第一篇:超净实验室 实 验 报 告
实 验 报 告
(2011 / 2012 学年 第 二 学期)
课程名称 实验名称 实验时间 指导单位
《超净工作实习》 超净工作实习
2011/2012学年第二学期(9-10周)
材料科学与工程学院
指导教师
王义成
学生姓名 学院(系)
戴祥祥 班级学号 B09070532 材料物理 材料科学与工程学院 专 业
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超净实验室简介
一.超净实验室的定义
在国际标准化组织ISO中超净实验室被定义为:
一个空气中的微粒浓度被控制、被建设用于减少房间内微粒的引进、产生和滞留,且其他有关参数如温度、湿度、压力必要时也被控制的实验室。
二.超净实验室的用途
工业
产品
电子工业
电脑,平面显示屏
半导体
用于计算机存储器和控制器的集成电路
光学器件
柔性焦距透镜组,激光设备
生物技术
抗生素的生产,遗传工程
制药业
无菌药品,无菌一次性用品
医疗设备
心脏瓣膜,心脏旁路系统
食物和饮料
啤酒的生产
从上面的表格中可以看出,超净实验室的应用可以大致分为两类: 三.超净实验室的发展史
早期(只在医院里有超净室,很少有通风
设备)——>具备通风设备的用于手术的超净室——>早期的供工业用的超净室——>均匀流型超净室
超净实验室的设计标准
一.设计超净实验室的三个经典条件
1、当建立了超净实验室并安装好各个仪器;
2、当所有设备安装好并能够运行而且不受人为因素的干扰
3、当超净实验室可操控并设备能够运行,人员在工作。
二.设计方针
晶片生产设备的建造和运转费用非常高,两年内就可以被取代,寿命最多就五年。所以头两年必须产生足够的利润去抵消建造和运转成本,否则成功的概率非常小,所以必须坚定地控制建造和运转费用。
ISO超净实验室设计标准应用于一般洁净室设施,它之所以有价值,是因为它不是特定工艺标准,各种优质的地方使用。
空中悬浮微粒的清洁程度分类; 生物污染
计量及测试方法 设计、施工和启动 超净实验室运行
第 1 页 条件,定义和单位 增强清洁设备 分子污染
三.布局
图3.1的超净室设计已经流行数年
a.舞厅式b.管槽式c.微环境室
a.舞厅式b.管槽式c.微环境室
第 2 页 四.空气循环系统
图3.8是典型的空气流动系统,它用来实现对穿过地板高效空气过滤器的空气的再循环。
典型的再循环空气移动系统有如下特征和要求
风扇类型(发动机在空气流缓外部);
风扇的结构放在具有分离基本设备的薄片制造区域外围; 发动机和风扇要远离薄片制造区域; 由于空气通道打,这要求消声处理设计 冷线圈要在风扇的逆方向。五.监控和报警系统
监控和警报系统在晶片的生产中拥有很高的优先级,所以其设计也是相当重要。设计者要考虑一下几点:
1.液体,工业气体,环境气体的纯净度和实际条件 2.人员安全、车间和工艺设备 3.产品产量和质量
4.对于废水毒性或声誉的社区关系 5.政府机构要求的控制、计量和报告
6.设施和公用工程系统的工作特性的条件和安全。
空气净化
一.高效空气过滤
供应到洁净室里面的空气必须先进行过滤,这是为了确保去除空气中的颗粒和微生物,以防止它们妨害在洁净室里面的实验。
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直到二十世纪八十年代初,当时洁净室里面最高效的空气过滤器是HEPA过滤器,亦称高效空气净化器,它对空气中直径0.3微米的微粒可以有至少99.97%的过滤效率。现今,仍然有许多洁净室在使用HEPA。
二、高效过滤器的结构
• 高效过滤器一般有两种结构,深褶式过滤器和迷你褶式过滤器。
• 深褶式过滤器具有比较传统的过滤器结构:在其中,滤纸像折扇一样并排折叠起来,每个折叠的部分相距15cm到30cm之间(6-12英寸)。• 结构如右图:
过滤介质
放置铝箔隔离板•
为了确保空气通过过滤纸以及加强过滤器强度,在过滤纸之间会放置皱褶的铝箔作为隔离板(前页红箭头)。之后隔离板与滤纸结合的过滤装置就会用密封剂粘合到塑料、木材或者是金属的外框中,过滤器的整体如图:
外框
密封胶
密封衬垫
• 迷你褶式过滤器大都用在单向流洁净室。因为其更大的过滤面积所产生的压降低于深褶式过滤器。
• 因为一个过滤器两端的压降取决于空气通过过滤介质的流速以及过滤介质的结构。通过过滤器的空气流速通常认为是0.5米/秒。在这个速度下,压降通常介于120帕到170帕之间。当压降达到原来气压的2.5到3倍,过滤器通常是无法承受的。更大的过滤面积产生的压降比较低,故迷你褶式过滤器能使用于单向气流洁净室中。•
三.去除微粒的机理
第 4 页 •
• • 设计出来的高效空气过滤器要求能够去除2μm甚至更小的微粒。高效空气过滤器的过滤介质是由玻璃纤维制造而成,玻璃纤维的直径要求在0.1μm到10μm之间。玻璃纤维之间的空间往往要大于要捕获的微粒。ULPA过滤器中使用的精细的玻璃纤维比例比HEPA过滤器的要高。
这些纤维随机地纵横交错于整个过滤介质的深层,纤维之间孔径空隙的大小也是随机而不可控的。
这些玻璃纤维10μm级的微观图像如下图所示:
当空气中的微粒通过滤材时,它们碰上玻璃纤维或者其他已经粘附在纤维上得微粒。一个微粒与纤维之间或者与被纤维捕获的微粒之间会产生一个比较强的作用力,如范德华力,从而实现滤材对微粒的捕获。
