幼儿园生活专题小结

第一篇：幼儿园生活专题小结

一个学期又在不经意间匆匆过去，又到了该梳理自己一学期来的班级工作的时候了.这个学期是我班实施“生活化、游戏化”课程的第二个学期，经过上个学期的探索教学后，这一学期已经有了一些经验，因此在实施中也能够把握生活化、游戏化主题活动的宗旨，开展有效的教学。

下面，就班级工作的几个方面加以总结。

（一）课程实施

1、本学期通过实施七个预设的主题（1、逛商场

2、生活用品

3、春天的电话

4、动物世界

5、漂亮的服饰

6、它们怎样过夏天

7、聪明的一休（进行了最后一周的教学），对照教学目标，我们可以真真切切的感受到孩子们在认知、情感、能力多方面都获得了发展。《逛商场》主题活动幼儿参观了常客隆大超市，让幼儿了解商场，并进行了亲自的购物活动，帮助幼儿积累生活经验，鼓励幼儿积极参与社会实践活动；《生活用品》丰富了幼儿有关生活用品的知识与经验，并让幼儿使用相关的用品，如肥皂、洗衣粉、洗洁净等用品，接受日常生活安全教育，并进行了一些洗手帕、大扫除等劳动活动；通过对文学作品的欣赏，让幼儿以独特的角度感知春天的到来，体验同伴间友好的情感，激发了幼儿认识大自然，通过多种形式表达出对春天的认识，发展了幼儿的语言表达能力和创造能力；结合春天主题，我们相应把《动物世界》主题活动融入进来，通过与亲身的感知动物，萌发幼儿探索动物的兴趣；主题《它们怎样过夏天》，让幼儿了解了人、动物、植物在夏天里的变化，了解了它们所采用的各种避暑方法，学习保护自己。

2、继续创设良好学习环境，感受学习乐趣。这个学期在实施“生活化、游戏化”课程的过程中，教学组织形式继承了上学期的传统，注重为幼儿的学习活动营造一个更加开放、和谐的环境氛围，让幼儿在一个宽松的环境中学习，学得轻松和快乐。区域活动的形式跟课堂教学有机地结合，让教学活动为游戏服务。幼儿在一种相对轻松的氛围下进行自主性学习操作，他们学习自主性提高了，他们之间的个别差异得到更多的照顾。

3、丰富生活经验，拓展学习空间。实施“生活化、游戏化”课程的关键就是要丰富幼儿的生活经验，我们一方面按照教学用书的提供的方法，通过家园联系的渠道让家长们重视孩子生活经验的丰富和积累，另一方面我们充分利用周围社区、公共设施、大自然等多种资源、多种渠道来帮助幼儿丰富生活经验，拓展学习空间。开展丰富的社会实践活动，让幼儿走出幼儿园，走向社区、走进生活、走进大自然。如：我们带孩子去琴枫苑参观，看看夏天的绿化以及小动物是怎么过夏天的。开展《逛商场》主题活动时，我们又去了常客隆大超市，看看商品布局，看看商品价格表等等，让幼儿进一步加强对商场的认识，为教学活动游戏活动准备了重要的感性经验。通过自己去超市购物的活动，幼儿认识了一些钱币，查看了商品价格以及让幼儿真真体验了购物实践活动。通过拓展幼儿的学习空间，使学习的内容从书本又重新回到了幼儿的现实生活，又从现实生活中回到课堂，并加以提升，让幼儿真真切切学到一些与自己生活密切相关的知识与能力，学习兴趣自然就提高了，知识面自然更广了。

（二）幼儿学习工作

（1）运动方面：在本学期，开展了一系列的运动擂台赛，如跳绳、运球走、投掷，幼儿的运动技能技巧发展很快。我们还重点抓住了一些不好动的孩子，如唐珩益、瞿程等幼儿，尽量选择一些他们喜欢的，易于成功的简单游戏，平时还和他们一起玩，经常在游戏过程中肯定他们的进步。现在他们在活动中表现的很大胆，运动能力也加强了。

（2）在开学初期我们班孩子的倾听常规不是很好，老师与同伴在讲的时候孩子们做自己的事或与同伴窃窃私语的交谈，根本就不听，老师请他起来说。他就支支吾吾说不出，根据孩子这一薄弱环节我们俩位老师就从培养幼儿平时的良好倾听习惯入手，一点一滴地抓，并持之以恒。利用四月园部举行的讲故事擂台赛为契机，鼓励幼儿踊跃报名参加班级讲故事擂台赛。我们班44名幼儿都勇敢走到小朋友前面，大胆地讲故事。通过幼儿民主投票推选3名幼儿参加年级总决赛，分别取得了“小擂主”、“金奖”和“银奖”。

（3）幼儿合作性规则意识进一步加强。由于年龄的特点决定着孩子以自我中心为主，缺乏一定的合作性。在教学活动以及游戏活动中，我们两位老师有意识地组织幼儿合作的活动环节，经过一个学期的努力，我班幼儿的合作能力发展很快，合作意识和责任感也有了明显提高。

（三）家长工作

实施“生活化、游戏化”课程中家长资源是十分重要的资源，我们通过家长会让家长们了解了我们现在实施的课程与以往的课程的区别，帮助家长更新了观念，家长们都比较赞同和支持我们实施这一课程。本学期我们继续在搞好搞精家园栏的同时，还在每个主题开始之前，发放亲子活动单，及时让家长了解主题目标以及需要家长配合的地方。家长们有的放矢，认真和幼儿一起做好调查报告单，还和幼儿一起收集了各种主题活动开展的材料。幼儿材料与经验准备充分，我们也能更有效地和幼儿开展

活动。本学期的家长工作也注意了现代化技术的使用，班级网站和年级论坛成为我们和家长交流的平台。娃哈哈、奚小辫、庆庆妈妈、乐乐，陶然、lishun、hanfeichi、独上寒枝不肯栖、聪聪妈妈、虎虎等一大批家长加入我们中（1）班这个大家庭，大家都能敞开心扉，述说着孩子的问题、孩子的成长。在心与心的碰撞着，更坚定了我们老师的教育信念。

