第一篇：Agilent1200 高效液相色谱仪工作站学习总结
Agilent1200 高效液相色谱仪工作站学习总结
开首语 本人在2008年 本人在2008年1月8日至1月11日参加广州 日至1 11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。
硬件篇 安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。
Agilent 1200HPLC系统堆叠方式
脱气机 安捷伦1200系列在线脱气机有，微量真空 脱气机G1379B、标准真空脱气机G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允许气体分 子通过，液体分子无法通过。A型用的是微渗 管，B型用的是滤膜。流路A型是左进右出，而 B型为下进上出，本科室使用的为A型G1322A。使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间 的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费 用。
真空脱气机脱气原理
泵 安捷伦1200系列泵有： 单元泵：G1310A、四元泵：G1311A、二元泵：G1312A、二元泵SL型：G1212B。单独一个泵腔 泵腔无法满足溶剂传输系统的要 泵腔 求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。
单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并 联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵 由于两个泵的相位不同，可以补偿流量脉冲，但由于单向阀的数量增多，所以容易造成泄漏，增加了维护使用的难度。串连柱塞泵左泵腔的 活塞运动速度为右泵腔活塞的2倍，因此，相同 时间内，左泵提供的流量为右泵的两倍，左泵 提供的溶剂一半直接供给系统，另一半被右泵 吸入，稍后供给液相系统，减少了单向阀的用 量，可以使用压缩因子补偿。
四元泵，其实就是比单元泵多了四元比例阀。由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元 比例阀外，还要更换主板。需要注意的是，当 使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到 四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面 的通道上。如果经常使用盐溶液，建议定期用 水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐 沉淀。
四元泵的工作原理
二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗
装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从 0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态 混合器，使流动相混合更加均匀；如果配置
溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂，类似四元比例阀，但并不完全一样，只能同时 混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高，而且由于为高压混合，产生的气泡也更少，所 以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵，流速稳定性相对较差，低压混合容易产生气泡，在实验中常会遇到这样的问题，多元
混合中出现流动相不稳定的现象，特别是流动 相配比较低的如小于1%，其多元混合效果难以 达到我们的要求，造成保留时间漂移，甚至得 不到我们预期的色谱峰。明白四元泵的低压混 合的道理，实际操作中我们发现问题时，有助 于我们对原因的分析。必要时泵可以拆御，更换密封垫及滤芯。对容易出故障部位及处理方法，比如宝石
活塞杆是不能超声的部件，泵头密封垫要成对 更换，实验室中至少应备有一付 号泵头密封 室中至少应备有一付4号泵头密封 室中至少应备有一付 垫，部件号为：5663-6589（用于反相色谱）； 部件号为：（用于反相色谱）； 0905-1420（用于正相色谱）。同时实验室应备（用于正相色谱）。同时实验室应备）。过滤芯，有5-10个PTFE过滤芯，以备日常所需。判断方 个 过滤芯 以备日常所需。法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，流速 5m
