小四号黑体，段前0行，段后0行）
（正文部分宋体，字号体小四，行距固定值20磅，段落首行缩进2字符）
2.1.2 全自动机械搅拌不锈钢发酵罐外形图（三级标题小四号黑体，段前0行，段后0行）
2.1.3 全自动机械搅拌不锈钢发酵罐工艺流程图（三级标题小四号黑体，段前0行，段后0行）
2.1.3 全自动机械搅拌不锈钢发酵罐工艺操作过程（三级标题小四号黑体，段前0行，段后0行）
（正文部分宋体，字号体小四，行距固定值20磅，段落首行缩进2字符）
2.1.4 全自动机械搅拌不锈钢发酵罐操作注意事项（三级标题小四号黑体，段前0行，段后0行）
（正文部分宋体，字号体小四，行距固定值20磅，段落首行缩进2字符）3实习小结与心得（一级标题，小三号黑体，段前0.5行，段后0.5行）
（正文部分宋体，字号体小四，行距固定值20磅，段落首行缩进2字符。根据生物技术制药课程实习内容归纳总结并写出该次实习的心得体会以及感受，不少于800字）
重要要求：报告绝对不允许有抄袭及雷同现象，一经发现，所有雷同报告均退回重做或以该次实习成绩不及
第二篇：生物技术制药见习报告
生物技术制药见习报告
一药厂见习
(一)药厂简介
合肥神鹿双鹤药业有限责任公司是北京医药集团有限责任公司的全资子公司，公司是一家拥有四十余年历史，以生产中成药为主导产品的专业化中成药企业，公司注册资本为9650万元。公司先后被确定为全国医药行业质量效益型企业、全国中成药工业国有重点企业（五十强）之
一、安徽省医药行业的骨干企业、安徽省210户国有及国有控股重点企业、合肥市科技先导型企业、安徽省高新技术企业、合肥市科技创新型企业等荣誉称号，公司的技术中心为安徽省省级技术中心。
四十年来公司秉承“让生活有质量，让生命更健康”的使命，致力于提供安全、可靠、放心的产品和服务，追求提升人类生命价值和生活品质，公司曾连续荣获安徽省质量管理奖。公司占地面积145亩。职工460人，其中大专以上学历占45%，高中级专业技术人员67人，执业药师18名。经过多年的积累与发展，企业已形成较完整的营销、研发、生产技术、质量保证体系。拥有颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂等具有国内领先水平的生产线。生产工艺采用低温回流、一步造粒等先进工艺，2002年整厂一次性顺利通过了国家GMP认证。拥有高效液相、双波长薄层扫描、十万分之一电子天平、BGB－150B高效包衣机、小颗粒自动包装生产线等一批国内外先进的检测仪器和生产设备。目前已成为安徽省产能规模最大的中成药生产企业，具有年产片剂：3亿片；颗粒剂：600吨；胶囊剂：1亿粒的综合生产能力。
公司拥有温、养胃舒、益胆片、儿泻停颗粒、银菊清咽颗粒、化浊轻身颗粒以及正柴胡饮胶囊等独家产品和国家中药保护品种。
公司的主导产品温胃舒、养胃舒是目前国内胃药市场上唯一辨证分型、一病两药的药物,温胃舒、养胃舒曾荣获国家中医药管理局重大科技成果乙级奖、中国中药名牌、安徽省著名商标、安徽省名牌产品和高新技术产品等称号，并被列为国家基本药物目录，国家基本医疗保险药品、国家中药保护品种和国家社保目录乙类。
独家产品益胆片具有行气散坚，清热通淋的作用，消炎效果显著，起效迅速。适用于急慢性胆囊炎、胆石症、肾结石、膀胱结石等症，被誉为胆石患者的“良药”。
国家级新药儿泻停颗粒为纯中药制剂，具有疗效高、见效快、剂量小、口感好，安全无毒付作用等特点，为目前治疗儿童轮状病毒性肠炎的理想药物。
（二）制药技术介绍
1胶囊剂
胶囊剂（capsules）将药物直接分装于硬质空胶囊或具有弹性的软质胶囊中制成的固体制剂。： 根据囊材的不同分为硬、软、肠溶胶囊。
（1）硬胶囊剂：将一定量的药材提取物与药粉或辅料制成均匀的粉末或颗粒充填于空心胶囊中，或将药材粉末直接分装于空心胶囊中制成的剂型。
（2）软胶囊剂：将一定量的药物、药材提取物加适宜的辅料密封于球形、椭圆形或其他形状的软质囊材中制成的剂型。
（3）肠溶胶囊：硬胶囊或软胶囊经药用高分子处理或用其他适宜方法加工而成。囊壳不溶于胃液，能在肠液中崩解、溶化、释放胶囊中药物。
胶囊剂的特点：
可掩盖药物的不良气味；药物的生物利用度高（与片剂、丸剂相比）；可提高药物的稳定性（光、热敏感药物）；可定时定位（直肠、阴道给药）释放药物；弥补其他剂型的不足；（1）
含油量高或液态药物制成固体制剂时。（2）服用剂量小、难溶于水、胃肠道不吸收的药物，可溶于适当的油中。自动化程度高、整洁、美观、贮存、运输、携带、服用方便。胶囊剂的质量要求：
应整洁，不得有粘连、变形或破裂现象，无异臭。小剂量药物，应先用适宜的稀释剂稀释，混和均匀。硬胶囊剂的内容物应干燥、疏松、混合均匀。装量差异、水分、崩解时间应符合《中国药典》规定。
药物的填充
1、药物的处理：混合均匀的细粉或颗粒。
2、空胶囊的选择：
选择原因：药物的密度、晶态、颗粒大小的不同，占容积不同。
选择原则：按药物剂量所占容积选用最小的空胶囊。
选择方法：经验、试装；或测其密度查图可得。
3、药物填充方法：
手工填充、硬胶囊分装器填充、全自动胶囊填充机。
填充时需注意的问题：