（四）保育保健

这学期发生了一些事情，如朱子辰不小心撞破了头，石芷晴在家玩耍时手骨裂，余婧若跳绳膝关节受伤，幼儿的安全问题还需警钟长鸣。

生活进餐环节进步比较大，幼儿也能自觉的保持桌面清洁，不过这些现象孩子时有反复，要在以后的日子中持之以恒。在五月份我们开展了用筷子夹豆豆的擂台赛，绝大多数幼儿能熟练地夹起黄豆了。在六月份里，我们开始用筷子吃饭，幼儿也能很熟练地用筷子吃饭了，而且地面也能保持和以前一样的水平。

（五）礼仪养成

通过每月礼仪重点，我们将这些要求渗透在每周、每日的活动之中，在一日生活的各个环节进行培养和教育。

利用每周的国旗下讲话、评比礼仪之星的形式激发幼儿的荣誉感和进步的愿望。对于一些特殊的幼儿和事件，我们能进行个别教育和随机教育，并主动和家长进行交流，取得家长的配合，共同促进幼儿的进步。

经过我们的共同努力和相互合作，我们圆满完成了一学期的工作任务，幼儿也在各个方面获得了进步，但也有一些不尽人意的地方：如陶立、张映白等幼儿的规则意识还不强；陆顺学习不专注；朱子辰、陈子彦等幼儿交往能力还不够等等。在下一个学期中，我们将继续努力！

第二篇：实验室生活小结

平时在实验室最常听到的一句话就是“今天某某试验没做好是为什么？今天某某试验没出结果是什么原因？今天某某试验为什么会是这样的呢？” 等等。然后仔细一查找原因，往往是由于操作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋友的一些经验，与大家分享：

1跑page胶的时候，小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些，且分离效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分离。

2.提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。3.做WESTERN BLOT 的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说，节约了大量的时间。4.有关缓冲液和培养基配置

1）将缓冲液配方中的成分分别以10－100倍配成母液储存，需要的时候只需将相应的母液混合，补加水稀释即可

2）配培养基时通常会忘记各成分的量，如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g，哪个要10个，因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量，如配LB时，在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等，很方便，不需要每次配之前临时翻书 5.有关PCR主反应液配置: 在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定，每次配置PCR反应液很繁琐，可以将其配置类似kit的形式，按你需要的反应体系列表，然后放大100倍配置100×主反应液（100次反应），其中含buffer，Mg2＋，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在－20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样做的好处如下：

1）可极大的节省宝贵的时间，可早点收工，看球 2）避免每次反应加样不均的可能 3）大大减少PCR假阳性的产生 6.有关酶切反应液的配置: 在做酶切时，也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水，质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显： 1）各反应成分均一

2）可大大减少限制型内切酶的使用 3）节省时间

7.有关SDS－PAGE：

1）可将SDS－PAGE的积层胶，分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱（注：10％AP，TEMED不加，切记！！），每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP，TEMED即可，没必要每次制胶时候翻分子克隆，特别方便，而且，这样的预制胶可储存半年以上，不失为偷懒的绝佳方法；更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触，因此大大减少中毒的机会。

2）电泳时虽然小电泳分离效果要好一些，但2小时以上的等待的时间实在是痛苦，因此可以提高电泳至150V，但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热，这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的差，关键是时间大大节省，不需1h即可看结果了

8.实验中小窍门我想能够分成两类：一类是“非常规”操作；一类是常规操作过程中一些省时省事手段。前一类，我举个例子：有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大（1~2毫米以上，BL21就长得快），下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔（勿带出培养基），50微升酚/氯仿悬浮菌体，放置两分钟，加40微升TE抽提，上层TE吸出后再氯仿抽提一次，吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作，可以省去转接液体试管的培养步骤，至少节省6~8小时的时间。但是，要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果，不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复----其实，其它的一些“小窍门”也是如此。

后一类的小窍门则在实验室中无处不在。如：平行作不同样本的PCR,模板DNA加量一样，配置PCR体系可以一起配制后分装----这点做过试验的都知道，但是配制的时候配制量可以比预期分装量稍多一点（如用100微升则配110微升），这样可以避免有时候分装不够的尴尬，因为不同特别是大小不同的枪，会有误差。再比如：楼上有站友说的sds-page胶预配（APS和TEMED、或者后者先不加）的问题，实际上时间放置过长肯定影响效果，如果要在一天内连续地跑两次板，何尝不可？又比如，配sds-page胶的时候，上层胶和下层胶可以只用一个大枪头：先取胶，次取水，取6.8的tris后再取8.8的tris，省时省料。20021108站友开的这个帖子很好，在上上层楼的帖子说得也有道理。但我想，“窍门”和“偷懒”不应该是因果关系。其实，不管是那一类的小窍门，都是在充分地理解实验各步骤的原理、经过多次试验积累、再加上一点点思索然后尝试的结果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索，是根本。否则，别人的小窍门对你也未必能够有用。才进实验室的新手，务必要先练好规范扎实的操作，然后才能弄“窍门”。本末倒置，贻害无穷。

9.我一直是把SDS－PAGE的积层胶，分离胶预先配成mixture，APS制胶时加入，半年内使用，绝对没有问题，我保证。

10.做SDS-PAGE的时候，除了蛋白量上样一致，最好体积也一致，这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽，方便后面的比较，特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致，否则跑出来会有的宽有的窄，特别是上样体积相差较大的。

11.在把蛋白胶做成干胶时，很多时候会因为有气泡使胶裂掉，我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了，还有就是高温烘胶，我喜欢放到60度烘箱里烘，这样水分蒸发速度快，即使有一些小的气泡也不会有影响，呵呵，这是经验之谈，我从来都没失手过，大家可以试试

