猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

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第一篇:猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病是最古老的猪病之一,世界范围内的兽医工作者对此病进行长期、深入而全面的研究,人们对该病的认识已经相当清楚,防制技术也很成熟。该病在我国的流行是最近十年的事情,在防制工作中,还有一些问题存在争议。现就其中争议比较多、比较集中的问题提出来,与同仁共同探讨。

1.灭活疫苗和弱毒草疫苗的应用。

四、五年前,这是一个争论最多的问题,主要涉及以下两方面:

1.1安全性。业界人士认为灭活疫苗很安全,而弱毒疫苗可能存在散毒和毒力返强等安全隐患。事实上,早在此前弱毒疫苗在欧美国家已经使用了数十年,证明其很安全。现在,大多数猪场已经接受了使用弱毒疫苗,几年的实践也证明了弱毒疫苗的安全性。

1.2免疫效力。一般来说,灭活疫苗能激发比弱毒疫苗更高的抗体。因此一些业内人士据此认为前者比后者的免疫效果好。显然,仅仅根据抗体水平的高低来判断疫苗的效力不够全面,因为机体依赖多种免疫机制抵抗病毒的感染,主要有干扰素、体液免疫、细胞免疫、局部免疫和超感染占位竞争等。灭活疫苗和弱毒疫苗在上述机制中所发挥的效力有较大差别,见表:

免疫机制

疫苗类型干扰素体液免疫细胞免疫局部免疫占位

灭活疫苗hyhyhy

弱毒疫苗

弱毒疫苗更加接近于病毒自然感染的情形,能激发机体多种免疫机制,对机体提供迅速而全面的保护。循环抗体(即体液免疫)在中和病毒方面可以发挥很重要的作用,但抗体的作用受到其所能达到的部位的限制,对进入细胞的病毒和病毒感染门户部位(如上呼吸道),抗体的中和作用很难发挥,这就有赖于细胞免疫和其它免疫机制的作用。一般来说,细胞免疫在抗病毒感染中起着更重要的作用。又由于除体液免疫以外的其它免疫机制作用十分迅速,因此弱毒疫苗在紧急接种方面优势明显。几年的临床应用验证了弱毒疫苗具有比灭活疫苗更好的免疫效果。

2.免疫程序。各猪场实施的免疫程序有一定差别,对小猪是否需要免疫的争论比较多。在江西省,大多数猪场仅对种猪进行免疫,以预防繁殖障碍,并通过初乳保护小猪。也有少部分猪场对仔猪进行免疫接种。若要从根本上控制伪狂犬病,仔猪的疫苗接种是必需的。因为仔猪不接种疫苗,一旦母源抗体下降了或消失了,它们就会受到野毒的感染,尽管这些猪不表现临床发病,但它们成为终身带毒者并向外排毒,增加环境感染压力。这样,野毒就在猪场内不断循环感染,威胁着猪群的安全。隐性感染还会降低猪的日增重和饲料报酬。

在生产正常情况下,笔者推荐种猪在配种前免疫2次,以后每四个月免疫一次。仔猪于是10周龄左右免疫一次。疾病爆发时需要全群普免。

3.滴鼻免疫。滴鼻免疫在家禽生产上应用十分普遍。在养猪生产上,伪狂犬疫苗的滴鼻免疫也取得了很大成功。滴鼻免疫的优点一是可以避免母源抗体的干扰,二是在病毒感染门户产生局部免疫。但是滴鼻免疫并不总是必需的,它是疾病爆发环境感染压力很大时的暂时应急方法,一旦疾病得到控制步入正常生产了,可以转换成常规途径接种疫苗。

4.免疫失败。免疫失败的情况较少发生,分析原因主要是:

4.1免疫程序不当。当猪群爆发伪狂犬病时,没有进行全群免疫,只是对一部分猪主要是种猪接种疫苗,这样整个环境感染压力没有从根本上得到缓解,临床上表现为情况有好转,但不理想,零星散发时有发生。有的是仔猪免疫周龄偏小,母源抗体干扰了免疫效果。

4.2免疫时机不当。在接种疫苗时,猪群已经感染了伪狂犬病毒处于发病的潜伏期,或感染了其它与繁殖障碍有关的疾病。在此情况下,母猪发生流产、早产等繁殖障碍。

5.免疫猪场的野毒抗体问题。最近,通过对一些疫苗免疫猪场进行了野毒抗体的监测,结果发现各猪场(无任接种何种疫苗)均有一定数量的猪野毒抗体呈阳性。但是阳性率较四年前已有大幅度的下降,之所以还存在野毒抗体阳性,是因为:

5.1一些猪(尤其是种猪)在接种疫苗前就感染了野毒,血清已经转阳,这些猪没有被淘汰,在以后的监测中,血清学监测中呈阳性。

5.2疫苗免疫能有效地减轻或防止伪狂犬病的临床症状,但并不能完全阻止病毒的潜伏性感染。而在现场,极少量的病毒就能引起猪发生血清转阳。

5.3大多数猪场仅对种猪进行免疫,仔猪生长到10周龄左右母源抗体已不具保护力,它们在出售前的任何时候都可能感染野毒并发生血清转阳,尽管这些猪不表现临床发病。

5.4监测结果表明,对所有猪都接种疫苗的猪群,野毒抗体阳性率显著低于仅对种猪接种疫苗的猪群。在管理条件、设施条件及猪群状况相近,免疫程序相同的情况下,接种不同类型的弱毒疫苗,猪群野毒抗体阳性率没有差异。

6.单基因缺失苗和多基因缺失苗。这是目前争论较多的问题,怎样认识这个问题,可从以下几方面来

第二篇:猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病免疫防制技术探讨

猪伪狂犬病是最古老的猪病之一,世界范围内的兽医工作者对此病进行长期、深入而全面的研究,人们对该病的认识已经相当清楚,防制技术也很成熟。该病在我国的流行是最近十年的事情,在防制工作中,还有一些问题存在争议。现就其中争议比较多、比较集中的问题提出来,与同仁共同探讨。

