细胞生物学实验课自我测试题

第一篇：细胞生物学实验课自我测试题

细胞生物学实验课自我测试题

1、显微镜的光学系统主要有哪部分些构成？

2、拿到一张固定装片，为了很快找到需要找到的物像，首先应该做什么？

3、为避免显微镜的灯泡烧坏，应注意什么？

4、在低倍镜下找到物像后，为了看得更仔细，向高倍镜转换过程中需要调整粗调节螺旋吗？为什么？

5、如何搬动显微镜？

6、推血涂片时，要一次成功。即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重新开始。为什么？

7、使用染色缸时，为避免拿出玻片时找不到涂有细胞的一面，应注意什么？

8、如何知道试管中的红细胞溶血了？

9、抓取小鼠注射的正确方法是怎样的？

10、取蛙血时，从胸腔最先看到的一般是哪个器官？如何快速找到心脏？

11、细胞生物学实验要求学生掌握的最重要的技能是什么？

12、鸡的红细胞和小鼠的巨噬细胞相比，哪个体积大？

13、细胞处于高渗或低渗溶液中，如何判断水的运动方向？

14、可自由扩散的脂溶性小分子对细胞的影响如何？

15、显微镜下口腔粘膜细胞的线粒体的形状是什么样的？

16、在细胞吞噬活动观察的实验中，如何在显微镜下快速找到巨噬细胞？

17、推蛙血涂片时应注意什么？

18、为什么要用派洛宁和甲基绿染的混合染液染色RNA和DNA?

19、派洛宁和甲基绿染的混合染液染色细胞，细胞核和细胞质的颜色分别是什么颜色？为什么？

20、使用显微镜观察标本时，为什么必须按照从低倍镜到高倍镜，再到油镜的顺序进行？

21、使用显微镜时，为什么要先将10倍物镜与标本表面的距离调节到6mm之内？

22、如果标本片放反了，可用高倍镜或油镜找到标本吗？为什么？

23、怎样才能准确而迅速地在高倍镜或油镜下找到目标？

24、如果细调焦螺旋已转至极限而物像仍不清晰时，应该怎么办？

25、如何判断视野中所见到的污点是在目镜上？

26、在对低倍镜进行准焦时，如果视野中出现了随标本片移动而移动的颗粒或斑纹，是否将标本移至物镜中央，就一定能找到标本的物像？为什么？

27、动物细胞与植物细胞有哪些重要区别？

28、请说明细胞膜具有哪些特点。29 细胞的吞噬活动对人体有何意义？

30、物质跨膜（细胞膜）运输有哪些方式？请比较它们的不同点。

31、比较动植物细胞有丝分裂的异同点。

32、开始显微镜使用时，电源接通后灯泡不亮,可能有哪几种原因？

33、怎样才能快速在高倍镜下找到洋葱根尖细胞的分裂相？

34、高倍镜观察标本时，无论怎么调节微调螺旋，视野都很模糊，可能的原因是什么？该怎么处理？

35、动物细胞马蛔虫卵的有丝分裂相的两种图形：染色体直线排列与放射状排列属于什么时期？

36、着丝点的分裂在有丝分裂的那一个时期？

37、观察洋葱根尖和马蛔虫卵有丝分裂时，二者都能看到核仁吗？

38、显示蟾蜍血液细胞DNA和RNA时，为什么要在纯丙酮中迅速过一下？

39、细胞膜的通透性观察实验中溶血的原因是什么？ 40、NaCl溶液和葡萄糖溶液为什么不能产生溶血？

41、蟾蜍心脏取血时，剪开其表皮、打开胸腔时，应注意什么？

42、用牙签取自己的颊粘膜上皮细胞时，最先应做什么？

43、颈椎脱臼法处死大（小）白鼠时关键要注意什么？

44、在鼠肝细胞活体染色显示线粒体的实验操作中，为什么切取肝脏边缘较薄的肝组织一小块放入盛有染液的小培养皿内（或者凹玻片中）时，染液不可太多？

45、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前两天，每天每只小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml（含台酚蓝）？

46、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前先给每只小鼠腹腔注射1%鸡红细胞悬液1ml？

47、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察时，为什么25分钟后再向腹腔注射0.5ml生理盐水？

