双吻合技术在中低位直肠癌保肛手术中的临床应用(精)（五篇范文）

第一篇：双吻合技术在中低位直肠癌保肛手术中的临床应用(精)

作者：张发明 曾庆良 潘奕 程晓明 程家平谢铭

【摘要】

目的： 探讨双吻合技术（double stapling technique，DST）在中低位直肠癌保肛手术（sphincter－reserving operation，SPO）中的应用价值及并发症的防治。方法：对比分析采用DST者32例（研究组）与采用单吻合技术者（single stapling technique，SST）43例（对照组）两组患者临床病理指标、术后并发症及肿瘤复发情况。结果： 全组患者手术顺利，无手术死亡。两组患者在术后3个月和6个月时的排便功能比较差异有统计学意义（P0.05）；肿瘤位置比较差异有统计学意义，P

第二篇：管状吻合器在中低位直肠癌保肛手术中的应用(40例报告)

管状吻合器在中低位直肠癌保肛手术中的应用(40例报告)【关键词】 直肠癌

摘 要 目的：探讨管状吻合器在保肛手术中的应用优势及术中应注意的问题。方法：应用管状吻合器施行保肛手术40例。结果：手术操作简单，无手术死亡，无术后吻合口漏，无术后排便功能障碍。结论：管状吻合器的应用可简化手术操作，降低手术并发症，但应慎重选择病例，同时应注意以下几点：①保证吻合口良好血供；②保证吻合口无张力；③尽量清除直肠残端周围组织；④调整钉座与钉架的距离；⑤吻合器杆向腹侧摧顶的力量不宜过大；⑥检查切除圈是否完整；⑦放置有效的盆腔引流。

关键词 管状吻合器;直肠癌;保肛手术

临床资料

1．1 一般情况 40例中，男22例，女18例，年龄30~80 a。Duckes分期：A期2例，B期23例，C期13例，D期2例。距肛门6~9 cm 39例，距肛门5 cm以下1例。

1．2 手术方法 全部病例均应用管状吻合器行低位直肠前切除术。截石位，腹部手术切除直肠癌肿及周围淋巴脂肪组织同Miles手术。应用荷包缝合器或直线型切割缝合器在肿瘤下方约3cm处缝合关闭肠管并切除标本，远端直肠应用生理盐水冲洗，然后应用管状吻合器行结肠直肠端端吻合。

1．3 结果 40例结肠直肠吻合39例一次成功，1例首次吻合不满意再次钉合成功，切除圈均完整，无手术死亡，无术后吻合口漏，无术后排尿功能障碍。术后吻合口狭窄1例，经扩肛保守治疗治愈。术后1例习惯性便秘，其余排便功能良好。术后随访1~5年40例均未见吻合口局部复发。

讨论

2．1 管状吻合器的应用优势 管状吻合器的应用，使结直肠吻合比传统的手法缝合更快捷、安全可靠。每当患者肥胖、骨盆狭窄或直肠残端过短而回缩盆腔深部时，手法缝合操作将十分困难，有时几乎不可能。而管状吻合器配合荷包缝合器或直线型切割缝合器的应用，克服了以上缺点，使手术操作简单、方便，大大提高了直肠低位前切除的成功率，同时还可明显降低术后吻合口漏的发生率。国内文献报告应用吻合器吻合口漏的发生率为2.5%~3.4%［1］。本组40例无1例吻合口漏的发生。远较手法缝合法的10%为低。管状吻合器的应用，使既往不能施行直肠低位前切除的部分患者得以施行。在根治疾病的同时使患者免受人工肛门的痛苦，大大提高了患者的生存质量。

2．2 手术相关问题的探讨

2.2.1 病例的选择 直肠癌的淋巴转移是上行的，癌肿下切缘切除肠壁2~3 cm已基本足够，大多数直肠癌为局限性分化型腺癌。资料显示，保肛手术在肿瘤控制、术后局部复发、并发症发生率及5年生存率与Miles手术基本相同［2］。本组40例病人术后随访1~5 a未见局部复发和死亡病例，疗效确切，因而选择部分中低位直肠癌进行直肠低前位切除是有理论依据的。但对于直肠癌的治疗，首先应考虑的是根治性，其次才是保肛功能。既往的观点是能否实行保肛术，而今的观点是应不应该行保肛术［3］。恰当地选择病例是保肛手术的关键。我们认为，要应用吻合器施行Dixons手术，病例的选择应参考下列条件：①肿瘤距肛缘至少5~6 cm，否则吻合难于进行，且术后排便功能障碍。本组1例低于5 cm，术后长期便秘。②癌灶最好在肠壁内。③癌侵犯肠管周径不大于1/2，且分化程度较好。④如远处转移，即使行Miles手术也难于根治，也可切除癌灶保留肛门，近期疗效较好，提高患者生存质量。

