中科大生物化学与分子生物学实验原理2015试题

第一篇：中科大生物化学与分子生物学实验原理2015试题

简答题

1.用数学术语描述荧光定量PCR的定量依据 2.等速电泳的原理以及定性定量

3.在SDS-PAGE中，请给出浓缩胶，分离胶，上样缓冲液，电泳缓冲液的PH值（4分）并说明原因

4.用SDS-PAGE对某样品中的目的蛋白进行分离时，发现此蛋白大小符合目的蛋白的大小，但是却并不能确定是否为目的蛋白，因此需要进一步地对此种蛋白进行液相质谱分析。请简述实验步骤

5.由于GCMS具有高灵敏性，在加入溶剂时都能够检测到峰型。那么应该如何设计GCMS实验，检测某种样品中是否含有需要的蛋白，请设计实验 6.酵母双杂交的实验原理以及优缺点 7.电渗流形成原理以及影响因素

8.简述原核限制修饰系统以及二型限制性内切酶。9.简述蛋白质纯化的基本策略

10.简述体外定向进化技术的核心技术环节

11.PET系统成为大肠杆菌中医院蛋白表达首选载体的原因

12.以CH4为例，请简要说明质谱中4个分子量的名称以及含义

以上是全部2015-2016简答，选择回忆不出来

第二篇：生物化学与分子生物学

生物化学与分子生物学

江西农业大学生物化学与分子生物学专业于2003年获得硕士学位授予权，2004年开始招收硕士研究生，是江西农业大学的重点建设和优势学科之一。

硕士点有导师11人，其中博士生导师2人，教授7人，具有博士学位的9人，是一支以博士、硕士学历教师为主要骨干，职称和年龄结构合理的师资队伍。学科以科技部、农业部、江西省动物生物技术重点实验室和生物化学与分子生物学实验室为依托，拥有较为先进和完备的现代仪器设备，承担了一批国家级重点项目和省级重点科研项目，研究经费达1000余万元，主要以生物大分子如DNA、RNA、蛋白质（酶）、抗体、新活性物质为对象，进行结构与功能、代谢、生物信息的研究方向。培养熟练掌握生物化学与分子生物学，以及生物学相关学科的基本理论和基础知识，受到相关专业技能的训练，具备进一步攻读博士研究生的良好潜质，同时具备较扎实理论知识、实践技能和创新意识的高级专业人才。8年来共培养6届毕业生88人，发表论文共160篇。其中SCI、EI、ISTP收录14篇。在植物生物化学、动物生物化学、动物功能基因组学、生殖生物化学、植物资源利用等研究方向形成了自身的优势与特色。

第三篇：生物化学与分子生物学课程实验的体会

生物化学与分子生物学课程实验的体会

井冈山大学医学院口腔10（本1）班张佳

每次实验课前，老师都要求我们做好每一次实验课前的理论原理预习,这样老师可以在尽可能短的时间内说明实验操作的注意事项,使我们尽快了解和掌握实验的原理,操作过程,顺利地完成实验操作,以期达到更好的实践效果。在实验操作的选择上,虽然实验课时有限，老师还是尽可能让我们触及各种不同实验,以及尽可能系统地实验操作，本学期我们共进行了八个实验。在实行实验分组的过程中,不同的实验以1-2人为一组,否则较大的实验组难以达到人人动手操作的目的要求。

每一次实验课程都要及时总结并交实验报告,对我们在实验过程中碰到的问题及时发现,及时解决,对一些共性的问题，老师会重新强调,并且在后续的实验课程中给予针对性地预防；还有一些个性问题，老师也会讲解给部分同学,以免造成一误再误。学生通过总结实验结果、撰写实验报告，在师生之间进行实验总结、交流和报告，可以培养学生分析实验现象、总结实验结果和撰写实验论文的能力。这对于我们的科研素养的养成和创新能力的培养是有着重要的作用。老师要求我们在实验这个强调动手能力的课程上更需要打好坚实的基础,建立严谨的实验作风,这将对我们将来踏入工作岗位起到重要的作用。