定量药粉填充时会发生少量的损失，多准备填充物。麻醉、毒性药物除外。填充小剂量的药粉，麻醉、毒性药物易引湿或混合后发生共熔的药物，加入适量稀释剂，混合后填充。疏松性药物小量填充时，加适量乙醇或液状石蜡混匀后填充。中药浸膏粉，应保持干燥，添加适当辅料混匀后填充。挥发油先用吸收剂（碳酸钙、轻质氧化镁、磷酸氢钙等）吸收后填充。还可用复方中有些粉性较强药材，且为打粉入药吸收。
2制粒技术
近年来．一些新的制粒技术在制剂工艺改进方面起到了一定的推动作用，包括超细粉碎技术、超临界流体重结晶过程、微丸制备技术、微胶囊技术等。超细粉碎技木把机械粉碎与气流粉碎两者原理结合起来，可以达到亚微米级的细度，是当今最先进的超细粉碎方法之一。超临界流体重结晶是利用压力使溶液由不饱和变为过饱和，此而使物质重结晶析出，可在近常温下进行，适用于热不稳定、易氧化物质的重结晶提纯或制备微细颗粒。微丸制备技术生产能力大，可以制造0.3-30mm的球粒，颗粒直径大小相同、分散度小含量均匀。微胶囊包覆技术在我国工业的应用刚刚起步，但随着研究的深入，必将成为中成药制剂中的关键性高新技术之一。中药颗粒剂是在汤剂和糖浆剂的基础上发展起来的一种新的中药剂型，既保持了汤剂吸收快、显效迅速等优点，又克服了汤剂服用前临时煎煮、费时耗能、久置易霉变变质等不足。近年来，由于中药流化床制粒技术具有干燥时间短、产品质量好、干燥过程简单等特点，而被广泛应用于中药制药行业，其制粒技术亦日益趋向成熟。
2.1 中药制粒技术发展概况
中药大多数是以浸膏作原料，其中含有生物碱、昔类、多糖等有效成分，同时也含有纤维素、淀粉、蛋白质、树脂、树胶等无效成分，并给制粒带来很大困难。若要提高制剂质量，就必须改善颗粒外观、色泽，努力达到防潮、掩盖不良口味、防止药物挥发、提高溶解度、控或缓释等工艺要求。中药颗粒的制备工艺为: 选料斗去杂升工业提取升浓缩斗干燥叶制粒，其中主要的工艺环节是原料的处理与制粒。为了提高颗粒成品的质量，确保临床使用的疗效，药学工作者进行了广泛的实验研究。
2.2 原料的处理
根据处方中所含药物的成分，来确定处理的方法，出现了动态温浸技术、高速离心技术、絮凝澄清技术、大孔树脂吸附技术、超滤技术、挥发性成分包含技术，从而提高原药材的提取分离效果。
2.3 制粒工艺
通过辅料的选择和工艺条件的改进，来提高颗粒的质量，改善其性状:辅料上除了糖粉、糊精、可溶性淀粉外，还选用麦芽糊精、乳糖、微晶纤维素、微粉硅胶、经丙基淀粉等;制粒工艺上改变了传统工艺干燥时间长，药材中对热不稳定成分损失较多之不足，采用了动态提取、真空低温干燥或瞬间喷雾干燥、干法制粒、高速搅拌制粒等高新技术。实践表明，上述制粒技术的应用，大大地提高了中药颗粒的制备效率和成品质量，也为中药制药技术的进步与发展产生了积极的推动作用。
1.4.流化床制粒技术工艺原理
流化喷雾制粒，又称沸腾制粒、“一步制粒”。该法将制粒用的辅料置于流化喷雾制粒设备的流化室内，通人滤净的加热空气，使粉末预热干燥并处于沸腾状态，再将经预处理的药液以雾状间歇喷入，使辅料粉末被润湿而凝结成多孔状颗粒，继续流化干燥至颗粒中含水量适宜即得。
1.4.1流化床制粒技术特点
流化床制粒技术为混合、制粒、干燥操作一步完成的新型制粒技术。适于对湿、热敏感的药物制粒。该技术的使用，可大大减少辅料量，浸膏在颗粒中的含量可达到50%-70%，颗粒在沸腾状态下形成，大小均匀、外形圆整、流动性好、可压性好、生产效率高，便于自动控制。同时由于制粒过程在密闭的制粒机内完成，生产过程不易被污染，成品质量能得到更好的保障。目前多用于无糖型、低糖型颗粒剂的制备。
1.5 流化床制粒技术应用的注意事项
流化床制粒是中药制药工业中较为常用的先进技术之一，应用越来越广泛，但也存在着一些需要解决的问题。
1.5.1 防止喷雾干燥制粒机‘.塌床”现象的发生
1.5.2 产生“塌床”现象的原因
中药干浸膏粉多数粘滞性太大，引湿性较强，流动J性较差;操作中风温及风速过低，物料干燥速率太慢，粘合剂雾化液滴过大，或喷雾频率过高等;工艺设计不合理}，习。
1.5.3 防止“塌床”的方法
对于不同的处方、不同的中药成分，在操作中可以根实际情况，采取措施来预防和解决“塌床”现象。
1.5.4 防止颗粒大小不均
针对不同处方药物条件及制剂要求，适当地调整喷雾干燥制粒机的操作参数，并且在喷雾过程中，应随时根据取样情况，观测颗粒成型的好坏，并依此来调节雾化空气压力、流浸膏相对密度、进出塔风温度、微调风门的开启度、液体的喷雾速度等制粒参数，即可得到满意大小的颗粒
1.5.5 喷雾干燥产品的吸潮问题
近年来，人们在颗粒生产中采取了新工艺和新辅料、改善生产环境、采用阻湿性能强的包装材料等措施，旨在增强中药颗粒的抗引湿性能，解决喷雾干燥产品的吸潮问题。测定临界相对湿度(CRH)以决定加辅料量及包装材料的选择:CRH越大，水溶性药物越不易吸湿，反之，则越易吸湿。中药喷雾干燥产品，由于比表面积大，容易吸潮，含糖成分高的喷雾干燥产品更易吸潮，其CRH可低于50%，通常加人适量的白糊精、淀粉等作赋形剂，降低其吸潮性通常是赋形剂的用量越大，其吸潮性就越低。粘性低的中药提取液，其喷雾干燥产品与赋形剂用量比为9;1 时，用95%乙醇制粒，颗粒硬而粗但CRH值低，不利于长期保存，需要好的包装材料11610对于无糖型颗粒的包装材料需特别强调，一般的塑料复合膜不适用，真空镀铝的复合膜也不太理想，最好采用BOPP,扒UPE。的复合材料，以免成品吸潮、结块变质而失去药用价值，致使前功尽弃n70利用中药颗粒剂包衣的工艺，如将胃溶丙烯酸树脂薄膜包衣技术应用于板蓝根冲剂，即板蓝根浸膏粉与微晶纤维素、硫酸钙等混匀，湿法粒，颗粒
