第一篇:细菌鉴定方法
细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段,细菌鉴定方法。2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作。国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个重要组成部分同步启动。作为该项8的一个重要组成部分,微生物菌种资源整理、整合工作同期启动,在此项工作中,中国兽医药品监察所承担了兽医微生物资源整理、整合工作。本所在行业内发展了数家加盟单位,在整理、整合菌种资源的过程中遇到了一些实验室细菌鉴定结果出现偏差的问题。经分析调查,多是由于实验室人员结构以及实验室的硬件水平差别较大等原因,造成实验室间鉴定能力的参差不齐,致使鉴定项目完成情况不尽相同,细菌鉴定结果出现偏差。
细菌鉴定是指将分离培养获得的病原菌,通过纯化培养使其达到不含有其他微生物的纯培养程度,继而进行系统鉴定。而菌种保藏机构在收集一些已经冻干的菌种时,应在开启后经过两代的适应性培养方可进行复核性的系统鉴定。系统鉴定是通过细菌的形态结构、生长特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测,并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型(群)。目前菌种保藏机构通常使用的细菌鉴定方法大致有以下几种:
1、传统方法
常规宏观菌落形态学观察,主要观察菌落在其适合的培养基上的生长状况:细菌在固体培养基上的生长形态、大孝颜色是否均匀一致,菌落个体表面及边缘的生长状况;在液体培养基上的浑浊状况、沉淀状况、液面菌膜状况;半固体上穿刺接种后,观察细菌是否沿着接种线生长以及其生长状态是呈毛刷样生长还是均匀生长,上下生长是否一致。在鉴别培养基上培养,观察结果是否跟预期结果相同。
细菌的个体形态学观察,即通过显微镜观察。观察前细菌需要着色,要根据预先确定的观察项目选择与之相对应的染色方法,目前常用的染色方法包括革兰氏染色法、美蓝染色法、Ziehl—Neelsen染色法、姬姆萨染色法、鞭毛染色法、芽胞染色法等。尽量挑选对数生长期的细菌进行染色观察,此时的细菌生长处于幼期,利于观察,因为一些陈旧细菌的染色结果会有变化,如本为革兰氏阳性菌经过长期搁置后染色结果可能为革兰氏阴性。同时细菌培养时要注意培养基的挑选,一些细菌的特殊结构如荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞等,其表达是需要在特定的培养基上才能正常发育,有的细菌如炭疽在一般的培养基上不形成荚膜,只在动物体内形成明显的荚膜,所以需先接种实验动物后用病料进行涂片镜检。在镜检时观察细菌基本形态结构和大小及其排列状态、菌端形状、有无两极染色、有无形成芽胞和荚胞等。
形态学鉴定辅以生化试验在细菌鉴定中具有重要的意义,生化试验是根据细菌培养过程中不同菌种所产生的新陈代谢产物各异,表现出不同的生长特性。通过生物化学的方法来检测这些物质的存在与否,从而能够得到细菌的鉴定结果。如糖(醇)类代谢试验、氨基酸和蛋白质代谢试验、有机酸盐和胺盐利用试验、呼吸酶类试验、毒性酶类试验等。
血清型鉴定是根据细菌具有相对特异性的抗原结构这个特点进行微生物鉴定的特异方法。抗原的特异性程度又存在于属间细菌所共有的共同抗原,这种抗原的存在,能表明其属性。另一类特异性抗原只存在于特定的种、型,是确定细菌种、型的重要依据。通过专门的分型血清即可对这些细菌的血清型进行鉴定。