l/min，系统压力大于10bar就应更换过滤白，系统压力大于 就应更换过滤白 头了。头了。
二元泵的工作原理
进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、高性能进样器G1367A、高性能进样器SL型G1367B、手动进样器G1328B。自动进样器的特殊功能，洗针功能可以把 样品残留降低到最小限度；多次吸液用于进样 量大于100μl的情况；程序进样可以非常灵活
地执行用户的进样程序要求，如多种样品自动 混合，自动进样等高级功能的自由设置，但是，由于进样针的扩散，所以进样量越小，受到扩 散的影响也越大，所以自动混合的准确度还是 难以达到容量瓶的混合方式。这在做标准由线 时得注意的问题，如为定量则不推荐小样量的 混合方式。程序进样方式设置如下图：
第一步：设置进样 第一步： 器
第二步： 第二步：使用进样器程 序（U）
第三步：更多信息（功能项）第三步：更多信息（功能项）对于手动进样器，必须了解六通阀的工作原理，应特别注意的是进样量少于定量环的50%或大 于定量环的3-5倍量是比较准确的，不过，大家 用自动进样器已经习惯了，如果再用回手动进 样器会不会有
些郁闷？会不会有一种坐惯了宝 马又要回到踩单车的感觉？ 柱温箱，使用安捷伦柱温箱可以保证柱的稳 定性，从而保证了保留时间的重现性。恒定的 柱温特别是日温差大的时候更为必要。
检测器，安捷伦1200系列检测器有，可 变波长检测器G1314B、二极管阵列检测器 G1315B、二极管阵列检测器SL型G1315C、示 差折光检测器G1362A、荧光检测器G1321A。本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就 不多说了。对VWD型检测器应了解它的工作原 理，氘灯的使用维护及更换。需要注意的是，使用中不要频繁的开关氘灯，否则影响氘灯 的寿命。
可以利用诊断方式来检测氘灯的能量，当然，发现氘灯能量降低时不要马上得出氘灯应该更 换的结论，这也许是流通池脏或有气泡造成的 能量降低，所以必须用诊断方式检测流通池。诊断结果大于0.6说明流通池很干净，小于0.2则 说明流通池该清洗了。更换氘灯后要在诊断日 志中填写更换氘灯，这样氘灯的使用时数便从 零开始。
这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常 重要，一定要使用适当出口连接管，出口管线 要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不 得私自将废液管截短，以防气泡进入流通池。但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液 相色谱仪正确的操作方法和定期的维护保养的 是很重要的。
软件篇 软件部分，这就是1200液相色谱仪的化学 工作站。本所安捷伦1200高效液相色谱仪工作 站软件版本为B.02.01，现在新的版本为B.03-01 的了，但这没有太多的差别，新版本增加的只 是一部分我们很少用到的高级功能。
在这里我就和大家一起讨论一些日常使用 中遇到的细节问题，也许是我们使用过程中所 容易忽略也容易造成操作问题的。软件方面从数据采集，数据分析至报告格 式及打印。首先我们应该了解，脱机区别于联机是不 能对仪器进行控制，不能运行诊断。
工作站运行界面：单针进样 工作站运行界面： 工作站运行界面： 工作站运行界面：多针进样
数据采集中主要是分析方法和运行控制，这是我们操作中常用的。方法的的概念，方法 是一个参和集，它包括分析一个样品所需要的 所有参数：数据采集参数、数据分析参数及命 令或宏指令等内容。方法的组成：
1、方法信息；
2、仪器/采集参数；
3、数据分析参数；
4、运 行时选项表。
我想对方法的编辑大家应该都比较常用和熟悉 的了，在这里我选一些也许大家不太注意的说 一说吧。编辑方法仪器中，方法编辑选项里有 四个可选项，1、方法信息（M）；
2、仪器/采 集（I）；
3、数据分析（D）；
4、运行时选项 表（R）。首先选择所要编辑方法哪一部分
内容。需要注意的是，不选择某一部分内容，并不意 味着方法中不含有该部分内容，而仅仅
意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原 方法中设置的参数。还有，仪器参数设置—— 四元泵的参数设置。