置糖衣锅内滚动吹干，并用W号树脂PEG乙醇溶液进行包衣，可很好解决颗粒的吸湿问题
二 超临界流体萃取
3.1超临界萃取原理
超临界流体萃取分离过程的原理是超临界流体对脂肪酸、植物碱、醚类、酮类、甘油酯等具有特殊溶解作用，利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。当然，对应各压力范围所得到的萃取物不可能是单一的，但可以控制条件得到最佳比例的混合成分，然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出，从而达到分离提纯的目的，所以超临界流体萃取过程是由萃取和分离组合而成的。
3.2萃取装置
超临界萃取装置可以分为两种类型，一是研究分析型，主要应用于小量物质的分析，或为生产提供数据。二是制备生产型，主要是应用于批量或大量生产。超临界萃取装置从功能上大体可分为八部分：萃取剂供应系统，低温系统、高压系统、萃取系统、分离系统、改性剂供应系统、循环系统和计算机控制系统。具体包括二氧化碳注入泵、萃取器、分离器、压缩机、二氧化碳储存罐、冷水机等设备。由于萃取过程在高压下进行，所以对设备以及整个管路系统的耐压性能要求较高，生产过程实现微机自动监控，可以大大提高系统的安全可靠性，并降低运行成本。
3.3超临界流体萃取的特点
1）超临界流体CO2萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点：
(1)可以在接近室温(35-40℃)及CO2气体笼罩下进行提取，有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散。因此，在萃取物中保持着药用植物的全部成分，而且能把高沸点，低挥发度、易热解的物质在其沸点温度以下萃取出来；
(2)使用SFE是最干净的提取方法,由于全过程不用有机溶剂,因此萃取物绝无残留溶媒,同时也防止了提取过程对人体的毒害和对环境的污染,是100%的纯天然；
(3)萃取和分离合二为一，当饱含溶解物的CO2-SCF流经分离器时，由于压力下降使得CO2与萃取物迅速成为两相（气液分离）而立即分开，不仅萃取效率高而且能耗较少，节约成本；
(4)CO2是一种不活泼的气体,萃取过程不发生化学反应,且属于不燃性气体,无味、无臭、无毒，故安全性好；
(5)CO2价格便宜，纯度高，容易取得，且在生产过程中循环使用，从而降低成本；
(6)压力和温度都可以成为调节萃取过程的参数。通过改变温度或压力达到萃取目的。压力固定，改变温度可将物质分离；反之温度固定，降低压力使萃取物分离，因此工艺简单易掌握，而且萃取速度快。
2）从超临界流体性质看，其具有的特点：
(1)萃取速度高与液体萃取，特别适合于固态物质的分离提取；
(2)在接近常温的条件下操作，能耗低于一般精馏发，适合于热敏性物质和易氧化物质的分离；
(3)传热速率快，温度易于控制；
(4)适合于挥发性物质的分离
三小结
第三篇：生物技术制药总结
生物技术：人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术
1基因工程制药：利用基因重组技术将外援基因导入宿主菌或细胞进行大规模培养，以获得蛋白质药物的过程。
2.载体：是携带外源目的基因或DNA进入宿主细胞，实现外援基因或DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
细胞传代passage：将细胞从一个培养器皿中消化、分散并接种至另一个培养器皿中的操作。细胞克隆培养（clonal culture）：即单细胞分离培养，是将动物组织分散后，将一个细胞从群体细胞中分离出来，由单个细胞培养成纯系细胞集群。
动物细胞的复苏：其原则是快速融化，必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
细胞融合（cell fusion）：是指在外力（诱导剂或促融剂）作用下，两个或两个以上的异源（种、属间）细胞或原生质体相互接触，从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象，或称细胞杂交。
转基因动物（transgenic animal）：采用基因工程技术将外源目的基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体动物的染色体上稳定整合，在经过发育途径将外源目的基因稳定地传给子代，通过这项技术所获得的动物即为转基因动物。