我认为实验课在课程学习环节中占有特殊的地位，它可以使我们加深对所学课程基本理论和基本概念的理解，训练实验技能，培养我 1

们分析问题、解决问题的能力和严谨求实的科学态度。如何培养具有一流素质和创造能力的人才，相信也是实验老师面临的巨大挑战。纵观以往中学的实验，普遍存在着一些问题，如在当前的应试制度下，学生注重理论学习，轻视实验学习思想还很严重；实验教学内容重复、实验教学方法单

一、实验教学的水平和装备条件差异很大的问题依然存在。

生物化学与分子生物学是医学专业基础课之一，涉及医学的方方面面，也是一门实验学科，实验是理论的来源，是理论的基础，实验先于理论，也可验证理论。实验学习有着不可替代的地位，实验的目的不仅要加深对理论知识的理解，而且要利于实验技能、研究、分析和解决问题的综合能力的培养。生物化学与分子生物学实验是生物化学与分子生物学学习中的重要环节，学好实验，不仅使我加深理解生物化学的基础知识，而且还培养我严肃认真的科学态度，掌握分析、研究、判断、推理的科学方法及培养各种能力的重要手段。

分子生物学实验具有完整性和连贯性,但是我们的上课时间分散,如果能够有效地集中时间,完成综合性的实验,将对学生整体理解实验设计思路,全程地跟踪和了解实验具体过程有很大的帮助，针对这一问题，我们老师将一些实验列在一起进行实验。我们这个学年总共有八个实验：生物化学基本操作技术，溴甲酚绿法测定检验蛋白质，血清ALT标准曲线制作，血清ALT活性测定，血清蛋白乙酸纤维膜电泳，血清葡萄糖的测定，兔全血DNA提取，DNA琼脂糖凝胶电泳。

我最得意的实验：血清蛋白乙酸纤维膜电泳实验，一个混合的蛋

白质样品由于各蛋白质的等电点不同，在相同的pH溶液中所带的电荷性质不同，电荷的数目不同，在电场中各种蛋白质泳动的速度和方向也不相同。从而使蛋白质混合样分离开来。溶液的pH值：溶液的pH值决定了带电颗粒的解离程度，也决定了物质所带净电的多少。对蛋白质和氨基酸等两性电解质而言，pH值离等电点越远，颗粒所带净电荷越多，泳动速度也越快，反之越慢。因此，分离某一蛋白质混合物时，应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差异的pH值，以利于各种蛋白质的分离。为使电泳过程中溶液的pH值恒定，必须使用缓冲溶液。本次实验使用的是巴比妥-巴比妥钠缓冲溶液。

我认为，综合性实验不应仅局限于实验内容的综合，还应包括实验内容、实验方法、实验手段的综合。因此可以把综合性实验理解为实验内容涉及相关的综合知识或运用综合的实验方法、实验手段、对学生的知识、能力、素质形成综合的学习与培养的实验。综合性实验的特征应体现在:实验内容的复合性、实验方法的多元性、实验手段的多样性、人才培养的综合性。它不仅让学生学习知识，掌握实验技能,而且还要培养和提高学生综合应用实验方法和技能以及思考问题和解决问题的能力。

在此，我提议老师可以提供给学生小题目，学生自己查阅文献资料，自己制定方案，自行开展实验，在必要的情况下，可以请教老师，完成实验可能有几种不同方法，学生通过分析、比较，选择自己认为是可行的，合适的方案进行实验。我觉得这样从实验中思考问题要阅读资料以理论和新知识来讨论，使理论学习与实践学习有明显的研究

性。开设这样综合性、设计性实验，有助于提高和培养学生综合能力和培养学生创新能力。在实验过程中，学生的操作可以不局限于实验指导中规定的操作内容，而是将一部分试剂配制与实验内容相结合，使学生在实验技能方面得到多层次的训练。

