溶血标本对生化检验的准确性干扰及纠正性回归分析

第一篇：溶血标本对生化检验的准确性干扰及纠正性回归分析

溶血标本对生化检验的准确性干扰及纠正性回归分析

摘要：目的 探讨溶血标本对生化检验的准确性干扰及纠正性回归分析。方法 选取健康志愿者共144例，对其的血液标本进行采集，并随机分为两组，观察组患者接受溶血处理，并纠正分析生化检验指标的变化。结果 观察组与对照组相比，其中ALT、TP、ALB、AST、Na+、Cl-、GLU、LDH显著上升（P0.05）。选取单因素分析中的对生化检验有显著影响的指标，建立多元回归分析，发现回归分析的校正范围减少。结论 进行生化检验时，必须要保证血液采集、运输以及检侧过程的稳定性，避免发生血液溶血，促进检验准确度的有效提升。

关键词：溶血标本；生化检验；准确性；纠正性；回归分析

血生化检验在疾病的辅助诊断中得到广泛的应用，临床发现溶血会对检验指标的准确性造成影响，进而影响到疾病的诊治[1]。本次研究选择健康志愿者的血液标本以及溶血标本为研究对象，采用对比的方法，并对溶血影响到生化指标的准确性干扰进行纠正性的回归分析，获得良好效果，现具体报告如下。资料与方法

1.1一般资料 选取2013年3月～2014年4月我院征集的符合研究需求的144例健康志愿者为研究对象，随机分为对照组与观察组，对照组患者未做处理，观察组患者接受溶血处理。对照组患者共72例，其中男34例，女38例，年龄在12～58岁，平均年龄为（36.9±2.1）岁；观察组患者共72例，其中男36例，女36例，年龄在13～57岁，平均年龄为（37.1±1.4）岁。两组一般资料差异无统计学意义（P>0.05）。组间具有可比性。

1.2方法 所有患者晨起空腹状态下，采集10 ml的血液标本，观察组血液使用玻璃棒搅拌，进行溶血处理，对照组患者不做处理。观察组血液以速度为2500 r/min进行离心运动，运动时间持续15 min，之后将血液中的杂质排掉，留取血清。对血液的各项指标进行检测。

1.3统计学方法 通过统计学软件SPSS 17.0完成对汇总数据的统计学分析，其中计量资料则使用平方值±标准差（x±s）形式，组间对比采取χ2检验或者t检验。结果对比以P<0.05作为有统计学意义，以及有显著性差异。结果

2.1溶血标本影响生化检验的Pearson单因素分析 观察组与对照组相比，其中ALT、TP、ALB、AST、Na+、Cl-、GLU、LDH显著上升，而TBA、TBIL以及DBIL有明显下降，差异具有统计学意义（P0.05）。

2.2溶血标本影响生化检验的多元回归分析 选取单因素分析中的对生化检验有显著影响的指标，建立多元回归分析，发现回归分析的校正范围减少。讨论

血液的生化检验是属于对疾病进行辅助检查的一个重要项目，它的准确性与疾病诊断的正确性息息相关[2]。血液标本在采集过程以及检验过程中，如果出现失误、意外以及检验方法不准确的情况，则会造成血液溶血情况[3]。溶血是指血细胞内外渗透压失去平衡，最终使得细胞膜破损，细胞液成分进入到血液中，造成血清生化指标的改变，使得其与正常值存在差距[4]。因而必须要对影响溶血的因素进行研究，预防临床检验中溶血情况的发生[5]。

生化检验指标受到多种因素的影响，而各个影响因素之间也存在相互促进或者抑制的作用[6]。因此，本次研究不仅做了单因素分析，也做了多因素的纠正性回归分析[7-8]。利用生化分析仪，对血清代偿记录，同时校正实际的测定结果。整个过程以美国CIA98效能作为对比检验的精度标准，并最终得到校正值所对应的的可接受性，作为判断溶血为感染准确性的生化因素[9]。在对其进行单因素分析时，结果显示：溶血影响生化测定中影响比较大的指标是肝功能、心功能以及水电平衡指标，对血液的肾功能影响比较小[10-11]。通过深入纠正分析，可以发现TBA、ALB以及LDH的预期可接受性要低于80%，是因为溶血影响到准确性的一个重要指标，其他的指标改变属于继发性的改变。