胚胎干细胞（embryo stem cell）：简称ES细胞，是从早期胚胎细胞团分离出来并能在体外培养的一种高度未分化的、具有形成所有成年细胞类型能力的全能干细胞。它是正常二倍体型，像早期胚胎细胞一样具有发育上的全能性。
抗体工程制药（antibody engineering pharmaceutics）：利用基因工程、细胞工程（包括动物细胞工程和植物细胞工程）和转基因动物及转基因植物技术生产抗体药物的过程。
单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）：简称单抗，将能大量扩增和永生的骨髓瘤细胞和能合成分泌特异性抗体的B细胞（仅识别一种抗原表位）进行融合得到杂交瘤细胞，经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌抗单一抗原表位的特异性抗体。
杂交瘤细胞克隆化（cloning）：是指将阳性孔中分泌抗体的单个细胞分离出来。融合后的杂交瘤细胞一般要经过3次克隆化才能达到100%的阳性克隆。
双特异性抗体（bispecific antibody，bsAb）：亦称双功能抗体，是含有两个不同配体结合位点的抗体分子，它有两个不同的抗原结合部位（两个臂），可分别结合两种不同的抗原表位。嵌合抗体（chimeric antibody）：是利用DNA重组技术，将异源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达的抗体，表达的抗体分子中轻、重链的V区是异源的，而C区是人源的，即整个抗体分子的60%~70%是人源的。
人源化抗体（humanized antibody，hAb）：通过CDR移植即把鼠抗体的CDR（互补决定区）序列移植到人抗体的可变区内所得到的抗体，也称CDR移植抗体或改型抗体。该抗体既具有鼠源性单抗的特异性又保持了人抗体的功能（C区的功能）。
免疫原性（immunogenicity）：抗原能刺激机体特异性免疫细胞，使其活化、增值、分化，最终产生免疫效应物质（抗体或致敏淋巴细胞）的特性。
免疫反应性（immunoreactivity）：抗原与相应免疫效应物质在体内或体外相遇时，可发生
特异性结合而产生免疫反应的特性。
减毒活疫苗（live attenuated vaccine）：是通过不同的方式手段使病原体的毒性即致病
性减弱或丧失后获得的一种由完整的微生物组成的疫苗制品。
灭活疫苗（inactivated）：是将病原体经培养增殖、灭活纯化处理，使其完全丧失感染性，但保留了病原体的几乎全部组分因此灭活疫苗具有较好的免疫原性和安全性。
亚单位疫苗（subunit vaccine）：利用微生物的某种表面结构成分（抗原）制成、能诱发
机体产生抗体的疫苗。
分解代谢阻遏（catabolite repression）：在菌体的生长阶段被菌体快速利用的碳源会产
生大量的分解产物，这些代谢产物阻遏次级代谢酶系的合成，只有当这类碳源被消耗完后，阻遏作用被消除，菌体才由生长阶段转入次级代谢产物合成阶段，这种发酵过程中的次级代
谢产物在碳源被消耗尽时才产生和积累的现象称为分解代谢阻遏。
生物技术：人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原
理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
种龄（inoculumage）：种子罐中培养的菌丝转入下一级种子罐或发酵罐时得培养时间
生物技术药物的特性？
（1）理化性质特性（1）相对分子量大（2）结构复杂：蛋白质和核酸均为生物大分子，蛋
白质含有四级结构（3）稳定性差（2）药理学作用特性（1）活性与作用机制明确：活性物
质对生理功能的调节机制比较清楚（2）作用针对性强：有特定的靶分子、靶细胞或靶器官
（3）毒性低：生物技术药物本身是体内天然存在的物质或它们的衍生物（4）体内半衰期短
（5）有种属特异性（6）可产生免疫原抑制（3）生产制备特性（1）药物分子在原料中的含量低（2）原料液中常存在降解目标产物的杂质：应采取快速分离纯化的方法以除去影响
目标产物稳定性的物质（3）制备工艺条件温和：目的产物不稳定（4）分离纯化困难：需要
多种不同原理的层析单元操作才能达到要用的纯度（5）产品易受有害物质（4）质量控制特
性
质粒的特点：（1）是指独立于原核生物染色体之外具有自主复制能力的遗传物质。（2）质粒
具有遗传传递和遗传交换的能力（3）质粒具有不相容性：两种亲缘关系密切的不同质粒不
能在同一宿主细胞中稳定共存。4..共价闭合环状DNA(ccDNA)，开环DNA(ocDNA)，线状
DNA(lDNA)在琼脂糖凝胶电泳中
5.复制子松弛型复制子的复制和宿主蛋白的合成功能
无关，宿主染色体DNA复制受阻时，质粒仍可复制；严谨型复制子的复制与宿主蛋白质的合成相关，因此在每个宿主细胞中为低拷贝数，仅1~3个。
6.克隆表达的质粒载体涉及三个要素：
（1）复制子（2）选择标记：由质粒携带的赋予宿主细胞新的表型的基因，用于鉴定和筛选
转化有质粒的宿主细胞。常见的标记：氨苄西林（Amp），卡那霉素（Kan）（3）多克隆位点