48、观察蛙血涂片中的细胞形态结构时，甲醇的作用是什么？操作时要注意什么？

49、人的红细胞有细胞核吗？蛙的红细胞有细胞核吗？ 50、观察动植物细胞分裂时，间期的典型特点是什么？

细胞生物学实验课自我测试题答案

1、目镜、物镜、光源、聚光镜。

2、对着光线用肉眼找到固定装片上的被观察物，或者盖玻片的位置，将它放在通光孔的正中央。

3、一旦不观察或离开座位，应关闭光源开关。

4、不用，只调细调节螺旋。因为所有物镜的焦平面都在一个平面内，秩序用微调螺旋轻轻调节即可。

5、一手托着镜座，一手握着镜臂。

6、因为推两次必然造成两层涂片，细胞层很厚，细胞堆积在一起，在显微镜下无法清楚地观察单个血细胞。同时，第二次推片时必然破坏第一次推片涂布的细胞

7、应把所用的玻片正面都朝向一侧，并记下方向。

8、隔着试管可以清晰地看见后面纸上的字，即从不透明变成透明。

9、左手大拇指、食指抓小鼠头颈的上后部毛皮，使其颈部不能活动，其余手指固定其身体，将其翻转后可直接用右手持注射器对其胸腹部注射。

10、红色泡状的肺。跳动的器官即心脏。

11、非常熟练地使用显微镜，掌握临时装片的基本技术，各种细胞形态的观察。

12、一般说来小鼠的巨噬细胞大一些。

13、细胞处于高渗溶液中则水出细胞，细胞处于低渗溶液中则水进入细胞。

14、如果胞外的脂溶性小分子浓度很大，则会大量进入细胞，导致细胞破裂。

15、颗粒状、棒状、弯曲的线状。

16、细胞内有很多蓝色淀粉小颗粒的细胞，就是巨噬细胞。这是因为实验前向小鼠腹腔注射了含有台酚兰的淀粉肉汤，巨噬细胞吞噬了台酚兰颗粒。

17、斜角越小，速度越快，涂片越薄。

18、核酸是酸性的，它们对于碱性染料派洛宁和甲基绿具有亲和力。利用这两种染料的混合液处理细胞，可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色，这种颜色上的差异由DNA和RNA聚合程度的不同所引起，因为甲基绿分子上有两个相对的正电荷，它与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力，可使DNA分子染成蓝绿色；而派洛宁分子中仅一个正电荷，可与低聚分子RNA相结合使其染成红色。这样细胞中的DNA和RNA可被区别开来。

19、绿色和红色。因为细胞核中主要是DNA，细胞质中主要是RNA，而它们分别被绿色的甲基绿和红色的派洛宁着色。

20、因为低倍镜观察的表本范围最大，可以更快地找到要观察目标。

21、因为10倍物镜的工作距离为7.63mm，而为了保护物镜不与玻片相撞，应该将目镜与载玻片的距离调至6mm以内后，再下调载物台，既可找到观察目标，又可保护物镜。

22、不能，因为载玻片的厚度远大于高倍镜或油镜的工作距离。

23、在低倍镜下找到目标后，调至视野正中央，再转换到高倍镜。

24、应该换用粗调节旋钮，轻轻同方向转动一下，在用微调节旋钮调节焦距。

25、轻轻转动目镜，污点随目镜转动，就证明污点在目镜上面。

26、不一定，因为这些斑纹可能位于载玻片的反面（下面）。

27、动物细胞有中心体，植物细胞没有，植物细胞有液泡、细胞壁，动物细胞没有。

28、细胞膜的主要特点是具有不对称性、流动性。

29、细胞的吞噬活动对人体具有保护作用，免受外来微生物、有害物质的侵害。30、主动运输：消耗能量，从低浓度到高浓度

被动运输：不需要消耗能量，从高浓度一侧向低浓度一侧运输。又可以分为：简单扩散：不需要载体的帮助，物质直接透过细胞膜；帮助扩散：需要载体的帮助。通道运输：高浓度相低浓度运输，专一性强，运输速度快

31、动物细胞分裂时有星体的形成，而植物细胞因为没中心体，分裂时没有星体。动物细胞分裂时细胞膜缢缩分裂成两个细胞，而植物细胞因为有坚硬的细胞壁，在赤道板的位置重新形成细胞壁。

32、一是总开关未打开，或者插头接触不良；二是亮度调节旋钮没有打开。

33、先用肉眼对着光线找到切片上的洋葱根尖，然后放在通光孔的正中央，用10倍的物镜，在生长区找到分裂相，再转换到高倍镜即可。

34、可能的原因主要有：镜头被污染，尤其可能是被镜油污染。应该先用二甲苯清洗，再用擦镜纸擦去二甲苯。

35、有丝分裂中期，与赤道板垂直的切面和与赤道板平行的切面。

36、有丝分裂后期

37、洋葱根尖的间期能看到核仁一个或者二到三个。动物细马蛔虫卵细胞看不到。

38、在纯丙酮中迅速过一下的目的是为了脱去多余的染料，又不至于脱去已经与DNA和RNA结合的染料。

39、蒸馏水：水分子可以自由通过细胞膜，低渗溶液中的水分子迅速进入细胞内，使细胞破裂。乙醇、甘油：可以自由进入细胞，使细胞破裂。乙醇进入的速度慢于甘油。40、NaCl溶液的浓度高于生理盐水，是高渗溶液，细胞在高渗溶液中，细胞内水分子流出细胞，钠离子和氯离子都不能通过细胞膜