综上所述，进行生化检验时，必须要保证血液采集、运输以及检侧过程的稳定性，避免发生血液溶血，促进检验准确度的有效提升。

参考文献：

[1]方超，吴朝珍.溶血对生化检验准确性的影响及纠正探析[J].临床医药文献电子杂志，2014，08：1438-1439.[2]丰琳.溶血对生化检验准确性的影响及纠正措施[J].检验医学与临床，2015，04：551+553.[3]焦国立，黄华，周云将.溶血标本对生化检验准确性的干扰及纠正分析[J].当代医学，2015，08：51-52.[4]赵雅琳，孙红艳.溶血对生化检验准确性的影响及纠正探析[J].中国保健营养，2013，03：979-980.[5]郭晓红.溶血对生化检验准确性的影响分析[J].中国医药指南，2014，08：145-146.[6]李锦霞.溶血对生化检验准确性的影响及纠正探析[J].大家健康（学术版），2014，05：64-65.[7]赵丽芳.溶血对肿瘤患者生化检验准确性的影响及纠正[J].北方药学，2014，06：84-85.[8]徐振龙.溶血对生化检验准确性影响及应对措施分析[J].大家健康（学术版），2014，12：74-75.[9]江丽娅.溶血对生化检验准确性的影响及纠正探讨[J].当代医学，2014，26：11-12.[10]周延美，唐延辉.溶血对生化检验准确性的影响及纠正分析[J].中国卫生产业，2013，11：126+128.[11]彭敏颜，何艳嫦.标本溶血对常规生化检验结果干扰分析[J].中外医疗，2013，16：45-47.编辑/罗茗柯

第二篇：54例溶血标本对肝功能检验准确性的影响分析

54例溶血标本对肝功能检验准确性的影响分析

【摘 要】 目的 探讨标本溶血对生化检验结果的影响。方法 采用全自动生化分析仪检测 54例正常人不溶血和溶血血清中的总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酰转肽酶（GGT）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）并进行配对资料秩和检验的统计分析。结果 TBIL、DBIL、TP、AST 的值在溶血和非溶血标本之间有显著差异（P <0.01）； ALB 的值在溶血和非溶血标本之间无明显差别。结论 溶血对肝功检验有明显的干扰和影响。

【关键词】 溶血标本 肝功能检验 准确性

低渗溶液或机械性振荡等多种理化因素都可引起溶血，因此，溶血是临床检验工作难以避免的影响因素和难题川。溶血后的血液细胞成分对临床检验的生化指标有一定的影响。为探讨溶血标本对临床肝功能检验准确性的影响，我科对在我院体检的健康人群不溶血标本和溶血标本分别进行肝功能生化指标测定，现将结果分析报告如下。资料与方法

1.1 临床资料

研究对象为2011年12月在我院体检的健康人54例，年龄28―49岁，无肝肾功能障碍和血液系统疾病。

1.2 方法

本次所有研究对象均在同一时间抽取空腹静脉血4ml，分别注人两支干燥试管中，每管2ml，其中一管离心5 min后，无肉眼可见的黄疽和乳糜血，直接测定；另一管先置于-40℃冰箱冻结30min后，待其融化，然后以同一离心方法分离溶血血清再进行测定。取上述溶血血清和非溶血血清，分别测定 TBIL、DBIL、TP、ALB、GGT、ALT、AST、ALP 等项目。检测试剂为日本第一化药品株式会社产品，仪器采用日立 7170A 型全自动生化分析仪，检测时仪器性能良好，质控在控制范围内，质控物为挪威产品。

1.3 统计学处理

采用SPSS 13.0软件进行统计学分析处理，计量资料采用t检验。结果

54例体检者的溶血血样标本和未溶血血样标本进行肝功能检验，其溶血血样标本中ALP、DBIL、GGT、TBIL浓度相对于未溶血血 样 浓度 降低，溶血血样标本中ALT、TP、AST、ALB相对于未溶血血样浓度增高，其对比结果见表1。讨论