（MCS）：质粒载体中由多个限制性内切酶识别序列密集排列形成的序列。
7.目的基因常用制备方法
(1)化学合成法（2）PCR法：在含有DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP的缓冲溶液中通
过下列步骤扩增DNA：a）变性：双链DNA模板加热变性，解离成单链模板；b）退火：降
低温度，引物与单链模板结合；c）延伸：温度调整至DNA聚合酶最适宜温度，最终与单链
模板形成双链，并开始下一个变性、退火、延伸循环。（3）基因文库法（4）cDNA文库法
8.影响目的基因与载体之间连接效率的主要因素：
9.（1）DNA片段之间的连接方式：粘性末端的连接效率高于平头末端。（2）目的基因与载
体的浓度和比例：增加DNA浓度可以提高连接效率，目的基因与载体DNA的摩尔数比应大
于1.（3）连接温度、时间、连接酶的活性及缓冲液。
9.重组DNA导入大肠杆菌，常用的感受态细胞制备方法：氯化钙法
10.重组子的筛选与鉴定：
（1）载体遗传标记法：a)抗生素抗性筛选法
b)互补筛选法：重组子转化成宿主细胞，载体的表达产物与宿主细胞中营养缺陷性突变发生
互补作用，从而实现重组子的筛选。蓝白斑筛选：lacZα基因可编码β—半乳糖苷酶α氨基
端的α互补肽段，与宿主细胞编码的缺陷型β—半乳糖苷酶α实现互补，可分解底物5-溴-4-
氢-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，形成蓝色菌落。由于lacAα基因的插入失活而成白色，空载体的宿主细胞呈蓝色。c)营养缺陷筛选法d噬菌斑筛选法(2)核酸分子杂交法
(3)限制性内切酶图谱法(4)DNA序列测定法：双脱氧终止法(5)目的基因表达产物测定法
12.外源基因在大肠杆菌中的表达形式：
(1)胞内表达：(a)非融合蛋白的胞内表达：形成包涵体（B）融合蛋白的胞内表达：在大肠杆
菌内较稳定（2）分泌表达：（a)分泌至周质（b）分泌至胞外
11.外源基因在原核生物中表达的重要调控元件
(1)启动子：是DNA链上能与RNA聚合酶结合并起始mRNA合成的一段序列，是决定外源基
因在原核生物中表达效率的关键因素。(2)核糖体结合位点：SD序列(3)终止子
13.大肠杆菌中外源蛋白表达效率的影响因素：(1)外源基因密码子：偏好密码子（蛋白质合成迅速，错配率低）和稀有密码子(2)mRNA结构：减少G、C含量，增加A、T含量(3)表达
载体：高拷贝数、适用范围广、稳定性高、表达产物容易纯化(4)外源蛋白稳定性
14.分离纯化技术应满足下列要求：(1)技术条件要温和，能保持目的产物的生物活性；(2)选
择性要好(3)回收率要高(4)两个技术之间要能直接衔接(5)整个分离纯化过程要快
15.基因重组蛋白的主要分离技术
(1)离心(2)沉淀(3)膜分离(4)双水相萃取
16基因重组蛋白的主要纯化技术:
(1)离子交换层析(2)亲和层析(3)凝胶过滤层析(4)反相层析和疏水层析
17.选择分离纯化方法的依据：
（元，层析分离次序的选择也同样重要。(3)根据分离纯化工艺的要求来选择(a)具有良好的稳
定性、重复性和较高的安全性(b)尽可能减少组成工艺的步骤(c)分离纯化工艺所用的时间要
尽可能的短(d)工艺和技术必须高效
18．基因工程药物的质量控制要点
(1)蛋白质含量的测定(2)蛋白质纯度检测(3)蛋白质分子质量测定(4)蛋白质等电点测定(5)蛋
白质序列分析(6)内毒素分析、宿主蛋白与核酸残留分析
19.蛋白质含量的测定
(1)紫外吸收法(2)BCA法(3)Lowry法(4)考马斯亮蓝法(5)SDS-PAGE扫描分析法
20.蛋白质纯度的检测：电泳法、层析法、质谱法、末端氨基酸残基分析法
21.蛋白质Mr测定有SDS-PAGE法、凝胶层析法、质谱法
22.蛋白质等电点测定的常用方法：等电聚焦法。
23.蛋白质序列的分析:N-端氨基酸序列分析，C-端氨基酸序列分析
根据体外培养时动物细胞对生长基质的依赖性，可将动物细胞分为
(1)贴壁依赖性细胞(2)非贴壁依赖性细胞(3)兼性贴壁细胞
1.动物细胞培养的环境条件
(1)培养温度（哺乳类37℃，昆虫25~28℃）(2)pH值（大多数7.2~7.4）(3)通氧量（一定量的CO2）(4)防止污染(5)基本营养物质(6)渗透压
3.动物细胞的培养特性
(1)比微生物细胞大得多，无细胞壁，抗机械强度低，对剪切力敏感，适应环境能力差；(2)
倍增时间长，生长缓慢，正常二倍体细胞的生长寿命是有限的；(3)对培养基要求高，易受
微生物污染，培养时需要添加抗生素；(4)生长大多需贴附于基质，相互粘连以集群形式存
在，并有接触抑制现象；(5)多半将产物分泌在细胞外，便于收集和纯化；(6)对蛋白质的合成条件和修饰功能与细菌不同，动物细胞可对蛋白质进行完善的翻译后修饰，特别是糖基化，与天然产品更一致，更适合于临床应用。
4.原代培养的主要步骤
(1)从健康动物体内无菌条件下取出适量组织，剪切成小薄片；(2)加入适宜浓度的胰蛋白酶