1.灭活疫苗和弱毒草

疫苗的应用。

四、五年前,这是一个争论最多的问题,主要涉及以下两方面:

1.1安全性。业界人士认为灭活疫苗很安全,而弱毒疫苗可能存在散毒和毒力返强等安全隐患。事实上,早在此前弱毒疫苗在欧美国家已经使用了数十年,证明其很安全。现在,大多数猪场已经接受了使用弱毒疫苗,几年的实践也证明了弱毒疫苗的安全性。

1.2免疫效力。一般来说,灭活疫苗能激发比弱毒疫苗更高的抗体。因此一些业内人士据此认为前者比后者的免疫效果好。显然,仅仅根据抗体水平的高低来判断疫苗的效力不够全面,因为机体依赖多种免疫机制抵抗病毒的感染,主要有干扰素、体液免疫、细胞免疫、局部免疫和超感染占位竞争等。灭活疫苗和弱毒疫苗在上述机制中所发挥的效力有较大差别,见表:

免疫机制

疫苗类型干扰素体液免疫细胞免疫局部免疫占位

灭活疫苗hyhyhy

弱毒疫苗

弱毒疫苗更加接近于病毒自然感染的情形,能激发机体多种免疫机制,对机体提供迅速而全面的保护。循环抗体(即体液免疫)在中和病毒方面可以发挥很重要的作用,但抗体的作用受到其所能达到的部位的限制,对进入细胞的病毒和病毒感染门户部位(如上呼吸道),抗体的中和作用很难发挥,这就有赖于细胞免疫和其它免疫机制的作用。一般来说,细胞免疫在抗病毒感染中起着更重要的作用。又由于除体液免疫以外的其它免疫机制作用十分迅速,因此弱毒疫苗在紧急接种方面优势明显。几年的临床应用验证了弱毒疫苗具有比灭活疫苗更好的免疫效果。

2.免疫程序。各猪场实施的免疫程序有一定差别,对小猪是否需要免疫的争论比较多。在江西省,大多数猪场仅对种猪进行免疫,以预防繁殖障碍,并通过初乳保护小猪。也有少部分猪场对仔猪进行免疫接种。若要从根本上控制伪狂犬病,仔猪的疫苗接种是必需的。因为仔猪不接种疫苗,一旦母源抗体下降了或消失了,它们就会受到野毒的感染,尽管这些猪不表现临床发病,但它们成为终身带毒者并向外排毒,增加环境感染压力。这样,野毒就在猪场内不断循环感染,威胁着猪群的安全。隐性感染还会降低猪的日增重和饲料报酬。

在生产正常情况下,笔者推荐种猪在配种前免疫2次,以后每四个月免疫一次。仔猪于是10周龄左右免疫一次。疾病爆发时需要全群普免。

3.滴鼻免疫。滴鼻免疫在家禽生产上应用十分普遍。在养猪生产上,伪狂犬疫苗的滴鼻免疫也取得了很大成功。滴鼻免疫的优点一是可以避免母源抗体的干扰,二是在病毒感染门户产生局部免疫。但是滴鼻免疫并不总是必需的,它是疾病爆发环境感染压力很大时的暂时应急方法,一旦疾病得到控制步入正常生产了,可以转换成常规途径接种疫苗。

4.免疫失败。免疫失败的情况较少发生,分析原因主要是:

4.1免疫程序不当。当猪群爆发伪狂犬病时,没有进行全群免疫,只是对一部分猪主要是种猪接种疫苗,这样整个环境感染压力没有从根本上得到缓解,临床上表现为情况有好转,但不理想,零星散发时有发生。有的是仔猪免疫周龄偏小,母源抗体干扰了免疫效果。

4.2免疫时机不当。在接种疫苗时,猪群已经感染了伪狂犬病毒处于发病的潜伏期,或感染了其它与繁殖障碍有关的疾病。在此情况下,母猪发生流产、早产等繁殖障碍。

5.免疫猪场的野毒抗体问题。最近,通过对一些疫苗免疫猪场进行了野毒抗体的监测,结果发现各猪场(无任接种何种疫苗)均有一定数量的猪野毒抗体呈阳性。但是阳性率较四年前已有大幅度的下降,之所以还存在野毒抗体阳性,是因为:

5.1一些猪(尤其是种猪)在接种疫苗前就感染了野毒,血清已经转阳,这些猪没有被淘汰,在以后的监测中,血清学监测中呈阳性。

5.2疫苗免疫能有效地减轻或防止伪狂犬病的临床症状,但并不能完全阻止病毒的潜伏性感染。而在现场,极少量的病毒就能引起猪发生血清转阳。

5.3大多数猪场仅对种猪进行免疫,仔猪生长到10周龄左右母源抗体已不具保护力,它们在出售前的任何时候都可能感染野毒并发生血清转阳,尽管这些猪不表现临床发病。

5.4监测结果表明,对所有猪都接种疫苗的猪群,野毒抗体阳性率显著低于仅对种猪接种疫苗的猪群。在管理条件、设施条件及猪群状况相近,免疫程序相同的情况下,接种不同类型的弱毒疫苗,猪群野毒抗体阳性率没有差异。

6.单基因缺失苗和多基因缺失苗。这是目前争论较多的问题,怎样认识这个问题,可从以下几方面来分

析:

6.1多基因缺失苗不等于多价苗。这是普通常识,多价苗含有多种抗原成份,免疫后对猪提供更多的保护。多基因缺失苗则是缺失多个基因,减少了一些抗原成份。当然减少的这些抗原成份对总体的免疫效果影响不大。

6.2基因缺失的目的。基因缺失的主要目的是为了鉴别免疫猪和野毒感染猪,为根除伪狂犬病提供血清学监测手段。目前,世界通用的是gE单克隆抗体ELISA试剂盒,单基因缺失苗和多基因缺失苗都能达到鉴别目的,从这一意义上来说,二者没有任何区别。