12.做大肠表达时确定蛋白是否表达一般要煮样做诱前诱后检测,但很多时候煮出来的很黏影响跑胶效果.我发现如果现用8M Urea重悬细菌再煮效果会有极大改善.注:不能用Gu-HCl代替 13.我也推荐几个偷懒的方法 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两边缘会有气体,所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发.然后放4度过夜.第二天直接拔下梳子行后续.国外好多公司出售脚既是如此,可以保存上星期.2 配置分离胶或者非变性胶时因胶凝时收缩可导致加样孔变浅.可以将加剩的胶放入4度以降低凝聚速度,而将凝胶放入37度促聚,并随时用4度加剩的胶补充下降的胶面.另外将胶横放与水平面成~10度角也可以减少收缩的影响.3 推荐一个节约抗体/时间的做法: 同时跑2块胶,同时转膜,然后两块膜背靠背放入同一封口膜同时封闭,同时一抗二抗(最好是用转轮,这样效果好.如果是摇床,隔一段时间帮它们翻个身以保证两张膜的正面都有机会与液体充分接触.一起洗膜(可以稍微加强洗膜也可以不做.我最多一张盘子里放4张膜而没有影响洗膜).可分别或同时压片.这样就可以节约一半抗体和接近一半时间而不会影响结果.或者另外一个就是孵育后的抗体不要扔,好的抗体可以反复做好几张膜呢.但每次都会减弱,效果不如上面一种方法.14.做western blotting 转膜时，胶放在转膜缓冲液中一段时间，待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装好转膜装置，我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带，方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚，等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了，以防maker失去参照价值。

15.超滤最合适用于蛋白的浓缩，更换缓冲液和除盐，对于按照分子量进行初分离的效果不是很好，理论和现实是有很大差别的^_^ 16.关于Western Blot 1）器具的清洁非常重要，开始做前，为了安全，尤其是装胶的厚薄玻璃板，可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗，确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2－3遍，然后用去离子水冲洗一遍。最后用95％酒精再擦一遍后晾干备用。

2）配胶最好现用现配，先配下层胶（分离胶），后配上层胶（浓缩胶或积层胶），而且在临灌胶前加APS并迅速混匀，即用移液枪抽吸与注入1－2次即可。

17跑蛋白page的时候，一开始用加样针，太麻烦，发现用20ul枪+普通小白枪头点，非常省事。另外，点样时有可能看不清孔在哪，看远离你的那面胶，孔有反光的。点样也点你对面的那块胶，省的总低头，干咱这行的容易得颈椎呀，爱惜自己。

18.垂直电泳时，可在电泳糟中放入青霉素小瓶等，可自然使液面提高而不影响电泳，又很节约电泳缓冲液。

19.我们有时要沉淀东西时，由于沉淀量很少，离心完之后不知道到底有没沉淀下来东西，由于量很少，不好观察，所以离心时建议按特定的方向放置离心管，这样你就可以在离心之前确定沉淀该沉淀到管子的大致部位，这样离心后就可直接观察那有没有沉淀，避免满管子找，另外看沉淀时可以对光看，这样就是颗粒状的细小沉淀也能看见的。

20.大家都知道PMSF有剧毒，以前都是知道浓度和要配的体积的基础上,算出要称多少毫克的PMSF,其实也可以先称PMSF,称多少算多少,再调整异丙醇的体积，到达你所要的浓度。这样就避免了你长时间和它接触。

21.跑好SDS-PAGE胶的一些体会。

1.清洗好玻璃板，不要偷懒，很多时候跑完电泳撬胶时会因为玻璃板不干净胶粘在板上把胶撬破。2.配胶时不要反复用枪混，稍微摇混就可以了，用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。3.AP分装成500微升一管保存放-20度，避免AP用太久失效。

4.倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干，因为微量的水存在会影响配的胶浓度。5.尽量不用过夜放室温或者四度的胶，也回影响胶 的分离效果。

6.电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板，在一平皿里装好水，把有胶一面的放在水中晃动几次胶很容易就脱落下来，一点没有问题，方便的很。

7.点样时样品别忘了离心这步，因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。8.尽量在冰浴状态下跑。

22.做 ２－ＤＥ 做的比较多，总结了几个小窍门：

１．一向电泳时，盐离子容易聚在 胶槽的两侧．剪一小段ＩＰＧ胶条放在两侧，构成盐桥，电压就容易上去了．避免一向电泳不好影响最后实验

结果．

２． SDS－PAGE时,在灌胶之前,一般大家都会用凡士林封底, 在SDS－PAGE 电泳之前又必须把凡士林搽干净,很是麻烦,我的经验是:不用凡士林,取少量未加Ap的分离胶,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板间,等上几分钟,待胶凝固后就可以接着灌分离胶了.方面,效果好!23.蛋白质纯化时，蛋白质降解可能与超声破菌保持冰浴有关，之前建议加pmsf，建议在上柱子洗脱的时候也加pmsf（蛋白降解抑制剂），一定要用之前再加。

24.做透析的时候，拿一个5ml的枪头或者是其他类似的东西，剪短，穿过个塑料泡沫之类的面积比烧杯大东西，然后把透析带一端扎紧，另一端开口绑紧在5ml枪头下端，扎紧得那端也可以弯过来绑成u字型。这样就可以用1ml的枪穿过5ml的枪头的孔，另一只手调整透析带，来加样取样，省去了总绑透析带的麻烦，对同一个蛋白大量多次透析非常方便 25.第一次发贴说一下自己的小经验，希望版主能给我一分，每次看到好东西因为没分都没法下，好羡慕有分的人啊。当然也不能不劳而获，说一下自己的实验技巧给大家分享。