去除微粒的原理大概有三种:扩散捕捉原理、冲突原理和拦截原理。值得一提的是,滤过(筛选)原理发生在微粒直径大于纤维间距时,这里不予考虑。并且静电效应在高效空气过滤之中的影响不是很大,也不予讨论。
四、高效过滤器的检测
• 高效过滤器生产出来后需要用测试微粒对其过滤效率进行测试。测试的方法有许多,比较出名的有如下:
• DOP法:源于美国,相关标准为美国军用标准MIL-STD-282。利用加热生成的0.3μm单分散相DOP油雾对高效过滤器的0.3μm微粒的过滤效率进行测试。现在已经用DOS和PAO的替代DOP(因为其中含有苯环,可能对人有害)。
• 钠焰法:源于英国,标准:欧洲Eurovent4/4.试验尘源为单分散相氯化钠盐雾。盐水在压缩空气的搅动下飞溅,经过干燥形成微小盐雾进入风道。含盐雾气使氢气火焰的颜色变蓝、亮度增加。以火焰亮度可判断盐雾浓度,从而确定过滤器对盐雾的过滤效率。盐雾粒径0.6μm左右。
• 粒子计数法/IEST-RPCC007:环境科学与技术研究所学会开发的一种用于测试ULPA过滤器的推荐方法。利用光粒子计数器测量粒子,通过选择不同的气溶胶材料可得到粒径范围在0.07到3.0不等的测试尘源。•
建造材料的选择
第 5 页 一.整体设计
1.保证实验室整体美观;
2.选用材料要求为无机材料,防酸、碱;
3.符合洁净室设计的要求;
4.防静电,不积尘;
5.坚固耐用便于安装和维护。
二.建造材料的一般物理要求
• 超净实验室建设使用的材料,要严禁气孔或粗糙面,以防止泄露的漏洞造成分散的悬浮颗粒留下污染。表面应无壁架并且能够轻松去除无任何污染沉积。微生物引起的污染,将需要消毒。消毒剂要溶于水中并且正确消毒要与材料接触几分钟,如果建筑材料不合格,水渗透可能发生。因此,以确保水不会发生渗透,因为这可能导致微生物的生长。
三,建筑材料的化学性质
要保证建造材料的稳定性,确保其耐用,具有很强的化学惰性,不被化学制剂腐蚀无尘表面,尤其是地板,应能承受在超净实验室使用的液体。一些实验使用强酸或溶剂将破坏表面。超净实验室不能发生这种状况。
四.室内装修材料材质要求
1.维护结构材料 采用彩钢夹芯板制作 2.地面材料: 基层:水泥自流坪。
表层:静电免维护的PVC地板
(颜色可选择)3.门、窗材料: 采用铝合金型材制作。
五.室内工艺设备材质要求
1.化学安全柜材料: 外层:采用冷扎钢板喷塑制作。内壁:采用PVC板制作。上下推拉窗:采用5mm的钢化玻璃,表面进行防腐处理。
2.仪器台、水盆台、边实验台台面: 采用实芯理化板,厚度12.7mm。
3.边实验、样品柜、试剂柜、水盆柜等柜体材料: 采用中密度板板式结构,金属件连接,但连接件外表加装塑料扣件达到防腐作用,注:试剂柜带通风。超净台的下柜带排风。4.柜拉手材料:采用全塑拉手
5.电器插座: 采用防水插座、防水开关,防止腐蚀性液体溅入内部,腐蚀内部金属件。
6.超净工作台内部的高效过滤器: 采用玻璃纤维滤纸的无隔板过滤器。
7.水盆及水龙头: 水盆为pp材料,水龙头要防腐。
六.实验室排风系统的要求
1.送风管道: 采用镀锌钢板,厚度0.5~1.0mm。
2.排风管道 采用PVC或玻璃钢材料,厚度4~8mm。
3.高效过滤器 采用塑料隔板,玻璃纤维滤纸的高效过滤器。
4.送风口 采用铝合金制作的风口。
5.回风口 铝合金材料双层可调风口。
6.排风机 采用PVC或玻璃钢防腐风机。
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超纯水的制备及循环系统一. 超纯水的定义和应用
• 超纯水:既将水中的导电介质几乎完全去除,又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。电阻率大于18MΩ*cm,或接近18.3MΩ*cm极限值。在25℃时超纯水的电阻率为 18.3(兆欧·厘米),一般约为15~18(兆欧·厘米)。
• 集成电路工业中用于半导体原材料和所用器皿的清洗、光刻掩模版的制备和硅片氧化用的水汽源等。此外,其他固态电子器件、厚膜和薄膜电路、印刷电路、真空管等的制作也都要使用超纯水。
二. 出去盐溶液中的水
1、蒸馏法(在理想条件下)按蒸馏器皿可分为玻璃、石英蒸馏器,金属材质的有铜、不锈钢和白金蒸馏器等。按蒸馏次数可分为一次、二次和多次蒸馏法。此外,为了去掉一些特出的杂质,还需采取一些特殊的措施。例如预先加入一些高锰酸钾可除去易氧化物;加入少许磷酸可除去三价铁;加入少许不挥发酸可制取无氨水等。蒸馏水可以满足普通分析实验室的用水要求。
2、冷却结晶法,用物理方法洗
3、水合作用法:固体水合物的形成除洗后可以分解产生纯净水
4、反渗透法:是渗透现象的逆过程,在浓溶液上加压力,使溶剂从浓溶液一侧通过半透膜向稀溶液一侧反向渗透,脱盐可达98%,并能除去99%的细菌颗粒和溶解在水中的有机物。常用的反渗透膜有:醋酸纤维素膜,聚酰胺膜和聚砜膜等。膜的孔径为0.0001-0.001μm.反渗透的动力依赖于压力差(10-100大气压)。去除杂质的能力由膜的性能好坏和进出水比例决定。
三.脱盐包括电渗析、反渗透和离子交换
• 电渗析,通过一个直流电流通过一个溶液将使正电荷的离子和带负电荷的离子以相反的方向迁移。如果有放置在水膜对,其中(一个阳离子渗透膜)有选择性地允许通过阳离子和其他(一anion-permeable膜)可以选择性运输阴离子,之间的水膜可以成为淡化。