6.3免疫效力。目前还没有权威性的论著对单基因缺失苗和多基因缺失苗免疫效力之间的优劣做过评述,从所了解的各猪场实际应用看,二者对控制伪狂犬病均具有良好的效果。抗体水平的监测也没有发现二者之间存在差异。最近的研究表明,某些弱毒疫苗会移植至免疫猪的隐性靶组织即三叉神经元,并通过与伪狂犬野毒的超感染竞争,从而阻断隐性感染的发生。研究还表明,既缺失糖蛋白gE又缺失tk基因的弱毒苗在三叉神经节的移植能力弱。而阻断和减少野毒潜伏性感染在伪狂犬病的防制中是至关重要的。

6.4安全性。这是争论的焦点问题,主要是关于单基因缺失苗是否安全的争论。

6.4.1基因缺失在减毒方面有一定作用,但显然非常有限,疫苗的减毒主要依赖于继代培养。除伪狂犬病疫苗外,其它疫苗都没有缺失基因,其中家禽用疫苗有十多种,猪用疫苗有五、六种,人用疫苗有七、八种,如果说这些疫苗存在毒力返强或其它安全性问题,显然与事实不符。因此,不能因为某一种疫苗缺失基因,就过分夸大基因缺失在安全性方面的作用,甚至把基因缺失的多少作为衡量一个疫苗安全性的依据。

6.4.2从历史的角度看,单基因缺失疫苗(如Bartha株)是一个使用历史最长(1961年研制成功)、范围最广、数量最多的弱毒疫苗。数十年的应用实践已经表明这是一个免疫力和安全性都很好的疫苗株。因此,不能因为多基因缺失苗(如同时缺失TK基因)强调其安全性就反过来怀疑单基因缺失苗的安全性,这与思维逻辑不符,更与事实不符。

6.4.3从现实的角度看,单基因缺失苗仍然是世界范围内用来防制伪狂犬病的主要品种,在十分注重生物安全的欧美国家,生产和使用一种不安全的疫苗是令人难以想象的。

6.4.4到目前为止,已有几家外国公司的Bartha株单基因缺失弱毒苗获得了我国农业部的批准注册,被允许进口。我国也是一个越来越注重生物安全的国家,批准注册这些单基因缺失苗时,是从各个方面充分考虑、认证了其安全性因素,显然有关单基因缺失弱毒疫苗存在安全问题的说法不可信。

6.4.5**省几十个规模化猪场从1999年就开始使用单基因缺失弱毒苗,至今未发生安全性问题。曾有个别猪场在使用单基因缺失弱毒苗后,出现一些问题,但经实验室检测,问题不在疫苗,而是该猪场在接种疫苗时已经感染了其它繁殖障碍性疾病,猪场人员也表示,接种疫苗就已经有问题发生。这种偶然情况在其它类型的疫苗使用过程中也会碰到。

7.猪场能否使用不同类型的基因缺失弱毒疫苗。从理论上讲,不同的基因缺失弱毒疫苗有发生重组的可能,但生产实践中还没有观察到这种重组,或由重组引起的不良后果。在生产中也无法完全避免对同一头猪使用不同的疫苗,如商品猪场往往会从多个种猪场引种,各个种猪场使用的疫苗可能就不一样,它们和商品猪场使用的疫苗可能也不一样。

《猪伪狂犬病免疫防制技术探讨》

第三篇:猪伪狂犬病的表现形式及防制

猪伪狂犬病的表现形式及防制

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是危害养猪业最严重的传染病之一,给世界养猪业造成重大的经济损失,近年来许多国家报道此病有增多的趋势。我国于1974年在家猫中发现此病,以后逐渐在猪、牛等家畜中流行,成为我国养猪业不可忽视的主要传染病。

1猪伪狂犬病的表现形式

1.1妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊,在宁波B场,1996年5至8月份发生以产死胎为主,损失达2200多头,死胎率在55%,后经有关单位诊断为AD病。何启盖(1998)报道,1990年秋季某猪场35头母猪共产仔305头,其中死胎290头,从死胎中分离出伪狂犬病病毒。徐沈涛(1999)报道,江西T猪场由此病引起的流产为7.2%死胎8.4%.猪细小病毒也可引起以母猪繁殖障碍为表现的疾病,但它主要侵害头胎母猪,以产木乃伊为主.而伪狂犬病侵害各种胎次的母猪,并以产死胎为主.

2.2以乳猪死亡为主,逐步延伸到培育猪和肉猪出生后外观健康的仔猪,从第2d天开始发病,3-4d时整窝死亡.赵建山(1998)报道,初生仔猪在2-3d时整窝突然发病,1-2d后基本死亡.姜达书(1998)报道,发病日龄早的确3-4d,普遍为7-10d,少数可达30d,徐沈涛(1999)报道,2-10d的仔猪发病,死亡为26.27%。

伪狂犬病仔猪日龄在延长,这可能与发病母猪的母源抗体有关.

1.3母猪不育产过死胎或产后仔猪因发生伪狂犬病死亡的母猪,产后配种困

难.返情率可高达60%以上,母猪空怀造成严重经济损失.补注伪狂犬病疫苗(每头4头份)、改善饲料、增强护理、加强配种对防治因狂犬病造成的母猪不育很有效.临床表现

ADV的症状随病猪年龄的差异而有所变化.

2.1 乳猪4周龄以内的仔猪感染后病情最为严重.新生仔猪产下后很健康,膘情也好,但在2-3日龄发病后,仔猪眼眶发红,闭目昏睡,体温在41◦C左右,口角流出大量泡沫性唾液,有的呕吐或腹泻,初期听到刺激性声音可发出兴奋性鸣叫,后期则无反应.随后出现眼睑、口角、颌下水肿(这些症状可与低血糖、补铁制剂引起的中毒相鉴别),常在腹部出现粟粒大小的紫色斑点,严重时全身呈紫色,患猪步态不稳,有的只能后退,易跌倒,有时出现间歇性抽搐,角反张,一般持续4-10min.病情最短的为4-6h,最长为5d,一旦出现明显的神经症状及拉黄色稀粪,绝大多数死亡,耐过的成为僵猪.

