第一篇:WB02 胶体金法快速检测瘦肉精说明书概要
瘦肉精快速检测法-盐酸克仑特罗快速检测卡
【简介】
盐酸克仑特罗(Clenbuterol Hydrochloride,简写Clen)俗称瘦肉精,为一种人工合成的β-肾上腺素能兴奋剂,具有扩张支气管的作用。当人食用含有盐酸克仑特罗(瘦肉精)残留的产品后的中毒症状为心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠甚至瘫痪等。国家已经明令禁止盐酸克仑特罗在动物饲养中使用。本试纸用于猪和牛尿液、肉、酱肉及其食用饲料中的盐酸克仑特罗残留的快速筛选检测。
【检测原理】
本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。试剂含有被预先固定于膜上检测带(T)的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。检测限为3ng/ml(3ppb)。
【样品制备】
1.尿液:样本必须用洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器收集。可直接检测,如有浑浊请先离心(3000rpm,5min)取上清。若不能及时检测送检,尿样样本在2-8℃冷藏可以保存48小时。长期保存需冷冻于-20℃,忌反复冻融。
2.肉:装入大约4克碎的肉样本(肉泥)于离心管中(酱猪牛肉加2ml水或PBS),盖紧管盖,在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟;吸取煮出的溶液到1.5ml的离心管中。如有明显黄色浑浊请离心(3000rpm,5min),取上清检测。如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min),取上清检测。
3.饲料:取1g样品粉末于离心管中,加入5ml水,混匀,置于超声波水浴中超声30min(每10min取出混匀1次),超声提取后冷却至室温,于3000rpm离心5min,取上清液进行测试。
【操作步骤】
1.在进行测试前先仔细阅读使用说明书,使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。
2.从原包装中取出试剂,打开后平放在桌面上,请在1小时内尽快使用。
3.吸取待检样品溶液,缓慢滴加80~100μl(约2~3滴)于加样孔中,加样后开始计时。
4.在5分钟内读取结果,超过5分钟的结果判读无效。
【结果判定】
阳性:位置C显示出红色条带,位置T无条带或颜色非常模糊时判为阳性。
阴性:位置C显示出红色条带,位置T同时出现红色条带时,判为阴性。
无效:位置C不显示出红色条带,则无论位置T显示出红色条带与否,该试纸卡均判为无效。
【贮存及有效期】
冷藏,忌冷冻,有效期12个月。
【注意事项】
1.请按照操作步骤进行测试,操作时请勿触摸试纸显示区。
2.如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处更换。
3.本品为一次性产品,请勿重复使用。
4.出现阳性结果,建议用本卡复查一次。
5.自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
6.由于样品(尿和饲料)的差异,有的检测线可能偏淡或偏暗,但只要出现条带,就可判定为阴性结果。
7.若需直接检测标准品,请用PBS或阴性样品配制。
第二篇:腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒说明书(胶体金法)
腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒说明书(胶体金法)腮腺炎病毒概述:
流行性腮腺炎(epidemic parotitis,mumps)简称腮腺炎,别名叫蛤蟆瘟。是儿童和青少年中常见的呼吸道传染病,成人中也有发病,由腮腺炎病病毒所引起。腮腺的非化脓性肿胀疼痛为突出的病征,病毒可侵犯各种腺组织或神经系统及肝、肾、心、关节等几乎所有的器官。因此,常可引起脑膜脑炎、睾丸炎、胰腺炎、乳腺炎、卵巢炎等症状。腮腺炎病毒血清学诊断常用方法有ELISA抗体定量测定和金标抗体IgM定性检测。
产品名称:腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒 包装规格:20人份/盒 检测样本:血清/血浆 检测方法:胶体金法 预期用途:
该试剂盒可快速定性检测人全血、血清或血浆中的腮腺炎病毒免疫球蛋白IgM抗体,用于腮腺炎病毒早期感染的辅助诊断。
检测原理:
本试剂盒是采用胶体金免疫层析技术原理。在金标垫上包被胶体金标记的鼠抗人IgM,,用于定性检测人全血、血清或血浆样品中的腮腺炎病毒IgM抗体。检测阳性样品时,样品中的腮腺炎病毒IgM抗体可与胶体金标记的鼠抗人人IgM结合,形成免疫复合物,由于层析作用复合物及样品在硝酸纤维素膜内部向前流动。当复合物经过T线时与包被的重组MuV-Ag结合,形成“Au-鼠抗人IgM-MuV-IgM-MuV-Ag"而凝集显色。剩余的胶体金标记鼠抗人IgM与C线处包被的羊抗鼠IgG抗体结合而凝集显色,检测阴性样品时,样品中不含腮腺炎病毒IgM抗体,致使不能形成免疫复合物,则只能在C线处显色。
腮腺炎病毒试剂盒主要组成成份:
1、测试板:20人份/盒
2、试剂Ⅰ:1瓶(0.02mol/L)(PBS缓冲液PH=7.4)
3、试剂Ⅱ:1瓶(胶体金标记物)
4、说明书1份
储存/有效期:
试剂盒储存于2℃~8℃条件中,不能冷冻;有效期24个月,生产日期见试剂盒包装外。
收集样本要求:
1、检测样本不能溶血,建议用新鲜血清即时检测,或将样本2℃~8℃保存最好不超过3天。
2、高脂血症血清不能使用
检测步骤:
1、滴入1滴试剂Ⅰ于测试板中央孔中,待完全渗入。
2、滴入2滴(约100μl)上清液于测试板孔中,待完全渗入。
3、滴加2滴试剂Ⅱ于测试板孔中,待完全渗入;
5、渗入2滴试剂Ⅰ于测试板孔中,待完全渗入。
结果判定:
阳性:反应板孔中C端出现红色圆斑,T端出现红色圆斑,为腮腺炎病毒抗体阳性; 阴性:反应板孔中C端出现红色圆斑,T端不出现红色圆斑,为腮腺炎病毒抗体阴性。失效:反应板孔中C端不出现红色圆斑,或C端、T端均不出现红色圆斑,为试剂盒失效。
检验方法的局限性:
1、腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒仅用于检测腮腺炎病毒抗体,对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。
2、抗体含量低的血清样品,不能被检测出来是可能的。部份患者,不产生抗体或产生少量的抗体。此时,可能显示阴性结果。
3、试验结果可疑时,应用其它方法确诊。
产品性能指标:
1、批内精密度:阳性符合率和阴性符合率均应≥95%,反应斑点颜色深浅程度应接近。
2、批间精密度:阳性符合率和阴性符合率均应≥95%。
注:腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒说明书由广州市标健生物科技有限公司技术人员编译,请与原文版说明书为准!