1.配SDS-PAGE胶时，用枪头混匀比较麻烦，而且费时费力，效果也不好。可以剪一小段夹文件的那种曲针做转子放到配胶的小烧杯里，在磁力搅拌器上边搅边加入各溶液，这样加完也就混匀了，直接灌胶即可。2.上面的站友也说过，上样用黄枪头就行，我也一直在用，根本不用注射器，方便的很，建议大家也试试。3.电泳后考马斯亮蓝染色一般要1h到2h，脱色也要2h左右，麻烦的很。现在给大家说一个简单的方法，是我从一个师姐那里学到的。

加入染色液后，先放入微波炉里加热5-10秒，使染色液微热即可（千万不要加热太久，否则冰醋酸就挥发了）。然后放水平摇床上摇20分钟，最多半小时就染好了。

脱色也很简单，不用脱色液，直接用去离子水，放微波炉里煮沸5分钟左右，然后将水倒掉，再换上新的去离子水煮，这样反复几次，就可以了。效果可能比正常的脱色稍差一点点，不如那样清楚，只要电泳时比平时多上1/5的样品就可以了，关键是这样省时省材料（用不着含甲醇和冰醋酸的脱色液）。方便快捷！放心，反复煮胶不会把胶煮坏的。

26.我也说说我的小经验。可能大家都知道，请别笑话我。

1、配胶时一定要掌握好时间，不要因为过度赶时间，而造成以后的条带粗大，压不成条带，且消耗很多试剂和时间。

2、加样时，冲洗加样器可用双蒸水，用电泳液会使加样器中有很多的泡沫。或许是因为SDS的原因吧？

3、对于大分子蛋白质，转膜过夜更好。滤纸的张数可以适当减少。

4、在跑样时同时加入MARKER有助于正确识别所需的蛋白位置，减少NC膜的消耗。

5、一抗、二抗的浓度不要太高。

6、做ECL显影时，根据荧光的亮度调整时间。泡完显影液，胶片应用水洗一下，以减少定影液变黄。

7、和有经验的同学交流，也是非常重要的。知识的交流绝对有助于试验的成功。这是我目前的一点拙见。

27.推荐一个省质粒试剂盒硅胶柱与溶液的方法：

所有试剂使用手提质粒自己配置的溶液

一、溶液

二、溶液三（代替试剂盒的solution1、2、3），然后一比一的与饱和碘化钾或碘化钠（代替结合缓冲液）混合，就可以让质粒在硅胶上结合，而试剂盒的硅胶柱可以重复使用，没有试剂盒溶液量的限制，只要是一样的质粒我想提几管就提多少。

顺便说一句硅胶柱也可以用自己买的硅胶粉末代替，离心后倒掉硅胶柱上面的上清就可以，用起来不象柱子方便。效果比手提的要好要快。

28.做WB时,样品比较多, 又怕放时间长了对蛋白样品不好,而且确定以后肯定要做某个抗体,只是一时没有决定.那么你可以选择先做SDS-PAGE,并转膜.然后把PVDF膜凉干, 放四度保存.以后拿出来封闭后,加抗体就行了.蛋白在膜上,且已经分离, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵

29.今天作his纯化的时候，又琢磨了一个窍门，与大家分享。我得样品比较多，几百ml，而柱子不够大，只有10几ml，跑来跑去的上样，还总得记着，太麻烦了。于是，我就刷干净了一个烧杯，装了我的样品，找了一个细胶皮管，当连通器，就像鱼缸换水一样，用5ml枪在一头一吸，液体流出来，放到纯化柱里，调好烧杯的位置，两个液面一样平了，呵呵，上了好几个小时了，没有问题，现在调低速度，过夜上样：）30.能导致PAGE胶不凝的原因主要有三个：

1、配胶中用到的主要试剂的配置。

主要就是30％的丙稀酰胺的配置。粉末状的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不应该超过一年，因为丙稀酰胺会吸潮水解，这样以来丙烯酸的含量就会加大，从而导致page胶不凝。

2、温度。

温度高时凝固快，但是亦不宜过高，因为温度变化会影响交连物的孔径大小。所以温度在25度最为合适。

3、氧气。

氧气是凝固的终止剂，所以不能让胶中出现气泡。虽然都是些看起来听低级的错误，但是不注意还是会犯。31.我做2维蛋白电泳，也有些心得：

1、向电泳玻璃板内加入胶条时，先在缝隙中加入配好的溴芬兰缓冲液，要加满，再将胶条贴后面玻璃板壁用薄塑料片将胶条缓缓推下至凝胶上缘，这样可以很好的避免胶条下形成空气泡。

2、能做出好的图谱已经很不容易了，如果在扫图时撕破实在可惜，所以扫图要小心，将凝胶转移到扫描仪时可以用塑料隔片在下面托着，同时保持有些水，这样就安全多了。32.凑个热闹说两句吧

1、sds-page胶如果配好装好倒入内槽液以后，发现内槽液稍有渗漏，可以把外槽液多加一些，加满，加到与内槽液相齐，这样就可以继续正常跑胶，不用浪费已经加进去的内槽液

2、至于染色脱色的问题，我们这里一直是染色：加热半分钟，摇20分钟；如果染液不是新配的，就加热半分钟摇十分钟，凉透了再重复一次即可 脱色也一直是用去离子水煮两三次即可

3、不知道大家都是怎么做酶切的，我的体会是，酶切质粒时，两个酶分别单酶切比直接双酶切效果要好很多。我有一次双酶切两次都没连出来，后来分步单酶切，连接效率几乎100%。