2.2.2 术中应注意的问题 应用管状吻合器行Dixons手术，其手术的并发症与传统手法缝合相同，主要为漏及狭窄。造成吻合口漏的原因有两种，其一同传统手法缝合相同，其中吻合口的血运、张力和肠管的清洁程度等原因仍是主要因素。在直肠癌手术中，一方面要求切除足够的肠系膜及肠管，另一方面在病情允许时又要尽量恢复肠管的连续性，为照顾后者而牺牲前者是错误的，而不顾吻合口张力偏大勉强进行结肠直肠吻合则是危险的。正确的方法是尽量游离近端结肠，甚至不惜延长切口游离降结肠和结肠脾曲。吻合口张力偏大产生的危害除了造成吻合口肠壁的慢性撕裂外，同时也会因肠系膜血管受牵拉而影响血流，导致血液供应障碍，最终导致吻合口漏的发生。其二与器械操作有关，吻合口切割圈不完整或中断可能也是造成吻合口漏的原因之一。国内邱忠辉等报告应用吻合器技术治疗直肠癌120例中，有6例发现直肠切割圈不完整，虽经修补，但其中1例仍发生吻合口漏。造成切割圈不完整的原因可能是在靠拢对合两端时，术者用吻合器杆向腹侧推顶的力量偏大，使吻合器前端钉合圈内的肠壁平滑肌受到过度牵伸后变薄，甚至断裂，因此在吻合切割后肌肉收缩，导致切割不完整，而最终导致吻合口漏的发生。另外，直肠残端周围组织残留过多，致使吻合时钉合不满意，也是造成吻合口漏的原因。因此，我们认为，防止吻合口漏，术中应注意以下几点：①保证吻合口肠管良好的血供。②保证吻合口无张力。③尽量清除直肠残端周围组织。④适当调节钉座与钉架的距离。⑤吻合器杆向腹侧推顶直肠闭合端的力量不宜过大。⑥吻合后检查切除圈是否完整。⑦正确放置引流管并保持有效的引流。

(1广州市红十字会医院普外科，广东 广州 510220； 2.广东药学院外科教研室）

第三篇：PCR技术在临床检验中的应用

PCR技术在临床检验中的应用

http://www.xiexiebang.com 生物技术支持

医学检验大致可分为形态学、生物化学、血清免疫学和分子生物学几大类，其分别代表几代实验诊断技术。60年代DNA双螺旋结构及半保留复制模式的出现，70年代基因重组及体外基因克隆技术、分子杂交技术的应用使分子生物学在疾病诊断中得到了长足的发展。特别是1985年Mullis发明了聚合酶链式反应（PCR）技术，使医学界真正兴起了基因诊断技术热，成为现代医学发展的又一里程碑。用于临床检验的PCR技术与经典的PCR反应在操作上稍有区别，有其自己的特色。一般在样品处理上，多采用非离子去污剂一次加热处理，这种方法对DNA纯化有限，但适应临床微量、快速的特点。另外PCR反应体系中各组成成份往往都预分装到反应管中，既减少操作者的工作强度而且也减少了污染的机会，具有极高的使用价值。本公司率先研制并推出单管单人份的PCR诊断试剂，具有开创性意义。这些改进都不影响PCR效果，同样表现出高特异性、高敏感性、简便快捷等PCR最优秀的特征，在常见传染病、性病、肿瘤、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等广泛领域中有相当高的实际应用价值。