或胶原酶和EDTA等进行消化作用使细胞分散；(3)将分散的细胞进行洗涤并纯化后，以2×
10^6~7×10^6 /ml的浓度加到培养基中，37℃下进行原代培养，并适时进行传代培养。分为
组织块培养和单层细胞培养两种方法。
5.动物细胞深低温保存的基本原理
在-70℃以下时，细胞内的酶活性均已停止，即代谢处于完全停滞状态，故可以长期保存。
在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发
生机械损伤、电解质浓度升高、渗透压改变、脱水、pH改变、蛋白质变性等，能引起细胞
死亡。目前为了保存细胞，都采用液氮低温（-196℃）冻存的方法。
6.动物细胞的复苏
其原则是快速融化，必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻
存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
7.动物细胞营养要求特点
(1)碳源不能为无机物，大多为葡萄糖；(2)氮源不能为无机物，主要为各种氨基酸；(3)在很
多情况下尚需添加5%~20%的小牛血清或适量的动物胚胎浸出液。
8.动物细胞的大规模培养方法
(1)悬浮培养法(2)微载体培养法(3)多孔载体培养法(4)微囊化培养法(5)中空纤维培养法
9.诱导动物细胞融合的方法主要有:(1)病毒法(2)PEG法(3)电击法(4)激光法
10.转基因动物生物反应器（整体掌握？）
(1)转基因动物乳腺生物反应器（药用蛋白，如抗凝血Ⅲ、抗胰蛋白酶、葡萄糖苷酶、C蛋白）
(2)转基因动物血液生物反应器（人血红蛋白、抗体或非活性状态的融合蛋白）(3)转基因动
物尿液生物反应器（促性腺激素）(4)转基因鸡（蛋）生物反应器（人干扰素）
1.单克隆抗体技术的基本原理
基于动物细胞融合技术得以实现的，即骨髓瘤细胞和B细胞的融合。骨髓瘤细胞在体外
培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；抗原免疫的B细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫B细胞和骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代
细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗
体的能力。通常使用HAT（H为次黄嘌呤、A为氨基蝶呤、T为胸腺嘧啶核苷）选择培养基
对杂交瘤细胞进行筛选。未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡，未融合的骨髓瘤细
胞合成DNA的从头合成途径被培养基中的A阻断，又因缺乏HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸
核糖转移酶）和TK（胸腺嘧啶核苷激酶），不能利用培养基中的H和T完成DNA的合成过
程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了HGPRT和TK，因此能在HAT培养基
中长期存活与繁殖并分泌抗体。
2.单克隆抗体的大量制备主要方法:（1）体内培养法（2）体外培养法
6.重组ScFv的应用:(1)用于构建和生产免疫毒素(2)用于肿瘤的影像分析和治疗
7.噬菌体抗体库技术的基本原理:用PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的VH和VL基因，克隆到噬菌体载体上并以融合蛋白的形式表达在其外壳表面。这样一来噬菌体DNA中有抗
体基因的存在，同时在其表面又有抗体分子的表达，可以方便地利用抗原-抗体特异性结合而筛选出所需要的抗体，并进行克隆扩增。
7.噬菌体抗体库构建过程
(1)从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B细胞，提取mRNA并反转录为cDNA；
(2)应用抗体轻链和重链引物，根据建库的需要通过PCR技术扩增不同的抗体基因片段；
(3)构建噬菌体载体；(4)用表达载体转化细菌，构建全套抗体库。
通过多轮的抗原亲和吸附（结合）-洗脱-扩增，最终筛选出抗原特异的抗体克隆。其中，噬
菌体抗体库的筛选是关键环节和步骤。
减毒活疫苗的优缺点：
优点：
（1）通过自然感染途径接种，可以诱导包括体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫在内的更全面的免疫应答，使机体获得更广泛的免疫保护；（2）由于使用的是活的微生物他们可以在体内
长时间起作用而诱导较强的免疫反应，且由于活的微生物有增殖的特性，理论上只需要接
种一次，即可达到满意的免疫效果；（3）可能引起水平传播扩大免疫效果，增强群体免疫屏
障；(4)一般不需要再疫苗中添加佐剂，生产工艺一般不需要浓缩纯化，价格低廉。
缺点：
(1)一般减毒活疫苗均保留一定残余毒力，对一些个体如免疫缺陷者可能诱发严重疾病，并