可以第一个酶切完后直接把体系热失活，（根据酶说明书上一般是65度20min）然后直接向里面补第二个酶

或者第一个切完后用氯仿抽提，把蛋白提出

或者中间做一次回收，这个就要考虑回收效率和损失的问题了，但是这样除蛋白最彻底 前两个方法我们这都是有人做过的，已经都很好用了

33.俺也来说说关于Bradford法蛋白浓度定量和DTNB法巯基浓度定量的一点体会：

我是做蛋白修饰巯基后，通过这两种方法的定量来间接反应修饰的程度。一路摸索过来，也有半年有余；最大的体会就是不要急于求成，直接实验，首先检测修饰体系是否对方法有影响，修饰基团是否会在595nm和412nm下有特定的吸收，修饰后修饰试剂本身是否会有变化，对蛋白整体结构造成影响，其次再谈具体修饰比例和程度。对于巯基浓度测定方法，有四种（Anal Biochem.1998 Dec 1;265(1):8-14），而DTNB本身虽然灵敏度不高，但是重复性和抗干扰是最佳的了。

34.考马斯亮蓝染色后的脱色，如在脱色液中加数张捏成条状的Kimwipes纸（国外实验室常用，相当我们的擦镜纸，全棉纤维制造），由于染料吸附到纸纤维上，脱色加速。待纸着色较深时，更换新纸条，不用换液。我想脱脂棉或纱布也是一样的。但滤纸等可能不行，会溶掉。

半贴壁细胞如SP/0或杂交瘤细胞传代时，不用吹打或刮落。先将上清吸出，适当拍打培养瓶（当然是塑料瓶，玻璃瓶拍碎了别找我），即可见贴壁细胞脱落，加培养基混悬即可。注意，过力拍打培养瓶会裂，特别是瓶颈。

35.一向电泳时，盐离子容易聚在 胶槽的两侧．剪一小段ＩＰＧ胶条放在两侧，构成盐桥，电压就容易上去了．避免一向电泳不好影响最后实验结果． 36.我也推荐几条：

1、关于20021108战友的说法，我觉得我们制备好了一批感受态，最好马上转化一种已知质粒，与此同时，取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒，又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格，那以后就可以放心使用！因为我也曾经遇到其实是因为感受态不好而导致试验不成功，但是当时不知道，结果费时费力。

2、做克隆挑斑时，我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前，在一块相应抗性的平板上点一下，标注清楚，培养时间稍长一点，待长成较大菌落后收取。以后需要哪一个菌,就在平板上挑取。这样既方便快捷，又可以保证菌的一致。

3、抽提质粒时，加入Sloution II和III后要求轻柔混匀。我个人觉得不用这样，只要不是非常剧烈，可以快速混匀。尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候，这样可以快速，而且效果一点也不差。

4、抽提质粒时，用无水乙醇沉淀的时间可以由实验操作者来决定，如果时间充裕可以30min，否则8-10min也可以。至于温度，个人觉得-20度好于常温。如果加入可醋酸钠，会较容易形成盐类杂质，所以时间短一些更好！

今天想到这些，先写到这里，以后想到了在上来与大家分享。希望我的小经验对大家有所帮助！37.首先声明：实验中的一些技巧要用在首先对基本的操作有深刻了解的基础上，在力求省时、省力、节约成本等的同时，实验的准确性是最重要的。

对大多数做蛋白的战友们来说，培养细胞应该是不陌生的，我这里谈一个培养细胞的小技巧，大家知道，对于一定的空间（如某种尺寸的细胞培养瓶）来说，细胞数目太多或者太少都不利于其生长，太多了就要消化，太少了要换一个小点儿的培养瓶，我的做法是：如果细胞数目太少，可以不必去找小一点儿的培养瓶，可把原来的培养瓶由原来的平放改为竖着放，这样底部的空间就小了，有利于细胞的生长，当细胞数目增加到一定程度的时候还可以在平过来，避免了来回换培养瓶而增加污染的机会（对没有小培养瓶的更实用）。

个人体会，仅供参考。

38.说说关于SDS-PAGE的几个小经验

1、做好胶后，把所有的加样孔都加上样，这样可以防止边缘的样品脱尾。

2、高电压/高电流电泳时，可以把电泳槽放到4度冰箱中进行电泳，省时省力，1hr搞定。

3、胶考染时间40min，放在凝胶摇床上（没有胶床可以放到28度普通摇床上，但要控制好摇床速度）缓缓摇动，使染色均匀，同时可提高检测的灵敏度，根据我的经验可以达到银染的级别，就是脱色时间比较长，一般需要脱色2－3d，夏天的时候要勤换脱色液，防止变臭哦

39.质粒小提如果是用作鉴定或酶切，不必进行酚仿抽提，将溶液1.2.3 离心后的清液移入一个新的1.5ml离心管中，再次离心3-5分钟，小心取出上清液后，直接沉淀，不必担心DNA切不开，我已经这样使用一年多，没出过什么问题。当然这样的质粒不很干净，但是做鉴定足够了。尤其是实验室女同胞们，可以减少酚仿的侵害，而且节省时间。

分子生物学当中的经验教训及技巧[copy](2009-03-23 15:02:08)大家平时做实验，肯定都有很多小的技巧，在书上都看不到的，也没有系统的整理，但是确实能够起到很好的作用，不妨在这里与大家分享一下。

任何专业任何点滴的东西都行，也许就对别人有一点好处哦！举个例子：

我在用酶标板加样的时候，蛋白样品常常会产生很多气泡，如果做荧光实验，由于灵敏度非常高，一点点微小的气泡都会影响很大，常常又不可能加消泡剂，我就用卫生纸，撕下来一下条，搓成小针，碰一碰气泡就破了，很好使：）

1、酶切或者PCR体系混合好以后，大家都会用手指轻弹EP管的底部来混匀溶液，常常出现很多气泡。这时候轻弹液面上方的管壁，消除气泡就轻而易举了。千万别弹液面下方的，气泡会越来越多。

2、CR不要一次做太多样品 有时候机器不稳定 影响结果

3、用卫生纸是一个，我觉得最好的是用接种针烧热了之后去戳一下，防止被卫生纸污染哈 建议瞬间离心一下是最好的，不但消除气泡，还有将管壁上的液体离下来，否则可能不够分装