第四篇：生物化学与分子生物学专业

生物化学与分子生物学专业

专业简介

学科：理学

门类：生物科学类

专业名称：生物化学与分子生物学专业

生物化学与分子生物学是当前自然科学中发展最快、实践影响最大的学科之一。生物化学是研究生物有机体的化学组成和生命过程中化学变化的科学，属于生命科学的基础和前沿学科；分子生物学是从分子水平上研究生命现象，它与生物化学密切相关，正以惊人的速度发展，已成为当前生物学发展的热点。本专业研究的主要内容包括：生物大分子的结构与功能，遗传信息的传递及表达，代谢过程及其调控，生物资源活性成分的分离纯化，生化与分子生物学技术的原理及应用等。这些研究将为相关学科的发展提供理论和方法，并在工、农、医等领域有广泛的实践意义。

该专业的特点是侧重于从分子和微观水平来认识和理解生命科学现象，学习从分子和微观水平上改造生物和提取制备新型医药、食品、酶制剂、生物活性物质等生物产品的方法。

专业信息

培养目标：本专业重视学生实践能力的培养，使学生掌握最新的理论知识和研究方法，力求使学生具有良好的科学素养和创新能力、具有从事科研、教学、生产、管理等工作的能力。

培养要求：本专业要求学生全面、扎实地学习数、理、化、外语、计算机知识，系统地学习生物化学、细胞生物学、普通遗传学、微生物学、分子生物学等现代生命科学基础课程，同时强化基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、生物制药、免疫学等知识和技能的训练。

修业年限：以4年制为基础，实行三至六年的弹性学制。

授予学位：理学学士学位。

主干学科：免疫学及实验、基因工程、酶工程、细胞工程及实验、发酵工程及实验、生物制药学、生物技术大实验。

主要课程：植物生物学及实验、动物生物学及实验、生物化学及实验、微生物学及实验、普通遗传学及实验、细胞生物学及实验、分子生物学。

专业就业状况

毕业生能胜任理、工、农、医、环境等领域的研究、开发、管理以及教学研究工作。毕业生可报考相关学科高层次研究生继续深造，优秀学生可保送进入研究生阶段学习。

院校分布(部分)

辽宁大学。

第五篇：《生物化学与分子生物学》教学大纲

分子生物学（Molecular Biology）

（50学时）

一、前言

本课程面向生物技术专业和生物科学专业，学时50，学分3，属于专业必修课，先修课程为生物化学。

二、课程的性质、地位和任务：

本课程首先介绍分子生物学的含义,它在生命科学中的位置、发展现状及展望以及基因组织包括DNA结构、复制、突变、修复和重组。同时兼顾学科发展动向,着重涉及当今分子生物学应用技术即分子克隆工具酶、电泳技术、载体、DNA及RNA制备、构建DNA文库、遗传转化、基因表达、PCR、RFLP、RAPD,还介绍了蛋白质合成及分析。旨在使研究生了解现代分子生物学理论的新进展并为相关学科从分子水平上阐明问题提供知识和技术。

三、教学基本要求和方法：

通过对本课程的学习，要求学生掌握基因概念在分子水平上的发展与演变、基因的分子结构和特点、基因的复制、基因表达（在转录、翻译水平）的基本原理、基因表达调控的基本模式、基因发生突变与交换及DNA遗传多型性检测的分子生物学原理。

四、授课教材及主要参考书目 教材：

P.C.Turner,A.G.McLennan,A.D.Bates&M.R.H.White 1999 分子生物学（Molecular Biology）科学出版社

参考书目：

黄翠芬 1987 遗传工程理论和方法 科学出版社 盛祖嘉等 1988 分子遗传学 复旦大学出版社 齐义鹏 1989 基因工程原理和方法 武汉大学出版社 吴乃虎 1991 基因工程原理 高等教育出版社 1998 基因工程原理(第二版)科学出版社 金冬雁 黎孟枫等译 1992 分子克隆实验指南 科学出版社 谢友菊 1992 遗传工程概论 北京农业大学出版社 阎隆飞、张玉麟 1993 分子生物学 北京农业大学出版社 阎隆飞、张玉麟 1997 分子生物学(第二版)北京农业大学出版社 徐洵、刘震乾 1993 DNA重组技术 科学出版社 卢圣栋 1993 现代分子生物学实验技术 高等教育出版社 李德葆 徐平1994 重组DNA原理和方法 淅江科学技术出版社 孙志贤 1995 现代生物化学理论与研究技术 军事医学科学出版社 林万明等 1995 PCR技术操作和应用指南 人民军医出版社 金冬雁 1996 英汉分子生物学与生物工程词汇 科学出版社 1998 基因及其操作原理 武汉大学出版社 金冬雁等 1996 核酸和蛋白的化学合成与序列分析 科学出版社 夏其昌 1997 蛋白质化学研究技术与进展 科学出版社 科学出版社名词室 1997 英汉生物学词汇（第二版）科学出版社 朱玉贤等 1997 现代分子生物学 高等教育出版社 瞿礼嘉等 1998 现代生物技术导论 高等教育出版社 Robert.F.Weaver 2000 分子生物学(in English)科学出版社 Sambrook J.等 1982 Molecular Cloning;A Laboratiry Manual 1989(2nd edition)Cold Spring Harbor Laboratory Press Turner等 1999 分子生物学(in English)科学出版社