常见的传染性疾病有细菌、病毒、衣原体、支原体等，可引起消化、呼吸、循环、泌尿生殖等不同系统相应的病变。消化系统感染性疾病在我国具有代表性意义的有肝炎、胃炎及肠道感染性疾病。引起肝炎的病原体主要包括乙型肝炎病毒（乙肝）、丙型肝炎病毒（丙肝），其它还有甲型肝炎病毒（甲肝）、丁型肝炎病毒（丁肝）、戊型肝炎病毒（戊肝）、庚型肝炎病毒（庚肝）等。这几种肝炎病毒中只有乙型肝炎病毒是DNA病毒，其余均为RNA病毒。我国是乙肝高发区，乙肝病人为世界乙肝病人总数的50％。乙肝病毒经血液传播，病毒主要在肝细胞中增殖，也可以长期存留在骨髓细胞或外周血白细胞中。通常用PCR法检测血清中的乙肝病毒。有报道用PCR法可以在泪液、乳汁、精液及血白细胞中检出乙肝病毒，这些发现提示其它传染途经存在的可能。PCR法检测乙肝的优势表现在：①早期诊断，因为PCR扩增极其敏感，理论上可检出100CID/ml乙肝病毒的患者血清，在感染潜伏期即可被PCR法检出。②对低持续感染乙肝病人的诊断，有些乙肝病人体内的病毒长期低复制感染，血清病毒浓度极低，一般酶标试剂无法检出，可以用PCR法检出。③疗效跟踪及病程判断，因为PCR能半定量检测乙肝病毒基因，是病毒是否存在及其数量多少的最直接指标。在治疗过程中通过监测血清或白细胞中病毒基因存在与否及其动态变化即能准确地了解病情。丙型肝炎病毒在血清中的浓度很低，丙肝病毒的分离尚未成功。目前用于丙肝病毒检验的方法主要是ELISA法测定血清中的HCV抗体。由于HCV尚无法分离纯化，所以用于包被的抗原是人工合成肽或基因工程蛋白，这些人工抗原与天然病毒抗原有一定的区别，理论上是存在假阳性或假阴性。同时血清中抗体的出现及动态变化与病人病情无线性相关关系。RT－PCR技术使这些困难得到解决。HCV是RNA病毒，需先将病毒RNA逆转录为cDNA（RT）后再进行PCR扩增，这种技术称之为逆转录－PCR（RT－PCR）。PCR敏感性高可以检测出血清中低浓度的病毒，了解病毒在体内复制的动态状况。RNA纯化要求严格，是RT－PCR的技术关键，本公司目前使用的高效基因释放剂，联合特异性固相基因吸附乳胶颗粒，对样本中的RNA进行分离纯化，使这一问题得到解决。通常用于RNA→cDNA逆转录的酶大致可以分为二大类，即低温逆转录酶，如AMV/MLV逆转录酶，高温逆转录酶，如Tth酶。Tth酶在锰离子作用下，具有逆转录酶活性，Tth酶活性温度高，可以使核酸充分线性化，提高逆转录效率及特异性。Tth酶在镁离子的作用下，又具有DNA聚合酶活性，从而真正实现单管单酶单人份的扩增要求，这样就在不降低扩增敏感性的条件下，一步完成扩增，不仅简化操作，而且又减少污染，提高检测的准确性。国内本公司已采用这种技术推出单管单酶单人份的RT－PCR诊断试剂。丁型肝炎病毒是缺陷病毒，与乙型肝炎病毒协同感染。甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒主要存在于急性病人粪便样本中，戊型肝炎病毒也长期存在于血清中。在PCR检测时，需注意取材的合理性。在消化道传染性疾病中，另一类最重要的感染性疾病是幽门螺旋杆菌（HP）所引起的胃炎、胃溃疡等。HP可以经口－口途经传播并定位于胃粘膜上皮细胞，早期表现为浅表性胃炎，可发展成为胃溃疡。我国胃炎发病率之高估计比乙型肝炎更严重，对HP的检测应受到广大医务工作者的重视。对HP的检测可以用生化法测试尿素酶或用免疫法测试血清中对HP特异性抗体，也可对胃液、胃粘膜样本进行细菌培养及菌种鉴定。PCR法检测HP非常敏感且特异性高，有研究发现可以从病人的唾液或口腔含漱液中检出HP。PCR法避免了取胃液及胃粘膜，减少病人痛苦，是目前最理想的方法。

呼吸系统感染性疾病主要的有肺结核、非典型性肺炎等。结核杆菌感染曾给人类健康带来很大威胁，一度是较严重的致死性疾病之一。解放以后由于对结核病的预防的重视，特别是特效抗痨药物的出现，使结核病流行基本被控制。近来结核病有抬头的趋势，基原因可能有两方面，其一是耐药株的不断出现，其二是对结核预防重视不足。结核菌痰涂片镜检阳性率太低，酶标法又因抗原交叉反应易出现假阳性，结核检测的金标准是结核菌培养法。但培养法费时昂贵并且受到用药的影响，在实际应用中受到限制。PCR在结核菌检测方面有简便、敏感、特异的优点。一般认为样本中内要有100个左右的结核菌即可被检出。目前用于结核菌PCR诊断的试剂，其引物主要来源于以下基因片段36KD/65KD抗原蛋白基因；染色体重复插入序列IS986、IS960、IS6110、染色体质粒DNA PH7311、PMTB4、P36基因等。其中最常用的是染色体重复插入序列IS986或IS6110，1990年Hermans首先介绍并使用了IS986基因设计的引物扩增产物为245BP，研究表明这一基因对人型结核菌有特异性。而后Thierry又介绍了插入序列IS6110基因，并认为这一基因对人型结核菌具有比IS986更高的特异性及敏感性，最适合M.TB的检测。结核菌痰标本的PCR检测应注意以下几种常见的问题。其一，多条带。即扩增产物电泳后有三条或三条以上的萤光除最前面的引物以外有两条产物带，这与插入序列本身各片段长度有差异、结核菌在治疗过程中染色体畸变、断裂、缺欠及不等位交换有关。这种扩增结果的判断应特别注意，凡在阳性对照相应位置有明显条带的判阳性，否则应为阴性，或建议病人过一些时间后再复检一次；其二，结核痰样本PCR检测时，要使样本充分液化，否则痰液中的粘液成份将影响扩增效果，甚至会导致严重非特异性扩增，电泳结果呈雾状；基三，结核痰样本PCR检测结果可能表现为阳性、阴性交替出现，这与结核病灶的不规律排菌有关。

循环系统以肠道小RNA病毒感染最具代表意义，如柯萨奇病毒等。这些病毒经肠道粘膜、淋巴结进入血液，最终可定位于心肌细胞中导致心肌炎。目前对这些病毒的血液样本检测往往比较困难。PCR用于柯萨奇病毒检测时因其是RNA病毒所以应注意样本的保存。外在环境中存在大量RNA酶，病毒脱壳后RNA将被迅速降解。一般用于RNA检测的血清常温下不应超过24小时，4℃下可保存2天，-20℃下可以保存2月以下。