且由于种种原因如基因修饰等，减毒活疫苗可能出现毒力回复即“返祖”现象；(2)减毒活
疫苗是活的微生物制剂，可能造成环境污染而引发交叉感染等，并可能滞留在环境中形成传
染源；(3)缺损颗粒可能干扰免疫效果，因此产品分析评估较为困难；(4)保存运输等条件要
求较高，如需冷藏等。
1.灭活疫苗的特点：(1)灭活疫苗常需多次接种；(2)接种灭活疫苗产生的抗体滴度随着时
间而下降；(3)灭活疫苗需要量大。
第七章 发酵工程制药
1.发酵类型：(1)微生物菌体发酵(2)微生物的酶(3)微生物的代谢产物发酵(4)微生物转化发
酵(5)生物工程菌发酵
2.微生物发酵生产药物的分类：(1)抗生素类(2)氨基酸类(3)核苷酸类(4)维生素类(5)甾体类
激素(6)多糖类(6)治疗酶及酶抑制剂
3.菌种保藏方法：(1)斜面低温保藏法(2)石蜡油封存法(3)沙土管保藏法(4)麸皮保藏法(5)甘
油悬液保藏法(6)冷东真空干燥保藏法(7)液氮超低温保藏法(8)宿主保藏法
4.种子液具备的条件：(1)菌种的生长活力强，转种至发酵罐后能迅速生长，延迟期短；(2)
生理状态稳定；(3)菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求；(4)无杂菌污染，保证纯种培养；()保持稳定的生产能力
5.微生物的发酵方式：（1）分批发酵（2）补料—分批发酵（3）半连续发酵（4）连续发酵
5.发酵过程的中间分析项目：（1）产物产量（2）PH值（3）糖（4）氨基氮（5）菌丝形
态
6.发酵过程的影响因素及控制：（1）菌体浓度的影响及控制（2）营养物质对发酵的影响
及控制（3）温度的影响及控制（4）PH的影响及控制（5）溶氧的影响及控制（6）二氧化碳的影响及控制（7）泡沫的影响及控制（8）染菌对发酵的影响
第四篇：生物技术制药教学大纲
第一章 绪论（2学时）第一节 生物技术概述 1 生物技术的概念 2 生物技术发展史 第二节 生物技术制药 1 生物技术制药的概念 2 生物技术在制药中的应用 我国生物技术制药现状和发展前景 4 医药生物技术发展展望
第二章 生物药物（10学时）
1．生物药物的来源、特性、分类与制备。（2学时）
2．氨基酸类药物：氨基酸类药物研究概况；在医药中的应用；氨基酸生产。（2学时）3．多肽、蛋白质类药物：多肽、蛋白质类药物的特点、分离纯化方法、工业生产制备过程。（2学时）
4．核酸类药物：概述（分类、应用）；生产方法；核酸类药物的制备。（2学时）5．糖类药物：制备；纯化。（2学时）
第三章 基因工程制药（8学时）
通过本章学习，了解基因工程药物研制的意义，掌握基因工程药物的研制过程、研制方法。1概述。
2基因工程药物生产的基本过程。(2)3目的基因的获得：直接分离法；从基因文库中筛选；逆转录法；人工合成法。4目的基因与运载体的体外重组：常用载体；目的基因与运载体的体外重组。5重组分子导入受体细胞；导入方法；影响转化的因素；阳性重组体的筛选。(2)6基因表达：大肠杆菌中的基因表达；真核基因在原核生物中的表达方式；真核基因在真核生物中的表达；真核基因在动物细胞中的表达。(2)7基因工程下游技术；下游技术的要求；基因工程菌的稳定性；基因工程菌发酵。8基因工程药物的分离、纯化：分离纯化的基本过程；分离纯化的技术。
9基因工程药物的质量控制:材料的质量控制;培养过程的质量控制;纯化工艺工程的质量控制。(2)第四章 动物细胞工程制药（8学时）1 概述： 形态及生理特性。（2）生产用的动物细胞：生产用动物细胞的要求；生产用动物细胞的获取。4 基因工程细胞的构建和筛选；真核细胞基因表达载体的构建；基因载体的导入和高效表达工程细胞株的筛选。（2）动物细胞的培养条件和培养基 6 动物细胞培养的基本方法（2）7 动物细胞大量培养的方法和操作方式 动物细胞生物反应器及检测控制系统：搅拌式生物反应器；气升式生物反应器；流化床生物反应器。（2）
第五章 抗体制药（4学时）1概述
2单克隆抗体：制备；细胞融合；杂交瘤的培养、筛选及克隆化。（2）
3鼠源性单克隆抗体的改造：Ig分子的结构模式图；结构改造；基因工程抗体。4抗体的应用：临床检验；层析介质；导向药物。（2）
第五篇：《生物技术制药》课程教学过程的体会
最新【精品】范文 参考文献
专业论文
《生物技术制药》课程教学过程的体会
《生物技术制药》课程教学过程的体会
摘要：《生物技术制药》是一门实践性很强的综合性课程，是农业院校生物工程、生物技术专业的重要课程之一。文章主要总结了笔者在多年教学过程中的一些体会，以便于更好地激发学生学习兴趣，建立和实践结合的教学模式，培养学生创新思维和创新意识。
关键词：生物技术制药；教学内容；教学方法
中图分类号：G642 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2013）-04-0286-1
众所周知医药卫生领域是现代生物技术最先登上的舞台、发展最迅速、潜力也最大的一个领域。医药事业的发展对生物制药教育和人才培养提出了更新的要求。生物技术制药内容较多、基础理论性与实践性都较强。笔者针对该学科的特点，通过对生物技术制药的教学方法等方面进行调整，教学方法上结合了多种方式，取得了良好的效果。