3.1 溶血的影响：溶血产生的原因很多，如止血带结扎时间过长，抽吸力过大、抽血不顺利、容器不干净、离心力过大等，不管何种原因引起的溶血均可产生检验结果误差。本结果显示溶血标本的肝功指标与正常标本测得值有显著差异，结果升高或降低。

3.2 溶血原因及其防止：体外溶血可由物理因素（如机械性破坏、冰冻）、化学因素（如血样接触表面活性剂）和代谢性因素（如遗传病引起的血细胞脆性增加）引起。体内溶血则可由物理因素（如人工心脏瓣膜或大血管手术后）、生物因素（如恶性疟）和药物毒性反应等因素引起。对于反复出现的原因不明的溶血，有时需要鉴别。为减少失误和误差，提高检验结果的准确性，一旦发现溶血标本，应采取相应的措施。一方面是重新抽取标本或对轻度溶血标本结果进行较正。另一方面是从方法学上克服或减少溶血的干扰，如Hb对吸光度的干扰，可通过设置样品空白或改用双波长比色，导数分光光度法和动力学法等措施；属于参与某一分析法化学反应的溶血干扰，只能是改变所用试剂类型。随着全自动生化分析仪的普及，检查血清标本是否溶血，已成为试验过程中质控的重要环节。

综上所述，溶血会直接影响到临床肝功能检验结果的准确性。为此临床从采集血液标本到检测结束这个过程，要减少各种客观因素引起血样溶血。对于溶血标本应该及时采用补救措施进行校正，以此降低溶血对检验结果的影响，若严重溶血需要重新采集血样，确保血液检测的准确率，为体检者和患者提供准确率高的检测结果。

参考文献

[1] 吴立翔.标本溶血对临床检验结果的影响[J].重庆医学，2005，34（11）：1717-1719.[2] 李兵，李豫英.溶血对肝功能检验准确性的影响及纠正[J].中国煤炭工业医学杂志，2008，14（11）：143-145.[3] 孔艳玲.溶血对肝功能检验结果影响的分析[J].中国实用医药，2010，5（8）：254-255.[4] 唐清.溶血现象对临床生化检验项目影响的观察[J].中国当代医药，2010，17（27）：139-140.[5] 安银东，黄萍，顾娟玲.乙型肝炎病毒携带者血清IL-

6、IL-

8、TNF-α检测及临床意义[J].中华临床医师杂志：电子版，2011，5（1）：226-227.

第三篇：溶血标本对部分生化指标的影响

溶血标本对部分生化指标的影响

在工作中往往因各种原因导致标本溶血，而血清标本溶血时主要影响哪些指标，测定结果是否真实可靠，是所有检验工作者需要了解的问题。为了能及时客观地分析指标的变化是否具有临床意义，应当详细了解标本溶血对各项生化指标的影响。本文观察了部分常用生化指标在标本溶血前后检测结果的变化，旨在为标本溶血时血液生化结果分析提供一定的参考依据，尽量增加生化测定数据的可利用性。1资料与方法

1.1 与试剂 HITACHI 7070全自动（日本）。谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、胆固醇（CHO）、血糖（GLU）生化分析试剂盒，均购自北京康大泰科医学科技有限公司。

1.2 溶血的血清标本的制备

健康体检者50人，禁食不禁水12h，各抽取静脉血4ml，分别注入两支干燥试管各2ml。其中一支让其自然凝固，另一支在血液凝固前用金属棒搅拌使其溶血，然后以3000r/min离心10min，去上清液分别为未溶血和溶血的血清标本。

1.3 生化指标的测定

用己糖激酶法测定血清葡萄糖（GLU），连续检测法测定谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），重氮法测定总胆红素（TBIL），尿素酶—GLDH法测定尿素氮（BUN），苦味酸法测定肌酐（CRE），氧化酶法测定胆固醇（CHO），以上指标均用HITACHI 7070全自动生化分析仪测定。结果

溶血后AST、TBIL、ALT的值比溶血前的值高；CRE的值比溶血前的值低；GLU、BUN、CHO的值在溶血前后未见明显改变。讨论

3.1 谷草转氨酶（AST）

人红细胞中AST活性约为血浆中的40倍［1］。当标本溶血时，势必引起血清中AST活性的升高，从而使溶血标本的结果明显高于未溶血标本。AST主要是作为肝损伤的敏感指标，测定结果的偏高会导致假阳性的产生。故出现溶血标本应当在报告中注明。