2.2 仔猪(断奶后至30kg阶段)症状与乳猪相似,只是轻微一些,其发病率与死亡率比乳猪低。对发病的3个猪场作粗略统计,发病率25%,死亡率95%以上。

2.3 中猪(4月龄左右)症状轻微,低热,眼结膜发红,鼻镜潮湿,有鼻涕,体温40.5◦C左右,易被误认为流感。偶有脓性鼻涕,猪只呼吸困难,咳嗽,精神沉郁,食欲不振,有的呈“犬坐势”,有的呕吐或腹泻,1周后逐渐康复,重者可延长到20d。若发现出僵直、惊厥、行走困难等神经症状,预后不良。

2.4 母猪母猪发病,表现为厌食、便秘、震颤、眼眶膜炎或视觉消失。个

别发病严重的..耳尖发紫,四肢叉开呈鹅步不能站立,有时头侧向一边,体温在40◦C-42◦C,最后衰竭死亡。怀孕母猪感染本病,则分娩延迟或提前,流产呀产木乃伊,流产的可达50%,所产仔猪初生重小,弱仔在2-3d内死亡。

3病理变化

(1)鼻腕:急性死亡的乳猪,出现鼻腕骨化脓或脓性出血性炎症。(2)

喉头扁桃体水肿并伴以咽炎和喉头水肿,喉头常有纤维素坏死性假膜,喉粘膜点状出血。(3)淋巴结:肠系膜淋巴结和下颌淋巴结充血、肿胀或出血,咽背淋巴结肿胀、充血、出血、水肿,并有局部坏死。(4)心内膜:有点状出血、(5)肺:有小叶性肺炎,散在小的出血和坏死点有时可见肺水肿。(6)胃、小肠:有出血性炎症。(7)膀胱:有时粘膜亦有充血、出血。(8)脑:脑膜充血,脑血管明显增粗,脑脊液增多。(9)眼结膜:眼睑水肿、潮红,病重猪眼球突出,眼结膜充血。(10)口腔硬腭、上臼齿附近粘膜充血、出血及糜烂,扁桃体充血、化脓坏死。(11)肝、脾稍肿,有散在圆形、白色及略隆起的坏死灶。(12)肾脏发白,有散在细小出血点,切面有坏死灶。

4防治体会

引进种猪要严格把关,要到中信度强的国家定点种猪场购买。对新引进种猪要隔离观察并及时注射疫苗。给种猪每年定期注射伪狂犬病疫苗,小猪在乳猪期和断奶后各注射1次。流行AD病毒的猪场,要严格执行隔离和淘汰制度。各猪舍管理人员严禁乱串,出入猪舍要消毒并换衣换鞋。

在确认病因后尽快使用疫苗是防治此病的根本。同时适当使用抗生素等药物。进行对症治疗,能防止并发症。

建议有关部门加强种猪检疫。经有关人员血清学调查,猪伪狂犬病阳性率很高。有些种猪场从未注射过疫苗,阳性种猪就向省内、外出售。说明现在不少种猪场对伪狂犬病的监测不够重视,在种猪苗的流通过程中应加强检疫。

疫苗似乎有治疗作用。对刚开始发病、病症较轻、还没有拉黄色稀粪的发病猪,包括有体温但在体表还没有出血点的仔猪采取紧急免疫,用哈尔滨兽医研究所生产的猪伪狂犬病弱毒疫苗或华中农大生产的基因缺失灭能苗加倍量注射,有2/3左右发病仔猪6d后恢复健康。发病猪场若有肉猪生长参差不齐,应考虑二免。

建议农牧防疫部门订免疫程序时,对猪伪狂病列入强制性常规免疫。

第四篇:伪狂犬病防制技术规

伪狂犬病防制技术规范

伪狂犬病(Pseudorabies,Pr 又名Aujeszky’s disease,AD)。是由疱疹病毒科猪疱疹病毒I型(伪狂犬病毒PrV)引起的各种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为特征的急性传染病。除猪以外的其它动物发病均以死亡而告终,但呈散发形式或地方疫源性疾病。该病对养猪业的危害最大,在猪呈爆发流行,常引起妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、新生仔猪大量死亡,育肥猪发生严重的呼吸道症状和增重滞缓、种猪不育,给养猪业造成巨大的经济损失。世界动物卫生组织(Wold Organisation for Animal Health,简称OIE)将其列为B类动物疫病,我国将其列为二类动物疫病。

为了预防、控制和消灭伪狂犬病,依据(中华人民共和国动物防疫法)和共他相关法律法规,特制定本技术规范。

1.适用范围

本规范适用于中华人民共和国境内一切从事哺乳动物饲养、经营、使用、屠宰、加工、运输等相关活动中的动物疫病防治工作。

2.诊断

根据流行特点,临床特征和病理变化,结合乳胶凝集试验(LAT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)作出初步诊断。确认需进一步做病毒中和试验(NT)或病毒分离鉴定或动物接种试验或聚合酶链反应(PCR)。

2.1 流行特点

本病与其他疱疹病毒病不同,宿主范围广,猪、牛、羊、犬、猫最易感,寒冷季节多发,本病在猪呈爆发流行,猪是伪狂犬病毒储存者和传染源,病猪、隐性感染猪和康复猪可以长期带毒。病毒在猪群中主要通过空气传播,通过呼吸道和消化道感染,也可通过胎盘感染胎儿,除猪以外的其它动物感染伪狂犬病毒后,发病均以死亡告终,但呈散发形式或地方疫源性疾病。

2.2 临床表现:

2.2.1 潜伏期一般为3-6天

2.2.2 牛、羊、犬、猫、兔等动物感染本病后以发热、兴奋、奇痒、脑脊髓炎症状,结果均以死亡转归。

2.2.3 母猪感染伪狂犬病毒后常发生流产、产死胎、弱仔、木乃伊胎。青年母猪和空怀母猪常出现返情、屡配不孕或不发情;公猪常出现睾丸肿胀、萎缩、性能下降、失去种用能力;新生仔猪大量死亡,15日龄内死亡率为100%;断奶仔猪发病20-30%,死亡率为10-20%;仔猪症状病初高烧、腹泻、呕吐、精神不振,随后出现转圈、震颤、鸣叫、昏睡等神经症状;育肥猪出现严重呼吸道症状,生长滞缓,饲料报酬降低。2.3 病理变化:

病理组织学呈现非化脓性脑炎变化,剖检脑膜瘀血、出血,肾脏布满针尖样出血点,其它大体剖检特征不明显。

2.4 实验室诊断:

2.4.1 病原学诊断:

2.4.1.1 动物接种:

采取病猪扁桃体,嗅球、脑和肺,用生理盐水或PBS(磷酸盐缓冲液)制成10%悬液,反复冻融三次后离心取上清液接种于家兔皮下或者小鼠脑内,(用于接种的家兔和小白鼠必须事先用乳胶凝集试验或ELISA检测伪狂犬病毒抗体阴性者才能用),家兔经2-5天或者小鼠2-10天发病死亡。家兔发病时先用舌舔接种部位,以后用力撕咬接种部位,使接种部位被撕咬伤、鲜红、出血,持续4-6小时,病兔衰竭,倒卧于一侧,痉挛,呼吸困难而死亡。小鼠不如家兔敏感,但明显表现兴奋不安,神经症状,奇痒和四肢麻痹而死亡。

2.4.1.2 鸡胚接种:

取上述上清液接种9-10日龄鸡胚绒毛尿囊腔,经3-4天后形成特征性痘疱样白斑,死亡的鸡胚神经系统出血导致胚胎颅腔突出,取尿囊液做病毒中和试验,进行病毒鉴定。

2.4.1.3 用细胞培养分离病毒,见附件一。

2.4.1.4 聚合酶链反应(PCR)诊断,见附件二。

2.4.1.5荧光抗体试验(见附件三)

2.4.2 血清学诊断(抗体检测)

2.4.2.1 微量中和试验(固定病毒、稀释血清)见附件四

2.4.2.2 酶联免疫吸附试验(见附件五)

2.4.2.3 乳胶凝集试验(见附件六)

2.4.2.4 琼脂扩散试验(见附件七)

2.4.2.5 区分强弱毒感染鉴别乳胶凝集试验(见附件八)

2.4.2.6 区分强弱毒感染鉴别ELISA(见附件九)

3.疫情报告

凡发现疑似疫情的单位和个人,均应及时报告所在地基层动物防疫组织或动物防疫监督机构。

接到报告后的基层防疫组织和动物防疫监督机构,按《动物疫情报告管理办法》的规定上报。

4.疫情处理

4.1 紧急免疫接种:对发病种母猪、种公猪,用gG单基因缺失灭活疫苗作紧急免疫接种注射,第一次注射后间隔4-6周后再加强免疫一次,以后按种猪免疫程序进行,对正在发病的猪场,仔猪采用TK-/gG-双基因缺失弱毒疫苗作超前

--免疫,即滴鼻或注射一头份剂量。对正在发病的仔猪用TK/gG双基因缺失弱毒

疫苗滴鼻或肌肉注射作紧急预防接种可收到很好的效果。同时对所有的其它种猪用gG单基因缺失灭活疫苗注射,仔猪和肥猪用TK-/gG-双基因缺失弱毒疫苗注射。

4.2 消毒:对栏舍、场地、道路等用2%的氢氧化钠溶液1-3%的漂白粉液。1:300的消毒灵或1:300的复合酚溶液喷洒;对金属器具用0.5%的次氯酸钠薰蒸消毒;工作人员服装、鞋帽等用消毒液浸泡、高压灭菌法消毒。

4.3 严格禁止狗、猫、鸡、鸟类等动物进入猪场,加强灭鼠。

4.4 严格限制和减少猪场外来人员和外来车辆进入场内,同时要限制场内饲养员和工作人员在各猪舍互相来往和串门,以免人为扩散原病。

4.5 对病死动物尸体、剖检动物、死胎、流产物及其它污染物和排泄物作销毁无害化处理或者按《病死动物及产品深埋处理技术规范》深埋处理。

4.6 进行紧急免疫注射见效果后,以后按伪狂犬病根除计划方案中伪狂犬

病阳性场根除方案进行伪狂犬病的根除计划(见5、6伪狂犬病根除计划方案),直到最终消灭此病。

5.预防与控制:

5.1养畜场(含种畜场)的选址和布局要符合《动物防疫法》和国家畜牧兽医主管部门规定的防疫条件,并取得动物防疫监督机构颁发的《动物防疫合格证》。

5.2 经常保持场(户、舍)的清洁卫生、严格灭鼠,严禁其它动物和鸟类进入场内,避免因动物带毒传播。

5.3 新进动物必须来源于非疫区(非疫场),并进行严格检疫,伪狂犬抗体阴性或强毒感染阴性的猪才能引进。对出场、厂(户)种畜由动物防疫监督人员进行检疫、监测阴性的方出具检疫合格证明,准予出场、厂(户);或经动物防疫监督机构检疫,并持有检疫合格证明。

5.4 免疫预防:对饲养动物(特别是猪)进行定期免疫。免疫用疫苗首选基因缺失苗,种猪选用gG-或gE-单基因缺失标志灭活疫苗、仔猪和育肥猪选用----TK/gG或TK/gE双基因缺失弱毒疫苗,注射剂量、部位和方法及疫苗保存、运输方法等按生产厂的说明书要求进行。