PCR检测在性传播性疾病(STD)的诊断中有较广泛的应用。经典的性传播疾病有梅毒、淋病、腹股沟淋巴肉芽肿、软锐湿疠、硬下疳等。而在现代STD中、解尿支原体及沙眼衣原体引起的非淋菌性尿道炎（NGU）可能更具有代表性意义。梅毒是由梅毒螺旋体感染布致，首先在局部形成硬软下疳，布后经血行播散到全身，最严重的是波及中枢神经系统。感染早期，梅毒螺旋体大量存在于硬下疳中，可以用生理盐水湿棉签擦去皮疹表面污物再用钝刀片轻轻刮去上皮及结痂，用洁净棉签取渗出液样本作PCR检测，其敏感性及特异性极高。二期梅毒皮疹中也存在梅毒螺体其取样方法同埂下疳，三期梅毒皮疹中一般无螺旋体存在，因此III病人及部分无皮疹的I、II期梅毒病人可以取EDTA抗凝全血检测。淋病是目前发病率最高的性传播性疾病之一，由淋病双球菌引起。淋病双球菌一般为胞内寄生，常见的感染部位为外生殖器、尿道粘膜最常见。在尿道及外生殖器分泌物中有许多非致病的双菌存在，对分泌物拭子进行涂片镜检时，常导致误诊。另外目前非淋球菌性尿道炎的发病率不断增加，鉴别诊断特要，培养法准确但费时且费用高，受用药的影响。PCR法简便、快捷、准确非常理想。常用的引物多采用外膜蛋白抗原基因、隐性质粒DNA或16s RNA基因。16s RNA基因设计的引物特异性高但其敏感性低；隐性质粒设计的引物敏感性高但偶尔出现多条带的扩增产物，判断结果时应以阳性对照为标准，凡在阳性对照相应部位有明显条带的为阳性，其余均为阴性。以往对沙眼衣原体及解脲支原体的检测主要靠培养法，费时且昂贵，简便快速的PCR检测对其有极高的使用价值。沙眼衣原体、解脲支原体样本来源主要是尿道及宫颈分泌物拭子，由于分泌物中有许多污物含有PCR扩增的抑制剂，因此每次采样时尽量避免采集过多脓性分泌物，如果宫颈分泌物太多可以先用湿棉签将表面的分泌物擦去，再用洁净的湿棉签轻压旋转采集宫颈脱落细胞送检，其准确性更高。PCR也可以用检测单纯疱疹病毒、EB病毒、乳头瘤病毒等。引物尖锐湿疣的病毒是人类乳头瘤（HPV）,可致生殖系统感染的乳头瘤病毒主要是6、11、16、18、33型。新近研究结果表明，在乳头瘤病毒引起的良、恶性生殖器病变中，与血清型的关系并不密切，经常有交叉或多型民时感染。为简化操作，对其基因对比分析寻找共同序列设计的简并引物可以同时检出这几种型别的病毒既简化操作又减少费用是一种极理想的方法。

我国恶性肿瘤为人口死亡的第一位原因，其中以肺癌、胃癌及食管癌的发病率最高，占恶性肿瘤死亡总数的60％以上。引起肿瘤的原因非常复杂包括外界环境因素及遗传背景。外界因此可分为三大类即化学、物理及生物因素。肿瘤与遗传有关的证据越来越多，除已知的单基因遗传肿瘤如视网膜细胞瘤、肾母细胞瘤等以外，还在几乎所有的肿瘤细胞中观察到原癌基因的重排，这些基因的变化常导致细胞增殖调控失调终形成肿瘤。癌基因是指在自然或实验条件下具有潜在诱导细胞恶性转化的基因，它们是在研究逆转录病毒时发现的。目前已知的肿瘤基因有60多种，1969年Hubner根据Rous(1911)的实验，在小鸡肉瘤滤液中发现一种能诱导宿主细胞转化的RNA病毒性癌基因（Viral Oncogene）。后来又在其它哺乳动物基因中发现与病毒癌基因同源序列，这种正常的细胞基因表达产物与细胞生长、增殖、分化有关。但若被某种因素激活就会转化为有活力的癌基因，通常称之为原癌基因（Proto Oncogene）。为了与病毒癌基因区分，分别用V-Onc及C-Onc基因来代表。目前了解较多的癌基因（C-one）有scr基因族、ras基因族、mgc及myb基因族。原癌基因存在于正常细胞中，并表达生物功能，只有在原癌基因被激活后才能诱导细胞转化，可能的原癌基因活化机理有：①点突变，受到射线、化学因素、生物因素的诱导，这样微小的变化，就会活化癌基因，活化的基因产物仅有极微的结构差异，但在功能在却有很大的区别。②获得启动子，原癌基因从病毒基因中获得启动子而活化。③基因易位，内外界因素能导致染色体的某些基因易位、重排使原来无活性的原癌基因移至某些强的启动因子或增强子附近而被活化。④原癌基因的过量扩增，原癌基因产物一般与生长因子、生长因子受体、跨膜信息蛋白有关或功能相近，过度表达时，会因调控失常而引起细胞癌变。另一类与肿瘤相关的基因是抑癌基因如P53。抑癌基因较复杂，作用机理不太清楚。癌基因检测中常用的分子生物学技术有：杂交、DNA分子克隆、PCR扩增及序列分析。PCR扩增简便、快捷有较强的实用性，甚至可从病人体液样本中检测活化的癌基因而不需取活组织，对癌症的早期诊断有极重要的意义。Ras基因是1964年首次从大鼠肉瘤的急性逆转录病毒（Harver Murine Sarcoma and Kister Murine Sarcoma Virus）中分离出来取大鼠肉瘤（Rat Sarcoma）的字首命名。1982年首次在人膀胱细胞细胞癌中检出有转化能力的ras基因与Harver大鼠肉瘤病毒癌基因有同源性称C-H-ras基因，后从肺细胞癌中发现了与Kister大鼠肉瘤癌基因同源的C-K-ras基因，从神经母细胞中又发现了N-ras基因。Ras基因激活的最常见方式是点突变。人类原发肿瘤时点突变主要发生在密码子12、13、59、61位。激活后的ras基因不牟自行灭活，根据其点突变的情况可以基因诊断、疗效观察。用PCR扩增样本ras原癌基因，再使用杂交法、限制性内切酶消化或产物测序法检测基因的突变情况即可用诊断。P53是抑制癌基因的代表，位于17号染色体短臂上，其产物为53KD分子量的蛋白从此而得名，可分为突变型和野生型，前者为癌基因，后者为抗癌基因。1979年Cane发现了P53蛋白Eliyahu发现了p53基因有抑癌作用。P53突变后其产物突变蛋白稳定性增加，半衰期较野生型基因产物长，在细胞内堆积，可以用免疫组化法测出。PCR-RELP、PCR-SSCP则因方法简单、快速、特异性高，更具有实用价值。在SSCP分析中，单链DNA因碱基序列的变异，导致构型改变，在进行凝胶电泳时，其泳动速率发生改变，从布将变异的DNA与正常DNA区分开，统计表明100-300bp分子大小的ssDNA突变检出率可达97％，300-450bp标出率可达69％，因此大于400bp的片段多态性应采用其它方法检测。