41、用镊子挑起皮肤，仔细用剪刀剪开皮肤复，再用镊子夹住胸骨。小心剪开，以免直接伤及内脏，流血过多，不利于取血。

42、漱口。这样可除去口中的食物残渣，便于刮下的大多是细胞。

43、固定头颈部，用力一下子拉直脊椎。

44、要使肝组织的上半部分暴露在空气中，而不可使组织块完全淹没，这样细胞内线粒体的酶系可被充分氧化而使线粒体易于着色。

45、为了在后续观察实验中清晰地观察到巨噬细胞，含台酚蓝的淀粉肉汤为蓝色，被巨噬细胞吞噬后可示踪巨噬细胞；此外，腹腔注射的淀粉肉汤作为外来异物，会吸引小鼠体内的巨噬细胞集中到腹腔，便于后续实验得到大量的巨噬细胞。

46、为了观察小鼠腹腔巨噬细胞如何吞噬鸡红细胞

47、使腹腔中的液体多一点，便于收集巨噬细胞和鸡红细胞；生理盐水不会使细胞破裂或变形。

48、甲醇的作用是使细胞固定。注意用完甲醇后一定要倒回原瓶，予以回收，以免污染环境。尤其应该严格避免甲醇溅到眼睛和皮肤上，一旦醇溅到眼睛和皮肤上，应立即用清水冲洗。

49、人的红细胞没有细胞核。蛙的红细胞有细胞核。50、核膜、核仁清晰，染色质呈丝状。

第二篇：细胞生物学实验课自我测试题

细胞生物学实验课自我测试题

1、显微镜的光学系统主要有哪部分些构成？

2、拿到一张固定装片，为了很快找到需要找到的物像，首先应该做什么？

3、为避免显微镜的灯泡烧坏，应注意什么？

4、在低倍镜下找到物像后，为了看得更仔细，向高倍镜转换过程中需要调整粗调节螺旋吗？为什么？

5、如何搬动显微镜？

6、推血涂片时，要一次成功。即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重新开始。为什么？

7、使用染色缸时，为避免拿出玻片时找不到涂有细胞的一面，应注意什么？

8、如何知道试管中的红细胞溶血了？

9、抓取小鼠注射的正确方法是怎样的？

10、取蛙血时，从胸腔最先看到的一般是哪个器官？如何快速找到心脏？

11、细胞生物学实验要求学生掌握的最重要的技能是什么？

12、鸡的红细胞和小鼠的巨噬细胞相比，哪个体积大？

13、细胞处于高渗或低渗溶液中，如何判断水的运动方向？

14、可自由扩散的脂溶性小分子对细胞的影响如何？

15、显微镜下口腔粘膜细胞的线粒体的形状是什么样的？

16、在细胞吞噬活动观察的实验中，如何在显微镜下快速找到巨噬细胞？

17、推蛙血涂片时应注意什么？

18、为什么要用派洛宁和甲基绿染的混合染液染色RNA和DNA?