免疫程序:种猪第一次免疫后,间隔4-6周后加强免疫一次,以后每6个月免疫一次,产仔前一个月加强免疫一次,经过前面规则免疫后的种猪所产仔猪,其母源抗体可以维持到60日龄左右,因此后备种猪可在60-70日龄首免。间隔4-6周后加强免疫一次作为基础免疫,以后按种猪的免疫程序进行免疫,育肥猪是经过前述规则免疫后所产的仔猪,应在60-70日龄用基因缺失弱毒疫苗免疫一次,间隔4-6周后加强免疫一次,直到出栏。如果是没有规则免疫母猪所产的仔猪,可提前到断奶时注射一次,间隔4-6周后加强免疫一次,直到出栏。

5.5 监测:对种猪场、育肥猪场要定期进行该病的监测。监测方法采用乳胶凝集试验或ELISA方法,种畜场每年监测2次,商品场每年监测一次,监测时种公猪(含后备种公猪)应100%,种母猪(含后备种母猪)按20%的比例抽检,商品猪按5%的比例不定期进行抽检;对有流产、产死胎、产木乃伊胎等症状的种母猪100%进行检测。

5.6 伪狂犬病根除计划方案:

根据不同的猪场、不同情况和实验室检测情况,选择不同的方案与措施。

种猪与种猪场

伪狂犬病毒是属于高度潜伏感染的病毒,而且这种潜伏感染随时都有可能被体内外和环境变化的应激因素刺激而引起疾病爆发,同时基因缺失弱毒疫苗注射带有野毒潜伏感染的动物时,由于活病毒之间发生基因交换和重组的可能性,加上种猪饲养的时间长(3-4年),因此这种可能性和机率就会增大,而且国内外都有因注射弱毒疫苗而引起伪狂犬病爆发的例子。因此在西方发达国家如德国严格规定种猪只允许使用灭活疫苗。美国在其伪狂犬病的根除计划中,也规定种猪只允许使用灭活疫苗。根据以上这些特点,因此建议在我国种猪也只能使用基因缺失灭活疫苗。华中农业大学专门研制了针对种猪用的单基因缺失浓缩灭活疫苗。尤其是gG单基因缺失灭活疫苗对病毒的免疫原性几乎完全没有什么影响。因为gG是病毒的非结构蛋白基因,gG蛋白是病毒繁殖时分泌到细胞培养的上清

中与病毒免疫原性无关;该基因缺失后,对病毒的免疫原性没有什么影响,但又可以作为鉴别诊断。鉴于国内外已大量使用gE缺失疫苗,为了与国际接轨,我们也研制了gE单基因缺失灭活浓缩疫苗。

育肥用的仔猪和架子猪可以使用双基因缺失的弱毒疫苗。华中农大研制的TK-/gG-和TK-/gE-双基因缺失弱毒疫苗都是缺失了伪狂犬病毒的主要毒力基因TK,该基因缺失疫苗可用作于新生仔猪(未吃初乳)的超前免疫,尤其是TK-/gG-缺失疫苗可用于发病仔猪的紧急预防接种,具有明显的急救和预防效果。也可用于断奶仔猪和生长育肥猪的免疫,可预防各种年龄猪的伪狂犬病,具有明显的促生长作用。由于育肥猪的生长周期短(6个月左右),因此不存在病毒重组变异和返强的危险。

5.6.1 种猪及种猪场的根除计划

5.6.1.1 在没有使用过疫苗的猪场,先作普遍血清学检查,如果发现血清学阳性猪,最好是能将血清学阳性猪与血清学阴性猪分群饲养。然后将血清学阳性猪和血清学阴性都用基因缺失灭活浓缩疫苗注射,所有猪普遍注射一次疫苗后,间隔4-6周再加强免疫一次。以后血清学阴性猪群按每半年注射一次,血清学阳性猪群每4个月注射一次,然后每半年进行一次血清学鉴别检查,凡是注射疫苗血清学阳性的猪归为健康群,凡是野毒感染血清学阳性猪归为另一群,逐步缩小和有计划的淘汰野毒感染猪群,逐步达到完全健康无野毒感染的猪群。直到最后根除消灭伪狂犬病。

5.6.1.2 对已经注射过疫苗的猪场,首先将疫苗完全换成浓缩单基因缺失灭活疫苗。免疫程序按每4个月注射一次。每半年进行一次血清学鉴别检查,逐步开始分群将基因缺失疫苗免疫血清学阳性猪视为健康群分开饲养,将野毒感染血清学阳性猪分为另一群分开饲养,逐步淘汰和缩小野毒感染猪群,最后建立完全健康无野毒感染的猪群。

5.6.1.3 以上述经过规则免疫后的种猪所生仔猪留作种用的仔猪在100日龄时作一次伪狂犬病普通血清学检查,凡是抗体阴性者留作种用。对检出的抗体阳性者作进一步的鉴别血清学检查,对野毒感染阴性者同样可用作种用,对强毒感染阳性者淘汰作为肥猪用,不能作为种猪用。对伪狂犬病抗体检测阴性猪和野毒感染阴性猪等留作种用的仔猪用伪狂犬病浓缩单基因缺失灭活疫苗在100-110日龄接种一次,再到130-140日龄时加强免疫一次,以后按种猪的免疫程序每半年注射一次浓缩基因缺失灭活疫苗。同时每半年抽血样进行一次鉴别血清学检查,如发现野毒感染血清学阳性猪应及时隔离淘汰处理,以保持猪群无野毒感染,安全健康。

5.6.1.4 对种用仔猪经上述检测,发现和分群隔离的野毒感染血清学阳性猪,立即注射灭活疫苗或基因缺失疫苗,最好是间隔4-6周注射2次,作为育肥猪饲养出栏。

5.6.1.5 以上是在种猪群和种猪场进行伪狂犬病根除计划的最佳方案。但考虑到我国养猪业的实际情况,一般猪场的养猪数量都已达到满负荷的程度,猪舍和栏圈都比较紧张,对采取隔离分群有困难时,此种情况在没有注射过疫苗的场先进行抗体检测,确定有无感染存在,或是已经注苗的场先将疫苗更换为浓缩单基因缺失灭活疫苗,再按前述的种猪及种猪场的免疫程序进行免疫。即抗体