• 反渗透:是渗透的反过程,施加的压力超过溶液的渗透压,迫使纯净水分子通过适当的半透膜,脱盐可达98%,并能除去99%的细菌颗粒和溶解在水中的有机物。• 反渗透有螺旋缠绕系统和中空纤维系统这两种系统。
四.颗粒物的去除
• 在离子交换之前需注意颗粒物的去除。颗粒物是指直径大小在0.005至30微米之间的颗粒,它们极可能称为堵住渗透膜孔的污垢,因此,十分有必要去除。
• 主要去除手段是过滤,微滤以及超滤,它们所清除的颗粒大小不同。
• 过滤去除的是直径在10至30微米的颗粒。可加入明矾作为混凝剂。
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• 微滤去除的是直径在0.1至40微米的颗粒。
• 超滤可以去除细菌般大小的微粒,可至0.005微米。五.有机物的去除
对于纯度要求极高的超纯水来说,有机物含量绝对需要达到一个极低值。有机物的去除方法多种多样,主要有:
• 纳滤反渗透
• 离子交换
• 活性碳过滤
• 其他方法
值得一提的是一般情况下我们不依赖单一的方法去除有机物,而是多种方法同时进行。
六.离子交换
• 离子交换就是用一种等量的离子代替另一种离子的过程。离子交换主要分为阳离子交换和阴离子交换两种。
• 离子交换的表述可由以下方程式表示:
阳离子交换(Cation exchange)(H+)R + M+ =(M+)R + H+
阴离子交换(Anion exchange)((OH)-)R + X-=4(X-)R +(OH)
• 需要注意的是:离子交换是可选择性的加入某些离子以及出去某些离子。需要避免引入不必要的杂质。
七.精处理
1、紫外线杀菌
生物体的核酸吸收紫外线光的能量而改变核酸自身结构,破坏核酸功能而使细菌死亡。杀菌最强的光谱波长为2600埃。
2、终端膜过滤
3、超滤
水在压力下流过一个卷式或中空纤维膜棒。膜孔径在10~200埃范围内,薄膜厚度为0.1~0.5微米,附在一个中孔的纤维棒内壁上,超滤能除去细菌和0.05微米的粒子
超净实验室的使用规范
第 8 页 一. 人员可能带来的污染 人们在行走时,每分钟约能产生1000000颗粒子和数千个微生物颗粒,超净实验室里的人越多,分散在里面的污染也就越大,因此要确保只有必要人员才能进入洁净室,许多污染问题都是因为认识不足造成的。
二. 进入实验室的一些条件
• 进入洁净室的人不应该分散显著,下面给出的例子在可能会导致更多的污染。以下的建议,包含标准,可以歧视一些工作人员。
• 应确保任何歧视既不是非法的或有失公平。名单中还包含一些临时条件。
如:皮肤皮肤细胞的异常大量分散的条件下,如皮炎,晒伤或坏头皮屑。呼吸系统疾病,如感冒引起的咳嗽或打喷嚏,流感或慢性肺部疾病。
在一个biocleanroom,它可能是微生物成长的条件,并导致变质或疾病。他们在洁净室工作的适用性应该就具体产品的易感性考虑各类微生物的生长。人与过敏性条件,引起打喷嚏,发痒,刮伤,或流鼻水,可能不适合在洁净室就业。花粉症患者有可能在洁净室中找到救济,因为空气过滤系统会过滤掉过敏原负责。有些人可能会过敏,在洁净室中使用的材料,如(a)由聚酯制成的服装,(B)塑料或乳胶手套,(C)化学物质,如酸,溶剂,清洗剂
(四)在房间里的产品制造,如抗生素 和激素。
三. 实验室洁净标准
人员来回缓冲区必须更换服装,门不可悬空并且门一般开向内进入生产车间 使用无接触技术,比如长钳 口罩需戴到鼻子上部 物品要保持经常消毒
四.超净实验室人员出入标准
• 进入前更换为无尘服装及鞋子污染的预防,• 无尘服装存放方法
• 化妆品,发胶,指甲油应在进入之前清除
人员进入要完全笼罩,工作服,头罩,口罩,及膝靴子和手套。
五. 退出实验室规范
退出时所有一次性装备废弃(在无菌制药洁净室完全废弃)废弃的物品集中放置处理
如工作服重复使用,不使用时工作服通常挂在单向流柜
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第二篇:超净工作台的使用
超净工作台的使用
1.超净工作台工作原理
(1)超净工作台内配备紫外杀菌灯管,用于杀灭微生物。
(2)超净工作台内变速离心机可将经过高效过滤器过滤的空气以水平或者垂直的单向气流吹出,并能以一定的均匀断面风速吹过工作区,带走尘埃颗粒和微生物颗粒,形成无尘、无菌的工作环境
2.超净工作台操作方法
(1)接通电源。将电源插入插座,并打开整个超净工作台的总开关后,可以看到按钮面板个电源指示灯亮,表示电源处于接通状态。(通常,实验室的超净工作台总电源开关一直是处于打开状态)。
(2)清理台面,拉下防尘玻璃挡板,紫外杀菌。若超净工作台内堆放有与本实验无关的物品,可先移出,用酒精棉球清洁台面后可预先放入实验相关的且能以紫外照射的材料进行紫外灭菌。拉下工作台前面的玻璃挡板,并关严。找到按键板,按下标有“杀菌”字样的按钮即可开启紫外灯管(再次按下该按钮则会闭紫外灯)进行杀菌,一般照射30min即可。
【注意】可将操作台面大致分为废物回收区、物品放置区和操作区。操作区内尽量不要堆放物品;不要在杀菌的同时开启风机。