19、派洛宁和甲基绿染的混合染液染色细胞，细胞核和细胞质的颜色分别是什么颜色？为

什么？

20、使用显微镜观察标本时，为什么必须按照从低倍镜到高倍镜，再到油镜的顺序进行？

21、使用显微镜时，为什么要先将10倍物镜与标本表面的距离调节到6mm之内？

22、如果标本片放反了，可用高倍镜或油镜找到标本吗？为什么？

23、怎样才能准确而迅速地在高倍镜或油镜下找到目标？

24、如果细调焦螺旋已转至极限而物像仍不清晰时，应该怎么办？

25、如何判断视野中所见到的污点是在目镜上？

26、在对低倍镜进行准焦时，如果视野中出现了随标本片移动而移动的颗粒或斑纹，是否

将标本移至物镜中央，就一定能找到标本的物像？为什么？

27、动物细胞与植物细胞有哪些重要区别？

28、请说明细胞膜具有哪些特点。

29细胞的吞噬活动对人体有何意义？

30、物质跨膜（细胞膜）运输有哪些方式？请比较它们的不同点。

31、比较动植物细胞有丝分裂的异同点。

32、开始显微镜使用时，电源接通后灯泡不亮,可能有哪几种原因？

33、怎样才能快速在高倍镜下找到洋葱根尖细胞的分裂相？

34、高倍镜观察标本时，无论怎么调节微调螺旋，视野都很模糊，可能的原因是什么？该

怎么处理？

35、动物细胞马蛔虫卵的有丝分裂相的两种图形：染色体直线排列与放射状排列属于什么

时期？

36、着丝点的分裂在有丝分裂的那一个时期？

37、观察洋葱根尖和马蛔虫卵有丝分裂时，二者都能看到核仁吗？

38、显示蟾蜍血液细胞DNA和RNA时，为什么要在纯丙酮中迅速过一下？

39、细胞膜的通透性观察实验中溶血的原因是什么？

40、NaCl溶液和葡萄糖溶液为什么不能产生溶血？

41、蟾蜍心脏取血时，剪开其表皮、打开胸腔时，应注意什么？

42、用牙签取自己的颊粘膜上皮细胞时，最先应做什么？

43、颈椎脱臼法处死大（小）白鼠时关键要注意什么？

44、在鼠肝细胞活体染色显示线粒体的实验操作中，为什么切取肝脏边缘较薄的肝组织一

小块放入盛有染液的小培养皿内（或者凹玻片中）时，染液不可太多？

45、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前两天，每天每只小鼠腹腔注射6%

淀粉肉汤1ml（含台酚蓝）？

46、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前先给每只小鼠腹腔注射1%鸡红细

胞悬液1ml？

47、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察时，为什么25分钟后再向腹腔注射0.5ml生理盐水？

48、观察蛙血涂片中的细胞形态结构时，甲醇的作用是什么？操作时要注意什么？

49、人的红细胞有细胞核吗？蛙的红细胞有细胞核吗？

50、观察动植物细胞分裂时，间期的典型特点是什么？

细胞生物学实验课自我测试题答案

1、目镜、物镜、光源、聚光镜。

2、对着光线用肉眼找到固定装片上的被观察物，或者盖玻片的位置，将它放在通光孔的正中央。

3、一旦不观察或离开座位，应关闭光源开关。

4、不用，只调细调节螺旋。因为所有物镜的焦平面都在一个平面内，秩序用微调螺旋轻轻调节即可。

5、一手托着镜座，一手握着镜臂。

6、因为推两次必然造成两层涂片，细胞层很厚，细胞堆积在一起，在显微镜下无法清楚地观察单个血细胞。同时，第二次推片时必然破坏第一次推片涂布的细胞

7、应把所用的玻片正面都朝向一侧，并记下方向。

8、隔着试管可以清晰地看见后面纸上的字，即从不透明变成透明。

9、左手大拇指、食指抓小鼠头颈的上后部毛皮，使其颈部不能活动，其余手指固定其身体，将其翻转后可直接用右手持注射器对其胸腹部注射。

10、红色泡状的肺。跳动的器官即心脏。

11、非常熟练地使用显微镜，掌握临时装片的基本技术，各种细胞形态的观察。

12、一般说来小鼠的巨噬细胞大一些。

13、细胞处于高渗溶液中则水出细胞，细胞处于低渗溶液中则水进入细胞。

14、如果胞外的脂溶性小分子浓度很大，则会大量进入细胞，导致细胞破裂。

15、颗粒状、棒状、弯曲的线状。

16、细胞内有很多蓝色淀粉小颗粒的细胞，就是巨噬细胞。这是因为实验前向小鼠腹腔注射

了含有台酚兰的淀粉肉汤，巨噬细胞吞噬了台酚兰颗粒。

17、斜角越小，速度越快，涂片越薄。

18、核酸是酸性的，它们对于碱性染料派洛宁和甲基绿具有亲和力。利用这两种染料的混合液处理细胞，可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色，这种颜色上的差异由DNA和RNA聚合程度的不同所引起，因为甲基绿分子上有两个相对的正电荷，它与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力，可使DNA分子染成蓝绿色；而派洛宁分子中仅一个正电荷，可与低聚分子RNA相结合使其染成红色。这样细胞中的DNA和RNA可被区别开来。