遗传病是由于遗传基础异常而引起的疾病，人类遗传病约有3000多种，患者占总人口数的10％。遗传病大概可分为单基因、多基因及染色体遗传病。常用诊断方法有家系谱分析、染色体检查（特别是显带法）、生物化分析等。随分子生物学发展，基因诊断愈来愈表现出其优越性，PCR技术是基因诊断的主要技术之一，为快速、准确地检测人类遗传病开辟了一个新的途径，预计与遗传相关的疾病的检测有80％将在3-5年内被PCR法所取代。PCR在遗传病诊断应用中，可以利用引物直接扩增变化的基因产物，也可以结合应用限制内切酶，分子杂交及电泳图谱分析进行诊断。应用较为广泛的有PCR法检测中海贫血、苯丙酮尿症、血友病、脆性X综合症及性别鉴定等。地中海贫血（Thalassmia）是世界上最常见的单基因遗传病，不有同类型，以a地中海贫血及在中海贫血最常见。a珠蛋白基因位于11号染色体短臂上，a珠蛋白基因突变致血红蛋白的全成减少或缺失，表现溶血性贫血，肝脾肿大，在我国发病率为0.66％，贵州、四川等地高发可达2.2％。应用PCR技术可以直接检测突变的基因诊断此病。苯丙酮尿症（Phenylketouria,PKU）是一种常染色体隐性遗传病。病人肝脏苯丙氨酸羟化酶严重缺乏使苯丙氨酸不能转化为酷氨酸血症，出现脑组织损伤，智力障碍。此病患者出生时正常，出生后一经确诊立即停止母乳喂养，采用低苯丙氨酸饮食治疗8-10年不致影响患者智力，但低苯丙氨酸饮食代价之昂贵是一般家庭所不能承受的，关键在于避免患儿出生。因此本病的早期诊断有极其重要的意义。PCR结合斑点杂交能有效诊断PKU。遗传性疾病的基因变化很复杂，单基因固定位点变异布致病的情况很少，因此基因诊断过程中往往需要PCR技术与限制性内切酶、斑点杂交、聚丙烯酰胺胶电泳图谱分析及扩增产物序列分析结合，作综合判断。

优生学包括基础优生学、社会优生学、临床优生学及环境优生学。孕期检查及产前诊断是临床优生学的最重要内容之一。孕期检查除一般项目外还能及时了解孕妇是患有某些对胎儿发育有严重影响的疾病如风疹病毒感染、沙眼衣原体、解脲支原体、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、弓体感染等，及时发现及时治疗并采取有效措施预防发展成为宫内感染。PCR技术对这些病原体的检测简便而确实，另外利用PCR技术可以对地中海贫血、血友病、苯丙酮尿症、脆性X综合症等遗传性疾病进行宫内诊断。可见PCR在优生优育方面有很高的应用价值。