阴性猪首先作两次基础免疫,其间隔4-6周。然后每半年注射一次。如是野毒感染阳性猪群先作两次基础免疫后,再每4个月免疫一次,直至野毒感染抗体消失后,改为每半年一次。对已经免疫过的猪群,则将疫苗更换成浓缩单基因缺失疫苗就行。然后按每半年抽血检查一次。逐步缩小野毒感染的猪。这就是要比前述的采取分群隔离的措施达到净化根除的目的要慢一些。

5.6.1.6 对正在爆发伪狂犬病的猪场,种猪除进行两次间隔4-6周基础免疫外:种猪应在配种前注射一次,产前一个月加强免疫一次,均使用浓缩的单基因缺失的灭活疫苗。育肥猪用基因缺失弱毒疫苗进行两次免疫。如仔猪发病用基因缺失疫苗紧急预防接种效果显著。

5.6.1.7 对新引进的种猪,要进行严格的检疫,最好是要引进伪狂犬病抗体阴性猪或野毒感染抗体阴性猪,引到本场后,隔离饲养2个月,抽血样检查,抗体或野毒感染抗体为阴性者再与本场其它猪混群饲养。与其它猪群一样,每半年作一次检查。对于检测出的野毒感染阳性猪要严格隔离,注射疫苗后,看情况能否作为种用,最好是将其淘汰不作种猪用。

5.6.1.8 猪场要进行定期严格的消毒管理措施,最好是使用2%的氢氧化钠(烧硷)溶液或酚类消毒剂。猪舍、栏圈的清洗消毒,最要选择气候干燥和具有阳光照射下进行效果最佳。

5.6.1.9猪场严格禁止养狗、养猫、养鸡,严格禁止狗、猫、鸡和其它鸟类及动物进入猪舍。在猪场内要进行严格的灭鼠措施。消灭鼠类带毒传播疾病的危险。

5.6.1.10 要严格禁止人员和车辆等进入猪场,避免因人员和机械带毒传播疾病。

5.6.1.11在5公里方圆范围内的相关猪场都必须统一采取同样措施,因为伪狂犬病可在方圆5公里范围内通过空气传播。

5.6.2育肥猪场伪狂犬病的根除计划

上述种猪及种猪场的根除计划措施完全适用于育肥猪场。育肥猪场种猪的伪狂犬病根除计划措施与上述的种猪的根除计划措施是完全一样的。不同的只是在育肥猪方面,首先应对育肥猪群在70-100日龄的猪进行伪狂犬病血清学检测,如发现有抗体阳性或野毒抗体阳性猪,所有的猪只都应注射疫苗。经过规则免疫的种猪所生的仔猪,一般在60-70日龄注射一次基因缺失弱毒疫苗,间隔4-6周后再加强免疫一次。一般情况下在育肥猪场种猪育肥猪都应进行免疫。如只免疫种猪,大量的育肥感染病毒,在那里大量增殖病毒并向猪舍内排毒,直接威胁着种猪,因而种猪的免疫效果受到影响。此外育肥猪感染伪狂犬病毒后,虽不表现出典型的临床症状和发生死亡,但可明显的引起呼吸道症状,增重迟缓,饲料报酬降低,推迟出栏,其间接经济损失也是巨大的。经实验室的动物实验和临床上的观察证实,感染了伪狂犬病毒的育肥猪群,注射疫苗与不注苗其增重相差约1/3。即注射疫苗猪比未注射疫苗猪在同等饲养条件下多增1/3,可见育肥猪应该进行伪狂犬病免疫的重要性。

6.无病标准:

首先要配合我国无特定病原区的建设的工作计划,划定一定的区域,对区域内的猪场进行血清学调查,了解和掌握伪狂犬病猪场和猪群阳性感染率的情况,制定伪狂犬病的免疫预防计划与措施。按照前述伪狂犬病的根除计划方案,实施强制性免疫计划,配合强有力和有效的区分强弱毒感染的监测,建立健康群,通过有计划的免疫,使猪群伪狂犬病强毒感染率降到10%左右时,就可以采取捕杀或淘汰野毒血清学阳性猪,建立健康猪群。最后要在一定的区域范围内或甚至是全国范围内,经过较长时间的监测没有再发现野毒感染猪。在稳定控制标准的基础上,停止注苗后,连续3年无临床病例出现,由国家指定的专门实验室到该区域内的猪场随机抽血样检测伪狂犬病毒抗体为阴性,没有阳性猪出现,才算消灭或根除了伪狂犬病。

第五篇:猪伪狂犬病防制与净化措施

猪伪狂犬病防制与净化措施

白挨泉

(佛山科学技术学院,广东佛山528200)

摘要:本文针对猪伪狂犬病及近三年出现的变异伪狂犬病的流行病学,临床表现,病理变化的特征以及经典伪狂犬病毒和变异伪狂犬病毒的临床表现区别作了详尽阐述,并提出了猪伪狂犬病的防制和净化的措施。

关键词:猪伪狂犬病 变异毒株 防制 净化措施

伪狂犬病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属,伪狂犬病毒只有一个血清型,可致潜伏感染,尤其潜伏在神经系统,潜伏感染是疱疹病毒非常重要的特征。

1流行病学

伪狂犬病毒在全世界广泛分布。伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫,另外,多种野生动物、肉食动物也易感。水貂、雪貂因饲喂含伪狂犬病毒的猪下脚料也可引起伪狂犬病的暴发。耐过的猪会永远潜伏感染,在应急状况下,潜伏感染的病毒将被再活化。关于人感染伪狂犬病毒的报道很少,并且都不是以病毒分离为报道依据。如土耳其及我国台湾曾报道有血清学反应阳性者。欧洲也曾报告数例因皮肤伤口接触病料组织而感染,主要表现为局部有发痒,未曾报告有死亡。最新的报道见于1992 年,在波兰因直接接触伪狂犬病毒而感染的工人,首先是手部先出现短暂的瘙痒,后扩展至背部和肩部。2013 年在我国也有发现人感染的临床病例。