19、绿色和红色。因为细胞核中主要是DNA，细胞质中主要是RNA，而它们分别被绿色的甲

基绿和红色的派洛宁着色。

20、因为低倍镜观察的表本范围最大，可以更快地找到要观察目标。

21、因为10倍物镜的工作距离为7.63mm，而为了保护物镜不与玻片相撞，应该将目镜与载

玻片的距离调至6mm以内后，再下调载物台，既可找到观察目标，又可保护物镜。

22、不能，因为载玻片的厚度远大于高倍镜或油镜的工作距离。

23、在低倍镜下找到目标后，调至视野正中央，再转换到高倍镜。

24、应该换用粗调节旋钮，轻轻同方向转动一下，在用微调节旋钮调节焦距。

25、轻轻转动目镜，污点随目镜转动，就证明污点在目镜上面。

26、不一定，因为这些斑纹可能位于载玻片的反面（下面）。

27、动物细胞有中心体，植物细胞没有，植物细胞有液泡、细胞壁，动物细胞没有。

28、细胞膜的主要特点是具有不对称性、流动性。

29、细胞的吞噬活动对人体具有保护作用，免受外来微生物、有害物质的侵害。

30、主动运输：消耗能量，从低浓度到高浓度

被动运输：不需要消耗能量，从高浓度一侧向低浓度一侧运输。又可以分为：简单扩散：不需要载体的帮助，物质直接透过细胞膜；帮助扩散：需要载体的帮助。

通道运输：高浓度相低浓度运输，专一性强，运输速度快

31、动物细胞分裂时有星体的形成，而植物细胞因为没中心体，分裂时没有星体。动物细胞

分裂时细胞膜缢缩分裂成两个细胞，而植物细胞因为有坚硬的细胞壁，在赤道板的位置重新形成细胞壁。

32、一是总开关未打开，或者插头接触不良；二是亮度调节旋钮没有打开。

33、先用肉眼对着光线找到切片上的洋葱根尖，然后放在通光孔的正中央，用10倍的物镜，在生长区找到分裂相，再转换到高倍镜即可。

34、可能的原因主要有：镜头被污染，尤其可能是被镜油污染。应该先用二甲苯清洗，再用

擦镜纸擦去二甲苯。

35、有丝分裂中期，与赤道板垂直的切面和与赤道板平行的切面。

36、有丝分裂后期

37、洋葱根尖的间期能看到核仁一个或者二到三个。动物细马蛔虫卵细胞看不到。

38、在纯丙酮中迅速过一下的目的是为了脱去多余的染料，又不至于脱去已经与DNA和RNA

结合的染料。

39、蒸馏水：水分子可以自由通过细胞膜，低渗溶液中的水分子迅速进入细胞内，使细胞破

裂。乙醇、甘油：可以自由进入细胞，使细胞破裂。乙醇进入的速度慢于甘油。

40、NaCl溶液的浓度高于生理盐水，是高渗溶液，细胞在高渗溶液中，细胞内水分子流出

细胞，钠离子和氯离子都不能通过细胞膜

41、用镊子挑起皮肤，仔细用剪刀剪开皮肤复，再用镊子夹住胸骨。小心剪开，以免直接伤

及内脏，流血过多，不利于取血。

42、漱口。这样可除去口中的食物残渣，便于刮下的大多是细胞。

43、固定头颈部，用力一下子拉直脊椎。

44、要使肝组织的上半部分暴露在空气中，而不可使组织块完全淹没，这样细胞内线粒体的酶系可被充分氧化而使线粒体易于着色。

45、为了在后续观察实验中清晰地观察到巨噬细胞，含台酚蓝的淀粉肉汤为蓝色，被巨噬细

胞吞噬后可示踪巨噬细胞；此外，腹腔注射的淀粉肉汤作为外来异物，会吸引小鼠体内的巨噬细胞集中到腹腔，便于后续实验得到大量的巨噬细胞。

46、为了观察小鼠腹腔巨噬细胞如何吞噬鸡红细胞

47、使腹腔中的液体多一点，便于收集巨噬细胞和鸡红细胞；生理盐水不会使细胞破裂或变

形。

48、甲醇的作用是使细胞固定。注意用完甲醇后一定要倒回原瓶，予以回收，以免污染环境。

尤其应该严格避免甲醇溅到眼睛和皮肤上，一旦醇溅到眼睛和皮肤上，应立即用清水冲洗。

49、人的红细胞没有细胞核。蛙的红细胞有细胞核。

50、核膜、核仁清晰，染色质呈丝状。

第三篇：细胞生物学实验总结

细胞自主实验方法总结

自主实验是在老师的指导和帮助下学生自己设计实验且自己准备实验所需的一切准备工作来完成的实验。平时做实验老师占重要地位但自主实验中学生占重要地位。自主实验中学生自己思考设计出实验方案，实验所需试剂，实验方法和步骤然后按该方案来做实验。

老师让学生做自主实验的原因是老师想培养学生的动手能力，合作能力，想让学生独立思考，想让学生亲自动手做实验，最重要的一点是把理论知识结合实践。

细胞培养是在体外模拟体内的生理环境，培养从机体中取出的细胞，并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。

本实验采用了微量全血培养技术，培养人体外周血小淋巴细胞,使原处于 G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞, 进而进行有丝分裂，增殖成功率高、技术方法完善。把体外增殖的小淋巴细胞裂解,对细胞核染色体进行染色和 固定,制得人染色体标本,用于进行染色体组型分析，取得了令人满意的效果。

人和动物细胞培养是动物细胞工程的一项基本技术。目前,动物细胞培养主要用于通过大量的细胞培养获得有经济价值的生物产品和细胞本身。1966 年以前基本上用 Mo o r he a d 等，1960年建立的人外周血白细胞培养技术,该方法比较完善,成功率高。但缺点是取血量多,手续较麻烦。近30 多年来国内外绝大多数均采用微量全血培养技术,不但取血量少,而且可略去一些繁琐操作过程,如离心、分离血浆等,做起来既方便,也节省人力和物力, 比较适于推广和使用。