第三篇:水产品中氯霉素的快速检测 胶体金免疫层析法(KJ201905)
附件5
水产品中氯霉素的快速检测
胶体金免疫层析法
(KJ201905)
范围
本方法规定了水产品中氯霉素的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于水产品中氯霉素的快速测定。
原理
本方法的测定以竞争抑制免疫层析原理为基础。样品中的氯霉素经有机试剂提取,固相萃取小柱净化,浓缩复溶后,氯霉素与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和微孔膜检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线颜色深浅比较,对样品中氯霉素含量进行定性判定。
试剂和材料
除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为
GB/T
6682
规定的二级水。
3.1
试剂
3.1.1
正己烷。
3.1.2
丙酮。
3.1.3
乙酸乙酯。
3.1.4乙腈
3.1.5磷酸二氢钠,NaH2PO4·2H2O。
3.1.6磷酸氢二钠,Na2HPO4·12H2O。
3.1.7
氯化钠
3.1.8
复溶液:称取0.12
g磷酸二氢钠
(3.1.5)置于100
mL容量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,制成溶液A;称取磷酸氢二钠7.16
g
(3.1.6)置于100
mL容量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,制成溶液B。取溶液A
2.8
mL、溶液B
7.2
mL、氯化钠(3.1.7)0.85
g,用水溶解并稀释至100
mL,得磷酸盐缓冲液,即为复溶液。
3.1.9丙酮-正己烷(1+9):丙酮(3.1.2)、正己烷(3.1.1)按体积比1:9混匀。
3.1.10丙酮-正己烷(6+4):丙酮(3.1.2)、正己烷(3.1.1)按体积比6:4混匀。
3.2
标准物质
氯霉素标准物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分之式、相对分子质量见表1,纯度≥98.6%。
表1
氯霉素参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量
中文名称
英文名称
CAS登录号
分子式
相对分子量
氯霉素
Chloramphenicol
56-75-7
C11H12Cl2N2O5
323.13
注:或等同可溯源物质。
3.3标准溶液配制
3.3.1
氯霉素标准储备液(1
mg/mL):精密称取氯霉素标准物质(3.2)10
mg,置于10
mL容量瓶中,用乙腈(3.1.4)溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1
mg/mL的氯霉素标准储备液。4℃避光保存,有效期6个月。
3.3.2
氯霉素标准中间液A(10
μg/mL):精密量取氯霉素标准储备液(1
mg/mL)(3.3.1)0.1
mL,置于10
mL
容量瓶中,用乙腈(3.1.4)稀释至刻度,摇匀,制成10
μg/mL的氯霉素标准中间液A。4℃避光保存,有效期3个月。
3.3.3
氯霉素标准工作液(0.01
μg/mL):精密移取氯霉素标准中间液A(10
μg/mL)(3.3.2)0.01
mL分别置于10
mL容量瓶中,用乙腈稀释至刻度,摇匀,制成浓度为0.01
μg/mL的氯霉素标准工作液。临用新配。
3.4材料
3.4.1固相萃取小柱:Cleanert
Silica,200
mg/6mL。LOT:0170198。
3.4.2免疫胶体金试剂盒(在2~30℃、干燥阴凉条件下保存,在产品有效期内使用)。
3.4.2.1
金标微孔。
3.4.2.2
试纸条或检测卡。
仪器和设备
4.1
移液器:200
μL、1
mL和5
mL。
4.2
涡旋混合器。
4.3
离心机:转速≥4000
r/min。
4.4
电子天平:感量分别为
0.01
mg和
0.01
g。
4.5
样品浓缩仪:如有需要。
4.6
环境条件:
温度:15~25℃,相对湿度:≤60%。
5分析步骤
5.1试样制备
取具有代表性样品约500
g,充分粉碎混匀,均分成两份,分别装入洁净容器作为试样和留样,密封,标记,于常温保存。
5.2试样提取和净化
准确称取试样6