生物技术制药的学科特点
生物技术制药虽然是一门新兴学科，但也是一门综合性学科，涉及到细胞生物学、生物化学、免疫学等生物学学科以及生物技术制药、药理学等药学学科。本课程涉及的知识面广，各知识点之间密切相关，不仅包括与生物技术相关的一些基本理论，还包括与药物制剂、药物质量控制等相关药学知识。
修订教学大纲、更新教学内容
为将教学改革思路融入课程教学当中，进一步明确课程教学要求，不断提高教育教学质量，我们在总结原《教学大纲》执行情况、分析相关课程的教学内容，结合该领域中的理论和实践的新进展、新技术修订教学大纲。以“强调知识更新，优化教学内容和缩减教学时数”为指导思想，使内容丰富，结构系统完整，既注重少而精，又注重由浅入深，循序渐进。在修订过程中遵循了以下原则：
（1）适应性。教学大纲应符合学校对生物专业办学定位、专业培养目标、培养规格、层次对教学内容的特殊要求。（2）前瞻性。教
最新【精品】范文 参考文献
专业论文
学大纲应较好地反映生物技术制药所在领域的先进成果及其发展趋势，充分体现教学改革的成果，为学生的自主发展和进一步深造及教师不同教学风格的展现留有发展的空间。（3）一致性。先承后续、相关课程的教学内容安排要求协调一致，以减少有关知识讲授的简单重复。（4）协调性。教学大纲修订要处理好知识传授、能力培养和素养提升的关系，做到三者的协调统一。
教学方法、方式的优化
3.1 启发式教学
传统的板书讲授方式使学生对教书的认识被无形中的限制为照本宣科、让他自己看书也能看懂的过程。因此，在我们的实际教学过程中，应注意将课程本身应用性强、结合实际紧密的特点贯穿在整个教学过程中，以基础性，发展性知识为主线，一般性知识为辅助的教学原则，引导学生边学边想边分析，并通过课堂提问来激发学生的思维活动，培养学生的想象力和独立思考的能力，使教与学两方面紧密结合起来。禽流感、SARS等病毒引发全国范围重要疫情的时候也恰好是目前学生经历过的事情，采用这样活生生的例子来讲授疫苗和药物开发能够让学生有更深刻的感受，教学活动是教与学两方面构成，只有将教师的讲授和学生的思维活动有机结合起来，学生才会对所学的知识记忆深刻、才会自觉地去思考。
3.2 探究式教学
探究式学习具有学生参与度高，启发性强，利于提高学生综合素质等特点，是近年来广受重视的教学方式。通过这种学生间小组合作解决给定问题的过程中，锻炼了学生团队精神，也锻炼了学生查阅文献和组织文献的能力，更锻炼了学生的语言组织能力和宣讲能力，进而锻炼学生们与人交流的能力；同时还补充了教师在课堂上不能充分覆盖的知识点，对丰富教师的知识结构也起到了很好的作用。
3.3 加强现代化信息技术的应用
运用集图、文、声于一体的现代信息多媒体教学模式来指导生物技术制药教学工作，充分发挥现代信息技术的特点，使其直观化、形象化，增强学习效果。比如为提高教学质量，加强学生能力培养，通过视频了解基因工程乙肝疫苗、胃病疫苗、禽流感疫苗生产的原理及
最新【精品】范文 参考文献
专业论文
生产工程，真实地再现了工厂实际生产操作过程，有利于学生今后在相关行业尽早地适应工作需要。通过给学生观看部分教学多媒体录像，有目的性的抛出一些问题，让大家带着问题去观看，这样有的放矢，可以使学生对问题的理解更为透彻、深入。同时充分利用各种信息资源库，或者直接访问数字图书馆中的内容，获得学科的最新信息，从而更好的把握教学内涵，了解该学科发展动态。
充分结合试验教学，推动理论学习
理论教学和实验教学是生物技术制药中不可分割的两个方面，所以要引导学生重视实验，提高实验教学质量。比如让学生根据实际条件自行设计试验方案，交由老师统一审定试验的可行性并进行修订，然后由学生按照修订后的方案执行整个试验过程并提交完整试验报告，教师根据学生从设计到实施到完成报告整个过程的表现进行综合、全面评价。还可以组织学生深入到一些制药公司进行实地观看生物技术制药等的生产全过程，增强学生的感性认识，缩短实验室教学与生产实践之间的距离。
近年，社会对制药工程人才的需求已发生一些变化，尤其是提高了对动手能力的要求，能完成相关的工作，其次要有综合运用的能力，能将理论与实践有机结合并不断创新的能力。在5年的教学工作中，也逐渐品味出教与学的关系、从不同的角度和位置探索促进二者共进的方法。希望能有效促进学生学习的主动性和积极性，提高其动手能力和综合运用能力，有利于学生更好的适应将来社会和工作的需求。
参考文献
[1] 任长松著.探究式学习――学生知识的自主建构[M].教育科学出版社，2005，2：5.[2] 翟西峰，王之纬.药剂学教学中应重视学生创新能力的培养.卫生职业教育，2002，20（12）：47.[3] 张惠斌.未来药学的发展趋势及药学人才培养的要求.药学教育，200，2：1.[4] 夏焕章，熊宗贵.生物技术制药（第2版）[M].北京：高等教育出版社，1999.作者简介： 王媛媛（1978-）女，博士，沈阳农业大学生物科技
最新【精品】范文 参考文献
专业论文
学院讲师，研究方向：生物工程。
------------最新【精品】范文
点击咨询 