1、停止时间：是仪器停 止采集数据的时间，并不是泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10 分钟后，不再采集数据，但泵仍然继续工作，向系统提供流动相。使用自动进样器
时一定要设置适当的停止时间，以保证连续进 样的要求；
2、后运行时间：是指一次运行结束 后，到第二次进样前的等候时间，该时间用于 系统为第二次进样做好准备。例如：将不感兴 趣的杂质冲洗出色谱柱，或等待系统中的流动 相真正变成下一次进样的初始比例。做梯度洗 脱时，一定要设置该数值；
3、压力限：
压力的上下限也要合理设置。压力上限不要高 于柱子能够承受的压力最大值，一般比正常分 析压力高20bar左右；而压力下限的数值一般比 正常分析压力低20bar左右；
4、时间表：此处 可以编辑梯度洗脱程序，规定溶剂比例变化方 式。要注意程序时间与停止时间和后运行时间 之间的协调关系。单元泵的参数设置界面与四 元泵相比少了溶剂选择项，参数设置的要求
与四元泵参数设置要求相同，只是此时只有一 种溶剂可供选择，也无法进行梯度洗脱实验。二元泵的参数设置要求与四元泵参数设置
要求 相同，只是此时只有A、B两种溶剂可供选择。二元泵SL的参数设置可以在溶剂类型处的列表 中选择本次使用的溶剂，并写入对溶剂描述。
系统将根据你所选择的溶剂自动进行溶剂压缩 因子补偿，保证流量、比例更加精确。当选择 “使用高级压缩因子校正”选项时，将按照各 个方法中泵参数部分选择的溶剂的对应的压缩 因子来控制泵，进而保证流动相的流量和比例 更加精确。有一个问题，就是在数据采集完毕洗柱的时候 是不用开灯的，但如果强行关灯则方法运行时
会报错，会提示仪器没有准备就绪。怎么办呢，在方法的运行时选项表中有“运行前命令/宏” 和“运行后命令/宏”，我们可不可以在“运行 前命令/宏”中设置把灯关了呢？当然可以，而 且这是关灯后再洗柱方法中所必须的，但我在 前面说过，先关灯，仪器会报错，方法无法运 行。其实很简单，这是因为我们有一个细节
设置关灯后洗柱： 设置关灯后洗柱：第一步 设置关灯后洗柱： 设置关灯后洗柱：第二步 设置关灯后洗柱： 设置关灯后洗柱：第三步 设置关灯后洗柱： 设置关灯后洗柱：第四步
没编好，在方法编辑过程中，进入仪器参数设 置-检测参数VWD设置，在右下角选“更多信 息”，点击进入后点选“特殊设置”，对“当
灯关闭时可进行分析（E）”进行勾选，再在 “运行前命令/宏”中输入LAMP OFF，这样，就 可以实现先关灯后再运行洗柱的方法了。然后 在“运行后命令/宏”中设置完成后关泵或关闭 闭 工作站，工作站，这就是随你所欲啦。关泵为PUMP OFF，关闭 整个系统为STANDBY，这里要说明的是PUMP OFF和STANDBY是有区别的，前者为泵的关闭，后者为停泵至待机状态的。如果选BACK命令，则关闭工作站。这是关机方法中的一个小技巧，这当然不 可用在分析方法上，分析方法中前后宏命令最 好慎用，特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选 “当关灯时可进行分析”，不然我们的实验操 作就没有意义了。这是为什么，大家一想就知 道啦。还有，在运行时选项表中要注意的问题是，除 非有特殊要求，一般不建议选择“保存GLP数 据”、“将方法和数据保存在一起”选项，GLP 数据是最原始的数据，不允许改动。一般情况 下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议先 预览一下，看看是不是我们想要的突变或浙变 效果。数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何建 立校正表。有时我们得到的色谱图并不很理想，那如何对它进行合理积分以得到比较准确的数 据这是个关键，这可以从积分事件中进行设置。斜率灵敏度和峰宽的数值改动要慎重，因为选 用不同数值，将影响色谱峰起止点的识别，得 到不同的峰面积，进而影响到所得定量结果的 准确程度。一定要保证处理同一系列数据（各 个标样数据和未知样品数据）时，这两个参数值是一致的。最小峰面积和最小峰 高的数值大小不会影响所得峰面积，仅仅做为 是否对该色谱峰进行积分的标准。积分事件表 中的积分参数并不是孤立于方法的参数，它们 属于方法的一部分内容，所以保存积分参数时 应先将积分事件保存到方法中，然后再保存方 法，积分参数就会被保存下来。如果自动积分
和利用积分事件表设置积分参数都不能满足用 户积分的具体要求，那么退出积分事件表，即 可看到上图所示的手动积分工具栏，你可以使 用手动积分的功能进行积分条件优化，手动积 分不能被直接保存到方法中，也不建议保存手 动积分参数。