3.2 谷丙转氨酶（ALT）

细胞内ALT含量比血浆中高约7倍，因此溶血后ALT含量测定的增高主要来源于细胞内ALT的大量释放。可见与AST相比，ALT受溶血影响轻些，故对标本的要求低一些，但在分析结果时要注意考虑溶血的影响。

3.3 总胆红素（TBIL）

笔者使用的试剂盒是用重氮法测定总胆红素的，最后生成紫红色的偶氮胆红素，主要在波长为540～560nm处有光吸收。而血红蛋白在波长540～550nm处有光吸收［2］，恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后红细胞破裂时大量血红蛋白进入血清，势必造成总胆红素测定值的升高，是总胆红素的正向干扰因素。此外，由于血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素，溶血对重氮法测定胆红素同时存在负向干扰，使测定结果偏低，但该作用较轻微［3］，因此溶血后由于血红蛋白对测定结果的干扰，胆红素的测定结果往往偏高。

3.4 肌酐（CRE）

笔者使用的试剂盒是采用苦味酸法测定CRE的，而苦味酸特异性较差，易受其他还原性物质影响，主要是维生素C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰［4］。假肌酐物质也可与苦味酸形成颜色反应，导致测定值偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多，血清中较少，故溶血后红细胞中假肌酐物质是造成测定值发生偏差的主要原因。

3.5 溶血原因及防止

高亚英［5］等认为溶血的原因主要是操作不当和抽血器具不合格造成的。结合我们日常工作分析造成溶血的可能原因主要包括：（1）由于抽血困难，采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等而发生溶血。（2）注射器和针头连接不紧，采血时空气进入，在抽取的血标本中混有泡沫，这种混有泡

沫的血标本，放置一定时间后泡沫破裂或迅速干燥，造成血细胞破坏而发生溶血。（3）血标本在运输过程中过度震荡或贮存不当。（4）不合格的塑料制品会因聚合不完全而具有毒性，这种毒性可造成溶血。（5）试管质量粗糙。因此，在采血、检验过程中必须注意细心操作，并注意注射器、针头和试管的质量。在报告检测结果时要注意溶血的影响，并在数据中加以标注。

【参考文献】 Thomas L,Haemolysis as influence and interference factor.The Journal of The International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,1999,13(4).2 张敏，蒲彦武，阚玫.不同溶血度下20项生化试验结果分析.西北国防医学杂志，1997，18（4）：273-274.3 邱谷.溶血对重氮法血清胆红素测定的干扰分析.上海杂志，2000，15（6）：350.4 李影林.中华医学检验全书（上卷）.北京：人民卫生出版社，1997，641-860.5 高亚英，王晓明，蒋冬青，等.血液标本溶血原因分析及控制.交通医学，2002，16（1）：84.

第四篇：溶血现象对临床生化检验项目的影响分析

溶血现象对临床生化检验项目的影响分析

【摘要】目的：对溶血现象对临床生化检验项目的影响进行深入分析。方法：抽选到我院接受健康体检者的65例血样标本，每份量为6ml，均分置入两个试管，选择1个试管实施人工溶血操作，再对正常血样和溶血标本的检验结果进行对比分析。结果：通过对比分析，溶血血清的检验项Glu、ALP水平要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指标水平均要高于正常血样，均存在差异，有统计意义（P＜0.05）。结论：溶血现象的产生对血生化检验结果有一定影响，为确保临床检验结果的准确度，应有效避免溶血情况发生。【关键词】溶血现象；生化检验；影响

溶血现象是临床血生化检验中较为多见的影响性因素。如果待测血样的红细胞浓度高于血浆浓度，则会导致检验结果出现较大偏差，并且溶血情况下白细胞、血小板等会破坏而释

[1]放出某些成分，对生化检验项带来影响。为进一步掌握溶血现象产生的影响，制定出针对性预防措施，本文65例到我院接受健康体检者的血样标本生化检验情况进行分析，报告正文如下。