(3)开启风机和照明系统,开始实验。紫外杀菌结束前应先开启风机,再关闭紫外灯,最后掀起玻璃挡板开始实验。按钮板面上面标记“开启/停止”字样的按钮是风机的开启和关闭的按钮。正常情况下,风机的最低档在出厂时候已经满足风速要求。使用时可多次按下“风量调节”按钮选择需要的风速大小。按动风量调节按钮后,风速的变化为:“低→高→低”的不断循环,并且有相应的灯指示风量状态。标有“照明”字样的按钮是超净工作台内照明灯的开关,可根据需要开启。
【注意】①试验操作时候尽量避免快速且大幅度移动,以减少对超净工作台内气流的扰乱,避免外界细菌进入。②有的超净台同时具有正压和负压系统,一般情况下使用正压系统;当试验的试剂可能有气体逸出,对人员造成刺激性伤害时候,可使用负压风道系统,使所有的气体只在超净台内部循环。
(4)结束试验,清理台面,关闭风机,拉下防尘玻璃挡板。试验后,清理台面废弃物后,用酒精棉球擦拭台面。关闭风机后拉下防尘玻璃挡板。若下面还有试验,可打开紫外灯,为接下来再次使用做好准备。
3.超净工作台的维护
(1)根据环境洁净度,定期更换滤布;定期对超净台内外进行清洁。
(2)照明灯和紫外灯达到使用寿命后更换相同规格灯管。
第三篇:超净工作台清洁验证方案
超净工作台的清洁
验
证
方
案
目录
一、概述
二、验证目的三、验证范围
四、验证人员
五、验证内容验证条件可接受标准清洁过程取样及样品处理偏差分析及处理
六、验证结论及评价
七、再验证周期
八、验证进度计划
一、概述
超净工作台是用于疫苗检验的重要设备,工作区的洁净度设备性能起决定性作用,对设备进行彻底地清洁,保证设备的清洁卫生关系到疫苗的产量和质量。故需对超净工作台的清洗效果进行验证,确认清洗后设备的清洁状况满足预定要求。清洁验证共需进行3次,方可证明清洁规程能持续稳定达到要求。
二、验证目的验证本公司的超净工作台按清洁规程进行清洁后的清洁效果能达到预定要求,符合制品生产的要求。
三、验证范围
本验证方案主要适用于超净工作台的清洁验证。
四、验证人员
五、验证内容验证条件
1.1 设备应为完好设备。
1.2 人员:包括设备管理部门、使用部门、QA人员、QC人员及具体岗位操作人员。
1.2.1 在岗人员均经过GMP知识、药品管理法及其实施细则、生物制品管理办法、产品质量法等法律法规的培训。
1.2.2 在岗人员均为经过岗位SOP、岗位安全操作法、工艺规程、卫生清洁规程等岗位专业知识培训,并持有上岗证的熟练工人。
1.3 清洁剂条件: 中性或弱碱性,对设备无腐蚀;不含4A沸石等不溶性助剂,洗涤后无不溶性残留;对制品、人体无毒害。可接受标准
2.1目检法:设备表面应无可见的残留物,并无残留物的气味。
2.2浊度检查:取最终淋洗水50ml与纯化水50ml比色,目测应无可视差异。
2.3 尘埃粒子限度:尘埃粒子数应符合相应级别要求。(见下表)
洁净度级别尘粒最大允许数/立方米
≥0.5μm≥5μm
100级35000
2.4 微生物限度:沉降菌指标应符合相关规定。(见下表)
洁净度级别微生物最大允许数
沉降菌/皿.0.5h
100级0.53 清洁过程
3.1 清洁操作:按《超净工作台清洁规程》对设备进行清洁至目测合格。
3.2 清洁剂:饮用水、纯化水。取样及样品处理
4.1目检法:目视检查设备内外表面,目视检查合格后方可进行取样检查。
4.2 浊度检查
4.2.1取样工具:广口瓶。
4.2.2取样步骤
4.2.2.1用广口瓶接取样点之水,冲洗瓶内2次,装取300ml,密封。
4.2.2.2取样结束及时贴上标签,标明取样日期、样品编号、样品名称送检。
4.4 尘埃粒子测定
4.1.1取样部位:超净工作台室内各采样点。
4.1.2 取样器具:尘埃粒子计数器
4.1.3 取样步骤:待超净工作台正常运行30分钟,在其室内各采样点进行测试。按照尘埃粒子计数器标准操作规程测量≥0.5μm、≥5μm粒子浓度,总采样次数不得少于5次。
4.2沉降菌测定
4.2.1取样部位:超净工作台室内各采样点。
4.2.2 取样器具:Φ90mm玻璃平皿
4.2.3 取样步骤:在超净工作台正常运行30分钟,用¢90mm玻璃培养皿和营养琼脂培养基,在采样点放置,打开平皿盖,使培养基表面暴露30分钟后,将平皿盖盖上并做空白对照,然后在30-35℃条件下培养48小时后计数。采样点的位置可以同悬浮粒子测试点。
4.2.4 取样结束及时贴上标签,标明取样日期、样品编号、样品名称送检。
4.5 样品检查
4.5.1取最终洗涤水50ml与纯化水50ml进行目视比色,应无可视差异。
4.5.2取最终洗涤水按《中国药典》微生物限度检查法检查10个培养皿,结果应符合规定。偏差分析及处理
按照验证方案对超净工作台进行清洁效果确认,在确认的过程中若出现不符合标准的情况(偏差),应进行分析,找出原因,进行纠正改进直至达到要求。
六、验证结论及评价
由验证小组汇总各项验证确认结果,进行验证过程的整理并写出验证报告,由质量管理部根据结论填发验证证书。
七、再验证周期
根据验证报告结果确定再验证周期。
八、验证进度计划
在年月日到年月日组织验证小组对超净工作台进行清洁验证。
第四篇:省级CDC实验室开展实验报告
省级CDC实验室开展工作报告
为了更好的迎合本单位工作的开展,为了更好的建设本单位实验室的各个项目,根据上级领导指示,笔者在网上收集全国各省级CDC所开展的实验室工作项目,并汇报如下。
1急慢性传染病控制科