PCR技术的出现对法医学的发展也有不可低估的作用。在法医物证如血斑、毛发、组织碎片等的确证，DAN多态性分析远比血清学或等方法确实可靠。早期DNA多态性分析主要使用Southern印迹杂交的方法。1985年Jeffreys首先采用肌红基因第一个内含子中的串联重复序列作探针，从人的基因库中筛选出小卫量DNA，使用阿交法产生杂交图谱即DNA指纹。这一技术成功地应用于个人识别及亲子鉴定。这种方法仍受到样本量的限制，当样本DNA数量不足时或DAN严重降解则不能正常检出。且杂交技术常使用同位素杯记探针要求较镐的防护措施。PCR技术的出现，可以对极少量物证如一根毛发、一滴血液、极小精斑都可以进行分析。在人类基因组中有许多由10-15bp核心顺序构成的串联重复DNA序列，具有单位点特征的称为VNTR结构，多位点串联成为卫星DNA。由于VNTR在等位基因中的多态性便构成了遗传标记。使用PCR技术对其进行扩增结合对扩增产物凝胶电泳图谱分析即可进行个人识别及亲子鉴定。由2-6核苷组成的重复串联序列称为微卫星。在人类基因组中，微卫星更加丰富。微卫星的重复序列比VNTR短，扩增分型简便，易于自动化，在VNTR或微卫星不仅重复片段的数量不同而且重复片段的核苷酸也具有多态性。在VNTR或微卫星多态性分析时，如再结合碱基配对分析可以藜得更大量的信息，这一种更有希望的标志即MVR（Microsatllite Variant Repeats）。理论上其对嫌疑人的排除率为99.999％。PCR技术可以完成替代早期的Southern印迹法进行多态性分析而且操作简便，敏感性及准确性都有大幅度的提高。当然PCR技术在法医中的应用仍在起步阶段有许多技术问题等待解决，如样本中的抑制剂、检村中DNA的损报告伤、PCR扩增污染等。想念随着PCR技术的不断完善它将在法医学领域中有更加广泛的应用。

第四篇：各种护理标识在手术护理中的应用

各种护理标识在手术护理中的应用

手术室 刘莉

摘要 手术室作为医院的特殊部门，每天要迎接全院所有手术科室的患者进行手术治疗工作。由于人员流动性大，工作环节多而复杂，护理风险较其他临床科室更大。为了提高护理人员的风险识别和防范能力，我院将护理标识应用于手术室护理工作的各个环节，充分利用了标识形象直观、色彩醒目等优点，极大地提高了工作效率及患者的安全度和医护人员的满意度。关键词 护理标识 应用 手术护理 1.手术患者系列标识 1.1腕带识别标识

病区护士于手术前在患者手腕带上填好患者姓名、性别、年龄、住院号、科室、床号、过敏史、血型和术前诊断，原则上佩戴于患者的手腕上，特殊情况佩戴于患者下肢，无药物过敏的患者用蓝色腕带，有药物过敏的患者一律用红色腕带。从患者进手术室到离开手术室，在麻醉实施前，手术开始前和手术结束后，便于手术医生、麻醉师、手术室护士三方核查。1.2管道识别标记

①输液管道

在手术中，患者安置的输液管道在透明敷贴的上方（便于观察注射部位）标明置管的日期、时间、置管人签全名。静脉管道用红色表贴。②引流管道某些手术患者在手术结束时身体带有多根引流导管，每个导管在导管与引流袋连接处贴有专门的一次性标识，注明日期、名称、操作者及备注，如胸腔引流管用浅绿色色，腹腔引流管用绿色，导尿管用黄色，T管引流用紫色。1.3手术部位标识 择期手术由主刀医生术前一天在手术部位划标识，急诊手术由手术医生在确立手术方案后在手术室进行标识，标识要求是在手术消毒铺巾后仍清晰可见。方便手术医生、麻醉师、手术室护士三方核对。2.环境标识 2.1手术区域标识

在手术室不同的区域都有明确的标识，如清洁区、缓冲区、洁净区、污染区。每个区域都在醒目处悬挂标识牌，提醒参加手术人员检查自己的着装及操作是否符合要求。2.2手术间标识

每个手术间门上有醒目的号码，以提醒参加手术的医生在第几手术间 进行手术。3手术室药品标识

3.1药品放置标识

将外用、内用药物及毒、剧、麻药物分开放置。每种药物都注明药物名称、剂量、浓度及有效期，毒、剧、麻药物由专人专柜保管，每班检查。3.2药品使用标识

配制不同药物时，在注射器上粘贴不同颜色的标签，注明药品的名称、浓度、剂量、时间、用法。4.手术室其他物品标识 4.1 无菌物品的标识 手术室无菌间内的无菌包外都有标识，注明包的名称和灭菌日期及有效期，并根据无菌架上的标识归类放置，这样既方便取用，也便于检查保管，减少过期物品的回炉率。4.2一次性物品的标识

随着医疗水平的提高，一次性物品的使用种类也不断增加。标识管理显得尤为重要。各类一次性物品都按照标识分别放置在塑料筐内，不仅方便取用，更有效防止一次性物品的挤压和过期。4.3贵重仪器标识

手术室的各种贵重仪器如电刀、电动止血带、超声刀、显微镜及显示器都粘贴标识，注明仪器的名称，注意事项及使用流程，重点标明安全值范围，如腹腔镜气腹压力设置为12-15mmHg,宫腔镜膨宫仪的压力范围为25-30mmHg，防止错误使用。各种贵重仪器定点放置、专人管理。4.4卫生处置的标识