1.资料与方法 1.1一般资料

抽选2015年1月到2016年1月到我院进行健康体检者的65例血液样本作为观察对象。其中，男性37例，女性28例；年龄19到37岁，平均（25.1±3.8）岁。本组均在晨起空腹抽取静脉血6ml，在平均置入两个干燥试管内。取其中1管进行溶血处理，置入低温冰箱（-45℃）进行冷冻20min，再取出予以融化，1500r/min离心10min，将溶血血清予以分离；正常血样在常温环境下放置1h之后，通过相同离心处理，予以分离，但不进行溶血，取出1ml为正常血清备用。1.2方法

本组患者均选用美产Beckmancx-7型全自动血生化分析仪进行检测，质控在正常范围之中，质控物为国产。对K+的测定应用国产迅达电解质分析设备及相应试剂，每一份正常血清、溶血血清均行10次测定，选取平均值。

检测指标有血糖（Glu）、丙谷转氨酶（ALT）、总蛋白（TP）、碱性磷酸酶（ALP）、血尿酸（UA）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（Alb）、总胆固醇（CHOL）等，均按照试剂盒相关规定操作。1.3统计处理

本组检测资料均应用SPSS18.5软件进行统计学处理，用均数和标准差（x±s）表示计量数据，再基于t检验，P＜0.05表示存在差异，有统计意义。2.结果

通过对比分析，溶血血清的检验项Glu、ALP水平要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指标水平均要高于正常血样，均存在较大差异，有统计意义（P＜0.05），具体如表1：

表1 溶血血清和正常血清的生化检验结果对比（x±s）检验指标 正常血清（n＝65）溶血血清（n＝65）t P值 GLU（mmol/L）

5.49±1.22

5.74±1.15

5.714

0.001 ALP（U/L）

124.71±7.31

84.25±4.17

10.203

0.001 TP（U/L）

59.31±6.24

62.27±6.23

7.152

0.005 ALT（U/L）

56.14±2.62

64.71±2.43

8.163

0.012 Alb（U/L）

32.24±4.31

36.19±4.25

5.252

0.004 AST（U/L）

57.10±2.57

66.43±2.46

6.187

0.001 UA（mmol/L）

356.25±10.47

362.15±10.23

5.223

0.026 TBIL（mmol/L）

10.28±0.49

13.52±0.81

4.116

0.032 CHOL（mmol/L）

4.92±1.35

7.40±1.73

3.156

0.013 3.讨论

血生化分析是临床检测中重要内容，其检验结果是临床诊疗的重要的指导依据，其准确

[2]性和有效性，和临床实际准确度对体检者有着重要意义。溶血现象是血生化检验中影响最终结果的一个常见因素，该种现象的是由诸多因素共同影响产生的，主要有这两个方面的因素：（1）体外因素，这是引起溶血现象产生的主要因素，包括物理方面，比如：冰冻、物理破坏；化学方面，比如血样和表面活性剂相接触；代谢方面，比如：遗传疾病导致血细胞脆性提升；（2）体内因素，该方面引起溶血现象的因素主要有生物方面，比如：恶性病症；

[3]治疗方面，比如：人工心脏瓣膜、药物毒副作用等。对血清标本测定是否出现溶血是临床常规检验中最为基本的环节，对某些疾病的检出和诊断有重要意义，而溶血对临床生化检验项目有不同程度的影响，会导致血生化检验指标的变化，且溶血现象的严重度对检验结果产生的影响也是不同的。本研究结果显示，溶血血清检验项Glu、ALP等指标要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指标水平均要高于正常血样（P＜0.05）。

为预防和减少溶血现象的产生，应不强化样品制备技术标准水平，可有效预防体外溶血发生；严格按血生化操作规范和技术标准予以血样采集，确保采集器具的干燥及清洁，包括

[4]针头、试管及注射器等，禁用酒精消毒，以免发生溶血；止血带包扎应松紧适宜，进针如有回血的，不应过快将注射器活塞拔出，应沿管壁缓缓注入试管，避免血泡产生过多而导致血细胞的破裂。血液在采样之后不应当即置入冰箱冷冻，避免融化溶血；血样搁置时间不应过长，要避免消毒液进入到标本，通常采血后在常规室温环境下放置0.5h~1h，之后分离血清；如果发现标本出现溶血，应当即采取有效的补救措施或指导患者再次抽血，以提升检测结果的有效性和准确性。