本实验对实验操作要求比较高。实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。操作做成中也要保证不污染。

第四篇：细胞生物学实验思考题

细胞生物学实验思考题

1、为什么暗视场照明的视场暗黑，而样品像明亮？相差显微镜镜检时，为什么要用绿色滤色镜观察活体样本？

暗视场显微镜照明光线不直接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的；

为获得好的效果，要用波长范围窄的单色光，选用绿色滤光镜，不但可满足这个要求，而且绿色可吸收红外光，减少发热。

2、为什么活细胞不易染色，从细胞生物学角度解释原因。

染色剂一般有剧毒，而细胞膜具有选择透过性，会将一部分对细胞有害的物质阻挡在细胞外，所以活细胞难以染色。而当细胞死亡后，细胞膜失去选择透过性，染色剂得以进入，细胞就被染色。

3、简述中性红染液、詹纳斯绿B染液用于细胞超活染色的原理。

Janus green B活体细胞染色的机理：Janus green B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态（即有色状态），呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基（即无色状态）。

Neutral red 碱性染料活体染色的机理：neutral red为弱碱性染料，对液泡系（即高尔基体）的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能与液泡中某些蛋白质有关。

4、什么是细胞骨架？它有何主要功能？

生物学中细胞骨架指真核细胞中与保持细胞形态结构和细胞运动有关的纤维网络。包括微管、微丝和中间丝。

细胞骨架不仅在维持细胞形态，承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用，而且还参与许多重要的生命活动，如：在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离，在细胞物质运输中，各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向转运；在肌肉细胞中，细胞骨架和它的结合蛋白组成动力系统；在白细胞(白血球)的迁移、精子的游动、神经细胞轴突和树突的伸展等方面都与细胞骨架有关。另外，在植物细胞中细胞骨架指导细胞壁的合成。

5、列举你所知道的动、植物细胞中由微丝组成的结构。

肌原纤维、微绒毛、应力纤维

6、显示细胞骨架的原理是什么？说明实验中使用的TritonX-100、戊二醛、考马斯亮蓝R-250的作用。

原理：用考马斯亮蓝对细胞骨架进行染色，染色观察前，应首先用去垢剂抽提掉胞质中的除骨架以外的其他蛋白。

TritonX-100：非离子型去垢剂，可使细胞质膜中和细胞质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提。

戊二醛：固定细胞

考马斯亮蓝R-250：蛋白质染料，对细胞骨架染色。

7、显示脂类时，制片及染色有何特殊之处？

制片时需要用10%甲醛钙固定液进行固定，要求用苏丹Ⅲ饱和溶液染色，但是对不同部位的脂类进行处理时有区别。

8、简述Fenulgen反应的原理和实验的关键步骤。

原理：DNA经弱酸水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷脂键打开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基，醛基在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色复合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色的阴性反应。关键步骤：①Schiff试剂遮光染色30min，一定要遮光；

②压片时，一定要压均匀，否则细胞会重叠，影响观察； ③洗玻片上的试剂，要注意样品不被洗掉。

9、试述差速离心法分离细胞器的原理。

在一定的离心场中（选用离心机的一定转速），球心颗粒的沉降速度取决于它的密度、半径和悬浮介质的黏度。在一均匀的悬浮介质中离心一定时间，组织匀浆中的各种细胞器及其它内含物由于沉降速度不同将停留在高低不同的位置。依次增加离心力和离心时间，就能够使这些颗粒按其大小、轻重分批沉降在离心管底部，从而分批收集。

10、试述密度梯度离心法分离细胞器的原理。

用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

11、为什么要事先向小鼠腹腔注射淀粉肉汤悬浮液？吞噬细胞的变形运动及吞噬作用的生物学机理是什么？

①诱导小鼠腹腔大量产生巨噬细胞，使其聚集； ②细胞膜具有一定的流动性。

第五篇：《细胞生物学实验》教学大纲

《细胞生物学实验》教学大纲

课程名称：细胞生物学实验

课程编号：12030037

课程类别：专业基础课/必修课

学时/学分： 24/0.75

开设学期：第四学期

说明

一、课程性质

细胞生物学实验是生物科学和生物工程专业一门重要的必修基础课程，在生命学科的本科教学中有着十分重要的地位。通过实验，不仅使学生加深对细胞生物学理论知识的理解和认证，同时通过对细胞生命现象的观察和亲手操作，使学生获得有关细胞生命活动的感性知识，有效地提高理论课的教学效果，并使学生掌握细胞生物学实验的基本原理、方法和技能，培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事教学或科学研究打下坚实的基础。