急性传染病科主要开展的实验工作有:食品卫生微生物学检验 菌落总数测定;食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定;食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验;食品卫生微生物学检验 志贺氏菌检验;食品卫生微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验;食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验;食品卫生微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验;食品卫生微生物学检验 空肠弯曲菌检验; 食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验;食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验; 食品卫生微生物学检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验;食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验;食品卫生微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验; 食品卫生微生物学检验 霉菌和酵母计数; 食品卫生微生物学检验 常见产毒霉菌的鉴定。
2营养与食源性疾病防治科
营养与食源性疾病防治科主要开展的工作有:食品卫生微生物学检验 肉与肉制品检验;食品卫生微生物学检验 乳与乳制品检验; 食品卫生微生物学检验 蛋与蛋制品检验;食品卫生微生物学检验 水产食品检验;食品卫生微生物学检验 冷冻饮品、饮料检验;食品卫生微生物学检验 调味品检验; 食品卫生微生物学检验 冷食菜、豆制品检验; 食品卫生微生物学检验 糖果、糕点、蜜饯检验;食品卫生微生物学检验 酒类检验; 食品卫生微生物学检验 罐头食品商业无菌的检验;食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留量检验;食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂; 食品卫生微生物学检验 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验; 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验;食品卫生微生物学检验 粮谷、果蔬类食品检验;食品卫生微生物学检验 双歧杆菌检验;食品卫生微生物学检验 乳酸菌饮料中乳酸菌检验;食品的相对密度的测定;食品中水分的测定;食品中灰分的测定;食品中蛋白质的测定; 食品中脂肪的测定;食品中还原糖的测定;食品中蔗糖的测定;食品中淀粉的测定; 植物类食品中粗纤维的测定;食品中总砷及无机砷的测定;食品中铅的测定;食品中铜的测定;食品中锌的测定;食品中镉的测定;食品中锡的测定;食品中总汞及有机汞的测定;食品中氟的测定;食品中六六
六、滴滴涕残留量的测定; 食品中有机磷农药残留量的测定;粮、油、菜中甲萘威残留量的测定;食品中黄曲霉毒素B1的测定;食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定;食品中黄曲霉毒素M1与B1的测定;植物性食品中杂色曲霉素的测定;食品中N-亚硝胺类的测定;食品中苯并(a)芘的测定;食品中糖精钠的测定;食品中山梨酸、苯甲酸的测定;食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的测定; 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定;油脂中没食子酸丙酯(PG)的测定; 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定; 食品中亚硫酸盐的测定;食品中合成着色剂的测定; 粮食中二溴乙烷残留量的测定;食品添加剂中重金属限量试验; 食品添加剂中铅的测定; 食品添加剂中砷的测定;食品中维生素A和维生素E的测定;食品中胡萝卜素的测定;食品中硫胺素(维生素B1)的测定;食品中核黄素的测定; 蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2,4-二硝基苯肼法);食品中磷的测定;食品中不溶性膳食纤维的测定;食品中烟酸的测定;食品中铁、镁、锰的测定;食品中钾、钠的测定;食品中钙的测定;食品中硒的测定;植物性食品中稀土的测定;蜂蜜中四环素族抗生素残留量的测定;谷物和大豆中赭曲霉毒素A的测定;食品中环已基氨基磺酸钠的测定;食品容器及包装材料用聚酯树脂及其成型品中锑的测定;植物性食品中辛硫磷农药残留量的测定;植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留量的测定;植物性食品中氨基甲酸酯类农药残留量的测定;黄瓜中百菌清残留量的测定;植物性食品中二氯苯醚菊酯残留量的测定;植物性食品中二嗪磷残留量的测定; 