总而言之，在临床生化检验中应重视溶血现象对检测结果的影响，加强检测操作控制和管理，确保血生化检测的临床可用性和安全性。参考文献：

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第五篇：血清标本溶血对血液生化指标的影响

血清标本溶血对血液生化指标的影响45

血清标本溶血对血液生化指标的影响；李大磊1，史文华1，刘志峰1,2；1山东省天然药物工程技术研究中心；2烟台大学药学院山东省烟台市264005；摘要：目的探讨血清标本溶血对血液生化检验结果的影；关键词：溶血；生化检验；；Theinfluenceofhemolysiso；LIDa-lei1，SHIWen-hua1，LI；1．ShandongEngineerin

血清标本溶血对血液生化指标的影响 李大磊1，史文华1，刘志峰1,2 1山东省天然药物工程技术研究中心 2烟台大学药学院 山东省烟台市 264005 摘要：目的 探讨血清标本溶血对血液生化检验结果的影响，为药物安全性评价的长期毒性试验数据的分析提供一定的依据。方法 采用全自动生化分析仪检测10份正常大鼠血液标本在溶血前和溶血后血清葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐（Cre）、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、钙（Ca++）、镁（Mg++）、钠（Na+）、钾（K+）、氯（Cl-）的值，并进行了比较和统计分析。结果 溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高，具有统计学意义；Cre的值比溶血前的值低，统计差异显著；GLU、TP、ALB、BUN、CHO、ALP、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值溶血前后未见明显统计学意义的改变。结论 溶血对血清AST、TBIL、ALTK+、Cre有明显的干扰影响，提请在分析测定结果时注意溶血情况。

关键词：溶血；生化检验；

The influence of hemolysis on sericem biochemical tests LI Da-lei1，SHI Wen-hua1，LIU Zhi-feng1,2 1．Shandong Engineering Research Center for Natural Drugs, Yantai, Shandong 264003 2．School of Pharmacy, Yantai University, Yantai, Shandong 264005 Abstraet：Aim To observe the influence of hemolysis on the results of biochemical tests.Methods The blood collected from the rat divided into 2 samples, one of which is to process hemolysis serum, the other is to process normal serum.The serum biochemical data were detected respectively, which include glucose(GLU), alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), total protein(TP), albumin(ALB), creatinine(Cre), Blood uric nitrogen(BUN), cholesterol(CHO), alkaline phosphal ase(ALP), total bilinibin(TBIL), calcium(Ca++), magnesium(Mg++), natrium(Na+), kalium(K+), chlorin(Cl-).The data were treated with paired-test.Resluts The level of serum AST, TBIL, ALT and K+ increased in hemolysis samples than normal.The level of serum Cre in hemolysis samples is lower than normal.There is no significant difference in serum GLU, TP, ALB, BUN, CHO, Ca++, Mg++, Na+ and Cl-.These results indicate that hemolysis could interfere the results of serum AST, TBIL, ALT, K+ and Cre.The significance of hemolysis on serum biochemical analysis should be regarded in drug safety evaluation.Key words ：Hemolysis；Biochemical analysis 在新药安全性评价的长期毒性试验中，血液生化指标的分析对药物毒性作用的了解和毒作用靶器官的判断具有重要的意义，是评价药物毒性的重要依据之一。

长期毒性试验的血液生化分析具有其特殊性，例如动物尤其是小动物的采血是不可重复的；血液生化测定结果的统计分析受数据资料数的限制等。在工作中往往因各种原因导致标本溶血，溶血样本不参与结果分析往往使统计资料数偏少，因此血清标本溶血时主要影响哪些指标，测定结果是否可以参与统计数据的分析，是所有药物安全性评价工作者需要了解的问题。为了能及时客观地分析生化指标的变化是否具有临床意义，应当详细了解标本溶血对各项血液生化指标的影响。目前国内尚未见标本溶血对药物安全评价所要求的十几项血清生化指标影响的报道，本文观察了药物安全评价长期毒性试验中需要测定的生化指标在标本溶血前后检测结果的变化，旨在为标本溶血时血液生化结果分析提供一定的参考依据，尽量增加生化测定数据的可利用性。材料与方法 1.1 动物来源 SD大鼠，清洁级。由山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，动物合格证号为：鲁动质字D20021133。