每个手术间的拖把抹布都是专物专用，并用红色标识注明房间号，有效的避免交叉感染。4.5其他物品标识

手术室的其他物品如各种体位垫、搁手板、推车等都粘贴标识，便于使用、管理。讨论

手术患者腕带标识、手术部位标识，特殊仪器的安全指数标识等为规范医疗管理提供了可靠地查对辅助工具，形成了安全有效的预警机制，确保患者安全，较大程度的提高了管理工作效能。减少医疗纠纷和护理差错的发生。所有的物品药品定点存放保管，标识明确，使手术室护士使用方便、迅速，极大提高工作效率，保障手术工作顺利完成。醒目的标识能起到警示、提醒、敦促的作用。规范护生的护理行为和操作，让她们迅速熟悉手术室环境，早日融入手术室工作中

总之，手术室是一个高风险科室，必须加强风险管理。护理识别可以将手术室的安全隐患消灭在萌芽状态，提高护理人员对风险识别和防范能力，为规范医疗管理提供了可靠的查对辅助工具，形成了安全有效的预警机制，极大地降低了护理风险的发生。

参考文献

孙元美 护理警示标识在护理风险管理中的应用 护理研究 2006年第9C期

郑芝芬;蔡学联;陈爱初;唐晓英;;护理标识在护理风险管理中的实践和体会[J];护士进修杂志;2007年13期

第五篇：PICC在临床护理中的应用

PICC在临床护理中的应用

外周静脉置入中心静脉导管(Peripherally Inserted Central Catheter PICC)是由外周静脉穿刺插管,其导管尖端定位于上腔静脉或锁骨下静脉。根据导管质量的不同可以在体内留置3个月~1年，操作快捷，无严重并发症。为患者开辟了一条方便,安全有效的静脉通路。能将各种药物直接输送到中心静脉处，能迅速稀释药物浓度，避免刺激性药物对血管的损伤。该项护理技术已被广泛应用于临床。PICC的临床应用

1.1危重患者的抢救与锁骨下静脉置管相比，PICC组导管留置时间长、并发症少的优点，并且PICC操作简单，可由护士单独执行操作，当医生进行其他抢救时，为病情重的患者的抢救赢得了时间[1]。

1.2用于烧伤患者大面积烧伤患者由于皮肤受损面积大,体液丢失多，休克期需补充大量液体,加之感染、修复期用药时间长，故静脉输液是治疗的重要途径之一。PICC为患者短时快速补液开辟了一条方便、安全的通路，减少了患者反复穿刺的痛苦[2]。

1.3胃肠外营养治疗及肿瘤患者化疗胃肠外营养对于危重患者的治疗具有的重要意义，是肠瘘，重症胰腺炎，短肠综合征等疾病的主要治疗手段的其中一种。而建立起一条有效的静脉通道是临床开展肠外营养的必要条件。PICC输注肠外营养是一种并发症少、有效、成功率高、安全的营养支持方法。PICC置管并发症的发生率明显低于锁骨下静脉置管和外周静脉穿刺[3]。

肿瘤患者经常需要长期静脉输注化疗药物及高浓度营养物质，临床传统的用药途径为反复浅静脉穿刺，这种方法不可避免地造成患者痛苦，化疗药物特殊的不良反应及对血管的破坏。由于PICC直达上腔静脉，药物注入后迅速被稀释，从而解除了药物对周围血管的损害，保护了上肢血管网，为肿瘤患者提供了一种无痛性的治疗通路[4]。

1.4 用于胸腹腔积液引流与化学治疗胸腹腔穿刺属于一种创伤性的治疗措施，适用于胸腔里面有大量的积液、大量腹水的患者，若一次性放水量过多、过快,会因胸、腹腔内压突然的降低,使血管扩张了，以及回心血量的减少，从而导致血压的下降,患者会发现有明显的不适，因此需要多次的进行胸腹腔穿刺放液才可以达到疗效。进行PICC置管引流胸腹腔积液,其优势就在于穿刺得危险性较小而且并发症少、并可多次的进行放液。刘杰等[5]在62例的恶性胸腔积液治疗过程中，应用PICC管进行胸腔留置引流化疗，除了其中1例出现了穿刺点红肿,胸腔内积液沿PICC管外渗外，其余的患者都没有发生并发症。廖少萍等[6]对其中43例顽固性腹水患者行PICC管长期留置引流，平均置管的时间达到20~30 d，没有1例出现过腹腔感染、低血压等的不良反应。PICC管在引流的过程中若有患者出现了不适的症状，可随时的调节速度或关闭其引流系统，不需要进行拔管，还可以随时的行腔内注射药物治疗，可以达到控制胸、腹腔积液的目的[7]。选择应用PICC管做胸腹腔引流,不仅可以有效的减少患者进行反复穿刺的痛苦,从而还避免了有发生交叉感染的症状[8]。