4、卫生纸主要成分是纤维素，一般并不会污染样品，除非你做分析实验，之所以用卫生纸是因为它会吸水，减少水的表面张力，很容易就让气泡破裂了

5、磁珠回收时，不要贪多，收集上层即可，太过影响DNA的纯度和质量，对链接、转化有影像。

6、各种buffer都要完全融化后才能用，而且不管什么药品，如果只剩下最后一点底子了，最好放弃，因为可能会影响你的实验

7、动手前，一定要思路清晰，尽量把要做的事情列出来

8、做前一定要在笔记上写上1、2、3.....，在按照笔记一步一步做，否则容易出错。

9、要加的酶阿，dNTP，水啊之类的能分装的话最好分装好一点，万一污染的话就全完了

10、实验前,列个表单,列明关键点.避免出错.这样费一点时间是值得的.不要太相信自己的记忆.孤风逐日：任何试剂反复冻融对其效率都有很大地影响。所以买来的试剂第一次使用时要注意按每次实验用量分装保存。提取的模板或纯化的样品也最好分装保存，以备不测。

很多个人经验在个板块相关分析中都有一些提及，只要多加留意就可以学到很多高手的不传经验。

11、同时做很多管PCR时的加样技巧 例如，需要做n管PCR：

1.如果用同一对引物扩不同的模板，可以先按照事先确定的比例，按照n+2的量把水，反应缓冲液，dNTP，镁盐，引物和Tag酶先加到一个大管里面，混匀后就是“预混合液”了，然后把“预混合液”分装到做PCR用的小管里面，通常我会分装n+1管，最后向前n管里面入模板，混匀，最后一管不加模板而是加入和模板等量的无菌水，作为对照，以检查加样过程中是否引入了污染，接下来就可以进行PCR反应。2.如果用不同的引物扩同一模板（不做多重PCR），则将第1点的引物和模板次序调换即可。3.同理，如果用不同的引物分别扩不同的模板，则将引物和模板留在最后分装后再分别加入。

这样做的优点：可以大量减少取样次数，减少了不同PCR管之间的误差（这一点对于荧光定量PCR尤其重要）；节省时间。

缺点：如果在制备预混合液时的任何一步引入了污染则会导致这一批次的所有PCR反应都被污染，所以我每次都做一个阴性对照（用无菌水替换模板），以检测是否被污染。

12、如果遇到试验有很多步，只是自己看protocol做，没有人带而且是第一次，我建议确立好步骤，然后每做一步的时候只注重眼前这一步，认真的做，不出错。这样每一步都只是关心眼下，可以集中精力，并且每一步都保证无误，最后结果应该不会太坏，而且即使出了问题，可以排除操作的因素。

13、跑PAGE胶染色的技巧吧：

其实是我自己的亲身体会，大家都知道如果严格按照protocol上的去做不但浪费药品，也浪费时间，程序还繁琐，当然代价也高些。

1、如果你跑的是小板的（SSR之类的分析足够），那么先找来4个1升左右的空塑料瓶，洗干净（我用的是上海国药的装尿素瓶，带盖的），用来分别装银染要用的固定液、染色液（硝酸银）、显影液、纯水，在每个上面分别写上名字，以免弄错，每次回收这些溶液后，把盖子拧紧，以阻止一些挥发或分解吧，延长使用“寿命”。

2、一般的书上都说显影液只能用一次，其实完全不至，我一般都是至少用2次，根本一点问题都没有。还有固定液和染色液也可以适当多用几次，只要能然出来就行。

3、有的时候实验室用超纯水so多，也so浪费，或是一时半会制不出来，而染色要用怎么办呢，我无意中就用蒸馏水代替，什么问题都没有，根本没啥差别，甚至于后来我压根都不用蒸馏水了，干脆改自来水，也没啥问题，完全可行，不信大家可以试试，呵呵，虽然说是可能某些地方不是很合理，但对一般像做分子标记之类的根本没啥影响，替老板能省就省点吧，大家都不容易，哈哈!还有我忘了说了，以前经常跑完胶后来不及染色就得回寝室了，怎么办呢，不用熬夜，就把胶剥离下来泡在固定液里，第二天早上再来接着下面的步骤一点问题都没有，就是可能胶尺寸会有些变化，但绝对不影响你的结果。

最后一个就是读带问题，我见过别人好多种方法，但我自己“发明”了一种实用、准确的：

找一块大点的普通玻璃板(我当时用的是跑大垂直板胶的），带上手套（保护好自己，虽然聚合后毒性小，但还是有的），快速把胶捞出来，放在玻璃板上，再迅速把玻璃翻个面，平放在观片灯上，只要你速度快，胶是不会掉下来的，会紧紧贴在玻璃上的，最好玻璃板和管片灯的平面有点空隙，否则胶粘住观片灯表面就会把灯面弄脏，胶也可能会掉，一切弄好后，你就可以直接那笔在玻璃的这个干净面上一清二楚的读带，直接可以往上面写带型，然后为了以后检查用，最好用数码相机快速拍照保存，不但胶上的带可以看清，你在玻璃上写的带型数字也是非常清楚的，当然读完的胶就可以立即扔掉，没必要保存

14、做实验时，认真做好记录，写好实验结果，过一段时间再去看看，温故而知新

15、有些时候做完ＰＣＲ，由于条带很淡，但你想回收．不妨将有目的条带的胶切下来．放到－２０度冻一会，拿出吸它的液体作摸板，再扩增效果很好！

16、做转染，我养过四五种细胞，都做了转染，但每种的转染率都不一样，本人当时就吃了这个亏，提醒大家，谁做转染事前先查一下要转的细胞转然率怎么样。

还有就是我在用脂质体2000做转染时，一次发现转染6小时后的液体打到其他细胞里仍可以转进去，所以为了提高转染率，我以后在6小时的时候都没有把转染液体打出去，只是又加了含血清的培养基。但有一个问题就是，不打出去的话，细胞会死很多，这个也与养的细胞种类，状态都有关。PCR预混:预混一般根据样品的多少，一般我在预混的时候大概每个样品管中预计损失0。5－0。6微升，这样计算需要的总的预混液数量，比较合适。