畜禽肉中已烯雌酚的测定; 柑桔中水胺硫磷残留量的测定;植物性食品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留的测定;谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定;大米和柑桔中喹硫磷残留量的测定;大米中杀虫环残留量的测定;大米中杀虫双残留量的测定;稻谷中三环唑残留量的测定;畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定(高效液相色谱法);食用豆粕卫生标准的分析方法; 小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定(ELISA);复合食品包装袋中二氨基甲苯的测定。
3职业病防治科 职业病防治科主要开展的实验工作有: 用于光子外照射放射防护的剂量转换系数;个人胶片剂量计;X射线防护材料衰减性能的测定;用于中子测井的CR39中子剂量计的个人剂量监测方法。
4慢病防治科
慢病防治科主要开展的工作有:化妆品卫生化学标准检验方法 汞;化妆品卫生化学标准检验方法 砷;化妆品卫生化学标准检验方法 铅;化妆品卫生化学标准检验方法 甲醇;化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定;化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群;化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌; 化妆品微生物标准检验方法 金黄色葡萄球菌。
5环境卫生科
环境卫生科主要开展的实验工作有:生活饮用水卫生标准检验;居住区大气中一氧化碳卫生标准检验方法 汞置换法;居住区大气中砷化物卫生标准检验方法 二乙氨基二硫代甲酸银分光光度法;居住区大气中二氧化硫卫生标准检验方法 四氯汞盐盐酸副玫瑰苯胺分光光度法; 居住区大气中汞卫生标准检验方法 金汞齐富集-原子吸收法;居住区大气中硝基苯卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中吡啶卫生检验标准方法 氯化氰-巴比妥酸分光光度法;居住区大气中硫酸盐卫生检验标准方法 离子色谱法;居住区大气中甲基-1605卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中铍卫生检验标准方法桑色素荧光分光光度法;居住区大气中氯卫生检验标准方法甲基橙分光光度法;居住区大气中苯、甲苯和二甲笨卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中甲醇、丙醇卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中铅卫生检验标准方法 原子吸收分光光度法; 居住区大气中镉卫生检验标准方法 原子吸收分光光度法;居住区大气中二硫化碳卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中硫化氢卫生检验标准方法 亚甲蓝分光光度法;水源水中乙醛、丙烯醛卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中氯丁二烯卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中丙烯酰胺卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中苯系物卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中氯苯系化合物卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中二硝基苯类和硝基氯苯类卫生检验标准方法 气相色谱法;水源水中巴豆醛卫生检验标准方法 气相色谱法; 水原水中硫化物卫生检验标准;居住区大气中二氧化氮检验标准方法 改进的Saltzman法; 居住区大气中气态污染物液体吸收法的标准采样装置;居住区大气中硝酸盐检验标准方法 镉柱还原-盐酸萘乙二胺分光光度法;大型水蚤测试标准方法;居室空气中甲醛的卫生标准; 居住区大气中甲醛卫生检验标准方法 分光光度法;居住区大气中苯胺卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中正已烷卫生检验标准方法 气相色谱法;居住区大气中三氯甲烷、四氯化碳卫生检验标准方法 气相色谱法; 居住区大气中酚类化合物卫生检验标准方法 4-氨基安替比林分光光度法;饮用水化学处理剂卫生安全性评价;公共场所空气微生物检验方法 细菌总数测定;公共场所茶具微生物检验方法 细菌总数测定;公共场所茶具微生物检验方法 大肠菌群测定;公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法 细菌总数测定 ;公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法 