校正，校正即是利用某个峰的峰高或峰面 积来确定其对应组分的浓度或含量，当检测器 灵敏度针对不同的组分而变化时需要进行校正，检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时 需要进行校正。校正分单级校正和多级校正。
一、单级校正：即单点校正，单点法。仅有一 个浓度的标样，无论进样几针取平均值，只要浓度相同，都相当于只做一次校正。单点 校正的两种假设（1、响应曲线必须是直线；
2、响应曲线必须通过原点。）都不尽合理，使得 单级校正定量结果不准确。但其具有简单、快 速的优点，常适用于以下情况：
1、做简单的粗 定量；
2、当未知样品的浓度小于且接近于标样 浓度时，变量定量结果较准确；
3、主要用于检 出实验，即不需要准确定量未知样品含量，只关心未知样品是否达标。
二、多级校正。
1、对每一峰需做至少两次校正；
2、可以补偿检测 器的非线性响应；
3、响应曲线可以不通过原点。多级校正纠正了单级校正的缺点，可以进行准 确定量。液相色谱里面常用的多级校正为五级 校正（即五点法）。
建立校正表，它的目的 目的是为了得出含量结果。目的 校正表建立是自动计算中必须的，标准曲线制 定也必须在校正表建立上。校正表编好后，也 要作为方法的一部分存入方法。同时想用批处 理来处理数据时首先建立校正表。至于批处理 方面的应用，这是高级培训班中的内容，在基 础培训班中只提及一下，所以我在这里也就不 不
多说了。在此提醒注意的是：如果使用内标法 或内标百分比法定量，一定要指定内标峰，否 则化学工作站会警告内标化合物丢失，无法完 成定量。最后是报告处理，工作站提供了一系列的报告 格式，如简单报告，性能报告，完整报告等，其中又分为内标法，外标法，百分比法等多
种报告格式。如果你对工作站上给出的格式不 满意，可以自定义设置报告，不过，自定义报 告的设置是一个令人头痛的问题，要想得到一 个较满意的自定义报告，需要你花不少的心神。安捷伦的色谱工作站中的报告功能确实到了人 人痛骂的程度。安捷伦公司难道真的这么没文 化么？一点没考虑中国国情还一味在中国
第二篇：高效液相色谱仪验证方案
高效液相色谱仪验证方案
目 录1.设备基本情况1.1 概述1.2 基本情况3 职责3.1 验证委员会3.2 工程处3.3 QC4 验证内容4.1 安装确认4.1.1 安装确认所需文件资料4.1.2 关键性仪表及消耗性备品4.1.3 评价仪器的安装是否符合GMp及供应商提议的要求4.1.4 起草标准操作规程4.2 校正4.2.1 紫外检测器4.2.1.1 固定波长紫外检测器波长示值误差的校正4.2.1.2 可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定4.2.2 高压泵4.3 运行确认4.3.1 紫外检测器4.3.2 高压泵4.4 性能确认4.4.1 最小检测浓度4.4.2 定性、定量测量的重复性4.5 拟订再验证项目及周期4.6 验证结果评定与结论1.设备基本情况1.1 概述本高效液相色谱仪主要由一个二元泵、一个柱温箱、一个可变紫外检测器、一个带有20μL定量环的进样器和一台工作站组成，各部分由工作站软件控制。本仪器主要用于分析原料和成品的有关物质和含量。1.2 基本情况设备编号：设备名称：高效液相色谱仪型 号：生产厂家： 供货厂家： 安装日期： 使用部门： 工 作 间： 保 管 员：2．验证目的 为确认高效液相色谱仪测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。3 职责3.1 验证委员会1.负责验证方案的审批。2.负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。3.负责验证数据及结果的审核。4.负责验证报告的审批。5.负责再验证周期的确定。3.2 工程处1.负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。2.负责建立设备档案。3.负责数字显示器、记录仪的校正。3.3质量部1.负责验证用对照品、样品及其它消耗性备品的准备2.负责备品、备件的保存。3.负责设备仪器的操作。4.负责记录各种测试结果。5.负责拟订再验证项目及周期。6.负责收集各项验证、试验记录，起草验证报告，报验证委员会。7.负责起草仪器使用、维护保养的标准操作规程。4 验证内容4.1 安装确认4.1.1 安装确认所需文件资料 工程处在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存。4.1.2 关键性仪表及消耗性备品 列出关键性仪表及消耗性备品的目录，汇总统计，作为仪器的关键资料，用来与仪器以后的变动做比较。