1.2 仪器与试剂

AUTOLAB全自动生化分析仪（AMS，意大利）。血清电解质分析仪(MEDICA，美国，EASYLYTE PLUS)，试剂原装。血糖（GLU）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（Cre）、尿素氮（BUN）、胆固醇（CHO）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、镁、钙血液生化分析试剂盒，均购自中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 溶血的血清标本的制备

取SD大鼠10只，雌雄各半。禁食不禁水12小时，用水合氯醛麻醉后腹主动脉取血6ml，分别注入两支干燥试管各3ml。其中一支让其自然凝固，另一支在血液凝固前用金属棒搅拌

使其溶血，然后以3 000 r*min-1离心10min，取上清液分别为未溶血和溶血的血清标本。

1.4 生化指标的测定

用葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖(GLU)、连续监测法测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)、双缩脲法测定总蛋白(TP)、溴甲酚绿法测定白蛋白(ALB)、苦味酸法测定肌酐（Cre）、两点动力法测定尿素氮(BUN)、酶比色法测定胆固醇(CHO)、连续监测法测定碱性磷酸酶(ALP)、重氮法测定总胆红素(TBIL)、邻甲酚酞络合酮比色法测定Ca++、二甲苯胺蓝法测定Mg++的值，以上指标均用AUTOLAB全自动生化分析仪测定。用EASYLYTE PLUS测定血清电解质Na+、K+、Cl-的值。结果

溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高；Cre的值比溶血前的值低，GLU、TP、ALB、BUN、CHO、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值在溶血前后未见明显改变（表1）。

Table 1 The influence of sample hemolysis on biochemical tests（X±SD）biochemical datum AST(IU/L)ALT(IU/L)T-BIL(mg/dl)K+(mmol/l)ALP(IU/L)Cre(mg/dl)GLU(mg/dl)Cl-(mmol/l)TP(g/L)ALB(g/L)BUN(mg/dL)CHO(mg/dl)Ca++(mg/dl)Mg++(mg/dl)Na+(mmol/l)3 讨论

3.1.谷草转氨酶(AST)人红细胞中AST活性约为血浆中的40倍[1]。当标本溶血时，势必引起血清中AST活性的升高，从而使溶血标本的结果明显高于未溶血标本。AST主要是作为肝损伤的敏感指标，Normal Serum 131.5±19.5 42.8±8.5 0.13±0.05 4.6±0.3 255.5±112.4 0.83±0.18 105.5±22.4 107.4±3.7 60.2±4.6 17.2±1.8 20.5±3.8 48.7±6.9 18.8±7.2 1.5±0.8 133.8±1.9 Hemolysis serum 247.7±27.4** 49.9±6.3** 0.49±0.18** 5.9±0.5** 243.1±108.9** 0.61±0.19** 98.7±21.5* 109.0±2.6* 61.2±2.9 17.2±1.3 21.6±4.9 50.7±6.0 20.9±7.8 1.7±0.7 134.9±4.4 % 91.7 18.9 315.0 27.2-5.1-27.7-5.1 1.5 2.1 0.8 4.9 4.6 27.0 42.1 0.8 Compared with normal serum *P<0.05;**P<0.01.测定结果的偏高会导致假阳性的产生，严重影响了药物毒性的判断。故溶血标本AST的测定结果不能用于统计结果分析，若出现溶血标本，应当在报告中注明。

3.2 谷丙转氨酶(ALT)细胞内ALT含量比血浆中高约7倍，因此溶血后ALT含量测定的增高主要来源于细胞内ALT的大量释放。可见与AST相比，ALT受溶血影响轻些，故对样品的要求低一些，如果标本溶血不很严重，可以参与统计资料的处理，但在分析结果时要注意考虑溶血的影响。