五、教学内容及学时分配： 第一章 细胞与大分子（2学时）

1、目的要求：掌握细胞和大分子的分类及用以分析的一些方法。

2、要点： 第一节 细胞分类

1.真细菌 2.古细菌 3.真核生物 4.分化 第二节 亚细胞器

1.细胞核 2.线粒体与叶绿体 3.内质网 4.微体 5.细胞器的分离 第三节 生物大分子

1.蛋白质和核酸 2.多糖 3.脂类 4.复杂大分子 第四节 大分子的组装

1.蛋白质复合体 2.核蛋白 3.膜

4.非共价相互作用

第二章 原核与真核生物的染色体结构（2学时）

1、目的要求：掌握DNA如何整合进原核和真核生物复杂的基因组中。

2、要点

第一节 原核生物的染色体结构

1.大肠杆菌染色体 2.DNA结构域 3.基因组超螺旋 4.DNA结合蛋白 第二节 染色质结构

1.染色质 2.组蛋白 3.核小体 4.H1的功能 5.连接DNA 6.30nm纤丝 7.高级结构

第三节 真核生物的染色体结构

1.有丝分裂染色体 2.着丝粒 3.端粒 4.间期染色体 5.异染色质 6.常染色质 7.DNaseⅠ超敏性 8.CpG甲基化 9.组蛋白变异体和修饰 第四节 基因组复杂度