g(精确至0.01
g)置于50
mL具塞离心管中,依次加入1
mL水和8
mL乙酸乙酯(3.1.3),涡旋提取5
min,以4000
r/min离心5
min。转移全部乙酸乙酯层于50
mL具塞离心管中,加入正己烷25
mL,氯化钠1
g涡旋混匀,4000
r/min
离心1
min,上清液待净化。5
mL丙酮-正己烷(1+9)(3.1.9)淋洗LC-Si硅胶小柱,弃去淋洗液,将待净化溶液转移到固相萃取小柱上,弃去流出液,用5
mL丙酮-正己烷(6+4)(3.1.10)洗脱,收集洗脱液,洗脱液于40℃氮气吹干,精密加入600
µL复溶液(3.1.8),涡旋混合1
min,作为待测液。
5.3
测定步骤
5.3.1
检测卡与金标微孔测定步骤
吸取150
µL样品待测液于反应微孔(3.4.2.1)中,抽吸
5~10次使混合均匀,室温温育3
min;温育结束后,将金标微孔中溶液滴加到检测卡(3.4.2.2)上的加样孔中,室温温育5~8
min,对结果进行判定。
5.3.2
试纸条与金标微孔测定步骤
吸取150
µL样品待测液于反应微孔(3.4.2.1)中,抽吸5~10次使混合均匀,室温温育3
min;温育结束后,将检测试纸条(3.4.2.2)吸水海绵端垂直向下插入反应微孔中,室温温育3
min,从微孔中取出试纸条,去掉试纸条下端的吸水海绵,并于5
min内进行结果判定。
5.3.3
检测卡测定步骤
吸取150
µL样品待测液滴加到检测卡(3.4.2.2)上的加样孔中,室温温育5~8
min,对结果进行判定。
5.4质控试验
每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。
5.4.1
空白试验
称取空白试样,按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
5.4.2
加标质控试验
准确称取空白样品6
g或适量(精确至0.01
g)置于15
mL具塞离心管中,加入180
μL氯霉素标准工作液(0.01
μg/mL)(3.3.3),使氯霉素浓度为0.3
μg/kg,一式2份,按照
5.2和5.3步骤与样品同法操作。
结果判定要求
通过对比控制线和检测线的颜色深浅进行结果判定。由于长时间放置会引起检测线颜色的变化,需在规定时间内进行结果判定。目视结果判读依据如图1所示。
6.1
无效
控制线(C线)不显色,表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。
6.2
阳性结果
检测线(T线)不显色或检测线(T线)颜色比控制线(C线)颜色浅,表明样品中氯霉素含量高于方法检测限,判定为阳性。
6.3
阴性结果
检测线(T线)颜色比控制线(C线)颜色深或者检测线(T线)颜色与控制线(C线)颜色相当,表明样品中氯霉素含量低于方法检测限,判定为阴性。
6.4质量控制要求
空白试验测定结果应为阴性,加标质控试验测定结果应为阳性。
结论
如被测样品中氯霉素检测结果为阳性时,应采用确证方法进行确证检测。
性能指标
8.1
检测限
氯霉素为0.1
μg/kg。
8.2
灵敏度
灵敏度应≥98%。
8.3
特异性
特异性应≥90%。
8.4
假阴性率
假阴性率应≤1%。
8.5
假阳性率
假阳性率应≤10%。
注:性能指标计算方法见附录A
9其他
本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便,在使用本方法时不做限定。方法使用者在使用替代试剂、试剂盒或操作步骤前,须对其进行考察,应满足本方法规定的各项性能指标。
本方法参比标准为GB/T
22338-2008
动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定
(包括所有修改单)。
附录
A
定性方法性能计算表
样品情况a
检验结果b
总数
阳性
阴性
阳性
N11
N12
N1.=N11+N12
阴性
N21
N22
N2.=N21+N22
总数
N.1=N11+N21
N.2=N12+N22
N=N1.+N2.或N.1+N.2
显著性差异(χ2)
χ2=(|N12-N21|-1)2/(N12+N21),自由度(df)=1
灵敏度(p+)
p+=N11/N1.特异性(p-)
p-=N22/N2.假阴性率(pf-)
pf-=N12/N1.=1-灵敏度
假阳性率(pf+)
pf+=N21/N2.=1-特异性
相对准确度
(N11+N22)/(N1.+N2.)