4.1.3 评价仪器的安装是否符合GMp及供应商提议的要求 查阅设备采购定单、操作手册等，列出设备安装、使用所需条件，包括温度、湿度、通风条件、电路等。检查仪器安装与使用所处的环境条件，是否符合上述要求。4.1.4 起草标准操作规程--高效液相色谱仪标准操作规程--高效液相色谱仪维护保养规程--高效液相色谱仪校正规程4.2 校正4.2.1 紫外检测器4.2.1.1 固定波长紫外检测器波长示值误差的校正通常用一块滤光片获得指定波长的光者，可小心将滤光片取出，用高精度的分光光度计检定。4.2.1.2 可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/l硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得重铬酸钾的硫酸溶液将检测器与记录仪联好，接通电源预热稳定后，用注射器注入重铬酸钾的硫酸溶液将吸收池充满，在235nm、257nm、313nm、350nm波长处检定仪器的波长示值误差。将记录纸速调到4mm/min，将检测器波长调到较规定波长低5nm处（例如检定257nm时，检测器波长先调到252nm，调记录笔到中间位置，然后每15秒改变1nm，直至规定的波长高5nm处，记录各点的吸收度，分别找出最小与最大点的波长与标准波长之差即为波长示值误差。每点重复测3次，最小与最大值之差即为波长重复性误差。标 准：固定波长紫外检测器波长示值误差应<±2nm可调波长紫外-可见检测器波长示值误差应<±2nm，重复性误差<±1nm。基线漂移≤5×10-3（AU/h）；基线噪声≤5×10-4（AU）最小检测浓度（静态）_ch 4×10-8g/ml（奈的甲醇溶液）。4.2.2 高压泵校正泵流量设定值：将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称重，按下式计算SS。表1 SS的检定
流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333收集流动相时间（min）864允许误差3%2%2%计算公式：Fm=(W2-W1)/ρ·t Ss =(Fm-Fs)/Fs ×100%其中：Fm为流量实测值(ml/min)，Fs为流量设定值(ml/min)，W2为容量瓶加流动相的重量(g)，W1为容量瓶的重量(g)，ρ为实验温度下流动相的密度(g/cm3)，t为收集流动相的时间(min)4.3 运行确认进行运行确认的目的是在不使用任何试样的条件下，确认该仪器能够达到设计要求。4.3.1 紫外检测器基线漂移和基线噪声的测定。将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，纸速为5mm/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30~40分钟，计算基线漂移和噪声。基线漂移应≤5×10-3(AU/h),基线噪声应≤5×10-4(AU)。4.3.2 高压泵流量稳定性误差SR的检定。将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表2 设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称重，按下式计算SR。表2 SR 的检定流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333收集流动相时间（min）864允许误差3%2%2%计算公式：SR =(Fmax-Fmin)/F×100% 其中：Fmax为同一组测量中流量最大值（ml/min），Fmin为同一组测量中流量最小值（ml/min），F 为同一组测量中算术平均值（ml/min）。4.4性能确认4.4.1 最小检测浓度在静态条件下，用注射器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基线燥声峰高，按下式计算最小检测浓度。Ct=2·HN.C/H式中：Ct:最小检测浓度（g/ml）HN:噪声峰高（记录仪格数或实测高度cm）C:样品浓度（g/ml）H:样品峰高（记录仪格数或实测高度cm）4.4.2 定性、定量测量的重复性将1×10—4g/ml 萘的甲醇溶液，注入高效液相色谱仪中，检测波长254nm，流动相为甲醇，流速1.0ml/min。重复进样8次，计算相对标准偏差（RSD），应小于等于1.5%。4.5拟订再验证项目及周期 质量处负责根据设备仪器情况，确定再验证周期项目及周期，报验证委员会审核。4.6 验证结果评定与结论QC负责收集各项验证、试验结果记录，起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论。附件1关键性仪表及消耗性备品情况