细菌毒力的测定,病原菌侵入机体能否引起疾病与其本身的毒力、侵入机体的数量和侵入部位有关。不同的病原菌或同种细菌不同的型或株,毒力常不一致。常用LD50或ID50表示毒力,即在一定时间内,能使一定条件的某种动物半数死亡或感染需要的最小细菌数或毒素量,鉴定材料《细菌鉴定方法》。毒力测定在菌种鉴定过程中可用于鉴别一些有代表性的菌株。LD50可用Reed—Muench公式进行计算。
2、仪器自动化鉴定
随着仪器分析技术的进步和计算机的广泛应用,微生物菌种鉴定逐渐由传统的形态学观察和人工生理生化实验鉴定发展进入了基于仪器自动化分析的鉴定系统阶段。近20年来,一系列商品化自动鉴定系统相继推出,并在应用中取得理想效果,如VITEK系统、MIDl系统、BIOLOG系统、SENSITl.TRE系统、AUTOSCEpTOR系统以及MICROSCAN系统等。下面以BIOLOG微生物鉴定系统为例,简述微生物自动鉴定系统的工作原理:BIOLOG微生物自动分析系统是美国Biolog公司从1989年开始推出的一套微生物鉴定系统,该系统主要根据细菌对糖、醇、酸、醋、胺和大分子聚合物等95种碳源的利用情况进行鉴定。细菌利用碳源进行呼吸时,会将四哇类氧化还原染色剂(TV)从无色还原成紫色,从而在鉴定微平板(96孔板)上形成该菌株特征性的反应模式或“指纹图谱”,通过纤维光学读取设备——读数仪来读取颜色变化(分为“自动”和“人工”两种读取方式),由计算机通过概率最大模拟法将该反应模式或“指纹图谱”与数据库相比较,可以在瞬间得到鉴定结果,确定所分析的菌株的属名或种名。以BIOLOG系统6.01版数据库为例,包含了革兰氏阴性好氧菌524种、革兰氏阳性好气菌341种、厌氧菌361种、酵母菌267种、丝状真菌(含部分酵母菌)619种以及几种特殊的致病菌,目前这个数据库已进行更新。利用微生物快速系统进行细菌鉴定,能节省时间,但由于其在数据比对过程中记入一些非特异性的阳性反应孔,会造成偶然误差,从而引起个别鉴定结果不稳定,另外此类仪器本身及其耗材价格均较高。
3、分子生物学鉴定
分子生物学鉴定目前比较流行的主要是核酸检测技术,包括基因测序、指纹图谱技术、基因探针技术、聚合酶链反应(pCR)、GC含量测定等。pCR和核酸杂交单独或结合在仪器已经形成比较经典的核酸检测技术,目前这两者已经得到了较大范围的推广和应用。
下面将简单介绍几种核酸检测技术的原理:
DNA的G+C含量测定法。此法是根据细菌的DNA中G+C含量的特异性来进行细菌鉴定,通过熔解温度(Tm)法或浮力密度法测定细菌DNA中G+C的含量,通过对比来鉴定细菌。
扩增片段长度多态性(AFLp)分析。此法是一种测定基因组限制性片段的DNA指纹技术,通过pCR选择性地扩增整个基因组DNA的内切酶片段,在分辨率高的聚丙烯酰氨凝胶上电泳,产生一组特异的DNA限制性片段的指纹图谱。与其他DNA指纹技术相比有其独特的优点:可用于各种大小不同的基因组的指纹分析,为研究细菌属乃至株间的亲缘关系提供一个有效手段;具有一定的灵活性,可通过特异性pCR引物的设计和内切酶组合的选择,调整AFLp图谱中限制性片段的适宜数目;由于适用了严格的pCR条件和高分辨率的聚丙烯酰氨凝胶电泳,因而重复性好,分辨率高;AFLp不仅仅是简单的指纹技术,而且可作为连接遗传图谱与物理图谱间的桥梁而用于基因组的研究。
限制性片段长度多态性(RFLp)分析。其原理是用限制性内切酶将细菌基因组DNA进行切割,之后在琼脂糖凝胶上电泳分离,以显示不同种群基因组DNA的限制性片段长度多态性。RFLp产生的指纹图谱更适用于细菌种间及种内株间的分型鉴定。
随机扩增DNA多态性(RApD)分析,又称为随意引物pCR(Ap—pCR)。它是一种DNA指纹多态性分析技术,其理论依据是不同的基因组中与随意引物匹配的碱基序列的位点和数目可能不同,因而用一组人为设计的核苷酸作为引物,通过pCR随机扩增可产生物种特异性的DNA带谱。