1.非编码DNA 2.复性动力学 3.单一序列DNA 4.串联基因簇 5.分散重复DNA 6.卫星DNA 7.遗传多态性 第五节 遗传信息流

1.中心法则 2.原核基因表达 3.真核基因表达

第三章 DNA复制（4学时）

1、目的要求：重点掌握DNA复制的过程，DNA复制在原核生物与真核生物中的区别。

2、要点：

第一节 DNA复制概述

1.半保留机制

2.复制子、复制起点与终点 3.半不连续复制 4.RNA引导 第二节 细菌的DNA复制

1.实验系统 2.起始 3.解旋 4.延伸 5.终止与分离 第三节 细胞周期

1.细胞周期 2.细胞周期4个时期 3.检验点及其调控

4.细胞周期蛋白和依赖于细胞周期蛋白的激酶 5.E2F和RB的调控

6.细胞周期的激活、抑制与癌症 第四节 真核生物的DNA复制

1.实验系统 2.起始点与起始 3.复制叉 4.核基质 5.端粒的复制

第四章 DNA损伤、修复与重组（4学时）

1、目的要求：了解导致DNA损伤的因素，掌握基因诱变、DNA重组和DNA修复的概念和方法。

2、要点： 第一节 诱变

1.突变 2.复制忠实性 3.物理诱变剂 4.化学诱变剂 5.直接诱变 6.间接诱变 第二节 DNA损伤

1.DNA损伤 2.氧化性损伤 3.烷基化 4.聚化加合物 第三节 DNA修复

1.光复活 2.烷基转移酶 3.切除修复 4.错配修复 5.遗传性的修复缺陷 第四节 重组

1.同源重组 2.位点特异性重组 3.转座作用

第五章 基因操作（4学时）

1、目的要求：掌握现有的对DNA进行操作的技术，学习用简单的DNA克隆策略图说明问题。

2、要点：

第一节 DNA克隆概述

1.DNA克隆 2.宿主和载体 3.亚克隆 4.DNA文库 5.筛选文库 6.克隆分析 第二节 质粒DNA的制备

1.载体质粒 2.质粒的小量制备 3.碱裂解 4.酚抽提 5.乙醇沉淀 6.氯化铯梯度 第三节 限制酶与电泳

1.限制性内切核酸酶 2.识别序列 3.黏末端 4.限制性酶解 5.琼脂糖凝胶电泳 6.DNA片段的分离

第四节 连接、转化与重组体分析

1.DNA连接 2.重组DNA分子 3.碱性磷酸酶 4.转化 5.筛选 6.转化率 7.筛选转化子 8.转化子的增殖与保存 9.凝胶分析 10.插入片段定向

第六章 克隆载体（4学时）

1、目的要求：了解常用的适合于各种用途的克隆载体。

2、要点：

第一节 质粒载体的设计

1.连接产物 2.双抗生素抗性 3.蓝—白颜色筛选 4.多克隆位点 5.已克隆插入片段的转录 6.表达载体 第二节 噬菌体载体

1.λ噬菌体 2.λ置换型载体 3.包装与侵染 4.噬菌斑的形成 5.λ溶原体 6.M13噬菌体载体 7.克隆到M13 8.质粒—M13杂合载体 第三节 黏粒、YAC与BAC 1.大片段DNA的克隆 2.黏粒载体 3.YAC载体