仪器名称仪器编号型 号关键性仪表仪表名称生产厂家型号校正证书编号保存处校正周期消耗性备品品名生产厂家型号数量单位保存处 确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日附件2 仪器安装条件检查记录
设备名称设备编号型 号安装条件要求实际安装条件温度10～30℃湿度小于65%通风水电气汽其它条件
工作台不受阳光直射。室内应无腐蚀性气体或其它影响测定的气体干扰。周围应无影响测定的强电场、磁场和强烈震动。确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日
附件3高效液相色谱仪校正记录
设备名称设备编号型 号温度：湿度：甲醇密度：泵流量设定值误差FstW2W1FmFm均值Ss标准规定判定检测者 复核人 年 月 日确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日附件4高效液相色谱仪运行确认记录设备名称设备编号型 号测试项目 标准规定实测结果结论 实测结果 结论 判定基线漂移≤5×10-3(AU/h)基线噪声≤5×10-4(AU)流量稳定性检测者 复核者 年 月 日复核者 年 月 日 确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日附件5 高效液相色谱仪性能确认记录设备名称设备编号型 号测试项目标准规定测定结果判定最小检测浓度＜4×10－8g/ml定性定量重复性RSD≤1.5%检测者 复核者 年 月 日复核者 年 月 日确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日附件6 高效液相色谱仪再验证项目及周期设备编号： 设备名称： 型号： 序号项目标准验证方法周期1线路连接检查线路、接地2附件检查检查操作记录、操作手册等3清洁清洁仪器外部4泵流量设定值和稳定性基线漂移和基线噪声最小检测浓度定性定量重复性详见验证方法起草： 工程部长： 验证委员会： 年 月 日第三篇：LC1620A高效液相色谱仪 生产厂家
LC1620A高效液相色谱仪价格优惠，专业生产销售厂家：郑州南北仪器设备有限公司（南北设备集团），南北通过向客户提供领先的技术、产品，更为优异的质量和服务，更高的性价比价值体来追求行业第一 可靠的性能.稳定准确的输液能力，是高精度分析的可靠保证。
LC1620A高压恒流泵采用了专利的端面凸轮设计，最大程度避免了加工和装配误差，结合经过精密计算设计的凸轮曲线，从而获得高精度流量。
丰富的功能紫外检测器具有：
.丰富的功能
.波长自动校准和修正功能
.波长扫描功能
.波长时间程序功能
.检测池最大耐压为15Mpa，便于串联其他检测器
自动化的操作.功能强大的智能化反控工作站，所有系统设置均可在电脑上完成。配合准确度和重复性高的自动进样器，您只需在软件上设置好条件，即能轻松完成整个分析过程。
更强的检测能力.除了常规的紫外检测器，LC1620A还可配置示差折光检测器和蒸发光散射检测器。无论您的实验室是从事制药、质量控制、食品安全、化学、环境等何种应用领域，LC1620A都能为您提供适合的行之有效的检测方案，帮助您分析各种各样的化合物，全面满足您分析检测的需求。
多方位的细节设计.流量监控功能：对流动相进行实时监控，双预警设计，当达到设定值时，系统会报警提示或自动停泵，有效保护HPLC系统。
.柱塞杆在线清洗功能： 高压恒流泵采用双密封圈设计，有效清洗缓冲盐，减少关键部件磨损，延长使用寿命。
第四篇：高效液相色谱仪检测食肉中瘦肉精含量
液相色谱法测定肉类食品中瘦肉精残留量
摘要瘦肉精是一种动物用药，将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。近期，国内双汇火腿肠出现食品安全问题所引发的“瘦肉精”事件令国人对食品安全颇为堪忧，因此 ,对动物肉类或内脏中盐酸克伦特罗的监督检测显得十分必要。为此南京科捷应用LC-600液相色谱仪，探讨肉类样品中瘦肉精（盐酸克伦特罗）的前处理方法 ,了解本市肉品中盐酸克伦特罗的残留情况。用水提取肉品中盐酸克伦特罗残留量 ,我们用固相萃取法对肉类样品提取液进行净化和浓缩 ,可以有效去除干扰 ,简便 ,灵敏度高 ,适于在日常检测工作中推广使用。残留监测作为食品安全的重要课题。使之越来越广泛地应用于不同类型兽药、农药及毒素类有毒有害物质的检测分析之中。关键词瘦肉精盐酸克伦特罗兽药农药残留高效液相色谱法 液相色谱仪 液相色谱 色谱仪 分析仪器