18、做实验前 一定先写出步骤和列出实验所需要的试剂和器材，下面看看哪些是要购买的，哪些是需要清洗的，哪些是要前处理的如过滤、高压。

定试剂一定要打提前量，不好买的试剂一定要在3周左右前订购，如在SIGMA订货。实验的时候一定要坐好标记！什么时间，多少浓度，如PH值,是否过滤了，做完实验有写离心或过滤的残液，先不要丢弃，万一实验失败，还要重复的。实验中的每个环节都很重要 忽略任何一个都可能导致实验的失败

每个人在实验中都有自己的一些好的细小的习惯

例如tip头吸完后马上从移液器上取下来，以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂 用完量桶或者烧杯后，及时清洗，并放入烘箱。不管大小实验，做完后都要认真做记录。

一个枪头如果可以连续吸两次的话，也不能吸，主要是第二次吸时不准，同时也不能完全打出来。做完实验擦干桌子，一切东西归位，有些东西可以回收的就回收，很多实验室的枪头是回收的 实验前认真设计，作实验时不胡思乱想，叽叽喳喳，做完后在海阔天空，认真分析试验数据

做之前认真设计,做时就不要老是想着结果,平心静气,注意细节，认真记录，因为失败是常事，不要回过头不知道该从哪里找原因。

每次的实验结束，要及时做好记录，不要等。好记性不如烂笔头，这虽然是俗语，但是不要放弃笔的重要性！

加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均

做完实验，清理实验台，以便下次能够更快、更好，更方便的继续工作！药品归位，仪器归位！做实验一定要有计划,最好在有部分实验数据出来时,就着手写文章,这个不是为了出文章,而是在写文章的时候,可以清晰自己的思路,知道后面该先做什么,该重点做什么.不然有时候辛苦半死,数据太分散,不能说明问题.不轻易用别人的东西，用时先打招呼，记录要详细，配液体时要记录试剂的批号等? 所有的东西都要即时标记好，日期，药品名称，浓度，等

移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性。

不用酶标枪时不要一直拿在手里，不可以倒过来（特别是里面还有液体的时候）不要一直说话、聊天~~ 笔记要全~要多全有多全~ 还有一点很关键，笔记要放好，最近我的笔记掉了~哭死 最后，做完实验要洗手~ 离开实验室前或进入实验室前注意水，电是否安全

试验之前看资料的时候，最好规类存放，看过后记下重点内容，并将出处标明，以免日后找不到 一定要记着关水浴箱，切记切记。

第三篇：生活财政小结

2013年工作计划

作为班中的生活委员兼财政大臣，在进行了一学期的工作后，发现了班级工作生活中的某些漏洞和不足。

首先，上学期的收入主要来自与开学初收取的班费；知道上学期末，最后的余额为255.8元。

上学期使用班费时，总是发生买回来的东西无用或是重复购买的事，导致班费的浪费。希望这学期同学在预支班费的能做好预算分析，并且购买班级用品时能货比三家，在班集体中弘扬简朴节俭精神。当然，最后还要记得要收据或发票。

上学期每个月收取伙食费，同学们总是不能及时地、高效率地把伙食费交齐。而当本学期第一个月收取伙食费时，只用了两天同学们就将钱交齐了。本学期，希望同学们能在各方面收取费用时交费及时高效。作为班级的财务大臣，当然希望班级的财政在自己的精心打理下能呈现日益上升的趋势。这学期，如果能在班级同学的支持和我这个生活委员的努力下，我们这个“不二之家”一定能蒸蒸日上！

张伊妮

高一（2）班

第四篇：生活委员小结

生活委员小结

转眼间已经是大二下半学期了，我担任08届3班的生活委员一职也已经快2个年头了。

在这两年中，我从懵懂无知遇事手忙脚乱到现在自认能游刃有余地处理生活委员的相关事物，不能不说这个职位给了我很多锻炼。初时竞选这个职务，只是因为觉得自己还算细心耐心，也有一定的责任感，应该可以胜任，可当上后才明白，这样是远远不够的。

担任生活委员，除了要处理班级财务上的一系列事情外，还要为班级后勤做好服务，在上个学期，除了一些支出诸如班级报刊的订阅，或者材料的复印，我们班还举办了两次班会，一次是为马冯莉同学办的参军送别会，还有一次是元旦和圣诞的双蛋晚会，从教室布置到采买东西，我都尽了自己应该尽的一份力，做好了身为一个生活委员应尽的职责，其过程虽然琐碎繁忙，但我却能乐在其中，因为这不仅在一定程度上培养了我的能力，也锻炼了我的心性，使我遇事更加沉着冷静，有条不紊。

当然，在生活上，我也尽量关心同学，和睦友爱，我还主动担任了女生寝室的厅长，以便更好的为同学们服务。作为一个生活委员，除了在班级财务上要有一丝不苟的态度外，还要有很好的沟通交涉能力。我承认在大学以前我都是一个性格内向不愿意多说话的人，所以在第一次收班费或者第一次安排同学做劳动时，我委实遇到了困难，但我渐渐明白，这是我所欠缺的能力，我必须不断地完善自己，大学是个很好的炼钢炉，它永远能让你明白你还欠缺什么，还需要向哪方面进行努力，于是我慢慢愿意与人沟通交流，与同学们也越来越相处愉快了。

同样地，在学习上我也刻苦努力，我学会了如何更好的利用时间，如何规划好自己的人生，不浪费自己的生命，获取知识，争取获得奖学金，以做好班干部的带头作用，在能帮助到别人的时候尽量帮助别人，与班级同荣辱共进退。