16S rRNA鉴定。细菌的核糖体RNA(rRNA)基因高度保守且进化速度缓慢,在漫长的进化过程中保留了rRNA基因结构和功能的同源性,在微生物染色体上可存在多个拷贝,以rRNA基因片段为探针可检出含有rRNA基因的DNA片段。分析杂交后得到的rRNA指纹图,为菌种定型和近缘菌株的鉴定提供了一种新技术。针对rRNA基因的核糖体分型可成功地区分多个菌种的相关菌株,因此该技术也被广泛称作核糖体分型技术。原核生物含有23S、16S和5S三种 rRNA,其大小分别约为3000、1500和120个碱基。其中作为小亚单位核糖体RNA的16S rRNA的大小最适合于核糖体分型。一般完成l6S rRNA序列测定后,在GenBank中与已知的序列进行BLAST分析,从而得出鉴定结果。
4、小结
一般来说,对于微生物的检测或鉴定应当至少使用三种指标同时进行验证。传统的分类鉴定需要测定的项目众多,工作程序繁琐,耗时长。在某些时候可以配合分子生物学的方法进行鉴定,如在进行菌株的血清型鉴定时,对于某些国内资源稀缺的菌株定型血清,而进口定型血清价格昂贵,国内可以开发分子生物学分型方法完成菌株的血清分型工作。而在利用分子生物学方法鉴定菌株血清型时,经常会遇到有一些菌株的血清型种类繁多,目前还无法通过简单的核酸测定完成血清定型工作,如大肠杆菌,仅O抗原就有上百种血清型,对于这种情况在使用血清进行定型的同时,还需要继续深入研究其分型技术。目前市场上的微生物自动鉴定系统虽然基本上都通过了相关权威组织的认可,在细菌快速鉴定或初步鉴定中起到了一定的作用,但如前所述,其稳定性尚存在一定问题,同样需要配合其他方法来相互印证,从而完成细菌鉴定工作。
总而言之,更多地使用传统与现代相结合以及不断发掘新的鉴定方法才能更好地完善菌种保藏过程中的细菌鉴定工作。
第二篇:全自动细菌鉴定
全自动细菌鉴定
仪器简介:
法国生物梅里埃公司最新一代应用经典生化方法进行细菌鉴定的全自动仪器,采用了国际金标准ApI的数据库并继承发展了VITEK第一代产品的自动化处理技术,集成了生物梅里埃几十年的技术和创新于一体,为当今最先进的细菌鉴定/药敏系统,全自动细菌鉴定。
技术参数:
一、鉴定原理:终点法、阈值法;比色、比浊动态分析法
二、菌液浓度控制:液晶数显比浊仪,测量细菌浓度范围0.0-7.5麦氏单位。多点测量,自动显示平均值。
三、自动加样:真空批量加样法,每批可同时处理10个试剂卡,每卡需菌悬液小于4ml
四、自动处理测试卡:自动扫描卡片条码、自动核查卡片与标本资料、自动密封卡片、自动上载试卡,自动孵育,自动每15分钟进行一次检测、自动卸载完成卡,自动报告结果。
五、操作软件:Windows Xp操作系统,简易易用图形界面,鉴定材料《全自动细菌鉴定》。
六、打印机:激光打印机,自动打印实验结果。
七、一次性试卡:64孔鉴定/药敏卡片,带有条形码可指示卡片的序列号和测试的种类。
八、鉴定细菌范围:可全自动鉴定菌种400种,包括:
革兰氏阴性杆菌(含大肠杆菌0157及非发酵菌);革兰氏阳性菌(含猪链球菌1型、2型和7种李斯特菌);酵母菌;需氧芽胞杆菌(含炭疽芽孢杆菌);奈瑟菌、嗜血杆菌、弯曲菌;厌氧菌
九、鉴定速度:95%常见细菌≤5小时;其中革兰氏阴性菌(GN)2~10小时,革兰氏阳性菌(Gp)2~8小时
十、药敏试验:满足革兰氏阴性及革兰氏阳性两大类细菌药敏试验,速度4—15小时,95%常见细菌药敏≤6小时;抗生素已含第4代头孢等
十一、工作容量:30个试验卡
十二、操作步骤:自动真空批量接种、自动扫描卡片条码、自动核查卡片与标本资料、自动密封卡片、自动上载试卡,自动孵育,自动检测、自动卸载废卡,自动报告结果