二、教学目标

通过细胞生物学实验，使学生们更加牢固地掌握细胞生物学基本知识和基本理论，对细胞的结构和功能有全面、真实的认识，使学生们掌握细胞生物学的基本实验方法和技能。

三、学时分配表 序号

实验项目实验 时数 实验

类型

内容与要求 小计实验1细胞膜的渗透性及细胞凝集反应4设计性了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度，掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝集的原理实验2叶绿体的分离与荧光观察3验证性掌握荧光显微镜的原理和使用方法；观察叶绿体的自发荧光与次生荧光；

通过对植物叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法实验3植物细胞骨架的观察4验证性掌握光学显微镜观察植物细胞骨架的原理和方法实验4鸡血细胞的体外融合6综合性了解PEG诱导细胞融合的基本原理，通过PEG诱导鸡红细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合技术实验5巨噬细胞吞噬现象的观察7综合性通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的活动观察，加深理解细胞吞噬作用的过程和意义；掌握小白鼠腹腔注射给药方法和颈椎脱臼处死法合计24

四、实验方法与要求建议

本课程采用传统的实验教学方法，2人一组操作，结合多媒体、小组讨论与集体讨论、实验设计、教学录像、细胞生物学小知识和小技巧介绍等多种教学手段，帮助学生通过本课程的学习全面地掌握细胞生物学的基本实验方法与技能以及实验设计的思路，以提高学生从事教学和科学研究的综合素质。

要求学生认真预习，熟悉实验的内容，了解所用的仪器用具；实验中严格按操作规程进行，仔细观察，及时记录实验现象及结果，认真做好每一天的实验报告；实验结束后仔细分析和总结实验结果；使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，对任何自己不熟悉的实验仪器都不要随意操作；在操作过程中发现任何意外现象都要及时向任课教师报告；在实验过程中制造的任何垃圾都要丢到垃圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内），严禁随地投弃。

五、考核方式及要求

1.考核方式：考试（√）；考查（）

2.成绩评定：

计分制：百分制（√）；五级分制（）；两级分制（）

成绩构成：实验成绩（100分）=实验预习（10％）+实验态度、卫生、安全（10％）+实验操作（25％）+实验报告（25％）+实验考试（30％）。

本文

实验一 ?细胞膜的渗透性及细胞凝集反应

一、实验性质

实验类别：专业基础课/必修

实验类型：设计性

计划学时：4学时

实验分组：2人/组

二、实验目的

1.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度，分析影响细胞膜渗透性的因素；

2.理解凝集素使细胞发生凝集反应的原理，观察细胞的凝集现象。

三、实验的基本内容和要求

1.制备羊血细胞悬液，加1份羊血和10份0.17mol/LNaCl溶液。

2.制备土豆凝集素的。

3.取10支试管分别加入1mL稀释羊血和10mL不同浓度的试剂，观察是否溶血，如不溶血，观察溶液的颜色有无深浅的变化。

4.用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞悬液各一滴，置载玻片上，充分混匀，静置20min后于低倍镜下观察血球凝集现象。以PBS液加2%红细胞悬液作对照实验。

四、实验仪器设备及材料

10ml移液管、1ml移液管、试管架、试管、烧杯、显微镜、粗天平、载玻片、盖玻片、土豆块茎、0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L硝酸钠、0.12mol/L硫酸钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮、新鲜羊血（加抗凝剂）、PBS缓冲液

五、实验操作要点

1.血细胞悬液的制备

2.低渗溶液

3.血红细胞的渗透性实验

4.土豆凝集素的制备

5.凝集反应

六、实验教学建议

先让学生通过查资料和实验指导书提前预习该实验，实验课上让1-2位学生来讲实验原理，操作步骤，其他同学做补充，老师做点评和总结，指出实验中注意事项等。学生自己以小组为单位配置所有药品并进行实验。