注:N:任何特定单元的结果数,第一个下标指行,第二个下标指列。例如:N11表示第一行,第一列,N1.表示所有的第一行,N.2表示所有的第二列;N12表示第一行,第二列。
a由基准方法检验得到的结果;
b由本方法检验得到的结果。灵敏度的计算使用确认后的结果。
本方法负责起草单位:山西省食品药品检验所。
验证单位:陕西省食品药品检验所、广东省药品检验所、四川省食品药品检验检测院。
主要起草人:李倩、阎安婷、陈煜、杨国伟。
第四篇:瘦肉精双拼检测卡说明书(完整版)
苏州快捷康生物技术有限公司
盐酸克伦特罗-莱克多巴胺金标检测双拼卡
使用说明书
【产品简介】
本产品运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行动物尿样、组织和饲料中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺残留的快速定性检测,不需要任何仪器,整个检测过程只需要3-5分钟左右,灵敏度为盐酸克伦特罗:5 ng/mL(5 ppb),莱克多巴胺:5ng/mL(5ppb)。
【适用范围】
适用于动物尿样、瘦肉、肝脏、肺脏、肾脏和饲料等样本中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的测定。检出限为盐酸克伦特罗:5 ng/mL(5 ppb),莱克多巴胺:5ng/mL(5ppb)。
【
一、尿样收集】
尿液标本必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。若不能及时送检,尿样标本在2ºC-8ºC冷藏可保存48小时。长期保存需冷冻于-20ºC,忌反复冻融。
【
二、组织样本收集】
组织样本(包括精肉、肝脏、肺脏和肾脏)立即检测或收集在塑料袋中送检。若不能及时检测,样本在2-8℃冷藏可保存24小时,-20℃冷冻保存1周,冷冻时忌反复冻融。将组织样本剪碎,称取0.5g组织样本装入我公司提供的配套组织提取液中。充分混匀,然后将离心管放入90℃以上沸水浴加热10min 便有液汁浸出,取出此离心管放至室温,(如条件具备,将离心管放入小离心机中,4000转离心5分钟后,取上清为待检液),如果没有离心机,需将离心管静置15分钟,此离心管中的样本渗出液为待检样品,检测时应尽量取上清液。
【试剂盒组成】
1、瘦肉精双拼卡快速检测卡
40根
2、说明书
1份
3、一次滴管
40根
4、一次性手套
5双
【操作步骤】
1.在进行测试前必须先完整阅读使用说明书,使用前将检测卡和尿样标本恢复至室温。2.从原包装铝箔袋中取出检测卡,在1小时内应尽快地使用。
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3.将试剂盒置于干净平坦的台面上,用塑料吸管垂直滴加2-3滴无空气泡的尿样(约60ul-80ul)于加样孔(S孔)内。
4.结果应在3~5分钟读取,且30分钟内结果不会有任何改变,根据示意图判定结果。
【结果判断】
【注意事项】
1、检测卡请在保质期内一次性使用;
2、检测时避免阳光直射和空调直吹;
3、如果尿样和组织提取样本出现沉淀或浑浊物,请离心后再检测;
4、操作失误,以及标本中存在干扰物质,有可能导致错误的结果。
5、不洁净尿,如含有漂白剂、明矾,可能在正确的分析操作方法下也会产生错误的结果,建议离心后再检测。
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6、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
【储存及有效期】
储存于2~30℃,阴凉避光干燥处,切勿冷冻;有效期18个月。有效期及批号见外包装。
第五篇:瘦肉精快速检测卡购置使用管理办法
**县动物卫生监督系统“瘦肉精”快速检测卡使用
管理办法(试行)
第一条、为进一步加强对“瘦肉精”快速检测卡(以下简称:检测卡)的管理,规范检测卡的使用与核算,充分有效利用资源,结合我县实际,特制订本办法。
第二条、**县动物卫生监督所负责检测卡的登记、保管、发放以及使用的培训。
第三条、检测卡由各分所依照本管理办法进行申领、“瘦肉精”的抽检及回收等工作。
第四条、各动卫分所负责每月以纸质材料上报检测卡的使用情况(包括检疫证明使用量、检测台账、检测卡使用量及下月预计用量)。
第五条、财务室每月统计各分所检测卡使用计划,安排上报购置资金并购买。
第六条、在购回所需的检测卡,由财务室做好登记,按各分所预计量下发。
第七条、各分所申领所需检测卡时,经财务室核实库存,综合调配,填写申领单,经县所主要领导批准后,财务室按领用程序执行。