本方法的应用范围
本方法的检测思路可供食品中农药、兽药残留检测的借鉴。如兽药残留动物源食品中硝基呋喃类残留(呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、呋马唑酮)磺胺类药物残留(磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺喹嚼啉)喹诺酮类(嚼喹酸、萘啶酸)氯羟吡啶、莫能菌素和盐霉素、乙氧酰胺苯甲酯、氯霉素、伊维菌素、克伦特罗、尼卡巴嗪、土霉素、四环素、金霉素(国标GBT14931．1)阿莫西林、盘尼西林及喹乙醇等。农药残留氨基甲酸酯农药、有机磷农药、百草枯、杀草快、草甘膦及氨基膦酸、苯并眯唑类杀菌剂、利谷隆、灭草隆及敌草隆、三嗪类多种农药的检测。
2.实验步骤
(1)仪器和设备
①LC-600高效液相色谱仪整套配置如下
P600宝石恒流泵1台UV600紫外检测器1台
7725i六通进样阀1只WS600色谱工作站1套
②匀浆机 ③旋转蒸发仪 ④电子天平：0.01mg ⑤紫外分光光度计
⑥离心机 ⑦固相萃取仪 HGC-8 ⑧固相小柱
（2）试剂
①盐酸克伦特罗标准品 ②乙醚；分析纯 ③正己烷：分析纯 ④甲醇：色谱纯
⑤盐酸克伦特罗标准液 ⑥lmol／I。盐酸溶液 ⑦0．05mol／L乙酸缓冲液
⑧0．3mol／L乙酸缓冲液 ⑨lmol／LNaOH溶液 ’
⑩甲醇液：甲醇—重蒸水(75+25)
(2)仪器和设备
②匀浆机 ③旋转蒸发仪 ④电子天平：0.01mg ⑤紫外分光光度计
⑥离心机 ⑦固相萃取仪 HGC-8 ⑧固相小柱
(3)测定步骤
①提取和净化 取组织样品10g，加入30ml lmol／L盐酸溶液匀浆，超声波振荡3h，5000r／mln的速度离心10min，—上清液用lmo]／LNaOH溶液滴至碱性，乙醚或正已烷抽三3次，抽提液在水浴锅上蒸发至5ml后上Silioa小柱，以除去大部分杂质，洗脱液上Alu—mina
A小柱，将待测成分吸附在小柱上，用0．05mol几乙酸缓冲液(pH7．0)洗涤小柱3次，o．3mol／L乙酸缓冲液洗脱待测成分，冷冻干燥，用0．5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。
②测定
a．色谱条件
色谱柱：C18柱，250mmX4.6mm
流动相：甲醇—水(75+25)
流速：0．65ml／mill
检测波长：243nm
进样量：100uL
b．色谱测定 分析样品按上述仪器操作条件供高效液相色谱仪分析。
③空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。
(4)检测限和回收率
本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0．001ug/g’回收率范围为80％±20％
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第五篇：Agilent 7890A 培训资料总结
Agilent 7890A 培训资料总结
1.分析方法的建立
首先在程序或电脑桌面上选择“联机1”→在联机窗口菜单栏里点击“方法”选择“新建方法”，再点击“方法”选择“编辑完整方法” →进入“编辑方法”窗口【该窗口里把“数据分析”不要勾选，其他勾选】→“确定” →“方法信息”窗口【在下面的注释里可以编辑，如写入创建方法的原因或检测的注意事项等】→“确定” →“选择进样源”【根据需要选择手动或GC进样器，如果需要手动进样时，该窗口要选择“手动”一般默认选择为“GC进样器”。若进样口有两个的话，要选择“前”或“后”】 →“确定” →“设置方法”窗口【该窗口上部为设定方法的程序升温的曲线。需要在“自动进样器”、“进样口”、“色谱柱”、“柱箱”、“检测器”、“信号”、“配置”等几个窗口里面编辑我们需要的条件】→在“设置方法”窗口里点击“自动进样器”【子窗口“前进样器”里输入进样量、清洗方法、样品前处理的方法等。该窗口“样品盘/其他”窗口里“样品重叠”不要勾选】→“进样口”【首先要选择进样口的位置“SSL-前”或“SSL-后”，下面窗口里“分流不分流进样口”里“加热器”、“压力”、“隔垫吹扫流量”、“载气节省”勾选，“模式”里面选择“分流”，输入需要的分流比】→“色谱柱”【“控制模式”里勾选“打开”，其中选择“压力”为恒压模式，“流速”为恒流模式，我们一般选择“流速”。如果更换了色谱柱 的型号后要在该窗口内点击“更改色谱柱”填写完整的新色谱柱信息。】