3.3 总胆红素(TBIL)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是用重氮法测定总胆红素的，最后生成红紫色的偶氮胆红素，主要在波长为540nm～560nm处有光吸收。而血红蛋白在波长540nm～550nm处有光吸收[2]，恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后红细胞破裂时大量血红蛋白进入血清，势必造成总胆红素测定值的升高，是总胆红素测定的正向干扰因素。此外，由于血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素，溶血对重氮法测定胆红素同时存在负向干扰，使测定结果偏低，但该作用较轻微[3]，因此溶血后由于血红蛋白对测定结果的干扰，胆红素的测定结果往往偏高。

3.4 钾（K+）

钾是细胞内液的主要阳离子，约98％的钾存于细胞内，红细胞内钾浓度约为105mmol/L，而血清中仅有3.5 mmol/L～5.4 mmol/L[4]。因此溶血造成血清钾测定的增高主要来源于红细胞内中钾的大量释放。有报道表明血清游离血红蛋白在 2.5～2.8g / L时血清钾增高14%～16%，血清游离血红蛋白达 6.6g / L时血清钾增高可达41%[5]，因此在分析血清钾的结果时引起注意。

3.5 肌酐（Cre）

中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用苦味酸法测定Cre的。而苦味酸特异性较差，易受其它还原性物质影响，主要是维生素C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰[4]。假肌酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应，导致测定值发生偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多，血清中较少，故溶血后红细胞中假肌酐物质的释放是造成测定值发生偏差的主要原因。

3.6 血清葡萄糖(GLU)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用葡萄糖氧化酶法测定GLU，葡萄糖氧化酶法的特异性较强，干扰物较少，而过氧化氢酶易受到其它物的影响，如维生素C、谷胱苷肽均因能竞争H2O2而导致负偏差[4]。3.7碱性磷酸酶(ALP)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用连续监测法测定ALP的。连续监测法测定ALP是通过在405nm处连续监测生成的黄色对硝基酚氧离子，根据单位时间内吸光度的增加来算出ALP的活力，因此排除了血红蛋白在波长540nm～550nm处光吸收的影响。故溶血样本ALP测定结果降低的原因可能是红细胞破裂逸出了抑制ALP或底物反应的物质。

3.8 氯（Cl-）

血浆中氯约为103mmol/L，红细胞中氯约为49~54mmol/L。溶血会导致细胞内的氯离子转移到血清中，从而引起了血清氯离子测定值得升高。[4] 3.9溶血后对测定结果无明显影响的项目主要包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、Ca++、Mg++和Na+。溶血后测定结果与未溶血时比较无统计学差异（P>0.05）。可能原因是这些项目的测定方法受溶血影响不大，因此在新药的安全评价时可以列入统计资料中进行统计分析和结果判定。

3.10 溶血原因及其防止

高亚英[6]等认为溶血的原因主要是操作不当和抽血器具不合格造成的。结合我们日常工作分析造成溶血的可能原因主要包括：（1）由于抽血困难，采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等而发生溶血。（2）注射器和针头连接不紧，采血时空气进入，在抽取的血标本中混有泡沫，这种混有泡沫的血标本，放置一定时间后泡沫破裂或迅速干燥，造成血细胞破坏而发生溶血。（3）血标本在运输过程中过度振荡或贮存不当。（4）不合格的塑料制品会因聚合不完全而具有毒性，这种毒性可造成溶血；（5）试管质量粗糙。

因此，在采血、检验过程中必须注意细心操作，并注意注射器、针头和试管的质量。样本发生溶血后血清谷草转氨酶(AST)不能参与统计结果的处理，其他指标在参与统计结果处理时，注意分析溶血的影响，并在数据中加以标注。

参考文献

1.Thomas L, Haemolysis as influence and interference factor.The Journal of The International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine[J]，1999,13(4)２． 张敏，蒲彦武，阚玫． 不同溶血度下２０项生化试验结果分析． 西北国防医学杂志[J]，1997,18(4):273-274.3.邱谷．溶血对重氮法血清胆红素测定的干扰分析．上海医学检验杂志[J]，2000,15(6):350.4.李影林． 中华医学检验全书（上卷）[M] ． 北京：人民卫生出版社，1997,641-860.