实验二 叶绿体的分离与荧光观察

一、实验性质

实验类别：专业基础课/必修

实验类型：验证性

计划学时：3学时

实验分组：2人/组

二、实验目的

1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法；

2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。

三、实验的基本内容和要求

叶绿体的分离与观察、菠菜叶片徒手切片观察。

四、实验仪器设备及材料

研钵、粗天平、纱布、量筒、离心管、滴管、普通离心机、荧光显微镜、普通光学显微镜、0.35mol/L的NaCl、0.01%丫啶橙、新鲜菠菜

五、实验操作要点

1.叶绿体的分离与观察

2.菠菜手切片观察

六、实验教学建议

先让学生通过查资料和实验指导书提前预习该实验，实验课上让学生来讲实验原理和操作步骤，其他同学做补充，老师做点评和总结，指出实验中注意事项之后学生再进行实验等。

实验三 植物细胞骨架的观察

一、实验性质

实验类别：专业基础课/必修

实验类型：验证性

计划学时：4学时

实验分组：1人/组

二、实验目的

了解细胞骨架的结构特征及制备技术。

三、实验内容

制备植物细胞骨架、用光学显微镜观察细胞骨架的原理和方法。

四、实验仪器设备与试剂

1.材料：洋葱鳞茎

2.试剂

(1).磷酸盐缓冲液

(2)M缓冲液

(3)1% TritonX-100：用M缓冲液配置。

(4).2%考马斯亮蓝R-250： 46.5ml甲醇、7 ml 冰醋酸、46.5ml蒸馏水。

(5).3%戊二醛：用6mmol/L磷酸盐缓冲液配置。

(6).0.2M磷酸盐缓冲液。

3.器材和仪器：小烧杯 镊子 滴管 载玻片 盖玻片 显微镜

五、实验操作要点

1.取材：撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小）置于装有6mmol/L磷酸盐缓冲液的烧杯中，使其下沉；

2.抽提：吸去磷酸盐缓冲液，用1% TritonX-100处理20~30min.；

3.冲洗：吸去TritonX-100，用M缓冲液洗3次，每次10min；

4.固定：3%戊二醛固定30min；

5.冲洗：6mmol/L磷酸盐缓冲液洗3次，每次10min；

6.染色：0.2%考马斯亮蓝R-250染色20min；

7.制片：用蒸馏水洗1-2次，将标本置于载玻片上，加盖片；

8.观察：光镜下可见表皮细胞的轮廓，细胞内存在着染成蓝色、粗细不等的纤维网络结构，即为构成细胞骨架的微丝束。

六、实验教学建议

先让学生通过查资料和指导书提前预习该实验，实验课上让学生来讲实验原理，其他同学做补充，老师做点评和总结，指出实验中注意事项，学生进行实验。

实验四 鸡血细胞的体外融合一、实验性质

实验类别：专业基础课/必修

实验类型：综合性

计划学时：6学时

实验分组：2人/组

二、实验目的

掌握细胞融合原理，应用PEG融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。

三、实验内容

动物细胞的制备、融合和观察。

四、实验仪器设备与试剂

1.材料：家鸡

2.试剂：

(1).50%PEG（MW4000）

(2).Hanks液

(3).0.85%生理盐水

(4).肝素

3.器材和仪器

注射器、试管、离心管、移液管、酒精灯、载玻片、盖玻片、水浴锅、普通光学显微镜、离心机

五、实验操作要点

1.鸡血细胞的获得

2.促融剂的配制

3.鸡红细胞的收集

4.细胞融合反应

5.终止反应

6.镜检

六、实验教学建议

先让学生通过查资料和指导书提前预习该实验，实验课上让学生来讲实验原理，其他同学做补充，老师做点评和总结，指出实验中注意事项，学生进行实验。

实验五 巨噬细胞吞噬现象的观察

一、实验性质

实验类别：专业基础课/必修

实验类型：综合性

计划学时：7学时

实验分组：2人/组

二、实验目的

1.通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及其意义；

2.掌握小鼠腹腔注射给药和脊椎脱臼处死方法。

三、实验内容与要求

对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察、理解细胞吞噬作用的过程；掌握小鼠腹腔注射给药和脊椎脱臼处死方法。

四、实验仪器设备与试剂

（一）器材

显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸

（二）试剂

1.0.85%生理盐水

2.Alsever溶液

3.4％台盼蓝染液

4.6％淀粉肉汤(含台盼蓝染液)

（三）材料

1.小白鼠

2.1% 鸡红细胞悬液

自健康鸡翼静脉采血或从集市杀鸡处接血lml(防止污染)，放入盛有4ml AlseVer溶液瓶中，混匀置4℃冰箱保存备用(一周内使用)。使用前加入0.85％生理盐水离心(1 500r／min 10min)洗涤二次，再用生理盐水配成l％浓度悬液。

五、实验操作要点

1.在实验前—天，给小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤(含台盼蓝)1m1。注射时，先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手的无名指和小指按住尾巴与后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部后l／2处的一侧注射。进针勿过深，否则易损害肝及血管等，造成出血致死；

2.?实验时，每组取一只注射过淀粉肉汤的小白鼠，腹腔注射l％鸡红细胞悬液lml，轻按小白鼠腹部，使悬液分散；

3.?20min后，用脊脱臼法处死小鼠(右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时向下按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致鼠死亡)；?

4.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管吸取腹腔液；

5.?每人取一张干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。

六、实验教学建议

先让学生通过查资料和指导书提前预习该实验，实验课上让学生来讲实验设计思路，其他同学做补充，老师做点评和总结，指出实验中注意事项、学生进行实验。

参考教材

[1]细胞生物学实验（第二版).杨汉民主编，高等教育出版社 [2]细胞生物学实验指导.李素文主编，高等教育出版社

[3]细胞生物学实验教程.安利国主编，科学出版社