猪是伪狂犬病毒的贮存宿主,病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。不少学者认为,其他动物感染本病与接触猪、鼠有关。伪狂犬病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪,另外,被伪狂犬病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。而空气传播则是伪狂犬病毒扩散的最主要途径。

猪发生经典伪狂犬病后,其临诊症状因日龄而异,成年猪一般呈隐性感染,怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。15 日龄以内的仔猪发病死亡率可达100%;对成年肥猪可引起生长停滞、增重缓慢等。变异伪狂犬病毒感染母猪、哺乳仔猪、保育猪、小中猪全部显性感染。其中中大猪、母猪都表现典型出伪狂犬症状死亡。有攻毒实验表明,用分离到的变异毒株实验室攻毒感染10 头180 斤育肥猪,滴鼻攻毒5 头,5 头均表现典型的伪狂犬症状发病死亡。肌注5 头,有4头出现典型的伪狂犬症状发病死亡。

2临床症状

经典伪狂犬病毒的临诊表现主要取决于感染病毒的毒力和感染量,以及感染猪的年龄。其中,感染猪的年龄是最主要的。与其他动物的疱疹病毒一样,幼龄猪感染伪狂犬病毒后病情最重。新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡,临诊上新生仔猪第1 天表现正常,从第2 天开始发病,3~5 天内是死亡高峰期,有的整窝死亡。同时,发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀。15 日龄以内的仔猪感染本病者,病情极严重,发病死亡率可达100%。成年猪一般为隐性感染,若有症状也很轻微,易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁,有些病猪呕吐、咳嗽,一般于4~8 天内完全恢复。

怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎,其中以怀孕中后期产死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病。伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。返情率高达90%,有反复配种数次都屡配不上的。变异伪狂犬毒株感染猪场临床表现毒株的毒力明显增强,病猪表现母猪流产、哺乳仔猪、保育猪、生长育肥猪均表现高热、神经症状,口吐白沫,拉黄色水样稀粪,眼肿,发病率,病死率均很高。

3病理变化

经典伪狂犬病猪剖检主要是肾脏布满针尖样出血点,有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血,脑脊髓液量过多,肝、脾等实质脏器常可见灰白色坏死病灶,肺充血、水肿和坏死点,(主要是哺乳仔猪表现典型病变)子宫内感染后可发展为溶解坏死性胎盘炎。变异伪狂犬毒株感染后,哺乳仔猪、保育猪、生长育肥猪都有非常典型的伪狂犬病变,且非常严重。扁桃体水肿,化脓、溃疡及白色坏死结节,肝脏有黄白色坏死点或坏死结节,肠道出血,肺脏出血,淋巴结肿大、出血,肾出血,脑出血、水肿等病理变化特典型,眼肿表现明显,特别是发生心肌坏死,以前临床没有发生。

4诊断

根据疾病的临诊症状,结合流行病学,可做出初步诊断,确诊必须进行实验室检查。

4.1 病毒分离鉴定病毒的分离是诊断伪狂犬病的可靠方法。患病动物的多种病料组织如脑、心、肝、脾、肺、肾、扁桃体等均可用于病毒的分离,但以脑组织和扁桃体最为理想,另外,鼻咽分泌物也可用于病毒的分离。病料处理后可直接接种敏感细胞,如猪肾传代细胞(PK-15 和IBRS-2)、仓鼠肾传代细胞(BHK-21)或鸡胚成纤维细胞(CEF),在接种后24~72 小时内可出现典型的细胞病变。若初次接种无细胞病变,可盲传3 代。不具备细胞培养条件时,可将处理的病料接种家兔或小鼠,根据家兔或小鼠的临诊表现做出判定,但小鼠不如家兔敏感。分离到病毒后再用标准阳性血清做中和试验以确诊本病。

4.2 血清学诊断多种血清学方法可用于伪狂犬病的诊断,其中Ge-ELISA 法具有特异性强、敏感性高的特点,3~4h 内可得出试验结果,并可同时检测大批量样品,并用于鉴别伪

狂犬野毒感染,广泛用于伪狂犬病的临诊诊断。

4.3 通过PCR 检测,新分离的伪狂犬病毒毒株出现基因变异,与Bartha 株比较毒力相关基因PR基因第31 位至36 位出现6 个连续碱基(第11 位和第12 位氨基酸)的缺失,与Bartha 株比较gB 基因的第224-232 位发生9 个碱基GCCCCGGCC 的缺失。通过中和试验结果表明,与传统毒株相比,新分离毒株对免疫血清更具有抵抗力。防治和净化措施

5.1 疫苗免疫接种是预防和控制伪狂犬病的根本措施,目前国内外主要使用的Bartha 株基因缺失疫苗能有效地减轻或防止伪狂犬病的临诊症状,从而减少该病造成的经济损失。周密的疫苗免疫方案,疫苗免疫配合检测淘汰阳性猪,培育阳性猪群。建议母猪加强免疫(3-4 次),公猪每年免疫3-4 次。仔猪出生后24-48 小时内要滴鼻免疫,而不是肌肉注射(避免母源抗体的干扰)。肉猪-7 周龄基础免疫,高度污染区4 周后加强免疫一次

5.2 严格的生物安全措施,消灭牧场中的鼠类,对预防本病有重要意义。同时,还要严格控制犬、猫、鸟类和其他禽类进入猪场,严格控制人员来往,并做好消毒工作及血清学监测等,这样对本病的防制也可起到积极的推动作用。此外,对猪群采血做血清中和试验,阳性者隔离,以后淘汰。以3~4 周为间隔反复进行,一直到两次试验全部阴性为止。到16 周龄时,做血清学检查(此时母源抗体转为阴性),所有阳性猪淘汰,30 日后再做血清学检查,把阴性猪合成较大群,最终建立新的无病猪群。

5.3 保证各个阶段猪只的合理营养供给。

总之,控制和净化猪伪狂犬病,肥育猪必须接种活毒疫苗,好的疫苗、正确的免疫计划、严格的生物安全措施是最有效的手段。

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