大肠菌群测定;理发用具微生物检验方法 大肠菌群测定;理发用具微生物检验方法 金黄色葡萄球菌测定;公共场所拖鞋微生物检验方法 霉菌和酵母菌测定;游泳池水微生物检验方法 细菌总数测定 ;游泳池水微生物检验方法 大肠菌群测定;公共场所浴盆、脸(脚)盆微生物检验方法 细菌总数测定;公共场所浴盆、脸(脚)盆微生物检验方法 大肠菌群测定;公共场所空气温度测定;公共场所空气湿度测定;公共场所风速测定;公共场所气压测定;公共场所辐射热测定;公共场所室内新风量测定; 公共场所室内换气率测定;公共场所采光系数测定;公共场所照度测定;公共场所噪声测定;公共场所空气中一氧化碳测定;公共场所空气中二氧化碳测定;公共场所空气中氨测定;公共场所空气中甲醛测定;公共场所空气中臭氧测定;游泳水温度测定;游泳水中尿素测定; 海滨游泳水透明度测定;室内空气质量测定。
6性病科
性病科主要的实验工作有:不加热血清反应素(USR)试验;梅毒螺旋体特异性反应(TPHA)试验;梅毒反应素快速环状卡片(RPR)试验;螺旋体蛋白补体结合试验(RPCE);梅毒螺旋体制动试验(TPI);间接免疫荧光螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS);淋球菌培养与涂片;酶联吸附试验测抗体 ELISA;蛋白印迹(Western印迹)法测HIV;HIV1型抗原检测;DNA-PCR 扩增外周血单核细胞中的前病毒DNA 来确定HIV感染。
6地方病科 地方病科实施开展的实验室工作主要以地域的不同而开展的具体工作也有所不同。
6总结与建议
本次搜查工作主要是简单的搜查了各省级CDC实验室开展的主要工作项目,有些科室开展的工作项目的搜查尚不全面。经过比对,笔者发现本单位有许多工作由于条件所限尚无法开展,与其它省级CDC实验室建设尚有一定距离。建议领导加大对实验室建设的重视,陆续开展一些与各科室相关的实验工作。
报告人:王冠中
报告时间:2015-3-11
第五篇:实验室平菇栽培法 实验报告[范文]
实验报告
实验名称 实验室平菇栽培法 班组 姓名 学号 日期 成绩 教师签名
一、实验目的
1.掌握平菇基本栽培方法及其原理。
2.掌握平菇栽培中器械和培养基的灭菌方法及原理,如高压蒸汽灭菌法、干热灭菌、灼烧灭菌和紫外灯灭菌法等。
3.了解食用菌母种扩大繁殖生产的基本原理,掌握斜面母种的接种和培养方法。
4.掌握平菇栽培中原种、栽培种培养基的制备方法。5.培养学生自行设计出菇的方案。
二、基本原理
1.平菇是木质腐生菌,生长发育所需各种营养物质均从木屑、棉籽壳、稻草等培养料中获得。平菇生长周期短,从播种到第一批采收一般为30天到40天,栽培方法简便,成功率高。本实验在实验室条件下,用袋装方法出菇。
2.食用菌生产中,培养基、器皿及接种工具的消毒灭菌,是防止杂菌污染,提高食用菌产量的关键措施,灭菌和消毒法主要有物理方法(高温灭菌和紫外线灭菌)、化学灭菌法。
干热灭菌是在保持恒温的电烘箱中进行的,适用于各种耐热的玻璃器皿、棉塞、滤纸、以及不能与蒸汽充分接触的液体的灭菌.一般在160摄氏度持续1.5—2小时,就可达到灭菌的目的.灼烧灭菌可直接在酒精灯外火焰灼烧灭菌,酒精灯所用的酒精浓度要在百分之95以上.紫外灯灭菌是接种室(箱)最常用的方法之一,每次在使用前开灯20—30分钟.紫外线可导致细胞内核酸和酶发生变化而使细胞死亡,还可使空气中氧气产生臭氧,臭氧也具有杀菌作用.因其透射力差只适用于空气及物体表面的灭菌,有效距离为1.5—2米,以1.2米内为最好.3.食用菌母种培养基和分离菌种时用斜面培养基,适用于一般食用菌的母种分离与培养用的培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基(即PDA培养基),配成后用加压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
4.食用菌菌种生产一般按母种——原种——栽培种进行。母种数量少,要进行试管移接扩大培养才能进行生产。
5.原种由母种繁殖而成,由原种扩大培养成栽培种。原种和栽培种生产一般包括配料——装瓶(袋)——灭菌——接种——培养等流程。一般用瓶装或塑料袋装,灭菌压力和时间相应延长。
三、实验器材
1.材料:马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、75%乙醇溶液、麦粒、棉籽壳、石膏粉、碳酸钙、麦麸
2.器具:锥形瓶、棉塞、超净工作台、烧杯、量筒、漏斗、天平、铁架台、纱布、药匙、PH实纸、接种铲、酒精灯、聚丙烯塑料袋、小试管、牛皮纸、高压蒸汽灭菌锅等
四、实验过程 1、10月7日
①准备干净的一只试管和一个锥形瓶,贴上标签并制作两个与试管和锥形瓶相配套的棉塞。②配置PDA培养基:
马铃薯(去皮)2500克 葡萄糖 250克 琼脂 250克 水 12500克 自然PH值
按上述配料加,用小火加热并用搅拌器不断搅拌。
③分装:将培养基在凝固前进行分装,一般到试管的1/5至1/4左右,分装完后加塞用牛皮纸包扎好。
④灭菌:用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌。
打开灭菌锅盖,向锅内加入适量的水。将待灭菌物品放入锅内,然后价盖旋紧螺旋,使蒸气锅密闭;