十三、认证:ISO9001认证:OK;CE或FDA认证:OK;进口医疗器械注册证:OK
主要特点:
1、自动化程度高,操作简单易用。
2、数据库齐全,鉴定准确。
内 容 概 述
关于全自动细菌鉴定等部分检验项目收费标准的复函
内 容 全 文
天津市卫生局:
你局《关于请批准部分新增检验项目收费标准的函》(津卫财函389号)收悉。经审核,对全自动细菌鉴定等4项检验项目收费标准予以核定,具体收费标准(见附件),自2011年11月20日起执行。
二〇一一年十一月二十八日。
第三篇:细菌鉴定系统
细菌鉴定系统
博检革兰氏阴性菌鉴定系统科学可行的鉴定系统
本系统由青岛高科园海博生物技术有限公司联合山东省出入境检验检疫局共同研发设计,经CDC、CIQ等部门验证完全符合GB/T 4789.4、GB/T 4789.5、GB/T 4789.6、GB/T4789.7、GB/T4789.8、GB/T 4789.36、GB/T 4789.40,具有与ApI20E和VITEK GNI+相同的鉴定效果,可广泛用于革兰氏阴性细菌的鉴定,细菌鉴定系统。
方便有效的编码程序
不同种属的细菌具有不完全相同的生化特征。本系统选取21种典型生化试验,并把生化反应的结果转换为一个8进制数,通过提供的标准数据库查询系统可得到实验菌株归属的相对概率、T值和R值,对菌株的归属进行一定程度的鉴定。
强大的数据库支持
当前可鉴定的革兰氏阴性细菌有112种,基本上涵盖了常见的革兰氏阴性细菌。
共有20种生化管及一个氧化酶试纸条,另附配套鉴定系统程序(博检鉴定系统),用于各种革兰氏阴性菌的生化检测
在该套试验系统中,21种生化试验分别为ONpG、精氨酸(ADH)、赖氨酸(LDH)、鸟氨酸(ODC)、柠檬酸盐利用实验(CIT)、产硫化氢试验(H2S)、脲酶(URE)、乳糖(LAC)、吲哚(IND)、Vp、明胶(GEL)、葡萄糖(GLU)、甘露醇(MAN)、肌醇(INO)、山梨醇(SOR)、鼠李糖(RHA)、蔗糖(SAC)、蜜二糖(MEL)、苦杏仁甙(AMY)、阿拉伯糖(ARA)、氧化酶(OX)。博检鉴定系统的原理是:不同种属的细菌具有不完全相同的生化特征。本系统选取21种典型生化试验,并把生化反应的结果转换为一个8进制数,通过提供的标准数据库查询系统可得到实验菌株归属的相对概率、T值和R值,对菌株的归属进行一定程度的鉴定。将细菌各项生化反应结果填入附赠的记录卡中,依次每三项为一组,若这三项反应均为阳性,则分别记为1、2、4,若为阴性,则相应项记为0,鉴定材料《细菌鉴定系统》。将每组三项的数值相加,共七组,组成一个七位数。将所得七位数输入数据库系统中即可进行查询。若某项生化反应结果较难判断,则按照阴性进行记录,但查询时,应在不定的生化反应前打钩。这样,及时是不确定生化同样可以做出鉴定结果。经过我们的反复试验校正,该实验准确率大大提高,同时系统的准确率接近100%,大大缩短了生化鉴定的时间,提高了鉴定效率。
BBLCrystalTM半自动自动细菌鉴定系统
微生物分离,鉴定的传统方法繁杂,周期长,准确性差,灵敏度低,对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高。
BBLCrystalTM半自动/自动细菌鉴定系统是BD公司专为中小型微生物实验室及科研结构而设计的经济型鉴定系统。该系统可在保持鉴定板高度专业性及数据库强大分析能力的前提下,有效利用微生物实验室常规配置--普通恒温孵育箱进行鉴定板孵育后进行差距自动或自动低度器进行结果判读,可最大程度实现资源共享,并在保证实验的准确性、快速性的基础上达到节约试验成本的目的。而其便携式设计则尤其适合于偏远地区用户及临床科研机构流行病学异地考察。鉴定试验原理:
将传统的酶、底物生化呈色反应与先进的BD专利荧光增强显色技术结合以设计鉴定反应最佳组合,使BBL? CrystalTM鉴定系统具备独特、准确、快速、灵敏的特点
鉴定板配置:
配套提供独立分装的鉴定用肉汤试管,确保无菌状态,使用方便。
第四篇:细菌分离鉴定
细菌分离鉴定
目的要求:
熟悉临床标本中常见的病原性细菌的分离鉴定方法,细菌分离鉴定。
实验内容:
一、脓汁、咽拭子等标本中病原性细菌的分离与鉴定
(一)标本采集
1.脓拭子:用无菌棉签蘸取患处深部脓液或分泌物少许,置入无菌空试管内,送检。
2.痰拭子:用消毒容器收集病人痰液,用无菌棉签挑取脓稠痰块,置入无菌空试管内,送检。
3.咽拭子:嘱病人把口张大,用压舌板压住舌根,用无菌棉签迅速蘸取咽部分泌物,置入无菌空试管内,送检。
4.血标本:疑为败血症患者,在严格无菌操作下,静脉采血,床旁直接加入含50ml的肉汤瓶内,立即摇匀后送培养。
5.脑脊液:对疑似流脑患者,作腰椎穿刺取脑脊液,立即行直接床旁接种(送检过程中应注意保温)。
6.尿道、阴-道分泌物:对可疑淋病患者,男性可从尿道取材,取材时导尿管应进入尿道1cm~2cm,如为刚排尿,应等待1h左右;女性则可以从宫颈口取分泌物,当内窥器插入宫颈口后应稍等片刻,再旋转取出,取材应立即送检,不可放置冰箱。
(二)分离鉴定程序
待检标本可直接做涂片染色检查鉴定,必要时可做分离培养、生化反应及致病性鉴定。常见的致病性球菌检查程序如下。
直接涂片、革兰染色、镜检(形态、排列、染色性)
脓、痰、咽拭子
分泌物、脑脊液 观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板→ 涂片、染色、镜检
↑ 挑取可疑菌落 生化反应
血液、穿刺液 →肉汤培养基 纯分离 致病性测定
↓ 药敏试验
如培养液混浊时可涂片、染色、镜检
(三)常见临床标本的检查方法
1.脓拭子
在脓汁中除了球菌外,也有杆菌存在,例如革兰阳性的有炭疽杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌等,革兰阴性的有大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等,此外尚可有真菌、放线菌、螺旋体等。
材料
(1)标本:脓拭子
(2)培养基:血琼脂平板
(3)兔血浆、白色滤纸片、无菌生理盐水、载玻片
方法 脓汁 → 革兰染色 → 镜检
↓ ↑
血琼脂平板 →观察菌落形态及溶血情况
↓
致病力试验
(1)将脓拭子作革兰染色,镜检(先作培养再涂片以免污染),鉴定材料《细菌分离鉴定》。标本放置4℃冰箱保存,待报告发出后再丢弃。
(2)将脓汁涂布于血琼脂平板上,再以灭菌接种环作划线分离。置培养37℃培养18h~24h。
(3)经培养后据菌落特点及涂片检查结果进行初步识别,根据需要再作进一步鉴定。若菌落较大、溶血透明、产生金黄色色素、涂片为革兰阳性球菌并成堆排列时可能系葡萄球菌,应确定其为何种葡萄球菌;必要时再作血浆凝固酶试验及甘露醇发酵试验,确定其致病力。
2.咽拭子
咽喉中存在的细菌较多,可以有厌氧及需氧性链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、四联球菌、脑膜炎球菌、卡他球菌、喉杆菌、结核杆菌枯草杆菌、百日咳杆菌肺炎杆菌及绿脓杆菌等。此外也可有白色念珠菌奋森螺旋体等。本实验以咽拭子作为标本,重点检查病原性球菌。
材料
(1)标本:咽拭子。
(2)培养基:血琼脂平板。
方法
咽拭子
↓
血琼脂平板
↓
观察菌落形态及溶血性
↓
革兰染色,镜检