所以说，进入大学的两年，我觉得我成长的不仅是年龄，更是人格。或许有一些困难，但是在同学与老师的陪伴下，我顺利的走过来了。我希望我的工作能得到同学们的认可，这是我经过两年工作后最欣慰的事，而在以后的工作中我会更加努力的完成自己的工作，也会更加自信，更加努力，做一个真正为大家服务的班干部，希望在以后的日子里，大家能给我提宝贵的意见，让我不断的进步，更好的为大家服务！

第五篇：寒假生活小结（精选）

寒假生活小结

我们刚刚度过一个“健康、安全、愉快、有益”的寒假和“欢乐、祥和、文明”的春节，送走了三个星期轻轻松松的寒假，又迎来了一学期紧张而又快乐的学习生活。现对这个寒假作以下小结：

1、安排好作息时间。

虽然寒假生活十分惬意，但每个同学都过得很有规律，并没有因此而养成坏习惯。每个同学都制定了一份合理的作息时间表。安排好自己的作业、活动和休息，养成了良好的生活习惯。

2、提高安全意识。

由于很多家庭都是双职工，因此，有些同学在暑假里要独自在家。但同学们都做好了防火、防盗、禁毒、交通安全工作。春节期间，大家没有暴饮暴食，没有购买非法烟花爆竹，也没有在内环线以内燃放烟花爆竹。

3、认真完成寒假作业。

两个月的暑假，同学们认真完成暑假作业，做到温故知新，并为新学期的学习作好充分准备。还利用寒假，看了不少课外书，增长了知识，与书交上了好朋友。

4、做父母的好帮手。

作为家庭中的一员，假期里，同学们能主动帮助父母做力所能及的事，体验了爸爸妈妈持家的辛苦，也锻炼自己劳动的能力，还从中学会了几种劳动技能。

5、关心时事。

在寒假里，同学们能每天收看电视新闻或收听广播，了解国家大事，增强了自己的爱国意识和责任意识。

6、坚持体锻，增强体质。

虽然寒假十分寒冷，但同学们能坚持体锻，如：跳绳、踢毽子、排球等。通过体锻，增强了体质，也培养了坚强的意志。

7、作好新学期准备。

在寒假里，每个同学根据自己的实际情况，做了新学期的打算，为自己定好了新学期的新目标。这样，有了目标，才有动力;有了动力，才会进步。

2016年学校寒假生活工作总结

快乐而短暂的寒假带着春节的喜庆一晃而过，踏着春天的脚步，老师和孩子们带着收获和成长的喜悦重返美丽校园，又将迎接一个新的学期。回顾寒假生活，大家都觉得在寒假中过得有滋有味，生活丰富多彩。现将情况总结如下：

一、认真做好假前宣传教育工作。

寒假开始前，分别召开了学校领导班子会议、班主任会议及全体教职工会议，明确了各自的工作任务，同时还给向全体学生家长发了一份《寒假致家长的一封信》，使学生家长明确学校寒假工作的指导思想、要求、安排，并请家长配合学校关心、指导、教育好孩子的寒假生活。

二、开展了丰富多彩的寒假实践活动。

感恩教育和习惯养成教育是我校常抓不懈的重点工作之一，寒假期间，学校积极引导学生在假期开展了一系列有意义的寒假活动，通过活动锻炼自我，快乐成长。

1、“小鬼当家”春节感恩主题活动。

假期中，我们许多的孩子主动承担起家庭的一个个小岗位：洗碗、拖地、洗衣服、倒垃圾„„就连低年级的小朋友也已经尝试自己洗袜子、洗红领巾等力所能及的事情。在劳动中，他们体会到了父母劳动的艰辛，培养了学生关心父母、孝顺长辈、感恩社会的意识。

2、“新春送春联”活动。

寒风送春联，墨香暖人心。1月20日——22日，我们学校依托乡村少年宫开展了“送春联”活动。活动现场，我校少年宫的书法老师摆出笔墨纸砚，挥毫泼墨，为村民们现场书写春联，书写的同时也送上了一份份新春的祝福。“花开天下福，马跃人间春”、“春来山水秀，马跃路途款”。村民们拿着一幅幅写好的春联，笑得合不拢嘴。“谢谢你们举办这次活动，为我们现场写春联，让我们可以带着春联喜庆的过年。”短短一个多小时，现场就送出了二百余幅春联。

3、“书香阅读”好书伴我成长活动。

在假期中孩子们除了有计划地认真完成寒假作业外，还通过阅读一些有益的课外书籍，增长见识，并能认真做好阅读笔记，写好读后感。开学后，学校大队部已陆续收到了各班的优秀作文。

4、乡村少年宫实践活动

“乡村少年宫开课了，农村娃娃可以免费学舞蹈、美术、小提琴啦!”2月9日，学校乡村少年宫正式开课，本次活动按照完全自愿的原则免费向学生开放。来自学区四所小学的近100名学生参加了少年宫课程的学习。担任少年宫的老师除了学校有特长的教师外，还邀请了校外的志愿者担任辅导员。乡村学校少年宫活动的正常开展，受到了教师、学生和家长的热烈欢迎和高度评价，产生了广泛的社会效应。一位母亲看到自己孩子的变化，高兴地说：“以前放假，孩子要么在外面‘野’，要么往网吧钻，就算在家也是趴在电视机前一看就是几个小时。现在好了，少年宫让他收了‘玩心’，而且有机会根据自己的兴趣爱好发展特长，真是太好了!”

三、做好假期学校安全保卫工作。

学校加强了假期值班护校工作，注意防火、防盗，确保学校校舍和财产安全;加强门卫管理和夜间巡逻，严防火灾、盗窃和其他突发事故发生，确保了学校财产安全。

寒假是短暂的，但同学们的寒假生活是丰富多彩的，家长的反映也很好，学生得到了许多的锻炼，也收获到了成功的果实。在今后的假期中将继续开展丰富的有利于学生们成长的综合实践活动，不断创新，再创佳绩