打开放气阀加热。自开始产生蒸汽后10分钟左右关紧放气阀让温度随蒸汽压力增高而上升,最后在115℃下,维持30分钟。
停止加热,待压力降至5磅以下时,放气,打开锅盖,取出灭菌物。
⑤ 制试管斜面:灭菌完毕降至60摄氏度后取出试管摆斜面,是斜面为试管长度的1/2。⑥无菌检查:将斜面培养基放置于37摄氏度温箱内,培养24小时,若无菌长出,可存备用。2、10月14日:
①超净台提前擦干净,紫外灯杀菌,通风打开10分钟后可以操作;②接种菌丝型平菇母种扩大培养:
左手持试管,右手持接种工具,拔去棉塞后用酒精灯封住管口 将母种用接种铲切成0.5厘米宽长条,深度约占培养基2/3,再用接种锄切成宽0.5厘米的正方形小块接种到空白试管中央,菌丝面朝上,使之紧贴于培养基斜面上。
置于25℃至27℃恒温箱中培养,当菌种块上菌丝萌发后可将温度降至2到3℃。当菌丝长至斜面培养基长度的4/5时可停止培养放恒温箱中培养。3、10月21日:
①配制麦粒培养基(即原种培养基): 麦粒 2500克 蔗糖 62.5克 碳酸钙 62.5克 水 6250克
②将麦粒培养基装到锥形瓶中(约占锥形瓶的一半,不可太满),加棉塞包扎后灭菌,灭菌条件一般采用1.4公斤/平方厘米,1.5—2.0小时。4、10月28日: ①原种接种:在超净工作台上,取斜面母种,切取2.5平方厘米大小斜面菌种一块放置于上述配置的麦粒培养基上,并使菌种埋在培养基中。接种后,用酒精灯灼烧瓶口、棉塞,用棉塞塞住瓶口,并用绳将牛皮纸扎在瓶口上。
②原种培养:接种后的原种的培养瓶,要及时移入25℃至27℃恒温培养箱或培养室中;菌种培养初期,每天检查染菌情况,污染的瓶袋要及时发现处理;适龄的菌种为菌丝长至5—10天室最适于扩大生产的;培养过程中,除对温度的要求较直接外,其余对培养室的湿度,通风条件等都是间接的,只要做到基本恒温,对湿度、空气、光线等培养条件只要做到一般性的综合调节就足够了。5、11月4日:
①配制棉籽壳培养基(即栽培种培养基): 棉壳 98% 石膏粉 1% 蔗糖 1% 含水量 60%—65% 按配方用量分别称取所需各种原料;
调整培养料的含水量:用手紧握培养料,以指缝中由水外渗而不往下滴为适宜,没有水渍为过干,由水珠连续淌下为过湿。可用加水、嗮干或加料的方法调整。
②装袋培养基配制好后,装入塑料袋中,在装的过程中插入一根小试管直达瓶底或至培养料4/5处(目的是增加袋内氧气,固定菌种和有利于菌丝沿着洞穴向下蔓延),注意装袋袋料保持一致均匀,手握时由弹性,不下陷,不要太松或太紧,及时扎口,仔细检查防止破损。③包扎后灭菌:灭菌条件与原种灭菌条件同。6、11月11日:
①栽培种接种:采用直接在接种穴内灌满的接种方法,在其表面也撒些菌种碎屑,操作在超净工作台上进行。
②恒温培养3周(要求与菌种的原种培养条件相同),菌丝即长满塑料袋,已分化出子实体原基。7、12月2日:
带回寝室培养:打开塑料袋口,或将塑料袋口剪破摊开,同时注意环境喷雾保湿,加强通风换气。待菌盖长至玉米粒大小后,才开始向子实体上喷少量雾状水,随子实体上大,逐渐增多喷水量和次数。
8、到菌菇体成熟时采收,一般鲜销的平菇在其成熟期的初期和中期采收。通常一手按住菇柄基部的培养料,一手捏住菌柄轻轻拧下,但切不可硬拔,以免将培养料带起,影响下潮出菇。
五、实验结果
实验结果:12月19日采收得到生长尚未成熟的平菇子实体。具体过程中:
1.母种扩大培养后的菌丝从外观看,菌丝洁白、浓密、粗壮、富有弹性,生长整齐,不产生色素,菌种无杂菌污染且无杂色出现; 2.原种培养得到的菌丝洁白、浓密,生长到最锥形瓶底部; 3.栽培种培养得到的菌丝洁白、浓密,生长到袋料的底部; 12月10日:子实体早期生长在培养基的周围,不规则分布。
12月12-13日:菇体发育成熟的初期和中期,菌盖边缘尚未完全展开、菌盖平滑完整无开裂,菌盖边缘韧性好,菌肉厚实肥嫩,菌柄中实柔软。
六、实验分析及注意事项:
实验分析:实验做的不是非常成功,由于培养时间不足,长出的菌菇尚未完全成熟。在母种、原种培养时做到没有让菌种污染,严格按照无菌操作步骤,所以在得到菌种时都是好的菌种。在出菇期的培养,控制了培养基的湿度、光照、温度等,每天检查湿度及生长状况。注意事项:
①在母种、原种、栽培种接种时,必须严格按照无菌操作的方法进行,接种工具在火焰上灼烧灭菌后,须在试管壁上冷却下在切割菌种,否则菌丝被烫融影响菌种恢复。尽量在超净工作台上操作。
②保藏的母种在接种前应进行认真检查是否由污染现象,已污染杂菌的母种不能用于扩大培养。
③掌握好菌种的适龄期,适龄菌种为菌丝长至瓶底后5—10天,最适于扩大生长,此时为菌丝生长处最佳生长期,适应性强。
④供制种的麦粒最好是储存一年左右的陈麦粒,新麦制种菌丝吃料慢长势弱;煮熟麦粒是制种的关键,要掌握熟而不烂,表皮不破,没有淀粉渗出。
⑤出菇期管理要点:
首先:刺激子实体的发生可通过增进散射光,延长光照时间;加大昼夜温差;保持较湿润环境的方法。
其次:提高成菇率主要是喷水和通气环节上,桑葚期时千万不要喷水,只有当菌盖长到1—2分硬币大小时才可根据天气情况和培养料湿度适当喷水,喷水后要适当加强通风,喷水时间一般在中午前后温度较高时进行。
⑥转潮管理:第一批菇采收后,不要马上喷水覆盖,要让料面露干4—5天,然后重喷一次水覆盖,保持湿润,批蕾萌发,原基形成后转入出菇期管理,方法同上。