取标本涂布于血琼脂平板,再以灭菌接种环划线分离,置37℃培养18h~24h培养。标本放置4℃冰箱保存,待报告发出后再丢弃。
可根据下述特点进行鉴别:
(1)在菌落周围产生2mm~4mm宽、界线分明、完全透明的溶血环、涂片为革兰阳性球菌并呈链状排列,可能是乙型溶血性链球菌。
(2)菌落细孝半透明、有草绿色溶血环、涂片为革兰阳性球菌呈链状排列,可能为甲型溶血性链球菌。需要进一步与肺炎球菌区别时,可做胆汁溶菌试验及菊糖发酵反应。
菌落细小半透明、不溶血、涂片为革兰阳性链状排列的球菌时,为丙型链球菌。
(4)菌落扁平边缘隆起、中央稍凹、半透明、呈草绿色溶血、革兰染色为阳性双球菌、呈矛头状排列时为肺炎球菌,应以胆汁溶菌及菊糖发酵反应与甲型溶血性链球菌区分。
(5)菌落中等大孝表面光滑、呈灰色、革兰染色为阴性双球菌,呈肾形排列时,可能为脑膜炎球菌,需要进一步作氧化酶试验及糖发酵试验(接种于含血清之葡、麦、蔗糖发酵管中)。
二、粪便标本中肠道杆菌的分离与鉴定
(一)标本收集
取患者的粪便或肛-门拭子。
(二)鉴定程序
肠道杆菌为一大群革兰阴性杆菌,从形态及染色性上无法鉴别为何种菌,只能依靠生化反应和血清学反应进行鉴定。
患者粪便(粘液、脓血)→肠道选择、鉴别培养基(如ss、中国蓝、伊红美兰)
↓
挑取可疑菌落(据大孝颜色、透明度而定)
↓
双糖铁及其他鉴别培养基
↓
据结果分析鉴定
↓
玻片凝集(做出特异性诊断)
葡萄糖乳糖动力H2S尿素
⊕⊕±--艾希菌属非致病菌
⊕+---克雷伯菌属
⊕±+++变形杆菌
⊕-++-乙型副伤寒致病菌
⊕-+±-甲型副伤寒
+-++-伤寒杆菌
+----痢疾杆菌
第五篇:细菌鉴定手册
细菌鉴定手册
一本有代表性的、参考价值极高、比较全面系统的细菌分类手册,细菌鉴定手册。由美国布瑞德等人主编。1923年第1版,后于1925、1930、1934、1939、1948、1957、1974年相继出版了第2至第8版,每个版本都反映了当时细菌学发展的新成就。其中第8版有美、英、德、法等 14个国家的细菌学家参加了编写工作,对系统内的每一属和种都做了较详细的属性描述。近年来,由于细胞学、遗传学和分子生物学的渗透,大大促进了细菌分类学的发展,使分类系统与真正反映亲缘关系的自然体系日趋接近。第9版(1984,1986)中实质性的变化,象征着细菌分类学的发展进入新的阶段。第一,手册更名,原书名为《伯杰氏鉴定细菌学手册》,第9版由于内容增加,范围扩大,提高了手册的实用性,同时指出各类细菌间的关系,所以改名为《伯杰氏系统细菌学手册》;第二,由1卷分成4卷,这是考虑到能及时反映新进展和使用者的方便;第三,细菌在生物界的地位,8、9版间无变动,但它们的高级分类单位有很大变化,尤其嗜盐细菌和产甲烷细菌,根据胞壁分析和DNA序列分折,另列疵壁菌门,古细菌纲;第四,趋近自然体系,在各级分类单位中全面应用核酸研究;在表型特征的基础上,以DNA资料给予决定性的判断,鉴定材料《细菌鉴定手册》。使人为的分类体系过渡到自然体系的理想进一步付诸实现。
本书是在《一般细菌常用鉴定手册》一书的基础上编写而成的。全书分两大部分:第一部分主要介绍了伯杰(Bergey)系统、常见细菌的检索表、属的提要及种的鉴别等;第二部分介绍了几种鉴定方法,包括常用的传统分类基本方法和目前通用的分子生物学方法及快速鉴定和自动化鉴定系统等。
常见细菌系统鉴定手册
编者评论www.xiexiebang.com
常见细菌系统鉴定手册东秀珠蔡妙英等编著科学出版社目录序使用说明绪论第一部分常见 细菌属的特征描述第一章光合细菌第二章产芽孢细菌第三章好氧或兼性厌氧发酵型革兰氏...阅读完整评论内容
常见细菌系统鉴定手册
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