4.用酿酒酵母的筛选 5.BAC载体 第四节 真核生物载体

1.克隆到真核生物 2.转染真核细胞 3.穿梭载体 4.酵母附加型质粒 5.根癌农杆菌Ti质粒 6.杆状病毒 7.哺乳动物病毒载体 8.直接基因转移

第七章 基因文库与筛选（4学时）

1、目的要求：介绍用DNA文库来分离筛选新的基因序列的过程与方法。

2、要点：

第一节 基因组文库

1.具代表性的基因文库 2.文库大小 3.基因组DNA 4.载体 第二节 cDNA文库

1.mRNA分离、纯化与分级分离 2.cDNA的合成 3.cDNA末端的处理 4.与载体的连接 第三节 筛选流程

1.筛选 2.菌落及噬菌斑杂交 3.表达筛选 4.杂交扣留与释放 5.染色体步移

第八章 克隆DNA的分析与应用（2学时）

1、目的要求：了解涉及DNA测序和克隆序列分析方面的一些更加复杂和详细的方法，熟练掌握PCR技术的原理和过程。

2、要点：

第一节 克隆的鉴定

1.鉴定 2.限制图谱 3.部分酶解 4.核酸标记 5.DNA和RNA杂交 第二节 核酸测序

1.DNA测序 2.RNA测序 3.序列数据库 4.序列分析 5.基因组测序计划 第三节 聚合酶链式反应

1.PCR 2.PCR循环 3.模板 4.引物 5.酶

6.PCR的条件优化 7.PCR派生技术 第四节 克隆基因的组构

1.组构

2.在基因组DNA上定位cDNA 3.S1核酸酶作图 4.引物延伸 5.凝胶阻滞 6.DNaseⅠ足迹法 7.报道基因 第五节 克隆基因的诱变

1.缺失突变 2.定点诱变 3.PCR诱变 第六节 克隆技术的应用

1.应用 2.重组蛋白 3.遗传修饰生物体 4.DNA指纹分析 5.医学诊断 6.基因治疗

第九章

原核生物的转录（3学时）

1、目的要求：熟练掌握原核生物基因转录的原理、过程。

2、要点：

第一节 转录的基本原则

1.转录概述 2.起始 3.延伸 4.终止

第二节 大肠杆菌RNA聚合酶

1.大肠杆菌RNA聚合酶 2.α亚基 3.β亚基 4.β’亚基 5.σ因子 第三节 大肠杆菌σ70启动子

1.启动子序列 2.启动子大小 3.-10序列 4.-35序列 5.转录起始点 6.启动子效率

第四节 转录的起始、延伸与终止

1.启动子结合 2.DNA解旋 3.RNA链起始点 4.RNA链延伸 5.RNA链终止 6.依赖ρ的转录终止

第十章

原核生物的转录调控（3学时）

1、目的要求：熟练掌握一些被细菌用来调控特定基因表达的精细机制。

2、要点：

第一节 乳糖操纵子

1.操纵子 2.乳糖操纵子 3.乳糖阻抑物 4.诱导 5.cAMP受体蛋白 第二节 色氨酸操纵子

1.色氨酸操纵子 2.色氨酸阻抑物 3.弱化子 4.前导RNA结构 5.前导肽 6.弱化作用 7.弱化的重要性

第三节 不同σ因子对转录的调节

1.σ因子 2.启动子识别 3.热休克

4.枯草杆菌的孢子形成 5.噬菌体σ因子

第十一章

真核生物的转录（2学时）

1、目的要求：熟练掌握真核生物基因转录的基本原理和过程。

2、要点：

第一节 三种RNA聚合酶：性质与功能

1.真核生物RNA聚合酶 2.RNA聚合酶亚基 3.真核生物RNA聚合酶的活性 4.RNA聚合酶Ⅱ的CTD 第二节 RNA聚合酶Ⅰ基因：核糖体重复

1.核糖体RNA基因 2.核仁的作用 3.RNA聚合酶Ⅰ启动子 4.上游结合因子 5.选择因子1 6.TBP与TAF1 7.其他rRNA基因

第三节 RNA聚合酶Ⅲ基因：5S基因与tRNA基因的转录

1.RNA聚合酶Ⅲ 2.tRNA基因 3.5S rRNA基因

4.可变的RNA聚合酶Ⅲ启动子 5.RNA聚合酶Ⅲ的终止

第四节 RNA聚合酶Ⅱ基因：启动子与增强子

1.RNA聚合酶Ⅱ 2.启动子 3.上游调控元件 4.增强子

第五节 通用转录因子与RNA聚合酶Ⅱ的起始

1.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子 2.TFⅡD 3.TBP 4.TFⅡA 5.TFⅡB与RNA酶的结合 6.RNA聚合酶进入之后的结合因子 7.TFⅡH作用下的CTD磷酸化 8.起始转录复合体

第十二章

真核生物的转录调控（2学时）

1、目的要求：掌握一些重要的真核细胞基因的转录调控的例子。

2、要点：

第一节 真核生物的转录因子

1.转录因子结构域结构 2.DNA结合结构域 3.二聚体结构域 4.转录激活结构域 5.阻抑物结构域 6.转录调控的对象 第二节 转录调控举例

1.组成性转录：SP1 2.激素调控：类固醇激素受体 3.磷酸化调控：STAT蛋白 4.转录延伸：HIV Tat 5.细胞决定：myoD 6.胚胎发育：同源域蛋白

第十三章 RNA加工与核糖核蛋白复合体（4学时）

1、目的要求：熟练掌握从新生RNA到成熟RNA分子的加工过程。

2、要点：

第一节 rRNA加工与核糖体

1.RNA的加工类型 2.原核生物的rRNA加工 3.真核生物的rRNA加工 4.核糖核蛋白复合体及其研究 5.原核生物的核糖体 6.真核生物的核糖体

第二节 tRNA的加工、RNA酶P和核酶

1.原核生物的tRNA加工 2.真核生物的tRNA加工 3.核糖核酸酶P 4.核酶

第三节 mRNA加工、hnRNP和snRNP 1.mRNA的加工 2.hnRNP 3.snRNP颗粒 4.5’端加帽 5.3’端剪切及加尾 6.剪接

7.前mRNA的甲基化 第四节 可变mRNA加工

1.可变加工 2.可变poly(A)位点 3.可变剪接 4.RNA编辑

第十四章

遗传密码与tRNA（2学时）

1、目的要求：掌握遗传密码的特点以及tRNA在翻译过程中的作用。

2、要点： 第一节 遗传密码

1.特性 2.破译 3.特征 4.突变的效应 5.通用性 6.可读框 7.重叠基因

第二节 tRNA的结构与功能

1.tRNA的一级结构 2.tRNA的二级结构 3.tRNA的三级结构 4.tRNA功能 5.tRNA的氨酰化 6.氨酰tRNA合成酶 7.校正

第十五章

蛋白质合成（4学时）

1、目的要求：熟练掌握RNA通过遗传密码翻译成成熟蛋白质序列的过程。

2、要点：

第一节 蛋白质合成概述

1.密码子与反密码子的相互作用 2.摆动现象 3.核糖体结合位点 4.多聚核糖体 5.起始tRNA 第二节 蛋白质合成机制 1.基本过程 2.起始 3.延伸 4.终止