→“柱箱”窗口【该窗口里勾选“柱箱温度为开”，其最高柱箱温度设定值要小于或等于色谱柱正常使用的最高温度，“覆盖色谱柱最大值”不要勾选】，该窗口右侧部分设定升温程序（其中“后运行温度”可以认为是老化程序，一般略高于方法的最终温度）。→“检测器”【该窗口首先要选择要编辑的进样口，勾选“加热器”、“H2流量”、“空气流量”、“尾吹流量”、“火焰”，其中H2流量和空气流量比为1：10】→“信号”【“信号源”栏里下拉菜单里选择正确的信号源，如选择“前部信号FID”，“数据采集频率/最小峰宽”下拉菜单里选择合适的档位，我们一般选择“20HZ/.01min”，勾选“保存”】 →“配置”【子菜单“其他”里勾选“低速风扇”，“模块”里“SS进样口”选择N2，“尾吹气”里选择N2，“点火补偿”为2.0-6.0PA，“自动进样器”里输入进样针的量程】→在窗口的空白处点击右键，选择“将方法下载的GC” →“确定” →“确定” →菜单里选择“方法” →“方法另存为”选择方法保存路径及命名方法→“确定”。以上为新分析方法的建立的过程，若电脑上已经有建立好的方法，直接点击菜单里“方法”选择“调用方法”即可。2.序列的生成
序列一般用于产品的分析，对于单个样品的分析不建议用序列。菜单里选择“序列” →“新建序列模板” →“序列” →“序列参数”【选择数据保存的路径、子目录、勾选“前缀/计数器”编辑 “前缀”和“后缀”】 →“序列” →“序列表”【“样品瓶位置”为101到116，其他录入值无效，“样品名称”里录入样品名和批号，“方法名称”可以根据路径寻找，编写进样次数，“样品类型”选择“样品”】 →“确定” →“序列” →“序列模板另存为”【选择路径和名称】→“确定” →等仪器稳定后菜单里点击“运行控制” →“运行序列”。3.仪器自算RSD的设定步骤
打开脱机程序，首先先对一组要计算RSD的谱图进行积分，从一组谱图里面任意调用一个，同时选择分析方法为“使用序列方法”，菜单栏里点击“校正” →“新建校正表” →进入校正窗口【该窗口内选择“自动设定”，“缺省含量”设定为“1”】→“确定”【如果前面已经建立过校正表，会跳出一个窗口询问是否覆盖现存的校正表，选“是”】 →在谱图里面选择要校正的峰，并在下面“校正表”窗口里输入该峰的名字→ 点击“校正表”窗口里面的“确定” →“是” →“方法” →“保存序列方法” →“序列” →“序列参数”【在序列参数窗口里选择“序列输出”，该窗口下“序列总结”里勾选“打印序列总结报告”和“输出到文件”，其中可以重新命名后缀为TXT的文件名，若想设定好后打印报告可以勾选“输出到打印机”,另外，该窗口内点击“设置”，在“序列总结参数”里面勾选7,8,9项，然后点击“确定”】 →“确定” →“序列” →“部分序列”【在该窗口里面选择要进行运算的谱图，然后点击“运行序列”】 →在上述的这个序列的文件夹里找到一个 名字为GLPrpt.txt的文本，打开即可看到我们需要 RSD。其中GLPrpt.txt为默认的名字，如果上述曾经更改过该.TXT名字，要打开改好的名字的文本进行查看。4.外标定量法
首先调用谱图，对所有标样和样品的谱图进行积分。在菜单里点击“校正表” →“校正设置…”【其中“参考峰”为相对保留时间的偏移值，特别是液相可能保留时间差异较大，这时就要调整该选项值，“缺省校正曲线”里面“类型”选择“线型”】 →“确定”→“校正表” →“新建校正表”【在弹出的“校正”窗口内选择“自动设定”，“级别”为1，“缺省含量”为0】 →“确定”【如果前面已建立过校正表，会弹出一窗口，点击“是”】 →谱图下面有个“校正表”窗口【选择代表标样的峰，在其相对保留时间对应行里输入化合物名称和含量数值，然后点击“确定”】 →在提示“是否删除含量为0的行”，根据需要选择“是” →如果是多点校正，接着打开第二针标样的谱图→“校正” →“添加级别”【“级别”里输入2，“缺省含量”为0】→“确定” →同样在谱图下面的“校正表”窗口内输入化合物名称和含量数值→“确定”【依次可以加入第3、第4个等更多个点的校正】→“报告” →“设定报告”【在“设定报告”窗口内，子窗口“定量结果”里“定量”选项里选择“外标法”】 →“确定” →调用要定量的样品谱图，点击预览或打印可以看到样品的含量。【注意：我们通常用到的是面积百分比，而不是样品中标准物质的含量，要完成面积百 分比，需要设置如下，在建立好校正曲线后，打开样品的谱图点击“报告” →“设定报告”在该窗口内“定量”选项里选择“面积百分比”，子窗口“计算因子”，“使用样品数据”选项里选择“来自下面的样品缺省值”，“确定”即可】。该外标法的设置Agilent7890（气相）与Agilent1200（液相）基本一样。5.内标定量法
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