2PICC的置管方法

2.1静脉选择首选贵要静脉，因它管径粗，静脉瓣少，且在置管体位下为导管头端到中心静脉最短、最直的途径。其次选肘正中静脉、头静脉，尽量避免在头静脉穿刺。与头静脉相比较，贵要静脉置管成功率高、留管时间长[9]。

2.2置管要领送管中动作轻柔,送管遇到阻力不可强行置，可向后撤导管，轻微旋转或调整方向。穿刺了以后从回血帽观察回血状况，保持住穿刺针的位置，隔无菌巾松止血带，轻压穿刺点上方止血，撤出穿刺针、固定，用肝素盐水抽吸至见到有回血，然后连接好肝素帽以及密闭输液器。穿刺部位放小方纱，将覆盖无菌的透气膜固定好，以穿刺点为中心用弹力绷带加压包扎24h，穿刺第2d再换膜1次，以后每2~3d换膜1次。导管的护理

3.1 封管液的选择封管液的选择是保证PICC管道通畅比较关键的一环，除使用正压封管方法外，高浓度肝素封管液(25u/ml)较低浓度(12.5u/ml)堵管率低。对于不能使用肝素的疾病如血友病、血小板减少症、以及化疗的患者，都可以使用生理盐水进行封管，在封管之前需要用20ml的生理盐水进行冲管，然后再进行生理盐水的正压封管[10]。

3.2 带管回家的护理 PICC留管的时间长，许多化疗的患者在化疗期间歇期需要带管回家。患者带管出院后要注意①穿刺侧肢体后不可进行剧烈的运动，不可提重物品。②衣袖要穿宽松的。②每次洗澡之前用清洁塑料薄膜包裹好穿刺部位上下至少到10cm，以防止浸湿了局部。不能进行盆浴。洗完澡后要尽快用干毛巾把局部擦干。③平时的时候要每星期去医院进行封管两次。④如果发现敷料有污染或者是局部有红、肿、痛、渗出等异常的情况及时到医院去处理。

3.3 拔管的护理拔出导管时的动作要轻，帮助患者摆好体位，仔细的清掉敷料，皮肤进行常规消毒，在插管的地方抓住导管，与之皮肤至平行慢慢的拔出。拔完后把无菌纱布放置于针孔处，轻轻按压直到不出血为止，然后固定好胶布。观察拔出来的导管尖端是不是完整的、测量管长、并且比较插管时的长度。常见并发症的原因及处理

4.1机械性静脉炎机械性静脉炎常出现在穿刺后48~72 h。主要因选择的导管型号和血管的内径大小不适宜、导管材料过硬、穿刺侧肢体活动过度等所致，还包括患者缺乏维护导管的基本知识[11]。女性患者常见。对已发生机械性静脉炎患者，应抬高患肢,促进静脉回流，缓解症状，肿胀部位给以隔湿热敷或使用如意金黄散加绿茶茶水调制糊状外敷并配合紫苏叶代茶饮效果较好。半导体激光治疗仪(红外线)照射患处也可以预防性使用[12]。

4.2导管阻塞导管堵塞原因分血凝性导管堵塞和非血凝性导管堵塞。前者是由于血管壁受损或炎症、封管时机、方法不正确导致血液返流、在管腔内形成凝块或血栓所致；后者是导管管径选择不当,导管扭曲、打折、血流速度减慢、血液粘度异常者、药物沉淀所致。

为预防导管阻塞，根据血管粗细选择合适规格的导管尤为必要。穿刺过程中减少对血管内膜的损伤、选择20ml注射器正压脉冲式封管、输注粘稠度较高的液体时必须每6h用生理盐水冲管一次、对易于发生血栓的患者应用抗凝剂、置入后行胸片检查确认导管有无打折、盘绕或其他受损迹象亦是常采取的措施。如发生液体输入不畅，考虑末端孔顶到血管壁，回血抽不出，此时将导管外端转几圈，避开静脉壁。如血栓堵塞时，注入溶栓药物(尿激酶浓度5000IU/m1)保留20min[13]。

4.3感染感染的发生与无菌技术、不及时换药或免疫力低下有关。临床操作中应严格无菌操作技术;及时更换无菌贴膜,第一个24h内更换贴膜1次,以后更换贴膜1次/w。遵医嘱给予抗生素治疗及营养支持治疗,提高患者抵抗力[14]。

4.4 导管脱出其常见原因有：护士未能向患者及家属说明导管留置中的注意事项，患者随意活动过度造成脱管，护理巡视不到位，未能及时发现贴膜松动或有汗液、血液渗出使贴膜脱落而导致导管脱出。因此，置管后应向患者及家属说明导管留置中的注意事项，活动时采取保护性措施。及时观察贴膜情况，如有松动或有汗液、血液渗出需及时更换。导管一旦脱出不可再用。

4.5穿刺点渗血渗液发生原因常见于：渗血凝血机制异常、导管固定不当自由出入穿刺点频繁、穿刺位置选择不当、渗液纤维蛋白鞘生成、患者低蛋白血症期、输液管路不畅等。对前者应弹力绷带加压包扎，后者给予紫外线治疗仪照射，在15cm的距离使用，第1d5s，第2d 10s，第3d 15s，症状未完全缓解可重复照射，合并使用抗生素[15]。