第三节 真核生物蛋白质合成的起始

1.基本过程 2.扫描 3.起始 4.延伸 5.终止

第四节 翻译调控与翻译后加工

1.翻译调控 2.多蛋白 3.蛋白质定位 4.蛋白质修饰 5.蛋白质降解

第十六章

噬菌体与真核生物病毒（2学时）

1、目的要求：掌握重要的原核生物和真核生物病毒，了解它们对我们理解分子信息处理所作的贡献。

2、要点： 第一节 病毒简介

1.病毒 2.病毒基因组 3.复制策略 4.病毒毒性 第二节 噬菌体

1.一般特性

2.裂解性与溶源性侵染 3.噬菌体M13 4.λ噬菌体 5.转座噬菌体 第三节 DNA病毒

1.DNA病毒基因组：复制与转录 2.较小DNA病毒 3.较大DNA病毒 4.单纯疱疹病毒-1 第四节 RNA病毒

1.RNA病毒基因组的一般特性 2.病毒的反转录 3.反转录病毒 4.致癌性反转录病毒

5.反转录病毒基因组结构及其表达 6.反转录病毒的突变率

第十七章

肿瘤病毒与癌基因（2学时）

1、目的要求：从病毒的研究的进展以及分子生物学其他领域的知识累积了解癌症的发生机制。

2、要点：

第一节 肿瘤病毒中的癌基因

1.癌症 2.癌基因

3.致癌性反转录病毒 4.癌基因的分离 第二节 癌基因的分类

1.癌基因与生长因子 2.核癌基因 3.癌基因间的协同作用 第三节 肿瘤抑制基因

1.概述

2.肿瘤抑制基因存在的证据 3.RB1基因 4.P53基因 第四节 凋亡

1.凋亡

2.损伤或危险性细胞的清除 3.凋亡过程中细胞变化 4.线虫中的凋亡作用 5.哺乳动物中的凋亡 6.凋亡在疾病和癌症中的作用福建农林大学生物科学专业

本科生《生物化学与分子生物学实验》教学大纲

80学时 3学分

一、课程的性质和任务

分子生物学和生物工程学是两门新兴的学科，无论对基础理论研究，还是生产实践都将产生巨大的影响。生物化学与分子生物学是这两门学科的重要基础，是一门实践性很强的实验课程。掌握和应用生物化学与分子生物学实验技能，是学好这一课程的必要条件。

生物化学与分子生物学实验技术不仅是生物化学教学重要的组成部分，而且在培养学生分析和解决问题的能力，严谨的科学态度和独立工作的能力方面，有着不可替代的作用。

针对学生的培养方向，本课程以培养学生掌握生物技术与分子生物学研究的基础实验技能为主要目标，力图最大限度地利用我校现有的实验条件，使学生通过本课程的学习和实践，接触和掌握从事生物技术研究所必要的实验手段。通过有限的实验室实践，涵盖生物化学与分子生物学各个方面的实验内容，以点带面，突出重点，促进学生对生物化学与分子生物学课程学习内容的理解和掌握。

二、课程教学的基本要求

本课程的内容以蛋白质（含酶）、核酸及脂类的提取、分离、纯化及鉴定为重点，兼及这些内容的定性和基团鉴定，以及糖类．维生素的实验。本课程的实验安排考虑到与化学基础和后继的专业实验的衔接，尽量避免重复。在实验项目安排方面，主要涉及提取、透析、冻干、层析、电泳、分光、离心、浓缩、PCR、分子杂交和基因表达等基础实验技能的训练。在时间安排上，针对本科生的学习特点，尽量安排每一个实验可以在２－３小时内完成，在课程结束前，适当安排少量综合实验，以培养学生应用实验手段的综合能力。

本课程教学总时数为8０学时，实验技术原理采取以学生自习为主，课堂进行提要式的提示讲解和必要的答疑的方式，使学生掌握实验方法的基本原理和应用范围。本课程强调实验技能训练的重要性，主要课时安排学生实验，以便尽量提高学时利用率。为了节省基础设施投资，提高仪器利用率，本课程采取开放式集中实验的方式，要求学生在实施实验之前，必须做好预习准备，拟好实验方案，经任课教师认可后，方可进入实验室做实验。课堂讲授与实验课的比例为１：10。

我们在课程成绩评定上，不以一次考试定音的传统考试方式，而强调平时和考试并重，基础理论和实验技能相结合的综合评定方式（理论３０％，实验技能考试３０％，平时观察和记录４０％）。

三、课程教学大纲及学时分配 1 绪论（3学时）常用生物化学实验技术及原理（自学）2.1 样品处理 2.1.1 透析

2.1.2 薄膜浓缩与冷冻干燥 2.2 层析技术 2.3 电泳技术 2.4 光谱技术 2.5 离心技术 2.6 PCR技术 3 学生实验

3.1 氨基酸的分离鉴定───纸层析法（3学时）

了解层析技术的一般原理、分类及应用范围，重点掌握纸层层析法的原理及操作技术，用以分离游离氨基酸组分。3.2 多糖的薄层层析分离（5学时）

了解薄层层析的一般原理，掌握多糖的水解方法和硅胶G薄层层析的基本技术及其在可溶性糖分离鉴定中的应用。

3.3 琼脂糖凝胶柱层析测定蛋白质分子量及分子量分布（8学时）

通过采用琼脂糖凝胶柱层析测定蛋白质分子量及分子量分布，学习和掌握凝胶柱层析法的工作原理和基本操作技术。

3.4 大蒜细胞ＳＯＤ的提取与分离（6学时）

通过大蒜细胞SOD的提取与分离，学习和掌握蛋白质和酶的提取与分离的基本原理和操作方法。

3.5 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定蛋白质的相对分子量（8学时）

通过利用SDS-PAGE测定蛋白质分子量实验，掌握垂直板型聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和操作方法，以及SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理和方法。3.6 酵母ＲＮＡ的提取与分离（8学时）

通过采用苯酚溶液提取法提取酵母RNA，采用地衣酚显色法测定RNA含量，学习和掌握RNA的分离与测定的基本原理和技术。3.7 植物ＤＮＡ的提取与测定（8学时）

通过采用SDS提取法提取花椰菜DNA，采用二苯胺显色法测定DNA含量，采用琼 脂糖凝胶电泳鉴定DNA，学习和掌握RNA的分离与测定的基本原理和技术。3.8 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（3学时）

通过本实验，掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法和技术。3.9 质粒DNA的提取及酶切（8学时）

通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。3.10

DNA重组（2学时）

通过本实验学会重组DNA连接以及鉴定重组子的方法。3.11

DNA序列测定——银染色法（8学时）

通过本实验，掌握银染测序法。3.12 PCR基因扩增（6学时）

通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。4 实验技能考试（2学时）和实验基础理论考试（2学时）

四、参考文献

１

张立名，王贤舜： 现代生物化学分析原理，中国科学技术大学出版社，１９９１年４月第一版。

２

王重庆等： 高级生物化学实验教程，北京大学出版社，１９９４年６月第一版。３

张龙翔等：生化实验方法和技术（第二版），高等教育出版社，１９９７年７月第二版。

４

赵亚华：生物化学实验技术教程，华南理工大学出版社，２０００年８月第一版。５

欧阳平凯：生物分离原理及技术，化学工业出版社，１９９９年２月第一版。６ 魏群：分子生物学实验指导，高等教育出版社，１９９９年１２月第一版。７ 杨安钢等：生物化学与分子生物学实验技术，高等教育出版社，２００１年２月第一版。

８ 郭勇：现代生化技术，华南理工大学出版社，１９９６年８月第一版。